Manejo del parásito aviar Philornis downsi en las Islas Galápagos; plan de investigación estratégica Reporte final del taller: Buscando soluciones para el control del parásito aviar, Philornis downsi Puerto Ayora, Santa Cruz, Galápagos 31 de Enero - 3 Febrero 2012 Fundación Charles Darwin y Parque Nacional Galápagos Abril 2012 Contribuyentes El presente plan fue desarrollado en febrero de 2012 durante el taller denominado “Buscando Soluciones para el control del Parásito Aviar, Philornis downsi". El taller fue organizado por Charlotte Causton y Francesca Cunninghame (Fundación Charles Darwin) y Wacho Tapia (Parque Nacional Galápagos). Charlotte Causton fue la autora principal del plan. La producción del plan fue posible gracias al generoso apoyo del Galapagos Conservation Trust y Galapagos Conservancy. Los contribuyentes al plan son los miembros de los grupos del taller e investigadores adicionales: Rachel Atkinson Ronal Azuero Carlos Carrión Raphael Carrión Víctor Carrión Oscar Carvajal Charlotte Causton Dave Chadee Dale Clayton Francesca Cunninghame Kristin Doherty Michael Dvorak Birgit Fessl George Heimpel Pierre-Yves Henry Gustavo Jiménez Sonia Kleindorfer Sarah Knutie Jennifer Koop Renato León Piedad Lincango Nivia Luzuriaga Raymond Martínez Godfrey Merlen Jody O'Connor Luis Ortiz Andrew Parker Martín Quiroga Christian Sevilla, Cathy Smallridge Wacho Tapia, Stephen Teale Sabine Tebbich Leandro Vaca José Villa Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador Agrocalidad-SICGAL, Islas Galápagos, Ecuador Fondo para el Control de Especies Invasoras en las Islas Galápagos (FEIG), Ecuador Parque Nacional Galápagos, Islas Galápagos, Ecuador Conservación de Islas (Island Conservation), Islas Galápagos, Ecuador Parque Nacional Galápagos, Islas Galápagos, Ecuador Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador Universidad de Indias Orientales, Trinidad Universidad de Utah, Salt Lake City, Utah, USA Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador Escuela de Ciencia Ambiental y Forestería, Universidad Estatal de Nueva York (SUNY-ESF) Vida Aviar (Birdlife), Austria Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador Universidad de Minnesota, St Paul, Minnesota, USA Universidad Pierre & Marie Curie Paris VI, Museo Nacional de Historia Natural, Paris, Francia Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador Universidad Flinders, Adelaida, Sur de Australia Universidad de Utah, Salt Lake City, Utah, USA Universidad de Arizona, Tucson, Arizona, USA Universidad San Francisco, Quito, Ecuador Universidad de Valencia, Valencia, España Universidad Pierre & Marie Curie Paris VI, Museo Nacional de Historia Natural, Paris, Francia Universidad de Indias Orientales, Trinidad Consultor Independiente, Islas Galápagos, Ecuador Universidad Flinders, Adelaida, South Australia Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador FAO/OIEA Laboratorios, Viena, Austria Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina Parque Nacional Galápagos, Islas Galápagos, Ecuador Consultora Independiente, Sur de Australia Parque Nacional Galápagos, Islas Galápagos, Ecuador Escuela de Ciencia Ambiental y Forestería, Universidad Estatal de Nueva York (SUNY-ESF) Universidad de Viena, Viena, Austria Centro Científico de Galápagos, San Cristóbal, Islas Galápagos, Ecuador Fondo para el Control de Especies Invasoras en las Islas Galápagos (FEIG), Ecuador Plan de Investigación de Philornis downsi Manejo del parásito aviar Philornis downsi en las Islas Galápagos; plan de investigación estratégica Antecedentes Philornis downsi fue registrada por primera vez en las Islas Galápagos en los años 60, pero sus impactos negativos en pequeñas especies de aves terrestres se descubrieron recién en los años 90 (Causton et al., 2006). Las moscas adultas colocan sus huevos en los nidos de las aves antes y después de que los polluelos nacen y la larva de la mosca se alimenta de su sangre y tejidos lo que produce un crecimiento reducido de los polluelos, anemia y deformación del pico. La mortalidad de los polluelos debido a estos parásitos está en el rango del 16 al 95%, dependiendo de los factores medioambientales (Dudaniec & Kleindorfer, 2006; Fessl et al., 2006a; Huber, 2008; O’Connor et al., 2010a,b). Las moscas poseen una alta capacidad de dispersión y usan un amplio rango de hábitats y huéspedes. Hasta el momento se han registrado en 14 islas con los mayores números de moscas en las islas habitadas; solamente las islas Genovesa y Española se encuentran libres de estos parásitos (Wiedenfeld et al., 2007; B. Fessl and P. Lincango, pers. comm. 2008). Al menos 17 especies de aves endémicas y una especie introducida, son atacadas por P. downsi (Wiedenfeld et al., 2007). El alto nivel de mortalidad e impacto en la salud de las aves que causa esta mosca son de especial preocupación para la conservación, especialmente sobre las especies vulnerables y decrecientes. El parasitismo de P. downsi ya está implicado en la reducción de especies endémicas en peligro crítico de extinción como el pinzón de manglar Camarhynchus heliobates, y el pinzón de árbol mediano - C. pauper (O’Connor et al., 2010 a,b,c). Actualmente, no existen técnicas disponibles para mitigar los impactos de la mosca P. downsi sobre las aves de Galápagos. Las brechas sustanciales en la comprensión de la historia de vida y la ecología de la P. downsi han impedido el desarrollo de métodos para reducir el número de moscas. Se conoce poco sobre la mosca en su rango nativo (Trinidad y Brasil) o en áreas donde se ha introducido inadvertidamente (Galápagos) o donde se ha dispersado naturalmente (Argentina). Más aún, los intentos de criar masivamente a P. downsi en el laboratorio no han sido exitosos. Debido a esto, el Parque Nacional Galápagos (PNG) realizó un taller juntamente con la Fundación Charles Darwin (FCD) del 31 de enero al 3 de febrero de 2012, para reunir a expertos locales e internacionales para desarrollar un plan de investigación y acción para el manejo de P. downsi. Durante la fase de planificación del taller, se puso en evidencia el hecho de que se conoce muy poco sobre el estado de las aves terrestres de Galápagos, a pesar de la reciente reducción de varias especies, y que es necesario contar con un marco de trabajo para la protección de las aves terrestres de Galápagos. Aprovechando la presencia de muchos ornitólogos que asistieron al taller, se incluyó una sesión adicional para discutir las acciones para monitorear y proteger a las aves terrestres. Luego de un día de charlas, los participantes se dividieron en grupos (ver el anexo 2) para trabajar en tareas específicas: 1. Desarrollar un método de monitoreo estandarizado, simple y eficiente para detectar los cambios en poblaciones comunes de aves. 2. Desarrollar un plan de acción para la protección a mediano y largo plazo de las especies de aves amenazadas. 3. Identificar las brechas en nuestro conocimiento sobre la P. downsi y desarrollar un plan para responder a las preguntas claves de investigación. 4. Identificar mecanismos que pueden usarse para controlar la P. downsi en el corto plazo y desarrollar un plan de investigación para encontrar métodos de control viables a largo plazo. Página 3 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Los resultados de los primeros dos grupos de trabajo se presentan en un documento separado denominado “Plan Estratégico para proteger las Aves Terrestres de Galápagos”. Las presentaciones del taller están disponibles en línea en el sitio: https://sites.google.com/site/philornisworkinggroup/workshop/presentations Un documento de resumen de lo que se conoce actualmente sobre la P. downsi está disponible en el sitio: https://sites.google.com/site/philornisworkinggroup/file-cabinet Página 4 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Tabla 1: Resumen de las actividades de investigación necesarias para desarrollar un programa de manejo efectivo de P. downsi y monto de financiamiento necesario a asegurar para cada actividad Pregunta de Investigación (página #) Acción Prioridad Ubicación de Cooperantes investigación a 1.3. ¿Dónde se aparean las moscas y cuál es la biología reproductiva de la mosca? (11) 1.4. ¿Cuáles son las capacidades de dispersión de P. downsi? (13) Estado de financiamientob FinanciaIniciado miento aproximado requerido $USDc Galápagos A-SICGAL, FCD, FC, GH, LV, RL 1-2 PF 9,000 √ 2. Monitorear la actividad Media/ de reproducción de las alta aves a lo largo de las islas. Galápagos A-SICGAL, BF, FCD, FC, GH, MD, RL, SKl, SKn, STe, LV 1-2 PF 9,000 √ 3. Determinar si P. downsi sobrevive toda la estación seca Media Galápagos, USA (SUNY) FCD, KD, GH, ST 1-2 PF 4,000 4. Buscar huéspedes o alimentos alternativos de P. downsi Baja Galápagos, FCD, GJU, Austria (OIAE) KD, RH-N, STe, CV 1 PF 10,000 √ 1. Determinar de qué forma las moscas encuentran los nidos de aves. Alta Galápagos, USA (SUNY, UCR) FCD, KD, JM, ST 1-3 PF 30-60,000 √ 2. Determinar de qué forma las moscas se localizan la una a la otra para aparearse. Alta Galápagos, USA (SUNY, UCR) FCD, KD, JM, ST 1-3 PF 40-80,000 √ 3. Buscar otros Alta componentes que atraigan a la P. downsi Galápagos, USA (SUNY, UCR) FCD, KD, JM, MQ, ST 1-3 PF 30-60,000 √ 1. Registrar el comportamiento de las moscas para observar su apareamiento. Galápagos, Trinidad, Argentina DC, FCD, KD, MQ, PL, RM, ST 1 PF 5,000 √ 2. Determinar la capacidad Alta reproductiva de la mosca Galápagos, DC, GH, FCD, Trinidad, USA RM (U. Minnesota) 1 F - √ 1. Determinar si han existido múltiples introducciones desde el continente y si P. downsi todavía está siendo introducida Alta Galápagos, Ecuador continental A-SICGAL, FCD, RL 1-2 PF 8,000 √ 2. Determinar la distancia que viajan las moscas dentro del archipiélago Alta Galápagos A-SICGAL, FCD, PNG 1 U 8000 Galápagos, Australia, Argentina, MQ, SKl, SKn 3 PF 1.1. ¿Dónde están las 1. Monitoreo todo el año de Alta moscas en la estación P. downsi a lo largo de las seca? (6) islas 1.2. ¿El comportamiento de la mosca está guiado por atractivos químicos? (9) Duración (años) Alta 3. Analizar la estructura de Media la población genética de P. downsi y especies de Philornis Página 5 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Pregunta de Investigación (página #) Acción Prioridad Ubicación de Cooperantes investigación a Duración (años) Estado de financiamientob FinanciaIniciado miento aproximado requerido $USDc 1.5. ¿Cómo podemos 1. Desarrollar una dieta reproducir a P. downsi para las larva de primer en cautiverio? (15) estadio Alta Galápagos, Austria, Trinidad, USA (U.Minnesota) DC, FCD, GH, MQ, PL, RHN, RL, RM, STe 1-2 F - √ 2. Desarrollar una dieta para estadios 2da y 3ra Alta Trinidad, Argentina DC, MQ, PL, RM 1-2 F - √ 3. Desarrollar una dieta para adultas Alta Trinidad, Argentina DC, MQ, PL, RM 1-2 F - √ 4. Determinar los estimulantes para la oviposición Alta Galápagos, DC, FCD, Trinidad, USA MQ, PL, RL, (SUNY), RM, ST Argentina 1-2 PF 5,000 1.6. ¿Cómo se comportan P. downsi y sus especies congéneres en sus rangos nativos e introducidos? (17) Media Galápagos, Ecuador continental, Trinidad, Brasil, Australia, Argentina DC, GH, MQ RL, RM, SKl, SKn 3 PF 150,000 1.7. ¿Es P. downsi un vector de enfermedad? (18) Media USA (U. Missouri-SL) PP 1-2 PF 10,000 1. Probar tratamientos para los nidos usando permetrin y compuestos similares Alta Galápagos, Argentina CC, FCD, CSe, CSm, FC, GM, PNG, MQ, SKn, WT 1 PF 12,000 2. Probar trampas con elementos atrayentes Media Galápagos A-SICGAL, CC, FCD, CSe,CSm, FC,PNG 1 PF 5,000 1. Probar trampas con atrayentes a gran escala Alta Galápagos, USA (SUNY) A-SICGAL, CC, CSe CSm, FCD KD , PNG, ST 1-2 U 10-15,000 2. Probar la interrupción de la reproducción con feromonas. Alta Galápagos, USA (SUNY) A-SICGAL, CC, CSe CSm, FCD, KD , PNG,ST 1-2 U 20-50,000 3a. Investigar el control biológico aumentativo Media/ Alta Galápagos, CC, CSe, USA FCD,PNG, (U.Minnesota) GH, SKl,STe, 1-2 PF 8-50,000 √ 3b. Investigar el control biológico clásico Media/ Alta Brasil, Ecuador continental, Galápagos, Trinidad, USA (U.Minnesota) 2-4 PF 100-120,000 √ 2.1 ¿Qué métodos podemos implementar a corto plazo para reducir los números de P. downsi en las áreas de anidación de especies de aves altamente amenazadas? (19) 2.2. ¿Cuáles son las mejores estrategias de manejo de la P. downsi? (21) Página 6 de 38 CC, FCD, CSe DC, GM, PNG, MQ, RM,, SKn, WT √ √ Plan de Investigación de Philornis downsi Pregunta de Investigación (página #) Acción Prioridad Ubicación de Cooperantes investigación a 4. Investigar opciones de control químico Alta Galápagos 5. Investigar técnicas para esterilizar a los insectos. Media/ Alta Galápagos, AP, CC, CSe, Austria (OIEA) CSm,PNG,W T CC, CSe CSm, FCD PNG, MQ, SKn, WT Duración (años) Estado de financiamientob 1-2 U 2-4 U FinanciaIniciado miento aproximado requerido $USDc 30-45,000 1,100,000 a: Cooperantes: A-SICGAL, Agrocalidad-SICGAL; AP, Andrew Parker (Organización Internacional de Energía Atómica, Austria); BF, Birgit Fessl (FCD); CC, Charlotte Causton ; CSe, Christian Sevilla ( Parque Nacional Galápagos); CSm, Cathy Smallridge (consultora independiente), DC, Dave Chadee (Universidad de Indias Orientales, Trinidad); FC, Francesca Cunninghame (FCD); (FCD); FCD, investigador de la FCD (a ser contratado)GH, George Heimpel (Universidad de Minnesota, USA); GJ, Gustavo Jiménez (FCD); GM, Godfrey Merlen (consultor independiente); PNG, Parque Nacional Galápagos; JM, Jocelyn Millar (Universidad de California, Riverside, USA); KD, Kristin Doherty Escuela de Ambiente y Forestería, SUNY, USA).; LV, Leandro Vaca (Centro Científico de Galápagos); MD, Michael Dvorak (Birdlife International, Austria); MQ, Martin Quiroga (Universidad Autónoma de Entre Ríos, Argentina); PL, Piedad Lincango (Universidad de Valencia, España); PP, Patricia Parker (Universidad de Missouri, St. Louis, USA); RH-N, Rebecca Hood-Nowotny (OIEA, Austria); RL, Renato León (Universidad San Francisco, Quito, Ecuador); RM, Raymond Martínez (Universidad de Indias Orientales, Trinidad); SKl, Sonia Kleindorfer (Universidad Flinders, Australia); SKn, Sarah Knutie (Universidad de Utah, USA); ST, Sabine Tebbich (Universidad de Viena, Austria); STe, Stephen Teale (Escuela de Ambiente y Forestería, SUNY, USA); CV, Científicos Visitantes; WT, Wacho Tapia (Parque Nacional Galápagos). b: Estado de financiamiento: F, financiado; PF, parcialmente financiado; U, no financiado. c: Costos aproximados: La intención de estos estimados es dar una idea del rango de costos necesario para completar cada actividad de investigación. Nota: esto no incluye los costos de implementación de los programas de control una vez que se haya finalizado la investigación. Página 7 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi PLAN DE INVESTIGACIÓN El presente documento identifica las investigaciones y acciones claves que son necesarias para desarrollar un programa efectivo de manejo de P. downsi. El plan está dividido en dos secciones basadas en dos metas: 1) Comprender la ecología y biología de P. downsi; y 2) Desarrollar una estrategia para el manejo efectivo de P. downsi. Se identificaron las siguientes preguntas clave de investigación para cada meta y se han listado de acuerdo a su prioridad. Meta 1: Comprender la ecología y biología de P. downsi 1. ¿Por qué y cómo P. downsi emerge en números tan grandes al principio de la temporada de reproducción? ¿Dónde están las moscas en la temporada seca? (PRIORIDAD ALTA). 2. ¿El comportamiento de la mosca es guiado por atrayentes químicos? (PRIORIDAD ALTA). 3. ¿Dónde copulan las moscas? (PRIORIDAD ALTA). 4. ¿Cuáles son las capacidades de dispersión de P. downsi? (PRIORIDAD ALTA). 5. ¿Cómo podemos reproducir a P. downsi en cautiverio? (PRIORIDAD ALTA). 6. ¿Cómo se comporta P. downsi en su rango nativo? (MEDIANA PRIORIDAD). 7. ¿Es P. downsi un vector de enfermedad? Meta 2: Desarrollar una estrategia para el manejo efectivo de P. downsi. 1. ¿Qué soluciones a corto plazo podemos usar para reducir los números de P. downsi en las áreas de anidación de especies de aves altamente amenazadas? (PRIORIDAD ALTA). 2. ¿Cuáles son las mejores estrategias de manejo para prevenir, controlar o erradicar a P. downsi y qué pasos deben darse para determinar si pueden ser efectivas? (PRIORIDAD ALTA). A continuación se presenta un resumen de las acciones recomendadas que deben realizarse para responder a cada una de las preguntas de investigación. Para cada actividad de investigación se provee la siguiente información: breve descripción de la metodología, dónde se realizará la investigación, principales recursos requeridos para realizar la investigación, lista de investigadores cooperantes en el proyecto con el coordinador del proyecto resaltado con un asterisco (*), y finalmente el financiamiento necesario para el proyecto. La investigación será realizada por especialistas en Argentina, Austria, Australia, Brasil, Ecuador, Trinidad, y en los Estados Unidos. Además, un pequeño equipo de investigación tendrá como base las islas Galápagos para realizar los estudios prioritarios sobre la ecología de la P. downsi y para probar técnicas de control en el campo. META 1: COMPRENDER LA ECOLOGÍA Y BIOLOGÍA DE P. DOWNSI Antecedentes Todavía existen grandes brechas en lo que conocemos sobre la historia de vida y la ecología de P. downsi tales como, cómo se reproduce, de qué se alimentan las moscas adultas y las larvas recién nacidas y qué estimula la colocación de huevos. Esta información es crucial para criar masivamente la P. downsi en el laboratorio, un pre-requisito para desarrollar métodos de control tales como la Técnica de Esterilización de Insectos y control biológico. Por otro lado, una comprensión de los señales olfativas (olores de comida o feromonas) que usan las moscas, facilitará el desarrollo de técnicas para atraparlas y monitorearlas. Página 8 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Preguntas de investigación 1.1 ¿Por qué y cómo la P. downsi emerge en números tan grandes al principio de la temporada de reproducción? ¿Dónde están las moscas en la temporada seca? (PRIORIDAD ALTA)parcialmente financiado, en progreso) Antecedentes y razonamiento: los estudios sugieren que las zonas húmedas de vegetación actúan como un reservorio para las moscas porque algunas aves pueden estar reproduciéndose todo el año en esta zona, manteniendo de esta forma una población permanente de moscas (Wiedenfeld et al., 2007; O'Connor et al., 2010a). Es necesario realizar más estudios para determinar si la zona húmeda es un hábitat de alta calidad para las moscas todo el año y si existe evidencia de dinámicas fuentesumidero donde las moscas en la zona húmeda se trasladan a la zona árida cuando las condiciones son favorables. Hipótesis: A. Las moscas adultas son activas y se alimentan de frutas en fermentación durante la temporada seca; B. Las moscas adultas entran en inactividad; C. La reproducción ocurre en los nidos de aves en la zona de Scalesia/agrícola a lo largo del año; D. La reproducción ocurre en huéspedes alternos o materiales alimenticios E. Migración entre hábitats donde las aves todavía están reproduciéndose (pe. Zonas bajas a zonas altas o zonas bajas a zonas agrícolas). Acercamiento a la prueba de hipótesis: 1.1.1 Monitoreo todo el año de P. downsi a lo largo de la islas Prioridad - Alta Breve descripción de los métodos – Las moscas serán monitoreadas con intervalos de tiempo estandarizados (pe. Semanalmente) usando trampas McPhail con una mezcla estandarizada de papaya y azúcar. Serán necesarias múltiples réplicas (~30/hábitat) en las zonas altas, en la zona agrícola y en las zonas bajas de cada isla. Inicialmente, el monitoreo se limitará a Santa Cruz y posiblemente a San Cristóbal, y en el sitio de anidación del Pinzón de Manglar. Ubicación – Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos de recolección. Duración – por lo menos 1.5 años. Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL, investigador de la FCD*, Charlotte Causton, Francesca Cunninghame, George Heimpel, Leandro Vaca, Renato León. Fondos necesarios – parcialmente financiado. Monitoreo en Santa Cruz financiado el primer año con fondos de Galápagos Conservation Trust y George Heimpel. GAIAS y el GSC, USFQ financiarán la investigación en San Cristóbal. Se necesitan fondos para contratar el investigador de la FCD. Monto necesario aproximado: $ 9000. Página 9 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi 1.1.2. Monitorear la actividad de reproducción de aves a lo largo de las islas Prioridad - Media/Alta Breve descripción de los métodos – Visitar hábitats áridos y húmedos todo el año para determinar el número de aves que se están reproduciendo y si es suficiente para apoyar las mismas poblaciones de Philornis observadas durante la estación húmeda. Cuantificar la densidad de nidos relativa a la abundancia de Philornis en los nidos para establecer una comparación entre las estaciones seca y húmeda. Revisar los nidos para determinar si Philornis está presente independientemente de la época del año. Ubicación – Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, binoculares, escalera. Duración – cada hábitat debe ser monitoreada por lo menos pasando una semana por al menos un año. Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL, Birgit Fessl, investigador de la FCD*, Francesca Cunninghame, Leandro Vaca, Michael Dvorak, Renato León, Sabine Tebbich, Sarah Knutie, Sonia Kleindorfer. Fondos necesarios - parcialmente financiado. Monitoreo en Santa Cruz financiado para el primer año con fondos de Galápagos Conservation Trust y George Heimpel. GAIAS y el CCG, USFQ financiarán la investigación en San Cristóbal. Se necesitan fondos para contratar al investigador de la FCD. Financiamiento necesario aproximado: $9000. 1.1.3. Determinar si P. downsi sobrevive toda la estación seca Prioridad - media Breve descripción de los métodos – Preservar algunas moscas al principio de la estación húmeda, examinar las capas de endocutícula para determinar si es una opción factible para determinar la edad de las moscas. Si esto funciona, determinar la edad de las moscas al inicio y al fin de la estación seca usando un microscopio de transmisión de electrones. Considerar también el mirar el pigmento del ojo pterina. Ubicación – Galápagos; Universidad Estatal de Nueva York (SUNY-ESF), Syracuse. Recursos clave - personal, transporte, trampas, tubos de recolección. Se requiere el microscopio de transmisión de electrones y posiblemente trabajo en sitio con un microscopio compuesto. Duración – 1-2 años. Cooperantes – Investigador de la FCD, George Heimpel, Kristin Doherty, Stephen Teale*. Fondos necesarios – parcialmente financiado. Algunos fondos de Stephen Teale y George Heimpel. Financiamiento necesario aproximado: $4000. Página 10 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi 1.1.4. Buscar materiales huésped /alimentos alternativos de P. downsi Prioridad - Baja Breve descripción de los métodos – Para determinar si los huéspedes de la Philornis cambian durante la estación seca, se analizará la marca isotópica y la composición de ácido graso de las moscas adultas a lo largo del año y se comparará con muestras de huéspedes alternativos potenciales tales como ratas y otras especies de aves. Se recolectarán 20 moscas adultas cada mes desde marzo a diciembre y se analizarán. Si es necesario se realizará la búsqueda de huéspedes alternativos en medio de la estación seca en diferentes tipos de hábitats. Las búsquedas deben incluir material de carroña/fecal y otros nidos/hábitats de otros animales vivientes (pe. Aves marinas, nidos de rata) de zonas húmedas, agrícolas y áridas, incluyendo las regiones costeras en donde se encuentra el pinzón de manglar. El barrer y aspirar la vegetación puede ayudar a determinar donde pasan el tiempo las moscas cuando no están en el nido. Ubicación – Galápagos; OIEA, Viena. Recursos clave - personal, transporte, trampas, barredor de nidos, aspiradora de insectos, tubos de recolección, análisis de laboratorio. Duración – trabajo isótopo: 1 año; trabajo de campo: semana de muestreo intensivo en diferentes hábitats en medio de la estación seca (pe. octubre), por 3 semanas. Cooperantes – trabajo isótopo: Rebecca Hood-Nowotny y Sabine Tebbich*; investigación en Galápagos: Investigador de la FCD*, George Heimpel, Gustavo Jiménez, científicos visitantes. Fondos necesarios – parcialmente financiado. Trabajo isótopo parcialmente financiado a través de una donación concedida a Rebecca Hood-Nowotny. Investigación en Galápagos sin financiamiento. Financiamiento necesario aproximado: $10,000. 1.2. El comportamiento de la mosca es guiado por atrayentes químicos (PRIORIDAD ALTA – parcialmente financiado, en progreso) Antecedentes y razonamiento: Esta investigación es crucial para el manejo exitoso de P. downsi. Los atrayentes químicos para el insecto pueden ser olores de alimentos o feromonas y pueden usarse por sí solos o combinados. Los atrayentes químicos se usan para monitorear poblaciones de plagas o para suprimir poblaciones a través de una serie de estrategias tales como trampeo a gran escala, interrupción de la cópula, entre otros. Varios múscidos producen feromonas para atraer a su pareja tal como la mosca casera y las especies de Fannia, entre otras. Los resultados preliminares de la búsqueda de feromonas en P. downsi, sugieren que los machos producen una feromona de agregación (Collignon y Teale, 2010). Adicionalmente, existe un pronunciado dimorfismo sexual en los hidrocarbonos cuticulares que son similares a las feromonas sexuales que han sido reportados en otros múscidos. Se requieren estudios adicionales para identificar el sexo que produce la feromona. Los olores de alimentos pueden ser atractivos en diferentes momentos en la vida del insecto adulto, por ejemplo, los olores de alimentos pueden atraer a las hembras a los sitios de colocación de Página 11 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi huevos. Algunas pruebas con elementos atrayentes sugieren que la P. downsi es atraída a productos en fermentación y olores producidos por la proteína en descomposición (Muth, 2007; Lincango y Causton, 2008a). De acuerdo a esto, podemos plantear la hipótesis de que las hembras de P. downsi en busca de nidos huésped podrian ser atraídas por olores fecales compuestos, en parte, de material vegetal y proteico digerido o en descomposición. 1.2.1 Determinar de qué forma las moscas encuentran los nidos de ave Prioridad - Alta Breve descripción de los métodos – Se realizarán pruebas para determinar si las aves dependen de señales visuales u olfativas, o ambas, para localizar los nidos. A. Para examinar si las moscas usan señales olfativas para localizar los nidos, se revisarán muestras de material fecal y muestras de materiales frescos de nidos para buscar potencial actividad con análisis de un detector a gas de cromatografía- electroantenografía (GC-EAD). Seguidamente se realizarán exámenes de comportamiento en el aboratorio y estudios de trampas en campo en combinación con feromonas. Se realizarán ensayos de comportamiento en laboratorio en Syracuse y ensayos de campo en Galápagos para confirmar la actividad de los compuestos que están activos. Los extractos activos a nivel de comportamiento serán examinados con el GC-EAD y los compuestos activos EAD serán identificados tentativamente con cromatografía de gas – espectrometría de masa (GC-MS) y serán enviados a UC Riverside para el posterior trabajo de elucidación estructural si es necesario. B. Para examinar si las moscas usan señales visuales como la forma del nido para localizar los nidos, se recolectarán nidos no ocupados de diferentes tipos y se expondrán a los volátiles que han sido identificados. Se colocará cinta adhesiva en los nidos para atrapar a las moscas. Ubicación – Galápagos; Universidad Estatal de Nueva York, (SUNY-ESF), Syracuse; Universidad de California, Riverside. Recursos clave - personal, atrayentes, trampas, análisis de laboratorio. Duración – 1-3 años. Cooperantes – investigador de la FCD, Jocelyn Millar (UC Riverside), Kristin Doherty, Stephen Teale*, estudiante de PhD no identificado supervisado por Stephen Teale. Fondos necesarios - parcialmente financiado. El trabajo en Syracuse está financiado para el primer año y posiblemente para el segundo año por Galápagos Conservancy. Financiamiento necesario aproximado para el segundo año: $ 20,000. Se necesita encontrar financiamiento para la producción en masa/síntesis de olores. El costo de la síntesis depende de la estructura de el/los compuesto(s) que es desconocida al momento. Este podría variar de insignificante, en caso de que el compuesto esté disponible a nivel comercial, a varias decenas de miles para una estructura compleja que requiera una síntesis con varios pasos. Página 12 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi 1.2.2. Determinar en qué forma las moscas localizan una pareja. Si usan feromonas, determinar el sexo que produce el atrayente y si es una feromona sexual o una feromona de agregación Prioridad - Alta Breve descripción de los métodos – las hembras vírgenes y los machos serán probados en el campo para determinar si existe algún atrayente y cuando se produce (edad de la mosca, hora del día) etc. Para determinar si se producen feromonas vía oxidación de hidrocarbonos, se expondrán los extractos cuticulares de la mosca a una luz de espectro completo usando un simulador solar en el laboratorio para aproximar condiciones parecida a las cuales P. downsi está expuesta en la naturaleza. Se examinarán separadamente los extractos masculinos y femeninos y luego se analizarán usando el GC-EAD. Todas las muestras activas a nivel de comportamiento serán analizadas por GC-MS al menos hasta identificar tentativamente los compuestos que activen las antenas y los extractos cuticulares masculinos y femeninos crudos y oxidados serán examinados en ensayos de campo en Galápagos. Dependiendo de si los compuestos activos son identificables con GC-MS o no, y de si éstos están disponibles comercialmente o no, el próximo paso será involucrar a un químico que pueda identificar el compuesto activo usando técnicas espectrométricas estándar, y luego, diseñarlo y sintetizarlo, si no está disponible comercialmente. Una vez que se obtenga una muestra sintética del compuesto activo, se confirmará su estructura con una serie de pruebas incluyendo la detección electroantenográfica (GC-EAD), respuesta de comportamiento en laboratorio en un olfatómetro de tubo Y, y una evaluación de trampas en campo. Ubicación – Galápagos; Universidad Estatal de Nueva York, (SUNY-ESF), Syracuse; Universidad de California, Riverside. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, análisis de laboratorio. Duración – 1-3 años. Cooperantes – investigador de la FCD, Jocelyn Millar (UC Riverside), Kristin Doherty, Stephen Teale*, estudiante de PhD no identificado supervisado por Stephen Teale. Fondos necesarios – parcialmente financiado. El trabajo en Syracuse está financiado para el primer año y posiblemente para el segundo año por Galápagos Conservancy. Financiamiento necesario aproximado para el segundo año: $40,000. Será necesario encontrar financiamiento para la producción en masa/síntesis de feromonas. El costo de la síntesis depende de la estructura de el/los compuesto(s) que es desconocida al momento. Éste puede variar de una cantidad irrisoria en caso de que el compuesto está disponible comercialmente, a varias decenas de miles de dólares para una estructura compleja que requiera una síntesis de varios pasos. 1.2.3. Búsqueda de otros compuestos que atraigan a P. downsi que puedan ser usados para atraparlas Prioridad - Alta Breve descripción de los métodos – Los olores asociados con los eventos de alimentación o Página 13 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi copulación serán identificados y examinados para ver si son atractivos a la P. downsi ya sea solos o en combinación con feromonas. Los aromas volátiles de banana y papaya y otros olores serán examinados en el laboratorio en Syracuse y se realizarán ensayos de comportamiento en laboratorio usando un olfatómetro con tubo en Y. Paralelamente se realizarán estudios en el norte de Argentina y posiblemente en Brasil. Se obtendrán muestras de los materiales en los cuales se observe a la P. downsi copulando en el laboratorio y en el campo, y estos olores serán analizados con GC-EAD y GC-MS. Se realizarán ensayos de comportamiento en laboratorio en Syracuse y se realizarán ensayos de campo en Galápagos para confirmar la actividad de los compuestos que están activos. Los extractos activos a nivel de comportamiento serán examinados con GC-EAD y los compuestos activos en base al EAD serán identificados tentativamente con el GC-MS y serán enviados a UC Riverside para realizar un trabajo de identificación estructural posterior, si es necesario. Ubicación – Galápagos; Universidad Estatal de Nueva York, (SUNY-ESF), Syracuse; Universidad de California, Riverside; Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, análisis de laboratorio. Duración – 1-2 años. Cooperantes – investigador de la FCD, Jocelyn Millar (UC Riverside), Kristin Doherty, Martín Quiroga, Stephen Teale*, estudiante de PhD no identificado supervisado por Stephen Teale. Fondos necesarios - parcialmente financiado. Financiamiento de Galápagos Conservancy para el primer año y posiblemente para el segundo año de investigación de Stephen Teale. Financiamiento necesario aproximado para el segundo año: $ 20,000. Será necesario encontrar financiamiento para la producción en masa /síntesis de atrayentes. El costo de la síntesis depende de la estructura de el/los compuesto(s) que es desconocida al momento. Éste puede variar de una cantidad irrisoria en caso de que el compuesto esté disponible a nivel comercial, a varias decenas de miles para una estructura compleja que requiera una síntesis de varios pasos. Se buscará financiamiento de agencias en Argentina para el trabajo en Argentina y Brasil (Martín Quiroga). 1.3. ¿Dónde se aparean las moscas y cuál es la biología reproductiva de la mosca? (PRIORIDAD ALTA – parcialmente financiado, en progreso) Antecedentes y razonamiento: No se ha observado la cópula en los nidos ni en ningún otro lugar en el campo. Se ha observado la cópula en el laboratorio pero solo en cinco ocasiones (Lincango y Causton, 2008b). El comprender donde copulan las moscas es crítico para desarrollar un programa de manejo, sin embargo todavía hay muchas cosas que no conocemos sobre el sistema de apareamiento de la mosca, por ejemplo, como se atraen las moscas unas a otras, qué pasa durante el cortejo y donde y cuando se realiza, si los machos tienen territorios o se congregan. Si somos capaces de determinar donde se realiza el apareamiento (pe. En flores o alimentos, en los nidos, en estiércol o carroña), podremos encontrar los olores atrayentes que están asociados con la ubicación del apareamiento que puede usarse para desarrollar un método para atraparlas. Por otro lado, una comprensión del sistema de apareamiento (tal como las señales para iniciar la cópula y el comportamiento para depositar los huevos) es clave para evaluar la factibilidad de la Técnica de Esterilización de Insectos. Página 14 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi 1.3.1. Observar el comportamiento de las moscas para observar los eventos de apareamiento Prioridad - alta Breve descripción de los métodos – Se realizarán observaciones en los puntos posibles de agregación, incluyendo frutas o proteínas en descomposición, flores y nidos de aves. Se colocarán cámaras o trampas pegajosas en lugares estratégicos tales como los nidos de ave para registrar la visita de las moscas y detectar si los machos se congregan alrededor de los sitios posibles para la colocación de huevos. También se colocarán trampas pegajosas en diferentes especies de plantas para determinar si las moscas adultas tienen una planta preferida. Adicionalmente, se colocarán trampas McPhail con atrayentes en lugares estratégicos y se registrará la visita y el comportamiento de las moscas alrededor de las trampas. Además, se realizarán observaciones en el laboratorio donde se colocarán las moscas en jaulas de diferentes tamaños (2.5 m de diámetro por 2 m de alto), para tratar de observar el apareamiento y otros comportamientos. Se usarán cámaras para registrar la actividad de las moscas. Ubicación – Galápagos; Trinidad; Argentina. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, jaulas, tubos recolectores, cámaras. Duración – 1 año. Cooperantes – investigador de la FCD*, Dave Chadee, Kristin Doherty, Martín Quiroga, Piedad Lincango, Raymond Martínez, Stephen Teale, estudiante de PhD no identificado supervisado por Stephen Teale. Fondos necesarios – parcialmente financiado. Las investigaciones en Trinidad y Argentina están financiadas. La investigación en Galápagos no está financiada. Monto aproximado de financiamiento necesario: $5000. 1.3.2 Determinar la capacidad reproductiva de la mosca Prioridad – Alta, pero no necesaria de manera inmediata Breve descripción de los métodos - en los programas de esterilización de insectos (SIT), las moscas de la fruta con tasas muy altas de fecundidad en su tiempo de vida (1000 – 2000 huevos por hembra) requieren tasas de liberación de moscas estériles más altas que las moscas con tasas reproductivas mucho menores. Mientras que las investigaciones recientes sugieren que un número de hembras Philornis pueden colocar de 10 a 15 huevos en un nido, no se conoce que proporción de la fecundidad en el tiempo de vida de cada hembra representa este evento reproductivo. Sería importante aclarar la fecundidad general en el tiempo de vida para esta especie, determinando la capacidad diaria o semanal para colocar huevos de numerosos individuos que se mantengan en el laboratorio en su tiempo de vida. Estos resultados facilitarán el realizar evaluaciones de la producción de moscas estériles y las tasas de liberación necesarias y los costos probables de la implementación de un programa de esterilización de insectos (SIT) para esta especie. Los resultados también serán útiles para otros programas de control. Ubicación – Galápagos; Universidad de Indias Orientales, Trinidad; Universidad de Minnesota. Página 15 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, espacio de laboratorio y jaulas. Duración – 1 año. Cooperantes – Dave Chadee*, Cathy Smallridge, George Heimpel, Raymond Martínez. Fondos necesarios - Financiado. La investigación en Trinidad está financiada por medio de un contrato con OIEA. 1.4. ¿Cuáles son las capacidades de dispersión de la P. downsi? (PRIORIDAD ALTA – pero no se necesita inmediatamente, parcialmente financiado) Antecedentes y razonamiento: Philornis downsi fue probablemente introducida por primera vez en Galápagos juntamente con frutas, palomas/pollos o material de nido importados o en las cabinas de los aviones. Es posible que haya existido más de un evento de introducción. El vía de colonización de la P. downsi dentro del archipiélago puede haber sido natural (por medio del viento) y/o asistida (en frutas, atraídas por las luces de los barcos, etc.). Los estudios han demostrado que existe un alto flujo de genes entre las islas Isabela, Santa Cruz y Floreana, siendo el más alto flujo de genes entre Santa Cruz e Isabela y el más bajo desde la isla Floreana; el flujo de genes entre los sitios de zonas bajas y altas fue comparable (Dudaniec et al., 2008). Esto sugiere que P. downsi puede dispersarse en grandes distancias y puede colonizar áreas nuevas por sí misma. El comprender la capacidad de dispersión de la P. downsi es crucial para determinar qué métodos de control serían efectivos. Por ejemplo, si es altamente posible tener una re-invasión, el enfoque debería ser una supresión/manejo a largo plazo en lugar de la erradicación. 1.4.1. Determinar si han existido múltiples introducciones del continente y si P. downsi todavía está siendo introducida. Prioridad - Alta Breve descripción de los métodos – El primer paso debe ser determinar si Philornis está presente en el Ecuador continental. Se debe contactar a los ornitólogos y entomólogos y en el caso que no se ha registrado la presencia de P. downsi en el continente, se debe realizar un inventario de los nidos de paseriformes en el área de Guayaquil. Adicionalmente, se deben revisar los especímenes recolectados durante el monitoreo de aviones y barcos de carga por parte de Agrocalidad-SICGAL. Se pueden colocar trampas tales como jaulas con luz LED y trampas pegajosas en el fondo de los contenedores de carga antes de salir de Quito y Guayaquil para identificar si Philornis está siendo reintroducida. Ubicación – Galápagos; Quito; Guayaquil y áreas aledañas. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores. Duración – al menos una vez al año. Cooperantes – Agrocalidad- SICGAL (Ronal Azuero, José Loayza, José Luis Escandón, Jimena Vivero), investigador de la FCD*, Renato León. Página 16 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Fondos necesarios – parcialmente financiado. Agrocalidad-SICGAL cubrirá los costos para monitorear periódicamente los aviones y barcos. Se necesita financiamiento para realizar la investigación en el Ecuador continental. Monto aproximado necesario de fondos: $ 8,000. 1.4.2. Determinar la distancia que viajan las moscas dentro del archipiélago Prioridad - Alta Breve descripción de los métodos – Usando polvo fluorescente, se pueden etiquetar las moscas de diferentes hábitats con un color distintivo y luego pueden ser liberadas. Las moscas serán recapturadas usando trampas McPhail y se registrará la proporción de colores en cada hábitat. Este estudio también podría proporcionar información sobre la longevidad de las moscas y complementará los estudios indicados en el numeral 1.1.3. Ubicación – Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, polvo fluorescente. Duración – al menos una vez al año. Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL, investigador de la FCD*, PNG. Fondos necesarios – sin financiamiento. Monto aproximado de fondos necesarios: $8000. 1.4.3. Analizar la estructura genética poblacional de Philornis downsi y las especies Philornis Prioridad - media Breve descripción de los métodos – Se analizarán muestras de moscas P. downsi de Trinidad, Argentina, Brasil, Galápagos, Perú, y especialmente de Ecuador, para evaluar la estructura genética de la población. El grupo de Kleindorfer extraerá el ADN de los huéspedes, larvas y pupas y se enfocará en ocho marcadores micro satelitales de P. downsi desarrollados por Dudaniec y otros. (2008). Adicionalmente desarrollarán más marcadores usando muestras de Philornis del continente y de las islas. También desarrollarán marcadores de cualquier especie parasitoide asociada con la P. downsi (incluyendo las dos que se encuentran comúnmente en las Galápagos; ver el numeral 2.2.). Se seguirán condiciones multiplex PCR como se describe en el trabajo de Dudaniec et al. (2008a). El equipo de Kleindorfer conducirá métodos genómicos adaptativos innovadores tales como el DNA Asociado en Sitio Restringido (RAD por sus siglas en Inglés- Restriction-site Associated DNA) secuenciando ambos P. downsi y los pinzones de Darwin desde 2013 al 2015, para identificar los genes adaptativos y comprender de mejor forma la relación entre el huésped y el parásito. Para distinguir entre las especies, el grupo de Quiroga usará secuencias ITS2 como marcadores moleculares para diferenciar de forma inequívoca los especímenes de Philornis identificados usando características morfológicas. La evidencia acumulada sugiere que la región rDNA ITS2 es un buen marcador filogenético a nivel de especies o géneros debido a sus muchas ventajas, como la facilidad de conducir PCRs y de ser una región relativamente pequeña con alto contenido de información. (Young & Coleman, 2004). Página 17 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Ubicación – Galápagos; Universidad Flinders, Australia; Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina. Recursos clave - personal, transporte, tubos recolectores, materiales necesarios para análisis genéticos (sustratos, enzimas, tubos para micro centrifugado, etc.). Duración – 3 años. Cooperantes – Grupo Clayton – Sarah Knutie (Galápagos y Trinidad), Martín Quiroga (Argentina), Sonia Kleindorfer (muestras en Galápagos y Ecuador continental). Fondos necesarios – parcialmente financiado, los grupos de Quiroga y Clayton tienen financiamiento. Se requiere financiamiento para el grupo de Kleindorfer (producto Noviembre 2012) $250,000. 1.5. ¿Cómo podemos reproducir a la P. downsi en cautiverio? (PRIORIDAD ALTA – parcialmente financiado, en progreso) Antecedentes y razonamiento: el poder reproducir a la P. downsi en cautiverio es crucial para desarrollar los métodos de crianza masiva que se requieren para el control biológico y esterilización de insectos (SIT). Debido a esto, todos los aspectos de esta investigación son de alta prioridad. Del 2007-2008 se han realizado esfuerzos considerables para tratar de criar moscas P. downsi en cautiverio, sin embargo, solo se han obtenido resultados parcialmente exitosos. Se encontraron medios para criar el segundo estadio hasta la edad adulta, pero los investigadores no pudieron encontrar un medio de alimentación adecuado para el primer estadio. Al parecer, las condiciones medioambientales también deben ser muy estables (pe. temperatura y humedad constantes para estimular los orificios nasales). Algunos huevos se colocaron en el laboratorio, pero todavía deben definirse los estimulantes de la oviposición y los medios de colocación de huevos. 1.5.1. Desarrollar una dieta para criar el 1er estadio de larvas Prioridad – alta Breve descripción de los métodos – Se criarán larvas en huéspedes vivos (canarios y pichones) en la Universidad de Minnesota y en la Universidad Nacional del Litoral (Argentina) para ver si es posible obtener moscas hasta su completo desarrollo. Paralelamente, se investigarán los medios para criar el 1er estadio de larvas en Trinidad. Una vez que se obtengan huevos/larvas en el laboratorio, se requerirá un medio artificial para alimentarlas. Para simular el ambiente natural, se pueden mantener las larvas en contenedores con material parecido al de los nidos, sobre la cual se colocará una fina membrana (parafilm, malla o caucho) a través de la cual las larvas pueden alimentarse, proveyendo un material alimenticio como sangre, productos cárnicos o medios artificiales, o se les puede sumergir en este material. Se usará un marcaje estable de isótopos para determinar qué las larvas del 1er estadio están realmente consumiendo, por ejemplo, secreciones o tejidos. Ubicación – Galápagos, Universidad de Minnesota; Universidad de Indias Orientales; OIEA, Viena; Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina. Recursos clave - personal, transporte, aves vivas, instalaciones de cuarentena, dietas. Página 18 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Duración – por lo menos una vez al año. Cooperantes – Investigador de la FCD, Dave Chadee*, George Heimpel, Martín Quiroga, Piedad Lincango, Raymond Martínez, Rebbeca Hood-Novotny, Renato León, Sabine Tebbich. Fondos necesarios – Financiado. Financiamiento de OIEA para el trabajo en Trinidad y el trabajo isótopo en Austria. George Heimpel y Martín Quiroga tienen financiamiento. 1.5.2. Desarrollar una dieta para criar 2do y 3er estadios larvales Prioridad – alta Breve descripción de los métodos – El segundo y el tercer estadios de larva se pueden criar en cautividad con sangre de pollo descongelada o agar con sangre de pollo (Lincango y Causton, 2008b; Hellman y Fierke, 2009). Estos métodos serán estandarizados y las técnicas como los sistemas de alimentación por membranas serán probadas para desarrollar una metodología que pueda usarse para criar grandes cantidades de larvas. Se investigará el uso de sistemas de calefacción en combinación con el régimen alimenticio (hematech). Ubicación – Universidad de Indias Orientales; Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina. Recursos clave - personal, laboratorio, dietas. Duración – por lo menos una vez al año. Cooperantes – Dave Chadee*, Martín Quiroga, Piedad Lincango, Raymond Martínez. Fondos necesarios - Financiado. El trabajo en Trinidad está financiado por el contrato de investigación con OIEA (contrato para 2 años). Trabajo en Argentina financiado por el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Térnicas - CONICET. 1.5.3. Desarrollar una dieta para criar moscas adultas Prioridad – alta Breve descripción de los métodos – Se ha encontrado que una mezcla de papaya y proteína es adecuada para criar moscas adultas y para obtener huevos fértiles (Lincango y Causton, 2008b). Las moscas también se alimentan bien con una mezcla de cerezas muyuyu y maracuyá con huevos, leche y azúcar (grupo de Clayton). Se probarán otros componentes de la dieta para encontrar un medio adecuado para criar moscas masivamente. Se realizarán pruebas para determinar las proporciones óptimas necesarias para asegurar un tiempo de vida largo y alta fecundidad y se desarrollará un protocolo. Ubicación – Universidad de Indias Orientales; Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina. Página 19 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Recursos clave - personal, laboratorio, dietas, jaulas. Duración – por lo menos una vez al año. Cooperantes – Dave Chadee*, Martín Quiroga, Piedad Lincango, Raymond Martínez. Fondos necesarios - financiado. El trabajo en Trinidad está financiado por el contrato de investigación de OIEA (contrato a 2 años). El trabajo en Argentina está financiado por CONICET. 1.5.4. Determinar qué estimula la oviposición Prioridad – alta Breve descripción de los métodos – se probarán las señales visuales y olfatorias para determinar los estimulantes más efectivos para la colocación de huevos. Esto incluirá los nidos (con o sin cubierta artificial y una fuente de calor), viruta o aserrín, plantas, entre otras. Los estudios de campo proporcionarán datos adicionales sobre las señales para probar. Adicionalmente, las hembras serán forzadas a depositar huevos, poniéndolas en pequeños frascos por períodos cortos de tiempo o por decapitación. Ubicación – Galápagos; Universidad de Indias Orientales; Universidad Estatal de Nueva York, (SUNY-ESF), Syracuse; Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, jaulas. Duración – por lo menos una vez al año. Cooperantes – investigador de la FCD, Dave Chadee*, George Heimpel, Martín Quiroga, Piedad Lincango, Raymond Martínez, Renato León, Stephen Teale. Fondos necesarios – parcialmente financiado. El trabajo en Trinidad está financiado por el contrato de investigación de OIEA (contrato a 2 años). El trabajo en Argentina es financiado por CONICET. El trabajo en Galápagos no está financiado. Monto aproximado de fondos necesarios: $ 5000. 1. 6. ¿De qué forma la P. downsi y sus especies congéneres se comportan en sus rangos nativos e introducidos y cómo se relaciona esto con el ambiente? (PRIORIDAD MEDIA – parcialmente financiado, en progreso) Antecedentes y razonamiento: El realizar investigaciones paralelas sobre la P. downsi y sus especies congéneres que tienen una relación cercana en su rango nativo e introducido, puede ayudarnos a comprender la biología de la mosca. El género Philornis consta de 50 especies y la distribución principal de la Philornis se encuentra en Centro y Sud América, extendiéndose hasta el sur de los Estados Unidos. Se ha reportado la existencia de P. downsi en Trinidad y Brasil, de donde se piensa es nativa. Recientemente se encontró en Argentina, a donde puede haberse dispersado naturalmente (Silvestri y otros., 2011). No se conoce si se encuentra en el Ecuador continental. La variación medioambiental influencia fuertemente la dinámica de las enfermedades en las Página 20 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi comunidades de vida silvestre. Los modelos de cambio climático global predicen una mayor virulencia e impacto de las enfermedades y parásitos en los ecosistemas, y debido a esto, es importante buscar evidencia de una rápida coevolución entre los huéspedes y la P. downsi en relación a los factores ambientales que influyen en el éxito y persistencia de la mosca. Los resultados de estos estudios tendrán implicaciones aplicadas para predecir la severidad del brote y conservar la biodiversidad. Breve descripción de los métodos – Se deben realizar estudios de campo sobre la prevalencia de Philornis e intensidad del parasitismo, para identificar las presiones selectivas que actúan sobre las poblaciones de P. downsi (pe. humedad/temperatura, competencia con otras especies de Philornis, parasitoidismo). Se conoce que en las áreas temperadas del sur, la prevalencia de Philornis usualmente se incrementa con el avance de la estación de reproducción, esto es diferente a lo observado en Galápagos. Se estudiarán los sistemas de apareamiento de las especies de Philornis en el campo y en el laboratorio. El rastrear las respuestas adaptativas al ambiente requiere el contar con muestras y un análisis genético de la misma población a lo largo del tiempo. Este proyecto combinará un extenso conjunto de datos ya existente (desde 1998) con nueva información (propuesta 2013-2015) sobre la variación genética de huésped – parásito, su historia de vida, salud y medidas ambientales. Usando el marco de trabajo de oscilación de frecuencia de genes (Wolinska y King, 2009), el equipo de Kleindorfer examinará la relación entre la frecuencia de genes y la influencia medioambiental. Ubicación – Galápagos; Ecuador; Trinidad; Argentina; Brasil. Recursos clave - personal, transporte, trampas, tubos recolectores, materiales y equipos para análisis genético. Duración – 3 años. Cooperantes – Dave Chadee, George Heimpel, Martín Quiroga*, Raymond Martínez, Renato León, Sarah Knutie, Sonia Kleindorfer* (modelado medioambiental del x huésped x efectos del parásito). Fondos necesarios – parcialmente financiado. Becas entregadas a Dave Chadee (Trinidad) y Martín Quiroga (CONICET). El grupo de Kleindorfer ha aplicado para obtener financiamiento ($150,000). 1.7. ¿Es P. downsi un vector de enfermedades? (PRIORIDAD MEDIA - financiado) Antecedentes y razonamiento: No se conoce si las especies de Philornis juegan un papel en la transferencia de arbo viruses entre aves. Aitken et al., (1958) examinaron 3 especies de Philornis con diferentes hábitos alimenticios (alimentador de sangre, alimentador subcutáneo y una especie coprofílica) para determinar si eran capaces de trasmitir arbo viruses y encontró que las larvas inoculadas con el virus de San Luis o virus Ilhéus, podían infectarse y transmitir el virus a las ratas. Más aún, las moscas adultas que emergieron de las larvas infectadas dieron positivo para el virus. En una ocasión una larva dio positivo con el virus de San Luis después de alimentarse de un ave infectada. Breve descripción de los métodos – Se diseccionará la cabeza, tórax y abdomen de Philornis para ver (1) que alimentos a base de sangre están comiendo los insectos (abdomen), y (2) qué patógenos pueden estar transmitiendo (tórax y cabeza, dependiendo del patógeno). Esta investigación formará Página 21 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi parte de un proyecto de investigación más grande sobre la relación entre los enfermedades en las Islas Galápagos. vectores y las Ubicación - Universidad de Missouri - St. Louis. Recursos clave - personal, tubos recolectores, análisis de laboratorio. Duración – por lo menos 1-2 años. Cooperantes – Patricia Parker. Fondos necesarios – parcialmente financiado. Este proyecto no tiene una fuente de fondos dedicada, pero existe financiamiento disponible a través de un proyecto grande de estudio de vectores y enfermedades que podría ayudar a financiar la investigación. El financiamiento aproximado necesario es: $10,000. Página 22 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi META 2: DESARROLLAR MÉTODOS PARA EL MANEJO EFECTIVO DE P. DOWNSI Antecedentes El desarrollo de estrategias de manejo efectivas de P. downsi en Galápagos se encuentra en un estado incipiente y al momento no existen métodos para reducir de forma efectiva los números de P. downsi en las áreas de anidación de especies de aves amenazadas o en áreas más grandes. La colocación de trampas con atrayentes químicos sin feromonas, produjo una recolección mínima de moscas P. downsi y además la atracción no fue específica para esta especie por lo que se recolectaron otras especies de mosca (Muth, 2007; Lincango y Causton, 2008a). El desarrollo de un protocolo de crianza masiva, a efectos de aplicar la técnica de esterilización de insectos (SIT por sus siglas en inglés), no ha tenido éxito (Lincango y Causton, 2008b; Hellman y Fierke, 2009). Un solo tratamiento de permetrin realizado a los nidos fue efectivo para frenar el parasitismo y por lo tanto incrementar la tasa de éxito de los polluelos significativamente, sin embargo, la extensa distribución de P. downsi a lo largo del archipiélago, hace que este método de control no sea práctico a gran escala (Fessl et al., 2006a). 2.1 ¿Qué métodos podemos implementar a corto plazo para reducir los números de P. downsi en las áreas de anidación de las especies de aves altamente amenazadas? (PRIORIDAD ALTA), parcialmente financiado, en progreso) Antecedentes y razonamiento: Los estudios han demostrado que P. downsi es una seria amenaza para la supervivencia de las especies amenazadas, tales como el pinzón de manglar en la isla Isabela y el pinzón de árbol mediano en la isla Floreana (Fessl et al., 2010; O'Connor et al., 2010c). Philornis downsi también está causando un serio impacto en las comunidades de aves en hábitats amenazados de alto valor para la conservación, tales como Los Gemelos (Dvorak y otros., 2011). Dada la urgencia de proteger estas especies y debido a que no existen al momento técnicas disponibles que sean altamente efectivas para reducir las poblaciones de moscas, quizás debería considerar el emplear una combinación de métodos que han tenido éxito parcial para reducir las poblaciones de moscas, aun cuando estos métodos representan un extenso trabajo y no son 100% efectivos. Las opciones incluyen el tratamiento de los nidos con permetrin y/o la colocación de trampas con atrayentes y la remoción de los nidos. 2.1.1. Probar el tratamiento de los nidos usando permetrin y compuestos similares Prioridad – alta Antecedentes y razonamiento – Hasta la fecha, éste es el único método de control existente que ha demostrado ser efectivo para reducir el número de moscas. Los estudios realizados por Fessl et al. (2006b) y Koop et al. (2011) mostraron que una o más aplicaciones al 1% de permetrín puede incrementar el éxito de los polluelos significativamente. Más aún, no hubo re-infestación de los nidos cuando éstos fueron tratados cuando los polluelos tenían 4-6 días de nacidos, quizás porque se presentó un efecto repelente. Es necesario realizar investigaciones adicionales para determinar la seguridad de usar permetrín con una especie amenazada y para diseñar métodos para colocar el insecticida en los nidos que se encuentran en árboles altos. Breve descripción de los métodos – Las pruebas preliminares indican que una dosis más baja de permetrín (0.1 %) podría ser efectiva y esto debe experimentarse en las larvas. También debe determinarse el tiempo y frecuencia de aplicación. Por ejemplo, ¿si se aplica permetrín en los nidos Página 23 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi antes de la salida de los polluelos del cascarón, esto puede evitar el establecimiento de la P. downsi en el nido? Se investigarán los riesgos y beneficios del uso de permetrín y otros compuestos relacionados con toxicidad más baja, por ejemplo, deltametrin, lambda-cyalotrin, a los polluelos pequeños, y se preparará un análisis de riesgos para obtener un permiso para realizar el tratamiento de los nidos con insecticida. Se probarán las técnicas para colocar el insecticida en los nidos (esto puede realizarse antes de obtener los permisos) tales como rociadores de nidos, geles de larga vida, bloques que liberan la fórmula lentamente, artefactos en forma de huevo (termómetro de prueba en forma de huevo), algodón mojado en insecticida, inyección de insecticida en el nido (desde abajo). Si el Parque Nacional Galápagos aprueba el análisis de riesgos, primeramente se probará la metodología en aves ubicadas en Los Gemelos. Seguidamente, se realizará el tratamiento de los nidos de pinzones de manglar y otras especies en el área. Nota: no es recomendable tratar solamente los nidos de otras especies en el área y no los de pinzón de manglar, pues esto puede producir que las moscas sean repelidas de realizar la ovoposición en los sitios tratados y se concentren en los nidos no tratados. Ubicación – Galápagos. Si resultara difícil encontrar moscas para las pruebas en la época seca, es posible que algunos de estos estudios puedan realizarse fuera de Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, cámara, insecticidas, pruebas de laboratorio. Duración – 1 año. Cooperantes – investigador de la FCD*, Charlotte Causton, Christian Sevilla, Francesca Cunninghame, PNG, Godfrey Merlen (métodos de colocación), Martín Quiroga, Sarah Knutie, Wacho Tapia. Fondos necesarios - parcialmente financiado. Monto aproximado de fondos necesario: $12,000. 2.1.2 Probar el uso de trampas con atrayentes Prioridad - Media Antecedentes y razonamiento – Se han probado diferentes métodos y atrayentes (O'Connor, pers. comm; Muth, 2007; Lincango y Causton, 2008a; Hellman y Fierke, 2009). Se obtuvieron los mejores resultados con trampas amarillas Mcphail (entrada sin malla) llenas con una mezcla de papaya madura y azúcar o azúcar y leche en polvo. Las trampas se colocaron generalmente con una separación de 10 m a 20 m a una altura de 2 m Aunque este método de control no es altamente efectivo y también atrae a otros insectos que no son el objetivo, la colocación de trampas en tiempos clave durante la época de anidación, podría ayudar a reducir el impacto de la mosca. Breve descripción de los métodos- colocar una cuadrícula de trampas usando el alimento atrayente más efectivo (jugo de papaya y azúcar), de preferencia en lugares soleados, con intervalos de dos metros para monitorear los números de moscas en la estación y atrapar y matar a las moscas. Una opción podría ser colocar jugo de papaya y azúcar en el fondo de las trampas McPhail, cubierto por un fondo falso; se colocaría un bloque de insecticida encima de esto para matar a las moscas. Se recolectarán las moscas de las trampas en alcohol en frascos para un conteo posterior. Se probará el uso de trampas secas de Amonio /podredumbre y se comparará su efectividad, si es posible, con las trampas húmedas con alimentos para determinar cuáles son más atractivas. Además, se repetirán Página 24 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi las pruebas con Z9-23 (tricosano), un atrayente de la Mosca doméstica. Agrocalidad-SICGAL revisará si el cebo de moscas de la fruta que se aplica en las áreas urbanas de Santa Cruz atrae también a la Philornis. Adicionalmente, 10 trampas con cebo de moscas se colocarán cada 2-3 días en un área que no haya sido rociada con cebo de moscas. Ubicación – Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, bloque de insecticida. Duración – 1 año. Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL (Ronal Azuero), Birgit Fessl, Cathy Smallridge, investigador de la FCD, Charlotte Causton, Christian Sevilla, Francesca Cunninghame*, PNG. Fondos necesarios - parcialmente financiado. Financiamiento del Fondo Durrell para la Conservación (Durrell Conservation Trust) para realizar pruebas en los sitios de reproducción del pinzón de manglar. Monto aproximado de fondos necesarios: $5,000. Otras opciones a considerar: Remoción de nido: las Philornis inmaduras deben permanecer en los nidos por al menos dos semanas luego del rompimiento del cascarón de los huevos, antes de emerger como adultas, y debido a que la mayoría de aves (con excepción de los pinzones terrestres) no reusan los nidos, sería factible eliminar las pupas usando esta técnica. Esto podía ayudar a reducir la tasa de expansión de la población a lo largo de la estación. Página 25 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi 2.2. ¿Qué opciones a largo plazo podríamos usar para el manejo de P. downsi? Tabla 2. Resumen de las opciones de manejo de P. downsi Opciones de Manejo Ventajas Desventajas Atraparlas con feromonas u otros atrayentes Método efectivo para proteger a especies amenazadas con poblaciones restringidas. Importante herramienta para el monitoreo de poblaciones. Solo se puede usar en áreas pequeñas. Necesita aplicar con regularidad. No todos los métodos son específicos para la especie. Interrupción del apareamiento con feromonas Específico para cada especie y ambientalmente seguro. Debe usarse en combinación con otras técnicas. Es más efectivo al controlar densidades poblacionales de bajas a moderadas (inversamente dependiente de la densidad) Funciona mejor si se tratan áreas grandes Se pueden tratar áreas inaccesibles. Puede dar como resultado la erradicación. Costoso Control biológico clásico (importación de enemigos naturales) Puede ser específico por género o especie. Ecológicamente seguro Se usa en grandes áreas. Puede aplicarse en topografía difícil. Permanente y auto sostenible. Buena relación costo- beneficio. Toma más tiempo para desarrollar. Es difícil conocer el nivel de control hasta ser liberado. Control biológico aumentativo (usando enemigos naturales que ya se encuentran en Galápagos) Puede ser específico por género o especie Ecológicamente seguro Se usa en grandes áreas Costos de desarrollo más bajos. Puede ser que no es auto-sostenible y puede requerir liberaciones periódicas del enemigo natural. Control químico (Reguladores de Crecimiento de Insectos (IGR), insecticidas, inhibidores de quitinasa, etc.) y biopesticidas Algunos como los IGR son más seguros y más específicos para un grupo. Puede ser útil para proteger las especies amenazadas con poblaciones restringidas. Algunos son de amplio espectro y la seguridad dependería de qué técnica se use para colocar el insecticida. Solamente es efectivo en áreas pequeñas Requiere aplicaciones repetidas. Se puede desarrollar resistencia con el tiempo. Costoso Técnica de Esterilización de insectos Método de control específico para la especie Costoso Se puede aplicar en una topografía difícil. Inversamente dependiente de la densidad Se integra bien con otros métodos. Puede dar como resultado la erradicación. Puede usarse también para una supresión y exclusión a largo plazo si es probable una re invasión (pe. Programa de liberación preventivo de California). Antecedentes y razonamiento: Se han listado las opciones para el manejo de la P. downsi en la Tabla 2. Debido a su extensa distribución en el archipiélago, su erradicación solamente sería posible si no ocurren nuevas incursiones de P. downsi de forma regular y si se garantiza un financiamiento a largo plazo. La interrupción del apareamiento o la Técnica de Esterilización de Insectos son técnicas que podrían usarse para erradicar la Philornis del archipiélago. La mejor opción para reducir el daño causado por la P. downsi a un nivel aceptable, sería una combinación de estrategias de manejo. El monitoreo y las evaluaciones regulares indicarán si se ha alcanzado la meta. Página 26 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi 2.2.1 Captura masiva con atrayentes Prioridad - Alta Antecedentes y razonamiento – La captura masiva usando atrayentes es una técnica útil para suprimir las poblaciones en áreas de alto valor para la conservación, pero no para un control en todo el archipiélago. Los atrayentes químicos también son útiles para medir poblaciones en el tiempo o medir la eficacia de otros programas de control como la Técnica de Esterilización de Insectos y control biológico. Los atrayentes que se usan para atrapar moscas incluyen los alimentos preferidos de la plaga o feromonas. Las feromonas son particularmente útiles porque pueden ser usadas para atraer moscas del sexo opuesto a una trampa o se pueden usar para interrumpir la actividad de apareamiento. Se han aislado feromonas y se han usado para atrapar moscas domésticas y especies Fannia, entre otras. Las pruebas preliminares con atrayentes sugieren que P. downsi podría usar feromonas (ver el numeral 2.2.2) y es atraída por producto de la fermentación y olores producidos por descomposición de proteínas. (Muth, 2007; Lincango y Causton, 2008a). Breve descripción de los métodos – Los atrayentes probados dependerán principalmente de los hallazgos de los estudios propuestos en el numeral 1.2. Una vez que se identifique un señuelo eficiente, se fabricarán los señuelos y una densidad de trampeo eficaz determinada (aproximadamente 5/hec). Se debe revisar las trampas con intervalos de 1 a 2 meses para limpiarlas y renovar los señuelos. Ubicación – Galápagos; Universidad Estatal de Nueva York, (SUNY-ESF), Syracuse. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, bloque de insecticida. Duración – por lo menos una vez al año. Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL (Ronal Azuero), Cathy Smallridge, Investigador de la FCD, Charlotte Causton, Christian Sevilla, Kristin Doherty, PNG, Stephen Teale*, estudiante de PhD supervisado por Stephen Teale. Fondos necesarios – Sin financiamiento. Depende de los resultados del numeral 1.2. Monto aproximado de fondos necesarios: $10,000-15,000 para desarrollar y probar el método. El costo del control dependerá del tamaño del área. El costo del señuelo será de aproximadamente $50/hec. 2.2.2. Interrupción del apareamiento con feromonas Prioridad – Alta (pero no se investigará inmediatamente) Antecedentes y razonamiento – El efecto general de la interrupción del apareamiento es confundir al macho enmascarando las feromonas naturales producidas por la hembra, liberando una feromona sintética en el hábitat de la plaga. Esto produce que los machos sigan los “falsos rastros de feromonas” para poder encontrar su pareja. Consecuentemente, la población de machos experimenta una probabilidad reducida de localizar exitosamente y de aparearse con las hembras, lo cual conduce al eventual cese de la reproducción y colapso de la infestación de insectos. Página 27 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Breve descripción de los métodos – Trabajo de laboratorio para aislar y sintetizar las feromonas descritas en el numeral 1.2. Si se logra aislar y sintetizar la feromona, se desarrollarán métodos para distribuirla, tales como: tecnología de puntos adhesivos (técnica de atraer y matar), en la cual se aplican puntos de gel a los troncos de los árboles u otras superficies con un aparato de calafateo tipo pistola, se colocan contenedores en los árboles o se realiza dispersión aérea. Se realizarán ensayos de campo para probar su efectividad. Ubicación – Galápagos; Universidad Estatal de Nueva York, (SUNY-ESF), Syracuse. Recursos clave - personal, transporte, trampas, métodos de colocación de las feromonas, atrayentes, tubos recolectores. Frecuencia /duración – 1-2 años Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL, Cathy Smallridge, Charlotte Causton, Christian Sevilla, PNG, Kristin Doherty, estudiante de PhD supervisado por Stephen Teale, Stephen Teale*. Fondos necesarios – Sin financiamiento. Depende de los resultados del numeral 1.2. Los costos principales serán para desarrollar un aparato para diseminar las feromonas (hojuelas impregnadas, etc., preferiblemente deben ser biodegradables) y para probar los métodos para su distribución. Monto aproximado de fondos necesario: $ 20-50,000. 2.2.3. Control Biológico Prioridad – Media/Alta Razonamiento – Si se usa con seguridad, el control biológico puede ser altamente efectivo para mantener a las plagas en niveles no dañinos en áreas extensas. Hasta hace poco, el control biológico se usaba principalmente en la agricultura, pero más recientemente se ha estado usando en ecosistemas naturales para conservar especies amenazadas, inclusive en las islas Galápagos donde se usó la Rodolia cardinalis para reducir el impacto de la cochinilla algodonosa en plantas endémicas (Calderón et al., 2012). Los enemigos naturales de P. downsi, particularmente aquellas especies que se alimentan exclusivamente de ellas, pueden ser altamente efectivos para reducir la población de P. downsi a niveles no dañinos. Existen dos tipos de controles biológicos que pueden usarse; el control biológico aumentativo donde los enemigos naturales que ya se encuentran en Galápagos se crían y liberan masivamente, o el control biológico clásico que involucra la importación de enemigos naturales del rango nativo de la mosca. Se han criado cuatro especies de parasitoides de pupas de Philornis en Galápagos (Spalangia endius, Brachymeria podagrica, B. cabira; y la eulofida Aprostocetus sp. (Tetrastichinae). En el 2008, Lincango y Causton encontraron 5% de las pupas atacadas por parasitoides, principalmente por la Brachymeria podagrica. Todos son parasitoides generalistas que podrían afectar a las especies nativas, y debido a esto, posiblemente no sean adecuadas para usarse en un programa de control biológico. Antes de eliminar la posibilidad de usar enemigos naturales residentes de la Philornis como agentes de control biológico, es necesario determinar si alguna otra especie está asociada con la P. downsi, incluyendo los endo-simbiontes. La información recolectada ayudará a determinar qué tipo de interacciones podrían ocurrir en el caso de que se importen agentes de control biológico a Galápagos. Página 28 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi No existen registros de parasitoides de P. downsi en su rango nativo, sin embargo, los parasitoides conocidos de otras especies de Philornis incluyen a Conura annulifera, Brachymeria podagrica o Dibrachys sp. (Couri y otros. 2006; Di Iorio y Turienzo 2011). a) Control biológico aumentativo Breve descripción de los métodos – Se recolectarán muestras de larvas y pupas de Philornis de diferentes áreas de vegetación e islas para determinar la prevalencia de enemigos naturales en Galápagos (diversidad, distribución y % de parasitación/nido). El muestreo puede combinarse con otra investigación sobre Philornis. Se criarán las pupas en el laboratorio para ver qué enemigos naturales surgen, si lo hacen. Estos estudios se realizarán dentro de las instalaciones de cuarentena de la FCD, las cuales necesitarán ser restauradas. Se investigará el rango huésped de todos los enemigos naturales de P. downsi por medio de la búsqueda en la literatura y revisando los registros del museo de la Estación Científica Charles Darwin. En caso de que se encuentren especies con un rango huésped restringido, se realizarán estudios para determinar los riesgos de usar especies con objetivo no específico y su eficacia como agentes de control (fase 2). Para probar endo-simbiontes, se exportarán moscas a Minnesota y se usarán análisis genéticos para determinar si las moscas están infectadas con bacterias endo-simbióticas comunes como la Wolbachia spp. o la Cardinium spp. Esto podría conducir al desarrollo de opciones alternativas de manejo porque los machos que portan endo-simbiontes son usualmente incompatibles con hembras no portadoras de endosimbiontes y así el apareamiento no es exitoso (O’Neill et al. 1997). Ubicación – Galápagos, Universidad de Minnesota. Recursos clave – Personal, transporte, tubos recolectores, instalaciones del laboratorio de cuarentena, jaulas para crianza. Duración – 1-2 años. Cooperantes – investigador de la FCD*, Christian Sevilla, George Heimpel, PNG, Sabine Tebbich, Sonia Kleindorfer. Fondos necesarios – parcialmente financiado. Existen algunos fondos del Fondo para la Conservación de Galápagos (Galápagos Conservation Trust) y George Heimpel para realizar encuestas de avispas parasitoides y para reparar las instalaciones de cuarentena. Monto aproximado de fondos necesarios: $ 8,000 – 12,000 para encuestas exploratorias (fase 1) y $ 50, 000 para la fase 2. b) Control biológico clásico Breve descripción de los métodos – Conura annulifera (= Spilochalcis ornithea) parece ser especialista en especies de Philornis (Burks, 1960; Couri y otros., 1996) y los esfuerzos se enfocarán en estudiar el impacto de esta especie así como en buscar otros enemigos naturales. Una rama adicional de investigación será el evaluar algunos de los parásitos generalistas muscoides disponibles a nivel comercial para hilornis downsi, los cuales incluyen Muscidifurax spp. y Nasonia vitripennis además de Spalangia endius, la cual ya se ha encontrado en las Galápagos. Se han obtenido permisos para traer pupas de Philornis al laboratorio de cuarentena de la Universidad de Minnesota y se realizarán esfuerzos para tratar de criarlas y mantener una colonia de Philornis en cautiverio, como pre-requisito para buscar los agentes de control biológico más adecuados. También se deben Página 29 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi investigar otros enemigos naturales, como patógenos, y se deben identificar potenciales colaboradores. A continuación se listan las acciones clave: B1. Obtener nuestras de nidos en Trinidad (George Heimpel, Ray Martínez, Sarah Knutie) y Brasil/Argentina (Martín Quiroga) para sacar pupas de Philornis y parasitoides asociados. B2. Estudiar el ciclo de vida de P. downsi en el laboratorio en una colonia de aves (cuarentena Minnesota, Estados Unidos). B3. Determinar la biología de los parasitoides asociados con Philornis incluyendo su capacidad para parasitar las larvas o pupas de P. downsi, la capacidad de los parasitoides para desarrollarse en P. downsi, su fecundidad y comportamiento de búsqueda. B4. Identificar y contactar colaboradores potenciales para investigar los patógenos, endosimbiontes (como la Wolbachia) y otros enemigos naturales asociados con P. downsi. B5. Determinar los efectos potenciales de su ataque a otros insectos no objetivo, en particular a las moscas nativas de Galápagos y otras especies de valor para la conservación. Ubicación – Trinidad; norte de Argentina; Brasil; Ecuador; Universidad de Minnesota; Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, laboratorio de cuarentena, jaulas de crianza. Duración – 2-4 años. Cooperantes – Charlotte Causton, Christian Sevilla, Dave Chadee, George Heimpel*, PNG, Martín Quiroga, Raymond Martínez, Sarah Knutie, Wacho Tapia. Fondos necesarios –Parcialmente financiado. Existen fondos para 1.5 años para iniciar los inventarios de enemigos naturales en el rango nativo de la mosca (George Heimpel). Se necesitan $2000 para realizar los inventarios en el norte de Argentina. Monto aproximado de fondos necesarios: $100-120,000. 2.2.4. Control químico Prioridad - Alta Antecedentes y razonamiento – Esta actividad extenderá la investigación realizada en la sección 2.1. Los reguladores de crecimiento de insectos,(IGR por sus siglas en inglés), otros piretroides, inhibidores de la quitinización o biopesticidas como las toxinas de Bacillus thuringiensis y la Spinosad, podrían ser útiles para controlar Philornis en áreas de alto valor de conservación tales como Los Gemelos, o en las áreas de anidación de las especies amenazadas. El nivel en que podrían usarse estos métodos de control dependerá de la técnica que se use para liberar el químico y podría incluir: la técnica de rociar los árboles, inyectar o rociar los nidos. Los Reguladores de Crecimiento de Insectos que se encuentran en el grupo de los benzo fenilos como la cyromazina y el polvo de triflumuron, induce la esterilidad de las moscas domésticas hembras, impide el nacimiento de los huevos e inhibe la síntesis de la quitina en las larvas. Estos compuestos son más seguros y más amigables con el ambiente que los insecticidas, se usan ampliamente para el control de moscas, Página 30 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi tienen una acción relativamente específica para dípteros y son de bajo riesgo para los organismos no objetivo (Isman, 2005; Hajjar, 1985). Jody O'Connor probó el polvo humedecible de triflumuron o polvo mezclado con agua (regular y doble poder) (llamado Alsystin de Bayer) en larvas y pupas en el laboratorio, pero no tuvo ningún efecto notable. Valdría la pena tratar otro regulador de crecimiento de insectos o realizar pruebas más profundas con estos compuestos. También se deben realizar pruebas con análogos hormonales juveniles como el metopreno. Breve descripción de los métodos Las acciones claves se describen a continuación: A. Crear un listado de posibles compuestos a probar, que incluyan: Deltrametrin, Reguladores de Crecimiento de Insectos (IGR - metopreno), toxinas de Bacillus thuringiensis, Spinosad, otros piretroides e inhibidores de la quitina, redes rociadas con insecticida, etc. B. Probar los compuestos que sean los más seguros para las aves y el ambiente. Examinar las larvas y en donde sea relevante, las hembras adultas para ver si se afecta la producción de huevos. Nota: puede ser necesario realizar algunas de estas pruebas fuera de Galápagos, dependiendo de si el uso de los insecticidas está aprobado o no en Galápagos. C. Probar métodos de colocación de los compuestos que sean efectivos y de bajo riesgo para las aves, con el objeto de usarlos en la mayor escala posible. Esto incluye la técnica de rociado en árboles, diseminación, que las aves lleven algodón mojado en insecticida a los nidos, etc. Nota. Es necesario probar si el método del algodón supone un mayor riesgo para las aves adultas al llevarlos en sus picos. Ubicación – Galápagos. Recursos clave - personal, transporte, trampas, atrayentes, tubos recolectores, insecticidas. Duración – 1-2 años. Cooperantes – Cathy Smallridge, investigador de la FCD*, Charlotte Causton, Christian Sevilla, PNG, Martín Quiroga, Sarah Knutie, Wacho Tapia. Fondos necesarios – No financiado. Monto aproximado de fondos necesarios: $30,000- 45,000. 2.2.5. Técnica de Esterilización de Insectos (SIT por sus siglas en inglés) Prioridad – Media/Alta Antecedentes y razonamiento – La Técnica de Esterilización de Insectos es un método de control de plagas en el cual se liberan grandes cantidades de machos estériles de la especie objetivo. Cuando las hembras fértiles se aparean con estos machos, su reproducción se reduce de tal forma que por varias generaciones, la población se reduce a una densidad insostenible y muere. Este método ha sido usado contra varias especies de plagas (Hendrichs et al., 2005). Tiene la ventaja de ser altamente específico para cada especie (no causará daño a otras especies) y es benigno para el medio ambiente. En el 2008 C. Smallridge preparó un plan de investigación para usar la técnica SIT en Galápagos. Los requerimientos para evaluar la factibilidad de implementar la SIT incluyen el Página 31 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi conocer sobre la biología reproductiva (comportamiento de apareamiento y colocación de huevos, dieta, condiciones ambientales, como criar la plaga en cautiverio) y la disponibilidad de conocimiento y métodos para monitorear y suprimir las poblaciones (pe. atrayentes huéspedes, feromonas, población, distribución y densidad). La SIT funciona mejor si existe una supresión inicial de la población porque el nivel del programa de SIT depende de la densidad poblacional y porque usualmente se usa de forma combinada con otras técnicas. Breve descripción de la metodología El proyecto consiste de tres fases principales para desarrollar e implementar un programa de SIT: Fase Uno: Investigar la biología y ecología de la mosca (en progreso) A. Desarrollar métodos de vigilancia y supresión de la población (en progreso, ver el numeral 1.2.2). B. Desarrollar un método de crianza en laboratorio para la P. downsi (en progreso, ver el numeral 1.5). C. Describir la historia de vida y biología (en progreso, ver el numeral 1.3). D. Evaluar la factibilidad de la Técnica de Esterilización de Insectos. La propuesta solicitando asistencia técnica debe ser enviada al Gobierno del Ecuador hasta el 31 de mayo de 2012 (Charlotte y Wacho con ayuda de Andrew Parker). Fase Dos: Desarrollo y prueba piloto de SIT Si el análisis de la fase uno es favorable, el desarrollo de una técnica de esterilización de insectos incluirá las siguientes actividades. A. Desarrollar los parámetros y el protocolo de esterilización: Determinar la relación entre la dosis, esterilidad y competitividad de la mosca estéril. B. Desarrollar un protocolo de liberación (que incluya la liberación piloto), identificar localidades y determinar la densidad de la liberación. C. Desarrollar técnicas y construir instalaciones para el suministro de moscas estériles: Determinar el sitio para la producción a escala piloto hasta la etapa de pupa, por ejemplo, construir la fábrica o comprar moscas estériles de una fabrica establecida de SIT en otro lugar, Crear procedimientos de operación para la fábrica, Identificar el método preferido de distribución o la combinación de métodos, por ejemplo. terrestre o aéreo, en etapa de pupa o adulto (los diferentes métodos pueden ser adecuados para diferentes islas de acuerdo a su accesibilidad y densidad de la plaga). Desarrollar guías de procedimiento para crianza y reproducción, Establecer guías para monitorear la calidad del producto estéril en las instalaciones de producción y en las ubicaciones de liberación en base a las guías de la FAO/OIEA/USDA (2003), Establecer guías para monitorear la efectividad de la operación de la SIT (por ejemplo, encuestas de larvas de polluelos, encuestas de adultos en trampas, etc.). D. Producir pupas estériles en números apropiados, criarlas y distribuir las moscas en áreas seleccionadas. E. Desarrollar un protocolo de monitoreo. F. Desarrollar un método para estimar la densidad poblacional a fin de determinar la densidad efectiva de liberación. Fase Tres: Operaciones de erradicación a gran escala. En caso de que se use la SIT, es posible que sea necesario usar una erradicación secuencial de la mosca en las islas en un período de 5 - 10 años. Este escenario permite una construcción gradual de una capacidad de producción de moscas estériles a través del período de duración de la campaña. Página 32 de 38 Plan de Investigación de Philornis downsi Cada fase de erradicación incluirá un período inicial de supresión (de la estación anterior y/o temprano en la estación) para reducir la población de adultos tanto como sea posible. A esto le seguirá un período extenso de liberaciones de insectos estériles. Ubicación – Galápagos Recursos clave – como se menciona anteriormente. Duración – Fase 1- 3 años, Fase 2 – 2-3 años, Fase 3 – 5-10 años. Nota: Posiblemente sea necesario implementar solamente las fases 1 y 2. Cooperantes – Agrocalidad-SICGAL, Andrew Parker, Cathy Smallridge, Charlotte Causton, Christian Sevilla, Dave Chadee, George Heimpel, PNG, Ray Martínez, Stephen Teale, Wacho Tapia. Fondos necesarios Fase 1: 300,000 USD (parcialmente financiado por OIEA). Fase 2: 1,100,000 USD Fase 3: 11 millones USD. Entre $500-4000 per km 2 /año dependiendo de la densidad de la plaga. COMUNICACIÓN El éxito de cada una de las actividades de investigación descritas en este plan dependerá de: a) la comunicación regular dentro y entre los grupos de investigación, sobre el progreso de cada actividad, b) compartir a tiempo los reportes recientemente publicados o artículos que sean relevantes, y c) la cooperación en la búsqueda de oportunidades de financiamiento. Para asegurar la probabilidad de éxito, un coordinador será responsable de mantener la comunicación abierta entre los investigadores. Esto asegurará que el plan se implemente de acuerdo a su diseño, eliminando la duplicación entre proyectos, y motivará a los investigadores a trabajar en equipo cuando sea posible. Para facilitar este trabajo, se ha creado un sitio web interactivo que permitirá el dialogo entre los investigadores, colocar artículos y presentaciones relevantes para el proyecto, y proveer información actualizada sobre proyectos de investigación: (https://sites.google.com/site/philornisworkinggroup/). Bibliografía Aitken, T.H.G., Downs, W.G., and Anderson, C.R. 1958. Parasitic Philornis Flies as Possible Sources of Arbor Virus Infections (Diptera, Anthomyidae). Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine 99: 635-637. Burks, B.D. 1960, A Spilochalcis parasitic on flies that infest bird nests (Hymenoptera, Chalcididae). 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Listado de participantes en el taller e información de contacto Rachel Atkinson Botánica/ especies invasivas /restauración, investigadora adjunta Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador Agrocalidad-SICGAL, Islas Galápagos, Ronal Azuero Técnico de Monitoreo Ecuador Director, Estación Científica Fundación Charles Darwin, Islas Stuart Banks Charles Darwin Galápagos, Ecuador Fondo para el Control de Especies Invasoras en las Islas Galápagos Carlos Carrión Coordinador (FEIG) Parque Nacional Galápagos, Islas Raphael Carrión Park ranger Galápagos, Ecuador Island Conservation, Islas Galápagos, Víctor Carrión Asesor técnico Ecuador Coordinador, Oficina de la Parque Nacional Galápagos, Islas Oscar Carvajal isla Isabela Galápagos, Ecuador Entomología/ especies invasivas, investigadora Fundación Charles Darwin, Islas Charlotte Causton adjunta Galápagos, Ecuador Entomólogo médico / Profesor de Salud Universidad de Indias Orientales, Dave Chadee Ambiental Trinidad Francesca Ornitología, programa del Fundación Charles Darwin, Islas Cunninghame pinzón de manglar Galápagos, Ecuador Ecología Química /entomología, estudiante de Kristin Doherty grado SUNY-ESF Ornitología/ biología de Michael Dvorak conservación Birdlife, Austria Ecología de comportamiento / biología de conservación, Fundación Charles Darwin, Islas Birgit Fessl investigador adjunto Galápagos, Ecuador Entomología/ control biológico, Profesor y director de estudios de Universidad de Minnesota, St Paul, George Heimpel postgrado Minnesota, USA Profeso de Manejo de la Biodiversidad /ornitología Universidad Pierre & Marie Curie Paris /cambio climático, VI, Museo Nacional de Historia Natural, Pierre-Yves Henry investigador Paris, Francia Fundación Charles Darwin, Islas Gustavo Jiménez Ornitología, investigador Galápagos, Ecuador Ornitología/ ecología de comportamiento, Profesora de Biodiversidad y Conservación y Directora Científica del Centro de Investigación Flinders para la Adaptación Climática y el Universidad Flinders, Adelaida, Sur de Sonia Kleindorfer Comportamiento Animal. Australia Biología evoluacionaria /ornitología/ ecología de parásitos, estudiante Universidad de Utah, Salt Lake City, Sarah Knutie graduada Utah, USA Biología ecológica y evolucionaria, colega Universidad de Arizona, Tucson, Jennifer Koop postdoctoral Arizona, USA [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] Director Laboratorio de Entomología Médica y Renato León Medicina Tropical (LEMMT) Entomología/ especies invasivas, estudiante Piedad Lincango graduada. Biología de conservación/ Estudiante monitora Nivia Luzuriaga graduada Entomología/ taxonomía de insectos, Asociado de Raymond Martínez Investigación Conservación /vias de Godfrey Merlen especies invasivas Ornitología/conservación biología/Programa del Pájaro Bobo de Floreana, Coordinador del Programa Luis Ortiz de restauración Entomólogo Investigador Andrew Parker (Tsetse) Martín Quiroga Christian Sevilla Cathy Smallridge Wacho Tapia, Ornitología, investigador Coordinador, Conservación y restauración de ecosistemas isleños Entomología/ecología de parásitos Coordinador, Programa de Conservación, Desarrollo Sustentable e Investigación Sabine Tebbich Profesor de ecología Química /entomología Asociado de Ornitología /ecología de comportamiento, investigación Leandro Vaca Biólogo José Villa Gerente de Proyecto Stephen Teale Universidad San Francisco, Quito, Ecuador [email protected] Universidad de Valencia, Valencia, España [email protected] Universidad Pierre & Marie Curie Paris VI, Museo Nacional de Historia Natural, Paris, Francia [email protected] Universidad de Indias Orientales, Trinidad Raymond.Martí[email protected] Consultor independiente [email protected] Fundación Charles Darwin, Islas Galápagos, Ecuador [email protected] FAO/OIEA Laboratorios, Viena, Austria [email protected] Universidad Autónoma de Entre Ríos, Santa Fe, Argentina [email protected] Parque Nacional Galápagos, Islas Galápagos, Ecuador [email protected] Consultora Independiente, Australia [email protected] Parque Nacional Galápagos, Islas Galápagos, Ecuador Escuela de Ciencia Ambiental y Forestería, Universidad Estatal de Nueva York (SUNY-ESF) Universidad de Viena, Viena, Austria Centro Científico de Galápagos, San Cristóbal, Islas Galápagos, Ecuador Fondo para el Control de Especies Invasoras en las Islas Galápagos (FEIG) [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] [email protected] Anexo 2. Grupos de Trabajo Grupo 1 Participantes Protección de especies de aves amenazadas a) Sistema de Monitoreo de Aves – cuál sistema, cuáles especies, donde, qué debe ser monitoreado (número de aves, parásitos, presencia de hormigas, Philornis) a) Rachel Atkinson, Sonia Kleindorfer, Michael Dvorak, Nivia Luzuriaga, Pierre-Yves-Henry, Luis Ortiz, Wacho Tapia, Oscar Carvajal, Gustavo Jiménez b) Plan para proteger especies amenazadas incluyendo: b) Birgit Fessl, Francesca Cunninghame, Godfrey Merlen, Sabine Tebbich, 2 Biología / Ecología de P. downsi a) Expandir la información disponible sobre la P. downsi b) Identificar preguntas de investigación c) Medios para responder a las preguntas (planes paso a paso) d) Identificar los posibles colaboradores /donantes Andrew Parker, Dave Chadee, Raymond Martínez, Martín Quiroga, Stephen Teale, Kristin Doherty, Piedad Lincango, Jen Koop, Renato León, Leandro Vaca 3 Manejo de P. downsi Soluciones intermedias para controlar la mosca en áreas de alto valor de conservación Soluciones a largo plazo Cathy Smallridge, George Heimpel, Charlotte Causton, Christian Sevilla, Víctor Carrión, Sarah Knutie, Ronal Azuero, Raphael Carrión.