GUIA DE LABORATORIO PRACTICA 5 CELULAS ANIMALES PROGRAMA DE INGENIERIA PECUARIA BIOLOGÍA GENERAL Leidy Diana Ardila Leal Docente. INTRODUCCIÓN Las células eucariotas pueden clasificarse de acuerdo a las características resaltantes que le dan ciertas peculiaridades. Las células vegetales son célula que encontramos haciendo parte del reino plantae y las células animales que son el objetivo de la presente practica tiene características que las diferencian claramente del resto de las células. Para la ejecución de esta práctica se van a usar diferentes tipos de células animales cuyas funciones son características de su sitio de obtención. OBJETIVO Conocer las características resaltantes de las células animales que permiten su diferenciación con las células vegetales. MARCO TEORICO En algún momento de la historia de este planeta aparecieron sistemas biológicos capaces de producir descendientes y evolucionar, un hecho íntimamente asociado con los cambios que sufrió la Tierra. Para introducirnos en el origen de las primeras formas vivas, debemos conocer las condiciones iniciales de la Tierra a partir de las cuales pudieron haberse establecido. Hay dos tipos distintos de células: las procariotas y las eucariotas. Las células procarióticas carecen de núcleos limitados por membrana y de la mayoría de las organelas que se encuentran en las células eucarióticas. Los procariotas fueron la única forma de vida sobre la Tierra durante casi 2.000 millones de años; después, hace aproximadamente 1.500 millones de años, aparecieron las células eucarióticas. Se ha postulado la llamada "teoría endosimbiótica" para explicar el origen de algunas organelas eucarióticas. Los organismos multicelulares, compuestos de células eucarióticas especializadas para desempeñar funciones particulares, aparecieron en una época comparativamente reciente, sólo hace unos 750 millones de años. Por ser de un tamaño muy pequeño, las células y las estructuras subcelulares necesitan de microscopios para poder ser observadas por el ojo humano, de limitado poder de resolución. Los tres tipos principales son el microscopio óptico, el microscopio electrónico de transmisión y el microscopio electrónico de barrido. Se han desarrollado además otras técnicas microscópicas. Los sistemas ópticos especiales de contraste de fase, de interferencia diferencial y de campo oscuro hacen posible estudiar células vivas. Un avance tecnológico importante fue el uso de computadoras y cámaras de video integradas a los microscopios. El primero que utilizó la palabra célula fue Robert Hooke, en 1665, al observar en un microscopio pequeños compartimentos parecidos a un panal en los cortes realizados de la corteza de un corcho. En 1831, Robert Brown descubrió el núcleo de las células vegetales. En 1838, Matthias Schleiden, afirmo que todas las plantas estaban hechas de células. En 1839, Theodor Schawann, amplio las observaciones de Schleiden pero con tejidos animales. Schleiden y Schwann, llegaron a la conclusión de que, la de célula constituye la unidad básica de toda la vida. Todas estas observaciones conforman la TEORIA CELULAR y significa que toda planta o animal está formado de células La teoría celular afirma que: • Todos los seres vivos están constituidos por células. • Las células se originan de otras células. Existe una similitud fundamental entre todas las formas vivientes. En muchos casos una sola de célula representa un organismo vivo. Ejemplo: la ameba. Este organismo unicelular lleva a cabo todas las funciones de la vida. Se alimenta por si misma, tiene capacidad de intercambiar materia y energía con el medio, responde a estímulos del ambiente, crece y se reproduce. La mayoría de seres vivos están compuestos por muchas células. En estos organismos pluricelulares, cada de célula se ha especializado en la ejecución de una o posiblemente de unas pocas funciones del organismo del cual forman parte. Por ejemplo: una de célula nerviosa. MATERIALES Materiales entregados en la practica Microscopio Agua Destilada Aceite de inmersión Colorante Wrigth Colorante de Azul de Metileno Colorante de Eosina Mechero Materiales traidos por el estudiante Lancetas ó agujas hipodérmicas. Bajalenguas Especimenes de liquido seminal Portaobjetos Cubreobjetos Goteros Papel arroz Guantes Tapabocas METODOLOGÍA Montaje de espermatozoides Montaje en fresco Con la ayuda del gotero tome una muestra de líquido seminal, proceda a colocar una gota sobre una lámina portaobjeto y cúbralos con una laminilla cubreobjetos. Observe la preparación al microscopio, comenzando por el de menor aumento hasta obtener el de mayor aumento. Con la presente muestra debe realizar las siguientes observaciones (figura 1 y 2): 1. Tamaño 2. Forma 3. Estructura 4. Tipo de movimiento Figura 1. Espermatozoide de un hombre. Montaje con tinción de espermatozoides Colocar Una pequeña gota de líquido seminal sobre una lámina portaobjetos. Prepare un frotis siguiendo las instrucciones del docente y de acuerdo a las instrucciones del docente para su elaboración y deje secar a temperatura ambiente. Proceda a realizar la tinción del frotis utilizando colorante de Wrigth. Lave delicadamente con agua destilada (frasco lavador) y deje secar a temperatura ambiente. Observe al microscopio. Haga sus observaciones teniendo en cuenta: Tamaño, Forma y Presencia de estructuras celulares. Figura 2. Espermatozoides anómalos Células epiteliales (parte interna de la mejilla) En un portaobjetos colocar una gota de solución salina a un extremo. Con un bajalenguas frotar suavemente la superficie interna de tu mejilla (las células se desprenden fácilmente, no es necesario refregar el bajalenguas). Introduce el extremo del bajalenguas en la gota de solución salina y mézclalo, tratando de hacer un frotis, extendiendo. Prepare un frotis en cada una de las láminas y fíjela mediante el calor. Deje Reposar a Temperatura ambiente. Proceda a colorear cada preparado con el colorante proporcionado por el docente. Lave suavemente con agua y deje secar a temperatura ambiente. Observe cada una de las láminas al microscopio utilizando el objetivo de menor aumento donde las células aparecerán como pequeñas masas de material granulado (Figura 3). Figura 3. Células epiteliales. Células sanguíneas Toma de muestra: Lávese y séquese bien las manos. La muestra de sangre puede obtenerse de dos maneras: por punción capilar o punción venosa. Pero en la presente practica se va a realizar se va a realizar por punción capilar: para ello desinfectar, con ayuda de una mota de algodón con alcohol, la yema de un dedo de la mano masajeando suavemente. Dejar secar, sin soplar. Presionar levemente y puncionar la zona desinfectada con una lanceta estéril, desechar la primera gota y colocar la segunda gota en un extremo del portaobjetos y continuar con el procedimiento de Frotis sanguíneo. Frotis sanguíneo: Es importante, para la realización de un buen frotis sanguíneo, utilizar portaobjetos perfectamente limpios, libres de grasa, de preferencia nuevos. Además de un portaobjetos con bordes lisos para utilizarlo en la extensión de la gota de sangre. Se procede a depositar una pequeña gota de sangre en un extremo del portaobjetos. Colocar otro portaobjetos de borde liso, frente a la gota de sangre que se depositó en el primer portaobjetos, formando un ángulo de 45º, presionar ligeramente y jalar hacia la derecha, de manera que fluya la sangre a lo largo del borde como se demuestra en la figura 5, extienda hacia la izquierda rápidamente, sin detenerse, ni despegarlo, sin presionarlo, conservando el ángulo, de manera que la gota de sangre quede como una capa fina sobre el portaobjetos, debe tener precaución en como ealiza el frotis y que este no quede erróneamente preparado (figura 6), lo que podría influenciar negativamente en la placa obtenida. Dejar secar al aire y a temperatura ambiente el frotis preparado. Tiña el frotis utilizando colorante de Wrigth. Lave suavemente con el portaobjetos con la ayuda del frasco lavador y deje secar a temperatura ambiente. • Observe al microscopio. Identifique en la preparación los hematíes, los leucocitos y las plaquetas (figura 4). Dibújelas con detenimiento, observe en los leucocitos los núcleos (su forma y textura), el tamaño de las células, la coloración del citoplasma. Figura 4. Células observadas en el frotis de la sangre. Figura 5. Procedimiento para la preparación de frotis de sangre. Figura 6. Errores comunes en la elaboración de frotis. Interrogante para resolver antes de la práctica 1. ¿Los espermatozoides de todos los animales (machos) son iguales? 2. Cuáles son los componentes principales encontrados en la sangre (relaciónalo con la constitución de la sangre) 3. Diga que sucedería si a una persona le faltara alguno de dichos compoenentes? Interrogantes para resolver después de elaborada la práctica. 1. Identifica los diferentes tipos de tejido que constituyen al organismo humano y coloca la función de cada uno. ¿Qué tipo de células posee cada uno de ellos? 2. Describa el papel biológico de cada uno de los componentes de la sangre y relaciónelos con los observados en el laboratorio 3. Realice una breve reseña sobre: a. Composición del líquido Seminal (valores de un individuo normal) b. Que aplicación tiene un espermograma. c. Para que le sirve conocer este tipo de células animales para su profesión.