informe - dspace.conicyt.cl

&CDNIGYT
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CCMiSÓN NACIONAL DE INVF5TIGACIóN
(FNTÍFI( A Y rE(NoÓGIcA
GOBIERNODE CHILE
COMISION NACIONAL DE INVESTIGACION CIENCIA Y TECNOLOGIA VERSION OFICIAL
FECHA: 30/09/2009
PROYECTO POSTDOCTORADO NO3080025
INVESTIGADOR RESPONSABLE: MARGARITA ELLY ALIAGA MIRANDA
FONDO NACIONAL DE DESARROLLO CIENTIFICO Y TECNOLOGICO (FONDECYT) Bernarda Morín 551, Providencia - casilla 297- y , Santiago 21
Telefono: 435 43 50 FAX 365 4435
Email: [email protected]
INFORME FINAL
PROYECTO FONDECYT POSTDOCTORADO
AÑO ETAPA: 2009
DURACIÓN: 2 años
N° PROYECTO: 3080025
TÍTULO PROYECTO: KINETIC STUDY ON THE FORMATION OF SUPEROXIDE RADICALS IN A
COPPER-GLUTATHIONE SYSTEM AND ITS POSSIBLE AUTODISMUTATION REACTION.
FISICO-QUIMICA
DISCIPLINA PRINCIPAL:
GRUPO DE ESTUDIO: QUIMICA
INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE: MARGARITA ELLY ALIAGA MIRANDA
CIUDAD DE LOS VALLES
DIRECCIÓN: LOS ABEDULES 1378
COMUNA: PUDAHUEL
CIUDAD: SANTIAGO
REGIÓN: METROPOLITANA
FONO: 6014174 94944094
EMAIL : [email protected]
INFORME
OBJETIVOS
Cumplimiento de los Objetivos planteados en el Proyecto. Recuerde que los objetivos del proyecto no se refieren a listar actividades
desarrolladas sino a los objetivos desarrollados
No
OBJETIVOS
Demostrar que el anión superóxido generado en
la interacción entre oxígeno molecular y el
2
3
4
complejo Cu(I)-glutatión podría experimentar una
reacción de autodismutación.
Determinar el efecto de concentraciones
crecientes de Cu2+/GSH (1:3) en la velocidad de
producción de radical superóxido y peróxido de
hidrógeno. Además evaluar el efecto de cambios
en la concentración de oxígeno como reactante
para reaccionar con el complejo Cu(I)-[GSH]2.
Evaluar el efecto de la temperatura en la
producción de radical superóxido y peróxido de
hidrógeno.
Evaluar el efecto de interceptores de radical
superóxido en la posible acumulación de una
forma oxidada del complejo Cu(I)-[GSH]2.
CUMPLIMIENTO
TOTAL
FUNDAMENTO
PARCIAL
El efecto de concentraciones crecientes del
complejo Cu(I)-[GSH]2 sobre la producción de
radical superóxido y peróxido de hidrógeno fue
estudiado satisfactoriamente. Dicho efecto fue
evaluado a partir de soluciones de complejo
Cu(I)-IGS1-1I2 que están saturadas en oxígeno
molecular y en ausencia de oxígeno. Los
resultados obtenidos en el estudio de una
concentración intermedia de oxígeno no fueron
satisfactorios, debido principalmente a que la
instrumentación para llevar a cabo los diversos
ensayos en la determinación de superóxido y
peróxido de hidrogeno no permitió mantener tal
condición.
TOTAL
TOTAL
5
Investigar la afinidad del grupo tiol presente en el
complejo Cu( I )-[ GS1-1 ] 2 hacia otros metales los
cuales podrían formar con GSH complejos más
estables. Específicamente evaluar el efecto de
metales diferentes a cobre sobre la producción de
radical superóx ido y peróxido de hidrógeno.
TOTAL
Otro(s) aspecto(s) que Ud. considere importante(s) en la evaluación del cumplimiento de objetivos planteados en la propuesta
original o en las modificaciones autorizadas por los Consejos.
RESULTADOS OBTENIDOS:
Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las
publicaciones y lo manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. En la sección
Anexos incluya información adicional que considere pertinente para efectos de la evaluación.
La extensión máxima de esta sección es de 5 páginas (letra tamaño 10, Anal o
Verdana).
Obj. 1. Demostrar que el anión superóxido generado en la interacción entre oxígeno
molecular y el complejo Cu(I)-[GSH]2 podría experimentar una reacción de
autod ismutación . *
Para el cumplimiento de lo anterior fue necesario primero re-evaluar la habilidad del complejo
Cu(I)-[GS1-1]2, en presencia de oxígeno molecular, para generar radicales superóxidos.'
La preparación del complejo Cu(I)-[GSH] 2 se realizó como ha sido reportado en la literatura,2 a
partir de una mezcla de Cu 2 /GSH (en una relación molar 1:3) preincubada durante 10 minutos,
(cuando corresponda se especifican otros tiempos de preincubación usados). Una vez preparado
el complejo y tras su interacción con oxígeno molecular, la producción de radicales superóxidos
se evalúo indirectamente mediante técnicas espectroscópicas que involucran: reducción de
citocromo c (Cyt-c; ¿\OD 5501 1), quimioluminiscencia debida a la reducción de luci g enina (Luc;
AAUC) y oxidación de dihidroetidio (DHE; X e,c470nm Y Xem.590nm). Los resultados obtenidos
muestran que todos los ensayos mencionados son procesos inhibibles por SOD (250 U/pocillo)
tal y como se aprecia en Figura 1 para los dos primeros casos (Sección VI. Anexos).
La capacidad que poseen los radicales superóxidos generados por el complejo Cu(I)-[GSH] 2 de
experimentar espontáneamente una reacción de autodismutación (Esquema 1), en lugar de
regenerar el oxígeno inicialmente consumido, fue evaluada. Para ello la formación de H 2 0 2 en el
medio de reacción fue determinada mediante: KIT Reflectoquat, específico para peróxido de
hidrógeno y fluori métrica mente (oxidación de N-(4-hidroxifenil)-acetamida en medio acídico).3
Ambos procesos inhibibles totalmente por catalasa (200 U/mL).
2Cu 2 + 6GSF!
00
2H
20, 20
U102 + 02
- SOD o Tempol
- --- 2Cu(1I)-[GSSG]
2Cu(II)-complejo
GSSG + 2Cu(1)-[GSH]2
20 2 20
Esquema 1
Obj. 2. Determinar el efecto de concentraciones crecientes de Cu 24 /GSH (1:3) en la
velocidad de producción de radical superóxido y peróxido de hidrógeno.* Para ello
primero se estudió el efecto que producen concentraciones crecientes del complejo en la
producción de radicales superóxido, mediante la reducción de, citocromo c (Cyt c) y lucigenina
(Luc). Los resultados obtenidos para ambas reducciones son mostrados en Figura lA y iB,
respectivamente. Figura lA (Sección VI. Anexos) muestra que la reducción de Cyt c es
dependiente de la concentración existente de complejo Cu(I)-[GS1-1] 2 en el sistema;
destacándose una primera zona a concentraciones del complejo menores o iguales a 10 VIM que
presenta una pendiente mayor a la encontrada para concentraciones del complejo superiores a
10 tM. Lo anterior refleja una mayor cantidad de Cyt c reducido para concentraciones de
complejo :5 10 .iM (expresado como un valor más alto de 1tmoles cyt c reducido/2min);
demostrando así una mayor eficiencia del sistema, y un descenso en la eficiencia a
concentraciones superiores a 10 tM.
En Figura lA se observa que la reducción de Cyt c-dependiente de superóxido por efecto del
complejo es inhibible por SOD. Sin embargo existe una fracción no inhibible por SOD (14%, para
la concentración de complejo 50 tM), que de otros resultados obtenidos (no mostrados) es
equivalente a la reducción de Cyt c dependiente de GSH existente en solución. También se
aprecia en Figura lA que al aumentar la concentración del complejo, aumenta la fracción no
inhibible por SOD. Experimentos realizados en atmósfera inerte dan cuenta de una magnitud de
reducción de Cyt c similar a la fracción no inhibible por SOD (datos no mostrados).
Figura lB (Sección VI. Anexos) muestra el efecto que producen concentraciones crecientes de
complejo Cu(I)-[GSH] 2 sobre la reducción de lucigenina (proceso SOD-inhibible). Se observa un
aumento en la quimioluminiscencia debida a la reducción de Luc, dependiente de la
concentración de complejo. La ausencia de un quiebre en Figura lB en comparación a aquel
,-hFçnirlr nn
ir1i r
1 t nnrlríA lzinr ,vnIirr1r
nid4r,rr1n Inc
r1
Ic rnt-nf
r1,
= 10 M's' (Afanas'ev et al.') la reacción entre Cyt c y superóxido posee una constante k =
2,6x10 5 M's'. (Butler et a0). Este último valor es más cercano a aquel reportado para la
reacción de autodismutación espontánea de superóxido k = 5,4>40 M's', (Cadenas et al.') lo
que los hace procesos competitivos. En virtud de lo anterior y como consecuencia de la presencia
de altas concentraciones de complejo las cuales producen una mayor cantidad de superóxido
(mayor reducción de Luc) se estaría favoreciendo la reacción de autodismutación espontánea,
frente a la reducción de Cyt c, lo que lleva a una disminución en la eficiencia a concentraciones
altas de complejo. Sin embargo en la reacción de superóxido con Luc el valor superior de la
constante involucrada no permitiría una competencia con la reacción de autodismutación y por lo
tanto la eficiencia del sistema sería constante. La explicación de lo anterior está asociada con la
observación experimental que da cuenta que la incubación de concentraciones crecientes de
complejo en un medio libre de Cyt c o Luc llevó a un incremento en la generación de peróxido de
hidrógeno (Figura 2). Dicho efecto se estudió a través de diferentes métodos de detección de
H 2 0 2 mostrándose en Figura 2A y B (Anexos), los más representativos. Se observa en todos
ellos un comportamiento similar, dependiente de la concentración de complejo Cu(I)-[GSH]2.
Además estudios realizados a diferentes tiempos de pre-incubación (no mostrados) muestran
que cuando la concentración del complejo aumenta desde 4jtM hasta 40 ViM se produce un
aumento en la velocidad inicial de formación de peróxido de hidrógeno que va desde 0,43 a 0,56
tM/min, respectivamente.
Obj. 3. Evaluar el efecto de la temperatura en la producción de radical superóxido y
peróxido de hidrógeno.
Figura 3A (Sección VI. Anexos) muestra la dependencia existente entre la temperatura y la
producción de superóxido (evaluada mediante la reducción de Luc). Se observa que para una
concentración del complejo Cu(I)-[GSH] 2 10 1.iM, pre-incubado 5 o 15 mm., al aumentar la
temperatura se produce una mayor reducción de Luc (vía radical superóxido generado por el
complejo). Sin embargo una relación inversa se empieza a evidenciar cuando el tiempo de preincubación aumenta a 30 minutos. Figura 313 (Anexos) muestra resultados que podrían explicar
lo que estaría ocurriendo con un complejo Cu(I)-[GSH] 2 10 ViM pre-incubado por 30 minutos en
relación a su capacidad generadora de H 2 02 a diferentes temperaturas. Por lo tanto mientras
mayor es el tiempo de incubación de la solución que contiene al complejo, se favorecen las
condiciones para la reacción de autodismutación. Por otro lado cuando el efecto del pH es
evaluado en este sistema, una disminución en el pH también favorece la reacción de
autodismutación, lo cual es consistente con la inestabilidad de los radicales superóxidos a pHs
acídicos.
Considerando el Esquema 1, la formación de 2 moles de complejo Cu(I)-[GSH]2 implica la
producción de 1 mol de GSSG, además bajo condiciones que favorecen la reacción de
autodismutación (por ej. aumento de temperatura) la reacción se desplaza hacia una ruta
irreversible que lleva a la formación en este caso de 2 moles del complejo Cu(II)-GSSG. La
cantidad generada de este complejo fue posible evaluar espectrofotometrica mente a través de la
oxidación de NADPH. Cabe destacar que este ensayo de determinación de GSSG, utilizó EDTA
(como agente quelante de cobre II) lo que permite determinar no solo el glutatión oxidado libre
sino también aquel que forma parte del complejo Cu(II)-GSSG. Por lo tanto figura 3C (Anexos)
muestra que un aumento en la temperatura lleva a una mayor producción de GSSG total. La
cantidad de GSSG total producida, por un complejo 10 1iM, es máxima a 37 0 C llegando a 15 ItM.
Considerando el efecto de la temperatura en la producción de GSSG (ya sea libre o formando
parte del complejo Cu(II)-GSSG), fue necesario paralelamente evidenciar la presencia de Cu(II)GSSG en soluciones que inicialmente contenían al complejo Cu(I)-[GSH] 2 y que han sido
incubadas a 370 C, para ello se hicieron estudios de 1 H-NMR. Figura 4 (Anexos) muestra los
espectros 'H-NMR obtenidos para una solución que contiene el complejo Cu(I)-[GSH] 2 incubada
a 370 C por 24 h (Espectro B). En el espectro anterior se observa la formación de un compuesto
cuyas características espectrales coinciden con aquellas obtenidas para un complejo Cu(II)GSSG preformado (Espectro C). Cabe destacar que el tiempo utilizado en la incubación a la
temperatura mencionada es para poder acumular una concentración útil para ser observada por
NMR. Espectros A y D corresponden a soluciones que contienen el complejo Cu(I)-[GS1-1] 2 y
GSSG utilizados como controles, respectivamente.
Obj. 4. Evaluar el efecto de interceptores de radical superóxido en la posible
acumulación de una forma oxidada del complejo Cu(I)[G51-1] 2 .* El cumplimiento de este
objetivo fue realizado, utilizando como moléculas interceptoresde radical superóxido, SOD y
derecha e impedir la regeneración tanto del complejo Cu(I)-[GSH] 2 como del oxígeno molecular.
Lo anterior implicaría la formación y acumulación de una forma oxidada de tal complejo, como se
ha explicado anteriormente con el efecto de la temperatura (Obj. 3).
Figura 5 A muestra que la incubación de un complejo Cu(I)-[GS1-1] 2 (10 PM) con Tempol lleva a
una disminución en el tiempo de los grupos tioles titulables de dicha mezcla, evaluados como
grupos reactivos a DTNB (AOD 412 nm) 7 , además muestra que tal descenso es acelerado cuando la
incubación es realizada a 37°C. Además otros resultados obtenidos, no mostrados, dan cuenta
de un incremento en la concentración de GSSG, evaluados a través del ensayo de oxidación de
NADPH/Glutatión reductasa, en presencia de EDTA (AOD3 4 0 1 m) para la misma mezcla.
Cuando la concentración de Cu(II)-GSSG fue evaluada espectrofotométrica mente a 625 nm
(longitud de onda característica de la formación del complejo Cu(II)-GSSG) 8 durante la
incubación del complejo Cu ( I )- [ GSH ]2 con Tempol o SOD o a una temperatura de 37°C, se
observa un aumento en la formación del complejo Cu(II)-GSSG (Figura 5B). Además es
importante notar que de acuerdo a estudios de 1 H-NMR el espectro obtenido en presencia de
interceptares de superóxido (no mostrado) es muy similar al espectro B de la Figura 4, lo cual
permite postular que la forma oxidada obtenida del complejo Cu(I)-[GSH] 2 ya sea en presencia
de interceptares de superóxido o a elevadas temperaturas correspondería al complejo Cu(II)GSSG.
Obj. S. Investigar la afinidad del grupo tiol presente en el complejo Cu(I)-(G5H] 2 hacia
otros metales los cuales podrían formar con GSH complejos más estables.
Específicamente evaluar el efecto de metales diferentes a cobre sobre la producción de
radical superóxido y peróxido de hidrógeno.
El efecto de metales sobre la producción de radicales superóxido por el complejo Cu(I)-[GS1-1]2
fue evaluado a través de la oxidación de DHE (Figura 6). Los resultados muestran que de las
sales de metales evaluadas la mayoría mantiene la magnitud en la capacidad generadora de
superóxido del complejo. Sin embargo niquel reduce tal magnitud y mercurio realza
considerablemente la producción de superóxido. Siendo ambos procesos SOD-inhibibles. En
ambos casos existen reportes de la formación de complejos entre estos metales y glutatión, en
las relaciones molares evaluadas. Por lo tanto es posible postular que en el caso del Ni un
complejo Ni(II)-[GSH] 2 es formado el cual posee un grado de redox actividad menor al complejo
Cu(I)-[ G 5H ]2 . En el caso de Hg, se observa una mayor oxidación de DHE lo cual se podría
atribuir a la formación de un complejo Hg(II)-[GSH] 2 el cual posee una magnitud de redox
actividad mayor que el complejo Cu(I)-[GSH] 2 . Además en este último caso, la formación del
complejo de mercurio supone el desplazamiento de cobre unido a GSH por mercurio, lo cual
concuerda con la mayor afinidad de Hg frente a Cu por el grupo sulfidrilo de GSH. En este caso
la producción de H 2 02 es mayor (no mostrado). Cabe destacar que tanto en el caso de Ni como
Hg la reducibilidad por parte de superóxido es termodinámicamente desfavorable hacia estos
metales (potenciales de reducción).
* Los objetivos específicos 1, 2 y 4 forman parte de la publicación adjunta: Speisky, H.;
Gómez, M.; Burgos-Bravo, F.; López-Alarcón, C.; .Jullian, C.; Olea-Azar, C.; Alia g a, M.E.;
Bioorg. Med. Chem. 2009, 17, 1803.
Referencias
1. Speisky, H.; Gómez, M.; Carrasco-Pozo, C.; Pastene, E.; Lopez-Alarcón, C.; Olea-Azar, C.
2008, 16, 6568.
Bioorg. Med. Chem.
2. Ciriolo, M.R.; Desideri A.; Paci, M.; Rotilio, G. J. Biol, Chem., 1990, 265, 11030.
3. Jie, N.; Yang, 3.; Huang, X.; Zhang, R. Song, Z. Talanta, 1995, 42, 1575.
4. Afanas'ev, I. B.; Ostrachovitch, E. A.; Korkina, L. G. Arch. Biochem. Biophys. 1999, 366, 267.
5. Butler, J.; Koppenol, W.H.; Margoliash, E. J. Biol. Chem. 1982, 257, 10747.
6. Cadenas, E.; Davies, K.J.A. Free Radical Biol. Med. 2000, 29, 222.
7. Rahman, 1.; Kode, A.; Biswas, S. K. Nature Protocols 2006, 1, 3159.
8. Postal, W. 5.; Vogel, E. J.; Young, C. M.; Greenaway, F. T. 3. Inorg. Biochem. 1985, 25, 30.
RESUMEN:
Describa en forma precisa y breve el tópico general del proyecto, sus metas y objetivos y los
resultados alcanzados. Utilice un lenguaje apropiado para la comprensión del público no
especialista en el tema. Esta información podrá ser difundida. La extensión máxima de esta
sección es de 1 página (letra tamaño 10, Anal o Verdana).
La reacción entre glutatión reducido (GSH) e iones cobre (Cu 2 ) resulta en la rápida formación
de un complejo Cu(I)-[GSH]2. Esta última especie es redox activa hacia oxígeno molecular
(Esquema 1); es decir durante su interacción con oxígeno, el complejo Cu(I)-[GSH] 2 experimenta
oxidación para formar radicales superóxido y una "forma oxidada del complejo". La generación
de superóxido es continua y totalmente reversible. Sin embargo en presencia de moléculas que
actúan como interceptares de radicales superóxido, el equilibrio anterior se vería alterado.
En el presente proyecto tal producción de radical superóxido dependiente del complejo Cu(I)[GSH] 2 fue evaluada cinéticamente, para lo cuál primero el complejo fue preparado por
preincubación de una mezcla de Cu 2 y GSH (en una relación molar 1:3, respectivamente).
Luego se estudió la influencia de diversos parámetros sobre la producción de 02 por el complejo
Cu(I)-[GSH] 2 , incluyendo el efecto de: concentraciones crecientes del com p lejo, temperatura y
pJ:i . Los resultados obtenidos muestran que: (a) en presencia de concentraciones crecientes del
complejo existe una mayor producción de radical superóxido evaluado a través de una mayor
reducción de, lucigenina, y de citocromo c, y también una mayor oxidación de DHE, todos estos
procesos son inhibibles por SOD; (b) para una determinada concentración de complejo Cu(I)
[GSH] 2 (10 jM, preincubado a tiempos superiores a 15 mm) la producción de anión superóxido
disminuye al aumentar la temperatura desde 22 a 37 °C; tales condiciones favorecerían la
reacción de autodismutación del radical , evidenciado en una mayor producción de peróxido de
hidrógeno; (c) la inestabilidad del radical superóxido evidenciada al aumentar el pH en el
intervalo estudiado 6,8-7,7 a 30 °C, conlleva a un incremento en la generación de peróxido de
hidrógeno a pHs más ácidos.
Por lo tanto la generación continua y totalmente reversible de radicales superóxido (Esquema 1)
puede ser alterada bajo ciertas condiciones experimentales, las cuales sean apropiadas para
favorecer la reacción de autodismutación, y por lo tanto que lleven a la reacción a través de una
ruta irreversible. Considerando esto último, otro de los objetivos del presente proyecto fue
evaluar el producto de oxidación del complejo Cu(I)-[GSH] 2 que se formaría y acumularía en
tales condiciones. Por lo tanto se estudió el efecto de la adición de interceptares de superóxido
(como SOD o Tempol) en soluciones que contienen el complejo Cu(I)-[GSH] 2 . Los resultados
muestran que: (/) la incubación del complejo Cu(I)-[GSH] 2 con Tempol lleva a una disminución
en los tioles titulables de dicha mezcla y a un incremento en la concentración de GSSG; (Ii) la
incubación del complejo Cu(I)-[GSH]2 con Tempol o SOD o a una temperatura de 37 0 c, lleva a
la aparición de una banda a 625 nm la cual es característica de un complejo Cu(II)-GSSG. (iii)
para la mezcla preparada en (II) espectros 'H-NMR y EPR son coincidentes con aquellos
obtenidos para un complejo preformado Cu(II)-GSSG, por lo tanto se postula a este complejo
como producto final de la reacción planteada en Esquema I.
La producción de radicales superóxido inducida por el complejo Cu(I)-[GSH] 2 se evaluó en
presencia de otros metales afines por GSH. Los resultados indican que entre todos los metales
evaluados, solo mercurio lleva a un aumento en la producción de radicales superóxidos y por
ende favorece las condiciones para la reacción de autodismutación de radicales superóxido.
202 20
2Cu' 6GSH
SOD
11202 1- 02
2Cu(1I)-complejo - - 2Cu(II)-[GSSG
-
GSSG f 2Cu(I)-[GSH2
20 2 202
Esquema 1
Y. INFORME DE EVALUACION DEL (DE LA) INVESTIGADOR(A) PATROCINANTE
NOMBRE: HERNAN SPEISKY COSOY.
La Dra. Aliaga se incorporó con rapidez y excelente habilidad al grupo de trabajo en diciembre de 2007.
Desde entonces, su inserción ha sido una continua e importante contribución científica para los otros
miembros, estudiantes de magíster y de doctorado. Durante estos 2 años, la Dra. Aliaga ha sabido realizar
sus compromisos en forma autónoma pero muy interactiva, y a su vez, sumar a la formación y al trabajo de
otros científicos en formación.
Durante el período a informar (Dic. -2007-Sep t. 2009), su trabajo se focalizó, inicialmente, en implementar un
amplio número de metodologías relevantes a la ejecución de los objetivos de su proyecto. Posteriormente, su
trabajo le permitió realizar un número sustancial de experimentos, lo que a su vez, le ha significado
comunicar en varias ocasiones sus resultados. En JuL-2008 presentó -en calidad de primera autora- en la
International Conference on Physical Organic Chemistry. ICPOC 08, celebrada en Santiago de Compostela,
España, un trabajo titulado "Kinetic Study of the generation of superoxide radicais during the reaction
between Cu(I)glutathione and molecular oxygen". En Sept.-2008, participó como co-autora de otro trabajo
en el Congreso de la European Society for Magnetic Resonance in Medicine and Biology (ESMRMB),
celebrado en Valencia, España, un trabajo titulado "Copper-Glutathione complexes: A new biological source
of superoxide radical".
Junto a lo descrito, la Dra. Aliaga presentó como autora principal, en Nov.-2008, con ocasión del congreso
TEMA-13 (Trace Elernents in Man and Animals), a celebrarse en Pucón, Chile, un trabajo titulado
"Formation of a Cu(ll)-GSSG complex during the removal of superoxide anions generated by the Cu(I)GSH]zcomplex". Junto a dicho trabajo, participó en el mismo evento como co-autora de otros 3 trabajos que
comprenden investigaciones que se enmarcan tanto en el proyecto de la Dra. Aliaga, como en el del
investigador que suscribe la presente.
Recientemente (Sept.-2009) la Dra. Aliaga presentó como autora principal, en el congreso: Free Radicais and
Antioxidants in Chile 2009, the VI meeting of the SFRM-South American Group, un trabajo titulado
"Cyclic voltammetric study on the formatiori of a Cu(ll)-GSSG complex during the removal of superoxide
anions generated by the Cu(I)-[GSH]2 complex.".
Como expresión concreta de su quehacer, la Dra. Aliaga publicó en 2009 un MS titulado "Generation of
superoxide radicals by copper—glutathione complexes: Redox-consequerices associated with their interaction
with reduced glutathione" (Anexo). Adicionalmente, esta pronta a enviar para su publicación en la revista:
New Journal of Chemistry el MS titulado "Generation of oxidizing species by the Cu(I)-glutathione
complex" (Anexo). Junto a dichos trabajos, la Dra. Aliaga esta actualmente redactando un trabajo adicional
en tomo al efecto de metales sobre la producción de radical superóxido y peróxido de hidrógeno, inducida
por el complejo Cu(1)-[GSH]2, para su futura publicación.
Finalmente, quisiera destacar que junto a su calidad científica, la Dra. Aliaga destaca por su alta calidad
humana. Ambas condiciones hacen deseable, para cualesquier laboratorio de investigación e institución
académica, conservar a la Dra. Aliaga como investigadora de planta. Sin lugar a dudas, su dificultad no
residirá en encontrar donde insertarse definitivamente sino en elegir donde proyectar su futuro académico.
Firma Investigador(a) Patrocinante
Fecha: 30 de Septiembre de 2009
13
PRODUCTOS
ARTÍCULOS
Para trabajos en Prensa! Aceptados/Enviados adjunte copia de carta de aceptación o de recepción.
Speisky, H.; Gómez, M.; Burgos-Bravo, 1*; López-Alarcón, C.; Jullian, C.; Olea-Azar. C.
Aliaga, ME,
Nombre Completo de la Revista : Bioorganic and Medicinal Chemistry
Generation of superoxide radicais by copper—glutathione complexes: Redox-consequences
Título (Idioma original) :
associated with their interaction with reduced glutathione.
ISI
Indexación:
ISSN:
2009
Año:
17
Vol.:
5
N°:
1803-1810
Páginas:
Estado de la publicación a la fecha : Publicada
Otras Fuentes de financiamiento, si las hay:
FONDECYT # 1070613
Autor (a)(es/as) :
si
BOMC_2009.pdf
Envía documento en papel :
Archivo Asociado al artículo :
ILI(lc
iVindex php/irivtstigadtr/I4 tí
iil
R1ccaig!I
OTRAS PUBLICACIONES
Sin información ingresada.
CONGRESOS
Autor (a)(es/as) :
Aliaga, M.; Burgos, F.; Gómez, M.; Olea-Azar, C. Jullian, C. and Speisky, H.
FORMATION OF A Cu(II)-GSSG COMPLEX DURING THE REMOVAL OF
Título (Idioma original):
SUPEROXIDE ANIONS GENJiRATED BY THE Cu(I)-[GS1-1I2 COMPLEX.
TEMA 13. Trace Elements in Man and Animals.
Nombre del Congreso:
País:
Ciudad :
Fecha Inicio :
Fecha Término :
Nombre Publicación:
Año:
Vol.:
N°:
Páginas
Envía documento en papel:
Archivo Asociado:
CHILE
Pucón
09/1 112008
13/11/2008
si
N°:
Autor (a)(es/as)
2
Speisky, H.; Gómez, M. Carrasco-Pozo, C.; Burgos-Bravo, F. and Aliaga, M.
Título (Idioma original)
RADICALS?.
Nombre del Congreso:
Cu(I)-GLUTATHIONE COMPLEX: A NEW BIOLOGICAL SOURCE OF SUPEROXIDE
País:
Ciudad:
Fecha Inicio:
Fecha Término:
Nombre Publicación:
CHILE
Pucón
09/11/2W8
13/11/2008
Año:
Vol.:
N°:
Páginas
Envía documento en papel:
Archivo Asociado:
N°:
Autor (a)(es/as) :
TEMA 13. Trace Elements in Man and Animals.
si
3
Aliaga, ME.; Zúñiga, MC.; Burgos-Bravo, F. and Speisky, H.
Título (Idioma original):
CYCLIC VOLTAMMETRIC STUDY ON THE FORMATION OF A Cu(II)-GSSG
COMPLEX DURING THE REMOVAL OF SUPEROXIDE ANIONS GENERATED BY THE Cu(1)-[GSHI2 COMPLEX.
Nombre del Congreso:
VI Meeting of SFRBM South American (Jroup.
País:
Ciudad:
Fecha Inicio :
Fecha Término:
Nombre Publicación:
CHILE
STGO
27/0912009
30/09/2009
Año:
Vol.:
Páginas:
Envía documento en papel : Archivo Asociado:
si
ANEXOS
N°:
Archivo Asociado :
Anexo sF ¡gura s_Proyecto_3080025 . pdf
hILI):/íe\alcyt Li mie\ L 'I/mforiiic Ltel1io!nde pIip/i
stkloI/I5 anex()s/deiealga/ 1
1 /3O8OO25/2OOY/47
N°:
2
Archivo Asociado :
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Archivo Asociado
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A continuación se detallan los anexos físicos/papel que no se incluyen en el informe en formato PDF.
1. Anexos Figuras de Resultados Obtenidos.
2. Presentaciones a Congresos
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COMIS6N NACIONAL DE INVIESTIGACIóN
A Y TCNOL GICA
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CON'IIRORANI'[ DU RL('Ii'CIÚN I)l INF()RN1l FINAl,
N° PROYECTO: 3080025
INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE: MARGARITA ELLY ALIAGA MIRANDA
RUT : 13.466.031-7
TÍTULO PROYECTO: KINETIC STUDY ON THE FORMATION OF SUPEROXIDE RADICALS IN A
COPPER-GLUTATHIONE SYSTEM AND ITS POSSIBLE AUTODISMUTATION REACTION,
DISCIPLINA PRINCIPAL: FiS ICO-QUIMICA
CÓDIGO DE TRANSACCIÓN: 25F2F1 F972A5236D5C885A4578F98E81)
FECHA DE RECEPCIÓN:
30109/2009
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