MANUAL DE PROCEDIMIENTOS 2014
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Manual de Procedimientos 11 1 CARATULA LOGO FUNDACIÓN SANTA FE DE BOGOTÁ LABORATORIO CLÍNICO MANUAL DE PROCEDIMIENTOS 2014 DEPARTAMENTO DE PATOLOGÍA Y LABORATORIOS LABORATORIO CLÍNICO MANUAL DE PROCEDIMIENTOS 2014 Departamento de Patología Y Laboratorios 2 Fundación Santa Fe de Bogotá Manual de Procedimientos FUNDACIÓN SANTA FE DE BOGOTÁ DEPARTAMENTO DE PATOLOGÍA Y LABORATORIOS MANUAL DE PROCEDIMIENTOS NHORA VILLEGAS DE MERINO M.D. Miembro emérito FSFB CUARTA EDICIÓN 2014 11 3 4 Fundación Santa Fe de Bogotá PERSONAL CIENTÍFICO MÉDICOS PATÓLOGOS DIANA MARÍA PALACIOS, MD Jefe Departamento de Patología y Laboratorios Fundación Santa Fe de Bogotá Profesora Departamento de Patología - Facultad de Medicina Universidad Nacional de Colombia ANA MARGARITA BALDIÓN, MD Patóloga Miembro Institucional Coordinadora de Calidad y Educación Fundación Santa Fe de Bogotá BACTERIÓLOGAS ANGÉLICA MARIA TRUJILLO ALVARADO CECILIA DEL SAGRADO HANABERGH AMORE CLARA LUZ RICO VILLEGAS CLAUDIA MARCELA PÉREZ RAMÍREZ GINA ELIZABETH CUÉLLAR ARÉVALO HIRLIS MARÍA ACEVEDO BARRIOS IVONNE JOHANA ROJAS FORERO LIDIA MARINA VEGA AMAYA MARÍA LUISA ESPINOSA DURÁN MARLLY MEDINA ARÉVALO ZANDRA DE LA ROSA NORIEGA Manual de Procedimientos 11 5 INTRODUCCIÓN El manual proporciona una guía para la utilización de los diferentes servicios que presta el laboratorio clínico de la Fundación Santa Fe de Bogotá. Está dirigido al personal médico y a los otros profesionales de la salud responsables de la solicitud de un examen de laboratorio, de la preparación de los pacientes, de la toma correcta de muestras de diferentes especímenes, de la realización de las diferentes pruebas en los laboratorios de diagnóstico y de su correcta aplicación e interpretación. Una solicitud médica para exámenes de laboratorio clínico a un paciente equivale a una interconsulta que desencadena una serie de mecanismos y procedimientos dentro del laboratorio para procesar una muestra, hacer un procedimiento y generar un reporte que servirá como ayuda en el diagnóstico y tratamiento de un paciente. En el manual se hace especial énfasis en las condiciones de la toma de la muestra pues éste acto inicial es fundamental para garantizar la calidad del resultado y es parte importante del proceso de Garantía de Calidad Total en que está comprometido el laboratorio clínico del Departamento de Patología y Laboratorios y la Fundación Santa Fe de Bogotá. Uno de los objetivos del programa interno de Garantía de Calidad que se lleva a cabo en el Departamento de Patología y Laboratorios es el de asegurar que el producto final que resulta de la solicitud médica, como lo es el resultado de la prueba de laboratorio, sea lo suficientemente confiable para tomar una adecuada conducta médica en el manejo del paciente. Esperamos que este manual sea permanentemente consultado por todos los profesionales de la salud responsables del cuidado de los pacientes para garantizar una óptima atención a los pacientes quienes, desde todo punto de vista, son la razón de ser de la Fundación Santa Fe de Bogotá. NHORA VILLEGAS DE MERINO M.D. Miembro Emérito Fundación Santa Fe de Bogotá 6 Fundación Santa Fe de Bogotá PROCEDIMIENTO DE VENOPUNCIÓN EN PACIENTES AMBULATORIOS Objetivo: Establecer los criterios para la recolección adecuada de especimenes sanguíneos por venopunción a pacientes ambulatorios. La correcta identificación del paciente y del espécimen es crucial. El flebotomista debe asegurarse que la muestra se recolecta del paciente, según lo consignado en el formato obtenido del computador por la recepcionista, y que el espécimen es marcado adecuadamente con la información correcta antes de realizar la venopunción. Procedimiento: 1. Llame al paciente por su nombre anteponiendo el título de señor o señora, preséntese y explíquele el procedimiento que le va a realizar. Identifique al paciente haciendo que reconfirme su nombre. 2. Utilizando el formato del computador que indica los exámenes a tomar, marque los tubos con los autoadhesivos del computador y si trae muestra de orina y coprológico o si los va a tomar en el laboratorio o en la casa marque inmediatamente los recipientes. Verifique que los exámenes anotados en el formato de solicitud producido por el sistema coinciden con los exámenes solicitados en la orden del médico y que han sido correctamente ingresados en el sistema por la recepcionista. Lávese las manos y colóquese guantes. 3. Inspeccione el área del brazo que planea usar para la flebotomía y asegúrese que ha escogido la mejor vena después de examinar ambos brazos. 4. Aplique el torniquete aproximadamente en la mitad del brazo, entre el codo y el hombro; si es posible haga que el paciente empuñe la mano. No permita que el paciente empuñe y desempuñe la mano continuamente, ya que esto causa cambios en algunas de las mediciones del laboratorio. 5. Nota: a) Nunca deje el torniquete por más de 1 minuto. Puede haber estasis localizada con filtración de sangre y hemoconcentración. Si el torniquete ha estado colocado más de 1 minuto para selección de vena, aflójelo y vuélvalo a colocar después de esperar 2 minutos. 6. Palpe la vena, aún cuando la vena se vea. Si no hay venas superficiales aparentes, puede hacer que la sangre llegue a la vena masajeando el antebrazo desde la muñeca hasta el codo; o puede hacer presión firmemente con el índice, esto causará que la vena se dilate. 7. Limpie el área de la siguiente manera; limpie con una gaza impregnado en alcohol isopropilico al 70% en forma descendente y de una sola pasada en tres zonas diferentes; una segunda gaza de limpieza en dirección izquierda a derecha de una sola pasada en tres zonas diferentes y una tercera gaza impregnada en alcohol del centro hacia la periferia, dejar que seque mínimo Manual de Procedimientos 11 7 30 segundos y procedes con la venopunción. 8. Coloque la aguja en el soporte plástico o capucha (vacutainer) 9. Inserte el tubo apropiado en el capuchón hasta el tope sin perforar el tubo. No empuje el tubo más allá del tope porque puede haber una pérdida prematura del vacío. 10. Asegúrese que el brazo del paciente está en una posición hacia abajo, para prevenir el reflujo. 11. Tome el brazo del paciente con firmeza. El pulgar de quien realiza el procedimiento debe usarse para estirar la piel. Esto asegura la vena. El pulgar debe estar de 2- 4 cm por debajo del sitio de venopunción. 12. Alinee la aguja con la vena, con el bisel hacia arriba a un ángulo aproximado de 15 grados y puncione la vena. No inserte la aguja completamente para evitar perforación de la pared posterior de la vena. 13. Puncione la piel con un movimiento suave y nítido y empuje el tubo para perforar la tapa. No dude. 14. Cuando la extracción ha comenzado, no cambie la posición del tubo hasta que se retire la aguja. Nota: no permita que la sangre del tubo toque la tapa. Un movimiento del fluido hacia arriba y hacia abajo en el tubo puede hacer que regrese sangre al sistema venoso del paciente y cause reacciones adversas en el paciente. 15. Llene el tubo hasta que se acabe el vacío y deje de salir sangre. Esto asegura que hay una cantidad adecuada de anticoagulante para la muestra de sangre. 16. Cuando cese el flujo de sangre, retire el tubo del capuchón. 17. Mezcle inmediatamente después de retirar cada tubo que contenga aditivos, invirtiendo suave y completamente el tubo de 5 a 10 veces. Nota: No lo haga vigorosamente, puede causar hemólisis. 18. Para obtener especimenes adicionales, inserte el tubo apropiado en el capuchón. Repita los pasos 14 a 17. 19. Libere el torniquete, antes de retirar la aguja de la vena, para evitar la formación de hematomas. 20. Coloque delicadamente gasa estéril sobre el sitio de venopunción y quite la aguja. Descarte la aguja en el contenedor apropiado que hay en cada cubículo. Nota: No descarte agujas en el basurero, ni intente retapar la aguja. 21. Ejerza presión ligera con la gasa estéril, manteniendo el brazo estirado. 22. Aplique un adhesivo o vendaje sobre el sitio de venopunción, después de asegurarse que no hay sangrado. 23. Nota: si el paciente continua sangrando: 24. a. Aplique presión al sitio con una gasa hasta que el sangrado pare. 25. b. Aplique un adhesivo o vendaje. 26. Dígale al paciente que se deje el adhesivo o vendaje por un mínimo de 15 minutos. 27. Asegúrese que ha marcado correctamente los tubos. 28. Quítese los guantes y cámbielos entre paciente y paciente desinfectándose antes las manos con alcohol glicerinado; entre cada 5 a 10 pacientes lavarse las manos con agua y jabón líquido. Ante la evidencia de cualquier suciedad visible o según se estime conveniente proceda a lavarse las manos nuevamente. 8 Fundación Santa Fe de Bogotá Imposibilidad para obtener muestra: Si no sale sangre al tubo: 1. Cambie la posición de la aguja. Si la aguja ha penetrado demasiado en la vena, retírela una pequeña distancia. Si no ha penetrado lo suficiente, aváncela una pequeña distancia en la vena. Rote la aguja media vuelta. 2. Utilice otro tubo. El tubo puede haber perdido vacío. 3. Afloje el torniquete. El torniquete puede haber estado muy apretado, parando el flujo sanguíneo. Reaplique el torniquete flojo. 4. No puncione dos veces en el mismo sitio pues es doloroso para el paciente. Una segunda venopunción debe realizarse en un sitio por debajo del primer sitio o en otra vena. 5. No realice más de 2 venopunciones. El número máximo de intentos es 2 por paciente. Solicite ayuda de la Supervisora o de otra bacterióloga para que ella continue con el procedimiento e intente una nueva venopunción Contraindicaciones para seleccionar el sitio: 1. Cicatrices extensas. Evite áreas de cicatrices o quemaduras. 2. Hematoma. No saque sangre de un área con hematoma. Si no hay otra vena disponible, tome sangre distal al sitio del hematoma. 3. Mastectomía. No saque sangre del lado donde se realizó una mastectomía. 4. Terapia intravenosa. No saque sangre del brazo que tenga una línea intravenosa. 5. Área afectada por patología. No saque sangre de áreas afectadas por patologías, por ejemplo: dermatitis, venas trombosadas, venas duras o esclerosadas, etc. 6. No saque sangre de áreas con injerto vascular, fístulas o cánulas. 7. No saque sangre de áreas de zonas con edema. Precauciones: Cada paciente debe asumirse como una fuente potencial de infección 1. Se deben usar guantes para realizar todos los procedimientos de flebotomía y deben cambiarse entre pacientes y cuando se rompan. 2. Realice una técnica aséptica para sacar sangre. 3. Lávese bien las manos antes de continuar con el siguiente paciente. 4. Si la parte exterior del tubo está contaminada con sangre, limpie el tubo con desinfectante antes de manipularlo. 5. Descarte las agujas y jeringas en los contenedores especiales que hay en cada cubículo. 6. Informe inmediatamente a la Administración del laboratorio y al Departamento de Salud Ocupacional llenando el formato correspondiente si sucede cualquier accidente con aguja o contaminación de la piel con sangre o excretas de un paciente. Manual de Procedimientos 11 9 GUÍAS ESPECÍFICAS Y PROCEDIMIENTOS PARA RECOLECCIÓN DE ESPECÍMENES VITALES PARA UN ANÁLISIS LIBRE DE ERRORES Fase preanalítica Esta es una de las fases más importantes del proceso de toma de muestras pues cualquier error en esta fase hace que el resultado también esté errado aun cuando la fase analítica haya sido perfectamente realizada. Orden de toma al recolectar múltiples tubos: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Tubo para hermocultivo (solamente utilizar con el equipo al lado Tubos sin aditivos o séricos, tapa roja Tubo con citrato de sodio ( tapa azul) Tubo con gel separador (tapa amarilla) Tubo con heparina de sodio o de litio (tapa verde) Tubo con EDTA (tapa lila) Tubo con oxalato de potasio (tapa gris) Este orden se explica porque: El tubo para cultivos debe tomarse primero para disminuir la posibilidad de contaminación bacteriana. • El tubo con heparina para medir potasio debe recolectarse antes del de EDTA, porque si el orden se invierte el potasio se eleva falsamente por la ruptura de los eritrocitos, liberando potasio al plasma. • El tubo de sangre para niveles férricos debe recolectarse antes que cualquier tubo con anticoagulante que contenga calcio (EDTA, citrato) para evitar niveles erróneos bajos de hierro. • Es importante recolectar el tubo de electrolitos antes del de EDTA para evitar resultados falsamente elevados. • El tubo de citrato para estudios de coagulación debe recolectarse antes del de heparina para evitar errores en los resultados. Si se deben tomar múltiples tubos, el tubo con aditivos debe ir de último para mezclarlo lo más pronto posible. Debe recalcarse que el anticoagulante presente en el tubo no debe mezclarse con la aguja al cambiar los tubos de recolección, ya que puede llevarse algo para el próximo tubo y causar resultados erróneos. Aplicación del torniquete: Muchos errores preanalíticos no detectados ocurren probablemente por aplicación prolongada del torniquete. Cuando se coloca un torniquete, la presión hace que el líquido y compuestos de bajo peso molecular pasen del espacio intravascular a los tejidos. Las moléculas y compuestos grandes se unen a proteínas y células sanguíneas (por ejemplo: colesterol, triglicéridos, albúmina, he- 10 Fundación Santa Fe de Bogotá moglobina) no pueden pasar por la pared capilar, incrementando así los niveles sanguíneos mientras el torniquete permanece apretado. También, hay paso de potasio de las células a la sangre cuando la presión del torniquete es muy alta o por demasiado tiempo. Se evitan errores en la elevación de analitos si se libera la presión del torniquete en 1 minuto. Cambios de postura: Algunas veces las guías para los cambios de postura no existen y deben implementarse por la administración del laboratorio. Estas guías proponen que los cambios de postura (sentado, acostado) pueden variar los resultados de algunos constituyentes químicos (colesterol, aldosterona). Es un factor importante al comparar los resultados de un paciente cuando estaba hospitalizado y en consulta externa para diagnóstico y tratamiento. Especimenes hemolizados: La hemólisis causa elevación de muchos analitos, incluyendo potasio, magnesio, fósforo, LDH y amonio. Se reconoce la hemólisis usualmente por apariencia roja del suero o plasma causada por liberación de hemoglobina por los eritrocitos. Sin embargo, la hemólisis no siempre se detecta, si se liberan bajas concentraciones de hemoglobina invisibles a simple vista. Por lo tanto todos los pasos deben seguirse para evitar errores. Causas de hemólisis que deben descartarse por quien recolecta el espécimen • Cantidad de sangre insuficiente para el aditivo en el tubo, resultando en hemólisis. • Palpación fuerte de la vena al recolectar la muestra puede llevar a hemólisis y/o a la formación de hematoma. • Sangre recolectada con catéteres pequeños (20, 22, 24) puede incrementar la presencia de hemólisis que la recolectada con un sistema de evacuación al vacío. • En la punción digital o del talón, “ordeñar” el sitio para obtener la muestra puede causar hemólisis. • Sangre recolectada de una vena que tiene hematoma en otro sitio, puede tener células hemolizadas. • Agitación vigorosa del tubo en lugar de una inversión suave y repetida puede causar hemólisis. Cronobiología, tiempo de recolección: La cronobiología es la estructura del tiempo de los organismos vivientes. Para humanos, los cambios del biorritmo ocurren en un periodo de 24 horas. Hay fluctuaciones del nivel de analitos debido a estos cambios. La mayoría de valores normales de analitos se han determinado en el estado basal, temprano en la mañana, 8 a 12 horas después de la última ingesta de comida. Por lo tanto, Manual de Procedimientos 11 11 si es posible, se deben recolectar temprano en la mañana, preferiblemente en ayuno, evitando las alteraciones por la ingesta de comida (Glucosa, triglicéridos). Es importante que la bacterióloga le dé instrucciones al paciente, enumerando las restricciones clara y detalladamente. Se debe asegurar que el paciente entienda que ayuno se refiere a abstinencia de comida y no de agua. La abstinencia de agua puede llevar a deshidratación que alterará falsamente el nivel de analitos sanguíneos. El paciente no debe tomar café o té, aun sin azúcar o leche, o fumar ya que algunos analitos pueden alterarse. Además de las instrucciones escritas se deben dar instrucciones verbales, si es posible, para aclarar y enfatizar la importancia del ayuno para resultados exactos de las pruebas. Si se recolecta muestra después de un ayuno mayor a 14 horas, las pruebas también pueden estar falsamente alteradas. En el monitoreo de drogas terapéuticas, se debe preguntar al paciente la hora de la toma de la droga para determinar si la muestra se está tomando en el pico o en el valle después de la administración de la droga. Sinembargo, el tiempo de recolección óptimo varía con la droga, la dosis y la vía de administración (oral, IV) usada. Ejercicio: El ejercicio moderado a vigoroso puede cambiar los resultados. La magnitud del cambio depende del estado de entrenamiento individual, de la masa muscular, de las influencias ambientales durante el ejercicio que alteran los niveles de electrolitos y de la duración del ejercicio. Los siguientes analitos sanguíneos cambiarán sus niveles por el ejercicio: creatinafosfoquinasa, ácido úrico, deshidrogenasa láctica, cortisol, ACTH y creatinina. Se debe interrogar al paciente previo a la recolección si ha hecho ejercicio vigoroso. Si lo ha hecho, se debe anotar esta información en la orden o en el computador. Se recomienda evitar regímenes de ejercicio irregular (maratón, competencia de 50 millas en bicicleta) previo a la recolección de la muestra ya que los resultados estarán seguramente alterados. Limpieza del sitio de recolección: En todos los tipos de procedimiento para recolección sanguínea es imperativo limpiar adecuadamente el sitio con un antiséptico previo a la recolección. Usar alcohol al 70% y dejar secar por 30-60 segundos porque el alcohol puede interferir con los resultados y el secado crea una barrera de protección contra la contaminación bacteriana. El grupo de recolección debe conocer los errores preanalíticos que ocurrirán si se usa isodine, entre ellos, elevación del fosfato, ácido úrico y potasio. El isodine se usa principalmente para recolección de especimenes para hemocultivo o para gases arteriales. 12 Fundación Santa Fe de Bogotá Mastectomía: No solamente pueden ocurrir errores preanalíticos, sino la salud del paciente puede estar en riesgo al tomarse la muestra del lado de la mastectomía. Por la linfoestásis debida al vaciamiento ganglionar axilar hay un riesgo potencial de infección y alteraciones en los líquidos y analitos resultante de la linfoestásis. Terapia y líquidos intravenosos Si el paciente tiene líquidos intravenosos no se debe tomar la muestra, de ese brazo, porque se puede contaminar con las drogas y fluidos, llevando a errores preanalíticos. Si no es posible tomar la muestra del otro brazo, entonces se debe realizar la venopunción distal al sitio de línea IV y si es posible en otra vena y quien recolecta la muestra debe hacer una anotación para que este factor sea tenido en cuenta al analizar el resultado. Si la muestra es para PT o PTT no se debe tomar del catéter venoso central que ha sido heparinizado o por donde se infunde heparina. Si no es posible de otro sitio, la sangre se debe recolectar del catéter heparinizado después de tomar 10 ml de sangre en un tubo para otras pruebas o descartarlo. Después de descartar los 10 mL, se debe cambiar la jeringa si no se ha tomado con vacutainer. Manual de Procedimientos 11 13 Índice FUNDACIÓN SANTA FE DE BOGOTÁ....................................................................................... 3 PERSONAL CIENTÍFICO........................................................................................................... 4 INTRODUCCIÓN..................................................................................................................... 5 PROCEDIMIENTO DE VENOPUNCIÓN EN PACIENTES AMBULATORIOS.................................. 6 GUÍAS ESPECÍFICAS Y PROCEDIMIENTOS PARA RECOLECCIÓN DE ESPECÍMENES VITALES PARA UN ANÁLISIS LIBRE DE ERRORES.................................................................................. 9 ANÁLISIS QUE SE PROCESAN EN EL LABORATORIO CLÍNICO............................................... 30 5-NUCLEOTIDASA •Código 903432............................................. 31 11-DESOXICORTISOL •Código 904810.............................................. 31 17-CETOSTEROIDES •Código 904804............................................. 32 17-HIDROXICORTICOSTEROIDES (17OHCS) •Código 904811.............................................. 33 17-HIDROXIPREGNENOLONA •Código 841450F............................................ 33 17-HIDROXIPROGESTERONA ALFA (17OHP) •Código 904509............................................. 34 17-HIDROXIPROGESTERONA ALFA, PRE Y POST ACTH •Código 904402............................................. 34 21-HIDROXILASA, ANTICUERPOS •Código 862742F............................................ 35 A ACETAMINOFÉN •Código 905702............................................. 37 ACETILCOLINA RECEPTORES •Código 906401............................................. 38 ÁCIDO 5-HIDROXIINDOL- ACÉTICO (5HIA) •Código 903103.............................................. 39 ÁCIDO CÍTRICO URINARIO •Código 903102.............................................. 40 ÁCIDO DELTA AMINOLEVULINICO (ALA) •Código 903104.............................................. 40 ÁCIDO FÓLICO (FOLATOS) EN SANGRE •Código 903105...............................................41 ÁCIDO FÓLICO EN ERITROCITOS •Código 903106 ..............................................41 ÁCIDO HIALURÓNICO •Código 862620F............................................ 42 ÁCIDO HOMOVANÍLICO (HVA) •Código 90310................................................ 43 ÁCIDO LÁCTICO (L-LACTATO) •Código 903111.............................................. 44 ÁCIDO METILMALÓNICO •Código 862608F............................................ 46 ÁCIDO MICOFENÓLICO •Código 862711F ........................................... 47 ÁCIDO ORÓTICO •Código 908002............................................. 47 ÁCIDO PIRÚVICO •Código 903112.............................................. 48 ÁCIDO ÚRICO •Código 903801............................................. 49 ÁCIDO ÚRICO EN ORINA DE 24 H •Código 903802............................................. 49 ÁCIDO ÚRICO EN ORINA (MICCIÓN SIMPLE) •Código 903802-2.......................................... 49 ÁCIDO VALPROICO •Código 905201............................................ 50 ÁCIDO VALPROICO LIBRE •Código 862679F............................................ 50 ÁCIDO VANILMANDELICO (VMA) •Código 903115...............................................51 ÁCIDOS BILIARES TOTALES •Código 862651F............................................ 53 ÁCIDO GRASOS LIBRES •Código 862654F............................................ 53 ÁCIDOS ORGÁNICOS DE CADENA CORTA •Código 908001............................................. 54 ÁCIDOS ORGÁNICOS DE CADENA CORTA EN ORINA •Código 908001-2.......................................... 54 ÁCIDOS ORGÁNICOS DE CADENA CORTA EN SUERO •Código 908001-1.......................................... 54 ACILCARNITINA •Código 862667F............................................ 55 ANTICUERPOS ANTI COXIELLA BURNETTI •Código 862566F............................................ 56 ACTINOMYCES, CULTIVO •Código 901201.............................................. 56 ACTIVIDAD ADAMTS 13 •Código 862772F............................................ 57 ADENOSIN DEAMINASA (ADA) •Código 903401............................................ 58 ADENOVIRUS ANTICUERPOS TOTALES •Código 862576F............................................ 59 14 Fundación Santa Fe de Bogotá ADENOVIRUS, ANTÍGENO •Código 906301............................................. 59 ADENOVIRUS, EN LCR •Código 862699F............................................ 59 ADENOVIRUS, PCR •Código 862660F ........................................... 59 ADENOVIRUS, ANTICUERPOS IgG •Código 906201 ............................................ 59 ADENOVIRUS, ANTICUERPOS IgM •Código 906203 ........................................... 59 ADHERENCIA DE NEUTRÓFILOS •Código 864772F............................................ 60 ADIPONECTINA •Código 904704F.............................................61 ADRENAL AUTOANTICUERPOS •Código 906405..............................................61 AGLUTININAS FRÍAS (Crioaglutininas) •Código 906901 ............................................ 62 AGREGACIÓN PLAQUETARIA (ADP) •Código 902002............................................. 63 CURVA •Código 902003............................................. 63 ALANINO AMINO TRANSFERASA (ALT/ SGPT) •Código 903866............................................. 64 ASPARTATO AMINO TRANSFERASA (AST/ SGOT) •Código 903867.............................................. 64 ALBÚMINA •Código 903803............................................ 65 ALBÚMINA EN ORINA DE 24 H •Código 903804............................................. 65 ALCOHOL ETÍLICO (ETANOL) •Código 905706............................................. 66 ALCOHOL METÍLICO (Metanol) •Código 905707............................................. 67 ALDOLASA •Código 903402............................................. 68 ALDOSTERONA •Código 904801............................................. 69 ALDOSTERONA EN ORINA •Código 904802............................................. 69 ALERGÉNOS PANEL •Código 862591F............................................ 71 ALFA 1 ANTITRIPSINA •Código 903406............................................. 71 ALFA -1- ANTITRIPSINA FENOTIPO R PLUS •Código.......................................................... 72 ALFA-1-GLICOPROTEÍNA ÁCIDA (Oromucoide) •Código 903407.............................................. 73 ALFA-2-ANTIPLASMINA •Código 903408..............................................74 ALFA 2 MACROGLOBULINA •Código 903001..............................................74 ALFA-FETOPROTEÍNA (AFP) •Código 906602............................................. 75 ALFA-FETOPROTEÍNA EN LÍQUIDO AMNIOTICO • Código 903002............................................ 75 ALFA-FETOPROTEÍNA (AFP) “Triple Screen” •Código 823415F............................................ 75 ALFA FETOPROTEÍNA (AFP) EN LCR •Código 903002-2.......................................... 75 ALFA-GALACTOSIDASA EN LEUCOCITOS •Código 862750F............................................ 77 ALFA GLUCOSIDASA EN LEUCOCITOS •Código 862619F............................................ 78 ALFA TALASEMIA GENOTIPO •Código 862696F............................................ 78 ALUMINIO •Código 862568F............................................ 79 AMIKACINA, SEMICUANTITATIVA •Código 905403 ............................................ 80 AMILASA SÉRICA •Código 903805............................................. 80 AMILASA URINARIA 24 horas •Código 903806............................................. 81 AMILASA ORINA micción simple •Código 903806-2.......................................... 81 AMILASA ISOENZIMAS •Código 862657F............................................ 82 AMINOÁCIDOS CUANTITATIVOS (plasma, orina) •Código 862707F/862708F............................. 83 AMIODARONA •Código 802991F............................................ 84 AMONIO (AMONÍACO) •Código 903602}............................................ 84 ANDROSTENEDIONA •Código 904501............................................. 85 ANDROSTERONA •Código 862682F............................................ 86 ANFETAMINAS Y METANFETAMINAS •Código 905302............................................. 87 ANGIOTENSINA II (AgII) •Código 904001............................................. 87 ANTICUERPOS A ANTÍGENOS CITOPLASMÁTICOS DEL NEUTRÓFILO (ANCAs) •Código 906415............................................. 88 ANTI CV2/CRMPS •Código 862555F........................................... 89 ANTICUERPOS A GANGLIÓSIDO ASIALO GQ1B •Código 835202F ......................................... 89 ANTICUERPOS A GANGLIÓSIDO ASIALO GM1 •Código 835201F............................................ 90 Manual de Procedimientos ANTI MA 1-2 •Código 862554F............................................ 91 ANTI RI (NEURONAL NUCLEAR RI) •Código 862553F............................................ 91 ANTI ÁCIDO FOSFATÍDICO IgG/IgM/IgA •Código 861470F............................................ 91 ANTI ARBOVIRUS IgM •Código 866520F............................................ 92 ANTI BETA 2 GLICOPROTEÍNA 1 IgM •Código 863127F............................................ 93 ANTICOAGULANTE CIRCULANTE (LÚPICO) •Código 902004............................................. 93 ANTICOAGULANTE LÚPICO PRUEBA CONFIRMATORIA •Código 902005............................................. 93 ANTICUERPOS ANTICOLÁGENO TIPO II •Código 863176F............................................ 95 ANTICUERPO ANTIENDOMISIAL IgA (EMA) •Código 883470F .......................................... 95 ANTICUERPO ANTIENDOMISIAL IgG •Código 862595F ........................................... 95 ANTICUERPO ANTI-EPIDÉRMICO •Código 883471F............................................ 96 ANTICUERPOS ANTINEURONAL NUCLEAR IgG TIPO I (HU- ANNA-1) •Código 862552F............................................ 97 ANTICUERPO ANTIRIBOSOMAL P •Código 863185F............................................ 98 ANTICUERPOS A PARVOVIRUS B19 IgG/ IgM •Código 867470F ........................................... 98 ANTICUERPOS A ENTAMOEBA HISTOLYTICA •Código 901320 ............................................. 99 ANTICUERPOS ANTICITRULINA IgG (PÉPTIDO CÍCLICO CITRULINADO –CCP3) •Código 862150F............................................ 99 ANTICUERPOS IgA A CARDIOLIPINA (Antifosfolípidos) •Código 906409F.......................................... 100 ANTICUERPOS ANTI FOSFATIDILCOLINA IgG, IgM, IgA •Código 862755F...........................................101 ANTICUERPOS A GLIADINA IgA/IgG/IgM •Código 862596F...........................................101 ANTICUERPOS ANTI HISTONA •Código 906424............................................ 102 ANTICUERPOS ANTI MUSK (TIROSINA KINASA MÚSCULO ESPECÍFICA) •Código 862558F.......................................... 103 11 15 ANTICUERPOS ANTINEUTRÓFILO POR CITOMETRIA DE FLUJO •Código 862745F.......................................... 104 ANTICUERPOS ANTIRECEPTORES TSH •Código 862633F.......................................... 104 ANTICUERPOS ANTI-RICKETTSIAS •Código 866092F.......................................... 104 ANTICUERPOS ANTI SACCHAROMYCES CEREVISIAE IgG, IgA (ASCAS) •Código 867201F.......................................... 105 ANTICUERPOS HETERÓFILOS •Código 906903........................................... 106 ANTICUERPOS IgG ANTI F-ACTINA •Código 866093F.......................................... 106 ANTICUERPOS IRREGULARES, DETECCIÓN •Código 911003............................................107 ANTICUERPOS A ISLET CELL (ISLOTES DE PÁNCREAS) •Código 863411F...........................................107 ANTICUERPOS LKM Tipo 1(Microsomales hígado y riñón) •Código 862580F.......................................... 108 ANTICUERPOS A LA/SSB ANTÍGENOS NUCLEARES EXTRACTABLES (Anti-ENAs) •Còdigo 906430........................................... 109 ANTICUERPOS A RNP •Código 906453........................................... 109 ANTICUERPOS A RO/SSA •Código 906454........................................... 109 ANTICUERPOS A Sm •Código 906456........................................... 109 ANTICUERPOS IgA A RETICULINA •Código 862530F...........................................110 ANTICUERPOS A RETICULINA TOTALES •Código 862531F...........................................110 ANTICUERPOS A RECEPTORES DE TIROTROPINA •Código 906462F........................................... 111 ANTIDEPRESIVOS TRICÍCLICOS •Código 905304............................................ 111 ANTICUERPOS A ECHOVIRUS 4, 7, 9, 11, 30 •Código 866581F .........................................112 ANTIESTREPTOLISINAS O (ASO-O) •Código 906002............................................113 ANTÍGENO CARCINOEMBRIONARIO (ACE, CEA) •Código 906603............................................114 ANTÍGENO DE CÁNCER DE MAMA 15-3 (CA 15-3) •Código 906604............................................115 ANTÍGENO DE CÁNCER DE OVARIO 125 (CA-125) •Código 906605............................................116 16 Fundación Santa Fe de Bogotá ANTÍGENO DE CÁNCER 19-9 (CA 19-9) •Código 906606............................................ 117 ANTÍGENO DE CÁNCER (CA 27-29) •Código 863161F .....................................118 ANTÍGENO DE CÁNCER CA 72-4 •Código 863162F...........................................119 ANTÍGENO ESPECÍFICO DE PRÓSTATA (APE, PSA) • Código 906610............................................119 ANTÍGENO ESPECÍFICO DE PRÓSTATA FRACCIÓN LIBRE (PSA libre) •Código 906611.............................................119 ANTÍGENO GALACTOMANO DE ASPERGILLUS •Código 906120F...........................................121 ANTÍGENO P1 •Código 862720F...........................................122 ANTÍGENO SOLUBLE DE HÍGADO (SLA/ LP) •Código 862578F...........................................123 ANTÍGENO TUMORAL DE VEJIGA •Código 906618.............................................124 ANTÍGENOS BACTERIANOS •Código 906203............................................124 ANTÍGENOS FEBRILES (Aglutininas febriles, seroaglutinaciones) •Código 906304............................................125 ANTI-HUMANO ANTI-RATÓN (HAMA) •Código 863195F...........................................126 ANTI-LEPTOSPIRA IgG, IgM •Código 867200F...........................................126 ANTITROMBINA III (AIII) •Código 902007............................................127 APOLIPOPROTEÍNA A1/B (APO A1/APO B) •Código 903413/903414................................128 APO E GENOTIPO •Código 838930F...........................................129 ARBOVIRUS, ANTÍGENO •Código 906305............................................129 ARILSULFATASA B, EN ORINA •Código 908501............................................130 ARILSULFATASA A, EN LEUCOCITOS •Código 908702............................................130 ARSÉNICO EN ORINA O SANGRE •Código 905709............................................130 ARSÉNICO EN SANGRE TOTAL •Código 905709-1..........................................131 ARSÉNICO ORINA DE 24 HORAS •Código 905709-2..........................................131 AZÚCARES REDUCTORES EN HECES •Código 907001.............................................132 AZÚCARES REDUCTORES EN ORINA •Código 907101.............................................132 B BACILOSCOPIA PARA MICOBACTERIAS •Código 901101F...........................................133 BARBITURATOS •Código 905204/905203...............................134 BARTONELLA henselae IgG, IgM •Código 866090F...........................................135 BARTONELLA quintana IgG, IgM •Código 863175F...........................................135 BENZODIACEPINAS SEMICUANTITATIVA •Código 905306............................................136 BENZODIACEPINAS CUANTITATIVA •Código 905305............................................136 BETA-2 GLICOPROTEÍNA I IgG/IgM/IgA •Código 862588F/906801.............................137 b2-MICROGLOBULINA (b2-M) •Código 906620............................................137 BETA-HIDROXIBUTIRATO (BHB) •Código 862716F...........................................138 CUERPOS CETÓNICOS •Código 903826/903827...............................138 BETA-GALACTOSIDASA •Código 862563F...........................................139 BETA-GLUCOSIDASA (BETAGLUCOCEREBROSIDASA BGC) •Código 862612F...........................................140 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA •Código 903809............................................140 BIOTINA (VITAMINA B7) •Código 862751F...........................................141 BNP-PÉPTIDO NATRIURÉTICO TIPO B •Código 903439F...........................................142 BORDETELLA PERTUSIS, ANTICUERPOS IgA, IgG •Código 862678F...........................................143 BORDETELLA PERTUSIS, CULTIVO •Código 901202.............................................143 BORRELIA BURGDORFERI ANTICUERPOS IgG/IgM •Código 906008/09...................................... 144 BORRELIA BURGDORFERI ANTICUERPOS IgG, IgM (WB) •Código 862754F.......................................... 144 BORRELIA SPP POR PCR •Código 862782F.......................................... 144 BRUCELLA ABORTUS ANTICUERPOS IgG, IgA, IgM •Código 862592F...........................................145 C C-TELOPÉPTIDOS (CTX) •Código 862594F...........................................147 N-TELOPÉPTIDOS (NTX) C1Q INMUNOCOMPLEJOS •Código 862717F...........................................148 Manual de Procedimientos C1Q AUTOANTICUERPOS •Código 862687F...........................................148 CADASIL, EVALUACIÓN •Código 862688F...........................................149 CAFEÍNA, CUANTITATIVA •Código 905714............................................149 CALCIO IONIZADO (CaI) •Código 903604............................................150 CALCIO SÉRICO TOTAL •Código 903810.............................................150 CALCIO URINARIO •Código 903811.............................................151 CALCITONINA •Código 906621............................................152 CÁLCULO BILIAR •Código 903004............................................153 CÁLCULO RENAL •Código 903005............................................153 CALPROTECTINA •Código 862784F...........................................154 CÁNDIDA ALBICANS, ANTICUERPOS IgA •Código 906104.............................................155 CÁNDIDA ALBICANS, ANTICUERPOS IgM •Código 906106 ............................................155 CANABINOIDES (Marihuana) •Código 9057179...........................................156 CAPACIDAD DE COMBINACIÓN (TIBC) •Código 903812.............................................156 HIERRO SÉRICO •Código 903846 ...........................................157 CARBAMAZEPINA •Código 905207............................................158 CARBOXIHEMOGLOBINA •Código 905208F...........................................158 CARBOXIHEMOGLOBINA •Código 905209F...........................................159 CARDIOLIPINA, ANTICUERPOS IgG, IgA, IgM (Anti fosfolípidos) •Código 906408............................................159 CARNITINA TOTAL •Código 821300F.......................................... 160 CAROTENOS •Código 903006............................................161 CATECOLAMINAS FRACCIONADAS EN PLASMA •Código 903008........................................... 162 CATECOLAMINAS FRACCIONADAS EN ORINA DE 24 H •Código 903007........................................... 162 CATECOLAMINAS TOTALES EN ORINA DE 24 H •Código 903009........................................... 162 CATECOLAMINAS TOTALES EN PLASMA •Código 903010............................................ 162 11 17 CÉLULAS DE PURKINJE (YO) •Código 906410F.......................................... 164 CÉLULAS LE (Lupus Eritematoso) •Código 902101............................................ 165 CÉLULAS PARIETALES, ANTICUERPOS •Código 906411............................................ 165 CEMENTO INTERCELULAR, ANTICUERPOS •Código 906412 .......................................... 166 CENTRÓMERO, ANTICUERPOS •Código 906413.............................................167 CERULOPLASMINA •Código 903416............................................ 168 CHARCOT MARIE TOOTH •Código 862655F.......................................... 168 CHLAMYDIA PSITTACI IgG, IgM, ANTICUERPOS •Código 862666F.......................................... 169 CHLAMYDIA TRACHOMATIS Y PNEUMONIAE, IgG, IgG, IgM •Código 866322F.......................................... 169 CHLAMYDIA TRACHOMATIS, ANTÍGENO •Código 906307........................................... 169 CICLOSPORINA •Código 905502............................................171 CISTICERCO, ANTICUERPOS IgG •Código 906107.............................................171 CISTICERCO, ANTICUERPOS TOTALES •Código 906109.............................................172 CISTINA EN ORINA •Código 862756F...........................................172 CISTINA, CUANTITATIVA •Código 908107.............................................172 CITOMEGALOVIRUS, ANTICUERPOS IgG/ IgM •Código 906205/906206...............................173 CITOMEGALOVIRUS, ANTICUERPOS IgG/ IgM LCR •Código 866450F...........................................173 CITOMEGALOVIRUS AVIDEZ •Código 862760F...........................................173 CITOMEGALOVIRUS, CARGA VIRAL •Código 906804............................................173 CLONAZEPAM (RIVOTRIL®) •Código 862714F...........................................175 CLORO (CLORURO) •Código 903813.............................................176 CLORO (CLORURO) EN ORINA DE 24 H •Código 903814.............................................176 CLOSTRIDIUM, TOXINAS A/B •Código 901401.............................................177 CLOZAPINA Y NORCLOZAPINA •Código 862686F...........................................177 COBRE (suero y orina) •Código 862753F...........................................178 18 Fundación Santa Fe de Bogotá COCAÍNA •Código 905725............................................179 COCCIDIOIDES ANTICUERPOS IgG/IgM •Códigos 862691F/862690F......................... 180 COFACTOR DE RISTOCETINA •Código 841401F.......................................... 180 COLESTEROL TOTAL •Código 903818.............................................181 COLESTEROL ALTA Y BAJA DENSIDAD (AD/ BD) •Código 903818.............................................181 COLIGLICINA •Código 903418............................................ 183 COLINESTERASA ERITROCITARIA •Código 903419............................................ 183 COLINESTERASA SÉRICA •Código 903420........................................... 183 COLORACIÓN DE GRAM •Código 901107............................................ 184 COLORACIÓN TINTA CHINA •Código 901109............................................ 185 COLORACIÓN PARA HEMOPARÁSITOS •Código 902215/902214............................... 186 CONCENTRADO DE PLAQUETAS POR PLAQUETOFÉRESIS •Código 911201.............................................187 CONCENTRADO DE PLAQUETAS IRRADIADAS •Código 911104.............................................187 CONCENTRADO DE PLAQUETAS LEUCORREDUCIDAS •Código 911103.............................................187 COMPLEJOS INMUNES CIRCULANTES (CIC) •Código 906805........................................... 188 COMPLEMENTO C1Q •Código 906806........................................... 189 COMPLEMENTO C2 •Código 862617F.......................................... 189 COMPLEMENTO HEMOLÍTICO TOTAL CH50 •Código 906904............................................190 COMPLEMENTO C3 •Código 906906............................................191 COMPLEMENTO C4 •Còdigo 906908............................................191 COMPLEMENTO SÉRICO C3C-2 •Código.........................................................192 COMPLEMENTO SÉRICO C5 CUANTITATIVO •Código 906907F...........................................192 COOMBS DIRECTO / INDIRECTO •Código 911007/902203................................193 COPROLÓGICO •Código 907002............................................194 COPROSCÓPICO •Código 907004............................................194 COPROCULTIVO •Código 901206.............................................194 CORTISOL Y CORTISOL AM/PM •Código 904805/904806...............................196 CORTISOL LIBRE EN ORINA DE 24 H •Código 904807............................................196 CORTISOL EN ORINA DE 24 HORAS •Código 862729F...........................................196 CORTISOL EN SALIVA •Código 862733F...........................................196 CORTISONA •Código 862747F...........................................198 COXSACKIE A, ANTICUERPOS •Código 862725F...........................................199 COXSACKIE A LCR •Código 862700F/.........................................199 COXSACKIE A ANTÍGENO •Código 906310.............................................199 COXSACKIE B, ANTICUERPOS •Códigos 862726F.........................................199 COXSACKIE B LCR •Código 862701F...........................................199 COXSACKIE B VIRUS, SEROTIPOS •Código 862586............................................199 COXSACKIE B, ANTÍGENO POR NEUTRALIZACIÓN CREATINFOSFOQUINASA (CPK/CK-MB) •Código 903821/903819.............................. 200 CK ISOENZIMAS •Código 825501F.......................................... 200 CREATININA (Suero, orina) •Código 903825........................................... 202 CREATININA DEPURACION •Código 903823........................................... 202 CREUTZFELDT- JAKOB PROTEÍNA 14-3-3 •Código 862621F.......................................... 203 CRIOAGLUTININAS (Ver aglutininas frías) CRIOGLOBULINAS •Código 906909........................................... 204 CROMATINA ANTICUERPOS •Código 862646F.......................................... 205 CROMOGRANINA A •Código 906202F.......................................... 205 CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS, CULTIVO •Código 901208............................................ 206 CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS, ANTÍGENO •Código 906112............................................ 206 CRYPTOSPORIDIUM, ANTÍGENO •Código 862676F.......................................... 207 CRYPTOSPORIDIUM PRUEBA RÁPIDA •Código 901102F.......................................... 207 Manual de Procedimientos CUADRO HEMÁTICO •Código........................................................ 208 CUERPOS CETONICOS O CETONAS EN ORINA •Código 903826........................................... 208 CUERPOS CETONICOS O CETONAS EN SANGRE •Código 903827........................................... 208 CURVA DE GLICEMIA (Ver glucosa) •Código........................................................ 208 D D-XILOSA •Código 903423-1........................................ 209 D-XILOSA ORINA •Código 903423-2 ....................................... 209 DEFICIENCIA CARBOHIDRATO TRANSFERRINA (CDT) •Código 906209F...........................................210 DEHIDROEPINANDROSTERONA (DHEA) •Código 904808............................................211 DEHIDROEPIANDROSTERONA SULFATO (DHEA-S04) •Código 904809............................................211 DENGUE VIRUS ANTICUERPOS (IgG/IgM) •Código 906207/906208...............................213 DENGUE, ANTÍGENO •Código 862582F...........................................213 DESHIDROGENASA LACTICA (LDH) •Código 903828............................................214 DESOXIPIRIDINOLINA (DPD) •Código 903011.............................................215 DIGOXINA •Código 905605............................................216 DIHIDROTESTOSTERONA (DHT) •Código 862628F...........................................216 DÍMERO-D •Código 902104.............................................217 ds-DNA (Anti-dsDNA) ANTICUERPOS IgG •Código 906418.............................................218 E ECHINOCOCCUS, ANTICUERPOS •Código 906110.............................................219 ECHOVIRUS 4, 9, 11, 30, ANTICUERPOS •Código 862702F .........................................219 ELASTASA 1 PANCREATICA •Código 862712F.......................................... 220 ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINAS A, S, C, F y variantes •Código 906809........................................... 221 ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEÍNAS •Código 906810............................................ 222 11 19 ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS (EFP) suero •Código 906812............................................ 223 ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS, orina •Código 906811............................................ 223 ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS, LCR •Código 826641F.......................................... 224 ENOLASA NEUROESPECÍFICA (NSE) •Código 906622........................................... 225 ENTAMOEBA HISTOLYTICA, ANTICUERPOS •Código 906113 ........................................... 226 ENTEROVIRUS, ANTICUERPOS •Código 906210............................................ 227 ENZIMA CONVERTIDORA DE ANGIOTENSINA (ACE) •Código 904002/862559F............................ 227 EPSTEIN-BARR ANTICUERPOS (IgG/IgM) •Códigos 906212/906216............................. 229 EPSTEIN-BARR, ANTÍGENO NUCLEAR IgG/ IgM •Códigos 862786F/862787F......................... 229 EPSTEIN-BARR, CARGA VIRAL •Código 862668F.......................................... 229 ERITROPOYETINA (EPO) •Código 902106 ........................................... 230 ESPERMATOZOIDES, ANTICUERPOS •Código 906420........................................... 231 ESPERMOGRAMA BÁSICO •Código 907201............................................ 232 BIOQUÍMICA SEMINAL •Código 903013............................................ 232 ESTRADIOL (E2) •Código 904503........................................... 234 ESTRIOL (E3) •Código 904504 .......................................... 234 ESTRIOL LIBRE •Código 904505........................................... 235 ESTRONA •Código 904507........................................... 235 EVEROLIMUS •Código 862565F.......................................... 236 F FACTOR 23 DE CRECIMIENTO DE FIBROBLASTOS (FGF23) •Código 862749F.......................................... 238 FACTOR ALFA DE NECROSIS TUMORAL •Código 906623........................................... 239 FACTOR PLAQUETARIO III •Código 902015............................................ 239 FACTOR INTRINSECO, ANTICUERPOS •Código 906813............................................ 240 FACTOR V •Código 902016............................................ 240 20 Fundación Santa Fe de Bogotá FACTOR VII •Código 902017 ............................................241 FACTOR VIII (VIII:C) •Código 902018............................................ 242 FACTOR IX •Código 902014............................................ 243 FACTOR X •Código 902020........................................... 244 FACTOR XI •CUPS 902021............................................... 245 FACTOR XII •CUPS 902022............................................... 246 FACTOR XIII •Código 902023............................................247 FACTOR XIII CUANTITATIVO •Código 862724F...........................................247 FACTOR REUMATOIDEO •Código 906911............................................ 248 FACTOR Von WILLEBRAND (vWF:Ag) •Código 902019............................................ 248 FACTOR Von WILLEBRAND, MULTÍMEROS •Código 862611F.......................................... 248 FENILCICLIDINA (PCP) •Código 905308........................................... 250 FENITOÍNA Total •Código 905213............................................ 250 FENITOÍNA Libre •Código 905210............................................ 251 FENOBARBITAL •Código 905216............................................ 252 FENOTIAZINAS CUANTITATIVA •Código 905309........................................... 252 FENOTIAZINAS SEMICUANTITATIVA •Código 905310............................................ 252 FERRITINA •Código 903016............................................ 253 FIBRINÓGENO (Factor I) •Código 902024/862650F............................ 254 FIBRINOPÉPTIDO A (FPA) •Código 853700F.......................................... 255 FLUCONAZOL (SUERO) •Código 802990F.......................................... 255 FOSFATASA ALCALINA (FAL) •Código 903833........................................... 256 FOSFATASA ALCALINA ÓSEA •Código 903834........................................... 256 FOSFATASA ALCALINA ISOENZIMAS •Código 903834F.......................................... 256 FOSFATIDIL GLICEROL IgM •Código 862625F.......................................... 257 FOSFATIDIL GLICEROL IgG •Código 862624F.......................................... 257 FOSFOLÍPIDOS (CARDIOLIPINA), ANTICUERPOS IgG •Código 906422........................................... 258 FOSFOLÍPIDOS (CARDIOLIPINA), ANTICUERPOS IgM •Código 906423........................................... 258 FÓSFORO INORGÁNICO •Código 903835/903836/903836-2............. 259 FÓSFORO INORGÁNICO ORINA 24 HORAS •Código 903836........................................... 259 FÓSFORO INORGÁNICO ORINA MICCIÓN SIMPLE •Código 903836-2........................................ 259 FRAGILIDAD OSMÓTICA DE LOS ERITROCITOS •Código 902107............................................ 260 FRUCTOSAMINA •Código 903425............................................261 G GAD65 (DECARBOXILASA DEL ÁCIDO GLUTÁMICO), ANTICUERPOS •Código 835193F.......................................... 263 GALACTOCEREBROSIDASA EN LEUCOCITOS •Código 862757F.......................................... 263 GALACTOQUINASA •Código 862723F.......................................... 264 GALACTOSA-1-FOSFATO URIDIL TRANSFERASA (GALT) •Código 908205........................................... 264 GAMA-GLUTAMILTRANSFERASA (GGT) •Código 903838........................................... 265 GAMOPATÍAS MONOCLONALES (MGUS) •Código 862627F.......................................... 266 GANGLIÓSIDOS GD1B ANTICUERPOS •Código 862613F.......................................... 266 GANGLIÓSIDOS GM1 ANTICUERPOS IgG/ IgM •Código 862614F.......................................... 266 GASTRINA •Código 906624............................................ 267 GEN 3 PARA CÁNCER DE PROSTATA (PCA3) •Código 862719F.......................................... 268 GEN MEN 1 •Código 862769F.......................................... 269 GENOTIPO VIRUS HEPATITIS C (VHC) •Código 862560F.......................................... 270 GENOTIPO, INHIBIDOR ACTIVADOR DEL PLASMINÓGENO •Código 862605F...........................................271 GENOTIPO TIOPURINA METILTRANSFERASA (TPMT) •Código 862567F...........................................271 GENTAMICINA •Código 905405........................................... 272 GIARDIA LAMBLIA, PRUEBA DIRECTA •Código 906316............................................ 273 Manual de Procedimientos GIARDIA LAMBIA ANTICUERPOS IgG, IgM, IgA •Código 862694F/862636F.......................... 273 GLICOPROTEÍNA ASOCIADA A LA MIELINA (MAG), ANTICUERPO IgM •Código 862599F..........................................274 GLOBULINA DE ENLACE DE TESTOSTERONA (SHBG) •Código 844021F.......................................... 275 GLOBULINA TRANSPORTADORA DE TIROXINA (TBG) •Código 904901........................................... 275 GLUCAGÓN •Código 904701.............................................276 GLUCOSA-6-FOSFATO DEHIDROGENASA (G-6-PD) •Código 902108.............................................277 GLUCOSA •Código 903841.............................................277 GLUCOSA EN ORINA •Código 903840/903840-1/2....................... 278 GLUCOSA PRE Y POST CARGA DE GLUCOSA •Código 903842........................................... 278 GLUCOSA PRE Y POST PRANDIAL •Código 903843........................................... 278 GLUCOSA, CURVA DE TOLERANCIA •Código 903844........................................... 278 GLUCOSA-6- FOSFATO ISOMERASA (G-6PI) •Código 862616F.......................................... 280 GONADOTROFINA CORIÓNICA (b-hCG) •Código 906625........................................... 280 GONADOTROFINA CORIÓNICA (b-hCG) PRUEBA DE EMBARAZO •Código 904508........................................... 280 GONADOTROFINA CORIÓNICA (b-hCG) LIBRE •Código 906626........................................... 281 GRASAS NEUTRAS EN HECES [SUDAN III] •Código 907006........................................... 282 H HAEMOPHILUS INFLUENZAE B, ANTICUERPOS •Código 862768F.......................................... 283 HAPTOGLOBINA •Código 903021........................................... 283 HELICOBACTER PYLORI IgG, ANTICUERPOS •Código 906023........................................... 284 HELICOBACTER PYLORI IgA, ANTICUERPOS •Código 906022........................................... 284 HELICOBACTER PYLORI IgM, ANTICUERPOS •Código 906024............................................ 284 11 21 HELICOBACTER PYLORI IgG ANTICUERPOS TOTALES •Código 906025........................................... 284 HELICOBACTER PYLORI IgG, CUANTITATIVO •Código 862764............................................ 284 HELICOBACTER PYLORI IgG CULTIVO •Código 901220............................................ 284 HELICOBACTER PYLORI ANTÍGENO EN HECES •Código 906022F.......................................... 284 GRUPO SANGUÍNEO (ABO/RH) •Código 911019/911020................................ 286 HEMOGLOBINA A2 •Código 902110............................................ 287 HEMOGLOBINA FETAL EN SANGRE MATERNA •Código 902111............................................ 287 HEMOGLOBINA GLICOSILADA (HbA1c) •Código 903427 ........................................... 288 HEMOGLOBINA PLASMÁTICA LIBRE •Código 902113............................................ 289 HEMOGRAMA COMPLETO •Código 902210............................................ 290 HEMÓLISIS ÁCIDA (PRUEBA DE HAM) •Código 902115............................................ 292 PRUEBA DE SUCROSA •Código 908307........................................... 292 HEMOPARÁSITOS, EXTENDIDO DE GOTA GRUESA •Código 902214............................................ 293 HEMOPARÁSITOS, COLORACIÓN •Código 902215/902214............................... 293 HEPARINA •Código........................................................ 294 HEPATITIS A, ANTICUERPOS IgM/IgG •Códigos 906218/906219............................. 295 ANTICUERPO A ANTÍGENO CORE (HBc total/ IgM) •Código 906221/906220.............................. 296 ANTICUERPO A ANTÍGENO DE SUPERFICIE (Anti-HBs) •Código 906223........................................... 296 ANTÍGENO DE SUPERFICIE B (HBsAg) •Código 906317............................................ 296 ANTICUERPO A ANTÍGENO E (Anti-HBe) •Código 906318............................................ 296 ANTÍGENO e (HBeAg) •Código 906218............................................ 296 PRUEBA CONFIRMATORIA •Código 838921F ....................................... 296 CARGA VIRAL, CUALITATIVA/ CUANTITATIVA •Código 906815/906816............................... 296 DNA POLIMERASA, ANTICUERPOS •Código 906224............................................ 296 22 Fundación Santa Fe de Bogotá GENOTIPIFICACIÓN •Código 862556........................................... 296 RESISTENCIA A DROGAS •Código 862664........................................... 297 HEPATITIS C ANTICUERPO A ANTÍGENO (Anti-VHC) •Código 906225........................................... 299 PRUEBA CONFIRMATORIA Anti-HCV •Código 906818............................................ 299 CARGA VIRAL •Código 906817............................................ 299 ARN DETECTOR •Código 906819............................................ 299 SEROTIPIFICACIÓN •Código 838980F.......................................... 299 SUBTIPOS •Código 838911F.......................................... 299 GENOTIPIFICACIÓN •Código 838922F.......................................... 300 HEPATITIS DELTA, ANTICUERPO IgM (AntiHDV) •Código 906226 .......................................... 303 HEPATITIS E, ANTICUERPOS (Anti-VHE IgG) •Código 866920F.......................................... 303 HEROÍNA, METABOLITOS •Código 862767F.......................................... 304 HERPES SIMPLEX (HSV)1 y 2, ANTICUERPOS IgG/IgM •Código 906228/906230.............................. 304 HERPES I y II ANTICUERPOS IgM TAMIZAJE •Código 862783F.......................................... 304 HERPES VIRUS 8, ANTICUERPOS •Código 862587F.......................................... 305 HIDROCARBUROS •Código 905722........................................... 306 HIDROXIPROLINA TOTAL •Código 903023........................................... 307 HIERRO SÉRICO •Código 903846........................................... 307 CAPACIDAD DE COMBINACIÓN (TIBC) •Código 903812............................................ 308 HISTAMINA •Código 906822/862579F............................ 309 HISTOPLASMA CAPSULATUM, ANTICUERPOS •Código 906118............................................ 309 HISTOPLASMA IgG/ IgM ANTICUERPOS •Código 862609F.......................................... 309 HISTOPLASMA ANTÍGENO URINARIO •Código 862697F...........................................310 HLA CITOTÓXICOS, ANTICUERPOS (ANTI HLA) •Código 906510/906509...............................311 HLA CLASE I, ANTICUERPOS TAMIZAJE •Código 862569F1.........................................312 HLA CLASE I, ANTICUERPOS ESPECÍFICOS •Código 862570F1.........................................312 HLA CLASE II DR-DQ (ANTÍGENO DR, DQ) •Código 862766F...........................................312 HLA CLASE II, ANTICUERPOS ESPECÍFICOS •Código 862570F2.........................................312 HLA CLASE II, ANTICUERPOS TAMIZAJE •Código 862569F2.........................................312 HLA A, B, D/DR y B27 •Código 906501/906511................................312 HOMOCISTEÍNA TOTAL (HCY) •Código 903022............................................313 HOMOCISTEÍNA URINARIA (HCY) •Código 826150F...........................................314 HONGOS SEROLOGIA •Código 906119/906120................................315 HORMONA ADRENOCORTICOTRÓPICA (ACTH) •Código 904103.............................................315 HORMONA ANTI MULLERIANA •Código 862645F...........................................317 HORMONA ANTIDIURÉTICA (ARGININA VASOPRESINA) •Código 904102.............................................318 HORMONA DE CRECIMIENTO (HGH, SOMATOTROPINA) •Código 904104.............................................319 HORMONA DEL CRECIMIENTO PRE Y POST EJERCICIO •Código 904202 ..........................................319 HORMONA TIROESTIMULANTE ULTRASENSIBLE (Tirotropina, TSH) •Código 904904........................................... 320 TSH NEONATAL •Código 904903........................................... 320 PRUEBA DE ESTIMULACIÓN TSH POST TRH •Código 904906........................................... 320 HORMONA FOLÍCULO ESTIMULANTE (FSH) •Código 904105............................................ 322 HORMONA LUTEINIZANTE (LH) •Código 904107............................................ 323 HORMONA PARATIROIDEA (PTH, PARATOHORMONA) •Código 904912............................................ 324 HTLV-I/II, ANTICUERPOS •Código 906232........................................... 325 HTLV I/II CONFIRMATORIO •Código 906233........................................... 326 HORMONA SOMATOMEDINA-C (IGF-1) •Código 904101............................................ 327 Manual de Procedimientos I IMIPRAMINA •Código 835230F.......................................... 329 INFLUENZA A Y B, PRUEBA DIRECTA PARA ANTÍGENO •Código 862649F.......................................... 329 INFLUENZA TIPO A, ANTICUERPOS •Código 906234........................................... 329 INFLUENZA TIPO B, ANTICUERPOS •Código 906236........................................... 329 INFLUENZA A y B, ANTICUERPOS IgG/ IgM •Código 906235........................................... 330 INHIBIDOR-1 ACTIVADOR DEL PLASMINÓGENO •Código 862606F.......................................... 331 INHIBIDOR C1 DE ESTERASAS •Código 906823........................................... 331 INHIBIDOR FACTOR DE COAGULACIÓN •Código 853350F.......................................... 331 INHIBINA A •Código 835209........................................... 332 INHIBINA B •Código 835210F.......................................... 333 INMUNOELECTROFORESIS DE CUALQUIER MUESTRA •Código 906824............................................ 334 INMUNOELECTROFORESIS EN SUERO (INMUNOFIJACIÓN) •Código 906824-1......................................... 334 INMUNOELECTROFORESIS EN ORINA (INMUNOFIJACIÓN) •Código 906824-2......................................... 335 INMUNOELECTROFORESIS EN LCR (INMUNOFIJACIÓN) •Código 906824-3......................................... 335 INMUNOFIJACIÓN DE PROTEÍNAS •Código 906825 .......................................... 335 INMUNOGLOBULINA IgA •Código 906827........................................... 336 INMUNOGLOBULINA IgA (saliva) •Código 862765F.......................................... 336 INMUNOGLOBULINA IgG Subclases 1, 2, 3, 4 •Código 906830........................................... 336 INMUNOGLOBULINA IgG (LCR) •Código 827844F.......................................... 336 INMUNOGLOBULINA IgM •Código 906832........................................... 336 INMUNOGLOBULINA IgG •Código 906829........................................... 336 INMUNOGLOBULINA IgD •Código 906833........................................... 336 IgG 4 SUBCLASES •Código 827880F.......................................... 336 11 23 INMUNOGLOBULINA IgE •Código 906835........................................... 339 INMUNOGLOBULINA IgE ESPECÍFICA (RAST) •Código 906834........................................... 339 INMUNOGLOBULINA ESTIMULANTE DE LA TIROIDES •Código 904902F..........................................341 INSULINA ULTRASENSIBLE •Código 904704............................................341 INSULINA, CURVA •Código 904703............................................341 INSULINA LIBRE •Código 862785F.......................................... 342 INSULINA, ANTICUERPOS [IAA] POR RIA •Código 906425........................................... 342 INSULINA, ANTICUERPOS ISLOTES [ICA] •Código 906426........................................... 342 INTERFERÓN ALFA •Código 862727F.......................................... 344 INTERFERÓN BETA 1A (IFNB-1A) ANTICUERPOS NEUTRALIZANTES •Código 862761F.......................................... 344 INTERFERÓN BETA 1B (IFNB-1B) ANTICUERPOS NEUTRALIZANTES •Código 862762F.......................................... 345 INTERLEUQUINA 6 •Código 862643F.......................................... 346 INTERLEUQUINA 5 •Código 862597F.......................................... 346 INTERLEUQUINA 8 •Código 862740F.......................................... 346 IONTOFORESIS, ELECTROLITOS EN SUDOR •Código 903607............................................347 ISOAGLUTININAS •Código 906427........................................... 348 ITRACONAZOLE •Código 862683F.......................................... 348 J JC (POLIOMA) VIRUS ANTICUERPOS •Código 862738F.......................................... 349 Jo1, ANTICUERPOS •Código 906327........................................... 349 L LA/SSB, ANTICUERPOS POR EIA •Código 906430 ......................................... 351 LACTÓGENO PLACENTARIO HUMANO (HPL) •Código 862632F.......................................... 351 LAMOTRIGINA •Código 905217F......................................... 351 24 Fundación Santa Fe de Bogotá LEGIONELLA PNEUMONIAE, ANTICUERPOS •Código 906027........................................... 352 LEGIONELLA, ANTÍGENO •Código 906322........................................... 352 LEISHMANIA MUCOCUTANEA [VISCERAL] ANTICUERPOS POR IFI •Código 906121............................................ 353 LEPTINA •Código 839371............................................ 354 LEPTOSPIRA ANTICUERPOS IgM •Código 862705F.......................................... 354 LEPTOSPIRA, SEROTIPIFICACIÓN •Código 901311............................................ 354 LEVETIRACETAM •Código 862629F.......................................... 355 LIDOCAINA (MONOETILGLICINEXILIDIDAMEGX) •Código 905002........................................... 356 LIPASA •Código 903847........................................... 357 LIPOPROTEÍNA A (Lpa) •Código 903431............................................ 357 LÍQUIDO ASCÍTICO (EXAMEN FÍSICO Y CITOQUÍMICO) •Código 903849........................................... 358 LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR) •Código 903850........................................... 359 LÍQUIDO PLEURAL •Código 903852............................................361 LÍQUIDO SINOVIAL •Código 838720 CUPS 903858.............. 362 LISOZIMA EN PLASMA •Código 862744F.......................................... 364 LISOZIMA EN ORINA •Código 839371F.......................................... 364 LITIO •Código 905313............................................ 365 M MAGNESIO •Código 903854........................................... 366 MAGNESIO EN ORINA MICCIÓN SIMPLE •Codigo 903854-2........................................ 366 MAGNESIO EN ORINA 24 HORAS •Código 903854-3........................................ 366 MALARIA ANTÍGENO •Código 862671F.......................................... 367 MANGANESO EN SUERO •Código 862752F.......................................... 368 MEMBRANA BASAL DEL GLOMÉRULO, ANTICUERPOS •Código 906431........................................... 369 MERCAPTOPURINA •Código 862581F.......................................... 369 MERCURIO, CABELLO Y UÑAS •Código 905730........................................... 370 MERCURIO, ORINA •Código 905731............................................ 370 MERCURIO, ORINA 24 HORAS •Código 905731-2......................................... 370 MERCURIO, SANGRE •Código 905731-1......................................... 370 METACUALONA •Código 905732............................................371 METALES PESADOS •Código 905736a......................................... 372 METALES PESADOS-TAMIZAJE •Código 905736F.......................................... 372 METANEFRINAS (Plasma y orina) •Código 903025F/862603F...........................374 METOTREXATE •Código 835240F ..........................................376 MI- 2 ANTICUERPOS •Código 862647F...........................................377 MICROALBUMINURIA •Código 903027............................................377 MICROPROTEÍNAS EN ORINA Y LCR •Código........................................................ 378 MIELINA PROTEÍNA BASICA (MBP) •Código 838730F ........................................ 379 MIELOPEROXIDASA, ANTICUERPOS •Código 906416F.......................................... 380 MIOGLOBINA •Código 903031............................................ 381 MITOCONDRIA, ANTICUERPOS (AMA) •Código 906433........................................... 382 MOCO CERVICAL (Prueba de SimsHuhner) •Código 907202........................................... 382 MONÓXIDO DE CARBONO (CARBOXIHEMOGLOBINA) •Código 905737............................................ 383 MUCOPOLISACÁRIDOS •Código 862692F.......................................... 383 MUCOPOLISACÁRIDOS (y CROMATOGRAFÍA) •Código 908505 .......................................... 384 MÚSCULO ESTRIADO, ANTICUERPOS •Código 906435 .......................................... 385 MÚSCULO LISO, ANTICUERPOS •Código 906437............................................ 385 MUTACIÓN GENÉTICA, ENFERMEDAD DE GAUCHER •Código 908608F.......................................... 386 MUTACIÓN PARA DISTROFIA MIOTÓNICA •Código 862631F.......................................... 387 MICOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS, CULTIVO •Código 901229............................................ 387 Manual de Procedimientos MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS, CULTIVO •Código 901230............................................ 387 MICOBACTERIUM, IDENTIFICACION •Código 901313............................................ 387 MYCOBACTERIUM SPP, PRUEBAS DE SENSIBILIDAD •Código 901007............................................ 388 MYCOPLASMA PNEUMONIAE, ANTICUERPOS IgA/ IgG/ IgM •Códigos 906033/906034/906035............... 388 MYCOPLASMA PNEUMONIAE, ANTICUERPOS TOTALES •Código 906036........................................... 388 MYCOPLASMA, CULTIVO •Código 901231............................................ 388 N NEISSERIA GONORRHOEAE, CULTIVO •Código 901232............................................ 391 NEISSERIA MENINGITIDIS, CULTIVO •Código 901233A......................................... 391 NEISSERIA MENINGITIDIS, SEROTIFICACIÓN POR LÁTEX •Código 901317............................................ 391 NETILMICINA •Código 905407........................................... 392 NEUROQUININA A •Código 862748F.......................................... 393 NEUROMIELITIS ÓPTICA ANTICUERPOS IgG EN LCR •Código 862604F......................................... 393 NEUROMIELITIS ÓPTICA ANTICUERPOS IgG EN SUERO •Código 862656F.......................................... 393 NEUTRALIZACIÓN PLAQUETARIA (NP) •Código 902119............................................ 394 NIACINA (Vitamina B3) •Código 862602F.......................................... 395 NICOTINA Y METABOLITOS EN SALIVA •Código 862610F.......................................... 396 NICOTINA-COTININA •Código 838870F.......................................... 396 NITRÓGENO URÉICO [BUN] •Código 903856........................................... 397 NITRÓGENO URÉICO [BUN] EN ORINA DE 24 H •Código 903857a......................................... 397 NITRÓGENO URÉICO EN ORINA (MICCIÓN SIMPLE) •Código 903857-2......................................... 397 ÚREA •Código 903869........................................... 397 O OLIGOSACÁRIDOS EN ORINA •Código 908707............................................ 399 11 25 OPIÁCEOS •Código 905740........................................... 399 ORGANOFOSFORADOS •Código 905742............................................ 400 OSMOLALIDAD •Código 903033........................................... 401 OSMOLARIDAD •Código 903034........................................... 401 OSTEOCALCINA •Código 903035........................................... 402 OXALATOS URINARIOS •Código 903036........................................... 403 OXALATOS SÉRICOS •Código 839451F.......................................... 403 OXCARBAZEPINA •Código 862575F.......................................... 405 OXYCODONA •Código 862681F.......................................... 405 P PAPILOMA VIRUS HUMANO (VPH) TIPIFICACIÓN •Código........................................................ 406 PAPP-A •Código 829980F.......................................... 406 PAROTIDITIS, ANTICUERPOS IgG •Código 906238........................................... 407 PAROTIDITIS, ANTICUERPOS IgG E IgM •Código 862734F.......................................... 407 PARVOVIRUS, IgG, IgM •Código 862680F.......................................... 408 PEPSINÓGENO I (P1) •Código 903047F.......................................... 408 PEPSINÓGENO II (PII) •Código 862677F.......................................... 408 PÉPTIDO C •Código 904706........................................... 409 PÉPTIDOS DE GLUTEN Y CASEÍNA •Código 862685F.......................................... 409 PIRUVATO QUINASA EN ERITROCITOS •Código 903111F............................................410 PIRUVATO QUINASA •Código 908305............................................410 PLAQUETARIOS, ANTICUERPOS •Código 906443............................................411 PLASMINÓGENO •Código 902029............................................412 PLOMO EN SANGRE •Código 836550F...........................................412 PLOMO EN ORINA •Código 836551F...........................................412 POLIPÉPTIDO INTESTINAL VASOACTIVO (VIP) •Código 845860F...........................................413 POLIPÉPTIDO PANCREÁTICO •Código 903014F...........................................413 26 Fundación Santa Fe de Bogotá POLIPOSIS ADENOMATOSA FAMILIAR (PAF) •Código 862693F...........................................414 PORFIRINAS CUANTITATIVAS EN ORINA •Código 903040F..........................................415 PORFIRINAS EN SANGRE •Código 983038............................................415 PORFOBILINÓGENO (PBG) EN ORINA DE MICCIÓN SIMPLE •Código 903040............................................416 PORFOBILINÓGENO (PBG) EN ORINA DE 24 HORAS •Código 903041.............................................416 POTASIO (K+) EN SANGRE •Código 903859............................................417 POTASIO EN ORINA •Códigos 903860/903860-2..........................417 PRA (Panel reactive antigen) HLA clase I/II Identificación •Código 862570F...........................................418 PRA (Panel reactive antigen) HLA clase I/II tamizaje •Código 862569F...........................................418 PREALBÚMINA •Código 906912.............................................419 PREGABALINA •Código 862684F.......................................... 420 PREGNANETRIOL •Código 841470F.......................................... 420 PREGNENOLONA •Código 841430F.......................................... 421 PRIMIDONA SEMICUANTITATIVA •Código 905750........................................... 422 PROCALCITONINA (PCT) CUALITATIVA •Código 906622F.......................................... 422 PROCALCITONINA (PCT) CUANTITATIVA •Código 906621F.......................................... 423 PROGESTERONA •Código 904510............................................ 424 PROINSULINA •Código 862670F.......................................... 425 PROLACTINA BASAL •Código 904108............................................ 425 PROLACTINA (TRES MUESTRAS) •Código 904108............................................ 425 PROPERDINA FACTOR B (PFB) •Código 903022........................................... 426 PROPOXIFENO •Código 905751............................................ 427 PROTEÍNA BÁSICA DE LA MIELINA (PBM) •Código 862601F.......................................... 427 PROTEÍNA DE BENCE JONES •Código 907103............................................ 427 PROTEÍNA C DE LA COAGULACIÓN •Código 902033........................................... 428 PROTEÍNA C ACTIVADA, RESISTENCIA (FACTOR V LEIDEN) •Código 902039........................................... 429 PROTEÍNA C REACTIVA (PCR) •Código 906913............................................ 430 PROTEÍNA EOSINOFÍLICA CATIÓNICA •Código 862642F.......................................... 430 PROTEÍNA S DE LA COAGULACIÓN, ACTIVIDAD •Código 902035........................................... 431 PROTEÍNA S DE LA COAGULACIÓN, ANTÍGENO LIBRE •Código 902037............................................ 431 PROTEÍNA S DE LA COAGULACIÓN, ANTÍGENO TOTAL •Código 902036........................................... 431 PROTEÍNA TAU •Código 863172F.......................................... 432 PROTEÍNA TRASPORTADORA DE HORMONAS SEXUALES (PTHS) •Código 903042........................................... 433 PROTEÍNAS DIFERENCIADAS (ALBÚMINAGLOBULINA) •Código 903861............................................ 433 PROTEÍNAS TOTALES •Código 903863........................................... 433 PROTEÍNAS EN ORINA (MICCIÓN SIMPLE) •Código 903862-2........................................ 434 PROTEÍNAS EN ORINA DE 24 HORAS •Código 903862........................................... 434 PROTEINASA 3 (PR-3), AUTOANTICUERPO •Código 906417F.......................................... 435 PROTOPORFIRINA ZINC (ZPP) •Código 903433F.......................................... 436 PROTOPORFIRINA ZINC ERITROCITARIA (ZPP) •Código 903433........................................... 436 PRUEBA DE CÉLULAS FALCIFORMES O DREPANOCITOS •Código 902121............................................ 437 PRUEBA DE COMPATIBILIDAD Y RASTREO DE ANTICUERPOS •Códigos 911021........................................... 437 PRUEBA DE HAM •Código 902115............................................ 438 PRUEBA DE SUCROSA •Código 908307........................................... 439 PRUEBA ENFERMEDAD GRANULOMATOSA CRÓNICA •Código 863840F.......................................... 440 REDUCCIÓN AZUL DE TETRAZOLIUM (NBT) •Código 864770F.......................................... 440 PURKINJE, CÉLULAS CITOPLASMÁTICAS (YO) AUTOANTICUERPOS •Código 906410............................................ 441 Manual de Procedimientos Q QUANTIFERON TB GOLD •Código 862758F.......................................... 442 QUININA/QUINIDINA •Código 905753........................................... 443 R RAPAMICINA (SIROLIMUS) •Código 849991F.......................................... 444 RAST IgE ESPECÍFICA •Código 862735F.......................................... 444 RECEPTORES DE ACETILCOLINA (MODULADORES) •Código 835192F.......................................... 444 RECEPTORES DE ACETILCOLINA ANTICUERPOS •Código 835190F.......................................... 444 RECUENTO DE ADDIS •Código 907104............................................ 445 RECUENTO DE EOSINÓFILOS EN CUALQUIER MUESTRA •Código 902218 ........................................... 445 RECUENTO DE EOSINÓFILO EN MOCO NASAL •Código 902219............................................ 445 RECUENTO DE PLAQUETAS •Código 902220........................................... 446 RECUENTO DE RETICULOCITOS •Código 902223........................................... 446 RECUENTO DE HAMBURGUER •Código 907105............................................ 448 RENINA •Código 904003........................................... 448 RENINA PLASMÁTICA ACTIVIDAD •Código 862648F.......................................... 448 RELACIÓN ALDOSTERONA/ACTIVIDAD DE LA RENINA PLASMÁTICA •Código 862713F.......................................... 449 RESISTENCIA A LA PROTEÍNA C ACTIVADA (FACTOR V LEIDEN) •Código 902039........................................... 451 RETRACCIÓN DEL COÁGULO •Código 902041............................................ 451 RIBOFLAVINA (VITAMINA B2) •Código 862623F.......................................... 451 RIBOSOMAL P, ANTICUERPOS •Código 862662F.......................................... 452 RICKETTSIA CONORI IgG/ IgM •Código 862718F.......................................... 453 ROTAVIRUS, ANTÍGENOS •Código 906327........................................... 453 RUBÉOLA, ANTICUERPOS IgG •Código 906241............................................ 454 RUBÉOLA, ANTICUERPOS IgM •Código 906243............................................ 454 S 11 27 SALICILATOS •Còdigo 905756........................................... 456 SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL •Código 907008........................................... 457 SARAMPIÓN ANTICUERPOS IgM •Código 862706F.......................................... 457 SARAMPIÓN, ANTICUERPOS IgG •Código 906245............................................ 457 SCL 70, ANTI-ESCLERODERMA IgG •Código 906455........................................... 458 SEROLOGÍA SÍFILIS RPR •Código 906915............................................ 459 SEROTONINA-5 HIDROXI-TRIPTAMINA •Código 903434........................................... 459 SEROTONINA -5 HIDROXI-TRIPTAMINA EN ORINA DE 24H •Código 903435........................................... 459 SHIGELLA, SEROTIPIFICACIÓN •Código 901319............................................ 460 SÍNDROME PARANEOPLÁSICO, EVALUACIÓN •Código 862672F...........................................461 Sm, ANTICUERPOS •Código 906456............................................461 SODI •Código 903864............................................461 SODIO EN ORINA (micción simple) •Código 903865-2........................................ 462 SODIO EN ORINA DE 24 HORAS •Código 903865........................................... 462 SOMATOMEDINA C (IGF-1) •Código 904101............................................ 463 PROTEÍNA TRASPORTADORA DE LA SOMATOMEDINA •Código 904110............................................ 463 SOMATOSTATINA •Código 904708........................................... 464 STREPTOCOCCUS BETA HEMOLÍTICO GRUPO A (Prueba rápida) •Código 901321............................................ 465 STREPTOCOCCUS pneumoniae Ac IgG, 7 SEROTIPOS •Código 862622F.......................................... 465 STREPTOCOCCUS pneumoniae Ac IgG, 14 SEROTIPOS • Código 862638F......................................... 465 STREPTOCOCCUS pneumoniae Ac, IgG 23 SEROTIPOS •Código 901322F.......................................... 465 SUBCLASES IgG 4 •Código 827880F.......................................... 466 SULFÁTIDOS, ANTICUERPOS •Código 862658F.......................................... 466 SULFATO EN ORINA •Código 862634F.......................................... 467 28 Fundación Santa Fe de Bogotá SULFONILUREAS TAMIZAJE DE DROGAS •Código 862715F.......................................... 467 T TACROLIMUS (FK -506) •Código 849995F.......................................... 469 TALIO (SUERO, ORINA) •Código 844440F......................................... 469 TALIO EN ORINA DE 24 H •Código 905760............................................ 469 TEOFILINA •Código 905607........................................... 470 TESTOSTERONA TOTAL •Código 904602............................................471 TESTOSTERONA LIBRE •Código 904601............................................471 GLOBULINA DE ENLACE DE HORMONAS SEXUALES (SHBG) •Código 844061.............................................471 TESTOSTERONA BIODISPONIBLE •Código 862653F...........................................471 TÉTANO IgG ANTICUERPOS •Código 862607FA.........................................474 TÉTANO PRE Y POST-VACUNACIÓN •Código 862561F...........................................474 TIEMPO DE COAGULACIÓN (Lee-White) •Código 902043............................................474 TIEMPO DE LISIS DE LA EUGLOBULINA •Código 902044........................................... 475 TIEMPO DE PROTROMBINA (TP/PT), INR •Código 902045........................................... 475 TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA (TPT/PTT) •Código 902049............................................477 TIEMPO DE SANGRÍA (TS) •Código 902046........................................... 478 TIEMPO DE TROMBINA •Código 902048........................................... 479 TIROGLOBULINA (Tg) •Código 904920........................................... 480 TIROIDEOS MICROSOMALES, ANTICUERPOS •Código 906458........................................... 481 TIROGLOBULINA, ANTICUERPOS •Código 906464........................................... 481 TIROIDEOS PEROXIDASA, ANTICUERPOS •Código 906462........................................... 482 TIROXINA LIBRE (T4 LIBRE) •Código 904921........................................... 482 TIROXINA TOTAL (T4 TOTAL) •Código 904922........................................... 483 TOPIRAMATO •Código 862736F.......................................... 484 TOXINA CLOSTRIDIUM DIFFICILE A Y B •Código 862572F.......................................... 484 TOXOCARA CANIS, ANTICUERPOS •862593F....................................................... 485 TOXOCARA CANIS, ANTICUERPOS •906125......................................................... 485 TOXOIDE DIFTÉRICO ANTICUERPOS IgG •Código 862618F.......................................... 486 TOXOIDE DIFTÉRICO PRE Y POSTVACUNACIÓN •Código 862562F.......................................... 486 TOXOPLASMA GONDII, ANTICUERPOS Ig A •Código 906126............................................ 486 TOXOPLASMA GONDII, ANTICUERPOS IgG POR EIA •Código 906127............................................ 486 TOXOPLASMA GONDII, ANTICUERPOS IgM POR EIA •Código 906129............................................ 486 TOXOPLASMA IgG AVIDEZ •Código 862741F.......................................... 487 TRANSAMINASA ASPARTATO AMINOTRANSFERASA •Código 903867............................................ 489 TRANSAMINASA ALANINO AMINO TRANSFERASA •Código 903866........................................... 489 TRANSFERRINA •Código 903046........................................... 489 TRANSGLUTAMINASA, ANTICUERPOS IgA •Código 841452F.......................................... 490 TRANSGLUTAMINASA, ANTICUERPOS IgG •Código 841451F.......................................... 490 TREPONEMA PALLIDUM SEROLOGÍA RPR, VDRL •Código 906915............................................ 490 TREPONEMA PALLIDUM, ANTICUERPOS (FTA-ABS) •Código 906039........................................... 490 TREPONEMA PALLIDUM, ANTICUERPOS IgM •Código 906040........................................... 491 TRIGLICÉRIDOS •Código 903868........................................... 492 TRIPSINA FECAL •Código 835212F.......................................... 493 TRIPSINA EN SUERO •Código 903047........................................... 493 TRIPTASA •Código 906834F.......................................... 494 TRIPTÓFANO •Código 862689F.......................................... 495 TRIYODOTIRONINA TOTAL, T3 TOTAL •Código 904925........................................... 495 TRIYODOTIRONINA, CAPTACIÓN O UPTAKE T3, (T3UP) •Código 904923........................................... 495 Manual de Procedimientos TRIYODOTIRONINA LIBRE, T3 LIBRE •Código 904924............................................ 496 TROPONINA I, CUALITATIVA •Código 903436........................................... 497 TROPONINA I, CUANTITATIVA •Código 903437............................................ 497 TROPONINA I DE ALTA SENSIBILIDAD •Código........................................................ 498 TRYPANOSOMA CRUZI (Chagas), ANTICUERPOS •Código 906131............................................ 500 TRYPANOSOMA CRUZI ANTICUERPOS IgM •Código 862637F.......................................... 500 U UNIDAD DE CRIOPRECIPITADO •Código 911105............................................ 502 UNIDAD DE GLÓBULOS ROJOS: LAVADOS •Código 911110............................................. 503 LEUCORREDUCIDOS •Código 911107............................................. 503 IRRADIADOS, LAVADOS Y LEUCORREDUCIDOS •Código 911109............................................ 503 UNIDAD DE SANGRE TOTAL •Código 911112............................................. 503 UNIDAD DE PLASMA FRESCO CONGELADO (PFC) •Código 911111............................................. 505 UROANÁLISIS (Examen de orina) •Código 907106............................................ 506 UROBILINÓGENO URINARIO •Código 907107............................................ 507 UROCULTIVO Y ANTIBIOGRAMA (MIC AUTOMATIZADO) •Código 901236............................................ 508 V VANCOMICINA, SEMICUANTITATIVA •Código 905411.............................................510 VARICELLA ZOSTER VIRUS, PCR •Código 862661F...........................................510 VARICELLA ZOSTER, ANTICUERPOS IgG •Código 906247.............................................510 VARICELLA ZOSTER, ANTICUERPOS IgM •Código 906248.............................................511 VELOCIDAD DE SÍNTESIS DE IgG EN LCR •Código 863171F...........................................511 VGKC, ANTICUERPOS •Código 862673F...........................................513 VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH 1/2) •Código 906249.............................................513 VIH PRUEBA CONFIRMATORIA • Código 906250..........................................513 11 29 VIH CARGA VIRAL •Código 906840............................................513 VIH 1 DETECCIÓN DEL PROVIRUS POR PCR • Código 906330...........................................513 VIH-1FENOTIPO 15 DROGAS •Código 875361F...........................................514 VIH-1 GENOTIPO • Código 875350F..........................................514 VIRUS DE FIEBRE AMARILLA, ANTICUERPOS IgM •Código 906252............................................517 VIRUS FIEBRE DEL NILO IgG-IgM LCR •Código 862710F...........................................517 VIRUS FIEBRE DEL NILO IgG-IgM SUERO •Código 862709F...........................................517 VIRUS SINCICIAL RESPIRATORIO (VSR), ANTÍGENO •Código 906253Fa.........................................519 VIRUS SINCITIAL RESPIRATORIO, ANTICUERPOS IgG •Código 906253............................................519 VITAMINA A (RETINOL) •Código 903701............................................ 520 VITAMINA B 1 •Código 903702............................................ 520 VITAMINA B6 •Código 903705............................................ 521 VITAMINA B12 •Código 903703............................................ 522 VITAMINA C •Código 842060F.......................................... 523 VITAMINA D 25-HIDROXI (Calciferol) •Código 903706............................................ 523 VITAMINA D 1,25-DIHIDROXI (Calcifidiol) •Código 903707............................................ 523 VITAMINA D3 (Colecalciferol) •Código 862573F.......................................... 523 VITAMINA E (Tocoferol) •Código 903708............................................ 525 VITAMINA K1 •Código 862630F.......................................... 526 Y YERSINIA ENTEROCOLÍTICA, CULTIVO •Código 901238............................................ 527 YERSINIA ENTEROCOLÍTICA, ANTICUERPOS IgG/IgA •Código........................................................ 527 Z ZINC •Código 903608........................................... 528 ZINC EN ORINA DE 24H •Código 903609........................................... 528 30 Fundación Santa Fe de Bogotá ANÁLISIS QUE SE PROCESAN EN EL LABORATORIO CLÍNICO APLICACIÓN CLÍNICA CONDICIONES DEL PACIENTE Y LA MUESTRA METODOLOGÍA VALORES DE REFERENCIA RANGO TERAPÉUTICO UTILIDAD DE LA PRUEBA E INTERPRETACIÓN DEL RESULTADO Manual de Procedimientos 11 31 5-NUCLEOTIDASA Código 903432 La enzima 5-nucleotidasa cataliza la hidrólisis de los nucleósidos-5-monofosfatos a nucleósidos y fosfato inorgánico. La actividad presente en el suero se descarga de las membranas de las células hepáticas por acción de las sales biliares y se ha usado como un marcador de enfermedad hepática. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Espectrofotometría cinética Valores de referencia: ≤ 11 U/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles elevados de la 5-nucleotidasa están asociados a obstrucción intra o extra hepática y particularmente a casos de carcinoma hepático y en pacientes con mastectomía por cáncer de seno y metástasis hepáticas recurrentes. Se ha demostrado que el valor diagnóstico de la 5-nucleotidasa en casos de metastásis hepáticas es superior al de las otras enzimas hepáticas. 11-DESOXICORTISOL Código 904810 El 11-desoxicortisol llamado también cortodoxona o cortexolona es un esteroide que puede ser oxigenado para convertirse en cortisol (hidrocortisona). Funciona como un glucocorticoide aunque menos potente que el cortisol. Puede ser sintetizado a partir de 17-hidroxiprogesterona. Los niveles de 11-desoxicortisol se elevan dramáticamente cuando hay deficiencia de la enzima 11beta-hidroxilasa produciéndose hipertensión a diferencia de la deficiencia de 21 alfa-hidroxilasa en donde se presenta hipotensión por falta de mineralocorticoides. El 11-desoxicortisol también puede ser convertido a androstenediona lo que explica la elevación de los niveles de esta última cuando hay deficiencia de la 11beta-hidroxilasa 32 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: < 8,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para evaluación de pacientes con hipertensión debida a deficiencia de la 11beta-hidroxilasa. 17-CETOSTEROIDES Código 904804 Son un grupo de compuestos esteroideos con una cetona (-C = O) en la posición C-17 del núcleo. En la mujer son secretados por la corteza adrenal y en el hombre además de esta por los testículos. Representan la secreción de los esteroides C-19 y C-21 y su principal compuesto es el sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEA-S) Se excretan en la orina principalmente como sulfatos y glucurónidos de androsterona, dehidroepidrosterona, etiocolanolona, 11-cetoandrosterona, 11-etiocolanolona, 11B-hidroxiandrosterona y 11B- hidroxietiocolanolona, Condiciones del paciente y/o de la muestra En la solicitud se debe anotar edad y sexo y las drogas que esté recibiendo el paciente. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en recipiente con 10 mL de ácido clorhídrico (HCl) 6.0 N que es estable 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica espectrofotométrica de Zimmerman Valores de referencia: Hombres: 10-25 mg/24 hrs Mujeres: 6-14 mg/24 hrs Niños (< 10 años) 0,1 - 5 mg/24 hrs (11-14 años) 2-7 mg/24 hrs Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Este examen no se realiza tan a menudo como solía hacerse en el pasado, debido a que en su lugar se emplean exámenes más específicos y con mejor sensi- Manual de Procedimientos 11 33 bilidad para el estudio de pacientes a quienes se les sospeche síndrome de Cushing, síndrome adrenogenital y otros defectos de la biosíntesis de los esteroides. 17-HIDROXICORTICOSTEROIDES (17-OHCS) Código 904811 Comprenden un grupo de glucocorticoides urinarios que tienen 21 átomos de carbono y una cadena lateral de dihidroxiacetona; dentro de estos se incluyen la 17-hidroxicosterona, derivada del compuesto F (hidrocortisona) y la 17-hidroxi-11-dehidrocorticosterona, derivada del compuesto E (cortisona). Las hormonas precursoras regulan el metabolismo de las proteínas y carbohidratos y están involucradas en el control de la secreción de la ACTH. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco con 10 g de ácido bórico para mantener el pH de la orina por debajo de 7,5. La muestra es estable 1 semana refrigerada. Metodología: Técnica colorimétrica de Porter-Silber modificada. Valores de referencia: Orina de 24 horas Hombres 7-15 mg/24 horas Mujeres adultas 5-12 mg/24 horas 2-14 años 3-10 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los 17-hidroxicorticoides urinarios reflejan la actividad adrenocortical y se encuentran elevados en síndrome de Cushing, tumores adrenales, estrés severo por infecciones, cirugía, trauma etc. y disminuidos en enfermedad de Addison, deficiencia de ACTH, ayuno prolongado, desnutrición severa, enfermedad hepática y falla renal. Es una prueba que casi no se usa pues ha sido reemplazada por pruebas más específicas. 17-HIDROXIPREGNENOLONA Código 841450F La 17 hidroxipregnenolona es un esteroide derivado de la hidroxilación de la pregnenolona, proceso en el cual interviene la enzima mitocondrial del citocromo P450 llamada 17 alfa hidroxilasa, presente en las glándulas suprarrenales y gónadas. En humanos los niveles máximos están presentes en la pubertad. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días 34 Fundación Santa Fe de Bogotá en refrigeración y 1 año congelada. La muestra se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: Pediátricos 1 - 29 días: ≤ 3.013 ng/dL 1 - 11 meses: ≤ 624 1 - 5 años: ≤ 152 5 -9 años: ≤ 72 10 - 13 años: ≤ 153 Mujeres 14 - 17 años: ≤ 909 Hombres 14 - 17 años: ≤ 128 Mujeres Premenopausia: ≤ 905 Postmenopausia: ≤ 286 Hombres: ≤ 905 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La medición de 17 hidroxi-pregnenolona es útil en el diagnóstico de ciertos tipos de hiperplasia suprarrenal congénita, defecto que puede producir deficiencia de la enzima 3 hidroxiesteroide deshidrogenasa, aumentando los niveles de 17 hidroxi-pregnenolona, o producir deficiencia de la enzima 17 alfa hidroxilasa resultando en niveles bajos o ausentes de 17 hidroxi-pregnenolona. 17-HIDROXIPROGESTERONA ALFA (17-OHP) Código 904509 17-HIDROXIPROGESTERONA ALFA, PRE Y POST ACTH Código 904402 Es un esteroide adrenal C-21 intermediario en la biosíntesis del cortisol. No se le reconoce un papel fisiológicamente importante (progestacional, estrogénico o androgénico) pero tiene propiedades natriuréticas. Se secreta en la suprarrenal, ovarios, testículos y placenta, se sintetiza a partir de progesterona catalizada por la enzima P-450C17, se metaboliza posteriormente a cortisol o androstenediona y circula unida a transcortin y albúmina; se excreta por la orina convertida a pregnanetriol. Sus niveles presentan un pico en la mañana; tiene una vida media de dos horas con velocidades de depuración metabólica de aproximadamente 2.000 litros por día. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Manual de Procedimientos 11 35 Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 6 días después de la fecha de envío. Metodología: Técnica de radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: Hombres adultos: 0,4-3,3 ng/dL Mujeres adultas Fase folicular: 0,1-1,2 ng/dL Fase luteal: 0,4-4,8 ng/dL Fase postmenopáusica sin tratamiento: 0,1-0,6 ng/dL En el recién nacido los valores tanto en mujeres como en hombres son más elevados y después del primer mes de nacido hasta los 17 años los valores son generalmente más bajos. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles séricos de 17-OHP son principalmente útiles en el diagnóstico de la hiperplasia adrenal congénita (CAH) debido a deficiencia de la enzima 21-hidroxilasa o 11 b-hidroxilasa en niños con síntomas de insuficiencia suprarrenal y en mujeres con evidencia clínica de posible exceso de andrógenos particularmente en judíos ashkenazi que tienen una prevalencia muy alta de deficiencia no clásica de 21-hidroxilasa. Algunos pacientes con CAH pueden tener niveles normales de 17-OHP y requieren estimulación con ACTH para establecer el diagnóstico. También puede haber elevación en pseudohermafroditismo masculino y en enfermedad de Cushing y disminución en tratamiento con cortisona e hidrocortisona y en la enfermedad de Addison. Esta prueba reemplaza a la de pregnanetriol en orina. 21-HIDROXILASA, ANTICUERPOS Código 862742F La 21 hidroxilasa es una enzima que actúa a nivel de la zona fascicular de la glándula suprarrenal, catalizando el paso de la 17 hidroxiprogesterona a 17,21 dihidroxiprogesterona y en la capa glomerular de la glándula, interviene en el paso de progesterona a 21 hidroxiprogesterona. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. 36 Fundación Santa Fe de Bogotá Metodología: Radioinmunoanálisis inverso (RIA) Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los anticuerpos anti 21-hidroxilasa son considerados marcadores específicos de la insuficiencia adrenal crónica primaria o enfermedad de Addison, causando la destrucción gradual de la corteza suprarrenal por estar dirigidos contra el auto antígeno microsomal 21-hidroxilasa. La destrucción de la corteza puede ocurrir esporádicamente o en combinación con otras enfermedades endocrinas, como la diabetes mellitus tipo 1A (DMT1A), tiroiditis crónica, enfermedad de Graves, hipoparatiroidismo, miastenia gravis, anemia perniciosa, vitiligo, entre otras, desencadenando finalmente el síndrome poliganglionar tipo 1 y tipo 2. Manual de Procedimientos 11 37 A ACETAMINOFÉN Código 905702 El acetaminofén es un medicamento de venta libre que se utiliza como analgésico y que alivia temporalmente dolores menores y además tiene la capacidad de disminuir la fiebre. Se metaboliza en el hígado y en casos de sobredosis produce hepatotoxicidad caracterizada por necrosis centrilobular y aún muerte por daño severo al hígado. Condiciones del paciente y/o de la muestra El tiempo habitual de muestreo es una hora después de la dosis (pico). En el caso de sobredosis se debe tomar también a las 4 horas de ingerida la droga. Muestra de suero o sangre total con anticogulantes como heparina de litio o EDTA para obtener plasma. No se debe utilizar tubo con gel separador. La muestra de suero es estable durante 48 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. Metodología: Colorimetría Rango terapéutico: Rango Terapéutico: 10 -30 µg/mL Toxicidad posible: 150 - 200 µg/mL Toxicidad 4 horas post dosis: >200 Toxicidad 8 horas post dosis: > 100 Toxicidad 12 horas post dosis: > 50 Toxicidad probable: > 200 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para controlar toxicidad en casos de sobredosis. La concentración sérica y la vida media son la única manera de evaluar el grado de intoxicación en estado temprano ya que las pruebas de función hepática (bilirrubina, ALT, AST, fosfatasa alcalina etc.) no muestran cambios clínicos significativos sino cuando hay daño hepático tisular momento en el cual el tratamiento ya no es efectivo. El nivel tóxico depende de la vida media. Cuando la vida media de eliminación es de cuatro horas, la hepatotoxicidad generalmente no ocurre a menos que la concentración sérica sea de más de 60 mg/L. 38 Fundación Santa Fe de Bogotá ACETILCOLINA RECEPTORES Código 906401 La Miastenia Gravis (MG) es una enfermedad autoinmune que se caracteriza por debilidad muscular y fatiga fácil, síntomas que mejoran con el reposo y drogas anticolinesterasa. La debilidad muscular se debe en la mayoría de los casos a una pérdida, mediada por autoanticuerpos, de los receptores funcionales de acetilcolina en la membrana muscular postsináptica. Los autoanticuerpos se clasifican en tres subgrupos dependiendo de cómo y dónde se unen a los receptores de acetilcolina: enlace, moduladores y bloqueadores. Para el diagnóstico de la MG adquirida autoinmune los anticuerpos de enlace se consideran la primera elección, los moduladores como segunda y los bloqueadores como tercera elección. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra de suero es estable por 2 semanas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 1 años congelada a -20ºC. No se aceptan sueros hemolizados y en pacientes que reciben relajantes musculares durante anestesia hay elevación de los títulos de anticuerpos moduladores y bloqueadores. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: Autoanticuerpos bloqueadores: Negativo: < 15,0% Débilmente positivo: 15,0-20,0% Positivo: > 20,0% Autoanticuerpos moduladores: < 32 % Autoanticuerpos de enlace: < de 0,25 nmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba de elección para el estudio de pacientes con MG adquirida es la determinación de autoanticuerpos de enlace pues esta es positiva en aproximadamente el 90% de pacientes con MG generalizada, en 63% con miastenia ocular (títulos más bajos) y en el 58% de pacientes en remisión. Los autoanticuerpos no se encuentran en la forma congénita de la MG. El título del anticuerpo no se correlaciona con la severidad de la enfermedad pues en algunos pacientes la mejoría clínica generalmente se acompaña de disminución en el título. Pueden haber resultados negativos en los primeros 6-12 meses después de la aparición de los síntomas de la MG y en pacientes que están en tratamiento con drogas inmunosupresoras. También se puede encontrar positividad en pacientes con timoma y en el 13% de los pacientes con el Manual de Procedimientos 11 39 síndrome miasténico Lambert-Eaton y con alguna frecuencia en pacientes con enfermedad hepática autoinmune. Los anticuerpos moduladores se consideran una prueba de segundo orden cuando los anticuerpos de enlace son negativos y se encuentran con la misma frecuencia que los de enlace; en un 8% de los pacientes solamente una de las dos pruebas es positiva. Los anticuerpos bloqueadores se consideran una prueba de tercer orden y se detectan en aproximadamente el 50% de pacientes con MG y en el 30% de miastenia ocular y muy rara vez se encuentran en pacientes que son negativos para los anticuerpos de enlace o los moduladores. Estos anticuerpos no se deben solicitar si la prueba de anticuerpos moduladores es negativa. ÁCIDO 5-HIDROXIINDOL- ACÉTICO (5HIA) Código 903103 El 5-HIA es el principal metabolito del catabolismo de la serotonina, la cual a su vez se deriva del catabolismo del 1% del triptófano que se ingiere en la dieta y que es convertido a serotonina por las células argentafínicas del intestino. El 5HIA se excreta por la orina. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente no debe haber ingerido café, té, aguacate, banano, berenjena, piña, ciruelas, tomate, nueces y chocolate durante las 48 horas anteriores a la recolección de la orina pues estos alimentos son ricos en serotonina. Se debe evitar el consumo de medicamentos como acetaminofén, salicilatos guayacolato de glicerilo, naproxen, metocarbamol, imipramina, isoniazida, inhibidores de la MAO, metildopa y fenotiazinas. Recolección de orina de 24 horas en frasco sin preservativo y mantenida en la nevera durante el período de recolección. La muestra es estable 1 semana refrigerada y 2 semanas congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible después de 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) Valor de referencia: ≤ 9 años 0,4–5,6 mg/24 horas ≤ 13 años 1,0–6,3 mg/24h ≤ 18 años 0,9 – 6,5 mg/24h ≥18 años ≤ 6,0 mg/24h Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los tumores carcinoides intestinales, sobre todo los producidos en el intestino 40 Fundación Santa Fe de Bogotá medio, así como los tumores neuroendocrinos producen exceso de serotonina lo que resulta en niveles urinarios elevados de 5-HIA y en el llamado síndrome carcinoide (SC). El SC se caracteriza por tumores carcinoides, rubores, enfermedad cardíaca y hepatomegalia. Hay elevaciones moderadas en enfermedad de Whipple, enfermedad celíaca, Sprue tropical y tumores de los islotes de páncreas no carcinoides. ÁCIDO CÍTRICO URINARIO Código 903102 Los citratos son las sales del ácido cítrico y actúan regulando la acidez orgánica. El citrato urinario estabiliza el calcio y disminuye la saturación del oxalato de calcio, previniendo la formación de cálculos. La excreción de citrato en pacientes con urolitiasis idiopática es significativamente baja comparado con personas sanas. En pacientes con hipocitraturia e hiperoxaluria es frecuente la urolitiasis, como resultado de la acidosis tubular renal. Pacientes con acidosis tubular renal están más predispuestos a la formación de cálculos renales. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco con 10.0 g de ácido Bórico o 10 mL de HCl 6N al iniciar la recolección. La muestra debe mantenerse refrigerada en los intervalos de la recolección y es estable 10 días a temperatura ambiente y/o refrigerada. La prueba se procesa en estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Colorimetría Valores de referencia: 170 – 1.266 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles reducidos de citrato están asociados con insuficiencia renal y favorecen la formación de cálculos renales. Niveles reducidos de calcio y magnesio y exceso de potasio, son causas adyuvantes en su formación. También es posible encontrar disminución de citrato urinario en pacientes con insuficiencia renal. ÁCIDO DELTA AMINOLEVULINICO (ALA) Código 903104 La hemoglobina la mioglobina y los citocromos son moléculas complejas de porfirinas que se sintetizan en el organismo a partir de glicina más succinato produciendo ALA y uroporfirinógenos. El ALA se forma por la reacción de la succinil-coenzima A con glicina teniendo como catalizador la ALA sintasa. Esta reacción es el primer paso en la biosíntesis de la molécula heme y es seguida por la conversión de ALA a porfobilinógeno por la ALA dehidratasa. Manual de Procedimientos 11 41 Condiciones del paciente y/o de la muestra Junto con la solicitud se debe enviar resumen de la historia clínica Recolección de orina de 24 horas recogida sin preservativo en frasco oscuro para protegerla de la luz. La muestra es estable 7 días en refrigeración y un mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de columna de intercambio iónico Valor de referencia: 1,5-7,5 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Puede haber aumento en la excreción del ALA por deficiencias hereditarias o por inhibición secundaria de las enzimas que intervienen en la vía de la biosíntesis del anillo heme como son la ALA dehidratasa en las porfirias (porfiria, porfiria intermitente aguda, coproporfiria hereditaria y porfiria variegada). Entre las causas secundarias está la intoxicación aguda o crónica por plomo, la tirosinemia tipo I, el alcoholismo y el embarazo. ÁCIDO FÓLICO (FOLATOS) EN SANGRE Código 903105 ÁCIDO FÓLICO EN ERITROCITOS Código 903106 Los folatos son una clase de compuestos vitamínicos relacionados con el ácido pteroilglutámico (PGA) que son necesarios para la síntesis de ácidos nucléicos, proteínas mitocondriales, el metabolismo de los aminoácidos y otros procesos celulares que utilizan transferencia de moléculas de carbonos simples. Los folatos sirven como donantes o receptores de moléculas de carbonos. Aproximadamente el 20% del folato absorbido diariamente se deriva de la dieta, el resto es sintetizado por microorganismos intestinales. La deficiencia de folato puede presentarse por baja ingesta en la dieta, malabsorción gastrointestinal, utilización inadecuada por deficiencias enzimáticas o terapia antifólica, ingestión de alcohol y demanda exagerada de folatos como en el embarazo o en procesos de proliferación celular. Los folatos están presentes en una gran variedad de alimentos, como los vegetales de hoja verde oscura, los cítricos, la levadura, las judías, los huevos y la leche. El folato es absorbido por el intestino delgado y almacenado en el hígado. 42 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y no debe estar tomando ácido fólico ni vitaminas que lo contengan. Esta prueba no se debe ordenar en personas recibiendo radioisótopos, metrotexate u otros antagonistas del ácido fólico. Muestra de suero y de sangre total con anticoagulantes heparina o EDTA para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 6 meses congelada a -20°C. La prueba de ácido fólico en eritrocitos se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. La muestra es estable 4 días en refrigeración . Metodología: Suero: Inmunoanálisis por quimioluminiscencia con partículas paramagnéticas. Eritrocitos: Ensayo Inmunocromatográfico de Membrana (ICMA). Valores de referencia: Suero: 5,9-24,8 ng/mL Deficiencia: < 4,0 ng/mL Eritrocitos: 280 – 790 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La deficiencia de folato puede presentarse por baja ingesta en la dieta, malabsorción gastrointestinal, utilización inadecuada por deficiencias enzimáticas o terapia antifólica, ingestión de alcohol y demanda exagerada de folatos como en el embarazo o en procesos de proliferación celular como en el cáncer. La deficiencia de folato puede provocar anemia megaloblástica y, en último término, problemas neurológicos graves. El alcoholismo, la hepatitis u otras enfermedades hepáticas pueden producir a su vez un gasto excesivo de folato. Los niveles de folato tanto en suero como en eritrocitos, se utilizan para evaluar el status de folato. El folato intraeritrocitario es el mejor indicador a largo plazo de las reservas de folato. Un valor bajo de folato intraeritrocitario puede indicar una deficiencia prolongada de folato. ÁCIDO HIALURÓNICO Código 862620F El ácido hialurónico es un glicosaminoglicano no ramificado que se encuentra ampliamente distribuido en el tejido conectivo y es producido principalmente por las células mesenquimales. Tiene varias funciones entre las que están: lubricante de las articulaciones, previene la invasión bacteriana y la de hidratante corporal interno. Se elimina rápidamente por el hígado. Manual de Procedimientos 11 43 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. Permita que la muestra se coagule completamente antes de separar el suero lo que debe hacerse antes de dos horas después de la recolección. No se aceptan muestras hemolizadas, ictéricas o lipémicas. La muestra es estable 10 días en refrigeración y un año congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible de 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático cuantitativo (EIA) Valor de referencia: 5,0-57,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La fibrosis hepática es prevalente en muchos pacientes que han tenido infecciones por los virus de la hepatitis B y C, en alcohólicos, en casos de hemocromatosis, talasemia y otras enfermedades que atacan el hígado La determinación del ácido hialurónico es uno de los mejores marcadores para evaluar cirrosis hepática y tiene muy buena sensibilidad para discriminar la cirrosis de otros estados de fibrosis. La concentración sérica es consistente con el estadio de la fibrosis y disminuye como respuesta a la terapia con Interferon en pacientes con hepatitis crónica por VHC. En pacientes con inflamación sinovial proliferativa, como la artritis reumatoidea, puede haber elevación del ácido hialurónico tanto en líquido sinovial como en el suero pero también puede ocurrir en otros tipos de enfermedades articulares como osteoartritis o artritis traumática. Algunos estudios han reportado elevación del ácido hialurónico en orina en pacientes con cáncer de vejiga. ÁCIDO HOMOVANÍLICO (HVA) Código 90310 El HVA es un metabolito final proveniente de la dopamina que es una de las más importantes catecolaminas endógenas junto con la epinefrina y la norepinefrina. Las catecolaminas se producen principalmente en las células cromafínicas de la médula suprarrenal, el cerebro y del sistema nervioso simpático. La dopamina se sintetiza principalmente en el SNC y actúa como neurotransmisor. Este compuesto se metaboliza a 3-metoxi-4-hidroxifenilacético (ácido homovanílico, HVA) por acción de la monoaminooxidasa y la catecol-O-metiltransferasa. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe evitar consumir té, café, alcohol y cigarrillo antes de la recolección y es preferible que no esté tomando alguna droga por lo menos 3 días antes del examen. Hay falsa elevación en pacientes que estén tomando L-Dopa. 44 Fundación Santa Fe de Bogotá Hay elevación fisiológica por disulfiran, verapamilo, piridoxina y reserpina. Hay interferencia analítica por aspirina. La muestra de elección es orina recolectada durante 24 horas, preservada con 10 mL de HCl 6M y debe mantenerse refrigerada durante la recolección y el envío. Para la determinación en niños se puede obtener orina de micción simple. La muestra de orina es estable 7 días en refrigeración y dos meses congelada a -20°C Para el diagnóstico de neuroblastoma puede ser satisfactoria una muestra simple si se relaciona con la excreción de creatinina. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica espectrofótometrica. Valor de referencia: Adultos: 3-8 mg/24 horas. Niños (µg/mg creatinina) <12 meses: 3-44 1-2 años: 5-42 2-5 años: 3-29 5-10 años: 1-19 10-15 años: 0-18 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se encuentran valores elevados en pacientes con neuroblastoma, feocromocitoma y gangliomas. También es útil en el diagnóstico de la disautonomía familiar (Síndrome Riley-Day) donde el HVA está aumentado y el ácido vanilmandélico (VMA) está disminuido. El resultado debe correlacionarse con la determinación del VMA especialmente en niños menores de 15 años. ÁCIDO LÁCTICO (L-LACTATO) Código 903111 El ácido láctico es un producto intermediario del metabolismo de los carbohidratos que se deriva principalmente de las células musculares y de los eritrocitos y es metabolizado en el hígado y en el corazón, por lo tanto los niveles del lactato sanguíneo reflejan tanto su producción como el metabolismo. El ácido láctico mantiene los niveles celulares del dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD). La deprivación severa de oxígeno a los tejidos conduce a acidosis láctica que se manifiesta por debilidad, estupor, fatiga y coma. Los niveles de lactato y piruvato sérico dan un índice de la severidad de falla circulatoria asociada a hipoxia tisular en diferentes estados clínicos. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe informar las drogas que esté tomando pues hay aumento fisio- Manual de Procedimientos 11 45 lógico por ingestión de aspirina, carbamazepina, fenobarbital, fenitoína y ácido valproico. La muestra debe tomarse con el paciente en ayunas, sin uso de torniquete y sin movimientos de contracción de la mano. Sangre total tomada en tubo con fluoruro de sodio u oxalato potásico como anticoagulantes para obtener plasma. El tubo debe mezclarse muy bien (invertirlo por lo menos 6 veces), mantenerse en hielo y enviarse rápidamente al laboratorio. El plasma debe separarse de los glóbulos rojos en los primeros 15 minutos después de la toma. Si se demora la separación los valores del lactato pueden aumentar en aproximadamente 10% después de la primera hora y hasta un 15% después de las dos horas. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente y 14 días en refrigeración . Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 3 horas a temperatura ambiente, 24 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20ºC Metodología: Colorimetría Valor de referencia: Plasma: 0.50- 2.2 nmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La concentración del ácido láctico en plasma tiene significado clínico en casos de acidosis láctica, choque hipovolémico, enfermedad hepática, tumores, cetoacidosis diabética, sepsis, intoxicaciones y ciertas deficiencias enzimáticas como en el caso de la deficiencia de la miofosforilasa o enfermedad de McArdLe. Pacientes con niveles por encima de 10,5 mmol/L tienen alta mortalidad.. Se ha reportado elevación del ácido láctico en hipoxia tisular, ejercicio muscular severo, enfermedades neoplásicas, defectos enzimáticos que afecten el metabolismo del piruvato y del lactato, desordenes neuromusculares, efectos de toxinas y sobredosis de drogas por ingestión o infusión de sorbitol, fructosa, metanol, etanol, salicilatos y fenformin. La prueba de estimulación para detectar deficiencia de miofosforilasa se realiza de la siguiente manera: 1. Colocar un catéter pericraneal en la vena antecubital del brazo. 2. Tomar una muestra de sangre para determinar ácido láctico basal. 3. Colocar el manguito del tensiómetro arriba del codo del paciente e inflarlo hasta que se obtenga presión de mercurio por encima de la presión arterial. 4. Hacer que el paciente empiece a inflar vigorosamente el balón de otro tensiómetro para llevar la columna de mercurio hasta el final de la escala. Este ejercicio produce dolor en el brazo por lo cual debe estimularse al paciente para que no lo suspenda pues es definitivo para obtener resultados confiables de la prueba. 5. Después de un minuto de este ejercicio se desinfla el tensiómetro y se to- 46 Fundación Santa Fe de Bogotá man muestras 1,3,6 y 10 minutos post ejercicio. 6. La prueba se considera normal cuando hay un aumento 3-5 veces del ácido láctico en las dos primeras muestras post ejercicio y disminución gradual a nivel basal en las muestras restantes. 7. En pacientes con Enfermedad de McArdLe el ácido láctico post ejercicio prácticamente no se eleva más de 1,5 veces sobre el valor basal. En la meningitis bacteriana se observa aumento de los niveles de lactato en el LCR, asi como en la hipocapnia, hidrocefalia, abscesos cerebrales, isquemia cerebral y cualquier condición clínica asociada a falta de oxigenación cerebral y/o presión intracraneal aumentada. ÁCIDO METILMALÓNICO Código 862608F El ácido metilmalónico (MMA) es un ácido dicarboxílico derivado de un metilado del malonato que se produce cuando los aminoácidos corporales se destruyen. La concentración del MMA se eleva principalmente en el suero en pacientes afectados con una enfermedad genética de tipo metabólico llamada acidemia metilmalónica y en pacientes con deficiencia nutricional de vitamina B12 o ácido fólico. De las dos entidades la más frecuente es la debida a la deficiencia nutricional por mala absorción intestinal, problemas digestivos o malos hábitos dietéticos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero que debe congelarse en dos viales plásticos. La muestra es estable 1 mes a temperatura ambiente, refrigerada y/o congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de gas/Espectrometría de masa Valor de referencia: ≤ 0,4 μmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del MMA es útil para la evaluación de niños donde se sospeche acidemia metilmalónica. . Niveles extremadamente altos (>20μmol/L) son indicativos de este desorden metabólico innato. También es útil para evaluar pacientes con signos y síntomas por deficiencia de vitamina B12. Varios estudios han indicado que la prueba en suero o en orina es un indicador más confiable a nivel tisular de deficiencia de cianocobalamina que la determinación de los niveles de vitamina B12. Se observan aumentos moderados (0,4 – 1,0 μmol/L) en pacientes con insuficiencia renal. También se encuentran niveles elevados en embarazo, anemia perniciosa y el 5-15% de pacientes ancianos. Manual de Procedimientos 11 47 ÁCIDO MICOFENÓLICO Código 862711F El ácido micofenólico es un medicamento inmunosupresor de tipo antibiótico que se obtiene de la bacteria Penicillium stoloniferum y especies relacionadas. Se utiliza junto con la ciclosporina y los corticoides para prevenir el rechazo del órgano en los pacientes trasplantados renales. Condiciones del paciente y/o de la muestra Enviar resúmen de historia clínica Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y dos semanas congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución Rango terapéutico: 1,0-5,0 mg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La concentración máxima de la droga se alcanza a las 0,5 a 2,5 horas después de la administración del micofenolato mofetilo en pacientes con trasplante renal y cardíaco, 5-6 días post-trasplante. La vida media es 11-26 horas. ÁCIDO ORÓTICO Código 908002 El ácido orótico, llamado también ácido pirimidine-carboxilico, es un compuesto heterocíclico ácido intermediario en la biosíntesis de la pirimidina. Se aumenta en desordenes que comprometen el ciclo de la urea y en los que comprometen el metabolismo de la arginina. Entre los errores congénitos del metabolismo está la aciduria orótica hereditaria que es un trastorno raro causado por una deficiencia grave de la enzima uridina 5-monofosfato sintasa que se trasmite según un patrón autosómico recesivo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Enviar resúmen de historia clínica. Muestra de orina de micción simple que es estable 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles después de la fecha de envío. Metodología: Colorimetría 48 Fundación Santa Fe de Bogotá Valor de referencia: Menos de 2 semanas de nacido: 1,4-5,3 mmol/mol de creatinina De 2 semanas-1 año: 1,0-3,2 mmol/mol de creatinina De 2 - 10 años: 0,5-3.3 mmol/mol de creatinina Mayor o igual a 11 años: 0,4-1,2 mmol/mol de creatinina Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del ácido orótico es útil para distinguir entre las diferentes causas de amonio elevado (hiperamonemia). La hiperamonemia es característica de todos los trastornos del ciclo de la urea, pero el ácido orótico solo se eleva en algunos de ellos. El ácido orótico también se eleva en los defectos de trasporte de los aminoácidos dibásicos (intolerancia lisinurica proteica, hiperornitinemia, hiperamonemia y el síndrome homocitrilinuria) y está muy elevado en la aciduria orótica hereditaria ÁCIDO PIRÚVICO Código 903112 El ácido pirúvico, metabolito intermediario, es un producto de la vía EmbdenMeyerhof, que oxida la glucosa a compuestos de tres carbonos. Cuando las células en las que se lleva a cabo ésta vía están suficientemente oxigenadas, el piruvato es oxidado en la mitocondria a CO2 y H2O por el ciclo de Krebs; en cambio en condiciones de anoxia tisular la PO2 y la reducción de NAD/NADH disminuyen y el piruvato es reducido a lactato, lo que aumenta la relación NAD/NADH y permite continuar el metabolismo anaeróbico de la glucosa. El ácido pirúvico juega un papel importante en la unión del metabolismo de los carbohidratos y los aminoácidos con el ciclo del ácido tricarboxilico, la vía de oxidación beta de los ácidos grasos y el complejo de la cadena respiratoria de las mitocondrias. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y debe enviarse resumen de historia clínica. El tubo especial con ácido metafosfórico al 5% se solicita al CIBI y se debe descongelar en el momento de la toma de la muestra. Muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulantes como heparina de sodio o litio, EDTA o fluoruro, mezclar bien y tomar una alícuota de 200 µl de la sangre y agregar a un tubo especial, enfriado, que contiene ácido metafosfórico al 5% y mezclar vigorosamente hasta que la muestra tome coloración café. La muestra es estable 1 hora refrigerada y 6 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Espectrofotometría de punto final Manual de Procedimientos 11 49 Valor de referencia: 0,034 – 0,102 mmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del ácido pirúvico es útil para detectar posibles trastornos del metabolismo mitocondrial cuando se usa en conjunto con el lactato tomado al mismo tiempo para determinar la relación lactato:piruvato (L:P). La relación L:P está elevada en varios de los trastornos de la cadena respiratoria de las mitocondrias. Se observa una relación L:P disminuida en los trastornos hereditarios del metabolismo del piruvato como la deficiencia del complejo piruvato dehidrogenasa. ÁCIDO ÚRICO Código 903801 ÁCIDO ÚRICO EN ORINA DE 24 H Código 903802 ÁCIDO ÚRICO EN ORINA (MICCIÓN SIMPLE) Código 903802-2 Los uratos son sintetizados por el organismo y también se obtienen de la dieta. El 75% se elimina por vía renal y el 25% por vía intestinal. Los uratos se filtran libremente por el glomérulo y aproximadamente el 98% es reabsorbido por el túbulo proximal. Aproximadamente el 8% de la carga filtrada se excreta en la orina. El ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se debe averiguar que drogas está tomando el paciente pues hay aumento fisiológico por el uso de agentes antineoplásicos, ácido etacrinico, adrenocorticosteroides, hidroclorotiazida, ciclosporina, pirazinamida, espironolactona, teofilina, indapamide, prednisona, propanolol, triamterene, warfarina, espironolactona y ácido acetilsalicílico. Muestra de suero o de sangre total tomada con anticoagulantes como heparina de amonio para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 6 meses congeladas a -20°C. La muestra de orina es estable 7 días en refrigeración y/o congelada. Recolección de orina durante 24 horas en frasco con 10 mL de hidróxido de sodio al 5% como preservativo para mantener la alcalinidad. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo. 50 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Suero Hombres: 4,8 – 8,7 mg/dL Mujeres: 2,6 – 8,0 mg/dL Orina 250-750 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles elevados en suero o plasma se acompañan generalmente de niveles elevados en orina. La principal indicación de la prueba es en el diagnóstico de hiperuricemia (gota) como resultado del aumento en la síntesis de las purinas. También hay niveles elevados en leucemias y policitemia por aumento del metabolismo de las nucleoproteínas, por ingestión de alimentos ricos en nucleoproteínas, en pacientes con disminución de la función renal, en ciegos y alcohólicos, en psoriasis y en desnutrición severa. ÁCIDO VALPROICO Código 905201 ÁCIDO VALPROICO LIBRE Código 862679F Es una droga de amplio espectro usada sola o en combinación con otras drogas, para el tratamiento de estados convulsivos. A niveles terapéuticos se han reportado casos de falla hepática y un síndrome parecido al Reye por lo cual es necesario controlar los niveles sanguíneos durante los primeros seis meses de tratamiento. El ácido valproico circula en la sangre en el 85 al 90% unido a proteínas. En casos de uremia o cuando se administra con otras drogas que también están altamente unidas a proteínas, como fenitoína, el ácido valproico es desplazado de las proteínas lo que da lugar a que la fracción libre del ácido sea mayor que está unida. Condiciones del paciente y/o de la muestra El tiempo habitual de muestreo debe ser inmediatamente antes de una dosis. En la solicitud del examen se debe anotar dosis y hora de administración de la droga. Se debe anotar que otros anticonvulsivantes está tomando el paciente pues la fenitoína, carbamazepina y la primidona pueden aumentar la eliminación del ácido valproico mediante la inducción de enzimas hepáticas lo que se traduce en niveles séricos bajos. Muestra de suero tubo tapa roja sin aditivos. La muestra es estable 2 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20º. No se debe Manual de Procedimientos 11 51 utilizar tubo con gel separador. Los efectos tóxicos tales como depresión del sistema nervioso central, trombocitopenia y daño hepático, se presentan con niveles por encima de 100-125 µg / mL. La prueba de ácido valproico libre se procesa en Estados Unidos y el ácido valproico total se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 1o días hábiles a partir de la fecha de envío.. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) para valproico total Inmunoanálisis enzimático (EIA) para el ácido valproico libre Rango terapéutico: Total: 50-100 µg/mL Libre: 4,8-17,3 mg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El tratamiento con ácido valproico se utiliza para el control de estados convulsivos simples o complejos y en terapia combinada con otros anticonvulsivantes para el control de convulsiones generalizadas. Debido a grandes diferencias individuales en las dosis requeridas para alcanzar terapia efectiva y con el fin de evitar los efectos tóxicos de la droga por sobredosis es necesario medir frecuentemente los niveles séricos. Debido a que la toxicidad de la droga está directamente relacionada con la fracción libre es necesario en algunos casos determinar la fracción libre, como en uso concomitante con otras drogas, hipoalbuminemia, embarazo, falla renal o hepática y en personas ancianas. ÁCIDO VANILMANDELICO (VMA) Código 903115 El VMA urinario es el metabolito más importante de las catecolaminas (epinefrina y norepinefrina) junto con el ácido homovanilico (HVA) y la dopamina. EL VMA es un indicador útil de la producción endógena de las catecolaminas por las células cromafínicas de la médula adrenal y por el sistema nervioso simpático. La cantidad del VMA excretado está aumentada en pacientes con aumento en la síntesis de las catecolaminas y por esto es un marcador para tumores de origen neuroendocrino, neuroblastoma, feocromocitoma y tumores de la cresta neural en niños. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe abstenerse de ingerir alimentos que contengan vainilla así 52 Fundación Santa Fe de Bogotá como los que tengan fenoles aromáticos tales como café, banano, te y chocolate, por lo menos 5 días antes de la prueba. Debe informar que drogas está tomando debido a que hay interferencia analítica con aumento por anileridine, ácido nalidixico, fenilsulftaleína, metocarbamol y aspirina. Hay aumento por efecto fisiológico por clorpromazina, epinefrina, glucagon, histamina, isoprotenerol, L-dopa, nitroglicerina, reserpina y rauwolfia. Recolectar orina de 24 horas en frasco con 10 mL de HCl 6N como preservativo y mezclar bien el contenido cada vez que se añada una nueva micción. Mantener la orina refrigerada durante el tiempo de la recolección. En niños se puede obtener orina de micción simple. Anotar el total del volumen recolectado antes de obtener la alícuota para la prueba. La muestra de orina es estable 7 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20°C La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Colorimétrico (Método de Pisano). Valor de referencia: Adultos: 2,0-14,0 mg/24 horas Niños: 0-12 meses: 0,0 – 35 μg/mg creatinina 1-2 años: 0,0 – 30 μg/mg creatinina 2-5 años: 0,0 – 16 μg /mg creatinina 5-10 años: 0,0 – 14 μg/mg creatinina 10-15 años: 0,0 – 10 μg/mg creatinina Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El feocromocitoma está asociado con niveles plasmáticos y urinarios marcadamente elevados de catecolaminas y de sus metabolitos urinarios VMA, metanefrinas y HVA. También se encuentran niveles elevados en ganglioneuroma, neuroblastoma y ganglioneuroblastoma. Más del 90% de los pacientes con neuroblastoma tienen niveles elevados de VMA y HVA por lo cual ambas pruebas deben hacerse en estos pacientes. Una prueba más específica y más fácil de realizar para el diagnóstico del feocromocitoma es la de las metanefrinas pues los niveles elevados de VMA son consistentes con éste tumor pero no diagnósticos. La prueba también es útil para el seguimiento post-quirúrgico de pacientes para determinar recidivas. Manual de Procedimientos 11 53 ÁCIDOS BILIARES TOTALES Código 862651F Los ácidos biliares se forman en el hígado derivados del colesterol, se conjugan principalmente con los aminoácidos glicina y taurina formando las sales biliares que se almacenan y se concentran en la vesícula biliar; se secretan al intestino después de la ingestión de los alimentos para facilitar la digestión pues producen emulsificación de las grasas ingeridas. El 90% de los ácidos biliares son reabsorbidos durante la fase absortiva de la digestión. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, refrigerada y congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría Valor de referencia: ≤ 10,1 μmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para determinar la eficiencia de la depuración hepática pues es un indicador sensible de enfermedad del hígado. Los ácidos biliares se encuentran elevados en cirrosis, hepatitis aguda y crónica, colestasis, trombosis de la vena porta, síndrome de Budd-Chiari, colangitis, enfermedad de Wilson y en hemocromatosis. Los niveles totales de ácidos biliares son el indicador más sensible para supervisar la eficacia del tratamiento con interferón de pacientes con hepatitis C crónica. Es de utilidad para evaluar la colestasis obstétrica en mujeres embarazadas. Los síntomas de la colestasis incluyen prurito persistente en el tercer trimestre del embarazo y los posibles riesgos para el feto, muerte fetal, parto prematuro y el sangrado. ÁCIDO GRASOS LIBRES Código 862654F Los ácidos grasos libres o no-esterificados constituyen el 95% de los ácidos grasos que se encuentran en la sangre. Están unidos a proteínas y su concentración se eleva después de una comida rica en grasas pero tienden a disminuir después de una comida ordinaria. Hay descarga de ácidos grasos libres por hormonas lipoactivas como epinefrina, norepinefrina, glucagón, tirotropina y ACTH y por tumores que las produzcan. 54 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe tener un ayuno de 12-14 horas pero no mayor, pues en ayuno muy prolongado o por inanición los ácidos grasos se triplican en sangre. El paciente no debe haber ingerido alcohol durante las 24 horas previas al examen. Muestra de suero el cual debe congelarse lo más rápidamente posible con el fin de eliminar la generación de ácidos grasos libres a partir de los triglicéridos por la acción de las lipasas séricas. La muestra es estable durante 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles después de la fecha de envío. Metodología: Técnica enzimática colorimétrica Valores de referencia: Niños. Adultos: < 30 días: ≤ 2,30 mmol/L < 12 meses: 0,50 – 1,60 < 8 años: 0,60 – 1,50 < 18 años: 0,20 – 1,10 0,07 – 0,88 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para evaluar el estado metabólico de personas con endocrinopatías y detectar presencia de feocromocitoma y otros tumores secretores de glucagón, TSH y ACTH. Niveles anormalmente elevados de ácidos grasos libres están asociados con diabetes mellitus mal controlada. Los ácidos grasos libres pueden contribuir a la resistencia a la insulina y al desarrollo de la diabetes tipo II. Los ácidos grasos libres también están implicados como un futuro factor de riesgo independiente para la enfermedad cardíaca. ÁCIDOS ORGÁNICOS DE CADENA CORTA Código 908001 ÁCIDOS ORGÁNICOS DE CADENA CORTA EN ORINA Código 908001-2 ÁCIDOS ORGÁNICOS DE CADENA CORTA EN SUERO Código 908001-1 Los ácidos orgánicos comprenden metabolitos claves de casi todas las vías metabólicas del metabolismo intermediario, por lo que el análisis de los mismos ofrece información sobre el estado de dichas vías. Los ácidos orgánicos ocurren como intermediarios fisiológicos en una variedad de vías metabólicas. Manual de Procedimientos 11 55 Las acidurias orgánicas constituyen un grupo de trastornos en los cuales están bloqueadas una o más de estas vías, lo que resulta en una deficiencia de productos normales y en una acumulación anormal, en el organismo, de metabolitos intermediarios (ácidos orgánicos) que se excretan en la orina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Enviar historia clínica del paciente. Muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para analizar la sangre total. La muestra es estable 8 horas refrigerada y 2 semanas congelada a -20°C. Gotas de sangre en papel de filtro que deben secarse a temperatura ambiente. La muestra es estable 6 meses a temperatura ambiente. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 15 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de gases acoplada a espectrofotometría de masa Valor de referencia: Reporte individual según el caso Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Las acidurias orgánicas típicamente se presentan, bien sea, como una enfermedad que amenaza la vida del niño en los primeros años o como un inexplicado retardo en su crecimiento con episodios intercurrentes de descompensaciones metabólicas en los niños de mayor edad. La presencia de acidosis metabólica severa y persistente de origen indeterminado acompañada de otras manifestaciones clínicas indica la posibilidad de acidurias orgánicas que pueden ser detectadas con la determinación de los ácidos orgánicos de cadena corta. ACILCARNITINA Código 862667F La deficiencia de la carnitina-acilcarnitina translocasa (CAT) es un desorden autosómico recesivo, raro, de la oxidación de los ácidos grasos que impide la descomposición de estos en el organismo. Este desorden se presenta típicamente en el periodo neonatal con hipoglicemia hipocetónica severa, hiperamonemia, anormalidades cardíacas y muerte prematura. También puede presentarse en una forma más leve a una mayor edad. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total con anticoagulante como heparina de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 1 mes congelada a -20ºC La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 15 días hábiles después de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de gases acoplada a espectrofotometría de masa. 56 Fundación Santa Fe de Bogotá Valor de referencia: Reporte individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para investigar la presencia de la deficiencia de CAT ANTICUERPOS ANTI COXIELLA BURNETTI Código 862566F La bacteria Coxiella burnetii es la responsable de la fiebre Q, zoonosis de distribución mundial. La fiebre Q es una enfermedad sistémica que puede producir neumonía atípica, síndrome febril, hepatitis o endocarditis. Puede infectar un amplio rango de animales, además de numerosas especies de garrapatas. Generalmente los humanos adquieren la fiebre Q al inhalar aerosoles o polvo contaminados. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Coxiella Burnetti anticuerpos IgG fase 1/2: Título < 1:16 IgM fase 1/2: Título < 1:16 IgA fase 1/2: Título < 1:16 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de la fiebre Q. La presencia del antígeno de fase 2 indica enfermedad aguda y de fase 1 indica enfermedad crónica. Al inicio de la enfermedad hay elevación de títulos de anticuerpos IgG y en la 8ª semana se observa la máxima elevación del título de anticuerpos fase 2, permaneciendo elevado por un año o más. En hepatitis granulomatosa crónica los títulos IgG para antígenos fase 1 y 2 están elevados. ACTINOMYCES, CULTIVO Código 901201 Actinomyces israelii es un bacilo Gram-positivo, anaeróbico, no esporulado, delicadamente ramificado que hace parte de la flora normal de la cavidad oral pero puede colonizar también el tracto gastrointestinal y el genital femenino. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra tomada asépticamente del sitio de la lesión y preservada en medio anaeróbico para ser llevada al laboratorio. El informe final del cultivo se hace a los 30 días de haber sembrado la muestra Manual de Procedimientos 11 57 Metodología: El espécimen se inocula en agar sangre y en caldo de tioglicolato y se incuba bajo condiciones anaeróbicas Valor de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Dada la localización normal de la bacteria en la nariz y en la garganta, la actinomicosis aparece más comúnmente en la cara y el cuello. Los síntomas ocurren cuando la bacteria entra en los tejidos faciales después de un traumatismo, cirugía o infección. Un desencadenante común es el absceso dental o la cirugía oral. Una vez en el tejido, forma un absceso, produciendo una protuberancia dura de color rojo intenso a rojo púrpura, a menudo en la mandíbula, de donde proviene su nombre común de “mandíbula abultada”. Finalmente, el absceso irrumpe a través de la superficie de la piel y produce un conducto sinusal que drena hacia el exterior. Sin embargo, la infección algunas veces puede presentarse en el tórax (actinomicosis pulmonar), el abdomen, la pelvis u otras áreas del cuerpo. La infección no es contagiosa. La infección también se ha observado en algunas mujeres que tienen dispositivo intrauterino (DIU) para prevenir el embarazo. ACTIVIDAD ADAMTS 13 Código 862772F La púrpura trombocitopénica trombótica (PTT) es una rara microangiopatía trombótica, congénita o adquirida, potencialmente fatal caracterizada por una variedad de síntomas como trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática, síntomas neurológicos, fiebre y disfunción renal. La ADAMTS 13 es una enzima desintegrina y metaloproteasa que divide el factor de vonWillebrand (vWF). Es secretada a la sangre y se encarga de degradar los multímeros del vWF disminuyendo su actividad. La disfunción ADAMTS13 ha sido implicada en la patogénesis de la púrpura trombocitopénica trombótica (PTT). Este desorden ocurre con mayor frecuencia en mujeres y, en el 13 por ciento de ellas, se asocia al embarazo. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante como citrato de sodio para obtener plasma pobre en plaquetas. La muestra se debe centrifugar dos veces pues la contaminación plaquetaria altera el resultado y es estable 14 días congelada a -70ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Resonancia fluorescente de transferencia de energía (FRET) Valores de referencia: Actividad ≥ 70% 58 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico de PTT congénita o adquirida. Los bajos niveles de ADAMTS13 en pacientes con PTT adquirida parecen ser causados por la presencia de anticuerpos IgG circulantes contra ADAMTS13. En el laboratorio, aproximadamente el 80% de estos anticuerpos inhiben la actividad de ADAMTS13, y otras pruebas de laboratorio no pueden detectar el 20% restante de anticuerpos clínicamente importantes. ADENOSIN DEAMINASA (ADA) Código 903401 La ADA participa en el catabolismo de las purinas catalizando la deaminación de adenosina para formar inosina y NH3. Su actividad biológica fundamental está relacionada con proliferación y diferenciación linfocítica. Niveles enzimáticos elevados se encuentran en pacientes donde la inmunidad celular se ha estimulado, teniendo más relación con el estado de maduración que con el número de linfocitos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total o líquido biológico tomados en tubo con o sin anticoagulante para obtener suero o plasma. Las muestras no deben estar hemolizadas debido a que los eritrocitos tienen alto contenido de ADA. La muestra es estable 4 horas a temperatura ambiente y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Espectrofotometría Valores de referencia: Nivel compatible con LCR: > 5,0 U/L a 37ºC Líquido pleural: > 32,0 U/L tuberculosis en: Líquido pericárdico: > 96,0 U/L Líquido peritoneal: > 36,0 U/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La cuantificación de la enzima ADA en suero y líquidos corporales es de gran ayuda diagnóstica en tuberculosis extrapulmonar pues se encuentran niveles significativamente elevados comparativamente con otras entidades que produzcan efusiones de líquidos en cavidades orgánicas. Como ayuda diagnóstica en tuberculosis pleural se recomienda realizar la prueba en suero y líquido pleural y establecer la relación Líquido/suero la cual si es mayor de 1,7 es compatible con tuberculosis. La ADA se libera en el suero de pacientes con diversas patologías e infecciones, incluyendo hepatitis viral, mononucleosis infecciosa, fiebre tifoidea, tumores malignos, leucemias, cirrosis, fiebre tifoidea y tuberculosis. Por ésta razón es importante, para tuberculosis extrapulmonar hacer la prueba también en el Manual de Procedimientos 11 59 líquido correspondiente. En el líquido cefalorraquídeo (LCR) los niveles de ADA por encima de 9,0 U/L son compatibles con meningitis tuberculosa mientras que niveles por debajo de éste valor prácticamente la excluyen. Es muy útil en el diagnóstico de hipertensión portal (ascitis) asociada con cirrosis hepática. Los niveles elevados de ADA en líquido pleural, están asociados con tuberculosis, aunque el incremento en la actividad de ADA puede tener su origen en efusiones debidas a varias causas, incluyendo TBC, infecciones bacterianas, enfermedades reumatológicas y desordenes linfoproliferativos. ADENOVIRUS ANTICUERPOS TOTALES Código 862576F ADENOVIRUS, ANTÍGENO Código 906301 ADENOVIRUS, EN LCR Código 862699F ADENOVIRUS, PCR Código 862660F ADENOVIRUS, ANTICUERPOS IgG Código 906201 ADENOVIRUS, ANTICUERPOS IgM Código 906203 El grupo de los adenovirus humanos comprende más de 51 serotipos que pertenecen a la familia Adenoviridae, género Mastadenovirus y que se agrupan en 6 subgenéros de la A-F. Las manifestaciones clínicas y la epidemiología de esta familia de virus es muy variada pues producen infecciones respiratorias altas y bajas, conjuntivitis, cistitis hemorrágica, uretritis cervicitis y gastroenteritis. Aproximadamente el 10% de las neumonías y el 5% de las infecciones respiratorias agudas en niños menores de 5 años son debidas a enterovirus. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente, 2 meses refrigerada y 1 año congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Muestra de materia fecal fresca y entregada rápidamente al laboratorio. La prueba del antígeno se procesa en laboratorio de referencia local y el resulta- 60 Fundación Santa Fe de Bogotá do está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fijación de complemento para los anticuerpos totales Prueba rápida de inmunocromatografía para el antígeno en materia fecal Valores de referencia: Anticuerpos totales: ≤ 1:8 Antígeno: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El cultivo es el estándar de oro para el diagnóstico de la infección por adenovirus. Sin embargo debido a que es necesario esperar 3 semanas para obtener el resultado del cultivo, con la prueba serológica de los anticuerpos se obtienen resultados más rápidos pero es menos sensible. La detección del ADN viral por PCR es un medio diagnóstico rápido, específico y con muy buena sensibilidad. ADHERENCIA DE NEUTRÓFILOS Código 864772F En el proceso de fagocitosis es importante el mecanismo de adhesión de las células fagocíticas al endotelio vascular, ya que se sabe que el neutrófilo se encuentra en un estado de “patrullaje” permanente y que el mecanismo de adherencia esta mediado por una serie de citocinas y factores químicos que lo inducen a llevar a cabo el proceso de fagocitosis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con heparina para aislar los neutrófilos polimorfonucleares (PMN). La prueba se toma y se procesa en el laboratorio de apoyo de diagnóstico con cita previa y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Método citoquímico de Lowry que aísla las células por gradiente de densidad. Valores de referencia: Concentraciones de proteínas 2-16 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado En ensayos realizados in vitro se ha informado que los PMN de individuos con deficiencias en la adhesión tienden a mostrar pérdida de la habilidad para adherirse a la superficie del plástico. Esto se relaciona in vivo con una disminución de la capacidad de los fagocitos para difundir a la zona del daño, formar seudópodos y por consiguiente fagocitar las partículas extrañas. Además la literatura informa una correlación directa entre los ensayos automatizados que miden cantidad de células con los que determinan la concentración proteica. La cualidad adhesiva se amplifica mediante la determinación de proteínas totales. Manual de Procedimientos 11 61 ADIPONECTINA Código 904704F La adiponectina (también conocida como Acrp30, Adiponectin30, AdipoQ, apM1 o GBP28) es una citoquina (hormona) secretada por el tejido adiposo, que regula el metabolismo energético, estimula la oxidación de ácidos grasos, reduce los triglicéridos plasmáticos y mejora el metabolismo de la glucosa mediante aumento de la sensibilidad a la insulina. La adiponectina es una de las proteínas plasmásticas más abundantes, constituyendo el 0,01% de las proteínas plasmáticas totales. Las concentraciones plasmáticas de adiponectina están entre los 5-10 μg/mL y las mujeres presentan niveles de esta hormona superiores a los hombres Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. Ayuno estricto. La muestra es estable 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La muestra se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 15 días a partir de la fecha envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Adultos 5,1 -11,5 μg/mL Niños obesos Media Índice de Masa Corporal IMC (27) 20,0-39,0 μg/mL Media IMC (12,2) 43,9-22,0 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diversos estudios han comprobado que la adiponectina aumenta la sensibilidad a la insulina en diversos tejidos como hígado, músculo esquelético y tejido adiposo. Los niveles circulantes de adiponectina son inversamente proporcionales al índice de masa corporal (IMC) y el porcentaje de grasa corporal. Las concentraciones de adiponectina se encuentran reducidas en la obesidad, diabetes mellitus de tipo 2 y la enfermedad coronaria arterial. ADRENAL AUTOANTICUERPOS Código 906405 La insuficiencia suprarrenal autoinmune se asocia, con una frecuencia del 1020%, a falla ovárica prematura. 62 Fundación Santa Fe de Bogotá Este trastorno se debe a anticuerpos que reaccionan contra antígenos de la glándula suprarrenal y gónadas. Enzimas de la familia del citocromo P450, como la de corte de la cadena lateral del colesterol (SCC), 21-hidroxilasa y una proteína de peso molecular de 51 KDa, han sido descriptas como los principales autoantígenos presentes en pacientes con enfermedad de Addison y el “síndrome poliendocrino autoinmune tipo I” (APS-I). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescensia indirecta (IFI) Valores de referencia: Título ≤ 1:2 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba evalúa insuficiencia suprarrenal y enfermedad de Adisson. El 40-70% de pacientes con enfermedad idiopática de Adisson presenta anticuerpos contra las células de la corteza suprarrenal; igualmente sucede en 7- 18% en enfermedad tuberculosa de Adisson y en el 1% de pacientes normales. AGLUTININAS FRÍAS (Crioaglutininas) Código 906901 Las aglutininas frías son autoanticuerpos, predominatemente IgM y generalmente de especificidad anti-I que aglutinan fuertemente a los eritrocitos a temperaturas de 250C o menos. Pueden producir anemia hemolítica autoinmune cuyo síndrome clínico tiene un espectro amplio pues puede ir desde anemia severa hasta enfermedad asintomática con presencia de autoanticuerpos a eritrocitos como la única manifestación. Hay dos clases de anticuerpos (IgG/IgM) que pueden producir la anemia y tienen propiedades biológicas y clínicas importantes; los anticuerpos IgM son los que producen la anemia hemolítica de tipo frio o llamada también síndrome de aglutininas frias; los de tipo IgG producen la anemia llamada de tipo caliente. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubos precalentados a 37ºC sin anticoagulante y sin gel separador. Inmediatamente colocar los tubos a 37ºC, dejar retraer el coágulo por una hora, centrifugar y separar el suero. Las crioaglutininas pueden interferir con la determinación del grupo sanguíneo, Manual de Procedimientos 11 63 las pruebas de compatibilidad, el recuento instrumental de células sanguíneas y pueden impedir el hacer un buen extendido de sangre periférica Metodología: Aglutinación Valores de referencia: Normal ≤ 1:32 Neumonía atípica ≥ 1:32 Positivo para Mycoplasma ≥ 1:256 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La presencia de aglutininas frías (crioaglutininas) puede presentarse en infecciones, especialmente neumonía atípica por micoplasma, infección viral, estafilocócica o malárica. Títulos altos pueden encontrarse en enfermedad hepática crónica, desordenes linfoproliferativos, leucemia mieloide crónica, macroglobulinemia de Waldenström, mononucleosis infecciosa, enfermedades de colágeno vascular, complejos inmunes y en ciertas enfermedades virales. . Se puede presentar un resultado falso positivo en embarazo. La prueba no se recomienda para el diagnóstico de neumonía atípica por Mycoplasma pneumoniae por no ser específica y porque ya hay disponibilidad para determinar cuantitativamente anticuerpos IgG e IgM a Mycoplasma pneumoniae. AGREGACIÓN PLAQUETARIA (ADP) Código 902002 CURVA Código 902003 La agregación plaquetaria es el fenómeno que se produce tras la adhesión de las plaquetas al colágeno en el cual las plaquetas se aglomeran entre sí por acción del ADP liberado para formar un trombo blanco. La agregometría es una técnica utilizada para estimar la cinética de la agregación de las plaquetas por medio de turbidimetría o densidad óptica. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe informar que drogas está tomando pues la agregación está aumentada con la aplicación de heparina y por nicotina. Se disminuye por aspirina, azlocilina, captopril, carbamato, carbenicilina, cloroquina, clorpromazina, clofibrato, ciproheptadina, dextran, dipiridamole, diuréticos, hidroxicloroquina, nifedipina, nitrofurantoína, antiinflamatorios no esteroides, penicilina, fentolamina, piperacilina, propanolol, prometazina, prostaglandina E1, piridinol, sulfipirazona, antidepresivos tricíclicos, agentes anestésicos volátiles. El paciente debe suspender los siguientes medicamentos 8 días antes de la toma de la muestra 64 Fundación Santa Fe de Bogotá de acuerdo con la autorización del médico tratante: aspirina, antihistamínicos, ibuprofeno, clopidogel, gentamicina y corticosteroides. Debe tener dieta baja en grasa 24 horas y ayuno de 12-14 horas antes de la toma de la muestra. El recuento de plaquetas debe ser mayor de 100.000/μL. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio al 3,2% como anticoagulante. La muestra es estable por 4 horas a temperatura ambiente. Metodología: Agregometría de densidad óptica. Valores de referencia: Ver reporte Utilidad de la prueba e interpretación del resultado En general una agregación plaquetaria anormal está asociada con: 1. Desordenes de las plaquetas debido a deficiencia de receptores de membrana de glicoproteínas, deficiencia en el pool de almacenamiento o deficiencia en la liberación de ADP. 2. Carencia de proteínas plasmáticas que aseguren la interacción de las plaquetas con la pared del vaso como factor de von Willebrand, fibrinógeno, fibronectina. 3. Presencia de metabolitos anormales y componentes del plasma en uremia, disproteinemias, y enfermedad cardiovascular diseminada. 4. Desordenes cardiovasculares del colágeno (Marfan, osteogénesis imperfecta). 5. Desordenes mieloproliferativos (trombocitopenia esencial, policitemia vera, etc). ALANINO AMINO TRANSFERASA (ALT/SGPT) Código 903866 ASPARTATO AMINO TRANSFERASA (AST/SGOT) Código 903867 La ALT/SGPT cataliza la transferencia reversible del grupo amino de la alanina a alfa-cetoglutarato. Su alto contenido en el hígado, comparado con su baja concentración en otros tejidos, hace que su determinación sea de valor en el estudio de la enfermedad hepática. La AST/SGOT cataliza la transferencia reversible del grupo amino del aspartato a alfa-cetoglutarato. Se encuentra en tejidos cardíaco, hepático, musculoesquelético, renal y cerebral. Por mucho tiempo se creyó que su alto contenido en el miocardio la hacía un marcador específico para el infarto del miocardio pero su elevación en necrosis hepática aguda ha limitado su uso como enzima cardíaca. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada con anticoagulantes como heparina Manual de Procedimientos 11 65 de amonio, litio o sodio para obtener plasma. Las muestras son estables 72 horas a temperatura ambiente y 1 semana refrigeradas. Metodología: Cinética enzimática Valores de referencia: Adultos: 15 – 41 U/L Hombres: 1 a 6 años: 22 - 58 U/L 6 – 10 años: 22 – 44 U/L 10 – 20 años: 13 – 38 U/L Mujeres: 1 a 6 años: 18 – 63 U/L 6 – 10 años: 21 – 36 U/L 10 – 20 años : 14 37 U/L La ALT se eleva significativamente en hepatitis (viral, tóxica etc) y necrosis hepática de diferente etiología y en menor nivel en cirrosis, ictericia obstructiva, carcinoma metastásico, hepatitis crónica, congestión hepática y colestásis intrahepática orgánica o por drogas. Puede haber elevación ligera en infarto del miocardio y pancreatitis aguda. La AST se eleva también en las condiciones mencionadas anteriormente pero la elevación en el infarto del miocardio es más significativa (tres veces más que la ALT) y sucede 36 a 48 horas despues del inicio de los síntomas. Hay aumento fisiológico de la ALT por acetaminofén, ácidos aminobenzoico, valproico, aminosalicílico, amiodarona, esteroides anabólicos, cefalosporinas, clorotiazidas, enflurano, halotano, ciclofenil dietiletilbestrol, haloperidol, heparina, metandrostelona, metildopa, anticonceptivos orales, fenotiazinas, fenilbutazona, propiltiuracilo y tolbutamida. ALBÚMINA Código 903803 Metodología espectrofotometría de punto final a tiempo fijo ALBÚMINA EN ORINA DE 24 H Código 903804 Ver Proteínas totales………………pag……………..431 66 Fundación Santa Fe de Bogotá ALCOHOL ETÍLICO (ETANOL) Código 905706 El etanol es una de las sustancias de abuso que más se consume en el mundo. Es el agente activo de la cerveza, vino, vodka, whisky, ron y muchos otros licores. Actúa como un depresor del sistema nervioso central de una manera similar a como lo hacen los anestésicos generales. Esta depresión causa la mayoría de los síntomas como son dificultad para hablar, confusión mental y cambios en el comportamiento del individuo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada con anticoagulantes como fluoruro de sodio o de potasio, heparina de litio, EDTA y oxalato con fluoruro de sodio o potasio como anticoagulantes para obtener plasma. Las muestras son estables 2 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigeradas y 4 semanas congeladas a -20ºC. No se debe desinfectar el área de la venopunción con sustancias alcohólicas. Debido a las características volátiles del etanol y a las implicaciones médicolegales de la prueba, los tubos de recolección deben quedar muy bien tapados después de tomar la muestra y ésta debe ser analizada inmediatamente después de abrir el tubo. Muestra de orina de micción simple que es estable 30 días en refrigeración . Metodología: Enzimática con alcohol deshidrogenasa Valores de referencia: ≤ 10 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar la concentración de alcohol etílico en sangre para hacer la correlación con el grado de intoxicación o con ingestión reciente. La cimetidina y la metoclopramida aumentan la absorción del etanol y los alimentos la disminuyen. La prueba tiene connotación médicolegal en casos de tipo policivo y los efectos en el organismo se describen en el cuadro siguiente: Licor alcohólico Concentración en sangre Efectos Onzas 1-2 10-50 mg/dL (2,2-10,9 mmol/L Ninguno o euforia ligera 3-4 50-100 mg/dL ( 10.9-21.7 mmol/L) Cambio en visión estereoscópica y en adaptación a la oscuridad 4-6 100-150 mg/dL ( 21,7-32,6 mmol/L) Euforia, desinhibición, disminución del tiempo de reacción Manual de Procedimientos 11 67 6-7 150-200 mg/dL ( 32,6-42,4 mmol/L) Intoxicación de moderada a severa, tiempo de reacción marcadamente prolongado, desinhibición, trastornos en equilibrio y en la coordinación. 8-9 200-250 mg/dL ( 43,4-54,3 mmol/L) Intoxicación severa, pérdida de reflejos y confusión mental 10-15 250-400 mg/dL ( 54,3-86,8 mmol/L) Coma profundo que puede llevar a la muerte Intoxicación leve: 10-100 mg/dL (2,2-21,7 nmol/L) Intoxicación moderada: 100-150 mg/dL (21,7-32,6 nmol/L) Intoxicación severa: más de 150 mg/dL (32,6 nmol/L) Los niveles de alcohol son útiles también en el diagnóstico de alcoholismo. Un paciente que consume crónicamente alcohol desarrolla tolerancia a la sustancia y requiere niveles séricos más altos para alcanzar estados de intoxicación. Además de las bebidas alcohólicas, hay productos que contienen alcohol en cantidades significativas como enjuagues bucales, colonias y preparados medicinales. ALCOHOL METÍLICO (Metanol) Código 905707 Es una sustancia altamente tóxica responsable de intoxicación exógena por ingestión, absorción cutánea o inhalación de vapores. Se conoce con los nombres de alcohol de madera, alcohol industrial o alcohol verde. La dosis tóxica es variable pero la ingestión de 50 mL puede ser fatal. En el organismo es metabolizado a formaldehido o ácido fórmico que produce una severa acidosis y otras complicaciones. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en 4 tubos tapa roja sin aditivo y un tubo con fluoruro como anticoagulante para obtener plasma. (Para valoración de etanol). Debe evitarse la contaminación de la muestra con formol, heparina y EDTA. No se debe desinfectar el área de la venopunción con sustancias alcohólicas. Debido a las características volátiles del metanol y a las implicaciones médicolegales de la prueba, los tubos de recolección deben quedar muy bien tapados después de tomar la muestra y ésta debe ser analizada inmediatamente después de abrir el tubo. En pacientes con severa acidosis puede presentarse resultado falso positivo por interferencia del reactivo ácido sulfúrico con compuestos orgánicos. Metodología: Colorimetría Valores de referencia: Negativo 68 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para determinar intoxicación por metanol. Por ser un método cualitativo no es posible determinar el grado de intoxicación y por esto es necesario la evaluación clínica del paciente. Este tipo de intoxicación es una verdadera urgencia toxicológica por lo tanto el resultado debe ser informado muy rápidamente. ALDOLASA Código 903402 La aldolasa es un tetrámero que se sintetiza en hígado, músculo, cerebro y que cataliza la conversión de fructosa 1,6-difosfato a fosfato dihidroxiacetona y 3-fosfato gliceraldehido. La aldolasa es necesaria para la glicólisis muscular como una vía de respuesta rápida para la producción de adenosin trifosfato, independientemente del oxígeno tisular. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe informar sobre los hábitos diarios que practica y las drogas que está tomando pues hay aumento fisiológico por epinefrina, etanol, ejercicio muscular e insecticidas organofosforados. No se debe usar tubo con gel separador. Muestra de suero. La muestra es estable 5 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C. La muestra debe ser centrifugada inmediatamente pues las plaquetas y los glóbulos rojos tienen alto contenido de aldolasa (10 veces más que el suero). La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica colorimétrica Valores de referencia: Adultos: 1,7 – 7,6 UI/L Niños: 10 – 24 meses: 3,4 – 11,8 UI/L 25 meses a 16 años: 1,2 – 8,8 UI/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en diferenciar enfermedad muscular de otras enfermedades. Los niveles más altos se encuentran en distrofia muscular progresiva (Duchenne). Menores elevaciones se encuentran en dermatomiositis, polimiositis, rabdomiolisis y otras distrofias. En aquellos casos de distrofia donde hay disminución de la masa muscular los niveles de la enzima son menores. Se observan niveles normales en polio, miastenia grave, atrofia muscular neuro- Manual de Procedimientos 11 69 génica y esclerosis múltiple. En infarto del miocardio hay aumento con un patrón muy similar al de la ALT. También puede elevarse en hepatitis aguda, gangrena, tumores de próstata, triquinosis, leucemia crónica, discrasias sanguíneas, delirium tremens, psicosis agudas, esquizofrenia, anemia megaloblástica y granulocítica y en carcinomas metastásicos. En los últimos años el ensayo de creatina fosfoquinasa (CPK) ha sustituido a la determinación de la actividad aldolasa en suero, especialmente en la distrofia muscular. ALDOSTERONA Código 904801 ALDOSTERONA EN ORINA Código 904802 La aldosterona es el principal mineralocorticoide retenedor de sodio producido por la corteza suprarrenal. Estimula el transporte de sodio a través de las membranas celulares, especialmente en el túbulo renal distal donde el sodio se intercambia por hidrógeno y potasio. Además la aldosterona es importante para mantener los niveles de presión y volumen sanguíneos. El sistema renina-angiotensina es el regulador principal de la síntesis y secreción de la aldosterona. Igualmente, concentraciones aumentadas de potasio plasmático pueden estimular directamente la producción de la hormona. Bajo condiciones fisiológicas la hormona ACTH puede estimular la secreción de aldosterona. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y no se necesita preparación especial. Se debe anotar si la muestra fue tomada con el paciente estando de pie o recostado y averiguar que drogas está tomando. Se recomienda suspender con anticipación la medicación de algunas drogas que pueden afectar el eje renina-angiotensina-aldosterona las cuales se enumeran a continuación: espironolactona y estrógenos (6 semanas); diuréticos, inhibidores de prostaglandin-sintetasa, ciroheptadina e inhibidores de ACE (hormona convertidora de angiotensina) (2 semanas); vasodilatadores, antagonistas de calcio, simpaticomiméticos e inhibidores adrenérgicos (1 semana). Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Muestra de orina de 24 horas recolectada en frasco con ácido bórico como preservativo (1 gr de ácido bórico por 100 mL de orina). Refrigerar la orina durante la recolección y envío y registrar el volumen de orina de 24 horas. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 años congelada a -20ºC. 70 Fundación Santa Fe de Bogotá La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: Suero: paciente de pie: 4 – 31 ng/dL Acostado: 1–16 ng/dL Orina: Dieta normal: 2,3 - 21,0 μg/24 horas Baja en sal: 17,0 – 44,0 μg/24 horas Alta en sal: 0,0 - 6,0 μg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se utiliza en el diagnóstico del aldosteronismo primario (carcinoma o adenoma suprarrenal e hiperplasia cortical suprarrenal) y del aldosteronismo secundario (depleción de sal, sobrecarga de potasio, insuficiencia cardíaca con ascitis, embarazo y Síndrome de Bartter). También es útil para evaluar a pacientes con presión arterial de difícil control, hipotensión ortostática y ciertos trastornos de los electrolitos. En suero está aumentada en hiperaldosteronismo primario y secundario, dieta muy baja en sodio, embarazo y Síndrome de Bartter; disminuida en hiperplasia adrenal congénita, deficiencia de la enzima aldosterona sintetasa, dieta muy alta en sodio, enfermedad de Addison y en hipoaldosteronismo hiporreninico causado por daño renal. En la orina está disminuida en todas las entidades anteriores con excepción del hiperaldosteronismo debido a secreción adrenal autónoma o en algunos casos de hiperaldosteronismo secundario por falla cardíaca, renal o hepática. Pacientes con una dieta baja en sodio tienen un aumento de 2 a 5 veces en los niveles de aldosterona que los que están en una dieta normal de sodio, por lo tanto, los valores de referencia son muy variables y difíciles de establecer, para cada paciente. La excreción de aldosterona disminuye con la edad y en pacientes que estén en tratamiento con heparina, ranitidina, verapamil, captopril y enalapril. Hay aumento después de stress térmico de una semana de evolución, durante la fase media y luteal tardía de la menstruación, en el embarazo y después de 10 días de ayuno. La ingestión alta de sodio disminuye el nivel de aldosterona y la ingestión baja la aumenta. Manual de Procedimientos 11 71 ALERGÉNOS PANEL Código 862591F Hay una multitud de alergénos provenientes de gran variedad de especies de plantas, animales, alimentos, hongos, mohos, parásitos y venenos que producen en los seres humanos, anticuerpos circulantes IgE específicos. El polen de una gran variedad de plantas (gramíneas) es uno de los mayores causantes de alergias; las plantas de mayor importancia en producción de alergias son aquellas que producen grandes cantidades de polen y lo diseminan con la ayuda del viento para aumentar la posibilidad de que el grano alcance el pistilo de una flor femenina de la misma especie. La alergia a alimentos se presenta en pacientes que tienen reacciones de hipersensibilidad a un alimento específico con respuesta inmune específica evocada por la penetración del alergeno a las células inmunocompetentes del tracto gastrointestinal; a pesar de que hay muchos alimentos capaces de estimular reacciones alérgicas los más frecuentes son leche de vaca, huevos, pescado, ostras, nueces, maíz, cereales, cítricos, maní y soya. Otra causa común de alergias es la inhalación de polvo o el contacto directo con animales que contienen alergénos derivados del pelo, epidermis (caspa) saliva, suero u orina. Los perros y gatos inducen asma, conjuntivitis y rinitis permanente especialmente en niños. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis fluoroenzimático (FEIA) - INMUNOCAP Valores de referencia: Ver reporte Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar reacciones de hipersensibilidad a los alergenos más comunes especialmente en niños con enfermedades atópicas y adultos con dermatopatías. ALFA 1 ANTITRIPSINA Código 903406 Es el componente principal de la globulina alfa-1 y el inhibidor de proteasas séricas (tripsina, elastina y otras) más abundante. El locus alfa1AT es altamente polimórfico e incluye alelos subtipo M y los alelos de deficiencia S y Z. 72 Fundación Santa Fe de Bogotá La deficiencia congénita de alfa1AT es una enfermedad autosómica recesiva caracterizada por niveles séricos disminuidos de alfa1AT que es un inhibidor de los anticuerpos de la elastasa de los neutrófilos del tracto respiratorio inferior. Este inhibidor es importante para evitar que las enzimas proteolíticas se liberen a la superficie de los órganos y produzcan daño tisular. La deficiencia congénita de alfa 1 antitripsina está asociada al desarrollo de enfisema panacinar en la tercera y cuarta décadas y a un aumento en la incidencia de hepatitis neonatal en niños con fenotipo ZZ que progresa generalmente a cirrosis. Aproximadamente un 9% de adultos con cirrosis no alcohólica son fenotipo MZ. Los alelos de deficiencia están asociados con hipotensión sistólica y los alelos Z con aumento en el riesgo de aneurisma abdominal aórtico. Condiciones del paciente y/o de la muestra Es necesario averiguar las drogas que toma el paciente y si tiene alguna enfermedad asociada pues los niveles de alfa 1 antitripsina pueden doblarse o triplicarse durante el embarazo, terapia con estrógenos, inflamación o enfermedad neoplásica. No es fácil distinguir entre niveles moderamente bajos y los normales por lo cual un episodio inflamatorio puede enmascarar una deficiencia de la proteína Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulantes como EDTA o heparina de litio para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 3 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: 90 – 200 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Estudio de niños y adultos jóvenes con enfisema y/o enfermedad hepática para determinar deficiencia congénita de la proteína. ALFA -1- ANTITRIPSINA FENOTIPO R PLUS Código Como la electroforesis de proteínas es poco precisa, la A1AT es analizada por electroenfoque, donde la proteína es pasada por un gradiente de pH. La A1AT normal es denominada M, ya que es neutral y no corre muy lejos. Las otras variantes son menos funcionales y son denominadas A-L y N-Z dependiendo de dónde corran; la presencia de bandas desviadas puede significar deficiencia de A1AT. En los resultados del examen IPMM, donde IP significa: Inhibidor de proteasa y MM es el patrón de bandas del paciente los niveles dependen del fenotipo, ya que las formas alteradas se excretan en forma deficiente por el hígado y se polimerizan en el retículo endoplásmico: IPMM: 100% (normal), IPMS: 80%, IPSS: 60%, IPMZ: 40% y IPZZ: 10-15% (deficiencia de A1AT severa) Manual de Procedimientos 11 73 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha envío. Metodología: Nefelometría/Inmunoelectroforésis Valores de referencia: Fenotipo normal en 90% de la población normal: MM Alfa 1 Antitripsina 90 – 220 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para la evaluación del fenotipo en la deficiencia de alfa-1-antitripsina ALFA-1-GLICOPROTEÍNA ÁCIDA (Oromucoide) Código 903407 La Alfa 1 Glicoproteína ácida es sintetizada en el hígado y en algunos tumores. Es una proteína reactante de fase aguda cuyo papel es aún desconocido. Hasta el momento se cree que el hígado es el único sitio de síntesis, pero algunas investigaciones recientes han demostrado que algunos tumores la sintetizan. Clínicamente se ha usado para el seguimiento de algunas entidades inflamatorias como la artritis reumatoidea y tumores malignos. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría Valores de referencia: 4,0 – 120,0 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se encuentran niveles disminuidos de alfa-1-glicoproteína ácida en malnutrición, daño hepático severo y en mujeres que usan anticonceptivos. Niveles aumentados en inflamación aguda y crónica severas como infarto del miocardio, artritis reumatoidea, LES, enfermedad de Crohn, gastropatías perdedoras de protéinas y en tumores malignos. 74 Fundación Santa Fe de Bogotá ALFA-2-ANTIPLASMINA Código 903408 La alfa-2-antiplasmina (inhibidor de la alfa-2-plasmina) se sintetiza en el hígado. Inactiva la plasmina que es la enzima fibrinolítica responsable de la remodelación del trombo de fibrina, enlaza la fibrina junto con el factor XIIIa haciendo que el coágulo sea más difícil de desintegrarse. La ausencia de alfa2-antiplasmina produce ruptura del coágulo de fibrina y esto se asocia a un mayor riesgo de hemorragias. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato de sodio (tubo tapa azul) para obtener plasma. Para la toma de la muestra se deben seguir las indicaciones dadas en la prueba tiempo de protrombina (PT/TP). La muestra es estable 14 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cromogénica que se interpreta manual o instrumentalmente Valores de referencia: 85-156% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en el diagnóstico de la deficiencia congénita de alfa-2-antiplasmina. Ayuda en la evaluación completa de la CID, coagulación intravascular y fibrinólisis o hiperfibrinolisis (fibrinólisis primaria) cuando se determina junto con el fibrinógeno, D-dímeros, productos de degradación del fibrinógeno, los complejos solubles de monómeros de fibrina y el plasminógeno. Sirve también para evaluar enfermedad hepática y los efectos de la terapia fibrinolítica o anti-fibrinolítica. ALFA 2 MACROGLOBULINA Código 903001 La alfa-2 macroglobulina (abreviada a2M o A2M) es una proteasa inhibidora y es una de las proteínas plasmáticas más grandes encontradas en la sangre. Se produce en el hígado y es un componente mayor de la banda alfa-2 de la electroforesis de las proteínas. La A2M trasporta hormonas y enzimas y tiene funciones efectoras e inhibidoras en el desarrollo del sistema linfático e inhibe componentes de los sistemas de complemento y hemostático. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 3 meses con- Manual de Procedimientos 11 75 gelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría Valores de referencia: 106,0 – 279,0 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se encuentran niveles elevados de A2M en el síndrome nefrótico debido a que las otras proteínas que son de menor tamaño se excretan y solo A2M se retiene debido a su gran tamaño. También esta elevada en cirrosis, diabetes, defectos del tubo neural, ataxia teleangiectasia, dermatitis atópica y síndrome de Down. Se encuentra disminuida en pancreatitis aguda lo que se correlaciona con la severidad de la enfermedad y en estados hiperfibrinolíticos, después de cirugía mayor, en septicemia y en insuficiencia hepática. ALFA-FETOPROTEÍNA (AFP) Código 906602 ALFA-FETOPROTEÍNA EN LÍQUIDO AMNIOTICO Código 903002 ALFA-FETOPROTEÍNA (AFP) “Triple Screen” Código 823415F ALFA FETOPROTEÍNA (AFP) EN LCR Código 903002-2 Es una glicoproteína fetoespecífica de cadena polipeptídica simple cuya síntesis ocurre principalmente en el hígado, saco vitelino y tracto gastrointestinal del feto y se secreta al suero fetal con un pico máximo a las trece semanas de gestación declinando gradualmente después de esta fecha. Los niveles permanecen ligeramente elevados hasta el primer año de vida y a partir de ese momento los niveles se estabilizan por el resto de la vida. También es producida por tumores que se originan en estructuras embrionarias de la línea media tales como el hepatocarcinoma y el teratocarcinoma testicular. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 8 horas a temperatura ambiente 76 Fundación Santa Fe de Bogotá y/o refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. No pueden utilizarse muestras hemolizadas ni muy lipémicas y en madres embarazadas la muestra de sangre debe tomarse antes de realizar una amniocentésis. Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 1 semana refrigerada y 2 meses congelada. La prueba en LCR se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Valores de referencia: Suero: 0,0 -9,0 ng/mL LCR: ≤ 0.5 ng/mL En el suero materno y durante el embarazo el valor depende de la semana de gestación como se detalla a continuación: Suero y Líquido amniótico (LA) semanas de gestación Semana Suero (ng/dL) Líquido amniótico (KIU/mL) 15 33,2 13,39 16 38,6 10,7-32,1 17 45,0 8,73-26,02 18 52,3 7,14-21,4 19 60,8 5,84-17,5 20 70,7 4,78-14,0 21 82,3 ----------- Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Concentraciones séricas elevadas (> 40 ng/mL) se encuentran en pacientes con hepatocarcinoma , teratocarcinoma testicular, carcinoma pancreático, carcinoma gástrico, carcinoma broncogénico y carcinoma de colón. También hay elevación en enfermedades hepáticas benignas tales como hepatitis viral, cirrosis postnecrótica, cirrosis de Laennec y en cirrosis biliar primaria. Como un marcador tumoral la AFP es útil en el manejo y seguimiento de pacientes en tratamiento antineoplásico especialmente tumores testiculares y hepatoma primario. En el suero materno es útil para detectar defectos del tubo neural en el feto pero Manual de Procedimientos 11 77 la elevación no es específica por lo cual debe usarse en combinación con otros procedimientos tales como ultrasonografía, amniografía y mediciones de acetilcolinesterasa. Si el feto tiene defecto abierto del tubo neural la AFP se escurre al líquido amniótico causando niveles elevados en el líquido. Posteriormente llega hasta la circulación materna produciendo niveles elevados en el suero materno. Aproximadamente el 80% de pacientes embarazadas con fetos defectuosos tienen niveles elevados 2,5 veces el valor promedio. También puede haber elevación en enfermedad renal congénita, atresia esofágica, onfalocele, gastrosquisis, embarazos múltiples, amenaza de aborto, parto prematuro y muerte fetal. Puede haber correlación entre niveles bajos y defectos cromosómicos y la prueba puede usarse en combinación con la gonadotrofina coriónica subunidad B (B-hCG) y la edad materna para estimar el riesgo de enfermedad de Down. La principal indicación para la prueba “triple screen” es la detección de defectos del tubo neural y se usa en combinación con la determinación de tres hormonas (triple screen) que son gonadotrofina coriónica humana total, estriol no conjugado y alfa gonadotrofina coriónica libre. La prueba refuerza la correlación que hay entre niveles bajos de AFP con desordenes cromosómicos y otros problemas fetales. Es útil también en detectar el Síndrome de Down ó mongolismo y otros padecimientos congénitos y complicaciones maternas. Aunque esta prueba no es diagnóstica por sí misma, detecta grupos de riesgo, y proporciona alta confiabilidad en su valor predictivo indicando la necesidad de evaluación médica más extensa. ALFA-GALACTOSIDASA EN LEUCOCITOS Código 862750F La deficiencia de la enzima alfa galactosidasa A (a-Gal A), produce la enfermedad de Fabry, entidad de origen genético con patrón autosómico recesivo, debido a mutaciones en el gen que codifica la enzima que está localizado en el cromosoma X. La enfermedad de Fabry es un trastorno en el almacenamiento lisosomal, con acumulación de glicosilesfingolípidos (globotriosilceramida) en riñón, corazón, piel y cerebro. Los síntomas en hombres aparecen antes de la adolescencia, y algunas mujeres que son portadoras de la mutación pueden presentar síntomas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con heparina como anticoagulante. La muestra es estable por 2 horas a temperatura ambiente. Muestra de gotas de sangre tomadas en papel de filtro. La muestra es estable por 6 meses a temperatura ambiente. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fluorometría de punto final 78 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: 20 - 100 nmol/mg de proteínas/hora Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es de utilidad para confirmar el diagnóstico de la enfermedad de Fabry. ALFA GLUCOSIDASA EN LEUCOCITOS Código 862619F La alfa-glucosidasa ácida (GAA) o maltasa ácida es una enzima lisosomal que es fundamental para metabolizar adecuadamente el glucógeno para la producción de glucosa. Si no se dispone de la enzima necesaria el glucógeno se acumula en las células musculares, y éstas se pueden alterar tanto que los músculos sufren un deterioro y dejan de responder correctamente a un estímulo. La deficiencia de esta enzima produce la enfermedad de Pompe que se caracteriza por flacidez muscular debilitante, reflejos inexistentes y cardiomegalia. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con heparina como anticoagulante. La muestra es estable por 2 horas a temperatura ambiente. Muestra de gotas de sangre tomadas en papel de filtro. La muestra es estable por 6 meses a temperatura ambiente. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles después de la fecha de envío.. Metodología: Fluorometría de punto final Valores de referencia: Ver reporte Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de glucogenosis como la enfermedad de Pompe ALFA TALASEMIA GENOTIPO Código 862696F La alfa talasemia es la más frecuente de todas las talasemias donde hay producción deficiente o ausente de la síntesis de alfa-globina. Un desequilibrio en la cadena alfa produce las anormalidades en los glóbulos rojos de la sangre. Las anomalías genéticas de alfa talasemia afectan principalmente a las poblaciones del sudeste de Asia y el Mediterráneo. El ensayo detecta 21 mutaciones en los genes HBA1 y HBA2 y cubre más del 95% de todos los alelos mutantes de alfa-talasemia que se encuentran comúnmente en los países mediterráneos y más del 99% del total de los reportados en el Medio Oriente y el Sudeste Asiático. Manual de Procedimientos 11 79 Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante. La muestra de sangre es estable por 72 horas refrigerada o a temperatura ambiente. La prueba se procesa en a Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Biología Molecular Valores de referencia: Ver reporte Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar presencia de mutaciones en la cadena alfa de la hemoglobina para efectos de diagnóstico y consejería genética ALUMINIO Código 862568F El aluminio que se ingiere en la dieta (5-10 mg) es completamente eliminado, en condiciones normales, por el riñón. Los pacientes que tienen insuficiencia renal pierden la habilidad de depurar el aluminio y pueden presentar toxicidad por este metal. La sobrecarga de aluminio conduce a acumulación del metal en el cerebro y en los huesos lo que puede llevar a demencia y a alteración de la formación de osteoide y a la captación de calcio en el hueso. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo especial libre de metales (tubo tapa azul oscura) y sin anticoagulante para obtener suero. La muestra es estable por 4 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrometría de masa (MS) Valores de referencia: < 40,0 μg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar posibilidad de toxicidad por aluminio en pacientes sometidos a diálisis continuas. Acumulación prolongada puede causar anemia, encefalopatía y osteomalacia vitamina D resistente. Además, los trabajadores expuestos a niveles altos o bajos a largo plazo tienen riesgo de toxicidad. 80 Fundación Santa Fe de Bogotá AMIKACINA, SEMICUANTITATIVA Código 905403 Es un antibiótico aminoglicósido que por su efecto nefrotóxico y ototóxico debe controlarse su dosificación. Como con otros aminoglicósidos hay un margen muy estrecho entre los niveles terapéuticos efectivos y toxicidad. Condiciones del paciente y/o de la muestra El tiempo para alcanzar el estado de equilibrio depende de la edad del paciente y de una dosis apropiada y continua. Neonatos: 10 a 45 horas; Niños y adultos menores de 30 años: 2,5 a 15 horas; Adultos mayores de 30 años: 7,5 a 75 horas. La muestra se debe tomar en el pico de 0,5 a 1 hora tras finalizar una infusión IV de 30 minutos (1 hora después de una dosis IM). También puede tomarse en el valle inmediatamente antes de la dosis siguiente. Se pueden inactivar los aminoglicósidos por concentraciones altas de ciertas penicilinas como por ejemplo carbenicilina. Muestra de suero o sangre total se toma en un tubo tapa roja sin aditivos. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 4 semanas a -20ºC.. Metodología: Interacción cinética de micropartículas, KIMS Rango terapéutico: Valle: 5 – 10 ug/ml Rango Terapéutico: 20 – 25 ug/ml Toxicidad: > a 35 ug/ml Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Controlar los niveles sanguíneos del antibiótico para eficacia del tratamiento y evitar toxicidad. Para una terapéutica efectiva se recomiendan niveles pico de 20-25 µg/mL. Se ha demostrado que concentraciones pico persistentemente elevadas de 30-35 µg/mL pueden causar daño renal y toxicidad al sistema nervioso central. La nefrotoxicidad se manifiesta por daño a los túbulos proximales renales con consecuente falla renal y la toxicidad del SNC por daño a las ramas vestibular y auditiva del octavo nervio craneal Hay reacción cruzada con kanamicina pero no con otros aminoglicósidos como tobramicina, dibekacina, netilmicina, gentamicina y vancomicina. Se pueden inactivar los aminoglicósidos por concentraciones altas de ciertas penicilinas como por ejemplo carbenicilina. AMILASA SÉRICA Código 903805 Manual de Procedimientos AMILASA URINARIA 24 horas 11 81 Código 903806 AMILASA ORINA micción simple Código 903806-2 Las amilasas son enzimas que degradan moléculas complejas de carbohidratos tales como amilopectina, amilosa, glicógeno en componentes pequeños. La amilasa es producida por el páncreas exocrino y las glándulas salivares para ayudar en la digestión de almidones. Se encuentra también en el hígado y en el epitelio de las glándulas de Falopio. La amilasa es filtrada por el glomérulo con la excepción de la macroamilasa que es una forma activa de alto peso molecular que no puede excretarse por la orina. Los pacientes con macroamilasemia tienen niveles elevados de amilasa sérica pero la amilasuria es normal o baja. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas e informar que drogas está tomando pues drogas tales como colinérgicos, corticotropina, fentanyl, meperidina, metacolina, metilprednisolona, morfina, narcóticos y tiazidas pueden producir elevaciones significativas. Muestra de suero o muestra de sangre total tomada con anticoagulantes como heparina de litio o de sodio para obtener plasma. Las muestras son estables por 8 horas a temperatura ambiente, por 48 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple o recolectada durante 24 horas en frasco sin preservativo. No puede realizarse el procedimiento en muestras hemolizadas pues por un gramo de hemoglobina libre se disminuye en un 20% la concentración de la enzima. Metodología: Cinética Enzimática Valores de referencia: Suero 28,0 – 100,0 U/L Orina Hombres: 16-491 U/L Mujeres: 21-447 U/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La actividad de la amilasa sérica aumenta en cuestión de horas (6 a 48 horas) en los pacientes con pancreatitis aguda pero esta elevación no siempre es proporcional a la gravedad de la enfermedad. Valores por encima de 500 UI/L tienen valor diagnóstico. 82 Fundación Santa Fe de Bogotá La amilasuria se eleva rápidamente, horas después de la elevación en suero y permanece elevada más tiempo que en el suero. Aunque está aceptado comúnmente que la amilasa es un marcador para enfermedad pancreática aguda este no es ni muy sensible ni altamente específico. La sensibilidad clínica reportada para amilasa en pancreatitis aguda esta entre un rango de 70 a 95%. Una explicación a este rango tan amplio de sensibilidad es que la utilidad de la prueba disminuye con relación al tiempo de iniciación del ataque inicial de la pancreatitis y que hay otras entidades que producen dolor abdominal que la elevan como apendicitis aguda, trauma abdominal, peritonitis, espasmo del esfínter de Oddi, inflamación de las glándulas salivales (paperas), enfermedad del tracto biliar y obstrucción intestinal. El nivel sérico de la amilasa puede disminuir en casos de pancreatitis necrosada fulminante donde la producción de amilasa ha disminuido o desaparecido completamente. Puede aumentar en pacientes con carcinoma pancreático o en pancreatitis crónica. AMILASA ISOENZIMAS Código 862657F Hay por lo menos siete isoenzimas de la amilasa en el tejido humano. En el suero se encuentran las formas salivares y la pancreática. Se puede encontrar actividad de la amilasa en el semen, testículos, ovarios, trompas de Falopio, músculo estriado, pulmones y en el tejido adiposo. También se encuentra en el calostro, las lágrimas y la leche. Un aumento de actividad de la amilasa no necesariamente puede ser debido a una pancreatitis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría cinética enzimática Valores de referencia: Amilasa total: 10,0 – 120,0 U/L Amilasa Pancreática: < 53,0 U/L Isoenzima Salival: < 48,0 U/L Macroamilasa: No detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de las isoenzimas es útil para diferenciar entre los tipos de amilasa salivar (S) o pancreática (P) pues un aumento de actividad de la amilasa no necesariamente puede ser debido a una pancreatitis. Manual de Procedimientos 11 83 Por lo tanto, la determinación del origen de la enzima es útil para determinar si la isoenzima presente es del tipo P (páncreas) o del tipo S (saliva). Algunas de las condiciones por las que se puede elevar la amilasa total incluyen insuficiencia renal (mezcla tipo S y P), hiperamilasemias neoplásicas (cáncer broncogénico u ovárico, lesiones de la glándula salival (tipo S), macroamilasemia (tipo S predominantemente ), úlcera péptica perforada (tipo P), obstrucción intestinal (tipo P), apendicitis aguda, cetoacidosis diabética (mezcla tipo S y P), alcoholismo agudo (mixto), embarazo ectópico (tipo S), y debido a drogas como opiáceos (tipo P) o por adicción a la heroína (tipo S). AMINOÁCIDOS CUANTITATIVOS (plasma, orina) Código 862707F/862708F Los aminoácidos (AA) son nutrientes requeridos por el organismo y algunos de ellos son esenciales para el cuerpo humano y constituyen el segundo más grande componente del nitrógeno no proteico del plasma Típicamente un desorden hereditario de los AA está directamente relacionado con la ausencia de una enzima de uno o más aminoácidos lo que produce una acumulación considerable en sangre y orina. Condiciones del paciente y/o de la muestra . El paciente debe estar en ayunas, debe informar que drogas está tomando y tener dieta libre de gelatinas y no debe realizarse la prueba si está recibiendo nutrición parenteral Muestra de micción simple de la primera orina de la mañana. La muestra es estable por 48 horas refrigerada y 3 meses congelada a -20°C. El día de la prueba no se debe usar talco ni cremas en la región genital. La prueba también puede hacerse en muestra de sangre total tomada en tubo con heparina (tubo tapa verde) o con EDTA como anticoagulantes para obtener plasma. La muestra de plasma es estable por 48 horas refrigerada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 15 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: Ver reporte Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Las concentraciones elevadas de AA en la sangre y orina de pacientes con función renal normal reflejan procesos metabólicos anormales como en fenilcetonuria (deficiencia o ausencia de fenilalanina hidroxilasa), tirosinemia (deficiencia de p-hidroxifenilpiruvato oxidasa), enfermedad de jarabe de roble (deficiencia de decarboxilasa cetoácida) y otras. También puede haber acumulación generalizada de AA en enfermedad hepática severa o excreción excesiva en caso de daño tubular renal. Los AA en cantidades excesivas en la sangre también aparecen en la orina pero si el umbral renal es bajo aparecerán en la orina aunque no haya 84 Fundación Santa Fe de Bogotá exceso en la sangre. Hasta ahora se han reconocido más de 50 aminoacidopatías y en la mayoría de ellas se presenta retardo mental, retardo en el crecimiento, y otros síntomas inexplicados; la más común es la fenilcetonuria que afecta aproximadamente 1:10.000 nacidos vivos. AMIODARONA Código 802991F La amiodarona es un medicamento antiarritmico usado para el tratamiento de arritmias severas (fibrilación ventricular recurrente) que amenazan la vida de un paciente. Es típicamente catalogado como droga clase III que también se usa en la taquicardia ventricular recurrente que no responde a otros antiarritmicos. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra debe tomarse a más tardar 12 horas después de la última dosis. Muestra de suero. No se debe usar tubo con gel separador. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente, 72 horas refrigerada y 14 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Rango terapéutico: 1,5 – 2,5 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para controlar el rango terapéutico y evitar toxicidad La amiodarona alcanza la concentración pico entre 3-7 horas después de la administración, su eliminación es muy prolongada y tiene una promedio de vida media de 53 días. AMONIO (AMONÍACO) Código 903602} Es un producto del metabolismo de los aminoácidos y por lo consiguiente del catabolismo proteico. Se forma principalmente en el hígado por la deaminación oxidativa de los aminoácidos principalmente la deaminación de Lglutamato a alfa-cetoglutarato. La mayor parte del amonio formado se elimina a través del ciclo de la urea en el hígado. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total recolectada en tubo con anticoagulante tal como heparina de litio o sodio. La muestra debe tomarse, en lo posible, sin torniquete y colocarse inmediatamente en hielo para evitar la formación de amonio in vitro que puede Manual de Procedimientos 11 85 ocurrir a una velocidad de 0,003 µg/mL por minuto a temperatura ambiente. Se debe evitar la hemólisis pues los eritrocitos contienen 2,8 veces más amonio que el plasma. No deben utilizarse muestras lipémicas. La muestra es estable por 30 minutos refrigerada y debe tomarse directamente en el laboratorio central. Metodología: Colorimetría enzimática de punto final a tiempo fijo. Valores de referencia: 16,0 – 60,0 μg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El monitoreo de los niveles de amoníaco sanguíneo puede ser de utilidad en el diagnóstico de encefalopatía hepática y coma hepático en los estados terminales de cirrosis hepática, insuficiencia hepática, necrosis hepática aguda y sub aguda, y en el síndrome de Reye. En infantes la hiperamonemia puede ser un indicador de deficiencias hereditarias en el ciclo metabólico de la urea. Controlar los niveles de amonio en sangre es de gran utilidad en el tratamiento del coma hepático, en el manejo de los pacientes con trasplante hepático y en el control del balance nitrogenado en pacientes que reciben hiperalimentación. ANDROSTENEDIONA Código 904501 Es una hormona esteroide androgénica producida por la corteza suprarrenal y por las gónadas. En hombres la actividad de la hormona es relativamente poco importante comparada con la del andrógeno testicular, la testosterona. En las mujeres la androstenediona y sus metabolitos, testosterona y dihidrotestosterona, contribuyen normalmente al crecimiento del vello púbico y axilar. Los niveles plasmáticos aumentan progresivamente desde los 7 años de edad y disminuyen gradualmente después de la tercera década de la vida. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se debe anotar la hora de recolección por la variación diurna así como la edad del paciente y las drogas que esté tomando pues hay aumento fisiológico por clomifene, acetato de ciproterona, danazol, dehidroepiandrosterona, y levonorgestrel subdérmico; también durante la tercera mitad del ciclo menstrual, en fumadores crónicos y después de ejercicio prolongado. Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C. En sueros muy lipémicos e ictéricos se pueden encontrar niveles bajos. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia 86 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Hombres: 0,7 - 3,6 ng/mL Mujeres: 0,0 – 3,5 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba está indicada en el diagnóstico y tratamiento de la hiperplasia suprarrenal congénita debida a deficiencia de 21-hidroxilasa o 17-beta-hidroxilasa, síndromes de virilización en mujeres, hirsutismo idiopático, enfermedad de ovarios poliquísticos y síndrome de Stein-Leventhal donde se presentan niveles elevados. Hay disminución en niños en edad prepuberal, en anemia de células falciformes y en mujeres con insuficiencia suprarrenal primaria o secundaria. Es útil para controlar el tratamiento en pacientes con hirsutismo y elevación de la concentración de la hormona haciendo determinaciones seriadas debido a que la mejoría clínica es mucho más lenta (meses) que la respuesta bioquímica. ANDROSTERONA Código 862682F La androsterona es un anabolizante androgénico esteroideo, intermediario en la síntesis de los andrógenos en el hombre que interviene en el desarrollo de los caracteres sexuales masculinos. Es una sustancia producida de forma natural por el hombre y no es perjudicial para el cuerpo humano, pero cuando se toma de forma sintética, se metaboliza en el cuerpo produciendo esteroides. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 24 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: Hombres: 22,0 - 86,6 ng/mL Mujeres: 20,0 – 80,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se observa aumento de la hormona en hiperplasia suprarrenal. El incremento de androsterona y etiocolanolona en varones, sin cambios proporcionales de DHEA y de 17-cetosteroides 11-oxigenados sugiere disfunción testicular. Manual de Procedimientos 11 87 ANFETAMINAS Y METANFETAMINAS Código 905302 Son aminas simpaticomiméticas que se clasifican en cinco grupos basados en su uso terapéutico: 1) estimulantes del S.N.C. (anfetaminas y metanfetaminas); 2) depresores del apetito (fenmetrazina y fenfluramine); antidepresivos (tranilcipromina y metilfenidato); descongestionantes (efedrina y fenilpropanolamina) y alucinógenos metoxilados (metoxianfetamina). Las anfetaminas son un agente adrenérgico sintético y potente estimulante del sistema nervioso central. Han sido utilizadas como agente para mejorar el rendimiento, tanto físico (dopaje deportivo), como intelectual (dopaje cognitivo). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple que debe enviarse al laboratorio rápidamente para evitar la formación de feniletilamina, tiramina y otras aminas que se producen en la orina cuando se deja a temperatura ambiente por un tiempo prolongado. La muestra es estable por 14 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica semicuantitativa por cromatografía de capa fina Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Sirve para detectar abuso por drogas de éste grupo y sus metabolitos. La presencia de más de 500 ng/mL es un fuerte indicador de que el paciente ha usado una de estas drogas en los últimos tres días. El límite mínimo de detección es de 100 ng/mL. ANGIOTENSINA II (AgII) Código 904001 La Ag II es un potente vasoconstrictor y un regulador importante de la secreción de aldosterona porque estimula la zona glomerulosa de la suprarrenal. Los niveles de AgII se elevan en varios tipos de hipertensión. La AgII estimula la descarga de la hormona antidiurética, ACTH, prolactina, LH, oxitocina y aldosterona. Inhibe la resorción tubular de sodio y puede aumentar el crecimiento de las células endoteliales. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe llevar una dieta normal de sodio y estar recostado por lo menos 30 minutos antes de la toma de la muestra. Debe informar las drogas que está tomando pues los diuréticos, mineralocorticoides, glucocorticoides, estrógenos, anticonceptivos orales, sodio y el potasio alteran los niveles de la AgII en plasma. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable por 4 horas a temperatura ambiente y 6 meses conge- 88 Fundación Santa Fe de Bogotá lada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: ≤ 87 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De utilidad en estudios de hipertensión arterial. ANTICUERPOS A ANTÍGENOS CITOPLASMÁTICOS DEL NEUTRÓFILO (ANCAs) Código 906415 Estos autoanticuerpos son de dos tipos de acuerdo al patrón de la coloración fluorescente: cANCA que produce un patrón difuso en los neutrófilos y monocitos y es específico para Proteinasa 3 y el pANCA que produce un patrón perinuclear de los neutrófilos y es específico para otras enzimas tales como mieloperoxidasa (MPO), elastasa y lactoferrina. Los anticuerpos cANCA se encuentran principalmente en pacientes con granulomatosis de Wegener, poliarteritis microscópica mientras que los pANCA se presentan en procesos de vasculitis sistémica, colitis ulcerativa, glomerulonefritis necrotizante y colangitis esclerosante primaria. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 14 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Metodología: Técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Negativo: Dilución ≤ 1:40 En caso de cANCA positivo se debe hacer titulación con diluciones seriadas. Los pANCA positivos se reportan como tal. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado En pacientes con granulomatosis de Wegener activa y generalizada la frecuencia de cANCA positivo es del 85%. Una prueba negativa para cANCA no descarta la enfermedad. En pacientes con diagnóstico comprobado la elevación de los títulos sugiere recaída y la disminución un tratamiento exitoso. Una prueba positiva para pANCA sugiere la presencia de anticuerpos a MPO y se presenta en el 85% de pacientes con diferentes tipos de vasculitis, colitis ulcerativa y colangitis esclerosante primaria. Resultados pANCA positivo no son es- Manual de Procedimientos 11 89 pecíficos para anticuerpos anti-MPO y por esto se debe solicitar la detección de anticuerpos a mieloperoxidasa en suero. Anticuerpos ANCA ocurren en más del 90% de los pacientes con enfermedad generalizada activa y en 67% de pacientes con enfermedad activa limitada. La incidencia varía en los estados de remisión. En pacientes con síndrome de Goodpasture y lupus eritematoso puede haber ANCA positivo ANTI CV2/CRMPS Código 862555F Los anticuerpos anti-CV2, son un grupo de anticuerpos paraneoplásicos que reaccionan con una proteína del cerebro de 66 kd y que pertenecen a la familia de las proteínas ULIP/CRMP. Las manifestaciones asociadas con anticuerpos anti-CV2 incluyen degeneración del cerebelo, uveítis, y neuropatía periférica. Los anticuerpos anti-CV2 reaccionan con antígenos de nervios periféricos. Los desordenes neurológicos paraneoplásicos autoinmunes reflejan respuestas humorales y celulares al cáncer. El cáncer puede ser primario o recurrente, generalmente limitado en volumen metastásico y a menudo oculto para los procedimientos de Rx. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 72 horas a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 1 año congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 15 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Western-blot Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para la evaluación serológica de pacientes que presentan un problema neurológico subagudo de etiología indeterminada, especialmente aquellos que tienen factores conocidos de riesgo para cáncer, o que están en tratamiento para cáncer y no hay evidencia de metástasis. Sirve para diferenciar neuropatía autoinmune de los efectos tóxicos de la quimioterapia. ANTICUERPOS A GANGLIÓSIDO ASIALO GQ1B Código 835202F 90 Fundación Santa Fe de Bogotá ANTICUERPOS A GANGLIÓSIDO ASIALO GM1 Código 835201F Los gangliósidos, familia de glicolípidos caracterizados por la presencia de ácido siálico, están ampliamente distribuidos a través de todas las membranas celulares y constituyen un componente potencial de receptores específicos para hormonas y neurotransmisores. En el SNC los gangliósidos se encuentran en las células de las neuronas motoras, el axón y en la unión neuromuscular. Varias investigaciones han reportado que niveles elevados de anticuerpos antigangliósidos pueden usarse como marcadores para ciertos tipos de neuropatías motoras. El gangliósido monosiálico GM1 es el receptor más conocido para la toxina del cólera y el gangliósido disiálico GD1b es el receptor específico para la toxina tetánica. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 21 días congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cuantitativa de inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: < 20% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de los anticuerpos anti-gangliósidos se ha constituido en una parte muy importante en la evaluación clínica de pacientes con enfermedad de neurona motora inferior o neuropatía motora. Los autoanticuerpos GQ1b están asociados con la enfermedad autoinmune desmielinizante o síndrome de Miller Fisher (MFS) que es una variante del síndrome de Guillain-Barré (SGB) que afecta las neuronas motoras superiores. Se puede presentar reacción cruzada con otros gangliósidos en los casos de neuropatía periférica con paraproteinemia. Manual de Procedimientos 11 91 ANTI MA 1-2 Código 862554F Corsellis y cols., describieron en 1968 una entidad que denominaron encefalitis límbica por sus características clínico-patológicas. Definieron alteraciones afectivas, amnésicas, neurovegetativas y de sueño, que se asociaban a signos inflamatorios del líquido cefalorraquídeo, perturbaciones electroencefalográficas y lesiones de la circunvolución límbica. La encefalopatía paraneoplásica por anticuerpos anti-neurales, anti-HU, anti-Yo y anti-Ma 1-2, dirigidos contra epítopos citoplasmáticos, sería una de las etiologías. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de LCR. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Western-blot Valores de referencia: No detectado Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De ayuda en el diagnóstico de encefalitis límbicas. ANTI RI (NEURONAL NUCLEAR RI) Código 862553F Los autoanticuerpos neuronal nuclear (Ri) Tipo 2 están asociados con el síndrome de opsoclono-mioclono y se ven a menudo en los casos de cáncer de mama, cáncer de pulmón de células pequeñas y cáncer ginecológico. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero muestra de LCR. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Western-blot Valores de referencia: No detectado Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De ayuda en el diagnóstico del síndrome opsono-mioclono ANTI ÁCIDO FOSFATÍDICO IgG/IgM/IgA Código 861470F Los anticuerpos contra el ácido fosfatídico son los mismos anticuerpos antifosfolipidos que sirven para la detección de enfermedades autoinmunes. 92 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG ácido fosfatídico: < 10,0 U/mL Anticuerpos IgM ácido fosfatídico: < 10,0 U/mL Anticuerpos IgA ácido fosfatídico: < 10,0 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de anticuerpos dirigidos a epítopes de fosfolípidos ANTI ARBOVIRUS IgM Código 866520F Los arbovirus son un conjunto de virus trasmitidos por artrópodos (arthropodborne-virus) como mosquitos o garrapatas y algunos son capaces de causar varios tipos de enfermedades. Los arbovirus se transmiten de personas infectadas a otras o, por los vectores contaminados durante la picadura de personas infectadas. Cuando la viremia es mayor que los anticuerpos, los virus llegan rápidamente al SNC por medio de los eritrocitos o leucocitos, atacando e invadiendo los plexos coroideos. Dependiendo del virus, muchas infecciones pueden pasar desapercibidas o cursar con sintomatología leve, sin embargo la muerte puede ocurrir en el 30% de los pacientes con encefalitis equina oriental. La enfermedad mejor conocida y más grave ocasionada por arbovirus es la fiebre amarilla. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 1 semana refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Encefalitis equina occidental IgM título <1:2 Encefalitis Equina del Este IgM título <1:2 Encefalitis de San Luis IgM título <1:2 Manual de Procedimientos 11 93 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Ayuda en el diagnóstico de la encefalitis por arbovirus. Los anticuerpos de tipo IgM se puede detectar de 1 a 3 semanas del inicio de la enfermedad, con un pico y un descenso rápido a los 3 meses. ANTI BETA 2 GLICOPROTEÍNA 1 IgM Código 863127F Es un polipéptido de cadena simple y se ha demostrado que inhibe la vía intrínseca de la coagulación sanguínea, la agregación de plaquetas mediada por ADP y la actividad protrombinasa de las plaquetas activadas. Su medición ayuda en el diagnóstico del síndrome de anticuerpos antifosfolípidos (APS) o de ciertos desordenes trombóticos autoinmunes secundarios al lupus eritematoso sistémico (SLE). Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente (18-25°C), 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Microelisa Valores de referencia: ≤ 21 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se utiliza para la detección semicuantitativa de autoanticuerpos de clase IgM antiglicoproteína B2I (B2 GPI). Los anticuerpos anti B2 GPI son de ayuda para el diagnóstico de ciertos trastornos trombóticos autoinmunes como los que se derivan del lupus eritematoso sistémico u otras afecciones similares. ANTICOAGULANTE CIRCULANTE (LÚPICO) Código 902004 ANTICOAGULANTE LÚPICO PRUEBA CONFIRMATORIA Código 902005 Son autoanticuerpos o aloanticuerpos (IgG o IgM) que reaccionan con fosfolípidos aniónicos (carga negativa) y proteínas asociadas a la membrana celular. El anticoagulante lúpico es un agente protrombótico, Su nombre deriva de sus propiedades in vitro, debido a que produce un aumento en el tiempo parcial de tromboplastina (PTT). 94 Fundación Santa Fe de Bogotá Interfieren in vitro con las pruebas de coagulación que son dependientes de fosfolípidos. Son inhibidores adquiridos de la coagulación que producen prolongación de los tiempos de coagulación y que se presentan en diferentes enfermedades y aun en individuos normales. In vivo, interactúa con la membrana de las plaquetas provocando aumento en la adhesión y la agregación de éstas, lo que le da sus características protrombóticas. Estos anticuerpos no están limitados a individuos con lupus eritematoso sistémico pues se presentan en otras enfermedades autoinmunes, en enfermedades vasculares del colágeno, en tromboembolismo venoso o arterial y en pacientes con abortos a repetición. Se clasifican en tres categorías: específicos, inespecíficos y totales. Condiciones del paciente y/o de la muestra En los pacientes anticoagulados la heparina debe suspenderse dos días antes de la prueba y los cumarínicos dos semanas antes. El tratamiento con heparina produce resultados falsos positivos y los cumarínicos alteran la habilidad para detectar las formas más sutiles del anticoagulante circulante. Se pueden presentar resultados falsos positivos en muestras de pacientes que estén recibiendo clorpromazina, hidralazina, procainamida, quinina y fenotiazinas. Sangre total tomada en tubo con citrato como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa los días miércoles y el resultado está disponible a los 2 días hábiles. El anticoagulante lipico confirmatorio se procesa en el laboratorio local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Determinación fotoóptica del tiempo de protrombina (TP) y del tiempo parcial de tromboplastina (TPT) en mezclas, a diferentes volúmenes, de plasma del paciente con plasma normal. Valores de referencia: 30 – 45 segundos Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Cuando el TP y/o del TPT del paciente es normal es difícil interpretar adecuadamente el resultado y en este caso debe realizarse la prueba confirmatoria del veneno de Russell. Si el TP y/o el TPT prolongados vuelven a sus valores normales después de la mezcla del plasma del paciente con plasma normal significa que el paciente tiene una deficiencia de uno o más factores de la coagulación; si continuan prolongados significa que hay presencia de un anticoagulante circulante o inhibidor de un factor de la coagulación. La presencia del anticoagulante circulante no tiene efecto anticoagulante in vivo sino que está asociado con una variedad de problemas trombóticos tales como trombosis venosas, abortos espontáneos, trombocitopenia y trastornos neuro- Manual de Procedimientos 11 95 lógicos. No produce fenómenos hemorrágicos a menos que este asociado con trombocitopenia o deficiencia de un factor de coagulación, especialmente factor II. Un resultado positivo requiere confirmación con pruebas más específicas como son: neutralización plaquetaria, inhibición de tromboplastina tisular, tiempo del veneno de Russell y anticuerpos anticardiolipina. ANTICUERPOS ANTICOLÁGENO TIPO II Código 863176F Estos anticuerpos se presentan en el 22% de pacientes con sordera neural sensorial, en el 30% de pacientes con sordera súbita y en el 67% de pacientes con la enfermedad de Meniere. Tambien se encuentran en la policondritis recidivante y en artritis reumatoidea. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 30 días a temperatura ambiente, refrigerada y congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo: <20,0 EU/mL Indeterminado: 20,0 – 25,0 EU/mL Positivo > 25,0 EU/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Ayuda diagnóstica en enfermedades autoinmunes. ANTICUERPO ANTIENDOMISIAL IgA (EMA) Código 883470F ANTICUERPO ANTIENDOMISIAL IgG Código 862595F Los anticuerpos IgA anti-endomisial (EMA) se encuentran en el 70-80% de pacientes con dermatitis herpetiforme y en el 100% de los que sufren de enfermedad celíaca (enteropatía sensible a gluten) con atrofia subtotal de vellosidades intestinales. Los anticuerpos piel IgG (inter-epitelial) se encuentran en el 90% de los pacientes con pénfigo vulgar y foliáceo. 96 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente (18-25°C), 72 horas refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Título ≤ 1:2,5 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico altamente específico de dermatitis herpetiforme y de enfermedad celíaca. Por su alta especificidad para detectar enfermedad celíaca la prueba puede evitar, especialmente en niños, la necesidad de múltiples biopsias del intestino delgado para comprobar el diagnóstico. El título de los anticuerpos generalmente se correlaciona con la severidad de la enteropatía sensible a gluten. Si el paciente mantiene una dieta estricta libre de gluten el título del anticuerpo debe empezar a disminuir 6-12 meses después del comienzo de la dieta. La determinación de los niveles sirve para saber si el paciente está cumpliendo con la dieta formulada. ANTICUERPO ANTI-EPIDÉRMICO Código 883471F La presencia de anticuerpos anti-epidérmicos contra el espacio intercelular del epitelio estratificado escamoso es característica de pacientes con pénfigo, pénfigo foliáceo y pénfigo paraneoplásico . Aunque los resultados de inmunofluorescencia indirecta son muy específicos para pénfigo, el tipo de pénfigo no puede diferenciarse con esta prueba. En un pequeño porcentaje de pacientes con pénfigo, los anticuerpos no pueden detectarse puesto que ya se han unido a la piel del paciente. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o con anticoagulante EDTA, heparina o citrato para obtener plasma. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 1 semana refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Título ≤ 1:10 Manual de Procedimientos 11 97 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los anticuerpos anti-epidérmicos (inter-epiteliales) se encuentran en el 90% de pacientes con pénfigo vulgar y foliáceo. Los anticuerpos dermoepidérmicos se encuentran en el 90% de pacientes con penfigoide buloso y cicatricial ANTICUERPOS ANTINEURONAL NUCLEAR IgG TIPO I (HU- ANNA-1) Código 862552F Son anticuerpos que reaccionan con proteínas de los núcleos de las células neuronales especialmente de las células de Purkinje y por lo general se piensa que son el resultado de un proceso autoinmune en el que los anticuerpos contra antígenos expresados en el tejido tumoral se dirigen contra antígenos similares del sistema nervioso central. Se encuentran principalmente en el suero y en el LCR de pacientes con carcinoma de pulmón de célula pequeña, complicado con varios síndromes neurológicos paraneoplásicos como neuropatía sensorial subaguda predominantemente autonómica y encefalomielitis paraneoplásica. Otras manifestaciones incluyen encefalitis límbica, degeneración cerebelar subaguda, mielopatía o radiculopatía. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente 2 semanas refrigeradas y/o congeladas a -20°C. Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente 1 semana refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. En caso de resultado indeterminado se debe confirmar por Western-blot Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI). Técnica de inmunoblot o Western blot Valores de referencia: Suero y LCR: Negativo <10 U/mL Inmunoblot negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de entidades paraneoplásicas asociadas a carcinoma de pulmón de célula pequeña tales como neuropatías autoinmunes paraneoplásicas, encefalomieloradiculopatías, desordenes neurológicos relacionados y en seudoobstrucción y dismotilidad intestinal. En estudios realizados se ha encontrado que el ANNA-1 se encuentra hasta en un 55% de pacientes antes de diagnosticar el carcinoma de pulmón. 98 Fundación Santa Fe de Bogotá No se recomienda como prueba de tamizaje en cáncer de pulmón. ANTICUERPO ANTIRIBOSOMAL P Código 863185F Ver Ribosomal p anticuerpos........Pag…………….. 449 ANTICUERPOS A PARVOVIRUS B19 IgG/IgM Código 867470F El Parvovirus humano B19 (no existen el B1 al B18) es un virus ADN de cadena única que pertenece a la familia Parvoviridae y que es el único parvovirus identificado como agente de enfermedad en los humanos. Durante la viremia (7-10 días después de la exposición) el virus B19 destruye los precursores de las células eritroides comprometiendo la producción de glóbulos rojos y produciendo una crisis aplástica transitoria en pacientes con anemias hemolíticas crónicas adquiridas o por drepanocitosis, esferocitosis hereditaria, talasemia y deficiencia de piruvato kinasa; la crisis se acompaña de fiebre, malestar general, síntomas gastrointestinales y respiratorios y un eritema dérmico sintomatología que se resuelve en 3-5 días. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente (18-25°C), 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM Negativo Índice < 0,9 Indeterminado: 0,9-1,1 Positivo ≥ 1,1 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La detección de los anticuerpos IgM es más útil durante el estadio temprano de la infección pues se elevan rápidamente alcanzando un pico a las 3 semanas y declinando de manera rápida después de este tiempo. También se utiliza en mujeres en edad fértil para determinar el estado serológico donde existe una sospecha de exposición a parvovirus B19 diagnóstico de la quinta enfermedad (eritema infeccioso). Manual de Procedimientos 11 99 ANTICUERPOS A ENTAMOEBA HISTOLYTICA Código 901320 Un individuo que mantenga y excrete quistes o trofozoitos de E. histolytica se considera que tiene amebiasis esté o no sintomático. Esta infección puede ser aguda o crónica. Las formas extraintestinales de la enfermedad, como el absceso hepático son menos frecuentes que las formas intestinales. El diagnóstico se establece directamente al encontrar quistes o trofozoitos en las heces. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 3 meses refrigerada y 1 año congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Hemaglutinación Valores de referencia: Negativo: ≥ 1:32 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Debido a que la E. histolytica es endémica en nuestro medio, títulos bajos entre 1:64 a 1:128 indican generalmente infección pasada o portador crónico del parásito. La prueba serológica es de mayor utilidad en la amebiasis extraintestinal donde los títulos están entre 1:256 a 1:2.048. ANTICUERPOS ANTICITRULINA IgG (PÉPTIDO CÍCLICO CITRULINADO –CCP3) Código 862150F El anticuerpo antipéptido cíclico citrulinado (anti-CCP) se encuentra en pacientes con artritis reumatoidea temprana, antes de la positivización del factor reumatoideo (FR) y generalmente 2 años antes de la aparición de los síntomas clínicos. Tiene una especificidad del 99.6% y es considerado más específico para el diagnóstico de artritis reumatoidea (AR), que el factor reumatoideo (99,6% frente al 91%), la combinación de las dos pruebas proporciona un alto valor predictivo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 8 días a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. El resultado está disponible 5 días hábiles a partir de la fecha de la toma de la muestra. 100 Fundación Santa Fe de Bogotá Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo: 0,0 – 20,0 U Indeterminado: 20,0 – 39,0 U Positivo moderado: 40,0 - 59,0 U Positivo fuerte: ≥ 60,0 U Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de anti-CCP es de gran utilidad para el diagnóstico temprano de AR, aún con factor reumatoideo no detectable. Niveles elevados son de alto valor pronóstico para predecir AR erosiva y progresiva. También permite diferenciar la AR de otros tipos de artritis como artritis erosiva secundaria al LES. ANTICUERPOS IgA A CARDIOLIPINA (Antifosfolípidos) Código 906409F Los anticuerpos antifosfolípidos IgG/IgM/IgA son autoanticuerpos que reaccionan con la mayoría de fosfolípidos aniónicos incluyendo la cardiolipina. Estos prolongan las pruebas de coagulación “in vitro” dependientes de fosfolípidos e históricamente se han conocido como “anticoagulante lúpico”. Paradójicamente los pacientes con estos anticuerpos no presentan hemorragias y antes por el contrario tienen fenómenos de trombosis. Frecuentemente se encuentran en pacientes con lupus eritematoso sistémico y en otros trastornos autoinmunes así como en algunos individuos sin enfermedad subyacente. El término síndrome fosfolípido se ha introducido para describir a pacientes que presentan trombosis venosa o arterial, trombocitopenia y abortos recurrentes, además de positividad permanente a alguno de los tipos de anticuerpos antifosfolípidos Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. No se debe emplear suero hemolizado, ictérico o lipémico. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo: ≤ 12,0 APL/UmL Indeterminado: 12-20 APL/UmL Positivo: ≥ 20 APL/UmL Manual de Procedimientos 11 101 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes con trombosis y/o abortos recurrentes. Como prueba suplementaria cuando se encuentra positividad para anticoagulante circulante. Se puede encontrar prueba positiva en enfermedades infecciosas agudas, sífilis y en el síndrome de inmunodeficiencia por virus VIH (SIDA) y en infección por HTLV-1. La presencia de estos anticuerpos está asociada con una alta prevalencia de anormalidades valvulares en pacientes caucásicos con livido reticularis, en el síndrome de Sneddon, con hemorragia adrenal y en enfermedad de Addison, con polimialgia reumática y arteritis de células gigantes. Hay correlación del 70% entre el anticoagulante circulante y ésta prueba por lo cual es posible encontrar anticoagulante circulante positivo con anticardiolipina negativo y viceversa. ANTICUERPOS ANTI FOSFATIDILCOLINA IgG, IgM, IgA Código 862755F El síndrome antifosfolípido es un desorden auto inmune adquirido, de variada etiología, asociado a eventos trombóticos, abortos recurrentes y algunas enfermedades autoinmunes. La característica principal de estas manifestaciones clínicas y enfermedades en los pacientes es la presencia de anticuerpos antifosfolípidos circulantes. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM/IgA ≤ 10 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De ayuda en los pacientes donde se sospeche síndrome anti-fosfolipido. ANTICUERPOS A GLIADINA IgA/IgG/IgM Código 862596F Las gliadinas son una clase de proteínas que se encuentran en el gluten de los granos del arroz y del trigo. En individuos genéticamente susceptibles, las a-gliadinas son necesarias para la activación de la enfermedad celíaca, un trastorno gastrointestinal que se caracteriza por adelgazamiento de la mucosa yeyunal. 102 Fundación Santa Fe de Bogotá Originalmente se pensó que la sensibilidad al gluten era una condición solamente de tipo genético sin embargo pacientes normales con biopsia normal del intestino delgado que consumen periódicamente dietas altas en gluten pueden eventualmente desarrollar enfermedad celíaca. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente, 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos ≤ 20,0 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Estos anticuerpos son útiles para el tamizaje de poblaciones de riesgo para enfermedad celíaca y otras enteropatías sensibles al gluten tales como la dermatitis herpetiforme y para controlar los pacientes que estén en tratamiento con dietas libres de gluten. El anti-gliadina IgG tiene mayor sensibilidad que el IgA pero este a su vez es más específico que el IgG. El título de anti-gliadina IgA disminuye con dieta libre de gluten y se correlaciona con la disminución de los títulos de los anticuerpos IgA endomisiales y los anti-reticulina. Los anti-gliadina IgA/IgG se elevan significativamente cuando se da una dieta de prueba alta en gluten y los niveles de IgA responden más rápidamente a los cambios en la mucosa debidos a supresión o aumento del gluten en la dieta. El estándar de oro para el diagnóstico de enfermedad celíaca sigue siendo la biopsia intestinal correlacionada con la dieta alta o libre de gluten. ANTICUERPOS ANTI HISTONA Código 906424 Las histonas son proteínas básicas, de bajo peso molecular que forman, junto con el ADN, la cromatina sobre la base de unas unidades conocidas como nucleosomas. Hay 5 clases de histonas llamadas H1, H2, H2b, H3 Y H4 que han sido caracterizadas por sus pesos moleculares que van desde 11 a 23 kD y por el contenido de sus aminoácidos básicos lisina y arginina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Manual de Procedimientos 11 103 Valores de referencia: Negativo ≤ 1,0 Positivo débil: 1,0-1,5 Positivo moderado: 1,6-2,5 Positivo fuerte: ≥ 2,5 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los anticuerpos anti histonas están presentes en el 80-95% de los pacientes con lupus eritematoso (LES) inducido por drogas, en el 20-50% de los pacientes con LES idiopático, y con poca frecuencia en pacientes con otras enfermedades autoinmunes del tejido conectivo. ANTICUERPOS ANTI MUSK (TIROSINA KINASA MÚSCULO ESPECÍFICA) Código 862558F La Miastenia Gravis es una enfermedad inmunológica adquirida que afecta la unión neuromuscular. El 80-85% de los pacientes tiene en el suero un anticuerpo específico llamado anticuerpo anti receptor de acetilcolina (ACRA). A este grupo se lo denomina Miastenia Gravis seropositiva. En el 15-20% de pacientes los ACRA son negativos que corresponde a Miastenia Gravis seronegativa. Un número variable de pacientes con ACRA negativo (seronegativos) presenta en el suero, altos niveles de anticuerpos Anti-MuSK que es una proteína que se ubica en la membrana del músculo y cuya función es mantener unidos los receptores de acetilcolina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente y 2 semanas refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA), Inmunoprecipitación Valores de referencia: Negativo: Título <10 Intermedio: Título 10-20 Positivo: Título ≥ 20 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para el diagnóstico de la Miastenia gravis seronegativa. 104 Fundación Santa Fe de Bogotá ANTICUERPOS ANTINEUTRÓFILO POR CITOMETRIA DE FLUJO Código 862745F Ver ANCAs Pag………………….86 ANTICUERPOS ANTIRECEPTORES TSH Código 862633F Los anticuerpos anti-receptor de la hormona TSH, pueden ser de dos tipos: anticuerpos estimulantes y anticuerpos bloqueadores. En la enfermedad de Graves o hipertiroidismo autoinmune están presentes los autoanticuerpos estimulantes que activan el receptor de tirotropina (TSH) causando hipertiroidismo autoinmune; los autoanticuerpos de tipo IgG producidos se unen a la hormona TSH bloqueando el receptor de la tiroides, inhibiendo la estimulación de la glándula y desencadenando el hipotiroidismo autoinmune. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 4días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: % de inhibición ≤ 17,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba tiene amplia utilidad clínica durante el embarazo en el diagnóstico diferencial de dos etiologías, tirotoxicosis con hallazgos clínicos ambiguos o enfermedad tiroidea no diagnosticada con exploración por radioisótopos; confirma el diagnóstico diferencial, en el primer trimestre de embarazo, de tirotoxicosis gestacional versus recurrencia de la enfermedad de Graves. En pacientes con función tiroidea normal confirma el diagnóstico de hipertiroidismo autoinmune o enfermedad de Graves-Basedow; en fetos de madres con enfermedad de Graves activa o controlada, permite determinar el riesgo neonatal de desarrollar tirotoxicosis y evalúa el riesgo de recaída a la enfermedad de Graves, posterior a tratamiento con medicamentos antitiroideos. ANTICUERPOS ANTI-RICKETTSIAS Código 866092F Las rickettsias son causantes de enfermedades infecciosas transmitidas por aerosoles, mordeduras, picaduras, rasguños, aguas y alimentos contaminados. Entre estas están el tifus clásico producido por la R. typhi y transmitido por piojos, el tifus murino, por pulgas, y la fiebre manchada de las montañas rocosas, por garrapatas. Manual de Procedimientos 11 105 La reactividad al antígeno R. Typhi se debe considerar grupal, pues la infección por R. prowazekii también induce anticuerpos que reaccionan con R. Typhi. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 5 días refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM para R. typhi y R. rickettsia Título ≤ 1:64 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De ayuda en el diagnóstico de la infección por Rickettsias. ANTICUERPOS ANTI SACCHAROMYCES CEREVISIAE IgG, IgA (ASCAS) Código 867201F Los anticuerpos anti-Saccharomyces cerevisiae (ASCA) han demostrado tener una prevalencia mucho mayor en los pacientes con enfermedad de Crohn que en los que sufren colitis ulcerativa. Estos anticuerpos, que pueden incluir las clases IgG y IgA, parecen dirigirse a las secuencias de manosa en la capa de manana del Saccharomyces cerevisiae. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgA Negativo ≤20,1 U Indeterminado: 20,1-24,9 Positivo: ≥ 24,9 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La detección de anticuerpos ASCAS es útil en el diagnóstico de enfermedad inflamatoria del intestino, especialmente para diferenciar entre la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerativa, en particular colitis indeterminada, utilizando una 106 Fundación Santa Fe de Bogotá combinación de pruebas con anticuerpos anti-neutrófilo citoplasmático perinuclear (pANCA) y ASCA3. Los anticuerpos ASCAS tienen una fuerte correlación con la enfermedad de Crohn. ANTICUERPOS HETERÓFILOS Código 906903 Son anticuerpos IgM que aglutinan eritrocitos de carnero o de caballo y que se encuentran en algunos individuos normales, en el 90% de pacientes con mononucleosis infecciosa, en enfermedad del suero, leucemias, policitemia vera, hepatitis viral A y B y en otras enfermedades. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. Metodología: Aglutinación de látex de eritrocitos Valores de referencia: Negativo Título ≤ 1:28 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de la infección por el virus de Epstein-Barr o mononucleosis infecciosa. Es necesario correlacionar el resultado con el hemograma donde puede encontrarse leucocitosis moderada y linfocitos atípicos. La utilización de eritrocitos de carnero puede dar un 9% de resultados falsos positivos por lo cual es mejor utilizar eritrocitos de caballo. Aproximadamente el 10% de pacientes con evidencia clínica de mononucleosis infecciosa no presentan anticuerpos heterófilos y en estos casos se requiere determinar anticuerpos a Epstein Barr para confirmar el diagnóstico. ANTICUERPOS IgG ANTI F-ACTINA Código 866093F Estos anticuerpos se encuentran aumentados en ciertas enfermedades autoinmunes y pueden tener valor diagnóstico. En la enfermedad celíaca los anticuerpos se correlacionan con el daño intestinal. En la hepatitis autoinmune son específicos para un pequeño porcentaje de pacientes con hepatitis autoinmune tipo 1 o hepatitis criptogénica. En cáncer gástrico se elevan, junto con otros anticuerpos, en la enfermedad severa con malos resultados. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. El resultado está disponible 5 días a partir de la fecha de la toma de la muestra. Manual de Procedimientos 11 107 Metodología: Microelisa Valores de referencia: Negativo: < 20,0 U Positivo débil: 20 – 30 U Positivo moderado o fuerte: ≥ 30,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico de la hepatitis crónica activa y hepatitis autoinmune. F-actina es uno de los objetivos específicos de los anticuerpos de la hepatitis autoinmune. Sólo el 21% de los pacientes con cirrosis biliar primaria y el 11% de los pacientes con enfermedades hepáticas relacionadas con alcohol son positivos para anticuerpos actina. El 16% de los pacientes con LES y el 10% de los pacientes con esclerodermia tienen anticuerpos actina. ANTICUERPOS IRREGULARES, DETECCIÓN Código 911003 En general los anticuerpos irregulares son significativos desde el punto de vista clínico cuando se asocian a enfermedad hemolítica del recién nacido, reacciones hemolíticas transfusionales o disminución llamativa de la sobrevida de los glóbulos rojos trasfundidos. La prueba se usa para detectar la presencia de Anticuerpos Eritrocitarios irregulares causados por sensibilización y el método es aglutinación en gel. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero y sangre total tomada con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra de plasma es estable 1 semana refrigerada y la de suero 1 semana refrigerada y congelada 1 mes. Metodología: Aglutinación en gel Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El principal objetivo de la prueba es la detección de los anticuerpos mas comunes causantes de reacciones post transfusionales. ANTICUERPOS A ISLET CELL (ISLOTES DE PÁNCREAS) Código 863411F Marcador de destrucción autoinmune de células de islotes del páncreas y por lo tanto útil en el diagnóstico de diabetes tipo I y estados prediabéticos. Su resultado debe correlacionar con los niveles de autoanticuerpos antiinsulina. 108 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana refrigerada y congelada 2 meses. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) Fijación de complemento (FC) Valores de Referencia: Autoanticuerpos Islotes células FC Título ≤ 1:2 Autoanticuerpos Islotes Células IgG U/JDF (Fundación Diabetes Juvenil) Normal: Título ≤ 5.0 U/JDF Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta prueba ha sido estandarizada con un suero proveniente de la Fundación de Diabetes Juvenil (JDF). Los puntos finales de la titulación del suero del paciente se comparan con una curva estándar que va desde 5 a 80 Unidades JDF. Esta prueba se debe complementar con los anticuerpos anti-GAD ANTICUERPOS LKM Tipo 1(Microsomales hígado y riñón) Código 862580F La enfermedad autoinmune hepática (hepatitis autoinmune y cirrosis biliar primaria) se caracteriza por la presencia de autoanticuerpos como los antimúsculo liso (SMA), los antimitocondriales (AMA) y los anti-LKM-1). Los subtipos de la hepatitis autoinmune se basan en los patrones de reactividad del autoanticuerpo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: < 20,1 U Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes con enfermedad hepática de etiología desconocida. Los anticuerpos LKM se encuentran en la hepatitis autoinmune tipo II. Manual de Procedimientos 11 109 ANTICUERPOS A LA/SSB ANTÍGENOS NUCLEARES EXTRACTABLES (Anti-ENAs) Còdigo 906430 ANTICUERPOS A RNP Código 906453 ANTICUERPOS A RO/SSA Código 906454 ANTICUERPOS A Sm Código 906456 Comprende un grupo de autoanticuerpos contra una variedad de antígenos celulares que se encuentran en varias enfermedades reumáticas sistémicas tales como lupus eritematoso sistémico (LES) polimiositis, síndrome de Sjögren, escleroderma y enfermedad mixta del tejido conectivo. Dentro de este grupo están: ribonucleoproteína (U1 snRNP), Smith (Sm), síndrome de Sjögren A (SS-A/Ro) y síndrome de Sjögren B (SS-B/La). El autoanticuerpo Sm es una ribonucleoproteina no histona, pequeña compuesta de varios autoantígenos designados como B, B1, D, E, F y G, específicos en pacientes con LES y enfermedad mixta del tejido conectivo y se presentan en aproximadamente en el 30% de los casos de LES. Los niveles de los anticuerpos Sm permanecen relativamente constantes en el tiempo en los pacientes con LES y también se encuentran asociados con los anticuerpos RNP. La ribonucleoproteína (RNP) es 1 de los 4 autoantígenos llamados antígenos nucleares extractables (ENAS). El anti-RNP ocurre en el 35-40% de pacientes con LES pero también se encuentra en casos de enfermedad mixta del tejido conectivo. La presencia de éste único marcador en estos pacientes disminuye la prevalencia de enfermedades renales y generalmente es de buen pronóstico. Los anti-SS-A/Ro se han detectado en el 35% de pacientes con LES y en un 40-60% de pacientes con Sjögren. Se encuentran generalmente en aquellos pacientes descritos como “LES negativo para anticuerpos antinucleares” y en niños y en madres de niños con bloqueo cardíaco congénito y manifestaciones cutáneas de lupus eritematoso neonatal. Los anti-SS-B/La se encuentran en el 10-15% de pacientes con LES y en pacientes con Sjögren. También son un factor de riesgo para la aparición de bloqueo cardíaco congénito. Cada ENA está compuesto de una o más proteínas asociadas con especies de ARN nuclear pequeño (snRNP) que tienen entre 80 a 350 nucleótidos. 110 Fundación Santa Fe de Bogotá Los anticuerpos a ENAs son comunes en pacientes con enfermedades reumáticas sistémicas como LES, síndrome de Sjogren, escleroderma o esclerosis sistémica y polimiositis/dermatomiositis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 72 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. Metodología: Microanálisis enzimático (Microelisa EIA) Valores de referencia: Negativo: 0- 20 U Indeterminado: 20 – 40 U Positivo débil: 40 – 80 U Positivo fuerte: > 80 U Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para evaluar pacientes con signos y sintomas de enfermedad del tejido conectivo en los cuales la prueba de anticuerpos antinucleares es positivo. Diagnóstico y diferenciación entre diferentes enfermedades del tejido conectivo especialmente LES y síndrome de Sjögren. Un resultado positivo aunque sea a títulos altos requiere correlación con los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio pues algunos individuos pueden tener títulos altos con poca o ninguna evidencia de enfermedad clínica. Los anticuerpos SS-B se encuentran casi siempre simultáneamente con los SS-A mientras que los SS-A pueden presentarse solos. Los pacientes que producen ambos anticuerpos generalmente tienen una enfermedad más leve con una incidencia menor de nefritis y anticuerpos a dsDNA. ANTICUERPOS IgA A RETICULINA Código 862530F ANTICUERPOS A RETICULINA TOTALES Código 862531F Los anticuerpos antireticulina no son específicos en enfermedad celíaca, pero pueden aparecer en personas con inflamación del intestino delgado sin relación con intolerancia al gluten. Estos anticuerpos pueden estar presentes también en síndrome de Sjögren, vitiligo, alopecia y dermatitis herpetiforme. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Manual de Procedimientos 11 111 Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: IgA < 1:10 Totales < 1:40 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Altamente específica para evaluación de enfermedad celíaca no tratada ANTICUERPOS A RECEPTORES DE TIROTROPINA Código 906462F La enfermedad tiroidea autoinmune se carateriza por la presencia de autoanticuerpos contra varios componentes tiroideos tales como el receptor de tirotropina (TSHR), tiroideo peroxidasa (TPO) y tiroglobulina (Tg) asi como por un infiltrado inflamatorio celular de intensidad variable en la glándula. Todas las formas de tirotoxicosis autoinmune (enfermedad de Graves, de Hashimoto y la neonatal) son causadas por la producción de autoanticuerpos estimulantes a TSHR. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis por electroquimiolumiscencia Valores de referencia: ≤ 1,75 IU/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico diferencial de la etiología en pacientes con hallazgos clínicos ambiguos donde se sospecha tirotoxicosis autoinmune. ANTIDEPRESIVOS TRICÍCLICOS Código 905304 Son drogas de amplio uso en el tratamiento de las enfermedades depresivas y las más comunes son imipramina, desipramina, amitriptilina y nortriptilina. La amitriptilina alcanza el estado de equilibrio 3-8 días de dosificación oral continua. La vida media de eliminación es de 17 a 40 horas. 112 Fundación Santa Fe de Bogotá La nortriptilina alcanza el estado de equilibrio 4-20 días de dosificación oral continua y la vida media de eliminación es de 18-93 horas. La desipramina alcanza el estado de equilibrio 2,5-11 días de dosificación oral continua y la vida media de eliminación es de 12-54 horas. La imipramina alcanza el estado de equilibrio 2-5 días de dosificación oral continua y la vida media de eliminación es de 9-24 horas. Todas las drogas se metabolizan en el hígado y sus metabolitos se excretan por vía renal. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulantes como EDTA, heparina de sodio o litio. La muestra es estable 5 horas a temperatura ambiente y 7 días refrigerada. No se deben usar tubos con gel separador. La muestra debe ser tomada inmediatamente antes de la dosis con el paciente en estado de equilibrio. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en támden (LC/MS/ MS) Rango terapéutico: 150-250 µg/L Niveles tóxicos Efecto cardíaco leve: 50,00 - 100,00 ng/mL Efecto cardíaco severo: 500,00 ng/mL Efecto cardíaco fatal: 1.000,00 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Seguimiento del tratamiento antidepresivo para evitar niveles tóxicos y en los casos donde se sospeche su ingestión como intento de suicido. ANTICUERPOS A ECHOVIRUS 4, 7, 9, 11, 30 Código 866581F Los enterovirus comúnmente infectan a los seres humanos y la infección puede ser asintomática o presentarse con un amplio espectro de enfermedad aguda especialmente en niños, que incluye fiebre de origen indeterminado, meningitis aséptica, encefalitis, miopericarditis, pleurodinia, conjuntivitis, enantemas, exantemas, faringitis y neumonía. Manual de Procedimientos 11 113 Actualmente hay por lo menos 70 serotipos de enterovirus que se denominan así: poliovirus 1 -3, echovirus 1 - 34, coxsackie grupo A 1- 24, coxsackie grupo B 1 - 6 y enterovirus 68 - 72. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de LCR enviada al laboratorio. Las muestras son estables por 1 semana a temperatura ambiente, 2 semanas refrigeradas y 1 mes congeladas a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Para cultivo viral se debe colocar la muestra en un medio de transporte especial para virus. Metodología: Fijación de complemento (FC) Valores de referencia: Suero LCR No Detectable: ≤ 1:8 Detectable: ≥ 1:8 Infección Reciente: ≥ 1:32 Negativo < 1:1 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El diagnóstico de infección por ECHO (enterocytopathogenic human orphan) virus se basa en su detección en cultivo y serología. El aislamiento en el líquido cefalorraquídeo es diagnóstico de meningitis pero su aislamiento de nasofaringe o heces solo sugiere la posibilidad de infección y la confirmación debe hacerse por la respuesta serológica aunque hay reacción cruzada con los otros enterovirus principalmente con el grupo coxsackie. ANTIESTREPTOLISINAS O (ASO-O) Código 906002 Las antiestreptolisinas son anticuerpos que se encuentran en infecciones estreptocócicas (grupo A) y que están dirigidos contra productos bacterianos extracelulares tales como estreptolisina O, hialuronidasa y la deoxiribonucleasa B (DNAsa B). La infección por Streptococcus grupo A (St pyogenes) en la faringe y en la piel (erisipela, piodermitis) son comunes y fácilmente diagnosticadas por cultivo pero pueden dar lugar a complicaciones tardías más severas como fiebre reumática y glomerulonefritis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 días a temperatura ambiente y/o 114 Fundación Santa Fe de Bogotá refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: Niños hasta 150 UI/mL Edad escolar y jóvenes: 166 – 200 UI/mL Adultos hasta 200 UI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de infección estreptocócica aguda o reciente. Generalmente dos meses después del comienzo de las manifestaciones de la fiebre reumática, el 78-80% de los pacientes presentan títulos elevados de ASOO; en los casos de piodermitis y nefritis la prevalencia del anticuerpo es de solo 57%. Pueden aparecer falsos positivos en otras enfermedades como artritis reumatoidea, escarlatina, amigdalitis, otras infecciones estreptocócicas, presencia de lipoproteína B, contaminación bacterial de la muestra y fenómenos de oxidación. La sensibilidad de la prueba es de 85% que aumenta a un 95% cuando se usa en conjunto con la prueba anti-DNase B aunque el cultivo de faringe continua siendo el estándar de oro para diagnosticar faringitis estreptocócica. La infección faríngea por St pyogenes también puede detectarse por la prueba directa de látex (Ver Antígeno Streptococcus). ANTÍGENO CARCINOEMBRIONARIO (ACE, CEA) Código 906603 Este antígeno es una glicoproteína que se expresa en mayor cantidad en el tejido embrionario del epitelio del colon y en el carcinoma del tracto gastrointestinal. El ACE no es específico de órgano ni de tumor. Hay concentraciones elevadas en cáncer colorrectal (57%), gástrico (41%), hepatocelular (45%) pancreático (59%) y biliar (59%) pero también se eleva en enfermedades benignas inflamatorias del colon y recto (17%), estómago (gastritis crónica y úlcera péptica 14%), hígado (cirrosis y hepatitis 17%), páncreas (21%) y seno (7%). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 8 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. Pueden presentarse valores elevados o disminuidos en pacientes que estén recibiendo preparaciones que contengan anticuerpos anti-ratón (HAMA) porque entre los reactivos de la prueba se utilizan anticuerpos monoclonales anti-ratón. Cuando la prueba se solicita para controlar evolución del tratamiento las mues- Manual de Procedimientos 11 115 tras deben tomarse en las mismas condiciones y analizarse por el mismo método. Metodología: Inmunoensayo quimioluminiscente con partículas paramagnéticas Valores de referencia: 0-3,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Por su baja sensibilidad y especificidad la prueba no debe solicitarse como tamizaje para detección precoz de carcinoma de colon. Su principal aplicación es en el seguimiento, evolución y pronóstico de pacientes que están siendo tratados por tumores malignos de los órganos que expresan el antígeno, especialmente carcinoma colorrectal para lo cual se necesita determinar los niveles antes del tratamiento. La sensibilidad del método para detectar recurrencia de cáncer colorrectal antes de la evidencia clínica (2-10 meses) está entre 60-95%. En estos casos la concentración se eleva persistentemente y valores por encima de 20 ng/mL son evidencia significativa de recurrencia y/o metástasis. Después del tratamiento los niveles disminuyen progresivamente hasta llegar a su valor normal generalmente a los 6 meses de un tratamiento exitoso. La elevación persistente de CEA tras el tratamiento terapéutico o la intervención quirúrgica indica enfermedad residual o recurrencia de la misma, mientras que la disminución de los niveles a los rangos normales indica que la intervención ha tenido éxito. ANTÍGENO DE CÁNCER DE MAMA 15-3 (CA 15-3) Código 906604 El CA 15-3 es una glicoproteína de alto peso molecular, denominada episialina, producida por el tejido epitelial mamario (normal o maligno). Se encuentran niveles séricos elevados en 31% de pacientes con cáncer de seno y su nivel se correlaciona con la masa tumoral; en estado I hay elevación en un 5% de los casos, 29% en estado II, 32% en estado III y 95% en estado IV. Cerca del 100% de las pacientes con descenso del CA 15-3 mayor al 50% están respondiendo favorablemente al tratamiento. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulantes como heparina de sodio o litio, y EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) 116 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: ≤ 31,3 U/ mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es más útil en el seguimiento post tratamiento para detectar recurrencia, especialmente enfermedad metastásica. Se encuentran niveles elevados en el 7% de pacientes que tienen recurrencia local y en 96% de las que tienen recurrencia local y sistémica. Valores por encima de 80 U/mL indican enfermedad metastásica y la prueba se considera un marcador más precoz que los criterios radiológicos y clínicos. Los niveles pueden elevarse en pacientes con otros tumores y en lesiones benignas. Es más útil que el CEA para la detección del cáncer mamario primario y/o metastásico pero puede ser de utilidad hacer los dos marcadores para correlacionar los dos niveles. La prueba no debe usarse como procedimiento de tamizaje para detectar cáncer en la población general. Valores dentro del rango normal no descartan la presencia de un tumor maligno de seno. ANTÍGENO DE CÁNCER DE OVARIO 125 (CA-125) Código 906605 Es una glicoproteína que se encuentra elevada en aproximadamente el 80% de mujeres con carcinoma de ovario, en 26% con tumores ováricos benignos y en 66% de pacientes con entidades no neoplásicas como primer trimestre del embarazo, menstruación, necrosis hepática severa, endometriosis, adenomiosis, periodo menstrual, fibromatosis uterina, salpingitis aguda, quistes ováricos, cirrosis e inflamaciones del peritoneo, pericardio y pleura. También puede elevarse en otras neoplasias malignas como carcinoma uterino, mesotelioma, hepatoma, adenocarcinoma pancreático y de pulmón. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulantes como heparina de sodio o litio, o EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Valores de referencia: ≤ 35 U/ mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico, seguimiento y control del tratamiento del carcinoma de Manual de Procedimientos 11 117 ovario La especificidad de la prueba es de 99,6 % cuando se usa en conjunto con un buen examen pélvico. Hay niveles elevados solamente en el 50%-75% de pacientes con tumores ováricos en estado I. El control postoperatorio debe hacerse por lo menos 3 semanas después de la cirugía pues la vida media del CA 125 es de 10 días y si se mide antes el nivel puede estar influenciado por la concentración que había en el momento de la cirugía. En el 95% de los casos se puede detectar enfermedad residual con concentraciones > 21U/mL pero un resultado negativo no excluye la presencia de recurrencia y es necesario utilizar procedimiento quirúrgico. Cuando la prueba se usa como marcador de respuesta al tratamiento la elevación persistente sugiere enfermedad maligna progresiva, recurrencia y/o pobre respuesta al tratamiento. La prueba no debe usarse como procedimiento de tamizaje para detectar cáncer en la población general. Valores dentro del rango normal no descartan la presencia de un tumor maligno de ovario. ANTÍGENO DE CÁNCER 19-9 (CA 19-9) Código 906606 El antígeno de carbohidrato 19-9, conocido como mucina, es un complejo glicoproteico de alto peso molecular cuyo determinante es un oligosacárido similar en estructura al antígeno del grupo sanguíneo Lewis ab (Leab) y por lo tanto no se expresa en individuos Lea-b-. Los niveles de CA 19-9 se elevan frecuentemente en pacientes con neoplasmas malignos gastrointestinales del páncreas (72-100%), hígado (67%), estómago (62%) colon y recto (19%) primarios o metastásicos; también se puede encontrar elevado en entidades no-malignas como hepatitis, cirrosis, pancreatitis (18%), gastrointestinales y en fibrosis quística. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulantes como heparina de sodio o litio, o EDTA para obtener plasma. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Valores de referencia: ≤ 37 U/ mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El principal uso del CA 19-9 es el de poder predecir la posibilidad quirúrgica del carcinoma de páncreas. Prácticamente casi todos los pacientes (95%) con niveles del antígeno mayores a 1.000 U/mL tienen un tumor de > de 5 cm en diámetro y los que tienen niveles < 1.000 U/mL tienen un tumor que permite ser resecado 118 Fundación Santa Fe de Bogotá quirúrgicamente. Niveles elevados post tratamiento quirúrgico indican recaída pero la falta de un tratamiento efectivo en estos casos precluye su uso para seguimiento. La prueba no debe usarse como procedimiento de tamizaje para detectar cáncer en la población general. Valores dentro del rango normal no descartan la presencia de un tumor maligno gastrointestinal. ANTÍGENO DE CÁNCER (CA 27-29) Código 863161F Es un antígeno mucinoso glicoproteico de alto peso molecular similar al CA 15-3 detectado por anticuerpos que reconocen epítopes asociados al cáncer de seno codificados por el gene humano MUC1 el cual se conoce con otros nombres como MAM6 y antígeno mucinoso de la leche. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: Negativo < 38 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para predecir recurrencia precoz de cáncer de seno. Se recomienda hacer determinaciones seriadas en pacientes que han sido tratadas para estados II o III y que están clínicamente libres de tumor. El mayor valor clínico es detectar recurrencia de cánceres extirpados en fases II o III. El aumento de la concentración sérica se observa en el 5% de pacientes en etapa I con carcinoma de mama, 29% en etapa II, 32% en etapa III y 95% en etapa IV. La prueba debe realizarse en conjunto con otros procedimientos clínicos que puedan detectar recurrencia precozmente. La prueba no debe usarse como procedimiento de tamizaje para detectar cáncer en la población general. Valores dentro del rango normal no descartan la presencia de un tumor maligno de seno. El CA 15-3 se puede usar en lugar del CA 27-29; aunque el CA 27-29 puede tener mejor sensibilidad para cáncer de seno, tiene las mismas indicaciones y limitaciones del CA 15-3. Manual de Procedimientos 11 119 ANTÍGENO DE CÁNCER CA 72-4 Código 863162F El antígeno de cáncer 72-4 es un complejo glicoproteico similar a la mucina con un alto peso molecular. Niveles elevados se encuentran en varias enfermedades malignas del tracto gastrointestinal como carcinomas de páncreas, estómago, vesícula biliar, colon y también en carcinoma de mama, ovario, cérvix y endometrio. La mayor sensibilidad diagnóstica se encuentra para los carcinomas del tracto gastrointestinal y los ovarios. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 5 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente Valores de referencia: ≤ 3,5 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil como marcador tumoral especialmente en carcinomas gastrointestinales y de ovario. ANTÍGENO ESPECÍFICO DE PRÓSTATA (APE, PSA) Código 906610 ANTÍGENO ESPECÍFICO DE PRÓSTATA FRACCIÓN LIBRE (PSA libre) Código 906611 El APE (PSA) es una glicoproteína con actividad proteolítica responsable de la disolución del líquido seminal después de la eyaculación. Es producida casi exclusivamente por el citoplasma de las células ductales de la glándula prostática. Existen en el suero tres formas principales de APE: la APE libre que constituye el 10-20% de la total y las otras dos resultan de complejos formados con dos de las principales proteasas inhibidoras extracelulares; el complejo APE-ACT (alfa-1-antiquimotripsina) constituye el 85-90% de la total y es el que más se encuentra en la circulación en los casos de carcinoma prostático; la APE libre se encuentra en mayor concentración en los casos de hipertrofia benigna de la próstata. Normalmente cantidades muy pequeñas de la total (< 2,5 ng/mL) se secretan a la circulación pero estos niveles aumentan en casos de hipertrofia prostática benigna (28%), retención urinaria aguda, carcinoma prostático (58%), prostatitis aguda y crónica, biopsia prostática, masaje prostático, eyaculación reciente y ocasionalmente por manipulación instrumental o manual de la próstata. 120 Fundación Santa Fe de Bogotá Algunos pacientes (12-15%) con carcinoma prostático presentan niveles aumentados de PSA libre pero en general son más bajos que en los pacientes que tienen hipertrofia benigna. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra debe tomarse antes de biopsia de próstata, prostatectomía, ecografía transrectal, o masaje prostático para evitar variaciones en el nivel del antígeno con relación a su valor basal. Deben pasar por lo menos 48 horas después de eyaculación o ejercicio prolongado en bicicleta estática o móvil . Muestra de suero. La muestra es estable por 5 días en refrigeración y 5 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de partículas paramagnéticas. Valores de referencia: PSA total ≤ 49 años ≤ 2,0 50 - 59 años ≤ 3,0 60 - 69 años ≤ 4.0 70 - 79 años ≤ 5.5 PSA libre Posible hiperplasia benigna: ≤ 0.15 Posible CA de próstata: ≤ 0.15 % APE libre: 4,3-52,2% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es importante determinar la relación APE libre/APE en pacientes cuyo APE total este entre 4-10 ng/mL y tacto rectal negativo para detectar lesión temprana y como ayuda para determinar la necesidad de biopsia. Si esta relación es mayor del 20-25 % es muy poco probable que el paciente tenga cáncer de próstata pero si la relación es menor del 15 % existe una buena posibilidad de que haya enfermedad maligna. No se justifica determinar el % de APE libre en los casos en que el APE total sea menor a 4 ng/mL (tacto rectal negativo) o mayor a 10 ng/mL (tacto rectal positivo). Se considera que niveles de APE < 7 ng/mL indican enfermedad localizada y cifras superiores a 20 ng/mL enfermedad diseminada. En pacientes con cáncer, el APE debe disminuir a niveles casi indetectables (00,2 ng/mL) después de prostatectomía radical lo que indica que todo el tejido prostático ha sido removido y en estos casos por lo menos el 93% no tendrán recurrencia. Esencialmente todos los pacientes con un nivel postquirúrgico de APE de 0,4 ng/mL o mayor tienen probabilidad de recurrencia si no son trata- Manual de Procedimientos 11 121 dos con terapia radioactiva o anti-androgénica. Por lo tanto los niveles de APE postquirúrgicos se pueden utilizar para identificar pacientes con carcinoma residual quienes pueden ser candidatos para el tratamiento médico. En general las pruebas tienen una sensibilidad de 90% y una especificidad de 55% para APE y de 73% cuando se calcula la relación APE/APE libre. ANTÍGENO GALACTOMANO DE ASPERGILLUS Código 906120F La aspergilosis invasiva (AI) es en la actualidad la primera causa de muerte de origen infeccioso en pacientes post trasplante alogénico de progenitores hematopoyéticos y que están recibiendo terapia agresiva de inmunosupresores. La incidencia de AI, dependiendo del tipo de población, varía entre el 5-20%. Ello se debe en parte a la falta de un diagnóstico precoz. Recientemente se ha descrito la detección del antígeno de galactomano de Aspergillus en suero por una técnica de ELISA. El antígeno galactomano es una molécula que se encuentra en la pared de las especies de Aspergillus. Este antígeno se puede detectar en el suero 7 a 14 días antes que otras pruebas diagnósticas se presenten y permite una intervención terapéutica antifúngica rápida. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 5 días congelada a -20°C. Muestra de líquido de lavado bronquial que es estable 24 horas refrigerada y 5 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo Índice ≤ 0,5 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Un resultado positivo es compatible con el diagnóstico de aspergilosis invasiva (AI) pero debe ser considerado junto con otros procedimientos diagnósticos como cultivo microbiológico, examen histopatológico de biopsia del tejido y evidencia radiográfica. Un resultado negativo no descarta la posibilidad del diagnóstico de AI y es recomendable hacer repetición de la prueba cuando haya una sospecha fuerte de la infección. Se presentan resultados falsamente positivos en pacientes tratados con piperacilina/tazobactam, así como con betalactámicos semisintéticos por lo cual se recomienda la confirmación por otros métodos diagnósticos. Se presentan resultados falsamente negativos en pacientes con enfermedad granulomatosa crónica y en el síndrome de Job crónico. 122 Fundación Santa Fe de Bogotá ANTÍGENO P1 Código 862720F El Sistema P, de acuerdo a la última nomenclatura de los Sistemas de Grupo Sanguíneo de la ISBT (International Society of Blood Transfusion), tiene un único antígeno que es P. Hay dos fenotipos: el fenotipo P1, presente en el 80% de los individuos de raza blanca, y el fenotipo P2 caracterizado por la ausencia de P1, presente principalmente en la población vietnamita. El anticuerpo anti-P1 generalmente es IgM y no se considera causal de enfermedad hemolítica del recién nacido. P1 se encuentra expresado en linfocitos, granulocitos, monocitos y plaquetas y en forma soluble se lo ha identificado en huevos blancos de paloma y en el líquido del quiste hidatídico. También ha sido encontrado en ejemplares de Ascaris suum, Fasciola gigantita, Paragoninus westermani y Dicrocelium dendriticum. El significado clínico de su presencia en estos parásitos aún se desconoce, pero se postula su intervención en el mimetismo molecular. Los pacientes que tienen grupo sanguineo P1 están expuestos a mayor riesgo de sufrir infecciones por estos parásitos que los pacientes que carecen de el. En las mujeres embarazadas estos anticuerpos se presentan en el 1,3%, siendo los más frecuentes anti-P1 y anti-Lewis. En la población hispánica, los crioaloanticuerpos están presentes en 0,18% de donantes de sangre y 0,83% de los pacientes, siendo anti-P1 el más común (44%) con mayor frecuencia en las mujeres. La autoinmunizacion contra los eritrocitos ocurre raramente durante el embarazo y conlleva a embarazos de alto riesgo por amenaza de aborto en el primer trimestre, debido a insuficiencia placentaria que ocasiona retraso de crecimiento y muerte fetal. Los antígenos de gripo P son receptores de diferentes Patógenos. Los P, P1, Pk, son receptores de la Eschericha coli enteropatógena; los Pk y P1 son receptores de las Toxinas de E. Coli enterohemorrágica; y las bacterias Sterptococcus sus causales de miringitis unen al Antígeno Pk. Se comprobó que los antígenos P (globósidos) también operan como receptores de Eritrovirus (parvovirus) B19, responsables del Eritema infeccioso (quinta enfermedad). Las personas con fenotipo P que carecen de globósido, son naturalmente resistentes a la infección con éste patógeno. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener sangre venosa. La muestra es estable 72 horas refrigerada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 24 horas hábiles a partir de la fecha de envío Manual de Procedimientos 11 123 Metodología: Aglutinación en tubo se confirma por microtécnica Valores de referencia: Ver informe Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Valoración de pacientes con sospecha de tener el antígeno P1 y su correlación con algún proceso infeccioso. ANTÍGENO SOLUBLE DE HÍGADO (SLA/LP) Código 862578F Estos anticuerpos son altamente específicos para hepatitis autoinmune (HAI) tipo 1 y pueden ser los únicos que se encuentren en el suero de los pacientes con esta entidad. La denominación de estos anticuerpos es compleja debido a que inicialmente se describieron como dos formas totalmente distintas, frente al antígeno soluble hepático o sobre un sustrato de hígado y páncreas. Sin embargo posteriormente se identificó el blanco específico que corresponde a una proteína del supresor del ARN de transferencia de la UGA. La presencia de anticuerpos anti-SLA, confirman el diagnóstico de CAH-1, tienen utilidad clínica en la evaluación de cirrosis biliar primaria (en inglés PBC) y en la investigación de enfermedad hepática de etiología desconocida. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente (18-25°C), 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo ≤ 20,0 U Indeterminado 20,0 – 24,9 U Positivo: ≥ 25,0 U Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Para evaluación y diagnóstico de hepatitis autoinmune; es positivo en aproximadamente el 30% de pacientes con HAI-1, pero también puede hallarse en HAI-2 y en la colangitis esclerosante primaria (CEP). Se había propuesto que su presencia permitiría distinguir otra forma de HAI, la tipo 3, pero actualmente no hay datos que sustenten este supuesto. La presencia de SLA/LP se correlaciona con una mayor gravedad de la HAI. Asimismo, su presencia en los pacientes negativos para el resto de autoanticuerpos puede ayudar a establecer el diagnóstico de HAI. 124 Fundación Santa Fe de Bogotá ANTÍGENO TUMORAL DE VEJIGA Código 906618 El antígeno tumoral de la vejiga (BTA por sus siglas en inglés) se encuentra en la orina de muchos pacientes con cáncer de vejiga. Puede que sea una señal de algunas afecciones no cancerosas también, como cálculos renales o infecciones en el tracto urinario y trauma vesical Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente (18-25°C), 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta prueba no es tan sensible como la cistoscopia para detectar cáncer de vejiga, pero puede ser útil al permitir que la cistoscopia sea realizada con menos frecuencia durante el seguimiento para el cáncer de vejiga. Hasta ahora, la mayoría de los expertos aún consideran la cistoscopia como la mejor forma de diagnóstico y seguimiento del cáncer de vejiga. ANTÍGENOS BACTERIANOS Código 906203 Los agentes etiológicos más frecuentes de la meningitis bacteriana son: Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis (grupos A, B, C), Haemophilus influenzae tipo B y Streptococcus grupo B. Es posible establecer el agente causal detectando los antígenos polisacáridos específicos que se liberan en el LCR, suero u orina. Los agentes más comunes de la sepsis neonatal son el Streptococcus grupo B y el E. coli enteropatógeno K1; en grupos de mayor edad los agentes más comunes son Haemophilus influenzae tipo B, Streptococcus pneumoniae y Neisseria meningitidis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Envío de muestra de líquido cefalorraquídeo (LCR) en tubo estéril. La muestra es estable 12 horas refrigerada y 48 horas congelada a -20ºC. Metodología: Técnica de aglutinación de partículas de látex sensibilizadas con los antígenos correspondientes a las bacterias en estudio. Manual de Procedimientos 11 125 Valores de referencia: Negativo para los antígenos bacterianos en estudio. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Una prueba positiva para alguno de los antígenos indica la presencia de la bacteria en el LCR y soporta el diagnóstico de meningitis bacteriana. El umbral de sensibilidad para N. meningitidis grupo B, E coli K1 y de H. influenzae tipo b es de 25 ng/mL; para N. meningitidis grupos A y C es de 50 ng/mL y para S. pneumoniae es de 100 ng/mL. Una reacción positiva con el látex R4 (N. meningitidis B/E coli K1) en un recién nacido y/o prematuro indica en la mayoría de los casos la presencia de E. coli K1; en un paciente de mayor edad indica, con mayor probabilidad la presencia de N. meningitidis grupo B. La sensibilidad del método para los diferentes antígenos va desde el 74% para N. meningitidis grupo C hasta 94% para S. pneumoniae y la especificidad está entre 99-100%. ANTÍGENOS FEBRILES (Aglutininas febriles, seroaglutinaciones) Código 906304 El diagnóstico de la fiebre tifoidea y de otras Salmonelosis debe hacerse por aislamiento del agente etiológico por medio de hemocultivo bacteriológico pues la prueba serológica es uno de los análisis más controvertidos a nivel de la práctica clínica. A pesar de que las reacciones de Widal y Weil-Felix, como se conoce a las seroaglutinaciones, se usan muy extensamente estas tienen muchas limitaciones y su resultado se debe interpretar con mucho cuidado. Los antígenos febriles pueden ser útiles en algunos casos especialmente cuando hay una elevación cuádruple del título en individuos de áreas no endémicas o en niños menores de 10 años en áreas endémicas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días refrigerada y 1 mes congelada a -20 ° C. Metodología: Técnica cualitativa de aglutinación de partículas de látex recubiertas con antígenos de Brucella abortus, Proteus OX19 y Salmonella 0 y H. Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Utilidad limitada por tener baja sensibilidad y especificidad para el diagnóstico de fiebre tifoidea. El estándar de oro para este diagnóstico es la detección de la bacteria en hemocultivo. 126 Fundación Santa Fe de Bogotá ANTI-HUMANO ANTI-RATÓN (HAMA) Código 863195F Los anticuerpos monoclonales de ratón se utilizan in vivo para la inmunosupresión después de un trasplante con el objetivo de evitar cuadros de rechazo, para suprimir fases agudas de autoinmunopatías y para la inmunogamagrafía o la inmunoterapia in vivo en pacientes con tumores. La administración de anticuerpos monoclonales de ratón puede inducir la aparición de HAMA en estos pacientes. Un uso reiterado de anticuerpos monoclonales de ratón suele provocar un aumento significativo de la concentración de HAMA en el suero del paciente. El HAMA también puede ser detectado en un porcentaje pequeño en la población general y generalmente representa anticuerpos heterófilos o exposición en la dieta de proteínas murinas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente (1825°C), 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: ≤ 75 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar presencia de anticuerpos humanos anti-ratón en pacientes que están en terapia con anticuerpos monoclonales de tipo murino ANTI-LEPTOSPIRA IgG, IgM Código 867200F La leptospirosis es una zoonosis que se encuentra distribuida mundialmente. La mayor fuente de la infección en el humano son los animales domésticos aunque los animales salvajes son el reservorio natural de la leptospira. La trasmisión de la infección se presenta por contacto con alimento, agua, tierra y orina proveniente de un animal infectado Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Título ≤ 1:80 Manual de Procedimientos 11 127 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Como respuesta a cualquiera de los 16 serotipos de leptospira que producen la leptospirosis se elevan ambos anticuerpos IgG e IgM. El IgM es detectable a las 1 o 2 semanas del comienzo de los síntomas y hace un pico entre la 2a y la 4a semana. Títulos iguales o mayores a 1:100 representan infección activa o reciente. ANTITROMBINA III (AIII) Código 902007 Esta proteína sintetizada en el hígado es el principal inhibidor natural y fisiológico de la trombina y de las formas activadas de factores IX, X, XI, XII y prekalicreina. Las anormalidades de la AIII pueden ser congénitas o adquiridas y resultan de disminución en la concentración y/o actividad funcional reducida. La deficiencia congénita de AIII se ha relacionado con episodios trombóticos recurrentes y la adquirida se ha asociado con fenómenos trombóticos en varias entidades tales como desordenes hepáticos, coagulación intravascular diseminada, enfermedades malignas, septicemia, estados postoperatorios con trombosis venosa profunda y con el uso de anticonceptivos orales y otras drogas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato para obtener plasma. La muestra es estable 6 horas a temperatura ambiente, 2 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Colocar la muestra en hielo y enviarla inmediatamente al laboratorio. Se disminuye fisiológicamente por anticonceptivos orales, estrógenos, asparaginasa, etinilestradiol, tamoxifen, mestranol y en estados tales como embarazo, cirugía y cirrosis hepática. El tratamiento con cumarínicos, irudina u otros inhibidores directos de la trombina producen una ligera elevación de la AIII y el tratamiento con heparina puede disminuirla. Metodología: Técnica cromogénica cuantitativa. Valores de referencia: AIII: 79,4- 112% Recién nacidos a término normales y prematuros (30-36 semanas) pueden tener niveles disminuidos (35-40%) y alcanzan los valores del adulto a los 90 días del período postnatal; en los prematuros los valores se alcanzan a los 180 días postnatal Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Resultados por debajo del 75% están asociados generalmente a tendencia trombótica. Pacientes con deficiencia congénita heterocigota generalmente tienen 128 Fundación Santa Fe de Bogotá niveles de 25-60%. No es útil para predecir la ocurrencia de un episodio trombótico ni para el diagnóstico de deficiencia congénita en pacientes con coagulación intravascular diseminada y fibrinólisis o episodio trombótico agudo. APOLIPOPROTEÍNA A1/B (APO A1/APO B) Código 903413/903414 La APO A1es una de las principales proteínas de las lipoproteínas de alta densidad (HDL, AD); la concentración plasmática de HDL está inversamente relacionada con el riesgo de enfermedad coronaria y pacientes con la enfermedad de Tangier tienen niveles de APO A1 menores al 1%. La APO A2 es el principal componente proteico de las lipoproteínas de baja densidad (LDL, BD) y existe en dos formas APO B 100 y APO B 48. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se requiere ayuno de 12 horas y no haber ingerido alcohol durante las 24 horas previas al examen. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable por 72 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Turbidimetría Valores de referencia: APO A1: 80 -170 mg/dL APO B: 48-124 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para evaluar el riesgo de enfermedad ateroesclerótica en individuos con historia familiar significativa de enfermedad coronaria. Pacientes con diagnóstico de enfermedad coronaria presentan consistentemente niveles elevados de APO B y disminuidos de APO A1. La APO B es útil en el seguimiento de individuos con valores anormales de colesterol LDL y en la confirmación del diagnóstico de hipo o abetalipoproteínemia. La APO A1 es útil en la enfermedad de Tangier pues en estos casos la HDL está muy disminuida también la APO A1. Manual de Procedimientos 11 129 APO E GENOTIPO Código 838930F La APO E hace parte de la familia de la apoproteínas y es el principal componente de los quilomicrones. Los defectos en la APO E producen la disbetalipoproteinemia o hiperliproteinemia tipo III en la cual se presenta aumento en colesterol y triglicéridos debido a que hay un trastorno en la depuración de los quilomicrones y en las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable máximo 24 horas a temperatura ambiente y 72 horas refrigerada . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Valores de referencia: Ver informe Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para determinar el genotipo de apolipoproteína específico en pacientes con hiperlipoproteinemia tipo III. ARBOVIRUS, ANTÍGENO Código 906305 Los arbovirus son “virus llevados por artrópodos” (ar-bo-virus: arthropod-bornevirus). Existe una gran variedad (más de 500, de los cuales más de 100 pueden afectar al ser humano), implicando a varias familias: arenaviridae, bunyaviridae, filoviridae, flaviviridae, reoviridae, rabdoviridae, togaviridae. Esta infección zoonótica es transmitida por mosquitos vectores de varios géneros a los vertebrados equinos, bovinos, caninos, aves y humanos. Estos virus generalmente atacan el SNC y producen encefalitis que puede ser de diferentes tipos según el virus que esté implicado. Entre estas infecciones están: encefalitis californiana, encefalitis equinas occidental y oriental y la encefalitis de San Luis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Título ≤ 1:2 130 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es de ayuda en el diagnóstico de las encefalitis causadas por arbovirus. ARILSULFATASA B, EN ORINA Código 908501 ARILSULFATASA A, EN LEUCOCITOS Código 908702 La deficiencia de la enzima arilsulfatasa A produce la leucodistrofia metacromática (LDM) que es una enfermedad hereditaria de depósito lisosomal lo que lleva a la acumulación del galactosil-sulfátido en la sustancia blanca del SNC y del sistema nervioso periférico. También se puede acumular en los riñones, vesícula biliar y otras vísceras. En particular el depósito de esta sustancia produce daño en las vainas de mielina de las neuronas y se excreta en cantidades abundantes en la orina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de sangre total recolectada con anticoagulante ACD para obtener leucocitos. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente y/o refrigerada. Muestra de orina recolectada durante 24 horas sin preservativo. Durante la recolección la muestra debe conservarse en refrigeración. La muestra es estable 14 días en refrigeración. Las pruebas se procesan en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Orina Colorimetría cinética Leucocitos: Colorimetría enzimática Valores de referencia: Orina >1 U/L Leucocitos: ≥ 62 nmol/h/mg Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba preferida para detectar la leucodistrofia metacromática es la que se hace en leucocitos. ARSÉNICO EN ORINA O SANGRE Código 905709 Manual de Procedimientos 11 131 ARSÉNICO EN SANGRE TOTAL Código 905709-1 ARSÉNICO ORINA DE 24 HORAS Código 905709-2 El arsénico es un elemento natural de la corteza terrestre y uno de los metales tóxicos que más se encuentran en insecticidas y que puede contaminar las aguas subterráneas. Las principales rutas de exposición de las personas al arsénico son la ingesta e inhalación. El arsénico es acumulable en el organismo por exposición crónica y cuando se superan ciertos niveles de concentración. El mecanismo de toxicidad del arsénico es la inhibición de la actividad enzimática a través de interacción de grupos sulfidrilos y por sustitución de los fosfatos en las enzimas mitocondriales. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no debe haber comido productos del mar (mariscos o pescado) 48 horas antes de la recolección de la orina. Muestra de orina recolectada durante 24 horas sin preservativo en envase libre de metales. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 2 semanas congelada a -20ºC. Es preferible mantener la muestra refrigerada a las 4 horas de haber terminado la recolección. Sangre total recolectada en tubo especial para elementos traza con EDTA como anticoagulante. La muestra es estable 10 días a temperatura ambiente y/o refrigerada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Plasma acoplado inductivamente/Espectrometría de masa (ICPMS) Valores de referencia: Orina ≤ 81μg/L Sangre total: ≤ 23μg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para la evaluación de pacientes con intoxicación por arsénico. Normalmente se consumen diariamente de 5-25 μg de arsénico en la dieta normal. Después de una comida rica en productos marinos, que pueden contener la forma orgánica, no tóxica del arsénico, la cantidad del metal en la orina puede aumentar a 300 μg por muestra por día. La concentración del arsénico en sangre total se eleva por un período corto de 132 Fundación Santa Fe de Bogotá tiempo después de la exposición y después desaparece rápidamente hacia los tejidos por su gran afinidad con las proteínas tisulares. Niveles de arsénico en sangre total mayores a 12 ng/mL indican exposición significativa El método preferido para la exposición a arsénico es la determinación en la orina. AZÚCARES REDUCTORES EN HECES Código 907001 AZÚCARES REDUCTORES EN ORINA Código 907101 Los azúcares tales como glucosa, galactosa, fructosa, maltosa, lactosa y pentosa se caracterizan como substancias reductoras basadas en su habilidad para reducir los iones cúpricos a cuprosos. Los azúcares reductores fecales se pueden aumentar en los síndromes de malabsorción de carbohidratos. La glucosa es el azúcar reductor más abundante en el organismo, seguido de la lactosa. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de materia fecal preferiblemente diarreica recién emitida. La muestra es estable 2 horas Metodología: Análisis químico con tira reactiva Valores de referencia: Negativo Utilidad e interpretación del resultado Los azucares reductores se consideran indicadores de infecciones virales, bacterianas o indeterminadas en los procesos diarreicos, especialmente en niños. En lactantes son indicadores de que los procesos diarreicos pueden ser por deficiencia de las enzimas disacaridasas, que impiden desdoblar la lactosa de la leche materna. El resultado positivo indica deficiencia de las enzimas disacaridasas intestinales, principalmente sucrosa y lactosa, por deficiencia congénita o daños inespecíficos en la mucosa. Manual de Procedimientos 11 133 B BACILOSCOPIA PARA MICOBACTERIAS Código 901101F La baciloscopia se determina con la coloración para bacilo ácido alcohol resistente (AAR) que significa que las paredes celulares de las micobacterias, ricas en lípidos, tienen la característica única de atrapar fuertemente el colorante carbolfuschina resistiendo a la decoloración con alcoholes y ácidos fuertes. La coloración se puede aplicar a diferentes extendidos de material tisular entre ellos el más común el esputo para detectar el bacilo tuberculoso. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de esputo expectorado, preferiblemente el primero de la mañana, o de otro líquido biológico recolectado en frasco estéril y enviado rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 2-4 horas a temperatura ambiente. El esputo debe representar una muestra de secreción profunda y no ser únicamente saliva. Se deben tomar como mínimo dos muestras en días diferentes para aumentar la posibilidad de encontrar bacilos. Líquido corporal diferente a orina tomado en frasco estéril . Metodología: La técnica semicuantitativa de coloración de extendidos que recomienda la Organización Mundial de la Salud es la de Ziehl-Neelsen que utiliza el colorante fuscina fenicada. El resultado se informa en cruces (+) de acuerdo a la escala anotada a continuación. Valores de referencia: Negativo para bacilos AAR en más de 100 campos observados al microscopio Positivo (+): < de 1 bacilo AAR en más de 100 campos observados (++): 1-10 bacilos AAR por campo en 50 campos observados (+++): > 10 bacilos AAR por campo en 20 campos observados Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de infección activa por Mycobacterium tuberculosis y otras micobacterias atípicas. También puede ser de utilidad para evaluar respuesta al tratamiento en individuos que están expulsando muchos bacilos. Se ha estimado que debe haber por lo menos 10.000 bacilos/mL de esputo para que sea posible detectarlos en la baciloscopia, pero su hallazgo asociado a la 134 Fundación Santa Fe de Bogotá sintomatología característica, establece el diagnóstico de infección tuberculosa. BARBITURATOS Código 905204/905203 Representan una clase de drogas que fueron introducidas inicialmente como hipnóticos, sedantes, anticonvulsivantes y analgésicos pero que ahora se consideran más como drogas “de abuso”. Dentro de este grupo están alobarbital, amobarbital, butabarbital, butalbital, mefobarbital, pentobarbital, fenobarbital, secobarbital y tiopental. La mayoría de estas drogas se metabolizan primariamente en el hígado y se excretan en la orina como metabolitos inactivos. Se usan como drogas de abuso para inducir el sueño después de un “coctel estimulante” compuesto de anfetaminas y cocaína. Condiciones del paciente y/o de la muestra Es importante anotar la historia clínica del paciente (ingestión de la droga, dosis y tiempo) para una buena correlación del resultado. Muestra de orina de micción simple tomada en recipiente limpio y nuevo. Se pueden utilizar como preservativos azida de sodio al 0,1%, ácido bórico al 0,1% y fluoruro de sodio 0,013 %. La muestra es estable 4 días refrigerada. La contaminación de la muestra con detergentes e hipoclorito de sodio (decol) interfiere con el resultado. Por las implicaciones legales de la muestra debe ser cogida en presencia de un funcionario del laboratorio diligenciando el formato de cadena de custodia correspondiente. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 5 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Prueba de tamizaje: Espectrofotometría Prueba confirmatoria: Cromatografía líquida/Espectrometria de masa en tándem (LC/MS/MS) Rango terapéutico: Negativo < 200 ng/mL Confirmatoria: ≥ 100 ng/mL para cada barbitúrico La concentración de la droga o de sus metabolitos detectada en orina no corresponde con la concentración de la droga en sangre, ni con el grado de daño físico. La presencia de la droga o de sus metabolitos en orina solo indica exposición previa a la droga. La prueba confirmatoria en orina identifica el barbitúrico específico y es utilizada posterior a una prueba de tamizaje positiva. Manual de Procedimientos 11 135 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Prueba de tamizaje o presuntiva para detectar presencia de barbitúricos en la orina. La mayoría de los barbitúricos son de acción rápida y su presencia en la orina indica uso durante 3 días previos a la determinación. El fenobarbital tiene vida media larga y su presencia en la orina indica que el paciente ha usado la droga, en algún momento, durante los 30 días previos al examen. Una prueba positiva requiere confirmación por cromatografía de gas o espectrofotometría de masa, especialmente si el resultado se va a utilizar con fines médicolegales. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. BARTONELLA henselae IgG, IgM Código 866090F BARTONELLA quintana IgG, IgM Código 863175F Bartonella henselae y Bartonella quintana son bacterias Gram (-) pequeñas, pleomórficas de forma bacilar. Se cree que el vector de la Bartonella henselae es el piojo Pediculus humanis. No se ha encontrado un vector animal para la Bartonella quintana. Se cree que el gato doméstico sea un reservorio para ambas bacterias. Los humanos son los únicos hospederos de la infección por Bartonella y en los que se produce una infección significativa tales como enfermedad de Carrión, fiebre de las trincheras y la enfermedad por arañazo de gato. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Técnica de Inmunofluorescencia (IFA) Valores de referencia: Bartonella henselae IgG: Título<1:64 IgM: Título <1:20 Bartonella quintana IgG: <1:6 IgM: <1:20 136 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico rápido de infección por Bartonella especialmente cuando hay historia de arañazo de gato o cuando hay biopsia de tejido que muestre los hallazgos típicos de micro abscesos estelares o una coloración Wartin-Starry positiva BENZODIACEPINAS SEMICUANTITATIVA Código 905306 BENZODIACEPINAS CUANTITATIVA Código 905305 Son drogas depresoras del SNC y que se usan clínicamente como sedantes, hipnóticas, ansiolíticas, relajantes musculares, antiepilépticas y en el tratamiento del alcoholismo. Tienen un rango terapéutico muy grande y generalmente son bien toleradas y la vida media va desde 1 hasta 100 horas dependiendo del compuesto. Debido a su fácil consecución y bajo costo se han constituido como un grupo importante de drogas de abuso. Condiciones del paciente y/o de la muestra Es importante anotar la historia clínica del paciente (ingestión de la droga, dosis y tiempo) para una buena correlación del resultado. Muestra de orina de micción simple tomada sin preservativo. La muestra es estable por 3 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y congelada a -20°C. La prueba confirmatoria se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Semicuantitativa: Interacción cinética de micropartículas en solución (KIMS). Confirmatoria: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/ MS/MS) Rango terapéutico: Semicuantitativa: Menor de 200 ng/ml Confirmatoria: <200 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Prueba presuntiva o confirmatoria para detectar presencia de benzodiacepinas (alprazolam, flunitrazepam, clordiazepoxide, diazepam, flurazepam, lorazepam, and triazolam) y sus metabolitos en suero. Manual de Procedimientos 11 137 Una prueba presuntiva positiva requiere confirmación por cromatografía de gas o espectrofotometría de masa, especialmente si el resultado se va a utilizar con fines médico-legales. BETA-2 GLICOPROTEÍNA I IgG/IgM/IgA Código 862588F/906801 La Beta 2 GP1 llamada también apolipoproteína H es un aminoácido sintetizado por los hepatocitos, las células endoteliales y el trofoblasto. Niveles patológicos de Beta 2 GP1 se encuentran en pacientes con el síndrome antifosfolípido, entidad que está asociada a trombosis, complicaciones en el embarazo, trastornos circulatorios cutáneos, trombocitopenia y endocarditis trombótica no bacteriana. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM/IgA Negativo <21,0 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los autoanticuerpos a Beta 2 GP1con niveles mayores de 40 U/mL para IgG y/o IgM constituyen criterio diagnóstico para el síndrome anti-fosfolípido. Si el paciente está recibiendo terapia anticoagulante no se afecta la detección de los anticuerpos. La detección de anticuerpos B2-GPI IgM, indica el inicio de la enfermedad autoinmune y la presencia de anticuerpos IgG, correlaciona el estado y progreso de las manifestaciones de la enfermedad autoinmune del síndrome antifosfolípido. b2-MICROGLOBULINA (b2-M) Código 906620 Es una proteína con movilidad de cadena liviana que pertenece al complejo HLA clase I y que se expresa en la superficie de casi todas las células nucleadas. La proteína está presente en la superficie de las células nucleadas como “cadena liviana asociada con HLA”. En individuos sanos se produce de una manera relativamente constante, se elimina por los riñones, donde se filtra, reabsorbe y se cataboliza en los túbulos proximales. Normalmente solo se encuentran trazas en la orina pero si hay daño tubular la excreción urinaria se aumenta. 138 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. Muestra de orina a la cual se le debe ajustar el pH entre 7-8 con fosfato de potasio. La muestra es estable 1 semana refrigerada y 1 año congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Suero:Inmunoturbidimetría Orina:Nefelometría Valores de referencia: Suero: 0,9-3,0 mg/L Orina: ≤ 0,24 mg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Aunque la concentración de la b2-M se eleva en una gran variedad de enfermedades malignas e inflamatorias tales como artritis reumatoidea, LES, síndrome de Sjogren, Crohn, SIDA y enfermedad renal, su indicación clínica mejor definida es en el uso como marcador de neoplasias hematopoyéticas . Útil como indicador pronóstico en mieloma múltiple porque refleja masa tumoral y depuración renal, condiciones que están asociadas a la sobrevida. En la enfermedad tubular renal los niveles séricos son bajos y los de orina son altos. Aunque la determinación en orina se ha usado para evaluar disfunción renal, la Beta-2-M no es estable en la orina con pH menor a 5,5 BETA-HIDROXIBUTIRATO (BHB) Código 862716F CUERPOS CETÓNICOS Código 903826/903827 El BHB hace parte de los cuerpos cetónicos y constituye el 78% de este grupo donde el acetoacético es el 20% y la acetona el 2%. Son el producto de un metabolismo incompleto de las grasas y su presencia es indicativa de acidosis. En diabetes mellitus mal controlada se puede encontrar cetonemia y cetonuria. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra fresca de orina de micción simple y/o Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y congelada a -20°C. . La prueba del BHB se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Manual de Procedimientos 11 139 Metodología: La determinación en suero del BHB se hace por el método fotométrico enzimático La determinación en orina se hace por técnica cualitativa colorimétrica con tira reactiva de apreciación visual. Valores de referencia: BHB: Suero <0,28 mmol/L Orina: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La presencia de cuerpos cetónicos es importante para evaluar la severidad de los trastornos del metabolismo de los carbohidratos y cuando se encuentran en cantidades elevadas en diabéticos indican acidosis y la posibilidad de coma. Se puede presentar cetonuria en estados febriles agudos, intoxicaciones, embarazo, caquexia, ayuno prolongado, dietas reductoras de peso y en estado postanestésico. Hay interferencia en la orina con resultados falsos positivos por bromosulftaleína, fenilcetonas y metabolitos de la L-dopa. La determinación de las cetonas por la tira reactiva no determina el BHB que es el más abundante fisiológicamente, pues solamente reacciona con el acetoacético y la acetona. BETA-GALACTOSIDASA Código 862563F La Beta-galactosidasa es una enzima lisosomal cuya función es catalizar la hidrólisis de los gangliósidos. La deficiencia hereditaria de esta enzima puede producir las siguientes entidades: gangliosidosis GM1, mucopolisacaridosis tipo IVB (síndrome de Morquio) y galactosialidosis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de gotas de sangre en papel de filtro que es estable 6 meses a temperatura ambiente. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre. La muestra es estable 4 días en refrigeración . La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fluorométrica enzimática de punto final Valores de referencia: 7,33-47,67 pmol/hora/disco 1.2 mm) 140 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado. Para la evaluación de pacientes donde se sospeche deficiencia hereditaria de la enzima. BETA-GLUCOSIDASA (BETAGLUCOCEREBROSIDASA BGC) Código 862612F La deficiencia de la enzima BGC produce acumulación de material de depósito lisosomal no digerido lo que produce interferencia con el normal funcionamiento celular y da origen a la enfermedad de Gaucher enfermedad hereditaria de tipo autosómico recesivo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con ACD como anticoagulante para obtener leucocitos. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente y refrigerada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Fluorometría de punto final Valores de referencia: 6-9 nmol/mg prot/h Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de enfermedad de Gaucher. Esta prueba no determina el estado de portador BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA Código 903809 La bilirrubina es un producto del catabolismo de la hemoglobina que se produce en el sistema reticuloendotelial. Circula unida a la albúmina y otras proteínas y en el hígado se conjuga con el ácido glucurónido haciéndose hidrosoluble, se excreta por los canalículos biliares al intestino donde la flora intestinal la convierte en urobilinógeno. Hay una pequeña porción que no se conjuga y se reabsorbe por el intestino. La bilirrubina conjugada (Bc) se conoce como directa y la no conjugada (Bu) como indirecta y la suma de las dos como bilirrubina total. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o plasma. Las muestras son estables por 6 horas a temperatura ambiente, 24 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. Se debe evitar la exposición a la luz de las muestras pues la bilirrubina es muy fotosensible. Metodología: Bilirrubina total: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Bilirrubina directa: Método díazo de punto final Manual de Procedimientos 11 141 Valores de referencia: Total: 0,3 - 1,2 mg/dL Directa: 0,1 - 0,5 mg/dL Indirecta: 0, 2 - 0,7 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación, clasificación y seguimiento de las ictericias tanto del adulto como neonatales. La hiperbilirrubinemia se clasifica en conjugada y no conjugada. La conjugada se clasifica en hepática (hepatitis de diferente etiología), colestásica producida por drogas (clorpromazina, esteroides etc.), cirrosis biliar primaria, hepatitis, ictericia familiar y en post hepática por obstrucción biliar por cálculos, cáncer o malformaciones de la vía biliar. La hiperbilirrubinemia no conjugada se clasifica en prehepáticas (estados hemolíticos y hematomas extensos) y hepáticas (síndromes de Gilbert y Crigler-Najjar e ictericia neonatal). Puede haber aumento por efecto analítico con novobiocina, propanolol, levodopa, metildopa, fenazopiridina, hemoglobina y lipemia. BIOTINA (VITAMINA B7) Código 862751F La biotina es un cofactor de enzimas que intervienen en reacciones metabólicas esenciales para sintetizar ácidos grasos, gluconeogénesis y metabolismo de la leucina. La biotina se encuentra en la célula unida al aminoácido lisina, formando el compuesto biocitina la cual se une covalentemente a ciertas enzimas relacionadas con la formación o utilización del dióxido de carbono, ejerciendo función de coenzima; actúa en la transferencia (aceptor y donador) de dióxido de carbono. La deficiencia de biotina es relativamente rara, puede ser ocasionada por dieta deficiente en individuos que reciben alimentación parenteral total durante varios años y el consecuente deterioro de las funciones metabólicas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Como la prueba de la vitamina se realiza por un procedimiento microbiológico, los pacientes que toman antibióticos los deben suspender 5 - 6 días antes de la extracción de la sangre. Permita que la muestra de sangre total se coagule completamente durante 30 minutos y centrifugue a 3.000 rpm por 10 minutos para obtener la muestra de suero. La muestra se debe proteger de la luz y es estable 2 semanas congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Biológica 142 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: ≤ 12 años: 57 – 2.460,2 pg/mL ≥ 12 años: 221 – 3.004 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en los casos raros donde se sospeche deficiencia de la vitamina. BNP-PÉPTIDO NATRIURÉTICO TIPO B Código 903439F El péptido natriurético de tipo B (Péptido natriurético del cerebro BNP) es un péptido pequeño secretado por el tejido cardíaco, predominantemente en los gránulos de las membranas de los ventrículos, y regula la presión arterial y el balance de líquidos. Es sintetizado y descargado a la circulación en respuesta a sobrecarga cardíaca o condiciones que causen aumento de la presión ventricular Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de sangre total tomada en tubo de plástico con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 1 mes congelada a -20°C. La molécula BNP es inestable en tubos de vidrio. La prueba se realiza en la fundación Santa Fe y se entrega urgente y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Valores de referencia: Sin insuficiencia cardiaca (ICC): ≤ 100,0 pg/mL ICC clase I (NYHA) Mediana: 133,0 pg/mL ICC clase II (NYHA) Mediana: 266,0 pg/mL ICC clase III (NYHA) Mediana: 335,0 pg/mL ICC clase IV (NYHA) Mediana: 1531,0 pg/mL La Asociación Neoyorquina del Corazón (NYHA) desarrolló un sistema funcional de clasificación de 4 clases para la insuficiencia cardíaca congestiva (ICC) basado en la severidad de los síntomas porque varios estudios han demostrado que la concentración circulante de BNP aumenta con el grado de severidad de la ICC de acuerdo con la clasificación de la NYHA. El valor de referencia sin ICC aumenta a medida que aumenta la edad del individuo hasta llegar a 10-138 pg/mL en hombres ≥ 83 años y en mujeres a 10-263 pg/mL. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil como ayuda en el diagnóstico de ICC. Valores menores a 300 pg/mL tienen Manual de Procedimientos 11 143 un 98% de valor predictivo negativo para ICC. Valores mayores a 450 pg/mL en adultos menores de 50 años son consistentes con ICC, mientras que en adultos mayores un punto de corte de 900 pg/mL es consistente con ICC en ausencia de falla renal. BORDETELLA PERTUSIS, ANTICUERPOS IgA, IgG Código 862678F BORDETELLA PERTUSIS, CULTIVO Código 901202 La Bordetella pertussis es una bacteria Gram (-) aerobia y anaerobia facultativa, encapsulada que causa la tosferina que es una infección respiratoria que ataca a individuos no vacunados y a aquellos con inmunodeficiencias. Se caracteriza por una tos crónica persistente y prolongada que a veces no se presenta en el paciente adulto. Tradicionalmente, el método de referencia para el diagnóstico ha sido el cultivo bacteriano a partir de secreciones nasofaríngeas pero debido a que la bacteria es difícil de cultivar por su susceptibilidad a cambios en el medio ambiente como temperatura, desecación y requerimientos especiales para el crecimiento, se han desarrollado otros métodos como la detección de anticuerpos y la PCR. Condiciones del paciente y/o de la muestra Anticuerpos Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Cultivo tomado de cepa pura Muestra de secreción nasofaríngea recolectada con escobillón estéril para siembra en medio de cultivo Metodología: Anticuerpos: Inmunodetección multianalítica (MAID) Cultivo en medio de cultivo Valores de referencia: Anticuerpos IgG ≤ 45 U/mL Anticuerpos IgA: ≤ 10 U/mL Hemaglutinina filamentosa IgG: ≤ 90 U/mL Hemaglutinina filamentosa IgA: ≤ 50 U/mL Cultivo: negativo 144 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles detectables de anticuerpos IgG a Bordetella pertussis se pueden encontrar en individuos vacunados, en recién nacidos por trasferencia placentaria de anticuerpos y en estado convaleciente de una infección reciente. El anticuerpo IgG solo es significativo cuando la prueba se hace en sueros apareados y es posible demostrar aumento en la segunda muestra después de un tiempo de haberse iniciado la infección. Por lo tanto para diagnosticar infección activa hay que determinar los niveles de los anticuerpos IgA e IgM o hacer la prueba de inmublot en vez de la ELISA. BORRELIA BURGDORFERI ANTICUERPOS IgG/IgM Código 906008/09 BORRELIA BURGDORFERI ANTICUERPOS IgG, IgM (WB) Código 862754F BORRELIA SPP POR PCR Código 862782F La enfermedad de Lyme o borreliosis de Lyme es una infección multisistémica causada por la espiroqueta Borrelia burgdorferi; el vector transmisor es la garrapata Ixodes sp que se encuentra más frecuentemente en los meses de verano en varias regiones de Norteamérica. Tiene tres estados clínicos; estado I: lesión cutánea 1-3 semanas después de la picadura llamada eritema crónico migrans; estado II varios meses después caracterizado por eritema multiforme migratorio, meningopolineuritis, artritis y miocarditis y mucho tiempo después el estado III caracterizado por acrodermatitis crónica atrófica y manifestaciones neurológicas crónicas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Para los anticuerpos muestra de suero que es estable 1 semana a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20ºC. Para la PCR sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o citrato para utilizar la sanger total. La muestra es estable por 7 días en refrigeración . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Prueba confirmatoria: Inmunoblot Antígeno: Reacción en cadena de polimerasa (PCR) Manual de Procedimientos 11 145 Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM Negativo: Índice ≤ 0,8 Indeterminado: Índice de 0,8-1,19 Positivo: ≥ 1,19 Inmunoblot: Positivo si se encuentran mínimo 5 bandas PCR: Antígeno no detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El diagnóstico de la enfermedad de Lyme depende básicamente de los hallazgos de laboratorio porque en la mayoría de los pacientes la picadura no se nota, la lesión en la piel puede pasar desapercibida y el cuadro clínico es muy variado. La prueba serológica puede ser negativa en el 50% de los pacientes infectados especialmente en el estado I (durante la 2a a 4a semanas después del comienzo del eritema crónico migrans) pero en estados tardíos es positiva en casi un 100% de los pacientes. La prueba de ELISA tiene una sensibilidad del 88% y una especificidad de 98%. La determinación por PCR se debe limitar a pacientes con prueba serológica positiva o indeterminada para anticuerpos a Borrelia burgdorferi. BRUCELLA ABORTUS ANTICUERPOS IgG, IgA, IgM Código 862592F La infección humana es producida por tres especies: B. mellitenses, suis y abortus. La infección inicial puede aparecer en los ojos, boca o tracto genital. Se debe considerar éste diagnóstico en pacientes que tengan fiebre de origen indeterminado que tengan historia de contacto con animales como los carniceros y veterinarios. La enfermedad es común en cabras, ganado vacuno, ovino y en animales salvajes. La infección se puede transmitir por contacto directo o manipulación de placenta, leche y fetos de animales infectados. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 1 día a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) 146 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Negativo < 0,80 Unidades Indeterminado: 0,80-1,09 Positivo: ≥ 1,10 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba detecta anticuerpos a B. suis, mellitensis y abortus y tiene buena sensibilidad por lo cual un resultado negativo indica muy poca probabilidad de tener la infección. En la etapa aguda de la infección hay producción inicial de anticuerpos IgM seguida rápidamente de anticuerpos IgG los cuales disminuyen después del tratamiento. La brucelosis crónica presenta predominio de anticuerpos IgG con niveles muy bajos o no detectables de IgM aunque estos pueden persistir por varios meses después de la infección aguda. Manual de Procedimientos 11 147 C C-TELOPÉPTIDOS (CTX) Código 862594F Se toma en suero y ayuno. Se recomienda tomar en las primeras horas de la mañana N-TELOPÉPTIDOS (NTX) Las mediciones bioquímicas del remodelado óseo junto con otras informaciones clínicas pueden ser de utilidad al evaluar pacientes en riesgo de osteoporosis. Los marcadores de remodelado óseo son también el mejor medio actualmente disponible para determinar con rapidez la adherencia al tratamiento de osteoporosis. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas Muestra en orina. La muestra para C-telopéptido es estable por 72 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Tomar únicamente en las horas de la mañana entre 6 y 10 am, cuando alcanza su máxima concentración sérica. La muestra para N-telopéptido es estable 2 meses congelada a -20°C Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: C-telopéptido N-telopéptido Hombres: 0,115 – 0,748 ng/mL Mujeres pre-menopáusicas: 0,112-0,738 ng/mL Post-menopáusicas : 0,142-1,351 ng/mL Hombres 5,4-24,2 nM BCE Mujeres pre-menopáusicas 6,2-19,0 nM BCE BCE: Equivalente a colágeno óseo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles séricos y urinarios de telopéptidos con carbono-terminal (CTX) y nitrógeno-terminal (NTX) son también fragmentos liberados durante la actividad de los osteoclastos y son marcadores potencialmente más específicos de la pérdida 148 Fundación Santa Fe de Bogotá de colágeno óseo. Las pruebas inmunoenzimáticas para los C-telopéptidos y Ntelopéptidos en muestra de orina y sangre son indicadores sensibles y específicos de la resorción ósea. Los niveles de telopéptidos en sangre o en orina aumentan en pacientes con enfermedades óseas asociadas con aumento en la resorción (osteoporosis posmenopáusica) y disminuyen en pacientes con osteoporosis en respuesta a tratamiento anti-resortivo (bifosfonatos y terapia hormonal de reemplazo). C1Q INMUNOCOMPLEJOS Código 862717F C1Q AUTOANTICUERPOS Código 862687F La deficiencia de C1 está asociada con enfermedades que tienen alta incidencia de complejos inmunes como LES, polimiositis, glomerulonefritis y la púrpura de Henoch-Schonlein. El lupus eritematoso sistémico (LES) es la manifestación más común de la deficiencia de C1 pero tiene diferencia con él LES sin deficiencia, pues el comienzo de la enfermedad se presenta a menudo antes de la pubertad. El anticuerpo anti-C1q es considerado un marcador presente en el 60% de los pacientes con LES, que tienen compromiso renal por nefropatía lúpica. Títulos significativos de anti-C1q, también están presentes en el síndrome de vasculitis urticariforme hipocomplementémica, enfermedad caracterizada por vasculitis y urticaria cutáneas crónicas, glomerulonefritis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica e inflamación ocular Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra se debe colocar en hielo inmediatamente después de tomada, debe centrifugar, separar el coágulo y congelar el suero inmediatamente. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 1 año congelada a -20°C. La muestra de suero para C1Q autoanticuerpos es estable 1 año congelada a -20ºC. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: C1Q inmunocomplejos: ≤ 25,2 µg/mL C1Q autoanticuerpos: ≤ 7,1 % del estándar Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba C1Q inmunocomplejos es de utilidad en el monitoreo de enfermedades del complejo inmune, como lupus, glomerulonefritis, hepatitis y artritis. Manual de Procedimientos 11 149 También es utilizada en el monitoreo de pacientes con algunos carcinomas, en tratamiento, para evaluar progresión o regresión. CADASIL, EVALUACIÓN Código 862688F La arteriopatía cerebral autosómica dominante con infartos subcorticales y leucoencefalopatía (CADASIL), es una enfermedad de las arterias menores del cerebro, que produce múltiples infartos en sus partes más profundas, causando daño cerebral por degeneración progresiva de las células musculares lisas en los vasos sanguíneos. Los primeros síntomas pueden aparecer alrededor de los 20 años de edad, con evolución lenta y progresiva, conduce el paciente a demencia y muerte en un período de 20 años. Es una enfermedad hereditaria, con patrón autosómico dominante, causada por mutación del gen NOTCH3, que ocasiona acumulación de la proteína Notch3 en la membrana plasmática de las células musculares, tanto en los vasos sanguíneos del cerebro como fuera de él. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener sangre. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente y 1 semana refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Reacción en cadena de polimerasa (PCR) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La presencia de la mutación en el gen NOTCH3 confirma el diagnóstico de CADASIL. CAFEÍNA, CUANTITATIVA Código 905714 La cafeína, administrada oralmente, se usa como tratamiento para la apnea que se presenta en los recién nacidos. En los neonatos la cafeína tiene una vida media larga (20-100 horas) debido a la inmadurez del hígado por lo cual es necesario administrarla en pequeñas dosis con intervalos largos. Se puede presentar toxicidad con estimulación muscular y del SNC y bradicardía. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas Muestra de suero o plasma. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y 2 semanas refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático múltiple (EMIT) 150 Fundación Santa Fe de Bogotá Rango terapéutico: 8-20 μg/mL Rango tóxico: ≥ 30 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Control del tratamiento de la apnea en neonatos para evitar toxicidad por cafeína CALCIO IONIZADO (CaI) Código 903604 El CaI es la forma libre y fisiológicamente activa y representa el 50-55% del calcio total. La forma no libre está unida en un 70% a albúmina y por esto cuando hay concentración anormal de la albúmina circulante la medición del CaI da una evaluación más precisa del nivel de calcio biológicamente importante. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada. Metodología: Equipo de Ión selectivo con electrodo específico para calcio. Los niveles son más altos en niños y en adultos jóvenes; varían inversamente con el pH sanguíneo, aproximadamente 0,2 mg/dL por cada 0,1 de pH. Valores de referencia: 1,16- 1,32 mmol/L (pH sanguíneo de 7,40) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil durante procedimientos quirúrgicos mayores como trasplante hepático, puentes coronarios y otros que requieran transfusión rápida de grandes volúmenes de sangre y componentes, pues la infusión del citrato que contiene las unidades de sangre disminuye los niveles de CaI y en muy poca proporción los de calcio total. Se considera como prueba de segundo orden en pacientes con valores anormales de calcio total. Niveles por debajo del 50% de su valor normal reducen significativamente el gasto cardíaco y deprimen la función ventricular. CALCIO SÉRICO TOTAL Código 903810 Manual de Procedimientos 11 151 CALCIO URINARIO Código 903811 El Ca total está compuesto de tres fracciones: 40% unido a proteínas, principalmente albúmina, 5% unido a aniones (lactato, bicarbonato, citrato) y 55% en forma libre o ionizada. El Ca se obtiene de la dieta, del metabolismo óseo y de los mecanismos regulados de excreción renal; se excreta por vía renal e intestinal. El nivel de Ca corporal se mantiene muy regulado por la vitamina D y por la hormona paratiroidea (PTH) que intervienen en la absorción intestinal del calcio de la dieta y en el intercambio de los depósitos óseos. El calcio urinario está ligado a aniones de citrato, sulfato y oxalato y su enlace depende del pH, flujo urinario y componentes de la orina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total en tubo con anticoagulantes como heparina de amonio, de litio o de sodio para obtener plasma. Las muestras son estables por 48 horas refrigeradas y 21 días congeladas a -20°C. La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. No se pueden utilizar muestras de pacientes que hayan recibido el medio de contraste hipaque o gadolinio pues hay interferencia con la mayoría de las pruebas para metales. Si el paciente ha recibido gadolinio se deben esperar 48 horas antes de hacer la prueba de calcio Para la determinación en orina se requiere muestra recolectada durante 24 horas en frasco con 25 mL HCl 6N como preservativo que debe mantenerse refrigerada durante la recolección, teniendo al paciente en dieta restringida de calcio (600800 mg/día) durante las 24 horas previas a la recolección; el agua para ingestión durante ese tiempo debe ser destilada o desionizada. La muestra de orina es estable 14 días a temperatura ambiente, 28 días en refrigeración y/o congelada Metodología: Potenciometría indirecta utilizando un electrodo selectivo para iones de calcio Valores de referencia: Suero: 8,9 - 10,3 mg/dL Orina: 100 - 300 mg/24 hrs En niños los niveles séricos son 7-8% más altos que en los adultos jóvenes. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de niveles de calcio total en sangre u orina. 152 Fundación Santa Fe de Bogotá Hay hipercalcemia debida a tumores malignos e hiperparatiroidismo primario y hay hipocalcemia por insuficiencia renal, hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D e hiperparatiroidismo secundario. La determinación simultánea de los niveles de Ca total y PTH permite hacer un diagnóstico diferencial en la mayoría de los pacientes que tienen una concentración anormal de calcio sérico. Hay hipercalciuria en hiperparatiroidismo primario, enfermedad de Paget, tumores ectópicos secretores de hormona paratiroidea, intoxicación por vitamina D, entidades malignas y mieloma múltiple e hipocalciuria en hipoparatiroidismo, raquitismo, osteomalacia, enfermedad renal severa, en pacientes críticamente enfermos, hipocalcemia e hipocalcemia hipocalciurica. Los diuréticos tipo tiazidas interfieren con la excreción del calcio y pueden dar lugar a hipercalcemia. CALCITONINA Código 906621 Es un hormona polipéptidica de cadena única secretada por las células parafoliculares (células C) de la glándula tiroides que tiene una vida media de 10 minutos. La secreción es modulada por el calcio sérico y su principal acción es inhibir la reabsorción ósea regulando la actividad y el número de los osteoblastos. Se metaboliza principalmente por el riñón pero también sufre degradación por un factor plasmático. Su significado fisiológico es aún incierto pero tiene un efecto moderado en bajar los niveles de calcio y fósforo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se requiere que el paciente este en ayunas. El suero debe congelarse inmediatamente si la prueba no se va a hacer enseguida. Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 6 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Valores de referencia: Hombres: <16 pg/mL Mujeres: <8 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para el diagnóstico y seguimiento del carcinoma medular de tiroides, Manual de Procedimientos 11 153 neoplasia que comprende aproximadamente el 7-10% de todos los carcinomas tiroideos. Situaciones en las cuales está indicada la prueba son: 1) Pacientes con un nódulo tiroideo con síntomas potencialmente atribuibles a hipercalcitoninemia 2) prueba de tamizaje en individuos con historia familiar conocida o sospechada de carcinoma medular o con el síndrome de la neoplasia endocrina múltiple tipo IIa o IIb (síndrome de Sipple) 3) Seguimiento de pacientes con carcinoma medular de tiroides. La mayoría de estos pacientes tienen niveles de calcitonina basales elevados pero hay un 30% con niveles normales que requieren prueba de estimulación con pentagastrina para demostrar la anormalidad. Los niveles de calcitonina se elevan además del carcinoma medular de tiroides en carcinoma de pulmón, senos y páncreas, pancreatitis, tiroiditis, falla renal, síndrome de Zollinger-Ellison, anemia perniciosa, embarazo a término y en recién nacidos; hay disminución en agenesia tiroidea. Elevación persistente después de tiroidectomia total por carcinoma sugiere tejido neoplásico residual o recurrencia. La prueba no está indicada para evaluar enfermedades que alteran el metabolismo del calcio. CÁLCULO BILIAR Código 903004 CÁLCULO RENAL Código 903005 La composición del cálculo urinario puede variar desde un simple cristal hasta una mezcla compleja que contiene diferentes especies de cristales. La composición del núcleo o nido puede ser completamente diferente a la de las capas periféricas. Aproximadamente el 70% de los cálculos renales están compuestos de oxalato de calcio con pequeñas cantidades de fosfato de calcio (hidroxiapatita); 1012% contienen ácido úrico; 10-20% contienen fosfato de magnesio y amonio y menos de un 1% están compuestos de cistina. La causa de los cálculos biliares varía. Hay dos tipos principales de estos cálculos: • Cálculos compuestos de colesterol, los cuales son de lejos el tipo más común. Estos cálculos no tienen nada que ver con los niveles de colesterol en la sangre. 154 Fundación Santa Fe de Bogotá • Cálculos compuestos de bilirrubina. los cuales pueden desarrollarse cuando los glóbulos rojos se están destruyendo (hemólisis). Esto lleva a un exceso de bilirrubina en la bilis. Estos cálculos se denominan pigmentarios. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se debe enviar todo el cálculo expulsado o extraído para su completo análisis fisicoquímico. No se debe colocar en cinta pegante sino en un tubo estéril o en recipiente para orina. Los cálculos muy pequeños se pueden colocar en una cápsula de gelatina. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cuantitativa de espectrofotometría infrarroja Valores de referencia: reporte y gráfico del tipo de cristales encontrados. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es importante conocer las características fisicoquímicas del cálculo renal para un adecuado manejo de los pacientes con cálculos recurrentes. En pacientes con cálculos de ácido úrico e hiperuricemia la orina se debe alcalinizar para aumentar la solubilidad del ácido úrico y prevenir la formación de cálculos. En presencia de cálculos de hidroxiapatita e hipercalciuria la orina se debe acidificar para aumentar la solubilidad del calcio. En general a los cálculos biliares no se les hace estudio por laboratorio pues los más frecuentes son los de colesterol. CALPROTECTINA Código 862784F La calprotectina es una proteína que se encuentra en el organismo en forma abundante, está unida al calcio, principalmente en los leucocitos polimorfonucleares. Presenta propiedades bacteriostáticas y fungicidas y sus niveles plasmáticos se elevan de 5-40 veces en los procesos infecciosos y/o inflamatorios. Se encuentra en una alta concentración en las heces y su concentración se puede aumentar en diversos procesos inflamatorios intestinales del intestino delgado y/o del colon. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de materia fecal tomada al azar que debe estar en el laboratorio antes de 2 horas de haber sido recogida. La muestra es estable 11 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 1 año congelada a-20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo Manual de Procedimientos 11 155 Valores de referencia: ≤ 163 μg/g Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba puede discriminar entre enfermedad orgánica intestinal y colon irritable y ante valores positivos se debe investigar la presencia de inflamación por medio de colonoscopia u otras pruebas. CÁNDIDA ALBICANS, ANTICUERPOS IgA Código 906104 CÁNDIDA ALBICANS, ANTICUERPOS IgM Código 906106 La candidiasis sistémica se caracteriza con frecuencia por elevación marcada de los niveles de anticuerpos IgG, IgM e IgA pero hay que tener cuidado al interpretar el resultado de los niveles de anticuerpos pues en el 20-30% de pacientes sanos se puede encontrar elevación. Además en los pacientes inmunosuprimidos la respuesta de los anticuerpos no es marcada a pesar de tener la candidiasis. En caso de duda es necesario hacer la prueba de detección del antígeno y/o cultivos Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis fluoroenzimático Valores de referencia: Anticuerpos IgM/IgA Negativo ≤ 1,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnosticar candidiasis sistémica especialmente en pacientes inmunosuprimidos. 156 Fundación Santa Fe de Bogotá CANABINOIDES (Marihuana) Código 9057179 Es una de las sustancias de abuso más usadas en el mundo que se obtiene de las hojas de la planta Cannabis sativa. La manera más común de uso es por inhalación al fumar cigarrillos hechos con marihuana; se absorbe rápidamente desde los pulmones a la circulación y se metaboliza en el hígado. La marihuana produce descoordinación motora, aumenta la presión arterial y el ritmo cardíaco El componente primario psicoactivo es delta-9-tetrahidrocanabinol (delta-9-THC) pero tiene otros componentes que también producen los mismos efectos. Aproximadamente el 80% del delta-9-THC se elimina, principalmente en las heces, durante los primeros 5 días y el resto en la orina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple. Por los efectos médicolegales que puede tener la muestra debe esta debe ser recogida en el laboratorio previa identificación del paciente. La muestra es estable por 5 días refrigerada. Metodología: Interacción cinética de micropartículas en solución (KIMS) Valores de referencia: Negativo ≤ 50 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Prueba de tamizaje para detectar abuso con este tipo de sustancia. En los fumadores ocasionales los metabolitos pueden ser detectados en la orina hasta por un período de 10 días pero en los fumadores crónicos hasta por 30 días. La concentración detectada en la orina no tiene correlación con los niveles séricos ni con el grado de disfunción orgánica y solo indica que hubo exposición previa a la marihuana. Una prueba positiva requiere confirmación por cromatografía de gas o espectrofotometría de masa especialmente si se va a utilizar con fines médicolegales. CAPACIDAD DE COMBINACIÓN (TIBC) Código 903812 Manual de Procedimientos 11 157 HIERRO SÉRICO Código 903846 El hierro es un componente de las cromoproteínas transportadoras de O2 como hemoglobina y mioglobina, así como de varias enzimas como citocromo oxidasa, xantina oxidasa, peroxidasa y catalasa. El resto del hierro está en flavoproteínas, ferrosulfuros, ferritina y transferrina. La transferrina se mide indirectamente por la cantidad de hierro que puede enlazar y es lo que conocemos como capacidad de combinación o enlace de hierro (TIBC). Otra medida que también es útil es el % de saturación que se obtiene de la fórmula hierro sérico/TIBC x 100 y que es un mejor indicador de los depósitos de hierro. Condiciones del paciente y/o de la muestra En lo posible la muestra debe tomarse en las mañanas y con el paciente en ayunas pues en pacientes normales hay una gran variación diurna del hierro sérico con valores vespertinos más bajos del orden de 10 µg/dL. El paciente debe evitar tomar suplementos de hierro por lo menos 24 horas antes de la toma de la muestra. Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulantes como heparina de litio, sodio y amonio para obtener plasma pero para la TIBC solo puede usarse heparina de sodio. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. No se aceptan muestras hemolizadas por la alta concentración de hierro que hay en la hemoglobina. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Hierro sérico TIBC Mujeres: 28-170 µg/dL Hombres: 45-182µg/dL 261-478 µg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Hay aumento del hierro sérico en anemias hemolíticas, talasemia, anemia sideroblástica, envenenamiento por plomo, deficiencia de piridoxina, necrosis hepática aguda, hepatitis, anemia perniciosa, terapia inapropiada con hierro, hemocromatosis y hemosiderosis por transfusiones repetidas. Hay hipoferremia en desnutrición, malabsorción, pérdida crónica de sangre, enfermedades crónicas, tumores malignos y en procesos inflamatorios e infecciosos. La anemia por deficiencia de hierro se caracteriza por disminución del hierro 158 Fundación Santa Fe de Bogotá sérico, aumento del TIBC o transferrina y una disminución del % de saturación de la transferrina. La ferritina sérica es una prueba más sensible y confiable para determinar deficiencia de hierro. CARBAMAZEPINA Código 905207 Es una de las drogas anticonvulsivantes más comunes que se usa en el tratamiento de convulsiones parciales o generalizadas debido al rápido control de descargas eléctricas cerebrales y a la baja incidencia de toxicidad aguda o crónica. El estado de equilibrio se alcanza 2-4 semanas después de la iniciación de la droga. Cualquier cambio en la dosificación de la droga requerirá de más o menos una semana para que la concentración vuelva a indicar el nivel de estado en equilibrio. Los efectos secundarios o adversos son: diplopia, somnolencia, visión borrosa, nistagmus y ataxia, estos dos últimos con más frecuencia en farmacoterapia múltiple. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero un tubo tapa roja sin aditivo. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. La muestra debe tomarse en el nivel valle es decir inmediatamente antes de la siguiente dosis oral habiéndose alcanzado el estado de equilibrio. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Rango terapéutico: 4-12 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Control de los niveles de carbamazepina en pacientes que estén en tratamiento con la droga. No se recomienda hacer determinaciones rutinarias de los niveles séricos sino cuando los síntomas clínicos hagan sospechar una posible intoxicación o cuando se de en combinación con otros anticonvulsivantes CARBOXIHEMOGLOBINA Código 905208F Manual de Procedimientos 11 159 CARBOXIHEMOGLOBINA Código 905209F La carboxihemoglobina es una forma anormal de hemoglobina que se ha adherido al monóxido de carbono (CO) en lugar del oxígeno o el dióxido de carbono en los casos de intoxicación por CO. Las cantidades altas de este tipo de hemoglobina anormal impiden una adecuada oxigenación de la sangre. Condiciones del paciente y/o de la muestra Tomar en sangre total arterial o venosa en tubo con heparina de sodio o litio. La muestra es estable 10 días a temperatura ambiente y/o refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría Valores de referencia: Menos del 7% de la hemoglobina total (pero puede ser hasta del 15% en los fumadores) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Este examen se utiliza para diagnosticar intoxicación con monóxido de carbono y otros cambios en la hemoglobina que pueden resultar de ciertas drogas. Si ciertos químicos o medicamentos ingresan al torrente sanguíneo, pueden cambiar la hemoglobina, de tal forma que ya no funcione apropiadamente. Con valores del 20% comienzan a aparecer los síntomas de intoxicación por monóxido de carbono; con el 30% se presenta intoxicación grave y entre 50% a 80% se presenta intoxicación mortal. CARDIOLIPINA, ANTICUERPOS IgG, IgA, IgM (Anti fosfolípidos) Código 906408 Los anticuerpos antifosfolípidos IgG/IgM/IgA son auto-anticuerpos que reaccionan con la mayoría de fosfolípidos aniónicos incluyendo la cardiolipina. Estos prolongan las pruebas de coagulación “in vitro” dependientes de fosfolípidos e históricamente se han conocido como “anticoagulante lúpico”. Paradójicamente los pacientes con estos anticuerpos no presentan hemorragias y antes por el contrario tienen fenómenos de trombosis. Frecuentemente se encuentran en pacientes con lupus eritematoso sistémico y en otros trastornos autoinmunes así como en algunos individuos sin enfermedad subyacente. El término síndrome fosfolípido se ha introducido para describir a pacientes que presentan trombosis venosa o arterial, trombocitopenia y abortos recurrentes, además de positividad permanente a alguno de los tipos de anticuerpos antifosfolípidos. 160 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 21 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM/IgA Negativo: < 20 unidades 20,00-39,00 unidades (positivo bajo) 40,00-79,00 unidades (positivo moderado) > o = 80,0 unidades (fuertemente positivo) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes con trombosis y/o abortos recurrentes. Los anticuerpos anti-fosfolipidos sirven como prueba suplementaria cuando se encuentra positividad para anticoagulante circulante. Se puede encontrar prueba positiva en enfermedades infecciosas agudas, sífilis y en el síndrome de inmunodeficiencia por virus VIH (SIDA). La presencia de estos anticuerpos está asociada con una alta prevalencia de anormalidades valvulares en pacientes caucásicos, con livido reticularis, el síndrome de Sneddon, con hemorragia adrenal y enfermedad de Addison, con polimialgia reumática y arteritis de células gigantes. Hay correlación del 70% entre el anticoagulante circulante y ésta prueba por lo cual es posible encontrar anticoagulante circulante positivo con anti-cardiolipina negativo y viceversa. CARNITINA TOTAL Código 821300F La carnitina es necesaria para el transporte intra-mitocondrial y el metabolismo de los ácidos grasos de cadena larga e indirectamente para la producción de energía de las mitocondrias. La deficiencia de carnitina se define como un estado de concentración intracelular insuficiente para mantener la adecuada función de las mitocondrias. La deficiencia puede ser primaria debido a un defecto en el transporte pero no en la síntesis o secundaria a una amplia gama de desordenes de los ácidos orgánicos y del metabolismo de los ácidos grasos Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de plasma heparinizado. La muestra es estable por 5 días a Manual de Procedimientos 11 161 temperatura ambiente y/o refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: Adultos Hombres: 30-70 µmol/L Mujeres: 25-58 µmol/L En los recién nacidos y menores de dos años los niveles son más bajos y en recién nacidos prematuros e ictéricos hay valores disminuidos. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes con sospecha clínica de una amplia gama de entidades entre las que están acidemias orgánicas, desordenes en la oxidación de los ácidos grasos y deficiencia primaria de carnitina. También se pueden encontrar niveles elevados en enfermedades neuromusculares, trastornos gastrointestinales, cardiopatías familiares, tubulopatías renales, en insuficiencia renal que requiere diálisis, tratamiento prolongado con esteroides, antibióticos, anticonvulsivantes (ácido valproico) y en nutrición parenteral total. La deficiencia secundaria se puede presentar en: deficiencias de la deshidrogenasa de Acetil-CoA y de hidroxiacetil-CoA, síndrome de Reye primario o adquirido, síndrome de Fanconi, enfermedad hepática severa con desnutrición, prematurez, ictericia persistente en niños, tratamiento con ampicilina intravenosa en algunos pacientes. CAROTENOS Código 903006 Los carotenos son vitaminas liposolubles y los principales precursores de la vitamina A en el organismo humano. Se sintetizan por plantas y animales pero no por el hombre. La absorción intestinal depende de la presencia y absorción normal de las grasas y no se almacenan en el organismo por lo cual se puede presentar la hipocarotenemia por falta de consumo o por fallas en la absorción de los lípidos. El beta-caroteno es el más importante de la familia de los carotenoides. Los niveles más altos se encuentran en individuos vegetarianos que ingieren grandes cantidades de vegetales especialmente zanahoria y que adquieren un tinte amarillento en la piel, pero no en las escleras, que puede confundirse con ictericia. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se requiere ayuno de 12-14 horas y no haber ingerido alcohol en las 24 horas previas a la prueba. 162 Fundación Santa Fe de Bogotá Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Espectrofotometría Valores de referencia: Alimentación Normal 50 - 200 µg/dL Alimentación Vegetariana 50 - 500 µg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la detección de deficiencias nutricionales, anorexia nerviosa, síndrome de malabsorción o exceso de carotenos en individuos vegetarianos que comen mucha zanahoria. Puede haber elevaciones moderadas en diabetes mellitus, mixedema, hiperlipidemia y nefritis crónica. Niveles entre 20-50 µg/dL sugieren problemas de absorción y por debajo de 20 µg/dL ya son definitivamente bajos. La prueba no sirve para detectar licopenia, entidad rara en la cual el paciente presenta tinte anaranjado en la piel por acumulación de licopenos que son constituyentes normales del tomate y de la misma familia que los carotenos. CATECOLAMINAS FRACCIONADAS EN PLASMA Código 903008 CATECOLAMINAS FRACCIONADAS EN ORINA DE 24 H Código 903007 CATECOLAMINAS TOTALES EN ORINA DE 24 H Código 903009 CATECOLAMINAS TOTALES EN PLASMA Código 903010 Las catecolaminas se sintetizan en las células cromafínicas del sistema nervioso simpático: la epinefrina (adrenalina) en la médula suprarrenal y la norepinefrina (noradrenalina) y dopamina en la médula suprarrenal y en las neuronas simpáticas postgangliónicas. Manual de Procedimientos 11 163 El aminoácido precursor es la tirosina y por elevar la presión arterial también se les conoce como aminas presoras. Circulan en forma libre y unidas a albúmina, globulinas y lipoproteínas. Cantidades pequeñas (2-4%) se excretan en la orina en forma libre (sulfatos) o conjugada con el ácido glucurónido. Los principales productos finales del metabolismo de la epi y norepinefrina son el ácido vanilmandélico (VMA), la metanefrina y normetanefrina; los de la dopamina son el ácido 3,4, dihidroxifenilacético y el ácido homovanílico (HVA). La vida media de la norepinefrina es de aproximadamente 2 minutos por lo cual se prefiere hacer su determinación en orina. Las catecolaminas tienen considerable variabilidad fisiológica y se aumentan con el dolor y con el stress emocional por lo que la toma de la muestra y su determinación son muy críticas. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 4 horas antes de la toma de la muestra de sangre y descontinuar por lo menos una semana antes todas las drogas que interfieran con la concentración circulante de catecolaminas; dejar de fumar y tomar café o té por lo menos 4 horas antes de la prueba. Treinta minutos antes de la prueba se coloca un catéter intravenoso y el paciente en posición supina y en reposo en una habitación tranquila para evitarle stress u otro factor que haga producir descarga de adrenalina. La prueba no se debe realizar en pacientes que estén en abstinencia de drogas terapéuticas o de abuso donde se produzca rebote de catecolaminas por la abstinencia. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en recipiente que contenga 10-25 mL de ácido clorhídrico (HCl) 6N como preservativo para mantener el pH urinario entre 1-3. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. En pacientes con episodios de hipertensión paroxística la sensibilidad de la prueba en orina aumenta cuando la recolección de la muestra se inicia después del episodio hipertensivo. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA, heparina o citrato enfriado previamente, colocarse inmediatamente en hielo y separarse el plasma en centrífuga refrigerada. Se debe remitir congelado. La muestra es estable 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: Plasma pg/mL Epinefrina Niños < 1 año : < 150 < 6 años: < 120 ≥ 6 años: < 84 164 Fundación Santa Fe de Bogotá Norepinefrina < 1 año: < 650 < 6 años: < 600 ≥ 6 años: < 420 Dopamina < 1 año: < 150 < 6 años: < 70 ≥ 6 años: < 60 Catecolaminas totales < 1 año: < 800 < 6 años: < 720 ≥ 6 años: < 504 Orina: Catecolaminas totales: <100 µg/L Epinefrina 0,5-13,5 horas µg/24 Norepinefrina 19,-82,0 horas µg/24 Dopamina <500 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico y seguimiento de pacientes con feocromocitoma, paraganglioma, neuroblastoma o hipotensión postural. Es una prueba complementaria a las pruebas de ácidos vanilmandélico y homovanilico. Puede haber resultados falsos negativos en pacientes con feocromocitoma que en el momento de la toma de la muestra estén normotensos y en los casos de tumores muy pequeños. Sirve también para evaluar pacientes con disfunción o falla autonómica o con neuropatía autonómica. Hay aumento de las catecolaminas por efecto fisiológico debido a nitroglicerina, nitratos, fenotiazinas, hidralazina y minoxidil y disminución por inhibidores de la monoaminooxidasa. Hay aumento por interferencia química con el método por isoprotenerol, vitamina B, eritromicina, hidralazina, L-dopa, metildopa, mandelato e hipurato de metenamina, ácido nicotínico, quinina, quinidina, salicilatos, tetraciclina, algunos agentes psicotrópicos y por ingestión de cafeína y por fumar. CÉLULAS DE PURKINJE (YO) Código 906410F Las células de Purkinje se encuentran dentro de la capa de Purkinje (neuronas de Purkinje) y son una clase de neurona GABAérgica localizada en la corteza cerebelosa. Son neuronas muy grandes que representan las unidades funcionales del cerebelo. Manual de Procedimientos 11 165 El anticuerpo a las células de Purkinje (anti-Yo) se encuentra en suero y LCR en aproximadamente el 50% de los pacientes con degeneración cerebelar paraneoplásica y también está asociado con carcinomas ováricos, uterino, pulmonar de célula pequeña y linfoma de Hodgkin. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero que es estable por 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 21días congelada a -20°C. Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio que es estable 1 semana refrigerada y 6 meses congelada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Western-blot como prueba confirmatoria Valores de referencia: Suero y LCR: Negativo WB: negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La detección de estos anticuerpos es útil para el clínico pues pueden indicar la presencia de un tumor maligno que es capaz de producir un síndrome paraneoplásico. Entre estos tumores están carcinoma pulmonar de célula pequeña, neuroblastoma, cánceres de ovario, seno y testículos. CÉLULAS LE (Lupus Eritematoso) Código 902101 Esta prueba por su baja sensibilidad y especificidad ha sido reemplazada por la determinación de anticuerpos antinucleares, anti-DNA y anti-ENAS CÉLULAS PARIETALES, ANTICUERPOS Código 906411 Se encuentran en aproximadamente el 2% de la población normal y en el 90% de los pacientes con anemia perniciosa; su frecuencia aumenta con la edad así como con la presencia de diabetes mellitus insulinodependiente Causan reducción en la producción del ácido gástrico y atrofia de la mucosa. Junto con otros datos clínicos y de laboratorio una prueba positiva ayuda a distinguir la anemia perniciosa autoinmune de otras anemias megaloblásticas. 166 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 72 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia infirecta (IFI) Valores de referencia: Negativo ≥ 1:40 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes en los cuales se sospeche anemia perniciosa con o sin otras enfermedades autoinmunes. Otras enfermedades que pueden dar prueba positiva son gastritis autoinmune, úlcera gástrica, gastritis atrófica, tiroides, diabetes mellitus y anemia por deficiencia de hierro. Aunque los anticuerpos han sido detectados en menos del 2% de la población normal menor de 20 años de edad, la incidencia aumenta en mujeres mayores de 40 años y puede estar presente hasta en el 16% de la población normal mayor de 60 años de edad. Aproximadamente el 50% de los pacientes con anemia perniciosa tienen anticuerpos antitiroideos y el 30% de pacientes con tiroiditis tienen anticuerpos a células parietales. CEMENTO INTERCELULAR, ANTICUERPOS Código 906412 Estos autoanticuerpos IgG se presentan en pacientes con pénfigo. En la mayoría de los pacientes con pénfigo bulloso el suero contiene los anticuerpos mientras que en el pénfigo cicatricial son muy pocos los que tienen anticuerpos. También se pueden encontrar en casos de epidermolísis bullosa y en el lupus eritematoso con manifestaciones penfigoides. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta. Valores de referencia: Autoanticuerpo cemento intercelular Manual de Procedimientos 11 167 Negativo < 1:10 Autoanticuerpo dermo-epidérmico Negativo < 1:10 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado También se denominan autoanticuerpos dérmicos con patrón intercelular y su presencia confirma el diagnóstico de pénfigo y son útiles para evaluar otras enfermedades que producen vesículas o ampollas. Estos autoanticuerpos son positivos en el 90% de los casos de pénfigo y su ausencia en una alta proporción excluye la posibilidad de este diagnóstico. Una elevación o caída del título de más de dos diluciones indica respectivamente recaída o control efectivo de la enfermedad. El resultado se debe interpretar en conjunto con el cuadro clínico y el patrón histológico, especialmente cuando se encuentran títulos bajos entre 1:20 a 1:40. Los autoanticuerpos dermo-epidérmicos son positivos en el 90% de los casos de pénfigo bulloso. Su ausencia no excluye este diagnóstico. Existe correlación entre el título del anticuerpo y la severidad de la enfermedad. CENTRÓMERO, ANTICUERPOS Código 906413 Los anticuerpos anticentrómero están dirigidos contra tres péptidos: CENP-A (19 KD), CENP-B (80 KD) y CENP-C (140 KD) presentes en la membrana interna y externa de la placa trilaminar del kinetocoro; están asociados con el síndrome de CREST (calcinosis, fenómeno de Raynaud, disfunción esofágica, esclerodactilia y telangectasia), que es una variante de la esclerosis sistémica progresiva. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulantes EDTA o citrato para obtener plasma. Las muestras son estables 48 horas a temperatura ambiente, 1 semana refrigeradas y 2 meses congeladas. El resultado está disponible 5 días hábiles a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Inmunofluorescencia (IFI) Valor de referencia: ≤ 7,5 UI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los anticuerpos anticentrómero son de utilidad en la evaluación y pronóstico del síndrome de CREST o esclerosis sistémica limitada, aunque pueden estar ausentes en algunos pacientes con esclerodermia o síndrome de CREST. Ocasionalmente se detectan en otras patologías del sistema conectivo, cirrosis biliar primaria e individuos sanos. La detección de anticuerpos anticentrómero en pa- 168 Fundación Santa Fe de Bogotá cientes con fenómeno de Raynaud primario, sugieren el desarrollo del síndrome de CREST. CERULOPLASMINA Código 903416 Es una a-2 globulina que transporta el 95% del cobre y se considera un reactante tardío de fase aguda. Es una enzima multifuncional que ayuda también a la movilización del hierro de sus sitios de almacenamiento y funciona como una enzima ferroxidasa durante la conversión del hierro de ferroso a férrico. En la enfermedad de Wilson que es una entidad autosómica recesiva hay baja producción de ceruloplasmina lo que disminuye dramáticamente la movilización del cobre hepático, pero el defecto primario no es la deficiencia de la enzima sino una falla en el cromosoma 13q14.3 del gene que codifica una enzima ATP que transporta el cobre. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable por 3 días en refrigeración y 4 semanas congelada a -20°C. La prueba se procesa en la fundación Santa Fe. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: Hombres: 0,15-0,30 g/L Mujeres: 0,16-0,45g/L Valores <0,14g/L son compatibles con enfermedad de Wilson. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los dos marcadores más importantes para hacer diagnóstico de enfermedad de Wilson son el alto contenido de cobre hepático y la disminución de la ceruloplasmina en suero. También hay disminución en falla hepática fulminante, malabsorción intestinal, falla renal con proteinuria, hepatitis crónica activa y desnutrición severa. Niveles elevados se encuentran en cirrosis biliar primaria, embarazo, uso de anticonceptivos orales y en enfermedades inflamatorias e infecciones. CHARCOT MARIE TOOTH Código 862655F La enfermedad de Charcot-Marie-Tooth (CMT) es uno de los trastornos neurológicos hereditarios más comunes y que afecta aproximadamente a 1 de cada 2.500 personas en todo el mundo y se da por igual en todas las razas y grupos étnicos. Manual de Procedimientos 11 169 La enfermedad de CMT, también conocida como neuropatía periférica hereditaria motora y sensitiva o atrofia muscular del peroneo, abarca un grupo de trastornos que afectan los nervios periféricos. Hasta ahora se han descubierto 5 tipos diferentes dependiendo de la mutación que esté presente. Esta enfermedad está causada por mutaciones en genes que producen proteínas relacionadas con la estructura y función tanto del axón como de la capa de mielina del nervio periférico. La lista de genes relacionados con los distintos tipos de esta enfermedad continua creciendo a medida que se van identificando nuevas mutaciones. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de sangre total tomada en tubo con heparina sódica para obtener sangre total. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Hibridación Fluorescente In Situ (FISH) Valores de referencia: Ver reporte Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar neuropatía periférica hereditaria. CHLAMYDIA PSITTACI IgG, IgM, ANTICUERPOS Código 862666F CHLAMYDIA TRACHOMATIS Y PNEUMONIAE, IgG, IgG, IgM Código 866322F CHLAMYDIA TRACHOMATIS, ANTÍGENO Código 906307 Las Chlamydias son microorganismos intracelulares, pequeños, no móviles que comparten muchas de las características de las bacterias y son sensibles a tratamiento con antibióticos. El género Chlamydia contiene tres especies: C. tracomatis, C. psittaci y C. pneumoniae. La C. psittaci es el agente causal de la psitacosis, enfermedad caracterizada por neumonía, dolor de cabeza, alteración mental y hepatoesplenomegalia. Se adquiere por transmisión aérea adquirida de aves infectadas. 170 Fundación Santa Fe de Bogotá La C. pneumoniae produce neumonía solamente en humanos. Se transmite de hombre a hombre y aparentemente no existe un huésped animal o aviario . La familia trachomatis se compone de varios serotipos de los cuales 8 (D-K) producen infecciones urogenitales (uretritis, epididimitis, cervicitis, enfermedad pélvica inflamatoria, salpingitis y endometritis) así como conjuntivitis neonatal y neumonía; tres serotipos producen tracoma. El diagnóstico de C. trachomatis puede hacerse por detección directa del antígeno en secreciones corporales (uretra, endocervix y orina) y/o detección de anticuerpos en suero. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero para la detección de los anticuerpos. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Para la detección del antígeno (Chlamydia trachomatis) se obtiene muestra de secreción uretral que se debe tomar dos horas después de una micción de orina utilizando un escobillón especial que se introduce en la uretra, se gira durante 10 segundos y luego se envía al laboratorio en un tubo estéril sellado y marcado. Para la muestra endocervical se debe retirar con un escobillón, todo el moco del cuello uterino y luego introducir otro escobillón en el canal endocervical girándolo enérgicamente durante 15-30 segundos; no se deben tocar las paredes vaginales al retirarlo, se coloca en tubo y se envía al laboratorio. Las muestras son estables 1 semana refrigeradas. Los escobillones para mujer y hombre son suministrados por el laboratorio pues no se pueden usar los de dacrón o alginato de calcio. Para la muestra de orina masculina el paciente no debe haber orinado durante por lo menos una hora y recoger los primeros 15-30 mL de orina. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Anticuerpos: Inmunoanálisis enzimático (EIA) para C. trachomatis Inmunofluorescencia (IFI) para C. pneumoniae. Antígeno C. trachomatis: Inmunocromatografía Antí Valores de referencia Anticuerpos a C. trachomatis Anticuerpos a C. pneumoniae Negativo: IgA < 0,35 U Negativo: IgM título < 1:10 IgG < 0,9 U Anticuerpos totales título < 1:8 IgM < 0,35 U Antígeno C. trachomatis: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de antígenos y anticuerpos en infección por Chlamydia trachomatis y Manual de Procedimientos 11 171 Chlamydia pneumoniae. CICLOSPORINA Código 905502 Es una droga inmunosupresora tipo undecapéptido cíclico obtenida de un hongo y que se utiliza intravenosamente para evitar rechazo tisular, en los primeros 5-20 días post-trasplante renal, hepático o cardíaco y luego oralmente por el resto de la vida del paciente. El 93% de la droga circulante se une a proteínas y un 40% es captado por los eritrocitos; se elimina en el hígado por las enzimas del sistema citocromo P-450. Es una droga tóxica para el riñón por lo cual es necesario controlar permanentemente los niveles séricos. La administración crónica puede producir hepatotoxicidad, nefrotoxicidad, diarrea, náusea, vómito, hirsutismo, temblores, hipertensión, hiperplasia gingival, hipomagnesemia y linfomas. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe informar que drogas está tomando pues un número importante de drogas afectan la concentración sanguínea de la ciclosporina; los niveles se disminuyen por terapia concomitante con fenitoína, fenobarbital, carbamazepina y rifampicina por ser inductores de las isoenzimas de la citocromo P450. El ketoconazol y la cimetidina aumentan significativamente la concentración sanguínea porque inhiben su metabolismo y la eritromicina porque inhiben la depuración. Debe tomarse antes de administrar la siguiente dosis, anotando si es Co (basal o C2 dos horas pos administración de la dosis de ciclosporina) Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Rango terapéutico: Sangre total: 100-400 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Seguimiento de los niveles sanguíneos de la droga (Sandimmune®, Ciclosporina A®) como ayuda en el manejo de pacientes trasplantados de hígado, riñón y corazón para mantener buena terapia y evitar toxicidad. CISTICERCO, ANTICUERPOS IgG Código 906107 172 Fundación Santa Fe de Bogotá CISTICERCO, ANTICUERPOS TOTALES Código 906109 La cisticercosis es producida por la larva de la Tenia solium. La forma adulta reside en el intestino delgado de los humanos y cerdos y los huevos son excretados en las heces. En sitios de procesamiento de alimentos donde las medidas higiénicas no son adecuadas, los huevos de la tenia contaminan el agua o los alimentos que al ser ingeridos liberan la larva en el intestino delgado; de allí migran a través de la pared intestinal a varios tejidos principalmente al cerebro donde se enquistan produciendo síntomas similares al de una masa tumoral. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de LCR que debe ser entregada en el laboratorio rápidamente. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 año congelada a -20°C. La prueba también puede hacerse en suero. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Western-blot Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Una prueba positiva sugiere la presencia de cisticercosis pero no es definitiva pues existe reacción cruzada con otros parásitos especialmente el Echinococcus. Toda prueba positiva debe ser confirmada por una prueba con mayor sensibilidad y especificidad. CISTINA EN ORINA Código 862756F CISTINA, CUANTITATIVA Código 908107 La cistinuria es un error congénito del metabolismo que resulta de una mala absorción y reabsorción en el intestino y el riñón del aminoácido cistina lo que conduce a acumulación de la cistina, que es pobremente soluble en la orina y en la producción de urolitiasis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple o alícuota de muestra de orina recolectada, en frasco con tolueno como preservativo, durante 24 horas que es estable 8 días a temperatura ambiente, refrigerada y/o congelada a -20°C. . La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis quimioluminimétrico Manual de Procedimientos 11 173 Valores de referencia: 10-100 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba apoya el diagnóstico de cistinuria, mediante la cuantificación del aminoácido cistina. Es posible clasificar la cistinuria en: Tipo I, niveles normales de cistina; cistinuria tipo II, niveles elevados de cistina y cistinuria tipo III, niveles de cistina intermedios. CITOMEGALOVIRUS, ANTICUERPOS IgG/IgM Código 906205/906206 CITOMEGALOVIRUS, ANTICUERPOS IgG/IgM LCR Código 866450F CITOMEGALOVIRUS AVIDEZ Código 862760F CITOMEGALOVIRUS, CARGA VIRAL Código 906804 El Citomegalovirus es un virus del grupo Herpes que se transmite por contacto sexual, transplacentario, respiratorio, orina, secreciones cervicales, leche materna, productos sanguíneos y trasplante de órganos. Produce una infección endémica de distribución mundial que tiene alta prevalencia en niños y pacientes inmunosuprimidos. La infección puede ser congénita adquirida in útero o en el período peri o postnatal. Aunque la mayoría de las infecciones en el adulto son asintomáticas la presencia de hallazgos clínicos depende de la edad del paciente y de su estado inmune. Un individuo puede adquirir la primoinfección, reinfectarse con virus exógeno o reactivarse el virus latente cuando es portador asintomático pues la presencia de anti-CMV IgG no confiere inmunidad. La infección por CMV se presenta principalmente en pacientes trasplantados que reciben tratamiento inmunosupresor y típicamente ocurre durante el primer año después del trasplante cuando se suspende la profilaxis antiviral. El riesgo de infección es más alto en receptores de órganos que son CMV seronegativos antes del trasplante y reciben un órgano de un donante seropositivo. En estos pacientes la infección se puede detectar determinando la carga viral y valores altos de virus están asociados con enfermedad tisular invasiva mientras que valores bajos se asocian a infección asintomática. 174 Fundación Santa Fe de Bogotá La determinación de CMV anticuerpos IgG permite la separación de los anticuerpos de baja afinidad (avidez) producidos en una fase temprana de la infección, de los anticuerpos con alta afinidad que reflejan un contacto anterior con el virus. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero para la detección de anticuerpos IgG/IgM o muestra de sangre total tomada con anticoagulantes para obtener plasma. La muestra es estable por 14 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. . La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. Para la carga viral se toma muestra de sangre total en tubo con anticoagulante como EDTA para obtener plasma o cualquier otro líquido biológico o tejido. La muestra de sangre se debe centrifugar dentro de las 6 horas de la toma y el plasma se debe congelar inmediatamente en hielo seco. La muestra es estable 21 días congelada a -70°C. Para la detección del antígeno CMV se puede utilizar sangre total tomada en tubo con heparina o ACD como anticoagulante la cual se centrifuga para recolectar el “buffy coat “y hacer extendidos en láminas que se fijan con acetona. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 72 horas refrigerada y 7 días congelada a -20°C. Para la detección del antígeno PP65 se requiere muestra de orina, LCR y otros líquidos que son estables 72 horas refrigerada y 1 semana congelada a -20ºC. La prueba de avidez se hace en suero, se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Muestra de LCR que es estable 48 horas a temperatura ambiente, 8 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos IgG/IgM: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Carga viral: PCR en tiempo real (RT-PCR) Antígeno PP65: Inmunofluorescencia directa (DFA) Avidez: Inmunoanálisis enzimático (EIA) LCR: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: IgG: No reactivo < 6,0 UA/mL IgM: No reactivo índice < 0,85 Reactivo índice ≥ 1,00 Carga viral: ≤ 40 copias/mL Antígeno: no detectable Manual de Procedimientos Avidez: LCR IgG 11 175 Baja: Índice ≤ 0,5 Intermedia: 0,51–0,59 Alta: ≥ 0,60 No detectable: ≤ 0,80 Indeterminado: 0,80 – 0,99 Detectable: ≥1,00 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de infección primaria por CMV en fase aguda, especialmente en pacientes con mononucleosis infecciosa y en mujeres embarazadas quienes según los signos clínicos y/o historia de exposición al virus pueden tener primoinfección. Determinar si un paciente que haya sido trasplantado, haya recibido trasfusión sanguínea o esté inmunosuprimido tiene o ha tenido infección reciente o exposición previa a CMV y cuantificar la viremia con el fin de controlar la progresión de la infección y la respuesta al tratamiento anti-viral. En individuos saludables y normales es difícil asociar infección por Citomegalovirus a un episodio específico de enfermedad porque entre el 50-80% de la población adulta tiene niveles detectables de anti-CMV IgG en el suero y las manifestaciones clínicas son muy variadas. Una muestra de suero tomada tempranamente durante la fase aguda puede ser negativa para anti-IgG o anti-IgM y tomada durante la fase de convalecencia puede ser negativa para IgM y por esta razón un resultado negativo no descarta infección reciente. La detección del antígeno es de utilidad en el diagnóstico de CMV en los casos de infección congénita, prenatal, posnatal, neumonía y trasplante de órganos. CLONAZEPAM (RIVOTRIL®) Código 862714F El clonazepam es un derivado de las benzodiacepinas de larga duración que se utiliza solo o como terapia adyuvante en el tratamiento de las convulsiones mioclónicas y aquinéticas del síndrome Lennix-Gastaut (variante del petit mal). Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra debe tomarse en el valle inmediatamente antes de la siguiente dosis. Muestra de suero. La muestra es estable 1 día a temperatura ambiente, 3 días refrigerada y 2 semanas congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) 176 Fundación Santa Fe de Bogotá Rango terapéutico: 30-60 ng/mL Nivel tóxico: > 70 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El uso del clonazepam está restringido a aquellos pacientes cuyas convulsiones han respondido solamente a diazepam pero se han vuelto resistentes a la droga a niveles terapéuticos. Es un anticonvulsivante efectivo pero se debe usar como un último recurso debido a sus efectos colaterales. CLORO (CLORURO) Código 903813 CLORO (CLORURO) EN ORINA DE 24 H Código 903814 El cloro (Cl) es el principal anión extracelular; la mayor parte del cloro ingerido es absorbido en el tracto gastrointestinal y el exceso se elimina por la orina en cantidades entre 40-224 mmol/día. Bajo ciertas condiciones clínicas, como en la depleción del volumen extracelular, la excreción renal no refleja la ingestión del cloro y se disminuye el cloro urinario Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total con anticoagulantes heparina de amonio, de litio, de sodio, oxalato de potasio/fluoruro de sodio para obtener plasma. Las muestras son estables 4 horas a temperatura ambiente, 8-12 horas refrigeradas y 1 mes congeladas a -20°C. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco sin preservativo que debe mantenerse refrigerada durante la recolección. La muestra es estable 7 días en refrigeración y/o congelada. LCR obtenido por el médico tratante que debe ser enviado al laboratorio lo más rápidamente posible. La muestra se puede refrigerar o congelar de 7-10 días. Metodología: Potenciometría indirecta utilizando un electrodo de cloruro de ión selectivo Valores de referencia: Suero o plasma: 101-111 mmol/L Orina de 24 horas: 110-250 mmol/L LCR: 118-132 mmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se presenta hipocloremia por pérdida de cloro en trastornos gastrointestinales, Manual de Procedimientos 11 177 cetoacidosis diabética, exceso de mineralocorticoides y enfermedades renales; en tratamiento con ácido etacrínico, ACTH, corticosteroides, diuréticos mercuriales y furosemida. Se presenta hipercloremia en acidosis metabólica por pérdida de bicarbonato, en hiperalimentación, administración de sales de cloruro de amonio, acetazolamida, fenil y axifenbutazona. CLOSTRIDIUM, TOXINAS A/B Código 901401 El Clostridium difficile es el causante de la diarrea asociada al Clostridium difficile (CDAD) y de la colitis pseudo- membranosa; es una diarrea que se presenta como consecuencia del tratamiento con antibióticos, especialmente cefalosporinas de amplio espectro y clindamicina. En esta entidad hay un sobre-crecimiento del Clostridium difficile y la enfermedad está relacionada con la producción de las toxinas A y B del Clostridium. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de materia fecal fresca, no preservada que es estable 72 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. El resultado está disponible 5 días hábiles a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Inmunoanálisis enzimático de fluorescencia (ELFA) PCR para detectar la presencia del gen que regula la producción de la toxina Valores de referencia: Negativo: ≤ 0,13 Dudoso: 0,13-0,37 Positivo ≥ 0,37 PCR positivo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se recomienda hacer la prueba de PCR para confirmar un resultado dudoso. CLOZAPINA Y NORCLOZAPINA Código 862686F Clozapine (Clozaril), es una dibenzodiacepina tricíclica que se usa para el tratamiento sintomático de trastornos psicóticos y se considera una droga antipsicótica atípica. Uno de sus metabolitos es la norclozapina que es metabólicamente activo Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con heparina de 178 Fundación Santa Fe de Bogotá litio para obtener plasma. Las muestras son estables 24 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración s y 30 días congeladas a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Rango terapéutico: Clozapina más Norclozapina: 25- 400 µg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar los niveles séricos de la droga para evitar toxicidad. COBRE (suero y orina) Código 862753F El cobre es un elemento traza constituyente de ciertas metaloenzimas (citocromo oxidasa, tirosinasa, MAO, uricasa etc.) y proteínas. La anormalidad más importante del metabolismo del cobre es la enfermedad de Wilson o degeneración hepatolenticular que produce acumulación del cobre en el hígado; también se acumula porque no puede ser eliminado como en la cirrosis biliar primaria o en la colangitis esclerosante primaria. Más del 95% del cobre sérico está unido a la ceruplasmina (ver esta prueba) y el resto a albúmina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente, 10 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Muestra de orina de 24 horas recolectada en frasco lavado previamente con cualquier ácido y enjuagado con agua desionizada. La muestra de orina es estable 5 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a-20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Suero/plasma: Espectroscopía de absorción atómica. Orina: Espectrometría de masa/Plasma acoplado inductivamente (ICP) Manual de Procedimientos 11 179 Valores de referencia: Suero/plasma en μg/dL Orina ≤ 6 meses: 38-104 ≤ 12 meses: 24-152 ≤ 2 años: 76-193 ≤ 4 años: 87-187 ≤ 6 años: 56-191 ≤ 10 años: 117-181 ≤ 14 años: 87-182 ≤ 18 años: 75-187 ≥ 18 años: 70-175 ≥ 16 años: 15-60 μg/espécimen Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para el diagnóstico de la enfermedad de Wilson, cirrosis biliar primaria y colangitis esclerosante primaria. La deficiencia de cobre resulta en un trastorno severo del crecimiento y el metabolismo y alteración de los mecanismos de eritropoyesis. El cobre sérico total esta disminuido en la enfermedad de Wilson debido a disminución en la síntesis de la ceruloplasmina lo que se refleja en aumento de los depósitos de cobre en los tejidos y mayor excreción en orina. La hipercupremia se encuentra en enfermedades crónicas y agudas, enfermedades malignas, hemocromatosis, cirrosis biliar, tirotoxicosis, infecciones, embarazo y en terapia con anticonceptivos y estrógenos. La hipocupremia se puede presentar en desnutrición, malabsorción, hipoproteinemia, síndrome nefrótico y enfermedad de Menkes. COCAÍNA Código 905725 Es una de las sustancias de “abuso” más usadas a nivel mundial y su principal forma de consumo es la base libre y el basuco (crack) que se administran por inhalación, insuflación nasal, inyecciones intravenosas o contacto con mucosas. Tiene una vida media de 0,7 - 1,5 horas y aparece en la orina como cocaína (1-9%), benzoilecgonina (35-34%) y otros metabolitos (32-49%). El metabolito principal es la benzoilecgonina que tiene una vida media de 12 horas y se detecta en la orina cuatro días después de su uso. Condiciones del paciente y/o de la muestra Por sus implicaciones legales debe recolectarse la orina en el laboratorio previa identificación del paciente. 180 Fundación Santa Fe de Bogotá Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. La muestra es estable 5 días en refrigeración y 2 meses congelada. Metodología: Interacción cinética de micropartículas en solución (KIMS) Valores de referencia: Cualitativo Negativo Semicuantitativo: ≥ 300 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar presencia de cocaína y sus metabolitos. Si el resultado se requiere para fines médico-legales toda prueba positiva debe confirmarse por cromatografía de gas o espectrometría de masa. COCCIDIOIDES ANTICUERPOS IgG/IgM Códigos 862691F/862690F La coccidioidomicosis (Fiebre del Valle de San Joaquín) es una infección micótica que se encuentra en el sur de los Estados Unidos, en América Central y en América del Sur. Se adquiere por inhalación de las artroconidías del Coccidioides immitis. Generalmente es una infección pulmonar leve, autolimitada pero puede diseminarse y aun comprometer las meninges. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de LCR. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fijación de complemento Valores de referencia: Fijación de complemento: Título ≤ 1:2 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de infección por Coccidioides immitis COFACTOR DE RISTOCETINA Código 841401F La enfermedad de von Willebrand (vW), uno de los trastornos hereditarios más comunes de la coagulación que se transmite de una manera autosómica dominante y se caracteriza por una disminución en la actividad del factor VIII coagulante (VIII: C) y una disminución paralela en el factor VIII antígeno o factor von Willebrand (VIII/vWF: Ag). Manual de Procedimientos 11 181 El cofactor de Ristocetina representa la actividad in vitro del factor de von Willebrand (vWF) el cual es responsable de la aglutinación de las plaquetas en presencia de ristocetina. La disminución del vWF está asociada a la enfermedad de vWF lo que hace que tenga mucho valor para el diagnóstico y la evaluación de esta coagulopatía la cuantificación del cofactor de ristocetina. Esta es una prueba complementaria fundamental en el diagnóstico de la enfermedad de Von Willebrand y mide funcionabilidad del Factor Von Willebrand. (vWF) Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y no debe tomar aspirina ni otras medicaciones que la contengan ni consumir una dieta que afecte la función plaquetaria por 7-10 días antes de la prueba. Debe evitar consumir alimentos grasos y lácteos por 12 horas antes de la prueba. Sangre total tomada en tubo de plástico con ACD como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción no sea traumática para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular. Después de la centrifugación remueva el plasma de las células teniendo cuidado de no alterar el “buffy coat” pues el plasma no debe tener glóbulos rojos ni plaquetas. La muestra es estable por 8-10 horas refrigerada y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en el laboratorio de referencia y el resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Turbidimetría Valores de referencia: 58-166 UI/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Para evaluar pacientes en quienes se sospeche enfermedad de von Willebrand COLESTEROL TOTAL Código 903818 COLESTEROL ALTA Y BAJA DENSIDAD (AD/BD) Código 903818 El colesterol es un esteroide alcohólico no saturado y componente estructural muy importante de las membranas celulares y precursor de la síntesis de los ácidos biliares y las hormonas esteroides. Las 2/3 partes del colesterol están esterificadas y 1/3 está libre. Aproximadamente el 50-75% es transportado por las lipoproteínas de baja densidad (LDL,BD), el 15-40% por las de alta densidad (HDL,AD) y un 5-12% por las de muy baja densidad (VLDL) 182 Fundación Santa Fe de Bogotá La LDL/BD está compuesta de colesterol (50%), APO-B (25%) y trazas de APO-C y la HDL/AD está compuesta por colesterol (20%), APO-A (50%) y fosfolípidos (30%). (Ver apolipoproteínas) Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayuno de 12-14 horas y no haber ingerido alcohol en las últimas 48 horas previas a la toma de la muestra. Muestra de suero o sangre total con anticoagulantes como heparina de amonio, litio y sodio y para el HDL heparina de litio o sodio para obtener plasma. Las muestras son estables por 7 días en refrigeración s y 3 meses congelada a -20°C. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Adultos Colesterol total: 100-200 mg/dL Colesterol HDL/AD: Riesgo cardiovascu- ≥ 60 mg/dL lar bajo: Riesgo cardiovascu- ≤ 40 mg/dL lar alto: Colesterol LDL/BD: Niños 100-130 mg/dL Colesterol total Riesgo bajo: ≤ 170 mg/dL Riesgo incierto: 170 -199 mg/dL Riesgo alto: ≥ 200 mg/dL Cuando el valor del colesterol LDL/BD no se mide directamente no es posible calcular los niveles de colesterol LDL/BD cuando el nivel de triglicéridos del paciente está por encima de 400 mg/dL. La concentración de LDL/BD se calcula teniendo en cuenta el valor de los triglicéridos de acuerdo a la siguiente formula de Friedewald: LDL/BD = colesterol total - HDL - Triglicéridos/5 Hay mucha variabilidad de los valores con relación a sexo, edad, dieta y riesgo coronario por lo cual es difícil establecer valores de referencia para la población general. En niños, adultos jóvenes y mujeres los valores son más bajos que en adultos mayores de 30 años. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Sirve para evaluar pacientes con riesgo de enfermedad cardiovascular arterioesclerótica, para determinar colestásis hepática y para definir evidencia de abetalipoproteinemia. Manual de Procedimientos 11 183 El colesterol sérico se eleva en hiperlipoproteinemias hereditarias, síndrome nefrótico, ictericia obstructiva con colestásis, cirrosis biliar primaria, embarazo, hipotiroidismo y otros desordenes metabólicos. Niveles bajos de colesterol se encuentran en hipertiroidismo, malabsorción, hepatitis severa, desnutrición y deficiencias de apolipoproteínas. Existe una relación inversa entre el riesgo de enfermedad coronaria y la concentración de colesterol HDL, pues entre más baja sea hay mayor riesgo y viceversa. COLIGLICINA Código 903418 La coliglicina (CG) es un ácido biliar primario conjugado Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: < 60 μg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La CG puede ser útil en pacientes que tengan sospecha o riesgo de cirrosis y en quienes las pruebas hepáticas sean normales y sirve para descartar enfermedades hepatobiliares estructurales o funcionales. La CG tiene un alto valor diagnóstico, y se considera una adecuada prueba complementaria del perfil bioquímico hepático convencional. COLINESTERASA ERITROCITARIA Código 903419 COLINESTERASA SÉRICA Código 903420 La colinesterasa sérica es diferente de la colinesterasa verdadera o acetilcolinesterasa que se encuentra en los eritrocitos y el tejido nervioso. Los insecticidas organofosforados son inhibidores potentes de la colinesterasa eritrocítica y pueden disminuir la colinesterasa (pseudocolinesterasa) sérica. El control de la actividad enzimática es de tipo genético y por esto pacientes homocigotos para el gene atípico autosómico recesivo tienen niveles bajos de colinesterasa; estos pacientes cuando se les suministra succinilcolina (relajante muscular) que es hidrolizada por la colinesterasa pueden entrar en un período prolongado de apnea por falta de hidrólisis de la droga. 184 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 6 horas a temperatura ambiente y 1 semana refrigerada. Para la colinesterasa eritrocitica se utiliza sangre total tomada con EDTA como anticoagulante para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente y 5 días en refrigeración . La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Pseudo colinesterasa: Espectrofotometría Colinesterasa eritrocítica: Electrométrica Michel y Aldrige Valores de referencia: Pseudocolinesterasa en U/mL 4,65 – 12,2 Alerta: 2,5 – 3,0 Riesgo: Menor de 2,5 Colinesterasa en U. delta ph/h 91-164 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Aproximadamente 1 de cada 2500 individuos tienen deficiencia o defecto hereditario de la pseudocolinesterasa que es la que metaboliza el agente anestésico succinilcolina y por esta deficiencia los pacientes pueden presentar apnea prolongada durante un acto quirúrgico. En personas expuestas a insecticidas organofosforados se encuentran bajas concentraciones de colinesterasa y de pseudocolinesterasa. La colinesterasa eritrocítica se disminuye en un 30-50% en pacientes con hepatitis aguda y hepatitis crónica de larga duración, en un 50-70% en cirrosis avanzada y en carcinoma con metástasis al hígado. COLORACIÓN DE GRAM Código 901107 Esta coloración fue desarrollada por Hans Christian Gram a finales del siglo XIX y se usa para identificar en láminas con extendidos de material biológico la presencia de bacterias, parásitos, levaduras, células sanguíneas y células epiteliales. Permite clasificar las bacterias en dos grandes grupos: Gram-positivas/Gram (+) y Gram-negativas/Gram (-) y evaluar la calidad de un espécimen para cultivo especialmente los esputos, secreciones vaginales y orina e identificar presuntivamente el tipo de microorganismo para la selección adecuada de los medios de cultivo en donde debe sembrarse. Manual de Procedimientos 11 185 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra tomada de la lesión con escobillón estéril evitando la contaminación de áreas vecinas especialmente cuando se toma de piel o membranas mucosas. Muestra de bacterias obtenidas de un cultivo puro en agar Metodología: Las bacterias contienen lipoproteínas que se tiñen con cristal violeta y yodo formando un complejo de color azul (yodo-para-rosanilina) que en el caso de las bacterias Gram (+) no se decolora con alcohol acetona pero si hay decoloración en las bacterias Gram (-); posteriormente se añade otro colorante, la safranina, que solo es tomado por las Gram (-) lo que les da un color rojo brillante. Valores de referencia: Negativo para bacterias Gram-negativas y/o Gram-positivas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Identificación presuntiva de la bacteria causante de una infección en diferentes tipos de material biológico o en material obtenido de un cultivo positivo. COLORACIÓN TINTA CHINA Código 901109 La tinta china o Nigrosina permite observar células levaduriformes capsuladas sobre todo en LCR. Los polisacáridos capsulares rechazan la tinta china y la cápsula aparece como un halo claro alrededor de los microorganismos. Las preparaciones de tinta china se usan para el examen microscópico directo de las cápsulas de muchos microorganismos. Los finos gránulos de la tinta china dan un fondo semi-opaco, contra el que las cápsulas claras pueden ser vistas fácilmente. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra tomada con asa bacteriológica del cultivo del hongo. Metodología: Agarrar con el asa una gota de la tinta china y ponerla en la lámina de vidrio. Colocar una gota de muestra de LCR, esputo o lavado bronco alveolar en la lámina. Con la lámina cubreobjetos mezclar la tinta con el hongo y observar la placa en el microscopio a 40x y 10x Valores de referencia: Negativo para hongos Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta técnica es particularmente es útil para visualizar cápsulas grandes de Cryptococcus neoformans en LCR, esputo y otras secreciones. 186 Fundación Santa Fe de Bogotá COLORACIÓN PARA HEMOPARÁSITOS Código 902215/902214 La malaria es causada por los protozoarios Plasmodium falciparum, P. vivax, P ovale y P. malariae. En nuestro medio se encuentran el P. falciparum y el vivax y de estos dos el que produce la enfermedad clínica más severa es el P. falciparum La infección se transmite de hombre a hombre por la picadura del mosquito anófeles quien inyecta en el huésped esporozoitos que al sufrir un ciclo asexual invaden los eritrocitos después de pasar por el hígado. La infección también puede transmitirse por transfusión de sangre infectada o por el uso de jeringas y agujas contaminadas que se comparten entre personas drogadictas. La transmisión congénita ocurre muy raramente. El período entre la picadura del mosquito y la aparición del parásito en los glóbulos rojos es de 6-9 días para el P. falciparum y vivax y para la aparición de los síntomas es de 12-14 días. En la infección por vivax algunas formas exoeritrociticas (hipnocitos) se quedan en el hígado por meses y pueden madurar posteriormente y dar lugar a recaidas; esto no pasa en la infección por falciparum. La confirmación por el laboratorio se hace al demostrar los parásitos de la malaria en extendidos de sangre periférica y en muestra de gota gruesa. Dependiendo del ciclo de evolución de la infección pueden haber trofozoitos inmaduros anulares (formas en anillo), esquizontes (formas en división) y gametocitos (formas sexuadas). En la infección por P. falciparum generalmente se encuentran, en el extendido periférico, formas anulares mientras que en la infección por P. vivax se pueden encontrar diferentes estadios de maduración. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de sangre periférica tomada por punción digital para hacer los extendidos y la gota gruesa; si esto no es posible se puede utilizar sangre total tomada en tubo con anticoagulante como EDTA. Metodología: Los extendidos de sangre periférica se fijan con metanol, se tiñen con colorante giemsa y se observan al microscopio para identificación y recuento de la parasitemia. La gota gruesa no se fija sino que se tiñe directamente con colorante Giemsa. El recuento de la parasitemia en los extendidos se hace contando el número de glóbulos rojos parasitados con relación al recuento de 100 leucocitos y ese valor se multiplica por el número de leucocitos del paciente. Valores de referencia: Negativo para hemoparásitos Parasitemia alta: > 1.000/mm3 Manual de Procedimientos 11 187 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico rápido y confiable de infección por Plasmodium y para determinar respuesta al tratamiento teniendo el dato de la parasitemia pre y post-tratamiento. CONCENTRADO DE PLAQUETAS POR PLAQUETOFÉRESIS Código 911201 CONCENTRADO DE PLAQUETAS IRRADIADAS Código 911104 CONCENTRADO DE PLAQUETAS LEUCORREDUCIDAS Código 911103 Las plaquetas se pueden obtener por plaquetoféresis (féresis mecánica) técnica que permite extraer de un solo donante un concentrado de por lo menos 10 unidades; esta es una manera más segura de tratamiento pues el receptor no queda expuesto a antígenos de varios donantes y el riesgo de infeccion transmitida por varias transfusiones es mucho menor. Es de utilidad en pacientes refractarios a plaquetas en los cuales se puede transfundir plaquetas HLA-compatibles de un solo donante. Una unidad de plaquetoféresis generalmente aumenta el recuento de plaquetas en un adulto de 70 Kg en 30-60 x 109 /L (30.000-60.000/µL). En algunos pacientes adultos inmunosuprimidos o inmunodeficientes las plaquetas deben ser irradiadas para prevenir la enfermedad de injerto contra huesped. Recién nacidos pretérmino o inmunodeficientes se deben transfundir con plaquetas leucorreducidas y en lo posible las unidades deben ser citomegalovirus negativas. Las unidades de plaquetas también pueden ser irradiadas para disminuir el riesgo de enfermedad injerto contra huésped especialmente en neonatos pretérmino, en aquellos con inmunodeficiencia congénita o que sean potencialmente candidatos a transplante de órganos. Se recomienda irradiar las plaquetas por lo menos con 2.500 cGy. Condiciones del paciente y/o la muestra El donante debe estar bien de salud, llenar el formulario de donante y se le debe explicar el mecanismo que usa la maquina de feresis para la extracción de las plaquetas. Hay necesidad de tomarle muestra de sangre para las pruebas para enfermedades infecciosas y tener el resultado listo antes de proceder a la trasfusión de plaquetas al receptor. Metodología: Equipo de plaquetoferesis utilizado con material desechable para la recolección de las plaquetas. Las plaquetas que se separan de una unidad de sangre se diluyen en 40-60 mL de su propio plasma. 188 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Una unidad de plaquetas de una unidad de sangre contiene >5,5 x 1010, 108 leucocitos y trazas de glóbulos rojos. Una unidad de plaquetas obtenida por plaquetoferesis equivale a 10 unidades de plaquetas. Utilidad del procedimiento e interpretación del resultado La trasfusión de plaquetas esta indicada en las siguientes entidades: 1. Hemorragia activa con un recuento de plaquetas inferior a 50 x 109 /L (<50.000/µL) en trombocitopenias centrales por aplasia medular, leucemias, síndromes mielodisplásicos o quimioterapias intensivas o por presencia de plaquetas funcionalmente anormales en trombopatías por tromboastenia de Glanzman o Síndrome de Bernard-Soulier. 2. Transfusión profiláctica en pacientes con recuentos menores a 15-20 x 109 /L (<15-20.000/µL) cuando tienen asociados otros “factores clínicos” tales como fiebre (>38ºC), infección, coagulopatía, CID o marcada esplenomegalia. En ausencia de estos factores la transfusión plaquetaria está razonablemente indicada si el recuento es de <10.000/uL 3. Pacientes que van a ser sometidos a cirugía mayor y que tienen recuentos menores a 50 x 109 /L (<50.000/µL). Procedimientos tales como aspiración y biopsia de médula ósea pueden realizarse en pacientes con trombocitopenias <20.000/uL siempre y cuando se haga presión prolongada en el sitio de la aspiración 4. Coagulación intravascular diseminada con trombocitopenia. 5. En coagulopatías posteriores a transfusiones masivas. 6. En el caso de neonatos la dosis es de 20 mL/kg. Se debe transfundir a) en todos los casos cuando el recuento es < de 20.000µL. b) En paciente inestable/ crítico a término con recuento < 50.000/µL o en prematuro (<37 semanas) estable/no crítico y c) En paciente a término sangrante o prematuro inestable/crítico a riesgo de hemorragia intracraneal con recuento < 100.000/µL. COMPLEJOS INMUNES CIRCULANTES (CIC) Código 906805 Los CIC están compuestos de anticuerpos naturales polireactivos tipo IgG/IgM y de fracciones del complemento e interactúan con la vía clásica de activación del complemento. Se pueden presentar en individuos normales y el daño tisular que producen depende de muchos factores como son: tamaño del complejo, naturaleza del antígeno, clase de inmunoglobulina, afinidad del anticuerpo, habilidad para fijar complemento, interacción con el factor reumatoideo y la capacidad de eliminación de los CIC por el sistema reticuloendotelial. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable por 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envio. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Manual de Procedimientos 11 189 Valores de referencia: Células Raji: < 15 μg Eq/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado En la prueba de células Raji, los CIC se unen al complemento asociado a los receptores de las células, estos CIC han sido particularmente encontrados en pacientes con vasculitis sistémica necrotizante y sarcoidosis. COMPLEMENTO C1Q Código 906806 El primer componente del complemento (C1) está compuesto de 3 subunidades llamadas C1q, C1r y C1s. El C1q reconoce y se une a un complejo de inmunoglobulina más antígeno e inicia la cascada del complemento. Las deficiencias congénitas de cualquiera de los componentes del complemento (C1, C2, C4) resultan en la inhabilidad de depurar los complejos inmunes Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total total tomada en tubo con EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría cinética Valores de referencia: 7-48 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de un nivel no detectable del complemento total CH50. También es útil para diagnosticar deficiencia congénita o adquirida de complemento C1 la cual está asociada con enfermedad de complejos inmunes como LES, polimiositis, glomerulonefritis y la púrpura de Henoch-Schonlein. La concentración de C1q es un indicador de la cantidad presente de C1 COMPLEMENTO C2 Código 862617F La deficiencia homocigota de C2, aunque rara, es la deficiencia hereditaria del complemento más común y tiene una prevalencia de 1:10.000 a 1:40.000; la prevalencia heterocigoto es de 1:50 a 1:100 y el 50% de los pacientes son clínicamente normales. El LES discoide o sistémico ocurre aproximadamente en una tercera parte de los pacientes con deficiencia homocigota de C2. Otras enfermedades asociadas con deficiencia de C2 son dermatomiositis, glomerulonefritis, vasculitis, urticaria al frio, enfermedad inflamatoria intestinal e infecciones recurrentes. 190 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 1 año congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunodifusión radial Valores de referencia: 1,6-3,5 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles bajos o ausentes de C2 en presencia de C3 y C4 normales son consistentes con deficiencia de C2. Niveles bajos de C2 en presencia de C3 y C4 bajos son consistentes con un proceso de consumo de complemento. Niveles bajos de C2 y de C4 en presencia de C3 normal sugiere un inhibidor o deficiencia de C1 estearasa COMPLEMENTO HEMOLÍTICO TOTAL CH50 Código 906904 La actividad hemolítica del complemento total de la vía clásica se mide por la prueba de CH50 con el resultado expresado en unidades el cual representa la cantidad de suero que se requiere para lisar el 50% de células de carnero sensibilizadas con anticuerpo anticonejo (hemolisina). Niveles bajos de CH50 se pueden presentar en infecciones, LES activo y enfermedad de complejos inmunes tal como glomerulonefritis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 1 mes congelada a -20°C. La prueba se envía a laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunodifusión radial Valores de referencia: 392-1.019 U CH50/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Un CH50 normal indica que los complementos C1 hasta C9 están presentes en el suero. Sin embargo, aun en presencia de un CH50 normal, los niveles absolutos de algunos componentes del complemento (C3, C4) pueden estar disminuidos porque el suero normalmente contiene C3 y C4 en cantidades en exceso de las requeridas para obtener un resultado normal de CH50; por lo tanto el CH50 se puede utilizar para evaluar la integridad de la vía clásica pero no como prueba con buena sensibilidad para la fijación del complemento in vivo. El complemento total (CH50) se disminuye en infecciones, LES activo, enferme- Manual de Procedimientos 11 191 dad de complejos inmunes y glomerulonefritis. Niveles no detectables sugieren la posibilidad de una deficiencia de un componente del complemento y se debe determinar componentes individuales del complemento COMPLEMENTO C3 Código 906906 COMPLEMENTO C4 Còdigo 906908 El sistema complemento está compuesto de por lo menos 15 proteínas circulantes que interactúan secuencialmente resultando en lisis celular, descarga de histamina de mastocitos y plaquetas, aumento de la permeabilidad vascular, contracción de la musculatura lisa, quimiotaxis de leucocitos y neutralización de ciertos virus. Estas proteínas se designan como C1, C1q, C2, C3, C3a, b y c, C4, C5 y hasta C9; circulan como precursores inactivos en suero, constituyen el 5-10% de las proteínas totales y son activadas por una secuencia bioquímica específica. Su presencia es indispensable en las reacciones antígeno-anticuerpo e intervienen en la defensa del organismo contra agentes infecciosos. La vía clásica del sistema complemento consiste de reconocimiento (C1q, C1r, C1s), activación (C4, C2, C3) y ataque (C5, C6, C7, C8, C9). El C3 es menos sensible que el C4 en la activación de la vía clásica; encontrar un C3 disminuido con C4 normal debe sospecharse activación de la vía alterna. Condiciones del paciente y/o de la muestra Debido a que hay drogas que alteran los niveles de complemento se requiere anotar en la solicitud cuales está recibiendo el paciente. Muestra de suero. La muestra es estable por 4 días a temperatura ambiente, 8 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Metodología: Inmunoturbidimetría. Valores de referencia: C3: 90 - 180 mg/dL C4: 10 - 40 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Ambas pruebas se utilizan en el diagnóstico de enfermedades autoinmunes, especialmente para evaluar LES activo. La disminución de C3 puede estar asociada con glomerulonefritis aguda o membrano-proliferativa, enfermedad por complejos inmunes, enfermedad hepática severa, lupus eritematoso sistémico activo. Se encuentran niveles aumentados en reacciones inflamatorias subagudas, obstrucción biliar y en terapia con anticonceptivos orales. El C3 se disminuye en tratamiento con fenitoína, metildopa e hidralazina y el C4 en terapia con dextrán, metildopa y penicilamina. Infecciones 192 Fundación Santa Fe de Bogotá bacterianas recurrentes se presentan en pacientes que tienen deficiencia congénita de C3 y en pacientes con C3 bajo por deficiencia secundaria del inactivador C3b. La disminución de C4 se encuentra en enfermedades autoinmunes adquiridas en fase activa como LES y la artritis reumatoidea, glomerulonefritis temprana, enfermedad de complejos inmunes, crioglobulinemia, angioedema hereditario y en deficiencia congénita de C4. COMPLEMENTO SÉRICO C3C-2 Código El Factor C3 del complemento es el factor común de las vías clásica y alterna del sistema de complemento. Su concentración y la de sus productos de degradación, incluyendo el C3c, sirven para indicar el grado de activación del complemento; cuando los valores disminuyen significa que se ha producido una activación. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con heparina de litio para obtener plasma. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente, 8 días en refrigeración y/o congelada a -20ºC. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: 90-180 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en el estudio de enfermedades inflamatorias e infecciosas como el LES, artritis reumatoidea, endocarditis bacteriana subaguda, viremias, infecciones parasitarias y en sepsis bacteriana. COMPLEMENTO SÉRICO C5 CUANTITATIVO Código 906907F El sistema del complemento es crítico para la respuesta inflamatoria. Los componentes C5 a C9 pertenecen a la vía común del complemento. Los pacientes con deficiencia congénita de cualquiera de estos componentes tienen un mayor riesgo de presentar meningitis por meningococo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunodifusión radial Manual de Procedimientos 11 193 Valores de referencia: 6,0 – 20,0 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles ausentes de C5 en presencia de C3 y C4 normales son consistentes con deficiencia de C5. Niveles ausentes de C5 en presencia de C3 y C4 bajos son consistentes con un proceso de consumo de complemento. En la literatura médica se han reportado más de 30 casos de deficiencia de C5, la mayoría en pacientes con infecciones por Neisseria COOMBS DIRECTO / INDIRECTO Código 911007/902203 La prueba directa se usa para demostrar recubrimiento o sensibilización “in vivo” de los glóbulos rojos con anticuerpos o complemento. La prueba indirecta se usa para demostrar reacciones “in vitro” entre los glóbulos rojos y los anticuerpos que lo recubren; la prueba se usa para detectar la presencia de Anticuerpos Eritrocitarios irregulares causados por sensibilización y el método es aglutinación en gel. Muchos anticuerpos IgG se unen a los glóbulos rojos o fijan complemento pero no son capaces, una vez unidos, de producir aglutinación de estas células. La antiglobulina humana o suero de Coombs permite detectar visiblemente estos anticuerpos o el complemento que sensibiliza al glóbulo rojo. Hay varios tipos de globulina antihumana: poliespecífica que contiene anticuerpo a IgG y a complemento C3d y C3b humanos y se usa para pruebas de compatibilidad, detección de aloanticuerpos y para el Coombs directo y la monoespecífica que contiene Anti-IgG o anti-C3d/b. Condiciones del paciente y/o de la muestra Es absolutamente indispensable anotar en la solicitud las drogas que esté recibiendo el paciente pues hay un sinnúmero de drogas que producen prueba directa positiva por respuesta inmunológica como son: ácido aminosalicilico, ampicilina, cefotetan, cefoxitina, clorpromazina, clorpropamida, dipirona, etosuximida, hidralazina, isoniazida, levodopa,ácido mefenamínico, meticilina, penicilina, penicilamina, melfalam, fenilbutazona, fenitoína, procainamida, quinidina, quinina, estreptomicina, sulfonamidas, sulfonilurea, tolbutamida, globulina inmune intravenosa. Producen Coombs indirecto positivo asparaginasa, carbromal, clonidina, levodopa, mefenitoína, metildopa, moxalactam, penicilina y rifampicina. Muestra de suero para el Coombs indirecto y con EDTA como anticoagulante para él directo. La muestra es estable 72 horas refrigerada. Metodología: Reacción serológica del suero y glóbulos rojos del paciente con la antiglobulina humana de conejo o suero de Coombs. Valores de referencia: Negativo 194 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba directa de Coombs demuestra in vivo si los glóbulos rojos están cubiertos con IgG o con el complemento C3d y se utiliza para investigar anemia hemolítica autoinmune, hemólisis inducida por drogas, enfermedad hemolítica del recién nacido (Rh y ABO) y reacciones aloinmunes por transfusiones recientes de glóbulos rojos. La prueba no es confiable para detectar enfermedad hemolítica del recién nacido por incompatibilidad ABO pues no es positiva en el 100% de los casos. La prueba indirecta se utiliza para detección (rastreo) e identificación de anticuerpos, grupo sanguíneo y pruebas de compatibilidad pre-transfusionales. También es posible encontrar falsos negativos en casos de contaminación de los tubos de muestra con detergentes o con muestras anteriores que no han sido eliminadas al lavar los tubos. En casos de Coombs indirecto positivo se requiere identificar el anticuerpo específico. COPROLÓGICO Código 907002 COPROSCÓPICO Código 907004 COPROCULTIVO Código 901206 El examen macro y microscópico de las heces es una de las pruebas de rutina más usadas en la práctica clínica. Su resultado puede conducir al diagnóstico de infestación parasitaria, ictericia obstructiva, diarrea, malabsorción, obstrucción recto-sigmoidea, disentería, colitis ulcerativa y hemorragia gastrointestinal. El coprocultivo determina la presencia en el intestino de bacterias patógenas causantes de infecciones gastrointestinales. El coproscópico incluye, además del examen coprológico corriente, las siguientes pruebas: leucocitos, pH y azúcares reductores. Si el pH fecal es ácido puede indicar que es una enfermedad diarreica aguda (EDA) de tipo viral y si es alcalino es EDA invasiva. Los azúcares reductores (lactosa y glucosa) se consideran como indicadores de infecciones diarreicas en niños. La reacción a la glucosa es compatible con diarrea viral y a la lactosa con diarrea bacteriana. Condiciones del paciente y/o de la muestra Recolección de muestra de materia fecal en recipiente limpio que permita cierre hermético. La muestra es estable 2-4 horas a temperatura ambiente y 1 día Manual de Procedimientos 11 195 refrigerada La muestra debe ser entregada en el laboratorio, debidamente identificada, en el menor tiempo posible para evitar degradación y destrucción de componentes y microorganismos. En la mayoría de los casos se requieren tres muestras seriadas tomadas en diferentes días. Metodología: Valores de referencia: Coprológico: Observación visual bajo el microscopio de luz. Coprocultivo: la muestra se siembra en medios de cultivo especiales para gérmenes Gram (-) Sangre oculta: Técnica del guaiaco (técnica de Van Deen) Reporte del examen macro y microscópico Reporte del urocultivo como negativo o positivo con identificación de la bacteria Reporte del coproscópico Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El examen macroscópico debe determinar la cantidad, forma, consistencia, color, olor y presencia de otros constituyentes como moco, sangre, pus, fibra vegetal, proglótidos de tenia y larvas de parásitos. Las heces blandas, fétidas de color grisáceo y que flotan en el agua son sugestivas de esteatorrea. La constipación está asociada a heces duras, pequeñas y redondeadas. Heces en forma de cinta sugieren constipación o estrechez del recto. Un color como yeso sugiere disminución o ausencia de bilis o presencia de bario. Sangre roja sugiere hemorragia del colon o recto y de color negro hemorragia gástrica o intestinal alta. La presencia de moco es anormal y debe reportarse pues sugiere constipación espástica, colitis mucosa o adenoma velloso del colon. Si se acompaña de sangre se debe sospechar carcinoma o colitis ulcerativa Evidencia de material purulento indica colitis ulcerativa y disentería bacilar. El examen de sangre oculta es una parte importante del coprológico como método de tamizaje para detectar cáncer colorrectal o hemorragia gastrointestinal de otro origen; las drogas como aspirina, indometacina, fenilbutazona, reserpina, hierro, corticosteroides, antiinflamatorios no esteroideos y el alcohol pueden producir hemorragia y dar reacción positiva. La vitamina C puede dar lugar a falsos negativos y las dietas basadas en productos cárnicos o peroxidasas de plantas como las del rábano, manzanas, naranjas y banano dan lugar a falsos 196 Fundación Santa Fe de Bogotá positivos. CORTISOL Y CORTISOL AM/PM Código 904805/904806 CORTISOL LIBRE EN ORINA DE 24 H Código 904807 CORTISOL EN ORINA DE 24 HORAS Código 862729F CORTISOL EN SALIVA Código 862733F El cortisol (hidrocortisona, compuesto F) es el esteroide circulante más abundante, representando el 75-90% de los corticoides plasmáticos y el principal glucocorticoide secretado por la corteza suprarrenal. Es fisiológicamente efectivo en actividad antiinflamatoria y en mantener la presión arterial y además interviene en la gluconeogénesis, absorción del calcio y en la secreción del ácido gástrico y la pepsina. Sus niveles tanto en el pico diurno (6:00-8:00 am) como en el nadir (11:00 pm) están regulados por la ACTH. La mayoría del cortisol circula unido a la globulina transportadora de cortisol (CBG-transcortin) y a albúmina y solo 5%-8% es libre y se filtra por el glomérulo. La porción libre es la forma fisiológicamente activa y su medición en suero u orina es la prueba más confiable para definir el estado de los glucocorticoides porque refleja el estado clínico con exactitud e independiente del nivel de la proteína transportadora. Los niveles de CBG se aumentan en el embarazo, terapia con estrógenos y anticonceptivos orales y se disminuyen en el síndrome nefrótico, ayuno prolongado y enfermedad hepática crónica. La determinación en saliva es un método efectivo y conveniente como prueba de tamizaje para el síndrome de Cushing y en un estudio hecho por el Instituto Nacional de Salud (NIH) de los Estados Unidos se encontró que, la determinación en saliva a medianoche, era superior a la determinación en suero y al cortisol libre en orina para detectar síndrome de Cushing leve Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada con EDTA o heparina para obtener plasma. La muestra es estable por 4 horas a temperatura ambiente y 7 días refrigerada y/o congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo cuando no es posible recolectar orina emitida durante 24 horas como en Manual de Procedimientos 11 197 niños. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20ºC. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en recipiente con 10 g de ácido bórico como preservativo que se debe mantener refrigerada durante el tiempo de recolección. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 14 días congelada. Para la recolección de la saliva no se deben cepillar los dientes ni tomar ni comer nada 15 minutos antes de la recolección de la saliva y preferiblemente la muestra se debe recolectar entre las 11 p.m. y las 12 de media noche y anotar el tiempo de recolección. La muestra es estable 5 días refrigerada y 3 meses congelada. La prueba de cortisol libre se procesa en Estados Unidos y la prueba de cortisol total en suero y en saliva se procesan en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Cortisol libre: Cromatografía líquida/Espectrometria de masa en tándem (LC/MS/ MS) Cortisol en saliva: Electroquimioluminiscencia Valores de referencia: Suero Orina Cortisol a.m.: 185-624 nmol/L Cortisol p.m.: 0.00-276 nmol/L Cortisol libre suero µg/dL 8:00-10:00 am: 0,070,93 µg /dL 4:00-6:00 pm: 0,040,45 µg /dL 10:00-11:00 pm 0,040,35 µg /dL Cortisol con extracción: 21-111 µg/dL/24 horas Cortisol sin extracción: 58-403 µg/dL/24 horas Cortisol libre orina en µg/24 < 5 años: 0,9 – 8,2 horas < 10 años: 1 - 30 < 14 años: 1 - 45 < 18 años: 3 - 55 ≥ 18 años: 4 - 50 Saliva 8:00 - 10:00 am ≤ 19,1 nmol/L 2:30 - 3:30 pm ≤ 11,9 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en el diagnóstico diferencial del síndrome de Addison entre insuficiencia primaria y secundaria y la enfermedad de Cushing, hipopituitarismo, hiperplasia 198 Fundación Santa Fe de Bogotá adrenal y carcinoma adrenal por ser un indicador de la función adreno-cortical. El síndrome de Cushing se caracteriza por elevación de los niveles de cortisol en saliva y la medición de la concentración en la saliva de media noche se considera una prueba óptima para el diagnóstico. Se considera una práctica estándar para el diagnóstico hacerla por lo menos una vez como prueba confirmatoria. Concentraciones anormales de cortisol se pueden encontrar en pacientes con infecciones agudas, dolor intenso, diabetes mellitus, insuficiencia cardíaca, embarazo y terapia con estrógenos pues estos disminuyen la depuración de cortisol y aumentan el cortisol unido a compuestos no proteicos. Se pueden realizar pruebas de estimulación con ACTH y de supresión con dexametasona. CORTISONA Código 862747F La determinación de la cortisona, metabolito del cortisol, puede ser una prueba complementaria para el diagnóstico de problemas adrenales como anormalidades de la enzima esteroide 11-beta-hidroxi-dehidrogenasa (11-beta HSD) que es la que convierte el cortisol a cortisona. La deficiencia hereditaria de esta enzima produce un exceso de mineralocorticoides debido a que el cortisol, no la cortisona, actúa como un agonista del receptor de los mineralocorticoides. También puede deberse a un inhibidor adquirido de la enzima por compuestos tales como el ácido glicirricina componente del licorice (regaliz). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente, 10 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en recipiente con 10 g de ácido bórico como preservativo que se debe mantener refrigerada durante el tiempo de recolección. La muestra es estable 4 horas a temperatura ambiente, 72 horas refrigerada y 1 año congelada. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: Suero Adultos AM: 1,2-3,5 μg/dL PM: 0,6-2,8 μg/dL Orina ≥ 18 años: 23 – 195 μg/24 horas Manual de Procedimientos 11 199 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación conjunta del cortisol libre y la cortisona es útil para el diagnóstico de pacientes con hipertensión por renina baja debida a un exceso de mineralocorticoides. COXSACKIE A, ANTICUERPOS Código 862725F COXSACKIE A LCR Código 862700F/ COXSACKIE A ANTÍGENO Código 906310 COXSACKIE B, ANTICUERPOS Códigos 862726F COXSACKIE B LCR Código 862701F COXSACKIE B VIRUS, SEROTIPOS Código 862586 COXSACKIE B, ANTÍGENO POR NEUTRALIZACIÓN Código 906312 Los virus Coxsackie, son virus pertenecientes a la familia Picornaviridae, del género Enterovirus. Se dividen en dos grupos: Coxsackie A y Coxsackie B. Se dividieron sobre la base de ciertas diferencias biológicas y antigénicas, y se subdividen en serotipos designados por números sobre la base de diferencias antigénicas adicionales. El serotipo A del 1 al 23 y el serotipo B del 1 al 6. Algunas enfermedades causadas por Coxsackie virus son miocarditis, pericarditis, conjuntivitis hemorrágica aguda, meningitis, cistitis, pleurodinia y otras infecciones. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. LCR tomado por el médico tratante y enviado rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 14 días refrigerada y 30 días congelada a -20°C. 200 Fundación Santa Fe de Bogotá Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos: Fijación de complemento (FC) Antígeno: PCR Valores de referencia: Coxsackie A/B Anticuerpos Suero Negativo título <1:8 Coxsackie A/B Anticuerpos LCR Negativo Título < 1:1 Antígeno: No detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Títulos únicos ≥ 1:32 indican infección reciente. Títulos entre 1:8 o 1:16 pueden indicar infección reciente o pasada ya que los niveles del título persisten por algunos meses. Un aumento cuádruple o mayor entre una muestra en etapa aguda y otra convaleciente confirma el diagnóstico de infección por Coxsackie. El diagnóstico de la infección en el SNC se hace demostrando la presencia del anticuerpo específico producido intra-tecalmente. La interpretación del resultado se puede complicar debido a niveles bajos del anticuerpo en el LCR, trasferencia pasiva de anticuerpos desde la sangre y contaminación por un LCR traumático. CREATINFOSFOQUINASA (CPK/CK-MB) Código 903821/903819 CK ISOENZIMAS Código 825501F Las creatina quinasas son moléculas diméricas compuestas de subunidades M y B y comprenden las isoenzimas MM, MB y BB. Las subunidades M y B son inmunológicamente diferentes. Las isoenzimas CK-MM y CK-MB se encuentran en el músculo esquelético y en el cardíaco respectivamente mientras que la CK-BB se encuentra en cerebro y en músculo liso. La actividad de la CK en el suero se debe principalmente a CK-MM; la actividad se aumenta rápidamente después de ejercicio, trauma muscular, choque y cirugía mayor. Las isoenzimas citoplasmáticas son dímeros de las subunidades M y B (MM, MB, o BB). El tejido cerebral contiene predominantemente CK-BB, el músculo esquelético casi exclusivamente CK-MM y el miocardio contiene aproximadamente 30% de CK-MB. Manual de Procedimientos 11 201 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total con anticoagulante como heparina de litio, sodio o amonio para obtener plasma. La muestra es estable 4 horas a temperatura ambiente, 12 horas refrigerada y 3 días congelada a -20°C. La prueba no puede realizarse en muestra hemolisada porque ésta contiene altos niveles de adenilatoquinasa, ATP y glucosa-6-fosfato, sustancias que interfieren con la prueba dando falsos positivos. La prueba de las isoenzimas se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cinética enzimática Electroforesis para las isoenzimas Valores de referencia: CPK total Hombres: 49-397 UI/L; Mujeres: 38 234 UI/L CK-MB: Hombres: 9-22,8 UI/L Mujeres: 9-27,3 UI/L Isoenzimas CK1 - BB (%) ≤ 1.0 % del total CK2- MB (%) ≤ 4.0 % del total CK3 - MM (%) 97.0 - 100.0 % del total Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en el diagnóstico de infarto del miocardio (IM) y junto con la aldolasa y su isoenzima MM se puede usar para diagnosticar enfermedad del músculo esquelético. Cuando se sospeche infarto del miocardio deben tomarse muestras seriadas de CPK total y CK-MB a la admisión del paciente y después a las 8, 16 y 24 horas. Un sólo resultado de CK-MB no es tan seguro como las mediciones seriadas ni tampoco el único criterio para el diagnóstico de IM. Aunque generalmente tanto la CPK total como la CK-MB se elevan después del IM, en algunos pacientes sólo se eleva la fracción MB hasta un 30% de la total. Cuando este valor se excede en un 50% sobre la total probablemente indique una síntesis anormal de la subunidad B. La relación CKMB/CPK total x 100 nos da un “índice relativo” que permite establecer la ocurrencia o no de IM; un índice de < 4% indica poca probabilidad de IM; índice entre 4-25% indica alta probabilidad de IM o de daño miocárdico (cateterismo), lesión muscular (distrofia muscular de Duchenne, CPK total atípica o elevada CK-BB; un índice >25% probablemente se debe a CPK total atípica o 202 Fundación Santa Fe de Bogotá elevación de CK-BB. La CPK también puede elevarse en intoxicación por monóxido de carbono, hipotiroidismo, traumas compresivos, distrofias musculares, polimiositis, rabdomiolisis, trauma muscular de cualquier origen como deportes, accidentes, inyecciones intramusculares, convulsiones, picaduras de avispas o abejas y quemaduras. El fenómeno de CKMB elevada con CPK total normal puede ocurrir en un 20% de pacientes mayores de 70 años y hasta un 10% en individuos más jóvenes. Este hallazgo representa, probablemente, lesión miocárdica (más común en el anciano) y debe ser considerado, no como error de laboratorio, sino como parte del espectro de un infarto miocárdico no transmural. CREATININA (Suero, orina) Código 903825 CREATININA DEPURACION Código 903823 La creatina es importante en el metabolismo del músculo porque sirve de almacenamiento de fosfatos de alta energía a través de la síntesis de fosfocreatina. La creatinina es un anhídrido de creatina y se forma, de una manera constante, por una reacción espontánea e irreversible de la creatina perdiéndose una molécula de agua. La creatinina libre no es reutilizada por el organismo y funciona solamente como un producto de desecho de la creatina. La excreción urinaria es directamente proporcional a la masa muscular; aproximadamente se excretan 0,5 mmol de creatinina por kilogramo de masa muscular. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero o con anticoagulantes como heparina de litio o sodio para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. La muestra es estable 30 días a temperatura ambiente, refrigerada y/o congelada. Para la depuración se requiere muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco sin preservativo, estando el paciente bien hidratado, simultáneamente se debe tomar una muestra de suero al final de la recolección. La orina debe mantenerse refrigerada en los intervalos. Metodología: Enzimática con reacción de punto final fotométrico Manual de Procedimientos Valores de referencia: 11 203 Suero o plasma Hombres: 0,61-1,24 mg/dL Mujeres: 0,44 -1,00 mg/dL Orina Hombres: 600-1.800 mg/día Mujeres: 800-2.000 mg/día Depuración < 12 años: 50-90 mL/min Hombres: 97-137 mL/min Mujeres: 88-128 mL/min Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de creatinina sérica se utiliza principalmente para evaluar la función renal pero se considera que para este propósito es más sensible determinar la depuración de creatinina corregida para la superficie corporal. Su concentración se eleva en daño renal y es un indicador más específico que el nitrógeno ureico. También se puede elevar en necrosis músculo-esquelética, trauma, distrofia muscular progresiva, esclerosis lateral amiotrófica, amiotonia congénita, dermatomiositis, miastenia gravis, ayuno prolongado, hipertiroidismo y acidosis diabética. La depuración de creatinina mide simultáneamente concentraciones de la sustancia en sangre y orina y sirve para evaluar la función renal total porque es un buen indicador de la rata de filtración glomerular (RFG). El paciente debe informar que drogas está tomando porque hay aumento en el suero por interferencia analítica con el método por las siguientes drogas o constituyentes: acetaminofén, acetoacetato, acetona, ácido amino y beta hidroxihipúrico, ácidos linoléico,nalidíxico, oxaloacético, úrico, ASA, ampicilina, bilirrubina, cefalosporinas, alanina, alfacetoglutarato, ciclosporina, cafeína, cloroquina, creatina, cimetidina, citrato, clofibrato, dipirona, EDTA, espironolactona, estreptomicina, etanol, fenitoína, glucosa, hemoglobina, heparina, hidantoína, hidroclorotiazida, indometacina, isoniazida, L-dopa, lactato, sulfametoxipiridazina, teofilina, tobramicina, triglicéridos y warfarina. Hay disminución por interferencia analítica por: ácido ascórbico, bilirrubina, oxalato de sodio y fenacemida. CREUTZFELDT- JAKOB PROTEÍNA 14-3-3 Código 862621F La enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ) es un mal neurológico con formas genéticas hereditarias y también contagiosas, producidas por una proteína llamada prion (PrP). Si bien los casos hereditarios e infecciosos están perfectamente documentados, la causa de la aparición del prion es desconocida en la mayor parte de los casos informados. Se trata de una enfermedad de naturaleza degenerativa y pronóstico mortal. 204 Fundación Santa Fe de Bogotá La proteína 14-3-3 es una proteína neuronal normal que se acumula en el líquido cefalorraquídeo (LCR) en situaciones de destrucción neuronal importante, aguda o subaguda. Condiciones del paciente y/o de la muestra LCR tomado por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Enviar el formulario diligenciado en su totalidad solicitado por el laboratorio de apoyo diagnostico en Estados Unidos Metodología: Análisis inmunocromatográfico de membrana Valores de referencia: Sin establecer Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar la posibilidad del diagnóstico de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob CRIOAGLUTININAS (Ver aglutininas frías) CRIOGLOBULINAS Código 906909 Son inmunoglobulinas que han sufrido alteración por diferentes procesos que las hacen insolubles a temperaturas por debajo de 37oC. La alteración se puede presentar por enlace con antígenos y/o complemento, antes o durante el proceso de la crioprecipitación. Se clasifican en tres tipos : a) Inmunoglobulina monoclonal simple tipo I que es una paraproteína más comúnmente IgG (mieloma múltiple) e IgM (macroglobulinemias); b) Inmunoglobulina mono-policlonal mixta tipo II que es un complejo de antígenos poli y monoclonales asociada a estados linfoproliferativos IgM; c) Inmunoglobulina poli-policlonal mixta tipo III que forma complejos IgG/IgM o IgG/IgM/IgA. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no requiere ayuno. Sangre total tomada en tubo precalentado a 37°C sin anticoagulante para obtener suero. La muestra debe mantenerse y separarse a 37oC para no perder crioglobulinas durante el proceso de coagulación y separación del suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente. Metodología: La muestra de suero se coloca a 4oC y se observa durante 7 días para detectar presencia de crioglobulinas que se manifiestan por un precipitado Manual de Procedimientos 11 205 blanquecino entre el suero claro; el precipitado se disuelve a 37oC. Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Las crioglobulinas se pueden encontrar en crioglobulinemia, púrpura vascular, fenómeno de Raynaud, hepatitis B, citomegalovirus, mononucleosis infecciosa, lepra y enfermedades autoinmunes como LES, síndrome de Sjögren, poliarteritis nodosa y en síndromes proliferativos como mieloma múltiple, macroglobulinemias, linfomas y leucemias. También pueden encontrarse en pacientes sin patología asociada y es llamada crioglobulinemia esencial. CROMATINA ANTICUERPOS Código 862646F El anticuerpo anti-cromatina (nucleosomal) juega un papel importante en la respuesta autoinmune en el LES. Aproximadamente el 90% de los pacientes con LES tienen en el suero reactividad a nucleosomas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 4 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: < 1,0 AI Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los anticuerpos anti-nucleosomas pueden ser detectados en fase más temprana que los anti-ADNdc. Además son útiles para evaluar el lupus inducido por drogas por ser más sensibles y específicos que los anticuerpos anti-histonas. Es bastante específico de LES y rara vez se encuentra en otras entidades. Es positivo en la tercera parte de los casos con LES anti-DNA negativos. CROMOGRANINA A Código 906202F Cromogranina A es un aminoácido miembro de la familia de las graninas que se encuentran en los gránulos secretores de los tejidos nerviosos centrales y periféricos, endocrinos y neuroendocrinos cuya función es mantener la secreción regulada de estas moléculas de señalización. 206 Fundación Santa Fe de Bogotá Debido a su amplia distribución dentro de los tejidos neuroendocrinos, la cromogranina A puede ser un marcador tumoral útil para neoplasmas endocrinos como carcinoides, feocromocitoma, neuroblastoma, carcinoma medular de tiroides, tumores de la pituitaria, de los islotes y otros tumores captadores de aminas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o heparina de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. El resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: ELISA Valores de referencia: ≤ 100,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La cromogranina A se eleva en pacientes con varias neoplasias endocrinas y con carcinoma pulmonar de célula pequeña. Sirve para control y seguimiento de pacientes tratados por tumores carcinoides y otros tumores neuroendocrinos. Puede ser una prueba auxiliar para predecir el resultado y el seguimiento de pacientes con carcinoma avanzado de próstata. CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS, CULTIVO Código 901208 CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS, ANTÍGENO Código 906112 El C. neoformans es una levadura encapsulada que se encuentra como saprofita en el medio ambiente y se aísla frecuentemente en los nidos de palomas, en sus excrementos y en el suelo; la criptococosis (torulosis) se adquiere por inhalación y produce principalmente una meningitis crónica o subaguda y lesiones sistémicas especialmente en pacientes inmunosuprimidos (SIDA, linfoma, sarcoidiosis, y terapia con esteroides). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio.La prueba de anticuerpos se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Manual de Procedimientos 11 207 Metodología: Aglutinación de partículas de látex. Anticuerpos: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Antígeno: Negativo Anticuerpos: Título ≤ 1:2 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La detección del antígeno en LCR o suero en pacientes no tratados indica enfermedad activa y en general la positividad en el suero es más baja. La disminución en los títulos en pacientes tratados indica una buena respuesta a la terapia y su aumento progresión de la enfermedad. En algunos pacientes tratados exitosamente la positividad puede permanecer a títulos bajos por largos períodos de tiempo. La técnica de aglutinación es un método más confiable que el de la tinta china pues tiene una sensibilidad casi del 100%; el método de la tinta china tiene menor sensibilidad y especificidad especialmente en pacientes con SIDA. Pueden haber falsos positivos en pacientes con Trichosporon beigleii, neurosífilis, meningitis bacteriana y con factor reumatoideo positivo. La prueba debe ser confirmada por cultivo de la levadura. CRYPTOSPORIDIUM, ANTÍGENO Código 862676F CRYPTOSPORIDIUM PRUEBA RÁPIDA Código 901102F El Cryptosporidium parvum es un parásito intracelular que produce diarrea en pacientes inmunocomprometidos. Este parásito del grupo coccidian es común en rebaños de animales y puede contaminar las fuentes de agua. La trasmisión al hombre ocurre por la vía fecal-oral o por ingestión de agua contaminada. La criptosporidiosis produce una diarrea severa en pacientes con SIDA y diarrea moderada en niños especialmente los que van a guarderías. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de materia fecal fresca recolectada en frasco limpio y preservada en formalina. La muestra es estable 2 meses refrigerada y/o congelada a -20°C. En extendido de la muestra fresca se puede hacer coloración Ziehl Neelsen modificada para observar si se encuentran los parásitos. La prueba del antígeno es una prueba rápida inmunocromatografica que identifica el antígeno en materia fecal, la intensidad de la coloración es variable y dependiente de la cantidad de antígeno de la muestra. 208 Fundación Santa Fe de Bogotá Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Coloración: Ziehl Neelsen modificada con verde de malaquita. Valores de referencia: Antígeno: No detectable Coloración: No se observan parásitos CUADRO HEMÁTICO Código Ver Hemograma completo página…………….286 CUERPOS CETONICOS O CETONAS EN ORINA Código 903826 CUERPOS CETONICOS O CETONAS EN SANGRE Código 903827 Ver Beta-hidroxybutirato página…………………135 CURVA DE GLICEMIA (Ver glucosa) Código Manual de Procedimientos 11 209 D D-XILOSA Código 903423-1 D-XILOSA ORINA Código 903423-2 Es una azúcar pentosa que tomada oralmente se absorbe pasivamente en el intestino delgado, no es metabolizada por el hígado y se excreta por los riñones. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayuno desde la media noche del día anterior a la prueba. Antes de administrar la carga de D-xilosa se debe recolectar una muestra de orina y descartarla. En niños (10 kg de peso hasta 9 años de edad) tomar muestra de sangre en un tubo con fluoruro como anticoagulante, dar 5.0 g de D-xilosa disueltos en 100-200 mL de agua, anotar el tiempo y exactamente una hora después tomar otra muestra de sangre; en niños de menos de 10 kg de peso se hace el mismo procedimiento pero la dosis de D-xilosa es de 0,5 g por libra de peso. En adultos se suministra 25 g de D-xilosa disueltos en 250 mL de agua, se recolecta toda la orina producida en un lapso de dos horas y se toma una muestra de sangre en tubo con anticoagulante fluoruro a las dos horas de haber suministrado la D-xilosa. La muestra de sangre es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada. La muestra de orina es estable 4 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica espectrofotométrica de Reiner. Valores de referencia Sangre: Niños (peso ≤ 10kg): > 15 mg /dL /hora (peso ≥10kg): >20 mg /dL /hora Adultos: 20 - 100 mg /dL /2 horas 210 Fundación Santa Fe de Bogotá Orina: Niños (>10 años): > 23% en 5 horas (dosis de 5 g) Adultos: >16-40% en 5 horas (dosis de 25 g) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta prueba se usa para evaluar la función del intestino delgado proximal. Se realiza para diferenciar la malabsorción producida por problemas intestinales, de la producida por insuficiencia pancreática. Para la absorción de la D-xilosa no se requiere la intervención de las enzimas pancreáticas. La D-xilosa se absorbe principalmente en el intestino delgado proximal, especialmente en el yeyuno por un mecanismo de difusión facilitado por un sistema de transporte. La causa más importante de disminución de absorción de la D-xilosa es la enfermedad celíaca (sprue no tropical, enteropatía sensible al gluten); otras causas pueden ser sprue tropical, abetalipoproteinemia, linfangiectasis, lipodistrofia intestinal, amiloidosis, linfoma intestinal, escleroderma y otras enfermedades del colágeno, enfermedad de Whipple y yeyunectomía. La prueba requiere que haya una función renal normal y tiende a dar resultados bajos en adultos mayores, en estados de hiperemesis, retención gástrica y en infecciones bacterianas intestinales. Puede haber valores falsamente reducidos en pacientes tratados con diuréticos, agentes inflamatorios no esteroideos (aines) y con ciertos antibióticos. DEFICIENCIA CARBOHIDRATO TRANSFERRINA (CDT) Código 906209F La transferrina deficiente en carbohidratos (CDT) se aumenta en pacientes que presentan alcoholismo crónico debido a un cambio transitorio en el patrón de glicosilación de la transferrina donde cantidades relativas de disialo y asialotransferrina (CDT) aumentan con relación a la cantidad normal de la tetrasialotransferrina glicosilada. La CDT se normaliza al cabo de varias semanas de abstinencia de uso del alcohol. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 28 días en refrigeración y 45 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría Manual de Procedimientos 11 211 Valores de referencia CDT: 28,1-76,0 mg/L Transferrina: 188-341 mg/dL % CDT <2,5 % Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El uso exagerado del alcohol, definido como más de 4-5 bebidas al día por dos semanas o más, está asociado a niveles elevados de CDT y lo mismo sucede en ciertas enfermedades hepáticas como cirrosis biliar primaria, hepatitis crónica activa y en pacientes con variantes genéticas de transferrina y en trastornos congénitos de glicosilación. DEHIDROEPINANDROSTERONA (DHEA) Código 904808 DEHIDROEPIANDROSTERONA SULFATO (DHEA-S04) Código 904809 La dehidroepiandrosterona (DHEA) es el principal esteroide C19 del hombre y un andrógeno débil comparado con la testosterona, que se sintetiza casi exclusivamente en la glándula suprarrenal aunque también algo se secreta por los testículos; no es producida por los ovarios ni aun en condiciones patológicas; aunque es un andrógeno débil puede ser metabolizada a andrógenos potentes como la androstenediona y testosterona y por esto puede ser una causa indirecta de hirsutismo o virilización. La dehidroepiandrosterona-sulfato (DHEA-SO4) se secreta al torrente circulatorio a una velocidad mayor que DHEA pero debido a que su recambio es más lento (vida media de 24 horas) los niveles plasmáticos se mantienen más altos; no tiene variación diurna y no circula unida a proteínas por lo cual sus niveles son estables e independientes de variaciones en las proteínas plasmáticas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 12 horas a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . Metodología: Inmunoanálisis de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. DHEA: Inmunoensayo Quimioluminiscente de partículas paramagnèticas 212 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Mujeres: 0a1 : 15 – 261 ug/dl 1 a 6 meses : < 2 – 74 ug/dl 6 a 12 meses : < 2 – 26 ug/dl 1 a 3 años : < 2 – 22 ug/dl 4 a 6 años : < 2 - 34 ug/dl 7 a 9 años : < 2 - 74 ug/dl 10 a 12|años : 3 - 111 ug/dl 13 a 15 años : 4 - 171 ug/dl 16 a 18 años : 10 - 237 ug/dl 18 a 21 años : 51 - 321 ug/dl 21 a 30 años : 18 - 391 ug/dl 31 a 40 años : 23 - 266 ug/dl 41 a 50 años : 19 - 231 ug/dl 51 a 60 años : 8 - 188 ug/dl 61 a 70 años : 12 - 133 ug/dl Mayores de 71 años: 7 – 177 ug/dl Hombres: 0a1 : 9 – 316 ug/dl 1 a 6 meses : 3 – 58 ug/dl 6 a 12 meses : < 2 – 26 ug/dl 1 a 3 años : < 2 – 15 ug/dl 4 a 6 años : < 2 - 27 ug/dl 7 a 9 años : < 2 - 60 ug/dl 10 a 12|años : 5 - 137 ug/dl 13 a 15 años : 3 - 188 ug/dl 16 a 18 años : 26 - 189 ug/dl 18 a 21 años : 24 - 537 ug/dl 21 a 30 años : 85 - 690 ug/dl 31 a 40 años : 106 - 464 ug/dl 41 a 50 años : 70 - 495 ug/dl 51 a 60 años : 38 - 313 ug/dl 61 a 70 años : 24 - 244 ug/dl Mayores de 71 años: 5 – 253 ug/dl Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La dehidroepiandrosterona (DHEA) es útil para diagnosticar y establecer el diagnóstico diferencial del hiperandrogenismo en conjunto con la determinación de otros esteroides sexuales La dehidroepiandrosterona sulfato (DHEA-SO4) es un indicador más confiable de la secreción de andrógenos por la suprarrenal y reemplaza la prueba de 17-cetosteroides en orina. Es útil para investigar hirsutismo y alopecia en mujeres; también tiene valor en la evaluación de la adrenarca y en los casos de demora en la aparición de la pubertad. Generalmente se analiza en conjunto con la testosterona libre como un tamizaje inicial para hiperandrogenismo en casos de hirsutismo. Los niveles de la hormona se elevan en hiperplasia adrenal congénita, carcinoma adrenal, tumores virilizantes de la suprarrenal, enfermedad de Cushing depen- Manual de Procedimientos 11 213 diente de la pituitaria y en el síndrome de ovarios poliquísticos. Puede haber niveles disminuidos en enfermedad de Addison y en hipoplasia adrenal. DENGUE VIRUS ANTICUERPOS (IgG/IgM) Código 906207/906208 DENGUE, ANTÍGENO Código 862582F El dengue es una enfermedad febril aguda caracterizada por fiebre de 5-7 días de evolución, cefalea intensa, dolor retroorbital, muscular y articular y salpullido eritematoso. La forma clínica más severa es el llamado dengue hemorrágico. El agente etiológico pertenece a los flavivirus habiendo cuatro tipos inmunológicos 1, 2, 3 y 4. Se transmite por la picadura de mosquitos infectados como Aedes aegypti, Aedes albopictus y Aedes scutellaris. El período de incubación es de 3-15 días y no se transmite de persona a persona. La prueba utiliza una mezcla de los cuatro serotipos de antígenos de dengue obtenidos del cultivo celular. La detección del antígeno se hace por la glicoproteína NS1 que es común a todo los serotipos del dengue y se la puede utilizar para detectar infecciones primarias o secundarias en las primeras etapas de la infección Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. El resultado está disponible 24 horas a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Dengue IgG/IgM: Inmunocromatografía Dengue antígeno: Inmunocromatografía Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM: Negativo Antígeno NS1: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de anticuerpos IgG/IgM al virus del Dengue. Se ha encontrado que sólo el 70-80% de los pacientes con la infección aguda tienen anticuerpos IgM detectables y por esto en los casos seronegativos se hace necesario tomar una segunda muestra 3-5 días más tarde para determinar 214 Fundación Santa Fe de Bogotá seroconversión. Los anticuerpos IgG indican infección pasada. DESHIDROGENASA LACTICA (LDH) Código 903828 Es una enzima tetramérica citoplasmática que cataliza la oxidación reversible de lactato a piruvato; tiene varias isoenzimas: LD1, LD2, LD3, LD4 y LD5 sintetizadas en el corazón, el hígado o ambos; la LD1 indica patología cardíaca y la LD5 hepática. Como con otros marcadores de función tisular la elevación de la LDH en el suero ocurre después de anoxia prolongada. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. El suero debe separarse inmediatamente después de la formación del coágulo. No pueden procesarse muestras hemolizadas pues los glóbulos rojos tienen un alto contenido de la enzima. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 30 días congelada a -20°C. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Adultos 98 – 192 U/L Niños: 1 - 5 años: 140 - 304 5 - 10 años: 155 - 290 10 - 15 años: 115 - 257 Niñas: 1 - 5 años: 142 - 297 5 - 10 años: 142 - 261 10 - 15 años: 122 – 234 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La LDH se mide principalmente para diagnosticar condiciones en las cuales hay daño tisular. Se eleva a las 24-48 después de un infarto agudo de miocardio y persiste hasta por 10-14 días post-infarto. También se eleva en miocarditis, insuficiencia cardíaca congestiva, necrosis hepática, mononucleosis infecciosa, anemias hemolíticas, tumores, reabsorción de hematomas, anemia megaloblástica, enfermedad músculo-esquelética, trauma, necrosis tisular, choque, accidente cerebrovascular, infartos en diferentes órganos, enfermedad pulmonar activa, transfusiones, delirium tremens, leucemias, carcinomatosis, cirrosis y terapia con heparina. La LDH se puede medir en líquidos biológicos y su valor se puede comparar con aquel en suero; si los niveles son similares esto puede ser una evidencia de un proceso inflamatorio. Se ha sugerido que los niveles de LDH sirven para distinguir toxoplasmosis pulmonar de neumonía por P. carinii y también como factor pronóstico en el seguimiento de pacientes con carcinoma colorrectal avanzado pues la sobrevida es mejor en los que tuvieron inicialmente niveles normales de LDH. Manual de Procedimientos 11 215 DESOXIPIRIDINOLINA (DPD) Código 903011 Aproximadamente el 90% de la matriz orgánica del hueso está representada por fibras de colágeno tipo I que es una proteína triple helicoidal; estas fibras están unidas por moléculas entrecruzadas que le dan rigidez y fuerza al hueso; las moléculas entrecruzadas del colágeno maduro tipo I son piridinium, piridinolina (PYD) y desoxipiridinolina (DPD); cuando el colágeno se rompe por la acción de la colagenasa se excretan en la orina los productos más pequeños junto con las moléculas entrecruzadas como el DPD y el PYD por lo cual la medición del DPD urinario es un marcador útil para detectar la cantidad de formación y degradación de la matriz ósea. En los estados anormales del metabolismo óseo el proceso de remodelación se desestabiliza y hay más reabsorción que formación lo que da como resultado pérdida de la masa ósea como es el caso de la osteoporosis Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple. Recolectar Orina de 2 horas: iniciar la recolección con la vejiga vacía, es decir descartar la primera orina; recolectar la totalidad de la muestra retenida durante las 2 horas siguientes en un envase plástico limpio.La muestra es estable 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático en fase sólida por quimioluminiscencia. Valores de referencia: Mujeres > 25 años: 3,0-7,4 nmol DPD/mmol de creatinina Hombres >25 años: 2,3-5,4 nmol DPD/mmol de creatinina Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Hay una relación directa entre la pérdida importante de masa ósea y factores como la edad, la dieta, la inactividad, la inmovilidad y el hábito de fumar. Sirve como marcador de reabsorción ósea y puede ser utilizado en el diagnóstico y control de trastornos degenerativos del hueso y del tejido conectivo como osteoporosis, hiperparatiroidismo primario, enfermedad de Paget, osteoartritis y artritis reumatoidea. No debe utilizarse para predecir el desarrollo de osteoporosis o riesgo de posibles fracturas futuras. Disminución de los niveles con relación a un valor base indican buena respuesta a la terapia. 216 Fundación Santa Fe de Bogotá DIGOXINA Código 905605 La digoxina es un glicósido cardíaco potente, ampliamente prescrito para el tratamiento de pacientes que sufren de insuficiencia cardíaca congestiva. Tiene una vida media de eliminación en el adulto de 40 horas y en los niños de 12-24 horas. El 75-80% de la droga se excreta inalterada por vía renal y un 30% por vía hepática. El estado de equilibrio se alcanza después de 5-7 días de dosificación continua en pacientes que tienen una función renal normal. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero se toma un tubo tapa roja sin aditivos antes de la siguiente dosis . El tiempo habitual de muestreo es de 6-8 horas después de la administración de la última dosis. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Rango terapéutico: 0,8-2,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar niveles terapéuticos y evitar toxicidad por exceso de la droga. La intoxicación por digitálicos es un problema común y serio en la práctica clínica. En parte esto es el resultado del hecho de que los glicósidos cardíacos tienen un rango terapéutico muy estrecho y que hay una marcada variabilidad en los pacientes al efecto de la droga a pesar de que siempre estén tomando la misma dosis. Rangos por encima de 2,7 ng/mL deben ser de “alerta” para disminuir la dosis. DIHIDROTESTOSTERONA (DHT) Código 862628F La DHT es el principal andrógeno prostático. A pesar de que el individuo envejezca los niveles permanecen normales, no se eleva en la hiperplasia benigna de la próstata; la testosterona si disminuye con la edad. La DHT se produce por reducción de la testosterona por la 5 alfa-reductasa. La deficiencia de 5 alfa-reductasa resulta en hombres con virilización incompleta y con fenotipo femenino. La DHT también tiene relación con la calvicie o alopecia androgénica. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente y/o refrigerada y 24 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Manual de Procedimientos 11 217 Metodología: Radioinmunoanálisis con extracción Valores de referencia: Mujeres 5-46 ng/dL Hombres 16-79 ng/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para hacer el seguimiento de pacientes que reciben terapia inhibitoria de 5 alfa-reductasa o quimioterapia y para evaluar pacientes con posible deficiencia de 5 alfa-reductasa. DÍMERO-D Código 902104 En la cascada de la coagulación, por acción de la trombina, el fibrinógeno se transforma en monómeros de fibrina (coágulo de fibrina) cuya presencia dispara el sistema fibrinolítico. La plasmina, potente enzima lítica del coágulo, ataca a la fibrina y al fibrinógeno; la acción sobre la fibrina produce fragmentos terminales derivados de los enlaces de fibrina llamados D-dímeros y del fibrinógeno, los productos de degradación del fibrinógeno (PDF). Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma pobre en plaquetas. La venopunción no debe ser traumática para evitar activación del proceso de la coagulación. La muestra es estable 3 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20°C. La prueba también puede hacerse en muestra de orina de micción simple. Metodología: Inmunoanálisis enzimático fluorescente (ELFA) Valores de referencia: ≤ 500 ng/mL unidades D-Dimero (FEU) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El D-dímero es un buen indicador de actividad del sistema fibrinolítico en casos de coagulación intravascular diseminada (CID). Puede ser útil como método de tamizaje en pacientes donde se sospeche trombosis venosa profunda o tromboembolismo pulmonar. El D-dímero se eleva a los 2-3 días post-cirugía como evidencia de la actividad lítica dirigida contra la fibrina que se forma en el acto quirúrgico; si el nivel elevado persiste por más tiempo se debe sospechar un episodio tromboembólico. También puede haber elevación en procesos hemorrágicos, hematomas y en terapia trombolítica. Hay evidencia en diferentes estudios que la determinación de D-dimero es más 218 Fundación Santa Fe de Bogotá específica para la detección de CID que la prueba de productos de degradación del fibrinógeno y tiene la facilidad de hacerse en plasma que obvia los problemas de la recolección de la muestra para obtener suero. Pueden presentarse falsos positivos en presencia de factor reumatoideo y en embarazo. ds-DNA (Anti-dsDNA) ANTICUERPOS IgG Código 906418 La presencia en el suero humano de niveles detectables de auto-anticuerpos a DNA nativo de doble cadena es característica del lupus eritematoso sistémico idiopático (LES) y raramente se encuentran en otras enfermedades autoinmunes. Estos anticuerpos son lo que a menudo producen un patrón de coloración periférico u homogéneo con los sustratos en la prueba de anticuerpos antinucleares. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Técnica semicuantitativa de inmunoanálisis enzimático por microELISA. Valores de referencia: Negativo 0-200 UI/mL Positivo débil 200-300,0 UI/mL Positivo: 301,0-800,0 UI/mL Positivo fuerte: > 800 UI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes en los que se sospeche por los signos y síntomas clínicos enfermedad del tejido conectivo especialmente LES. Seguimiento de pacientes con diagnóstico de LES pues una elevación significativa en el título generalmente precede a exacerbación de la enfermedad La detección y cuantificación del anti-dsDNA es diagnóstica y terapéuticamente útil para LES. No se recomienda realizar la prueba en pacientes con prueba negativa para anticuerpos antinucleares Se pueden presentar falsos positivos en casos de elevación de complejos inmunes y agregados de inmunoglobulina Manual de Procedimientos 11 219 E ECHINOCOCCUS, ANTICUERPOS Código 906110 La hidatidosis o equinococosis es una enfermedad parasitaria producida por larvas de Echinococcus granulosus que a menudo son ingeridas accidentalmente en alimentos contaminados. La detección de los anticuerpos juega un papel muy importante en el diagnóstico de la parasitosis ya que los individuos infectados no eliminan, en las heces, huevos de Echinococcus. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Si es positiva se debe hacer Western-blot Valores de referencia: Índice: negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico del quiste hidatídico. Después de la extirpación del quiste los anticuerpos séricos pueden permanecer positivos por mucho tiempo. Puede haber reactividad cruzada con cisticercosis ECHOVIRUS 4, 9, 11, 30, ANTICUERPOS Código 862702F Los enterovirus comúnmente infectan a los seres humanos y la infección puede ser asintomática o presentarse con un amplio espectro de enfermedad aguda especialmente en niños, que incluye fiebre de origen indeterminado, meningitis aséptica, encefalitis, miopericarditis, pleurodinia, conjuntivitis, enantemas, exantemas, faringitis y neumonía. Actualmente hay por lo menos 70 serotipos de enterovirus que se denominan así: poliovirus 1 -3, echovirus 1 - 34; coxsackie grupo A 1- 24, coxsackie grupo B 1 - 6 y enterovirus 68 - 72. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Muestra de LCR que es estable 14 días en refrigeración y 30 días congelada a 220 Fundación Santa Fe de Bogotá -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Para cultivo viral se debe colocar la muestra en un medio de transporte especial para virus. Metodología: Fijación de complemento (FC) Valores de referencia: Echovirus serotipos 4, 9, 11, 30 Negativo < 1:8 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El diagnóstico de infección por ECHO (enterocytopathogenic human orphan) virus se basa en su detección en cultivo y serología. El aislamiento en el líquido cefalorraquídeo es diagnóstico de meningitis pero su aislamiento de nasofaringe o heces solo sugiere la posibilidad de infección y la confirmación debe hacerse por la respuesta serológica aunque hay reacción cruzada con los otros enterovirus principalmente con el grupo coxsackie. Títulos entre 1:8 a 1:16 pueden ser indicativos de infección reciente o pasada ya que los títulos del anticuerpo pueden persistir por algunos meses. Un incremento cuádruple entre un suero agudo y uno convaleciente confirma el diagnóstico. ELASTASA 1 PANCREATICA Código 862712F La elastasa 1 pancreática (EL 1) es una glicoproteína sintetizada por las células acinares que se diferencia de las otras proteasas pancreáticas en que, además de su actividad proteolítica, se combina, en el intestino, con los ácidos biliares y los esteroides neutrales para trasportar el colesterol y sus metabolitos a lo largo del tracto gastrointestinal. La elastasa fecal es una prueba díagnóstica ideal para evaluar la función pancreática en niños con fibrosis quística ya que permanece intacta durante su tránsito intestinal y su concentración refleja, con un 100% de sensibilidad, la capacidad secretora del páncreas Condiciones del paciente y/o de la muestra Recolectar 100 mg de materia fecal formada y mantenga congelada a -20°C. La muestra es estable 5 días en refrigeración , 1 semana refrigerada y 1 año congelada a -20ºC. Si la muestra está diarreica puede haber disminución de la concentración de EL1 debido a factor de dilución. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Manual de Procedimientos 11 221 Valores de referencia: Normal >200 μg/g de materia fecal Leve a moderada insufi- 100-200 μg/g de materia fecal ciencia pancreática: Insuficiencia pancreática exocrina severa: <100 μg/g de materia fecal Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de EL1 es una prueba confiable, no invasiva y con muy buena sensibilidad y especificidad para evaluar la función exocrina pancreática en niños con fibrosis quística. ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINAS A, S, C, F y variantes Código 906809 La hemoglobina normal del adulto es llamada HbA y constituye casi el 97-99% de la hemoglobina total. Las variantes de hemoglobinas anormales tienen diferentes patrones de migración por lo cual es posible distinguirlas por este método. Existen aproximadamente 600 variantes de hemoglobina las cuales se identifican por letras mayúsculas (Hb C o Hb S etc.) o por la ciudad en la cual fue descubierta la variante (ej. Hb Kansas). En el recién nacido hay un 50% de HbF la cual va disminuyendo durante el primer año de vida hasta alcanzar los niveles del adulto. Hemoglobinopatía Hb A1 Normal Hb S Hb C Hb A2 Hb F 96 - 98,5 -------% -------- 1,5 - 4 % 0 - 2,0 % Rasgo falciforme 60 - 80% 20 - 40 % -------- -------- -------- Anemia falciforme -------- 60 - 99% -------- -------- 1 - 40% Rasgo Hb C 70% ------- 30% -------- -------- Anemia Hb S C -------- 45 - 55% 45 - 55% -------- -------- b-talasemia menor Hb A2-F ------100% -------- aumentada hasta un 7% b-talasemia mayor -------- -------- baja o eleva- 7 - 100% da -------- Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre total. La muestra es estable 7 días en refrigeración . Metodología: Electroforesis en medio alcalino en gel de agarosa 222 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Adultos HbA 96,8-98,9% HbA2 1,5- 4% HbF 0-2% HbS No detectable HbC No detectable Los tipos de hemoglobina encontrados se identifican, se cuantifican y se hace un reporte que incluye la gráfica obtenida de la electroforesis Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de las hemoglobinopatías A2F (fetal) S, C y sus variantes. La más común de todas las hemoglobinopatías es el aumento (4-8%) en HbA2 que se encuentra en b-talasemia menor. En b-talasemia mayor la Hb fetal puede llegar a ser un 30-90% de la Hb total. También se pueden encontrar ligeros aumentos en anemia aplástica, esferocitosis hereditaria, desordenes mieloproliferativos y enfermedad homocigota de células falciformes. Las Hb S y C se encuentran más frecuentemente en personas de raza negra y las E y H en personas de origen asiático. La enfermedad homocigota de células falciformes (HbS) se caracteriza por anemia hemolítica severa y crónica y la heterocigota o rasgo (HbAS), que es la más común, por ser asintomática. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEÍNAS Código 906810 La función principal de la lipoproteínas plasmáticas es el transporte de los triglicéridos insolubles, tanto exógenos como endógenos, de sus sitios de origen en el intestino y el hígado a sus sitios de almacenamiento y utilización. Las lipoproteínas se clasifican en: alta densidad (AD/HDL), alfa-1 HDL, baja densidad (BD/LDL),beta LDL, y muy baja densidad (VLDL). Las dislipoproteinemias pueden ser primarias (hereditarias) o secundarias (adquiridas) y las primarias se clasifican en 4 tipos 1) Tipo I o hiperquilomicronemia o deficiencia familiar de lipasa; 2) Tipo II o hipercolesterolemia familiar (beta) 3) Tipo III o disbetalipoproteinemia familiar (beta) 4) Tipo IV o hipertrigliceridemia familiar (prebeta). Las más comunes son el tipo II y el tipo IV Condiciones del paciente y/o de la muestra Se requiere ayuno de 12-14 horas y no se recomienda congelar la muestra para preservación. El paciente no debe cambiar sus hábitos alimenticios en las tres semanas previas a la prueba, no ingerir bebidas alcohólicas en las 72 horas previas al examen y realizar ayuno completo 12 horas antes de la toma de la muestra. Manual de Procedimientos 11 223 Es conveniente correlacionar el resultado con los datos del colesterol y triglicéridos del paciente. No se puede realizar en pacientes en tratamiento con tiroxina, estrógenos, esteroides, andrógenos, anti lipídicos y antihipertensivos. Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente y 7 días refrigerada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Electroforesis en gel de agarosa Valores de referencia: Alfa: 23,0 – 53,0 PreBeta: 5,0 – 22,0 Beta: 39,0 – 70,0 Quilomicrones: Ausente Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Actualmente en la práctica clínica rara vez es necesario realizar la electroforesis de lipoproteínas porque el tipo de hiperlipidemia se puede determinar analizando los niveles de colesterol y triglicéridos. Colesterol elevado y triglicéridos normales generalmente corresponden a hiperlipoproteínemia IIa; triglicéridos elevados y colesterol normal a las hiperlipoproteinemias tipo IV, V o I; ambos elevados a tipo IIb, III o IV. En pacientes con triglicéridos y colesterol elevados a veces es necesario distinguir entre los tipos IIb y el IV y para esto se determina el colesterol de baja densidad; si la LDL está elevada el tipo más probable es el IIb. Hay hiperlipidemias secundarias o adquiridas con elevación del colesterol en embarazo, hipotiroidismo, colestásis intra y extrahepática, y porfiria intermitente aguda; con elevación de triglicéridos por anticonceptivos orales, diabetes mellitus, alcoholismo agudo, pancreatitis aguda, gota, septicemia por gérmenes Gram (-) y en glicogénosis; con elevación de colesterol y triglicéridos por síndrome nefrótico, falla renal crónica y terapia con inmunosupresores esteroideos. ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS (EFP) suero Código 906812 ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS, orina Código 906811 224 Fundación Santa Fe de Bogotá ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS, LCR Código 826641F Las proteínas séricas, electroforéticamente, se agrupan en cinco bandas: albúmina que representa las 2/3 partes del total, alfa-1, alfa-2, beta y gama. Las mismas bandas se encuentran en el LCR identificándose además la prealbúmina. Normalmente muy poca proteína es excretada en la orina; hay proteinuria en nefrosis lipídica, glomerulonefritis, ejercicio, fiebre y otras enfermedades glomerulares o tubulares pero la que requiere identificación por EFP es la proteína de Bence Jones. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra no debe estar hemolizada pues la hemoglobina produce una banda extra. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Muestra de LCR obtenido por punción lumbar no traumática pues la contaminación con sangre falsea el resultado. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple. Tanto la orina como el LCR requieren proceso de concentración. Metodología: Electroforesis en gel de agarosa tamponado Orina: Electroforesis de alta resolución Valores de referencia: Suero % g/dL LCR % Prealbúmina ----- ------ 2,2-7,1 Albúmina 58,8-69,6 3,3-5,0 56,8-76,4 Alfa1 1,8- 3,8 0,2-0,4 1,1-6,6 Alfa2 3,7-13,1 0,3-1,0 3,0-12,6 Beta 8,9-13,6 0,6-1,2 7,3-17,9 Gamma 8,4-18,3 0,7-1,6 3,0-13,0 Orina: No se observan proteínas en la electroforesis LCR: Negativo para bandas oligoclonales Índice IgG: (IgG LCR/IgG Suero) / (albúmina LCR/albúmina suero) = < 0,7 unidades Manual de Procedimientos 11 225 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Aunque en muchos casos el análisis de la albúmina, las proteínas totales y el cálculo de las globulinas es suficiente para aclarar un diagnóstico también es importante, a veces, cuantificar las globulinas. La electroforesis de proteínas es útil en el estudio de pacientes con deficiencia de a-1 antitripsina, enfermedad hepatobiliar, mieloma y macroglobulinemia. En pacientes con mieloma múltiple o macroglobulinemia de Waldeströn se encuentra, en el suero, una banda monoclonal en la región de la gammaglobulina o entre la gama y la beta o en la región de la globulina alfa-2. Hay elevación de las globulinas y disminución de la albúmina en cirrosis hepática, genopatías policlonales, procesos inflamatorios agudos o crónicos y síndrome nefrótico donde hay elevación de alfa-2 y beta. La EF de proteínas urinarias se utiliza principalmente para identificar la proteína de Bence Jones que migra entre las regiones beta y gama y que posteriormente requiere inmunofijación para determinar la presencia de cadenas livianas monoclonales tipo kappa o lambda. En el 95% de pacientes con esclerosis múltiple (EM) hay aumento en el LCR de proteínas totales debido a síntesis de IgG específica; estas migran como dos o más bandas discretas en las regiones gamma o beta y representan la activación de clonas de células plasmáticas en el SNC; se llaman bandas oligoclonales y también pueden encontrarse en otras enfermedades neurológicas como meningitis criptocococcica, polineuritis idiopática, neurosífilis, panencefalitis crónica por rubella y panencefalitis esclerosante subaguda. ENOLASA NEUROESPECÍFICA (NSE) Código 906622 Es la isoenzima y-y de las enolasas que se encuentra casi exclusivamente en las neuronas y en el tejido neuroendocrino. Se encuentran concentraciones elevadas en pacientes con carcinoma medular de tiroides, tumores de islotes pancreáticos, feocromocitoma, carcinoide, neuroblastoma y carcinoma pulmonar de célula pequeña. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 5 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo: < 10,8 ng/mL 226 Fundación Santa Fe de Bogotá Inconcluyente: 10,8 - 15 ng/mL Positivo: > 15 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles superiores a 12,5 ng/mL de NSE se encuentran en 48-69% de pacientes con carcinoma pulmonar localizado y en 96-100% con lesión diseminada. La prueba puede diferenciar, con un valor predictivo del 91%, el carcinoma pulmonar de célula pequeña de otros carcinomas pulmonares. Durante el tratamiento del carcinoma pulmonar los niveles de la enzima disminuyen o se estabilizan en un 75% de los casos y se elevan en un 28% cuando la enfermedad progresa o recidiva. ENTAMOEBA HISTOLYTICA, ANTICUERPOS Código 906113 Un individuo que mantenga y excrete quistes o trofozoitos de E. histolytica se considera que tiene amebiasis esté o no sintomático. Esta infección puede ser aguda o crónica. Las formas extraintestinales de la enfermedad, como el absceso hepático son menos frecuentes que las formas intestinales. El diagnóstico se establece directamente al encontrar quistes o trofozoitos en las heces. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 3 meses refrigerada y 1 año congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estado Unidos y el resultado esta disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: ELISA Valores de referencia: Negativo ≤ 1,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los estudios serológicos son útiles en el diagnóstico amibiasis invasiva intestinal y extra-intestinal. Generalmente los portadores de quistes tienen serología negativa. El 85% de pacientes que tienen biopsia positiva para amibiasis intestinal tienen anticuerpo positivo y el 95-100% con amibiasis extra-intestinal son positivos. Los valores pueden permanecer positivos hasta por 6-18 meses después de enfermedad invasiva Manual de Procedimientos 11 227 ENTEROVIRUS, ANTICUERPOS Código 906210 Los enterovirus son un grupo de agentes virales que habitan en el intestino y que son los responsables de importantes y frecuentes enfermedades humanas con manifestaciones clínicas muy variadas. Los enterovirus son virus ARN pertenecientes a la familia Picornaviridae (“pico” pequeño;”rna” por ácido ribonucleico). Dentro del grupo de los enterovirus están Coxsackie A y B, Echovirus, Poliovirus Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Muestra de LCR obtenido por punción lumbar no traumática pues la contaminación con sangre puede falsear el resultado. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fijación de complemento (FC) Valores de referencia: Coxsackie A, B y Echovirus < 1:8 Anticuerpo no detectable Títulos únicos ≥ 1:32 indican infección reciente Poliovirus (Tipos 1-3) < 1:8 Anticuerpo no detectable Debido a que los niveles de anticuerpos por FC generalmente persisten por pocos meses cualquier título medible indica exposición reciente Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar infección por Enterovirus. ENZIMA CONVERTIDORA DE ANGIOTENSINA (ACE) Código 904002/862559F La ACE es una glicoproteína que contiene zinc y que cataliza la remoción de dos aminoácidos con terminal carboxilo a partir de varios sustratos péptidos. Se produce en el pulmón, en el epitelio del túbulo renal proximal y en las células endoteliales vasculares. 228 Fundación Santa Fe de Bogotá La enzima es la responsable de la conversión de angiotensina I a angiotensina II lo que estimula la producción de aldosterona y es un potente vasoconstrictor con efecto fisiológico sobre la filtración glomerular, además de otras funciones como inactivar la bradiquinina. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. En pacientes tratados con captopril la muestra debe analizarse después de 4 horas de la toma pues la ACE aumenta “in vitro” en función al tiempo de almacenamiento. Este fenómeno no ocurre con otros inhibidores de la ACE como enalapril. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Muestra de LCR obtenido por punción lumbar no traumática pues la contaminación con sangre puede falsear el resultado. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría cinética Valores de referencia: Suero Adultos: 9-67 U/L ≤ 18 años: 13-100 U/L LCR ≤ 16 U/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes en quienes se sospecha sarcoidiosis. Diferentes estudios han indicado que la ACE es significantemente más alta en el 79% de pacientes con sarcoidiosis activa y que aproximadamente un 5% de la población adulta normal también tiene niveles elevados. Al parecer la actividad de la enzima refleja la severidad de la enfermedad pues se encuentra elevada en el 78% de los pacientes con estadio I, en el 86% con estadio II y en el 91% de estadio III de sarcoidiosis y se disminuye dramáticamente en los pacientes que inician tratamiento con cortisona. También se puede elevar en enfermedad de Gaucher, lepra, tirotoxicosis, psoriasis, cirrosis alcohólica, hipertensión esencial y renovascular, enfermedad inflamatoria intestinal, diabetes mellitus, niños prematuros con SDR, amiloidosis, histoplasmosis, asbestosis, beriliosis, hepatitis granulomatosa, neumonitis hipersensible, linfoma de Lennert, tuberculosis miliar, cirrosis biliar primaria y silicosis. Puede haber niveles disminuidos por tratamiento con corticosteroides, hipotensores y niveles aumentados en individuos menores de 20 años y en tratamiento con diuréticos. Manual de Procedimientos 11 229 Aunque la determinación de la ACE no es específica para sarcoidiosis es en este momento la prueba más útil porque tiene una sensibilidad del 90% y una especificidad del 95%. EPSTEIN-BARR ANTICUERPOS (IgG/IgM) Códigos 906212/906216 EPSTEIN-BARR, ANTÍGENO NUCLEAR IgG/IgM Códigos 862786F/862787F EPSTEIN-BARR, CARGA VIRAL Código 862668F Las infecciones por el virus Epstein-Barr (miembro del grupo herpes) se manifiestan por un amplio rango de síntomas que van desde una infección subclínica in niños hasta una fulminante y fatal que puede presentarse en todas las edades. Este virus también está implicado en la etiología de varios cánceres tal como el linfoma de Burkitt y el carcinoma nasofaríngeo. La mononucleosis infecciosa es la manifestación más común de la primoinfección en adolescentes y adultos jóvenes. La infección adquiere importancia en pacientes inmunosuprimidos o trasplantados donde el virus puede producir un síndrome linfoproliferativo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos: Quimioluminiscencia Antígeno: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Carga viral: PCR-RT Valores de referencia: Anticuerpos IgG Negativo < 20,00 Positivo ≥ 20,00 Anticuerpos IgM Negativo < 20,00 Indeterminado: 20,00-40,00 Positivo: ≥ 40,00 Antígeno: Negativo Carga viral: Negativo 230 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de mononucleosis infecciosa cuando la prueba de aglutinación a anticuerpos heterófilos es negativa. Como ayuda en el diagnóstico de linfoma de Burkitt y carcinoma nasofaríngeo y en infecciones en pacientes inmunosuprimidos y/o trasplantados. Las pruebas detectan tres componentes del virus: antígeno temprano, antígeno viral capsular (VCA) IgG, IgM e IgA y el antígeno nuclear (EBNA). El antígeno temprano y el VCA IgG aparecen al comienzo de la enfermedad y hacen el pico entre las 4-6 semanas, declinando gradualmente durante la convalecencia quedando detectable el VCA por el resto de la vida. El VCA IgM es el anticuerpo que aparece más tempranamente, hace un pico entre 4-6 semanas, declina rápidamente y se negativiza 2-3 meses de iniciada la infección. Los anticuerpos a EBNA se desarrollan 6-8 semanas después de la primoinfección y también son detectables por el resto de la vida. Cerca del 90% de la población adulta normal tienen anticuerpos IgG a los antígenos VCA y EBNA. La persistencia con títulos altos del antígeno temprano y del VCA indican infección crónica La presencia de VCA IgG y de EBNA sin sintomatología clínica indica infección pasada. Prueba positiva para VCA IgM indica infección primaria aguda o reciente. VCA IgA está presente en el 84% de pacientes con carcinoma escamocelular no queratinizante (tipo 2 WHO) y sólo en el 16% en el carcinoma queratinizante (tipo 1) por lo cual la detección de éste anticuerpo puede ser de ayuda para el diagnóstico de estos tumores. El EBV puede producir síndromes linfoproliferativos especialmente en pacientes que han recibido trasplante renal o de médula ósea o que padecen SIDA. La carga viral se determina cualitativamente en diferente especímenes ERITROPOYETINA (EPO) Código 902106 La eritropoyetina (EPO) es una hormona glicoproteica secretada por el riñón y que se une a un receptor específico en las células progenitoras eritroides facilitando su diferenciación. La EPO regula la producción de los glóbulos rojos. Como la rata de depuración renal no se afecta por la concentración sérica ni por la utilización tisular, la concentración circulante de EPO refleja la rata de síntesis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos Manual de Procedimientos 11 231 y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cuantitativa de inmunoquimioluminiscencia. Rangos terapéuticos: mUI/mL Hombres Mujeres < 7 años: 3,5 - 21,9 < 7 años: 2,9 – 8,5 < 7 años: 3,5 - 21,9 < 7 años: 2,9 – 8,5 < 10 años: 1- 13,5 < 10 años: 2,1 – 8,2 < 13 años: 1 - 14 < 13 años: 1,1 – 9,1 < 16 años: 2,2 -14,4 < 16 años: 3,8 – 20,5 < 19 años: 1,5- 15,2 < 19 años: 2 – 14,2 ≥ 19 años: 2,6- 18,5 ≥ 19 años: 2,6 – 18,5 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Pueden haber niveles elevados de EPO en policitemia secundaria a hipoxia tisular (enfermedad cardíaca cianótica y en personas que viven en altitudes altas), eritrocitosis familiar, desordenes con aumento de la afinidad del O2, tumores productores de EPO y algunas veces en pacientes post-trasplante renal. En policitemia rubra vera los niveles pueden estar normales o disminuidos. Puede haber niveles disminuidos en falla renal, en enfermedades crónicas incluyendo SIDA; en los pacientes con infección por VIH los niveles de EPO se aumentan significativamente como respuesta al tratamiento con zidovudine. La eficacia del tratamiento con EPO en enfermedad renal terminal puede estar limitada por deficiencias de hierro, folatos, vitamina B12, hiperparatiroidismo o por intoxicación con aluminio. La concentración sérica de la EPO puede tener valor pronóstico para la aparición de rechazo en receptores de trasplante renal. Niveles disminuidos o suprimidos de EPO están asociados con anemia severa en pacientes con rechazo crónico. ESPERMATOZOIDES, ANTICUERPOS Código 906420 La incidencia de anticuerpos a espermatozoides es de 0-3,5% en la población general de mujeres fértiles y 0-2% en hombres. La incidencia en parejas infértiles sin enfermedad orgánica es de 18% en mujeres y de 5-10% en hombres. Se ha reportado que hasta un 40% de hombre vasectomizados tienen anticuerpos anti-esperma 232 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Muestra de semen del eyaculado total y el paciente debe haber estado es abstinencia sexual de 2-7 días antes de la recolección de la muestra. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de infertilidad en parejas. En hombres donde se sospeche infertilidad masculina se prefiere determinar la presencia de anticuerpos anti-esperma en el semen. La prueba sirve como seguimiento en los casos donde se note aglutinación de espermatozoides en el eyaculado y cuando haya historia de trauma testicular, biopsia, reversada de vasectomía, infección genital o lesiones obstructivas del sistema ductal reproductivo. En mujeres la prueba en suero se hace en casos de una prueba anormal post-coital y en casos de infertilidad inexplicada. ESPERMOGRAMA BÁSICO Código 907201 BIOQUÍMICA SEMINAL Código 903013 El semen está compuesto de espermatozoides suspendidos en el líquido seminal (plasma); éste suministra la nutrición y el volumen necesario para llevar los espermatozoides hasta el moco endocervical. La buena interacción del espermatozoide con las secreciones de la vagina es de gran importancia para la sobrevida y actividad funcional de los espermatozoides. Condiciones del paciente y/o de la muestra 1. El eyaculado debe tomarse después de 2-5 días de un período de abstinencia sexual. Se recomienda tomar dos o tres especímenes con intervalos de una semana para una muestra más representativa o realizar varios espermogramas durante el curso del ciclo espermatogénico (aproximadamente 45 días) 2. Debe recolectarse en el laboratorio y si esto no es posible entregarse en un período no mayor a dos horas después de obtenido. 3. Obtenerse por masturbación colocando directamente el total del eyaculado en un frasco limpio, debidamente identificado, que debe calentarse, previa- Manual de Procedimientos 11 233 mente, a la temperatura corporal. 4. No debe utilizarse condón ni coitus interruptus porque el primero interfiere con la viabilidad y el segundo con el volumen. 5. Protegerse de temperaturas extremas (entre 20-40ºC) y en lo posible mantenerse a temperatura corporal (37ºC) desde el momento de la colocación en el recipiente hasta su procesamiento. Metodología: Los parámetros medidos son: pH, color, volumen, recuento, movilidad, viabilidad, concentración y morfología de los espermatozoides según la recomendación de la Organización Mundial de la Salud (OMS). Valores de referencia: Volumen: ≥ 2,0 mL Recuento: ≥ 20 millones/ mL pH: 7,2-8,0 Viabilidad: ≥ 50% vivos Movilidad: ≥ 50% Grado de movilidad: 3-4 Morfología: ≥ 30 normales Leucocitos: <1 x 106 /mL Células germinales: < 4 x 106/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es la primera prueba que debe hacerse para estudio de infertilidad masculina. Las anormalidades en la morfología de los espermatozoides pueden producir infertilidad por defectos en transporte, capacitación, en reacción acrosómica, en la unión y penetración de la zona pelúcida y/o en la fusión con la membrana vitelina del oocito. Los espermatozoides con anormalidades en cabeza y cola, tamaño y forma no son capaces de completar los pasos críticos de transporte y fertilización. Un aumento en el número de leucocitos indica infección del tracto genital y un aumento del número de células germinales indica fallas en la espermatogénesis. La bioquímica seminal es el análisis bioquímico del semen. Los parámetros que se valoran en el análisis bioquímico del semen son: • • • • • ácido cítrico Fructosa Zinc Fosfatasa ácida prostática Alfa-glucosidasa neutra. 234 Fundación Santa Fe de Bogotá ESTRADIOL (E2) Código 904503 Es una hormona esteroide (estradiol-17b, E2) que circula unida a proteínas y es el estrógeno natural más potente producido principalmente por los folículos ováricos (no embarazadas) pero también se produce en la suprarrenal, cuerpo lúteo, placenta y en los hombres en los testículos. Además del estradiol otros estrógenos esteroideos naturales son estrona, estriol y sus conjugados. Los niveles de E2 varían con el ciclo menstrual presentando dos picos, el uno durante la mitad del ciclo y el otro en la fase luteal. Los niveles preovulatorios nos dan un índice de la maduración del folículo. Condiciones del paciente y/o de la muestra En la solicitud se debe especificar edad, sexo y si el/la paciente está en tratamiento con estrógenos o anticonceptivos. Muestra de suero o muestra de sangre total tomada con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Valores de referencia: Hombres 10-40 pg/mL Mujeres post-menopausicas 0-30 Mujeres no gestantes: 30-400 Fase folicular media: 23–122 Periovulatorio: 95-433 Fase luteal media: 49–291 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles de estradiol se utilizan para controlar el estado ovulatorio y son de valor en la investigación de pubertad precoz en niñas y de ginecomastia en hombres. Su utilidad principal está en el diagnóstico diferencial de amenorrea y en el control de la ovulación inducida. También está elevada en tumores ováricos, tumores feminizantes de la suprarrenal y enfermedad hepática y está disminuida en falla ovárica y en tratamiento con anticonceptivos orales. Niveles anormalmente elevados en hombres son indicativos de síndromes feminizantes como la ginecomastia. ESTRIOL (E3) Código 904504 Manual de Procedimientos 11 235 ESTRIOL LIBRE Código 904505 Durante el embarazo la E3 es el estrógeno dominante. La placenta convierte la DHEA-S producida por las adrenales del feto a E3 y otros estrógenos. El E3 es útil para evaluar las glándulas adrenales del feto y la placenta durante el embarazo. El E3 es uno de los marcadores bioquímicos maternos usados para el tamizaje de las trisomías cromosomales más comunes, especialmente el síndrome de Down. El E3 libre generalmente es más bajo que el normal en embarazos donde el feto es pequeño o en mala condición. Los niveles disminuyen dramáticamente inmediatamente antes de muerte fetal intrauterina alcanzando niveles muy bajos un poco tiempo después Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 12 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. La prueba de estriol se procesa en laboratorio de referencia local y la prueba de estriol libre se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Estriol libre Hombres: <0,07 ng/mL Mujeres: <0,08 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la evaluación, durante el embarazo, para el tamizaje del síndrome de Down y la trisomía 18. También es un marcador de muerte fetal y de trastornos congénitos del metabolismo de los esteroides fetales. Generalmente los niveles de estriol libre están mas bajos que el rango normal en los embarazos donde el feto es pequeño o tiene sufrimiento fetal y caen dramáticamente inmediatamente antes de la muerte fetal. ESTRONA Código 904507 La estrona se deriva principalmente del metabolismo de la androstenediona en tejidos periféricos, especialmente tejidos adiposos. Las personas obesas tienen aumento de la conversión de androstenediona a estrona lo que lleva a elevación de la estrona sérica. Además en la evaluación de la menopausia puede ser útil determinar un aumento en la relación estrona a estradiol. 236 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no puede estar tomando esteroides, gonadotrofina o estrógenos 48 horas antes de la prueba. Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 24 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: pg/mL 1 - 9 años hombres: ≤ 10; mujeres: ≤ 35 10-11 años hombres ≤ 13; mujeres ≤ 73 12-14 años hombres ≤ 29; mujeres ≤ 76 15-17 años hombres ≤ 65; mujeres ≤ 189 ≥ 17 años hombres ≤ 69 Mujeres adultas Fase folicular: 10-138 Fase luteal: 16-173 Post menopausia: ≤ 65 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de los trastornos de la menopausia y control de la obesidad EVEROLIMUS Código 862565F Fármaco inmunosupresor utilizado en el rechazo de órganos trasplantados. Actúa como un inhibidor de la señal de proliferación, modificando las señales fisiológicas que modulan el crecimiento y la proliferación celular al inhibir la acción de las células T y las células del músculo liso. El rango tóxico y terapéutico para everolimus no está bien definido y probablemente depende del medicamento administrado, el órgano transplantado, tiempo post-trasplante y otros aspectos de aplicación clínica especifica. Se ha sugerido un valor mínimo del nivel valle de 7,8 – 15,0 ng/mL cuando se administra junto con ciclosporina en el período temprano del post-trasplante renal. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener sangre total. La muestra es estable 2 semanas refrigerada y/o congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días Manual de Procedimientos 11 237 hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis de polarización fluorescente (FPIA) Rango terapéutico: 3-8 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Control de la terapia inmunosupresora en pacientes trasplantados para evitar toxicidad de la droga. 238 Fundación Santa Fe de Bogotá F FACTOR 23 DE CRECIMIENTO DE FIBROBLASTOS (FGF23) Código 862749F El FGF23 es un regulador importante de la homeostasis de fosfatos. Actúa en combinación con otros fosfatos que no están bien caracterizados. Es secretado principalmente por el hueso seguido del timo, corazón, cerebro y en menor cantidad por otros tejidos. Niveles elevados de fosfatos estimulan la producción y la secreción del FGF23que es bioactivo en su forma intacta. La importancia del FGF-23 radica en que ha sido identificado como el principal factor regulador del metabolismo del fósforo, el cual es un elemento crítico para el mantenimiento de la integridad del esqueleto, asi como para el desarrollo de múltiples procesos enzimáticos. Además, en la última década se le ha reconocido un papel protagonista en la fisiopatología de la calcificación vascular y de la enfermedad cardiovascular (CV), tanto en la población general como (y especialmente) en los pacientes con enfermedad renal crónica (ERC). Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable por 14 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 90 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunometría enzimática Valores de referencia: ≤ 181 RU/mL (Unidades relativas) En niños normales menores a 3 meses el valor está significativamente elevado >900 RU/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del FGF23 puede ayudar al diagnóstico y manejo de los trastornos del fosfato y del metabolismo óseo en pacientes con función renal normal o anormal. Cuando se eleva significativamente en pacientes con función renal normal se puede sospechar hipofosfatemia con o sin osteomalacia. Manual de Procedimientos 11 239 FACTOR ALFA DE NECROSIS TUMORAL Código 906623 El factor de necrosis tumoral (TNFa) es una hormona glucopeptidica del grupo de las citoquinas liberada por las células del sistema inmunitario (macrófagos, fibroblastos y células T) que interviene en la inflamación y la destrucción articular secundarias a la artritis reumatoide, así como en otras patologías. El factor de necrosis tumoral alfa (TNFa) es miembro de un grupo de otras citoquinas que estimulan la fase aguda de la reacción inflamatoria. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 9 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: 1,2 – 15,3 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles de TNF se elevan por endotoxinas, proteínas del choque tóxico, proteínas de micobacterias, hongos, virus y complemento C5a FACTOR PLAQUETARIO III Código 902015 El factor plaquetario 3 (FP3) es un fosfolípido de la membrana plaquetaria con una gran carga superficial electronegativa de suma utilidad en el anclaje al sitio de la reparación. Es el principal promotor del mecanismo intrínseco de la coagulación de la sangre y su disposición se ve potenciada en presencia de caolín. Si bien el factor plaquetario 3 se ve evaluado indirectamente por el tiempo de coagulación, el tiempo de Howell, y el consumo de protrombina; la actividad procoagulante de las plaquetas o FP3 debería ser evaluada de manera directa mediante pruebas de mayor sensibilidad como las determinaciones coagulométricas, ensayos cromogénicos de actividad protrombinasa o por citometría de flujo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con ACD como anticoagulante para obtener plasma pobre en plaquetas. La muestra es estable 2 meses congelada a -20°C. Metodología: La prueba de valoración del FP3 consiste en la recalcificación de un plasma rico en plaquetas (PRP) activado con caolín, Valores de referencia: 25-30% 240 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Como sus valores están influenciados por la cantidad y calidad de las plaquetas, calidad de la agregación, de la activación, y de la membrana plaquetaria, y como las plaquetas tienen injerencia en todas las etapas de la coagulación, la determinación de FP3 es importante en la evaluación plaquetaria y hemostática y es una prueba cuantitativa de mejor performance que el tiempo de sangría y la retracción del coágulo, con las que está relacionada fisiopatológicamente. FACTOR INTRINSECO, ANTICUERPOS Código 906813 Los autoanticuerpos bloqueadores al factor intrínseco se encuentran en aproximadamente el 75% de pacientes con anemia perniciosa. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: No detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para diferenciar la anemia perniciosa de otras anemias megaloblásticas. Pueden encontrarse resultados falsos positivos cuando hay concentraciones altas de vitamina B12 en el suero. FACTOR V Código 902016 Es un factor de coagulación glicoproteico, lábil, de alto peso molecular, llamado también proacelerina, el cual después de activación proteolítica por la trombina actúa como un cofactor acelerador de la conversión de protrombina a trombina por el factor Xa. El factor V activado, a su vez, puede ser inactivado rápidamente por la acción proteolítica de otra vitamina proteasa K-dependiente que es el complejo trombina-proteína C activada . La deficiencia congénita es muy rara y se transmite de una manera recesiva autosómica. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obte- Manual de Procedimientos 11 241 ner plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 3 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 4 semanas congelada a -20ºC. . Metodología: Coagulometría La concentración del factor V presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor V preparado comercialmente. El grado de corrección se mide realizando un PT. Valores de referencia: 50 - 160% Recién nacidos a término y prematuros sanos pueden tener valores bajos o ligeramente disminuidos (30-35%) y los niveles de adulto se alcanzan a los 21 días del período postnatal. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para diagnosticar deficiencia congénita aunque es rara. En los homocigotos congénitamente deficientes del factor V el nivel es menor del 10%-20% y en los heterocigotos es menor del 50%. La deficiencia congénita puede ocurrir asociada con deficiencia de factor VIII y produce prolongación del PT y el PTT. También sirve para evaluar deficiencias adquiridas asociadas con enfermedad hepática, terapia con anticoagulantes orales, deficiencia de vitamina K, inhibidores de factor V, desordenes mieloproliferativos, coagulación intravascular y fibrinolísis. El factor V es un marcador muy confiable de severidad de enfermedad hepática. FACTOR VII Código 902017 Llamado también factor estable o proconvertina es una proteasa serina vitamina K dependiente sintetizada en el hígado y componente del sistema extrínseco de la coagulación. Su vida media es de 3-6 horas. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. 242 Fundación Santa Fe de Bogotá La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Coagulometría La concentración del factor VII presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor VII preparado comercialmente. El grado de corrección se mide realizando un PT. Valores de referencia: 50 - 150% Recién nacidos a término y prematuros sanos pueden tener valores bajos o ligeramente disminuidos (30-35%) los cuales dentro de las primeras semanas pero no alcanzan los niveles del adulto sino a los 6 meses de vida. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La deficiencia adquirida está asociada a diátesis hemorrágica, enfermedad hepática, deficiencia de vitamina K, amiloidosis sistémica, terapia con warfarina y presencia de inhibidores (raros). El factor VII es el primer factor de coagulación dependiente de vitamina K que disminuye con tratamiento con warfarina y también el primero que se normaliza cuando se suspende la droga. FACTOR VIII (VIII:C) Código 902018 Llamado también factor antihemofílico, es un cofactor que se sintetiza en el hígado y no es vitamina-K dependiente. La deficiencia congénita del factor VIII produce uno de los trastornos más frecuentes de los factores de la coagulación como es la hemofilia A; es una enfermedad congénita ligada al sexo que se produce por una mutación en el cromosoma sexual X dando como resultado que los hombres son los afectados y las mujeres las portadoras. La deficiencia se puede diagnosticar aun en el recién nacido debido a que los niveles del adulto se alcanzan al momento del nacimiento. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Coagulometría Manual de Procedimientos 11 243 La concentración del factor VIII presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor VIII preparado comercialmente. El grado de corrección se mide realizando un PTT. Valores de referencia: 50 - 160% Los niveles en la forma leve son de 5-50%; en la moderada de 1-5% y en la severa menor del 1%. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba sirve para el diagnóstico de hemofilia tipo A, evaluar la severidad y para determinar deficiencia adquirida por inhibidores del factor VIII. También es de utilidad para evaluar respuesta al tratamiento con factor VIII y determinar la calidad de las preparaciones comerciales. La deficiencia congénita también puede ocurrir asociada con deficiencia de factor V. La enfermedad hepática generalmente produce un aumento de la actividad del factor VIII. Las deficiencias adquiridas de factor VIII se asocian con desordenes mielo o linfoproliferativos, inhibidores del factor VIII (autoanticuerpos, condiciones postparto etc.), coagulación intravascular y fibrinolísis. Los niveles de factor VIII se elevan en estados inflamatorios, embarazo, terapia estrogénica y síndrome de stress. En los pacientes con enfermedad de vonWillebrand los niveles de factor VIII se elevan en exceso con relación al factor VIII administrado. FACTOR IX Código 902014 Es una proteasa serina, llamada también factor Christmas, sintetizada en el hígado y vitamina K-dependiente. La deficiencia congénita de este factor produce la hemofilia B que es un trastorno ligado al sexo unido al cromosoma X y cuyas manifestaciones clínicas son indistinguibles de la hemofilia B. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minu- 244 Fundación Santa Fe de Bogotá tos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 2 meses congelada. Metodología: Coagulometría La concentración del factor IX presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor IX preparado comercialmente. El grado de corrección se mide realizando un PTT. Valores de referencia: 50 - 160% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta prueba sirve para el diagnóstico de la hemofilia tipo B. Los pacientes que tienen menos del 1% de actividad del factor tienen episodios espontáneos de hemorragias; con niveles de 1% - 4% rara vez hay hemorragias espontáneas pero pueden presentar artritis por hemorragias crónicas; con niveles entre 5% - 30% no se presentan hemorragias espontáneas y pueden pasar muchos años sin sangrado. FACTOR X Código 902020 Es una glicoproteína coagulante, llamada también factor Stuart-Power, sintetizada en el hígado y vitamina-K dependiente que tiene una vida media de 24-48 horas. Se puede convertir a factor X activado (Xa) tanto por la vía intrínseca como por la extrínseca. El factor Xa en unión con el factor Va más fosfolípido y calcio convierte rápidamente la protrombina a trombina y esta a su vez convierte el fibrinógeno a fibrina. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Coagulometría La concentración del factor X presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor X preparado comercial- Manual de Procedimientos 11 245 mente. El grado de corrección se mide realizando un PT. Valores de referencia: 50 - 160% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Pacientes deficientes en factor X presentan PT y PTT prolongados. La deficiencia congénita de este factor muy rara vez se presenta. La deficiencia adquirida está asociada a enfermedad hepática, deficiencia de vitamina K, amiloidosis sistémica, terapia con warfarina y presencia de inhibidores (raros). Como con la mayoría de los factores los recién nacidos pueden tener niveles disminuidos (<15-20%) pero alcanzan los del adulto después de tres meses de edad. FACTOR XI CUPS 902021 Llamado también el factor antecedente a la tromboplastina plasmática, es una proteasa serina que se produce en el hígado y no es dependiente de vitamina K. La deficiencia se asocia con tendencia leve a hemorragias generalmente por cirugía o traumas y se hereda de una manera recesiva autosómica. Ocasionalmente pacientes con niveles menores de 20% tienen una enfermedad moderamente severa; los pacientes heterocigotos generalmente son asintomáticos. No se ha determinado la prevalencia en la población general pero estudios hechos en Israel han encontrado una frecuencia alta de la deficiencia en judíos Askhenazis. Puede haber deficiencia adquirida por presencia de inhibidores a factor XI especialmente en pacientes con enfermedades autoinmunes. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Coagulometría La concentración del factor XI presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor XI preparado 246 Fundación Santa Fe de Bogotá comercialmente. El grado de corrección se mide realizando un PTT. Valores de referencia: 70-120 % Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar deficiencia congénita o adquirida del factor XI y para investigar PTT prolongado FACTOR XII CUPS 902022 El factor XII o factor de Hageman es una proteína plasmática estable, que no se consume durante el proceso de coagulación. Es una enzima de la clase de las serinas proteasas o serinas endopeptidasa. Es un factor que forma parte de la vìa intrínseca, siendo el primer factor que se activa tras la injuria sanguínea, al entrar en contacto con el colágeno, convirtiéndose en factor XII activado o factor XIIa, este actúa sobre el factor XI y la activará. La deficiencia se trata de un trastorno hereditario que se transmite de manera autosómico recesiva. La enfermedad no suele dar lugar a síntomas asociados con sangrados, su diagnóstico suele encontrarse en casos de exámenes preoperatorios o tras solicitar pruebas de coagulación. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Coagulometría La concentración del factor XII presente en el plasma de un paciente se determina por el grado de corrección obtenida cuando dicho plasma, a diferentes diluciones, se añade a un plasma humano deficiente en factor XII preparado comercialmente. El grado de corrección se mide realizando un PTT. Manual de Procedimientos 11 247 Valores de referencia: 70-150% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar deficiencia congénita o adquirida del factor XII y para investigar PTT prolongado. FACTOR XIII Código 902023 FACTOR XIII CUANTITATIVO Código 862724F Llamado también factor estabilizador de la fibrina esta enzima, es producida en el hígado y tiene una vida media de 10-14 días. La deficiencia congénita es autosómica recesiva y aunque es rara se manifiesta por hemorragias en diferentes sitios y por retardo en el proceso de cicatrización de las heridas. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Técnica cualitativa que mide la solubilidad de un coágulo bien formado en una solución de urea 5M. El coágulo de un plasma normal es insoluble en la solución de urea mientras que el que se forma en un plasma deficiente en factor XIII se disuelve. Técnica cinética cuantitativa. Valores de referencia: Cualitativa: coágulo insoluble en solución de urea Cuantitativa: 70-140 UI/dL 248 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Para la detección de deficiencia congénita o adquirida del factor XIII. FACTOR REUMATOIDEO Código 906911 Los factores reumatoideos (FR) son un grupo heterogéneo de autoanticuerpos dirigidos contra los determinantes antigénicos de la región Fc de las moléculas de IgG. Desempeñan un papel importante en el diagnostico de la artritis reumatoidea, pero también pueden aparecer en otras enfermedades no reumáticas. Los FR se designan como factores reumatoideos IgM, IgG e IgA. El que más comunmente se titula es el FR IgM. Aunque la presencia de este autoanticuerpo es diagnosticamente útil, puede que no esté etiológicamente relacionado con la artritis reumatoidea. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. Las muestras son estables 24 horas a temperatura ambiente, 3 días en refrigeración s y 4 semanas congeladas a -20ºC. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: ≤ 10 UI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El FR IgM se encuentra positivo en 2-10% de adultos aparentemente normales y en aproximadamente el 60-80% de individuos con artritis reumatoidea clásica. Se observan niveles elevados en pacientes con mononucleosis infecciosa, LES y sarcoidiosis. El FR generalmente está ausente en artritis juvenil, espondilitis anquilosante, artritis psoriática, artritis enteropática y síndrome de Reiter. FACTOR Von WILLEBRAND (vWF:Ag) Código 902019 FACTOR Von WILLEBRAND, MULTÍMEROS Código 862611F La enfermedad de von Willebrand (vW), uno de los trastornos hereditarios, más comunes, de la coagulación, se transmite de una manera autosómica dominante y se caracteriza por una disminución en la actividad del factor VIII coagulante (VIII: C) y una disminución paralela en el factor VIII antígeno o factor von Willebrand (VIII/vWF: Ag). Manual de Procedimientos 11 249 El defecto en la formación del coágulo plaquetario es debido a una disminución de la proteína vWF que permite la adherencia plaquetaria a la superficie subendotelial. Esta es una proteína transportadora para el factor VIII y estabiliza su actividad. La enfermedad puede pasar inadvertida debido a que con frecuencia los pacientes son asintomáticos y los fenómenos hemorrágicos solo se manifiestan en presencia de trauma o cirugía mayor. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente en lo posible debe estar en ayunas y no debe estar recibiendo drogas anticoagulantes como heparina o cumarínicos. Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. Es importante que la venopunción sea muy limpia, sin trauma, para evitar activación de la coagulación por la tromboplastina tisular; en el caso de tomar tubos para otras muestras la de factores de coagulación se debe tomar de última. La muestra de sangre se debe centrifugar rápidamente durante 10 minutos y retirar el plasma a un tubo plástico. La muestra para vWF antígeno es estable 1 mes congelada a -20°C. La muestra para vW multímeros es estable 6 meses congelada a -20°C y se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Factor vW antígeno: Inmunoanálisis enzimático ligado a fluorescencia (ELFA) Factor vW multímeros: Electroforesis en gel de agarosa Valores de referencia: Factor vW antígeno: Paciente grupo “0”: 52% - 154%; otros grupos (A, B, AB): 60 - 150% Factor vW multímeros: Patrón normal ver reporte interpretativo. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El vWF:Ag es una prueba útil para diferenciar hemofilia A de la enfermedad de vW. En hemofilia A el vWF:Ag es normal y el factor VIII:C está disminuido. En la mayoría de los casos de la enfermedad de vW el factor vWF está disminuido junto con la disminución del FVIII:C, sin embargo un vWF:Ag normal no descarta el diagnóstico de enfermedad de vW. Además el vWF:Ag es útil para detectar portadores de hemofilia A que tienen una relación FVIII:C/vWF:Ag alrededor de 0,5 mientras que en las mujeres normales la relación es alrededor de 1; una relación menor a 0,7 indica estado de portador. Sin embargo debido a la fluctuación de la molécula del factor VIII se recomienda 250 Fundación Santa Fe de Bogotá más de una determinación y se aconseja que por lo menos se hagan tres determinaciones con muestras diferentes. La disminución del factor en pacientes con historia de sangrado anormal y con un tiempo de sangría prolongado y/o PTT prolongado sugiere el diagnóstico de enfermedad de vW. Se presentan falsos positivos en presencia de factor reumatoideo. Pueden presentarse falsos negativos en otros tipos o variantes de enfermedad de vWF por lo cual es necesario realizar otras pruebas tales como factor VIII, recuento de plaquetas, actividad de cofactor de ristocetina y agregación plaquetaria. La prueba de los multímeros del vWF es útil para identificar las variantes del tipo 2 del factor vW cuando la prueba del antígeno está anormalmente alta o discordante con la prueba de la actividad del factor VIII o de la actividad del factor vW. FENILCICLIDINA (PCP) Código 905308 Fenilciclidina (polvo de ángel) es una droga de abuso que afecta diversas vías neurales e interactúa con receptores colinérgicos, adrenérgicos, serotononinérgicos y otros produciendo múltiples efectos dañinos que llevan a comportamiento bizarro y aun a la muerte por hipertensión severa. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. Por sus implicaciones legales debe recolectarse la orina en el laboratorio previa identificación del paciente. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 2 días en refrigeración y 7 días congelada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cromatografía de capa fina Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La presencia de fenilciclidina en la orina a concentraciones >10 ng/mL es un indicador fuerte de que el paciente ha usado PCP FENITOÍNA Total Código 905213 Manual de Procedimientos 11 251 FENITOÍNA Libre Código 905210 La fenitoína (difenilhidantoína) se utiliza como droga anticonvulsivante cuya farmacocinética es dependiente de la dosis por lo cual el tiempo para alcanzar el estado de equilibrio con administración oral es muy variable (8-50 días). El 95% de la droga se elimina por vía hepática y el resto por vía renal. Circula en un 92% unida a proteínas por lo cual el mejor indicador de una terapia adecuada es medir el nivel de la droga libre pues esta es la forma farmacológicamente activa. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Debe anotarse las drogas que este tomando el paciente y la hora de la última dosis de fenitoína pues el tiempo habitual de muestreo debe ser 2-4 horas después de la última dosis. El metabolismo se disminuye por barbitúricos, cloranfenicol, disulfiram, isoniacida y dicumarol y se estimula por alcohol, barbitúricos a baja concentración y carbamazepina; es desplazada de su unión a proteínas por salicilatos, ácido valproico, fenilbutazona y sulfonilureas. Muestra tomada en el nivel valle (antes de la siguiente dosis) de suero, tomar un tubo tapa roja sin aditivo. La muestra es estable 2 días a temperatura ambiente, 8 días en refrigeración y 5 meses congelada a -20°C. . La prueba de fenitoina libre se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Fenitoína total: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Fenitoína libre: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Rango terapéutico: Fenitoína total Adultos y niños > 3 meses: 10-20 µg/mL Niños < 3 meses: 6-14 µg/mL Fenitoína libre: 1-2 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la determinación de los niveles terapéuticos para evitar toxicidad y asegurar eficacia del tratamiento. Cuando se administra concomitantemente con carbamazepina se aumenta su metabolismo y depuración por lo cual la dosis de la fenitoína se debe aumentar en un 30% para mantener los niveles terapéuticos. Hay niveles aumentados en uremia, enfermedad renal o hepática y disminuidos en hepatitis aguda, mononucleosis infecciosa y embarazo. 252 Fundación Santa Fe de Bogotá FENOBARBITAL Código 905216 Es un depresor del SNC con probada eficacia en el control de convulsiones generalizadas o focales. Se administra generalmente en combinación con la fenitoína y el ácido valproico. El tiempo para alcanzar el estado de equilibrio es de 10-25 días en adultos y 8-15 días en niños. El 80% se elimina por vía hepática y el 20% como droga inalterada por vía renal. La vida media de eliminación en el adulto es de 48-120 horas y en niños de 37-73 horas; circula en un 50% unida a proteínas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Debido a la larga vida media del fenobarbital el tiempo real de muestreo no es importante. Sin embargo cuando se hacen mediciones comparativas es importante que el tiempo del muestreo sea el mismo. Muestra de suero, tomar un tubo tapa roja sin aditivo. La muestra es estable 2 días a temperatura ambiente, 8 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Rango terapéutico: 15 - 40 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la determinación de los niveles terapéuticos para evitar toxicidad y asegurar eficacia del tratamiento. El fenobarbital induce la síntesis de enzimas asociadas con la vía metabólica del citocromo hepático P450 y por esta razón puede interferir con la farmacocinética de otras drogas como la fenitoína. Los pacientes a quienes se les administra crónicamente no sienten sedación a menos que los niveles sanguíneos excedan de 40 µg/mL. FENOTIAZINAS CUANTITATIVA Código 905309 FENOTIAZINAS SEMICUANTITATIVA Código 905310 Cuando se solicita medición de este tipo de drogas generalmente se está buscando adicción o sobredosificación a alguno de estos tres compuestos: tioridazina (Meleril), trifluorperazina (Stelazine, Cuait-D, Modiur) y clorpromazina (Largactil, Sinogan). Manual de Procedimientos 11 253 Frecuentemente no se producen manifestaciones clínicas como sucede con los barbitúricos y hay pacientes que han ingerido hasta 5g diarios sin mayores consecuencias. Condiciones del paciente y/o de la muestra Por las implicaciones legales de la muestra debe ser cogida en presencia de un funcionario del laboratorio diligenciando el formato de cadena de custodia correspondiente. Muestra de orina tomada de micción simple. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 30 días en refrigeración y 12 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado esta disponible 5 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cualitativa: Cromatografía de capa fina Cuantitativa: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Rango terapéutico: Depende de la droga Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Para detectar abuso o sobredosificación de alguna de las fenotiazinas ya que el adicto generalmente presenta concentraciones excesivas (>500 ng/mL) FERRITINA Código 903016 Es una molécula proteica reactante de fase aguda, con un núcleo que contiene 20% de hierro. Se encuentran altas concentraciones en el hígado, sistema retículoendotelial, bazo y médula ósea pues en estos tejidos la ferritina actúa como el mayor depósito de reserva para el hierro para evitar efectos tóxicos por exceso y mantener fácil movilización para la eritropoyesis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total tomada en tubo con anticoagulante heparina. La muestra es estable 7 días refrigerada y 12 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Valores de referencia: Hombres 23,9–336,2 ng/mL Mujeres 11,0–306,8 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La ferritina juega un papel muy importante en determinar tanto deficiencia de hierro como exceso y en el manejo de situaciones y tratamientos que amenazan 254 Fundación Santa Fe de Bogotá el balance del hierro. Es de gran valor para diferenciar la anemia por deficiencia de hierro de la debida a otras causas y en detectar la desaparición de las reservas de hierro antes de que se produzca la anemia. Se encuentra elevada en los casos de hemocromatosis y otras formas de sobrecarga de hierro por transfusiones repetidas o tratamiento con hierro, enfermedad hepática, enfermedades inflamatorias, leucemia, enfermedad de Hodgkin y en tumores malignos y disminuida en anemia ferropriva, embarazo y en pacientes en diálisis permanente FIBRINÓGENO (Factor I) Código 902024/862650F Es una proteína plasmática que por la acción de la trombina se transforma en fibrina (coágulo). Es sintetizada en el hígado y circula como un dímero que consiste de tres pares de cadenas peptídicas (alfa, beta y gama) unidas por múltiples enlaces de disulfuro; la trombina rompe estos enlaces formando monómeros que al polimerizarse forman el coágulo de fibrina. La vida media biológica es de 3-5 días. La afibrinogenemia es una enfermedad congénita autosómica recesiva (homocigota) y la hipofibrinogenemia (heterocigoto) son de aparición muy rara. La deficiencia más común es la adquirida por trastornos de la coagulación. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente y 30 días congelada a -20°C. La presencia de heparina en la muestra y de productos de degradación del fibrinógeno puede producir resultados falsamente disminuidos. Metodología: Técnica cuantitativa cinética de coagulación de Clauss. Valores de referencia: 200 - 400 mg/dl Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Sirve para determinar deficiencias congénitas o adquiridas de fibrinógeno y controlar severidad y tratamiento de la coagulación intravascular diseminada (CID) y de fenómenos de fibrinolisis. Se encuentran niveles elevados en enfermedades inflamatorias agudas y crónicas, síndrome nefrótico, glomerulonefritis crónica, hipernefroma, hepatitis, hepatoma, cirrosis, embarazo, CID compensada y en terapia con estrógenos. Niveles disminuidos en CID, fibrinolisis, enfermedad hepática severa, terapia con L-asparaginasa, agentes fibrinolíticos (estreptokinasa, urokinasa) y activador de plasminógeno tisular. Manual de Procedimientos 11 255 FIBRINOPÉPTIDO A (FPA) Código 853700F El FPA es un péptido amino terminal liberado de la cadena Aa del fibrinógeno cuando este es convertido en fibrina por acción proteolítica de la trombina. Su vida media es de 3-5 minutos. El FPA es un marcador específico de la generación in vivo de trombina y como esta última, provee una medida de la activación endógena de la coagulación. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. . Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: 0,6-1,9 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de estados de hipercoagulabilidad. Es un marcador de trombosis. Su presencia en plasma indica activación del mecanismo de coagulación. Monitoreo de la formación de fibrina en pacientes con infarto agudo de miocardio que han sido heparinizados. FLUCONAZOL (SUERO) Código 802990F El fluconazol es un triazol sintético, agente anti-micótico para administración oral o intravenoso. Está indicado para el tratamiento de infecciones causadas por Candida albicans y para la meningitis por Cryptococcus neoformans. El fluconazol se excreta predominantemente en la orina como la droga principal. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 1 año congelada a -20°. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPCL) Rango terapéutico: ≤ 1 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Controlar el tratamiento con fluconazol para ajustar la dosis y evitar concentraciones asociadas a toxicidad especialmente en pacientes con alteración de la 256 Fundación Santa Fe de Bogotá función renal o aquellos que están en diálisis. FOSFATASA ALCALINA (FAL) Código 903833 FOSFATASA ALCALINA ÓSEA Código 903834 FOSFATASA ALCALINA ISOENZIMAS Código 903834F La actividad de la FAL del suero es realmente una mezcla de isoformas de las isoenzimas de hígado, hueso, riñón e intestino.Su concentración varía con la edad y con el embarazo. Se eleva rápidamente durante las primeras semanas de vida hasta alcanzar valores 5-6 veces el normal al cabo de un mes. Luego disminuye progresivamente quedando ligeramente elevada hasta terminarse la etapa de crecimiento para disminuir en el adulto (16-20 años) y luego vuelve a elevarse ligeramente en personas de mayor edad (> 50 años). Durante el transcurso del embarazo los niveles se elevan hasta dos veces lo normal y hasta tres veces durante el trabajo de parto y vuelven al nivel normal en tres a cuatro semanas. La FAL ósea es un indicador de actividad osteoblástica y su determinación tiene utilidad en: 1) Manejo de osteoporosis postmenopáusica y enfermedad de Paget; 2) Monitoreo en mujeres postmenopáusicas en terapia hormonal o con bifosfonato; 3) Predicción de la respuesta esquelética a terapia hormonal. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulantes heparina de litio, amoníaco o sodio para obtener plasma. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 2 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. La muestra de suero para la determinación de las isoenzimas es estable 14 días congelada a -20°C. La muestra de suero para la FAL ósea es estable 5 días en refrigeración y 1 año congelada y se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Cinético enzimático para FAL Isoenzimas por electroforesis Inmunoanálisis enzimático para FAL ósea Valores de referencia: 32 - 91 U/L Manual de Procedimientos Isoenzimas: 11 257 Ver reporte Fosfatasa alcalina ósea específica Hombres 3,7 – 20,9 µg/L Mujeres Pre Menopausicas 2,9 – 14,5 µg/L Post Menopausicas 3,8 – 22,6 µg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La FAL se eleva en colestásis intra o extrahepática (hepatitis, cirrosis biliar primaria, drogas hepatotóxicas, coledocolitiasis, carcinoma de la cabeza del páncreas, carcinoma hepático), en enfermedades óseas como osteitis deformante, raquitismo, osteomalacia, fracturas en consolidación, tumores osteoblásticos tanto primarios como secundarios y en hiperparatiroidismo primario o secundario. También puede elevarse en insuficiencia cardíaca congestiva, mononucleosis infecciosa, metástasis hepáticas, infecciones por citomegalovirus, embarazo, sarcoidiosis, tumores malignos ginecológicos, amiloidosis, colitis ulcerativa, perforación del intestino, infarto miocárdico y pulmonar y en septicemias. A veces es difícil determinar el origen de la elevación de la FAL entre fracción ósea o hepática. Hay dos maneras de enfrentar esta situación: 1) Determinar las isoenzimas especialmente la FAL ósea y 2) Cuantificar otras enzimas hepáticas que no se elevan en procesos óseos como la y-glutamiltransferasa, 5 nucleotidasa o leucinoaminopeptidasa. Esta última escogencia es la que más comúnmente se usa por ser de menor costo que la determinación de la fosfatasa alcalina ósea. Hay valores disminuidos en desnutrición, hipofosfatasia, hipotiroidismo y anemia perniciosa. FOSFATIDIL GLICEROL IgM Código 862625F FOSFATIDIL GLICEROL IgG Código 862624F El fosfatidil glicerol es un fosfolípido que está presente en cantidades relativamente grandes en las membranas mitocondriales y es un precursor de la cardiolipina. La presencia de este fosfolípido en el líquido amniótico indica el final de la madurez pulmonar. Los anticuerpos se encuentran en el síndrome anti-fosfolípido Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) 258 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: IgG/IgM < 10 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es de utilidad en el estudio de LES, artritis reumatoidea, neoplasias, trombosis venosa profunda, trombosis vascular en retina o cerebro, exposición a medicamentos (clopromacina, fenotiacinas, procainamida y antibióticos) y secundario a infecciones virales, bacterianas y micóticas FOSFOLÍPIDOS (CARDIOLIPINA), ANTICUERPOS IgG Código 906422 FOSFOLÍPIDOS (CARDIOLIPINA), ANTICUERPOS IgM Código 906423 Los anticuerpos antifosfolípidos IgG/IgM/IgA son autoanticuerpos que reaccionan con la mayoría de fosfolípidos aniónicos incluyendo la cardiolipina. Estos prolongan las pruebas de coagulación in vitro dependientes de fosfolípidos e históricamente se han conocido como anticoagulante lúpico. Paradójicamente los pacientes con estos anticuerpos no presentan hemorragias y antes por el contrario tienen fenómenos de trombosis. Frecuentemente se encuentran en pacientes con lupus eritematoso sistémico y en otros trastornos autoinmunes así como en algunos individuos sin enfermedad subyacente. El término síndrome fosfolípido se ha introducido para describir a pacientes que presentan trombosis venosa o arterial, trombocitopenia y abortos recurrentes, además de positividad permanente a alguno de los tipos de anticuerpos antifosfolípidos. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: ELISA Valores de referencia: Negativo Índice menor de 0.8 Indeterminado 0.8 - 1.2 Positivo Índice mayor de 1.2 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluación de pacientes con trombosis y/o abortos recurrentes. Como prueba suplementaria cuando se encuentra positividad para anticoagulan- Manual de Procedimientos 11 259 te circulante. Se puede encontrar prueba positiva en enfermedades infecciosas agudas, sífilis y en el síndrome de inmunodeficiencia por virus VIH (SIDA). La presencia de estos anticuerpos está asociada con una alta prevalencia de anormalidades valvulares en pacientes caucásicos, con livido reticularis, síndrome de Sneddon, hemorragia adrenal y enfermedad de Addison, polimialgia reumática y arteritis de células gigantes. Hay correlación del 70% entre el anticoagulante circulante y ésta prueba por lo cual es posible encontrar anticoagulante circulante positivo con anticardiolipina negativo y viceversa. FÓSFORO INORGÁNICO Código 903835/903836/903836-2 FÓSFORO INORGÁNICO ORINA 24 HORAS Código 903836 FÓSFORO INORGÁNICO ORINA MICCIÓN SIMPLE Código 903836-2 El fósforo es uno de los elementos más abundantes en el organismo; aproximadamente el 85% de los 500-600 g de fósforo inorgánico del adulto se encuentran en el hueso en forma de hidroxiapatita; el resto está combinado con lípidos, proteínas, carbohidratos, fosfolípidos, ácidos nucleicos, nucleótidos, membranas y citoplasmas celulares. La mayoría del fósforo absorbido por el intestino se excreta por la orina en cantidad aproximada de 7,0 g por día; el 80-90% es reabsorbido por lo túbulos renales, mecanismo que es controlado por la hormona paratiroidea (PTH). Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayuno de por lo menos 4 horas e informar las drogas que esté tomando porque hay hipofosfatemia en tratamiento con agentes tales como manitol, tiazidas, acetazolamida, corticosteroides, xantinas,glucosa IV, hidróxido de aluminio, betadrenérgicos, insulina y mitramicina e hiperfosfatemia por administración de meticilina, tetraciclina, antiácidos, enemas de fosfato, laxantes Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulantes como heparina de litio o sodio . El suero debe separarse del coágulo lo más rápidamente posible. No se pueden usar muestras hemolizadas. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 365 días congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple o recolectada durante 24 horas, ésta última debe recogerse en frasco con 10 mL. de HCl 6N como acidificante. La muestra es 260 Fundación Santa Fe de Bogotá estable 7 días refrigerada y/o congelada. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Suero: 2,5 - 4,6 mg/dL Orina: 0,4 - 1,3 g/día Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se presenta hipofosfatemia en: hiperparatiroidismo, nefrosis tubular aguda (fase diurética), defectos tubulares renales, malabsorción, diarrea, succión nasogástrica, alcalosis respiratoria severa, hipomagnesemia, hipocalemia, cetoacidosis diabética, EPOC, asma, alcoholismo, quemaduras, trauma, sepsis por Gram(-). Hay hipofosfatemia en tratamiento con agentes tales como manitol, tiazidas, acetazolamida, corticosteroides, xantinas,glucosa IV, hidróxido de aluminio, betadrenérgicos, insulina y mitramicina e hiperfosfatemia por administración de meticilina, tetraciclina, antiácidos, enemas de fosfato, laxantes Hay hiperfosfatemia en: insuficiencia renal, hipoparatiroidismo, acromegalia, administración de sales de fosfatos, catabolismo aumentado, infecciones, daño muscular, enfermedades mieloproliferativas, administración de vitamina D y sus metabolitos, hemólisis, tumores malignos óseos, inmovilización prolongada, rabdomiolisis, sarcoidiosis, enfermedad de Cushing y transfusiones. Hay hiperfosfaturia en: PTH elevada, defectos tubulares (síndrome de Fanconi), y en la fase diurética de la necrosis tubular aguda. FRAGILIDAD OSMÓTICA DE LOS ERITROCITOS Código 902107 La esferocitosis hereditaria se transmite de una manera autosómica dominante. Los glóbulos rojos son redondos y generalmente más pequeños de lo normal y la vida media es más corta. La enfermedad se manifiesta principalmente en niños pero puede ocurrir a cualquier edad y la triada de síntomas es anemia, ictericia y esplenomegalia Los esferocitos son células osmóticamente frágiles que se rompen más fácil, en soluciones hipotónicas, que los glóbulos rojos normocíticos; esto es debido a que tienen una relación disminuida de superficie a volumen y se lisan a osmolaridades más altas. Los eritrocitos que tienen una relación superficie/volumen más grande (codocitos o eritrocitos hipocrómicos) son más resistentes a la lisis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 4 días en refrigeración . La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Manual de Procedimientos 11 261 Metodología: Una muestra de los eritrocitos del paciente se mezcla con soluciones de diferentes concentraciones de NaCl y se mide el porcentaje de hemólisis en cada uno de los tubos. Se puede realizar también con incubación de las mezclas a 37ºC por 24 horas pero los resultados varían porque la incubación aumenta la hemólisis del esferocito. Valores de referencia: Muestra no incubada NaCl (g/dL) Hombres Mujeres % hemólisis % hemólisis 0,50 0,5 - 24,7 0,0 - 23,1 0,60 18 - 55,2 2,2 - 59,3 0,65 4 - 24,8 0,5 - 28,9 0,75 0,5 - 8,5 0,1 - 9,3 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en la evaluación de las anemias hemolíticas especialmente la esferocitosis hereditaria. Aunque no es frecuente hay otras entidades hemolíticas que pueden dar prueba positiva tales como anemia hemolítica congénita no esferocitica, anemia por deficiencia de G-6-PD o deficiencia de piruvato-quinasa. FRUCTOSAMINA Código 903425 La fructosamina sérica ha demostrado ser más sensible que la hemoglobina glicosilada para detectar fallas en el control diabético por suspensión de los medicamentos hipoglicémicos orales. La prueba de fructosamina puede hacerse cada 2-3 semanas para monitorear cambios a corto plazo en el control diabético. Además, la determinación de fructosamina en forma puntual aleatoria provee una valoración confiable y sencilla de la homeostasis de la glucosa. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría Valores de referencia: 190-270 µmol/L 262 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para controlar el grado de la glicemia sobre un corto período de tiempo (1-3 semanas). Una concentración de fructosamina mayor al rango normal indica una hiperglicemia prolongada de 1-3 semanas o mayor. Entre más alto sea el valor de la fructosamina más pobre es el control de la glicemia. Los cambios se presentan más temprano que los de la hemoglobina glicosilada A1c y los niveles disminuyen también más rápidamente cuando el paciente controla mejor la glicemia. Los pacientes que tienen niveles bajos de albúmina pueden tener niveles bajos de fructosamina. Manual de Procedimientos 11 263 G GAD65 (DECARBOXILASA DEL ÁCIDO GLUTÁMICO), ANTICUERPOS Código 835193F La GAD65 es una enzima neuronal involucrada en la síntesis del neurotransmisor ácido gama-aminobutirico. Los anticuerpos dirigidos contra GAD65 se encuentran en una variedad de desordenes neurológicos como el síndrome del hombre rígido (Moersch-Woltman), cerebelitis autoinmune, encefalitis del tallo cerebral, trastornos convulsivos, neuromielitis óptica y otras mielopatias, miastenia gravis, síndrome de Lambert-Eaton y en la disautonomía. El anticuerpo GAD65 es el más importante anticuerpo a islotes pancreáticos y un marcador serológico importante de predisposición a diabetes mellitus tipo1 y a otras enfermedades autoinmunes. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: < 1,5 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del anticuerpo GAD65 es útil para diagnosticar la diabetes insulino dependiente (DMID), evaluar el riesgo de padecerla, predecir el comienzo y el riesgo de desarrollar los trastornos endocrinos relacionados como la tiroiditis. GALACTOCEREBROSIDASA EN LEUCOCITOS Código 862757F La enfermedad de Krabbe o leucodistrofia de células globoides es un trastorno autosómico recesivo producido por la deficiencia de la enzima galactocerebrosidasa. Esta deficiencia lleva a la acumulación de galactosilceramida lo que produce una severa desmielinización cerebral. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con ACD como anticoagulante para obtener leucocitos. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioisotópica 264 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: ≥ 1,20 nmol/h/mg proteína Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La reducción o ausencia de galactocerebrosidasa en leucocitos o fibroblastos puede indicar el diagnóstico de enfermedad de Krabbe GALACTOQUINASA Código 862723F La deficiencia de galactoquinasa es la segunda forma más común de galactosemia y afecta aproximadamente a 1/250.000 nacidos vivos con la mayor frecuencia en la población Romaní. La principal manifestación clínica es cataratas bilaterales juveniles. Esta forma de galactosemia tiene una presentación más leve que la de la galactosemia clásica. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con heparina de sodio como anticoagulante para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 48 horas refrigerada. No se puede congelar. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Enzimática radioisotópica Valores de referencia: <2 años: 20,1-79,8 mU/g de hemoglobina ≥ 2 años: 12,1-39,7 mU/g de hemoglobina Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de deficiencia de la enzima galactoquinasa GALACTOSA-1-FOSFATO URIDIL TRANSFERASA (GALT) Código 908205 La galactosemia es un trastorno autosómico recesivo que resulta de la deficiencia de una de tres enzimas que catalizan la conversión de galactosa a glucosa: galactosa-1-fosfato uridiltransferasa (GALT), galactoquinasa (GALK) y la uridin difosfato galatosa-4-epimerasa. La deficiencia más común es la de la GALT por lo que se refiere a menudo como la galactosemia clásica. La galactosa-1-fosfato se acumula en los glóbulos rojos de pacientes con galactosemia. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable por 14 días a temperatura ambiente y 28 días en refrigeración y no se puede congelar. La prueba se procesa en laboratorio de Manual de Procedimientos 11 265 referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Ultravioleta cinética Valores de referencia: ≥18,5 U/g de hemoglobina Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de galactosemia por deficiencia de la enzima GALT GAMA-GLUTAMILTRANSFERASA (GGT) Código 903838 Es una enzima microsomal que se encuentra principalmente en el hígado, páncreas y riñón y que cataliza la transferencia del ácido glutámico de un péptido a otro o a un aminoácido haciendo siempre el enlace en el grupo gama-carboxil. Juega un papel muy importante en el metabolismo del glutatión, en la reabsorción de aminoácidos del filtrado glomerular y del lumen intestinal. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. Metodología: Cinética enzimática Valores de referencia: Adultos: 7 – 50 U/L Hombres: 5 a 10 años: 6 – 16 U/L 10 a 19 años: 7 – 26 U/L 5 a 10 años: 6 – 19 U/L 10 a 19 años: 8 – 23 U/L Mujeres: Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La GGT está indicada para evaluar la enfermedad hepática colestásica y la lesión hepática producida por abuso de drogas y alcohol. Tiende a elevarse junto con la fosfatasa alcalina (FA) en enfermedades pancreáticas y hepáticas pero no en las óseas. Es muy sensible al uso de alcohol y drogas y se normaliza cuando se hace una detoxificación hepática. Se eleva más frecuentemente que los otros “marcadores de colestásis” como son FA, leucinoamipeptidasa y 5-nucleotidasa. Niveles elevados se encuentran en ictericia obstructiva, colestásis intrahepática, cirrosis, mononucleosis infecciosa, abuso de alcohol y drogas y tratamiento con 266 Fundación Santa Fe de Bogotá quimioterapia. GAMOPATÍAS MONOCLONALES (MGUS) Código 862627F Las proteínas monoclonales son marcadores de desordenes de proliferación celular y pueden estar presentes en un amplio espectro de enfermedades que incluyen tumores malignos de células plasmáticas o de linfocitos B (mieloma múltiple, macroglobulinemia, plasmocitoma y linfoma de linfocitos B), trastornos de la estructura de las proteínas monoclonales (amiloidosis primaria, enfermedad de depósito de cadenas livianas, crioglobulinemia) y condiciones aparentemente benignas o premalignas (gamopatía monoclonal de origen indeterminado MGUS). Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante para obtener suero. La muestra es estable 4 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: Proteínas monoclo- Kappa/Lambda total nales: Kappa: 1,38-3,75 g/L Lambda: 0,93-2,42 g/L Kappa/Lambda Ratio 1,17-2,93 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de diversas concentraciones de los diferentes tipos de cadenas livianas resulta útil en el diagnóstico de afecciones tales como mieloma múltiple, neoplasmas linfocitarios, macroglobulinemia de Waldenstron y enfermedades como artritis reumatoidea y LES. GANGLIÓSIDOS GD1B ANTICUERPOS Código 862613F GANGLIÓSIDOS GM1 ANTICUERPOS IgG/IgM Código 862614F Los gangliósidos son glicoesfingolipidos que contienen residuos de ácido siálico y son abundantes en el tejido neural. Manual de Procedimientos 11 267 Las neuropatías periféricas son un grupo de desordenes que resultan de lesiones en los nervios periféricos debidas a varias causas entre las que están deficiencias en vitaminas, anormalidades metabólicas, infecciones, tumores malignos y enfermedades autoinmunes. Las neuropatías periféricas debidas a autoinmunidad están asociadas con la presencia de auto-anticuerpos circulantes que se unen a gangliósidos específicos. El anticuerpo a gangliósido GM1 IgG está asociado con el síndrome de GuillainBarre particularmente la variante axonal motora aguda y el anticuerpo IgM está asociado con la neuropatía motora multifocal crónica. El anticuerpo a gangliósido GD1b IgM está asociado con la ataxia sensorial crónica que con frecuencia se asocia a compromiso bulbar. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y los resultados están disponibles 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: ELISA cuantitativa Valores de referencia: GM1 IgG asialo: ≤ 1:100 GM1 IgM asialo: ≤ 1:1.600 GD1b IgG disialo: ≤ 1:100 GD1b IgM disialo: ≤ 1:800 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De ayuda en el diagnóstico de enfermedades neurológicas del tipo de enfermedad de neurona motora y neuropatías motoras. GASTRINA Código 906624 La gastrina es la principal hormona polipéptidica gastrointestinal que sirve para estimular la secreción del ácido gástrico y es secretada por las células G de la mucosa antral y por las del duodeno proximal. Existe en tres formas moleculares, G17, G34 y G14 llamadas así por el número individual de aminoácidos que contienen. 268 Fundación Santa Fe de Bogotá La hormona estimula las células parietales del fondo para la producción del ácido gástrico. También hay estimulación de pepsinógenos, factor intrínseco, secretina, HCO3 pancreático, enzimas, bilis hepática y de la motilidad gástrica. Los niveles de gastrina se aumentan con la ingestión de alimentos (proteínas, aminoácidos) y con la edad. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas desde la noche anterior y debe informar que drogas está tomando porque hay aumento fisiológico por drogas como carbonato de calcio, omeprazol, insulina, alimentos especialmente proteicos e ingestión de café. Muestra de suero, tomar 2 tubos tapa roja sin aditivo con ayuno estricto. La muestra es estable 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 6 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: 13-115 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba de gastrina es útil en la identificación de los gastrinomas (síndrome Zollinger-Ellison) y otras causas de hipergastrinemia. Niveles de gastrina mayores de 500 pg/mL indican generalmente síndrome Z-E pero hay un 40% de pacientes con el síndrome que pueden tener valores entre 100-500 pg/mL y requieren pruebas de estimulación con secretina o calcio para confirmar el diagnóstico. También hay elevación en otras condiciones tales como obstrucción pilórica, estado post-vagotomía, síndrome de retención antral, anemia perniciosa, gastritis atrófica sin acidez, en algunos casos de úlcera péptica y después de la administración de drogas que inhiben la producción de ácido gástrico. En recién nacidos y en niños menores de dos años los valores normales son más elevados. GEN 3 PARA CÁNCER DE PROSTATA (PCA3) Código 862719F El PCA3 (prostate carcinoma gene 3, llamado también DD3), es un gen que se encuentra sobre expresado sólo en las células cancerígenas prostáticas; su expresión en estas células es 100 veces superior que en las células prostáticas normales. Manual de Procedimientos 11 269 Hasta este momento, nunca se ha detectado expresión del PCA3 en otro tejido. La realización del análisis del PCA3 mediante técnicas de biología molecular en muestras de orina, ha mostrado elevados niveles de especificidad para el cáncer de la próstata. De tal manera, la relación entre ambos ARN mensajeros ó el puntaje PCA3 (PCA3-mRNA / PSA-mRNA) refleja la cantidad de células cancerosas presentes. En la prueba PCA3 se determina el ARN mensajero del gen del PCA3 en orina (PCA3-mRNA). Dado que la cantidad de células presentes en las orinas varía mucho, se expresa el resultado del PCA3-mRNA (altamente específico para Ca de próstata) en relación con el ARN mensajero del Gen del PAS (PSA-mRNA). Como la expresión del gen del PSA es igual en células cancerosas que en las células prostáticas benignas (diferente de lo que se podría deducir de las características del PSA sérico) el PSA-mRNA da una medida de la cantidad de células prostáticas presentes en las orina. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina de micción simple que debe obtenerse después de masaje prostático realizado por el médico tratante. La muestra es estable 2 semanas refrigerada y 12 meses congelada a -20ºC. Metodología: Biología molecular Valor de referencia: Puntaje PCA3: ≤ 35 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El punto corte de 35 para el puntaje de PCA3 tiene una mejor precisión diagnostica, con una sensibilidad de (50%) y especificidad de (77%). Los hombres con un puntaje de PCA3 ≥ 35 tienen un incremento del riesgo 2 veces mayor de tener una biopsia positiva, en relación con los hombres que tienen un puntaje de PCA3 < 35. El gen PCA3 se expresa fuertemente en el 95% de las muestras obtenidas de pacientes con cáncer primario de próstata. GEN MEN 1 Código 862769F Los síndromes de neoplasias endocrinas múltiples (MEN) recibieron este nombre porque predisponen a las personas a padecer tumores endocrinos. El sistema endocrino consta de glándulas que secretan hormonas al torrente circulatorio que controlan numerosos procesos del organismo. El sistema endocrino contribuye a la regulación del estado de ánimo, el crecimiento y desarrollo, el metabolismo, así como la función sexual y los procesos reproductivos. 270 Fundación Santa Fe de Bogotá Las glándulas principales del sistema endocrino que resultan afectadas por los síndromes MEN son hipófisis, tiroides, paratiroides, suprarrenales y páncreas. En la actualidad, hay dos síndromes MEN diferentes, MEN1 y MEN2. En algunos aspectos, los dos síndromes son similares, pero hay diferencias importantes. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para utilizar sangre total. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente y/o refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: PCR Valores de referencia: No detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El síndrome de neoplasias endocrinas múltiples de tipo 1 (MEN1) se caracteriza por el desarrollo de tumores en las glándulas paratiroides, la hipófisis y el páncreas. Casi el 100% de los pacientes con MEN1 presentarán tumores paratiroideos, el 30-75% tumores pancreáticos y entre el 10- 60% un tumor hipofisario. El MEN1 se diagnostica cuando hay presentes dos de estos tres tumores. También se diagnostica cuando una persona manifiesta uno de los tumores principales y tiene un pariente de primer grado con dos de los tres tumores endocrinos GENOTIPO VIRUS HEPATITIS C (VHC) Código 862560F El VHC se clasifica en 6 principales genotipos del 1-6 por sus secuencias de nucleótidos en ciertas regiones del genoma. El genotipo de hepatitis C es un indicador de la respuesta al tratamiento de la hepatitis con interferón alfa-2b (los virus que no son tipo-1 responden mejor) y a la terapia combinada con ribavirina. Todos los tipos responden pero la dosis y la duración de la terapia es dependiente del genotipo. El tipo 1 requiere un tratamiento más extensivo. Las infecciones con genotipos 2 y 3 tienen mejor índice de respuesta terapéutica a la terapia combinada (80-90%) que los genotipos 1 y 4 (40-50%) Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante ACD para obtener plasma. La muestra es estable por 6 horas a temperatura ambiente, 1 semana refrigerada y 90 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. La muestra debe tener una carga viral mínima del VHC de 1.000 UI/mL Metodología: Análisis de sondas en línea (LIPA) Manual de Procedimientos 11 271 Valores de referencia: HCV RNA, Cuantitativo PCR <43 UI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para el control del tratamiento y para evaluar la progresión de la enfermedad. El genotipo VHC predice la respuesta del virus al tratamiento con interferón alfa-2b y a la terapia combinada con ribavirina; todos los tipos de HCV responden pero la dosis y la duración del tratamiento depende del genotipo. GENOTIPO, INHIBIDOR ACTIVADOR DEL PLASMINÓGENO Código 862605F El PAI-1 (inhibidor del activador del plasminógeno-1) es el principal inhibidor del activador tisular del plasminógeno (t-PA) y la uroquinasa (uPA) y por lo tanto de la fibrinólisis. La trombosis venosa profunda y la enfermedad arterial coronaria están asociadas con aumento en los niveles del PAI-1. Esta elevación puede predecir el riesgo de re-infarto en individuos que han sobrevivido un infarto del miocardio especialmente si son jóvenes. Los niveles tienden a ser más altos en personas con el genotipo 4G/4G. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente y 7 días en refrigeración . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromogénica Valores de referencia: 4-43 UI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la evaluación de pacientes con trombosis venosa profunda y en pacientes que han sufrido infarto del miocardio. GENOTIPO TIOPURINA METILTRANSFERASA (TPMT) Código 862567F Las drogas del tipo purinas (azatioprina, 6-mercaptopurina, y 6-tioguanina) se usan para tratar pacientes con leucemia, enfermedad reumática, enfermedad inflamatoria intestinal o trasplante sólido de órganos. 272 Fundación Santa Fe de Bogotá Estas drogas requieren conversión a nucleótidos de tioguanina para ejercer su efecto terapéutico. Sin embargo esta conversión puede ser por metilación u oxidación. La metilación depende de la actividad de la enzima tiopurina metiltransferasa (TPMT) la cual varía entre los individuos pues aproximadamente el 90% tienen una actividad normal, 10% actividad intermedia y 0,3% muy baja o no detectable. Cuando la actividad de la TPMT esta reducida los nucleótidos de tioguanina se acumulan produciendo toxicidad hematopoyética lo que lleva a mielosupresión. Se puede causar reducción en la actividad de la TPMT por polimorfismos en el gen TPMT por lo cual se hace el genotipo el cual se encuentra alterado en varias entidades como enfermedad reumática, leucemia linfoblástica aguda, trasplante renal y enfermedad de Crohn. El genotipo TPMT* 1/TMPT* 1 es consistente con actividad normal de la enzima. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulantes EDTA, heparina de sodio o litio para obtener sangre total. La muestra es estable por 6 días en refrigeración . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Enzimática de punto final/Cromatografía líquida/Espectrometria de masa en tándem Valores de referencia: ≥ 15,0 U/mL GR (normal) 10,1-14,9 U/mL GR (normal bajo) 6,0-10,0 U/mL GR (portador) 0,0-5,9 U/mL GR (deficiencia) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar individuos con baja actividad de TPMT que pueden estar en riesgo de mielosupresión excesiva o toxicidad hematopoyética severa cuando reciben azatioprina (Imuran) o 6-mercaptopurina (Purinetol) GENTAMICINA Código 905405 Es un antibiótico aminoglicósido usado para tratar infecciones severas causadas por bacilos Gram(-) y que requiere control de la dosificación durante el tratamiento por su efecto nefrotóxico y ototóxico. Esta especialmente indicado para Citrobacter freundii, Acinetobacter, Enterobacter, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Providencia stuartii, Pseudomonas aeruginosa, y Serratia. A menudo se usa en combinación con antibióticos betalactámicos. Manual de Procedimientos 11 273 Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no requiere ayuno, solamente debe tomarse antes de administrar su siguiente dosis. Muestra de suero. La muestra se debe tomar en el pico de 0,5 a 1 hora después de finalizar infusión intravenosa de 30 minutos y 1 hora después de dosis IM. También puede tomarse en el valle inmediatamente antes de la dosis siguiente y es importante anotar en la solicitud la hora de aplicación o toma de la droga. Concentraciones altas de ciertas penicilinas con carbenicilina inactivan los aminoglicósidos. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Rango terapéutico: Pico de 5-10 µg/mL Valle < 2 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para controlar los niveles sanguíneos del antibiótico con el fin de determinar eficacia del tratamiento y evitar toxicidad. Niveles pico superiores a 10 µg/mL pueden producir daño ótico y/o renal. La prueba tiene reacción cruzada con otros aminoglicósidos como kanamicina y tobramicina. GIARDIA LAMBLIA, PRUEBA DIRECTA Código 906316 Es una prueba rápida, test inmunocromatográfico para la identificación cualitativa del antígeno en muestra de materia fecal. La intensidad de la coloración es variable y dependiente de la cantidad de antígeno de la muestra. GIARDIA LAMBIA ANTICUERPOS IgG, IgM, IgA Código 862694F/862636F La Giardia lamblia, intestinalis o duodenalis es un protozoo flagelado patógeno perteneciente al orden Diplomonadida que parasita el tracto digestivo de humanos y otros mamíferos, produciendo una patología denominada giardiosis, giardiasis o lambliasis que en la mayoría de los casos no produce sintomatología. Se trasmite por la materia fecal de una persona o animal infectado. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 14 274 Fundación Santa Fe de Bogotá días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba de los anticuerpos se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia (IFA) Antígeno: ELISA Valores de referencia: IgA/IgM < 1:16 IgM < 1:20 Antígeno: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La infección por Giardia lamblia se sugiere por la detección del anticuerpo IgM que indica infección actual o reciente o por un aumento cuádruple de la IgG/IgA entre un suero agudo y uno convaleciente. Títulos positivos de IgG/IgA sin IgM indican infección pasada. La prueba del antígeno tiene una sensibilidad del 96%, especificidad del 97% y valor predictivo positivo de 95%. La prueba de ELISA puede ser negativa en los casos donde solo haya pequeñas cantidades de Giardia lamblia en el duodeno. GLICOPROTEÍNA ASOCIADA A LA MIELINA (MAG), ANTICUERPO IgM Código 862599F La MAG es una glicoproteína específica de las células de Schwann necesaria para producir la mielina que necesitan las células nerviosas en el sistema nervioso periférico La detección de un auto-anticuerpo IgM contra la glicoproteína asociada a la mielina (MAG) sugiere desmielinización activa en una neuropatía periférica. Si la detección del anticuerpo es negativa se puede descartar la neuropatía. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: ELISA Valores de referencia: Título ≤ 1: 1.600 Unidades Manual de Procedimientos 11 275 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El anticuerpo IgM a MAG es útil en detectar anticuerpos asociados con neuropatía periférica autoinmune. La detección del anticuerpo por ELISA es más sensible y específico que el Western-blot y la IFA GLOBULINA DE ENLACE DE TESTOSTERONA (SHBG) Código 844021F Ver Testosterona pag………………….471 GLOBULINA TRANSPORTADORA DE TIROXINA (TBG) Código 904901 La TBG es la proteína de enlace para tiroxina y triyodotironina. Normalmente la glándula tiroides se ajusta a cambios en la concentración de TBG produciendo más o menos hormona para mantener un nivel constante de la hormona libre que es la metabólicamente activa. Niveles elevados de TBG se encuentran elevados en embarazo, predisposición genética, anticonceptivos orales y en terapia con estrógenos. Están disminuidos en terapia androgénica, glucocorticoides o con esteroides anabólicos, estados hipoproteinemicos, enfermedad hepática, síndrome nefrótico y variantes congénitas de TBG. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunocromatografía de membrana. Valores de referencia: Hombres ≥ 18 años 12,7-25,1 µg/mL Mujeres ≥ 18 años 13,5- 30,9 µg/mL Valores pediátricos en 4-6 años µg/mL 7-8 años 14,8-32,9 16,3-30,7 9-10 años 15,8-27,4 11 años 15,5-27,4 12 años 14,8-26,2 276 Fundación Santa Fe de Bogotá 13 años 13,8-25,2 14 años 12,2-25,2 15 años 10,8-23,8 16 años 10,0-23,8 7 años 8,5-23,1 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para establecer la deficiencia o exceso de TBG cuando se encuentran concentraciones anormales de T3 y T4 en presencia de niveles normales de las hormonas libres. GLUCAGÓN Código 904701 El glucagón es un polipéptido producido en el hipotálamo y en las células alfa de los islotes pancreáticos como respuesta a un estado de hipoglicemia lo que lleva a aumento en la concentración de glucosa en sangre. La excesiva secreción de glucagón puede conducir a hiperglicemia o agravar una diabetes preexistente y complicar su tratamiento. En casos raros puede ocurrir en tumores de los islotes del páncreas (glucagonoma), tumores carcinoides, otros tumores neuroendocrinos y en carcinoma hepatocelular Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra debe tomarse en tubo frio y después de la toma colocarse en agua con hielo por 10 minutos y centrifugarse en centrifuga refrigerada. El plasma se debe separar rápidamente y congelarse. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis después de extracción Valores de referencia: ≤ 134 pg/mL Hombres y mujeres adultos: Rangos pediátricos: Sangre de cordón: ≤ 215 pg/mL Recién nacido de ≤ 240 pg/mL 1día: 2 días: ≤ 400 3 días: ≤ 420 4-14 días: ≤148 Los niveles de glucagón están en todas las edades inversamente relacionados Manual de Procedimientos 11 277 con los de la glicemia. Esto particularmente se presenta al momento del nacimiento y unos pocos días después hasta que se empiece con los patrones normales de alimentación en el recién nacido. Esto explica los niveles elevados después del nacimiento que empiezan a disminuir a medida que la descarga del glucagón moviliza los depósitos de glucosa del niño. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico y seguimiento de glucagonomas y otros tumores productores de glucagón y ocasionalmente en el estudio de pacientes diabéticos. GLUCOSA-6-FOSFATO DEHIDROGENASA (G-6-PD) Código 902108 La G-6-P-D es la deficiencia enzimática más común en el mundo y compromete las 2/3 partes de la población mundial. La deficiencia de la G-6-PD en los eritrocitos es un desorden genético unido al sexo cuyo locus está en el cromosoma X y produce anemia hemolítica no esferocítica. En este desorden del metabolismo eritrocitario la deficiencia de la enzima es más notoria en los glóbulos rojos más viejos los cuales sufren lisis como respuesta a ciertas drogas tales como primaquina, quinina, cloranfenicol, acetanilida, fenacetina, vitamina K, sulfonamidas, nitrofuranos, azul de metileno, ácido nalidixico, naftaleno, piridazol, fenilhidrazina, azul de toluidina y trinitrotolueno. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante ACD o EDTA para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 20 días en refrigeración y no se puede congelar. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría cinética Valores de referencia: 75-215 U/g Hb Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los recién nacidos con esta deficiencia tienen ictericia neonatal más pronunciada y prolongada que los que no tienen la deficiencia. Los adultos con esta deficiencia tienen anemia hemolítica inducida por ciertos alimentos, estrés, drogas e infecciones. GLUCOSA Código 903841 278 Fundación Santa Fe de Bogotá GLUCOSA EN ORINA Código 903840/903840-1/2 GLUCOSA PRE Y POST CARGA DE GLUCOSA Código 903842 GLUCOSA PRE Y POST PRANDIAL Código 903843 GLUCOSA, CURVA DE TOLERANCIA Código 903844 La diabetes mellitus (DM) se define como una enfermedad metabólica caracterizada por hiperglicemia crónica que resulta de defectos en la secreción de insulina, en su acción o en ambos. La gran mayoría de los casos de diabetes se incluyen en dos categorías etiopatogénicas que son: DM tipo I y DM tipo 2 que es la más prevalente y la causa es una combinación de resistencia a la acción de la insulina con deficiencia relativa y una respuesta compensatoria inadecuada de la secreción de insulina. Las otras causas de diabetes pueden ser debidas a defectos genéticos, enfermedades del páncreas exocrino (pancreatitis, neoplasias), endocrinopatías, inducida por drogas o químicos, infecciones, síndromes genéticos, formas poco comunes de diabetes mediada por inmunidad y la diabetes gestacional. La diabetes gestacional se define como cualquier grado de intolerancia a la glucosa que comienza o se reconoce durante el embarazo. Seis semanas o más después del parto la paciente debe ser reclasificada en cualquiera de las siguientes categorías: 1) diabetes 2) trastorno de la glucosa en ayunas 3) intolerancia a la glucosa o 4) normoglicémica. En la mayoría de los casos de diabetes gestacional la regulación de la glucosa vuelve a lo normal después del parto. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas o haber hecho la última comida por lo menos 8 horas antes de la prueba. Muestra de suero o con anticoagulantes como heparina de litio, sodio, amonio y oxalato de potasio/ fluoruro de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. Orina obtenida por micción simple o recolectada durante 24 horas y líquido cefalorraquídeo (LCR) obtenido por el médico tratante y enviado al laboratorio rapidamente. Manual de Procedimientos 11 279 Determinar por glucometría el nivel de glicemia antes de dar carga de glucosa oral para la curva de tolerancia. Para la prueba de tolerancia a la glucosa se requiere ayuno de por lo menos 10 horas, tomar la muestra para la glicemia basal y después dar una carga de 75 g de glucosa disueltos en 400 mL de agua y beber el preparado en un tiempo de 5 minutos; posteriormente tomar muestras de sangre a los 30, 60, 90 y 120 minutos. Para la prueba pre y post-carga solo se toma la muestra basal y la muestra 120 minutos (2 horas) después de la ingestión de la carga de glucosa o del alimento. Metodología: Cinética enzimática Valores de referencia: Glicemia en Adultos: 70 – 100 mg/dl ayunas: Hombres: 1 semana a 1 70 – 123 mg/dl año: 1 -18 años: Mujeres: 56 – 145 mg/dl 1 semana – a 55 – 114 mg/dl 1 año: 1 a 18 años: 56 – 144 mg/ dL Glicemia 2 < 140 mg/dL horas post carga: LCR: 40-70 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de glicemia en ayunas y la prueba de tolerancia a una carga de glucosa sirven para establecer el diagnóstico de DM y los trastornos del metabolismo de los carbohidratos. También sirven para controlar el tratamiento en los diabéticos y en pacientes con deshidratación, coma, hipoglicemia, insulinoma, acidosis y cetoacidosis. Cualquiera de los siguiente resultados confirmados con una nueva muestra al día siguiente se pueden considerar como diagnósticos de diabetes: 1) Glucosa en ayunas ≥126 mg/dL después de un ayuno de 8 horas; 2) Glucosa 2 horas post-prandíal o post-carga de 75 gramos ≥ 200 mg/ dL; 3) Glucosa tomada al azar >200 mg/dL más síntomas típicos. Para el diagnóstico de diabetes gestacional se requiere que los niveles a la hora post-carga de 50g sea de 140 mg/dL y que por lo menos dos de los cuatro valores obtenidos durante la prueba con 100g excedan los siguientes valores: 280 Fundación Santa Fe de Bogotá Glicemia Carga 50 g Carga de 100 g Ayuno ----- 105 mg/dL 1 hora post 140 mg/dL 190 mg/dL 2 horas post ------ 165 mg/dL 3 horas post ------ 145 mg/dL GLUCOSA-6- FOSFATO ISOMERASA (G-6-PI) Código 862616F La G-6-PI es una enzima que cataliza la reacción reversible de glucosa-6-fosfato a fructosa-6-fosfato. Se ha reportado que la deficiencia hereditaria de la enzima G-6-PI es la causa de hemólisis crónica en muchos casos. Se trasmite como un gen autosómico recesivo y la enfermedad hemolítica del recién nacido es una manifestación común de la deficiencia. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con citrato como anticoagulante para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 20 días en refrigeración y no se puede congelar. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría cinética Valores de referencia: 39,3-57,7 U/g hemoglobina Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Una prueba de segundo orden para evaluación de pacientes con hemólisis crónica. La deficiencia de G-6-PI produce una anemia moderadamente severa. Los niveles pueden ser un 25% menor que el valor normal. Aumento en la actividad de la enzima se puede ver en los casos donde hay glóbulos rojos jóvenes (reticulocitos) producidos en respuesta a anemia o en el recién nacido. GONADOTROFINA CORIÓNICA (b-hCG) Código 906625 GONADOTROFINA CORIÓNICA (b-hCG) PRUEBA DE EMBARAZO Código 904508 Manual de Procedimientos 11 281 GONADOTROFINA CORIÓNICA (b-hCG) LIBRE Código 906626 La HCG es una glicoproteína compuesta de dos subunidades a y b2 producida, al comienzo del embarazo, por el sinciciotrofoblasto de la placenta y que estimula el cuerpo lúteo para mantener el embarazo durante las primeras semanas, hasta que la placenta pueda asumir esta función; además estimula los testículos fetales para la producción de la testosterona. La subunidad a es idéntica a la de la LH, FSH y TSH y por esta razón la subunidad b es la que le da las características inmunológicas y bioquímicas. En enfermedad trofoblástica se producen, además de las dos subunidades, 5 formas irregulares de la hormona que se reconocen como “nicked HCG”, pérdida del segmento C-terminal de subunidad beta, HCG hiperglicosilada y subunidad beta libre. Aproximadamente un mes después de la concepción los niveles de b-hCG son cercanos a 2.000 mUI/mL, alcanza su pico de 50.000-100.000 mUI/mL en el tercer mes, para a partir de ese momento empezar a declinar. Después del parto los niveles descienden rápidamente y a los dos semanas son de <5 mUI/mL. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total tomada en tubo con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable 12 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Valores de referencia: Hombres < 0,5–2,67 mUI/mL Mujeres no gestantes < 0,5–2,90 mUI/mL Embarazo: 1-2 semanas: 50-500 mUI/mL 2-3 semanas: 100-5.000 3-4 semanas: 500-10.000 4 -5 semanas: 100-50.000 5-6 semanas: 10.000-100.000 6-8 semanas: 15.000-200.000 8-12: semanas10.000-100.000 282 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El principal propósito para medir la b-hCG es diagnosticar y controlar el embarazo, pero su determinación también sirve para detectar embarazo ectópico, enfermedad trofoblástica gestacional (mola hidatidiforme completa, parcial o invasiva, coriocarcinoma, tumor trofoblástico placentario), tumores testiculares seminomatosos y no-seminomatosos, tumores intracraneales de células germinales y en la evaluación prenatal para determinar riesgo del síndrome de Down. También es producida por algunos teratomas malignos y por varios tumores sólidos no trofoblásticos de estómago, ovario, seno y páncreas. Los niveles séricos en enfermedad trofoblástica gestacional son mucho más altos que en el embarazo normal, probablemente por la mayor cantidad de sincicio productor de hCG y se correlacionan con la masa de tejido tumoral y el nivel debe disminuir con tratamiento médico-quirúrgico efectivo. Concentraciones altas de la hormona en suero indican una mayor masa tumoral y por lo tanto un peor pronóstico. En embarazos ectópicos y en aquellos que terminan en aborto los niveles circulantes son más bajos mientras que en embarazos gemelares tienden a ser más altos. GRASAS NEUTRAS EN HECES [SUDAN III] Código 907006 El aumento en la cantidad de grasas en la materia fecal está relacionado con el síndrome de mala absorción. Si se encuentra una prueba positiva de esteatorrea, deben realizarse exámenes adicionales para establecer su causa. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de materia fecal fresca que es estable 72 horas a temperatura ambiente. Metodología: Coloración de Sudán Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Tiene utilidad para detectar síndrome de malabsorción. Manual de Procedimientos 11 283 H HAEMOPHILUS INFLUENZAE B, ANTICUERPOS Código 862768F La detección del anticuerpo IgG se determina para evaluar la eficacia de la vacuna contra Haemophilus influenza tipo B. Un aumento significativo (> 0,15 mg/L) entre la muestra de suero pre y post-vacunación se considera vacunación efectiva. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y 14 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Pre-Post-vacunación >15,0 mg/dL Post/Pre-vacunación Relación >4,0 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluar la efectividad de la vacunación para Haemophilus influenza tipo B. HAPTOGLOBINA Código 903021 La haptoglobina es una proteína de fase aguda que capta de una manera irreversible la oxihemoglobina libre y que se eleva en procesos inflamatorios, necrosis tisular y enfermedades neoplásicas. En los procesos hemolíticos el complejo haptoglobina-hemoglobina es removido en minutos por el sistema reticuloendoltelial por lo cual la haptoglobina previene la pérdida de la hemoglobina por la orina y conserva los depósitos de hierro. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 3 meses refrigerada y 8 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles después de la fecha de envío. Metodología: Inmunoturbidimetría 284 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Adultos: 30 - 200 mg/dL Recién nacidos: 5 - 48 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta proteína está ausente en el momento del nacimiento y comienza a sintetizarse, principalmente en el hígado, durante la primera semana de vida pero sus niveles continuan bajos hasta los 3 meses de edad. Hay niveles disminuidos en procesos hemolíticos intravasculares, eritropoyesis inefectiva (deficiencia de folatos o vitamina B12), disfunción hepática severa y en deficiencia congénita entidad que es muy rara. Hay elevación en procesos inflamatorios, necrosis tisular, tumores, terapia con corticosteroides y obstrucción biliar. HELICOBACTER PYLORI IgG, ANTICUERPOS Código 906023 HELICOBACTER PYLORI IgA, ANTICUERPOS Código 906022 HELICOBACTER PYLORI IgM, ANTICUERPOS Código 906024 HELICOBACTER PYLORI IgG ANTICUERPOS TOTALES Código 906025 HELICOBACTER PYLORI IgG, CUANTITATIVO Código 862764 HELICOBACTER PYLORI IgG CULTIVO Código 901220 HELICOBACTER PYLORI ANTÍGENO EN HECES Código 906022F El Helicobacter pylori es una bacteria Gram-negativa en forma de espiral que está asociada en los humanos con la gastritis crónica tipo B y el adenocarcinoma gástrico. Manual de Procedimientos 11 285 La bacteria se detecta en casi el 100% de pacientes adultos con úlcera duodenal y en aproximadamente el 80% de los que sufren úlcera gástrica o gastritis. Las cepas de H. pylori se clasifican en dos grandes grupos: la tipo I que expresan citotoxinas tanto la vacuolítica (VacA) como la asociada al gen A (CagA) y la tipo II que no expresan ninguna de las dos. La tipo I es la que predomina en pacientes con úlceras y cáncer y tiene el mayor impacto desde el punto de vista clínico. La prueba serológica es un método de tamizaje no invasivo para detectar los anticuerpos al H. pylori y varios estudios han demostrado su utilidad en el diagnóstico y seguimiento del tratamiento. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Muestra de 1 gramo de materia fecal no preservada, almacenada durante 48 horas en refrigeración o congelada después de 48 horas de la recolección. Se debe descontinuar, 2 semanas antes de la prueba, el tratamiento con antimicrobianos, inhibidores de la bomba de protones o bismuto. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 60 días congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos IgG, IgA, IgM: Inmunoanálisis enzimático (EIA) e Inmunoblot prueba confirmatoria Antígeno en heces: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos cualitativo: Negativo Anticuerpos IgG, IgA, IgM Negativo: ≤ 0,89 Indeterminado: 0,89 – 0,99 Positivo: ≥ 0,99 Antígeno: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba debe realizarse en pacientes con síntomas gastrointestinales porque hay un alto porcentaje (40-60%) de individuos colonizados asintomáticos especialmente en grupos de edad mayores a 60 años. Útil en la detección de anticuerpos IgG, IgA, IgM al Helicobacter pylori en suero, plasma y sangre total. 286 Fundación Santa Fe de Bogotá La detección de la bacteria puede hacerse directamente por medio de endoscopia gástrica para tomar biopsia para estudio microscópico; este método a pesar de ser invasivo y más costoso es altamente específico y con un alto valor predictivo positivo; tiene la desventaja de que como la bacteria coloniza la mucosa gástrica en parches hay la posibilidad de que la biopsia se tome de un sitio no colonizado. Los dos métodos no invasivos son la prueba de ureasa en el aliento del tracto respiratorio y la detección serológica de los anticuerpos en los pacientes infectados. Se ha encontrado una alta correlación entre la gastritis histológica y la seropositividad de los anticuerpos. La detección de la bacteria en heces sirve para controlar la erradicación del Helicobacter pylori después del tratamiento. GRUPO SANGUÍNEO (ABO/RH) Código 911019/911020 La determinación del grupo ABO y Rh se debe realizar en todos los receptores de sangre y componentes antes de definir cuál es la unidad que es compatible con el receptor. Los grupos ABO se determinan directamente en pruebas de aglutinación con los antisueros A y B. En la mayoría de los casos los eritrocitos que poseen antígenos A o B, o ambos, se aglutinarán fuertemente con los correspondientes antisueros A o B. Sin embargo, en algunos casos, los eritrocitos con formas débiles de los antígenos A y B (fenotipos Am, Ao, Ax, o Bm) no reaccionan o lo hacen débilmente con anti-A y anti-B. Los niños recién nacidos no tienen aún sus propias aloaglutininas y las que presentan, en el momento de nacer y hasta aproximadamente los 5 meses, son por transferencia pasiva de los anticuerpos maternos. Hay diferente reactividad en muestras Rh (D) positivas con los reactivos anti-D. La mayoría presentan una aglutinación bien clara pero hay un pequeño porcentaje de muestras de pacientes que presentan aglutinación débil y requieren reactivos adicionales para determinar su fenotipo; estos casos se habían denominado como Du pero este término ya no se usa y los eritrocitos que tengan formas débiles de D deben clasificarse como D positivo y llamarse “D débil”. Esta característica es más frecuente en negros que en blancos y es genéticamente transmisible. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente y 10 días en refrigeración y no se puede congelar. Metodología: Técnica manual o automatizada de aglutinación de glóbulos rojos Manual de Procedimientos 11 287 Valores de referencia: No aplica Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar el grupo sanguíneo y el factor Rh de un individuo para definir en caso de una transfusión de sangre o componentes que unidad debe utilizarse. HEMOGLOBINA A2 Código 902110 La hemoglobina A2 es un tipo de hemoglobina, que representa en el adulto el 2,4% y en el feto menos del 0,5% de la hemoglobina total. Está formada por dos cadenas de globinas alfa y dos cadenas de globinas delta, que aumenta en forma importante en la beta-talasemia, al no poder sintetizar globinas beta. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o heparina para obtener sangre total. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente y 10 días en refrigeración y no se puede congelar. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado esta disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: ≤ 1 mes: <1,0 % 3 meses: <2,3 % 6 meses: <2,5 % 12 meses: <2,7 % >12 meses: 1,8-3,5 % Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico diferencial de beta talasemia y anemias. Valores por encima de 3,5-9% se encuentran en el rasgo de beta talasemia. Niveles disminuidos de Hb-A2 se encuentran en deficiencia de hierro y esto puede dar lugar a Hb-A2 normal en pacientes afectados con beta talasemia HEMOGLOBINA FETAL EN SANGRE MATERNA Código 902111 El paso de la hemoglobina fetal a la circulación materna puede ocurrir durante el embarazo, parto, abortos o trauma pélvico. Si la madre es Rh negativa y el feto es Rh positivo, la cantidad de eritrocitos fetales presente en la circulación materna determina la dosis que debe ser administrada de inmunoglobulina anti-Rh. 288 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total de la madre tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para hacer extendido periférico. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y no se puede congelar. Metodología: Método semicuantitativo, por la coloración de Betke-Kleihauer en extendido de sangre periférica o cuantitativo por citometría de flujo Valores de referencia: Coloración: negativo Citometría de flujo: ≤ 1,5 mL de glóbulos rojos fetales Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar la dosis apropiada de inmunoglobulina anti-Rh que debe inyectarse a la madre Rh negativa con feto Rh positivo para evitar sensibilización y la enfermedad hemolítica del recién nacido en posteriores embarazos. Se constituye hemorragia materno-fetal cuando hay más de 15 mL de sangre fetal en la circulación materna. La cantidad de sangre fetal que ha escapado a la circulación materna se puede calcular de una manera aproximada con la siguiente fórmula: Sangre fetal (mL) = (Nº de células fetales/Nº de células maternas x 100) x 50 Frascos de Inmunoglobulina Rho (D) necesarios = mL de sangre fetal /30 HEMOGLOBINA GLICOSILADA (HbA1c) Código 903427 La hemoglobina, como otras proteínas, se combina gradualmente con glucosa por un proceso llamado glicosilación. Como los eritrocitos son libremente permeables a glucosa, la hemoglobina glicosilada se forma dentro de ellos a una velocidad proporcional al promedio de la concentración de la glucosa sérica que ha habido durante las últimas 4-8 semanas. La reacción es espontánea, pero lo suficientemente lenta como para que solamente una fracción de la hemoglobina se modifique durante los 120 días de vida del eritrocito. Debido a esto la determinación de la hemoglobina A1c ha sido aceptada como indicador de la concentración media diaria de la glicemia en los últimos dos meses. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no requiere ayuno. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre total. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente y 7 días en refrigeración y no se puede congelar. Manual de Procedimientos 11 289 Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Valores de referencia: Normal: 4,0 - 6,00 % HbA1c Diabéticos controlados: 6.00 - 8.00 Diabéticos no controlados: > 8.00 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el control a largo plazo del tratamiento en diabéticos. La correlación entre el % HbA1c y los niveles de glucosa es: HbA1c (%) Glicemia (mg/dL) HbA1c (%) Glicemia (mg/dL) 4 60 5 90 6 120 7 150 8 180 9 210 10 240 11 270 12 300 13 330 Se considera un buen control cuando la HbA1c está entre 4 y 5% y aceptable cuando está entre 6 y 7%. Las anemias hemolíticas y las hemoglobinopatías se caracterizan por una disminución de la vida del eritrocito y en estos casos se pueden presentar resultados bajos o normales de HbA1c aunque los niveles promedios de la glicemia estén elevados. También hay disminución en estados post-hemorragias agudas donde la mayoría de los eritrocitos son jóvenes. Es suficiente hacer los controles cada 3-4 meses a menos que la paciente esté embarazada o al paciente se le haya cambiado el régimen del tratamiento. HEMOGLOBINA PLASMÁTICA LIBRE Código 902113 El plasma normalmente no contiene hemoglobina libre pues toda está dentro de los eritrocitos. Después de un episodio hemolítico como consecuencia de una reacción transfusional o ruptura mecánica de eritrocitos, en la bomba, durante cirugía cardiovascular se presentan cantidades significativas de hemoglobina plasmática. 290 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 1mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica espectrofotométrica Valores de referencia: ≤ 7 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Prueba que detecta la presencia de hemólisis en casos de reacción post-transfusional y en casos de fragmentación de glóbulos rojos durante cirugía cardiovascular. En los recién nacidos (0-13 días) los niveles pueden llegar hasta 40 mg/dL y generalmente se mantienen ligeramente elevados hasta los dos años de edad. HEMOGRAMA COMPLETO Código 902210 El hemograma es una de las pruebas de rutina más solicitadas en la práctica clínica y comprende por lo menos 16 parámetros que dan una información importante para el estudio de las anemias, leucemias, síndromes leuco y mieloproliferativos, trastornos plaquetarios, infecciones y lesiones tumorales. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe informar que drogas está tomando pues se presenta leucocitosis fisiológica en pacientes que están siendo tratados con carbamazepina, colchicina, esteroides, epinefrina, imipramina, fenotiazinas y tetraciclinas. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre total. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y no se puede congelar. El cuadro hemático no puede realizarse en muestras hemolizadas ni parcialmente coaguladas. No es necesario ayuno previo pero debe evitarse que la muestra sea lipémica pues la turbidez interfiere con la prueba de la hemoglobina dando resultados falsamente elevados. Metodología: Los diferentes parámetros hematológicos, incluyendo el recuento diferencial de leucocitos, se determinan en un contador de células electrónico y automatizado. Valores de referencia: Leucocitos : 7,8 +/- 3 x 103 /µL Manual de Procedimientos Eritrocitos 11 291 5,4 +/- 0,7 x 106 /µL (hombres) 4,8 +/- 0,6 x 106 /µL (mujeres) Hemoglobina: 16,0 +/- 2 g/dL (hombres) 14,0 +/- 2 g/dL (mujeres) Hematocrito: 47,0 +/- 5 % (hombres) 42,0 +/- 5 % (mujeres) V.C.M. 87,0 +/- 7 fentolitros (hombres) 90,0 +/- 7 fentolitros ((mujeres) H.C.M. 29,0 +/- 2 pg C.H.C.M. 35,0 +/- 2 g/dL A.D.E. 12 - 15% Plaquetas 150 - 400 x 103 /mm3 V.M.P. 7,5 - 8,5 µ3 Plaquetocrito 0,126 - 0,326 % A.D.P. 12 - 16 % Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Su mayor utilidad está en el diagnóstico diferencial de las anemias en microcíticas, normocíticas y macrocíticas, en la evaluación y caracterización de lesiones proliferativas del sistema hematopoyético y en la evaluación de procesos infecciosos. Hay una serie de interferencias en el conteo electrónico de los diferentes parámetros hematológicos que producen resultados falsos positivos o negativos como son: Falsa elevación de hemoglobina por carboxihemoglobina (>10%), crioproteínas, hemólisis intravascular, heparina, leucocitosis (> de 50.000/µL), hiperbilirrubinemia, lipemia, e hiperproteinemia monoclonal. Falsa leucocitosis por crioproteínas, proteínas monoclonales, agregación eritrocitaria y plaquetaria, eritroblastos y heparina. Falsa leucopenia por leucocitos desintegrados y uremia más inmunosupresores. Falsa eritrocitosis por crioglobulinas, plaquetas gigantes y leucocitosis de más de 50.000 µl. Falsa eritrocitopenia por aglutininas frías, auto aglutinación y microcitosis severa. Falsa elevación del hematocrito por plaquetas gigantes, leucocitosis de más de 50.000 µL e hiperglicemia de más de 600 mg/dL; falsa disminución por aglutininas frías, auto aglutinación y microcitosis. Los histogramas celulares muestran la distribución del tamaño de las poblacio- 292 Fundación Santa Fe de Bogotá nes de leucocitos (linfocitos, mononucleares y polimorfonucleares), eritrocitos y plaquetas. HEMÓLISIS ÁCIDA (PRUEBA DE HAM) Código 902115 PRUEBA DE SUCROSA Código 908307 La hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN) es una anemia hemolítica crónica rara y adquirida debida a un defecto intrínseco de los glóbulos rojos que los hace inusualmente sensibles a complemento. La naturaleza del defecto es desconocida, pero las células de HPN se unen más fácilmente a C3 que los eritrocitos normales, independientemente de que el complemento sea activado por la vía clásica o la alterna. La anemia puede estar asociada a hemosiderinuria, pancitopenia y a veces se presenta con anemia ferropriva, anemia aplástica, leucemia y mielofibrosis; en un 25% de los casos la excreción de hemoglobina urinaria episódica ocurre después del sueño nocturno; un 50% de los casos se presenta entre los 20-40 años y las células HPN también tienen deficiencia de actividad de acetilcolinesterasa. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o citrato de sodio para obtener sangre total. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente y 72 horas refrigerada. Metodología: En la prueba cualitativa de Ham los glóbulos rojos lavados del paciente se mezclan en diluciones seriadas con suero fresco normal a un pH ácido (6,5-7,0), se incuban a 37ºC durante 1 hora y se cuantifica el grado de hemólisis de cada tubo después de la incubación. La prueba de sucrosa es similar a la de Ham y la única diferencia es que el azúcar provee un medio de bajo poder iónico para la unión del complemento a los glóbulos rojos; el grado de hemólisis se mide al cabo de 30 minutos de incubación. Las células que se lisan son únicamente las que tienen el defecto de HPN. Valores de referencia: Prueba de Ham: negativa Prueba de sucrosa: < 5% de hemólisis Manual de Procedimientos 11 293 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba de sucrosa se considera la prueba de tamizaje y la prueba de Ham es la prueba confirmatoria y que hace el diagnóstico definitivo de HPN. Esto quiere decir que si la prueba de sucrosa es negativa no se justifica hacer la prueba de Ham o prueba del suero acidificado. En HPN la prueba de Ham muestra lisis en el 10-50% de los glóbulos rojos; si se presenta lisis con suero inactivado por calor la prueba no debe considerarse positiva para HPN y se debe pensar en esferocitosis o sensibilización de los eritrocitos por anticuerpos. La prueba también es positiva en anemia diseritropoyética congénita tipo II o HEM-PAS pero en esta entidad la lisis no ocurre con el suero del paciente y solamente en un 30% con suero normal. La prueba puede ser falsa positiva en anemias hemolíticas autoinmunes. En la prueba de sucrosa un 5-10% de hemólisis sugiere HPN y más del 10% es prácticamente diagnóstica de la entidad. Se pueden encontrar resultados falsos positivos en anemias megaloblásticas y hemolíticas autoinmunes. En la HPN también se encuentra disminuida la acetilcolinesterasa eritrocitaria. HEMOPARÁSITOS, EXTENDIDO DE GOTA GRUESA Código 902214 HEMOPARÁSITOS, COLORACIÓN Código 902215/902214 La malaria es causada por los protozoarios Plasmodium falciparum, P. vivax, P ovale y P. malariae. En nuestro medio se encuentran el P. falciparum y el P. vivax y de estos dos el que produce la enfermedad clínica más severa es el P. falciparum. La infección se transmite de hombre a hombre por la picadura del mosquito anófeles quien inyecta en el huésped esporozoitos que al sufrir un ciclo asexual invaden los eritrocitos después de pasar por el hígado. La infección también puede transmitirse por transfusión de sangre infectada o por el uso de jeringas y agujas contaminadas que se comparten entre personas drogadictas. La transmisión congénita ocurre muy raramente. El período entre la picadura del mosquito y la aparición del parásito en los glóbulos rojos es de 6-9 días para el P. falciparum y vivax y para la aparición de los síntomas es de 12-14 días. La confirmación por el laboratorio se hace al demostrar los parásitos de la malaria en extendidos de sangre periférica y en muestra de gota gruesa. Dependiendo del ciclo de evolución de la infección pueden haber trofozoitos inmaduros anulares (formas en anillo), esquizontes (formas en división) y gametocitos (formas sexuadas). 294 Fundación Santa Fe de Bogotá En la infección por P. falciparum generalmente se encuentran, en el extendido periférico, formas anulares mientras que en la infección por P. vivax se pueden encontrar diferentes estadios de maduración. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de sangre periférica tomada por punción digital para hacer los extendidos y la gota gruesa; si esto no es posible se puede utilizar sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre total. Metodología: Coloración de extendidos de sangre periférica para detección y recuento del parásito. Valores de referencia: Negativo para hemoparásitos Parasitemia alta: > 1.000/mm3 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico rápido y confiable de infección por Plasmodium y para determinar respuesta al tratamiento teniendo el dato de la parasitemia pre y post-tratamiento. HEPARINA Código La heparina acelera en forma considerable la inactivación del factor Xa de la coagulación y de la trombina mediante la antitrombina III. Por esta razón, los preparados heparínicos no fraccionados y de bajo peso molecular son de gran utilidad terapéutica como anticoagulantes. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente y 1 mes congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Coagulometría Valores de referencia: Menor de 0,4 UI/mL: No está anticoagulado 0,4 – 0,8 UI/mL: Anticoagulación profiláctica 0,8 – 1,2 UI/mL: Anticoagulación terapéutica Manual de Procedimientos 11 295 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar la actividad heparínica y para controlar el tratamiento de anti-coagulación con heparina. HEPATITIS A, ANTICUERPOS IgM/IgG Códigos 906218/906219 El virus de la hepatitis A (VHA) produce una forma esporádica y epidémica de hepatitis aguda la cual es transmitida por vía oral y fecal. Tiene un período de incubación de aproximadamente 4 semanas y la severidad de los síntomas clínicos generalmente es leve o moderada y nunca se vuelve crónica. Los anticuerpos contra el antígeno de la hepatitis A se detectan casi siempre al comienzo de los síntomas, generalmente 15-45 días después del contagio. El anticuerpo que primero aparece es el de tipo IgM el cual disminuye a niveles no detectables 3-6 meses después del proceso infeccioso. Los niveles de IgG se elevan rápidamente una vez que el virus desaparece de la circulación y pueden persistir por muchos años. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada con anticoagulantes como EDTA, heparina, citrato de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 14 días refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Técnica cualitativa de inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgM Anticuerpos IgG No reactivo: ≤ 0,80 Zona gris: 0,80-1,20 Reactivo ≥ 1,20 No reactivo: ≤ 1,00 Reactivo: ≥ 1,00 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba VHA IgG determina exposición previa e inmunidad al virus. En conjunto con la VHA IgM se puede diferenciar entre el estado agudo y convaleciente de la infección. Una prueba positiva para VHA IgG indica infección aguda o exposición previa e inmunidad al virus. Una prueba positiva para VHA IgM indica infección aguda o subclínica reciente. Las dos pruebas positivas indican infección aguda reciente. 296 Fundación Santa Fe de Bogotá La prueba VHA IgG puede dar un falso positivo transitorio en casos de administración reciente de globulina hiperinmune o de transfusiones de sangre y componentes sanguíneos. HEPATITIS B ANTICUERPO A ANTÍGENO CORE (HBc total/ IgM) Código 906221/906220 ANTICUERPO A ANTÍGENO DE SUPERFICIE (Anti-HBs) Código 906223 ANTÍGENO DE SUPERFICIE B (HBsAg) Código 906317 ANTICUERPO A ANTÍGENO E (Anti-HBe) Código 906318 ANTÍGENO e (HBeAg) Código 906218 PRUEBA CONFIRMATORIA Código 838921F CARGA VIRAL, CUALITATIVA/CUANTITATIVA Código 906815/906816 DNA POLIMERASA, ANTICUERPOS Código 906224 GENOTIPIFICACIÓN Código 862556 Manual de Procedimientos 11 297 RESISTENCIA A DROGAS Código 862664 La infección por el virus de la hepatitis B (VHB) produce una amplia variedad de lesiones hepáticas que va desde un estado asintomático de portador hasta una infección aguda auto-limitante, hepatitis aguda fulminante y hepatitis crónica que puede progresar a cirrosis y falla hepática severa. Durante la infección aguda el anticuerpo que más temprano aparece es el anti-core IgM seguido del IgG que puede ser el único marcador serológico que permanezca por años después de la exposición al virus. El anti-HBc total o el anti-HBc IgM pueden ser los únicos marcadores de una infección reciente de hepatitis B detectables después de la desaparición del HBsAg y antes de que aparezca el anti-HBs (período de ventana). El HBeAg se encuentra en la fase temprana de la hepatitis B un poco tiempo después de que se detecte el antígeno de superficie (HBsAg). Indica replicación viral activa y estado infeccioso del paciente. Se correlaciona con: infectividad, el número de partículas Dane, la presencia del antígeno core en el núcleo del hepatocito y presencia de ADN polimerasa viral en el suero. La ADN-polimerasa del VHB presenta en su secuencia de aminoácidos una homología parcial con la transcriptasa inversa de varios retrovirus oncógenos. Está implicada en los mecanismos de transcripción inversa del VHB y de encapsulación del ARN pregenómico. El anti-HBe aparece después del pico de replicación viral en convalecencia temprana a medida que los niveles del HBe disminuyen hasta hacerse no detectables. El HBsAg es el primer marcador serológico que aparece en el suero 6-16 semanas después de la primo-infección por el virus de la hepatitis B. En casos agudos el HBsAg desaparece generalmente 1-2 meses después del comienzo de los síntomas. El anti-HBsAg aparece en el estado de resolución de la infección después de que desaparece el HBsAg. Aparece como respuesta inmune natural o como resultado de administración de la vacuna de la hepatitis B. Condiciones del paciente y/o de la muestra Para los anticuerpos y los antígenos se utiliza muestra de suero o de sangre total con anticoagulantes como citrato de sodio, heparina, EDTA u oxalato de potasio para obtener plasma. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 7 días refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Para la prueba confirmatoria se requiere muestra de suero. La muestra es estable por 7 días en refrigeración . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Para la carga viral se requiere sangre total tomada en tubo con gel separador para obtener suero. El suero debe separarse dentro de las 6 horas de tomada la 298 Fundación Santa Fe de Bogotá muestra, congelarse inmediatamente y la muestra es estable 35 días congelada a -70°C. Para el genotipo se requiere sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 42 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cualitativa de inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) para anticuerpos, antígenos, prueba confirmatoria. ADN-PCR para la determinación de la carga viral y la genotipificación Valores de referencia: HBc Total/IgM, HBsAg, HBe/anti-HBe No reactivo: ≤ 1,00 S/CO Reactivo: ≥ 1,00 S/CO Anti-HBs No reactivo: ≤ 10,00 mUI/mL Reactivo: ≥ 10,00 mUI/mL Prueba confirmatoria para HbsAg: Negativa Carga viral ADN-PCR: Cualitativa: Cuantitativa: Virus no detectable < 0,01 pg/mL Genotipifica- Identificar genotipo de A-H. ción: Identificar mutaciones Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Un resultado positivo para anti-HBc total (IgG+IgM) indica infección aguda o infección en el pasado. Un resultado positivo para anti-HBc IgM indica infección aguda reciente. También puede haber positividad en hepatitis crónica activa en período de exacerbación. Una prueba positiva para HBeAg indica replicación viral activa e infectividad. La seroconversión de HBeAg a anti-HBe generalmente indica pérdida de la infectividad, resolución del proceso infeccioso y buen pronóstico clínico. La ausencia o desaparición del HBeAg o del anti-HBe no descarta la posibilidad del estado infeccioso o de portador de hepatitis crónica activa. El HBsAg es útil para establecer el diagnóstico de infección aguda o crónica cuando se obtiene un resultado positivo. Su presencia está frecuentemente asociada con infectividad especialmente si se asocia con positividad para HBeAg y/o HBV DNA polimerasa. No es de utilidad en el período de ventana inmunológica. El anti-HBsAg está indicado para determinar inmunidad a la infección por el vi- Manual de Procedimientos 11 299 rus de la hepatitis B. Un resultado positivo indica, generalmente, recuperación clínica de infección aguda o crónica. También indica respuesta inmune exitosa a la vacuna de la hepatitis B. La adquisición pasiva del anticuerpo por transfusión, administración de globulina inmune no significa inmunidad. Los niveles de anti-HBs postvacunación pueden disminuir totalmente con el tiempo. No es de utilidad para demostrar infección aguda. La prueba cualitativa de la carga viral es útil como ayuda diagnóstica de infección aguda antes de la fase de seroconversión, en los casos en los cuales se quiera confirmar el diagnóstico de infección por el VHB en pacientes o donantes que sean seropositivos para algunos de los anticuerpos que indican VHB y se quiera descartar falsa positividad. La prueba cuantitativa es útil para confirmar infección crónica en pacientes que previamente tienen HBsAg positivo y hacer el seguimiento de la infección y/o la respuesta al tratamiento. La prueba del genotipo determina el genotipo del virus (A-H) para epidemiología o pronóstico de la infección y detecta las mutaciones del virus que están asociadas con resistencia a las drogas anti-virales. El genotipo C está asociado con enfermedad hepática más severa que el genotipo B. HEPATITIS C ANTICUERPO A ANTÍGENO (Anti-VHC) Código 906225 PRUEBA CONFIRMATORIA Anti-HCV Código 906818 CARGA VIRAL Código 906817 ARN DETECTOR Código 906819 SEROTIPIFICACIÓN Código 838980F SUBTIPOS Código 838911F 300 Fundación Santa Fe de Bogotá GENOTIPIFICACIÓN Código 838922F El virus de la hepatitis C (VHC) parece ser el principal agente etiológico de la hepatitis transmitida parenteralmente llamada anteriormente hepatitis ni-A niB. El antígeno de la hepatitis C es un virus ARN de cadena simple que pertenece a la familia Flaviviridae. Es el responsable de por lo menos el 20% de todos los casos de hepatitis aguda donde un alto porcentaje (cerca al 50%) de los casos progresan a enfermedad crónica y a daño hepático severo. Es un virus de transmisión sanguínea que puede transmitirse por transfusiones de sangre, procedimientos de diálisis renal, trasplante de órganos y procedimientos invasivos o dentales. El anti-VHC generalmente no es detectable durante los primeros meses después de la infección y por no ser un anticuerpo neutralizante su presencia no confiere inmunidad. La pérdida del anticuerpo puede ocurrir muchos años después de la resolución de la infección. Debido a que existe la posibilidad de falsos positivos con títulos bajos en las pruebas inmunológicas para VHC es importante confirmar dicho resultado con pruebas suplementarias como RIBA (Recombinant InmunoBlot Assay) que detecta anticuerpos específicos contra proteínas (antígenos) virales como c100, c33c, c22(p). NS5 y hSOD y epítopes del core del tipo IgG los cuales, generalmente, son diferentes a los usados en las pruebas de ELISA. La cuantificación de los niveles de ARN del virus es de gran utilidad en el manejo de pacientes con hepatitis C crónica activa. Los niveles iniciales de la carga viral predicen la respuesta del paciente a la terapia con interferón alfa, ya que los pacientes con una carga viral baja (< 1x106 copias de ARN/mL) responden mejor al tratamiento que los que tienen mayor carga viral. Se han identificado un número significativo de serotipos o “genotipos” del virus del VHC y se han clasificado por PCR los 6 tipos y subtipos más comunes aunque hay muchos más. La posibilidad de realizar el genotipo ha hecho posible el estudio del significado clínico de los diferentes tipos de VHC y se ha obtenido una evidencia preliminar de que la patogenicidad y la respuesta al interferon dependen del tipo de virus que esté produciendo la infección. Además la genotipificación del VHC puede utilizarse para identificar el origen de la infección, particularmente para los subtipos de deferentes áreas geográficas. En general la infección con el HCV tipo 1b o 4 produce enfermedad hepática más severa, progresión más rápida a cronicidad y menor respuesta al tratamiento con interferón. Las infecciones producidas por los tipos 1a, 2, 3 y 5 tienen un pronóstico más favorable. Manual de Procedimientos 11 301 Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con gel separador para obtener suero. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Para la carga viral se requiere sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 42 días congelada a -20°C. Para la determinación del genotipo se requiere sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja) o con anticoagulante como EDTA (tubo tapa lila) para obtener plasma que debe separarse de las células dentro de los 30 minutos de tomada la muestra y congelarse inmediatamente. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 3 meses congelada. La prueba del genotipo se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío La muestra debe contener una carga viral mínima de 1.000 UI/mL. Metodología: Anti-VHC: Técnica cualitativa de inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Técnica cualitativa de inmunoanálisis enzimático lineal (inmunoblot) RT-PCR:Inmunoanálisis enzimático (ELISA) Valores de referencia: Anti-HVC No reactivo: ≤ 1,00 S/CO Reactivo: ≥ 1,00 S/CO Prueba confirmatoria: Negativo Carga viral: El rango reportable para la prueba cuantitativa Amplicor Monitor HCV es 2.000 - 600.000 UI/mL. El límite de detección para la prueba cualitativa Amplicor Monitor HCV es de 200 UI/mL Genotipos: Indetectables Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba de anti-VHC detecta infección presente o pasada. Un resultado positivo sugiere infección pasada o presente pero para confirmación de la infección se recomienda realizar pruebas complementarias como el Western-blot, el inmunoblot recombinante RIBA o la prueba de RT-PCR cualitativa. Indica además que el individuo puede ser portador asintomático y que puede transmitir la infección. Debido a la lentitud en el desarrollo de los anticuerpos un resultado negativo debe analizarse con cautela teniendo en cuenta el cuadro clínico y la historia 302 Fundación Santa Fe de Bogotá epidemiológica. No es de utilidad para el diagnóstico de la infección aguda temprana ni tampoco para diferenciar entre infección en resolución y la crónica. Las muestras de pacientes que están recibiendo inmunosupresores pueden tener niveles muy bajos de anti-VHC lo que impide detectar la reacción antígenoanticuerpo. Los niños nacidos de madres seropositivas pueden seroconvertir tardíamente. En los pacientes inmunosuprimidos o que están recibiendo terapia con anticuerpos anti-ratón pueden dar resultados falso-negativos. Una prueba negativa no excluye la posibilidad de exposición o infección por VHC debido al bajo nivel de anticuerpos o a que no se ha presentado la seroconversión que aparece a las 8-9 semanas después de la exposición al virus. La prueba confirmatoria es una prueba complementaria más específica para confirmar la infección. No reemplaza la técnica de inmunoanálisis ni debe usarse para la detección de la hepatitis aguda. En casos de resultado indeterminado debe realizarse nuevamente la prueba a las 4 semanas. La prueba cualitativa de la carga viral es útil en varias situaciones clínicas: 1) Como ayuda diagnóstica de infección aguda antes de la fase de seroconversión 2) En los casos en los cuales se quiera confirmar el diagnóstico en pacientes o donantes que sean seropositivos para el anticuerpo VHC y se quiera descartar falsa positividad 3) En pacientes seronegativos con hepatitis crónica o cuyos resultados serológicos son indeterminados 4) Para evaluar la persistencia de infección post-trasplante hepático en pacientes seropositivos pero con enzimas hepáticas normales. Esta prueba tiene mayor sensibilidad que la prueba cuantitativa y permite detectar VHC ARN entre 10-14 días post-infección mientras que las pruebas serológicas requieren un promedio mínimo de 6-7 semanas y a veces hasta 40 semanas para la fase de seroconversión La prueba cuantitativa es útil para determinar la carga viral de VHC/ARN y hacer seguimiento post-tratamiento. Un resultado negativo no descarta la presencia de inhibidores de la PCR en la muestra del paciente o que la concentración del VHC ARN esté por debajo del nivel de detección de la prueba. La determinación de los serotipos 1-6 es de utilidad en evaluar pronóstico, en la diferenciación entre VHC subtipos 1a y 1b, en conocer la probabilidad de respuesta al tratamiento, duración de la terapia y ayuda a identificar el origen de la infección por VHC. Manual de Procedimientos 11 303 HEPATITIS DELTA, ANTICUERPO IgM (Anti-HDV) Código 906226 El virus de la hepatitis Delta (HDV) fue descubierto por inmunofluorescencia directa en los núcleos de hepatocitos de pacientes con infección crónica por el virus de la hepatitis B. Es un virus RNA defectuoso que depende de la infección por hepatitis B para manifestarse y replicarse. Las dos infecciones pueden ocurrir simultáneamente o puede presentarse superinfección en un portador de hepatitis B. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta prueba está destinada para su uso en la siguiente población de pacientes: 1. Individuos que son seropositivos o son portadores crónicos de HBsAg. 2. Individuos que tienen hepatitis B aguda y grave 3. Individuos con alto riesgo de contraer la hepatitis B como por ejemplo, drogadictos intravenosos, hemodializados, multitransfundidos etc. 4. Cuando se sospeche infección concomitante HEPATITIS E, ANTICUERPOS (Anti-VHE IgG) Código 866920F Las hepatitis causadas por virus diferentes al de la hepatitis A o B habían sido llamadas anteriormente como hepatitis no-A, no-B pero los estudios de transmisión en primates han demostrado por lo menos dos formas epidemiológicas como son la hepatitis C de transmisión predominantemente parenteral y la hepatitis E de transmisión entérica. Esta última forma ha causado brotes epidémicos en países en desarrollo, en Asia, África y Suramérica y está asociada principalmente con ingestión de agua contaminada. La infección ocurre más frecuentemente en jóvenes y adultos jóvenes y tiene una alta mortalidad en mujeres embarazadas. El estudio molecular del virus sugiere que éste pertenece a un virus RNA de cadena única. La prueba utiliza dos antígenos recombinantes, el SG-3 y el 8-5 derivados de una cepa africana. El anticuerpo IgG se puede detectar al mes de verse iniciado la infección y puede persistir por meses o aun años. 304 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (ELISA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es de utilidad en casos de hepatitis seronegativa para los marcadores de hepatitis A, B y C teniendo en cuenta la evolución clínica y la historia epidemiológica del paciente. HEROÍNA, METABOLITOS Código 862767F La heroína como tal no es una sustancia activa pero se convierte rápidamente (en menos de 6 minutos) a 6-acetilmorfina (6-AM) y posteriormente a morfina y ambas tienen efectos eufóricos. La 6-AM se elimina rápidamente por la orina y el tiempo para detectarla es <24 horas, por lo tanto una orina negativa no excluye el abuso de heroína pero su presencia lo confirma. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. Por sus implicaciones legales debe recolectarse la orina en el laboratorio previa identificación del paciente. La muestra es estable 7 días en refrigeración. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de capa fina Valores de referencia: Metabolitos detectados (codeína, morfina y 6-MA): negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar abuso de heroína y sus metabolitos HERPES SIMPLEX (HSV)1 y 2, ANTICUERPOS IgG/IgM Código 906228/906230 HERPES I y II ANTICUERPOS IgM TAMIZAJE Código 862783F Manual de Procedimientos 11 305 HERPES VIRUS 8, ANTICUERPOS Código 862587F El virus Herpes simplex (HSV) es un miembro de la familia Herpesviridae que se encuentra mundialmente distribuido y se transmite por contacto cercano de persona a persona. Existen dos serotipos HSV 1 y 2 y ambos, con igual frecuencia, producen infección del tracto genital tanto en hombres (lesiones en pene) como mujeres (vaginitis). El tipo 1 es casi exclusivamente la causa del herpes oral (estomatitis) y también produce queratoconjuntivitis y meningoencefalitis es decir lesiones de la cintura para arriba y el tipo 2 lesiones de la cintura para abajo aunque no siempre presenta este comportamiento. La infección primaria se presenta como una forma subclínica y puede pasar desapercibida y no ser diagnosticada. La reactivación y replicación viral puede ocurrir después de un período de latencia de duración variable y dar lugar a lesiones clínicas especialmente en pacientes inmunosuprimidos debido a cáncer, trasplantes y SIDA. Es importante determinar el estado inmunitario para HSV de mujeres embarazadas con el fin de detectar seroconversión pues la infección neonatal produce alta morbimortalidad en el recién nacido. La prueba de anticuerpos IgM es importante para el diagnóstico de infección neonatal y encefalitis. La detección del HSV IgG/IgM en LCR puede indicar infección del SNC. El Herpes virus 8 (VHH-8) conocido también como el virus del sarcoma de Kaposi es un Rhadinovirus y ataca a las personas inmunosuprimidas en especial a las que sufren de SIDA Luego de la infección, el virus permanece en estado de latencia en células de origen linfoide de por vida, al igual que sucede con otros herpesvirus. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Muestra de LCR tomada en tubo especial que debe mantenerse refrigerada. Para la detección de los anticuerpos al Herpes virus 8 se requiere sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener sangre total. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente y 7 días en refrigeración . La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos IgG/IgM: Inmunoanálisis enzimático (ELISA) Herpes virus 8 ADN: RT-PCR 306 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM HSV Negativo ≤ 9 Dudoso 9-11 Positivo ≥ 11 HSV-8 ADN: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detección de infección herpética presente o pasada. Por ser anticuerpo de tipo IgG es necesario analizar muestras pareadas con 8-15 días de intervalo para determinar infección reciente; la segunda muestra debe tener una elevación cuádruple o mayor con relación a la primera. La presencia de anticuerpos IgG generalmente indica infección pasada y la de anticuerpos IgM infección reciente o actual. Muestras de LCR y suero con títulos elevados para HSV también deben analizarse para rubéola y paperas y si estos anticuerpos son negativos se debe considerar que hay una encefalitis herpética. HIDROCARBUROS Código 905722 Los hidrocarburos constituyen un amplio grupo de compuestos orgánicos que contienen solamente carbón e hidrógeno. Estas sustancias se encuentran de manera aislada o mezclada en gran variedad de productos comerciales que pueden encontrarse en el hogar o en algunos sitios de trabajo. La intoxicación con estos químicos, no produce efectos sistémicos generales pero actúan como asfixiantes. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina de micción simple fresca. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20 ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de gas. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Sus efectos se observan únicamente cuando su concentración es tan elevada en el aire que disminuye de forma importante la presión parcial de oxígeno. Se caracterizan por su alta volatilidad y mínima viscosidad, por lo que su inhalación puede reemplazar rápidamente el gas alveolar y causar hipoxia. Además, puede cruzar con facilidad la membrana alveolo capilar y originar síntomas neurológicos. Asimismo se han descrito efectos cardiotóxicos con producción de arritmias fatales. Manual de Procedimientos 11 307 HIDROXIPROLINA TOTAL Código 903023 Es un aminoácido presente en cantidades apreciables en el colágeno y en los tejidos que lo contienen (hueso) y que se excreta en la orina después del catabolismo tisular. Es un indicador de la velocidad de formación y reabsorción ósea y como se deriva casi exclusivamente del colágeno refleja la velocidad del catabolismo de esta proteína. La prolina se hidroliza después de que se incorpora al polipéptido precursor del colágeno. Cuando el hueso se reabsorbe, el colágeno se rompe y la hidroxiprolina no se reutiliza en la formación de hueso nuevo sino que se excreta primariamente como fragmentos di y tripéptidos Pequeñas cantidades de la hidroxiprolina urinaria están presentes como aminoácido libre pero la mayor cantidad está asociada a péptidos pequeños y grandes no deslizables; a esta combinación se le llama hidroxiprolina total. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no debe estar tomando preparados de colágeno (gelatina) y si es el caso se debe quitar de la dieta 24 horas antes de la prueba. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco con 25 mL. de HCl 6N para mantener el pH de la orina por debajo de 3. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 6 meses congelada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Técnica colorimétrica o por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Valores de referencia: Hombres: 9-73 mg/24 horas Mujeres: 7-49 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles de la hidroxiprolina total están marcadamente aumentados en enfermedad de Paget y en menor grado en hiperparatiroidismo primario y secundario, neoplasmas óseos, mieloma, hipertiroidismo, acromegalia, artritis reumatoidea, osteoporosis, falla renal crónica, quemaduras y psoriasis. Los niveles de la hidroxiprolina libre están aumentados en pacientes con errores congénitos del metabolismo, hidroxiprolinemia y aminoglicinuria familiar. HIERRO SÉRICO Código 903846 308 Fundación Santa Fe de Bogotá CAPACIDAD DE COMBINACIÓN (TIBC) Código 903812 El hierro es un mineral esencial para la mayoría de los organismos vivientes porque participa en una variedad de procesos vitales que van desde mecanismos oxidativos celulares hasta transporte de oxígeno a los tejidos. Es un componente de las cromoproteínas transportadoras de O2 como hemoglobina y mioglobina, así como de varias enzimas como citocromo oxidasa, xantina oxidasa, peroxidasa y catalasa. El resto del hierro está en flavoproteínas, ferrosulfuros, ferritina y transferrina. La transferrina se mide indirectamente por la cantidad de hierro que puede enlazar y es lo que conocemos como capacidad de combinación o enlace de hierro (TIBC). Otra medida que también es útil es el % de saturación que se obtiene de la fórmula hierro sérico/TIBC x 100 y que es un mejor indicador de los depósitos de hierro. Condiciones del paciente y/o de la muestra En lo posible la muestra debe tomarse en las mañanas y con el paciente en ayunas pues en pacientes normales hay una gran variación diurna del hierro sérico con valores vespertinos más bajos del orden de 10 µg/dL. Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Hierro sérico Mujeres: 37-170 µg/dL Hombres: 49-181µg/dL TIBC: 250-450 µg/dL Porcentaje de saturación: 14-50% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Hay aumento del hierro sérico en anemias hemolíticas, talasemia, anemia sideroblástica, envenenamiento por plomo, deficiencia de piridoxina, necrosis hepática aguda, hepatitis, anemia perniciosa, terapia inapropiada con hierro, hemocromatosis y hemosiderosis por transfusiones repetidas. Hay hipoferremia en desnutrición, malabsorción, pérdida crónica de sangre, enfermedades crónicas, tumores malignos y en procesos inflamatorios e infecciosos. La anemia por deficiencia de hierro se caracteriza por disminución del hierro sérico, aumento de TIBC o transferrina y una disminución del % de saturación de la transferrina. Manual de Procedimientos 11 309 HISTAMINA Código 906822/862579F La urticaria crónica es un trastorno común de la piel que afecta al 1-6% de la población general. Se caracteriza por brotes de irritación cutánea acompañados de enrojecimiento y prurito. La urticaria autoinmune se define por la presencia de anticuerpos IgG que tienen gran afinidad por lo receptores IgE y que desencadenan degranulación de mastocitos y basófilos. En un 30-40% de los pacientes con urticaria crónica se han identificado anticuerpos IgG funcionales al receptor IgE y anticuerpos anti-IgE en otro 5-10% Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con heparina como anticoagulante para obtener sangre total. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 1 semana congelada a -20°C. Muestra de orina recolectada durante 24 horas con HCl 6N como preservativo. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y/o congelada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Orina 0,006 – 0,131 mg/24 h Plasma: 0,1 – 1,8 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en evaluación de pacientes con fenómenos alérgicos cutáneos. HISTOPLASMA CAPSULATUM, ANTICUERPOS Código 906118 HISTOPLASMA IgG/ IgM ANTICUERPOS Código 862609F 310 Fundación Santa Fe de Bogotá HISTOPLASMA ANTÍGENO URINARIO Código 862697F El Histoplasma capsulatum es una bacteria saprofita del suelo que crece bien en suelos enriquecidos con excrementos de aves. La enfermedad que produce es auto-limitada, afecta los pulmones y es asintomática. En niños y en pacientes inmunosuprimidos puede producir enfermedad pulmonar cavitaria crónica, enfermedad diseminada y meningitis que pueden ser fatales. Los pacientes infectados con Histoplasma capsulatum presentan anticuerpos séricos con elevación del título dentro de las 6 semanas de haber adquirido la infección. La elevación de los títulos se asocia a progresión de la infección y a pesar de la mejoría clínica el anticuerpo específico persiste por varias semanas a un año. Un complejo de galactomanano-proteína está presente en el micelio del Histoplasma capsulatum y contiene proteínas (68%) y polisacáridos (galactomanano). La detección del polisacárido galactomanano en orina, confirma el diagnóstico de histoplasmosis diseminada. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20ºC. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fijación de complemento (FC) Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Fijación de complemento Anticuerpos a mi- Título ≤ 1:8 celios y levaduras: EIA Anticuerpos Negativo: Menor de 0.90 Indeterminado: 0.90 - 1.10 Positivo: Mayor de 1.10 Antígeno urinario: ≤ 0,5 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de histoplasmosis activa. La determinación del antígeno urinario (galactomannan) se utiliza en casos de histoplasmosis diseminada en pacientes con SIDA y tiene una sensibilidad mayor Manual de Procedimientos 11 311 del 90% y se usa para el diagnóstico de recaídas. Títulos por fijación de complemento ≥ 1:32 indican infección activa y la elevación persistente de los títulos está asociada a infección progresiva. El resultado positivo de la prueba de inmunoanálisis complementa los hallazgos de la fijación de complemento. HLA CITOTÓXICOS, ANTICUERPOS (ANTI HLA) Código 906510/906509 Son auto y aloanticuerpos a linfocitos generalmente de tipo IgG/IgM y cuando los aloanticuerpos están presentes en pacientes indican sensibilización a antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad (HLA); pueden aparecer después de transfusiones sanguíneas, embarazos y trasplante de órganos. Los autoanticuerpos son mediadores en enfermedades autoinmunes tales como anemia hemolítica, púrpura trombocitopénica, neutropenia, LES, artritis reumatoidea y neoplasias. Los pacientes candidatos a trasplante renal que han recibido transfusiones sanguíneas para mejorar la sobrevida del injerto desarrollan aloanticuerpos y los riñones que se trasplantan a estos individuos generalmente son rechazados irreversiblemente. Ambos tipos de anticuerpos también son importantes en aborto espontáneo recurrente para detectar si hay anticuerpos contra antígenos fetales de origen paterno. Se considera que las pacientes que tienen aloanticuerpos responden favorablemente a inmunización con linfocitos paternos presumiblemente porque la aloinmunización resulta en la producción de anticuerpos específicos que bloquean la respuesta inmune mediada celularmente en la madre lo que produce abortos recurrentes inmunológicamente modificables. Es importante distinguir entre los dos tipos de anticuerpos linfocitotóxicos (auto/alo) por que en el caso de abortos recurrentes espontáneos el tratamiento es diferente pues las pacientes que tienen autoanticuerpos responden a tratamiento con esteroides y anticoagulantes. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada. Metodología: Prueba serológica Técnica de microlinfocitotoxicidad dependiente de complemento Citometría de flujo Valores de referencia: Ver informe individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba permite la identificación de anticuerpos específicos anti-HLA clase I 312 Fundación Santa Fe de Bogotá (locus A, B y C) y clase II (locus DR, DQ y DP) Es útil en la evaluación de pacientes que requieren trasplante renal, cardíaco y pancreático; un resultado positivo es contraindicación para el trasplante, especialmente renal, pero un resultado negativo no excluye la posibilidad de rechazo hiperagudo. HLA CLASE I, ANTICUERPOS TAMIZAJE Código 862569F1 HLA CLASE I, ANTICUERPOS ESPECÍFICOS Código 862570F1 HLA CLASE II DR-DQ (ANTÍGENO DR, DQ) Código 862766F HLA CLASE II, ANTICUERPOS ESPECÍFICOS Código 862570F2 HLA CLASE II, ANTICUERPOS TAMIZAJE Código 862569F2 HLA A, B, D/DR y B27 Código 906501/906511 El complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) está situado en el brazo corto del cromosoma 6. Se divide en 6 clases de antígenos HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-D/DR, MB/DC y SB. Estos antígenos son glicoproteínas que hacen parte integral de la membrana celular y altamente polimórficos tanto estructural como serológicamente. Se dividen en moléculas clase I (HLA A, B, C) y clase II (HLA D/DR, DC/MB, SB). Están presentes en todas las células nucleadas y se detectan más fácilmente en los leucocitos. Algunos son muy reconocidos por su papel en trasplante de órganos y otros por su asociación con enfermedades específicas. Los antígenos clase I actúan como los principales blancos de rechazo en trasplante de órganos. Manual de Procedimientos 11 313 El antígeno HLA-B27 está presente en el 5-10% de la población general pero hay mayor prevalencia en ciertos individuos con enfermedades reumáticas, particularmente espondilitis anquilosante (>90%), síndrome de Reiter (79%), artritis reumatoidea juvenil (42%), uveitis anterior, artritis psoriática y enfermedad inflamatoria del intestino. Los antígenos HLA D/DR/DQ (clase II) son diferentes estructural y funcionalmente a los HLA A, B, C. Tienen una distribución celular más restringida y se encuentran solamente en macrófagos, linfocitos B, células de Langerhans, células de piel y espermatozoides. Son altamente polimórficos e inducen abundante proliferación de células T (D) y producción de anticuerpos (DR). Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante heparina o EDTA como para obtener sangre total. La muestra es estable 72 horas refrigerada. Metodología: Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR). Análisis en sistema LUMINEX. Se procesa en el Laboratorio de Referencia. Valores de referencia: HLA clase I/II Ver informe individual HLA B27: Afroamericanos: 3-4% Caucásicos: 6-8% Asiáticos: 1% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La tipificación HLA es útil para encontrar donantes compatibles para trasplante de órganos, especialmente médula ósea y riñón, transfusión de plaquetas en pacientes sensibilizados, pruebas de paternidad y buscar correlación con varias enfermedades. El HLA-B también sirve para determinar asociación con ciertas enfermedades y definir hipersensibilidad a drogas como carbamazepina, abacavir y alopurinol Los antígenos leucocitarios humanos (HLA) regulan la respuesta inmune y juegan un papel muy importante en los trasplantes de órganos. La tipificación de los HLA clase I se aplica más frecuentemente a la compatibilidad entre donante y receptor de un órgano y para encontrar plaquetas compatibles en pacientes aloinmunizados y refractarios a trasfusión de plaquetas. Los HLA clase I incluyen los locus A, B y C. La tipificación de los HLA clase II se aplica más frecuentemente a muestras de médula ósea y para determinar la compatibilidad entre donante y receptor de un trasplante de órgano sólido. Los HLA clase II incluyen los locus DR y DQ. HOMOCISTEÍNA TOTAL (HCY) Código 903022 314 Fundación Santa Fe de Bogotá HOMOCISTEÍNA URINARIA (HCY) Código 826150F La homocisteína es un aminoácido que contiene sulfuro producto de la desmetilación intracelular de la metionina. Es secretada al plasma principalmente en su forma oxidada y circula tanto en forma libre (trazas) como unida a proteínas (98-99%); la homocisteína total es la suma de las dos formas. Nivele elevados de la homocisteína total se han considerado como un factor de riesgo para enfermedad cardiovascular pues pueden causar daño a las arterias debido a su naturaleza irritante y resultan en inflamación y en formación de placas que pueden eventualmente ocasionar bloqueo del flujo de sangre hacia el corazón. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayuno de 12 horas e informar la drogas que está tomando pues puede haber elevación de la HCY en tratamiento con metotrexate, carbamazepina, fenitoína, óxido nitroso y triacetato de azauridine y disminución por penicilamina. Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o con heparina de litio para obtener plasma. Como la síntesis de la HCY continua in vitro dentro de los eritrocitos es muy importante separar el suero o plasma de los glóbulos rojos dentro de una hora después de la toma de la muestra. Las muestras deben colocarse inmediatamente en hielo y son estables 14 días en refrigeración y 1 año congeladas a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Valores de referencia: Hombres 5,46-16,20 µmol/L Mujeres 4,44-13,56 µmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para establecer el diagnóstico de homocistinuria, para detectar individuos con aumento en los factores de riesgo para enfermedad coronaria y como prueba funcional para deficiencia de ácido fólico. Varios estudios han demostrado que niveles moderamente elevados de HCY en sangre constituyen un factor de riesgo independiente para ateroesclerosis, tromboembolismo y enfermedad vascular oclusiva prematura y se asocian con enfermedades periféricas, cerebrales y cardiovasculares. También la HCY se eleva en deficiencia de ácido fólico, en metabolismo anormal y en deficiencia de vitamina B12 y en pacientes con enfermedad renal crónica; en estos últimos hay un aumento en la morbilidad y mortalidad por enfermedad cardiovascular arterioesclerótica. Manual de Procedimientos 11 315 HONGOS SEROLOGIA Código 906119/906120 Si hay sospecha de una enfermedad micótica sin evidencia de un microorganismo específico es posible determinar anticuerpos específicos a las diferentes especies de hongos para ayudar en el diagnóstico de infección por Blastomyces dermatitides, Coccidiodes inmites e Histoplasma capsulatum. El hongo dimórfico Blastomyces dermatitides se inhala por vía aérea y produce enfermedad pulmonar caracterizada por tos, fiebre y sudoración nocturna. Se disemina produciendo abscesos y granulomas supurativos en piel, hueso y genitales internos. El Histoplasma capsulatum es un saprofito del suelo especialmente contaminado con excrementos de aves. La enfermedad es generalmente limitada a los pulmones y asintomática pero puede haber diseminación a cerebro y médula ósea. El Coccidiodes inmites se adquiere por inhalación y produce enfermedad pulmonar limitada pero también puede diseminarse a otros órganos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se debe averiguar si al paciente se le ha hecho recientemente la prueba cutánea para histoplasmosis pues esto invalida el resultado para Histoplasma. Muestra de suero. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. . Metodología: Técnica de fijación de complemento o de inmunofijación radíal utilizando los respectivos antígenos para los hongos Valores de referencia: Negativo para hongos Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la detección de anticuerpos séricos en pacientes con infecciones micóticas. Los títulos pueden permanecer presentes meses después de la resolución de la infección HORMONA ADRENOCORTICOTRÓPICA (ACTH) Código 904103 La hormona ACTH regula principalmente la producción del cortisol adrenal y se sintetiza en la pituitaria anterior por estímulo de la hormona liberadora de corticotropina (CRH) producida en el hipotálamo. 316 Fundación Santa Fe de Bogotá Se libera normalmente de una manera cíclica con un pico plasmático diurno de 6:00-8:00 am y niveles muy bajos al final del día y hacia las 11:00 pm. El cortisol ejerce un control negativo de retroalimentación en la secreción de ACTH tanto a nivel hipotalámico como pituitario. Condiciones del paciente y/o de la muestra La ACTH es una molécula muy lábil por lo cual la toma y manejo de la muestra debe hacerse con precauciones especiales para evitar deterioro de la hormona. Es importante anotar la hora de la toma y tomar la muestra preferiblemente entre las 8:00-10:00 am. El paciente debe estar en ayunas e informar que drogas está tomando porque hay elevación de la ACTH por tratamiento con anticonvulsivantes, insulina, levodopa y metoclopramida y disminución por tratamiento con clonidina, dexametasona, fluocinolona, y metilprednisolona. Sangre total tomada en tubo de plástico con anticoagulante EDTA para obtener plasma que debe colocarse inmediatamente en hielo y centrifugarse en centrífuga refrigerada tan pronto llegue al laboratorio pues se deteriora muy rápidamente en sangre total. La muestra es estable 14 horas congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 6 días a partir de la fecha de envío. Para la prueba de estimulación se toma una muestra de sangre basal y luego se aplica la dosis de ACTH (Synacthen o Acthar) y se toma otra muestra 60 minutos después. Metodología: Técnica de inmunoanálisis enzimático en fase sólida por quimioluminiscencia. Valores de referencia: ≤18 años: 9-57 pg/mL ≥18 años: 10-60 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Sirve para diferenciar insuficiencia suprarrenal primaria (ACTH elevada y cortisol bajo) de la secundaria (ACTH y cortisol bajos), para hacer el diagnóstico del síndrome de Cushing y para la evaluación de pacientes con hiperplasia suprarrenal congénita. Para diferenciar pacientes con síndrome de Cushing de pacientes normales es mejor tomar las muestras en la tarde (4:00-6:00 pm) a pesar de que la costumbre es tomarlas en la mañana. Hay elevación de la ACTH en tumores secretores de la hormona, enfermedad de Cushing de origen pituitario, enfermedad de Addison, en situaciones severas de stress (trauma, hospitalización, cirugía mayor), alcoholismo, y depresión. Hay disminución en adenoma y carcinoma suprarrenal y en insuficiencia suprarrenal secundaria. Hasta un 50% de pacientes con síndrome de Cushing pueden Manual de Procedimientos 11 317 tener niveles normales de ACTH y la prueba no es útil para el diagnóstico definitivo de insuficiencia suprarrenal secundaria. HORMONA ANTI MULLERIANA Código 862645F La hormona antimulleriana (HAM) es una glicoproteína dimérica que inhibe el desarrollo de los conductos de Müller en el embrión masculino. También ha sido llamada factor inhibidor mulleriano (FIM), hormona inhibidora mulleriana (HIM) o sustancia inhibidora mulleriana (SIM). La hormona es producida por las células de Sertoli inmaduras y células de la granulosa de los folículos preantrales y antrales pequeños postnatales, cuya determinación puede ser útil para la detección de tejido testicular y su evaluación funcional prepuberal y en la búsqueda de tumores de células de la granulosa en adultos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica de inmunoanálisis enzimático en fase sólida por quimioluminiscencia. Valores de referencia: ng/mL Mujeres Hombres ≤ 14 años: 0,49 – 3,15 14 - 19 años: 1,28 – 16,37 20 - 29 años: 0,76 – 11,34 30 - 39 años: ≤ 9,24 40 - 49 años: ≤ 4,50 ≥ 49 años: ≤ 0,45 ≤ 1 año: 37,20 – 345,67 1 - 6 años: 59,54 – 320,65 7 - 11 años: 40,99 – 203,67 12 - 17 años: ≤ 128,29 ≥ 17 años: 1,15 – 15,23 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La HAM se postula como un marcador de la reserva ovárica de la mujer, lo que es muy interesante para conocer mejor la fertilidad, además se determina el tratamiento de reproducción asistida que la pareja debe seguir en función de la reserva ovárica de la mujer. 318 Fundación Santa Fe de Bogotá HORMONA ANTIDIURÉTICA (ARGININA VASOPRESINA) Código 904102 La hormona antidiurética (ADH, AVP) es un nonapéptido producido en el hipotálamo y secretado por la pituitaria anterior en respuesta a hiperosmolaridad e hipovolemia del líquido extracelular. La ADH promueve la formación de una orina concentrada por aumento de la reabsorción de agua en los túbulos renales. También tiene efecto vasoconstrictor (vasopresina) y probablemente juega un papel en el mantenimiento de la presión arterial durante pérdida de sangre. La función inadecuada de la ADH produce diabetes insípida (DI). El diagnóstico de DI se basa en la presencia de suero hiperosmolar con orina diluida y se puede diferenciar la DI central de la nefrogénica, midiendo la ADH e interpretando el resultado en conjunto con la osmolalidad plasmática. El síndrome de secreción inapropiada de ADH (SIADH) se manifiesta por hiponatremia y orina inapropiadamente concentrada y el diagnóstico se confirma midiendo la ADH plasmática o urinaria cuyo resultado no concuerda con la osmolalidad sérica. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayuno y sin haber tomado agua ni ningún líquido por 6 horas antes de la prueba. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. El plasma debe separarse rápidamente y en centrífuga refrigerada y mantenerse congelado hasta el momento del procesamiento. Se debe evitar remover la capa “buffy coat”. La muestra es estable 1 hora a temperatura ambiente, 6 horas refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis enzimático (RIA) Valores de referencia: 1-13,3 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Para el diagnóstico de las poliurias la determinación de ADH complementa las determinaciones de osmolalidad sérica y urinaria junto con la prueba de deprivación de agua. El diagnóstico diferencial de las dos tipos de DI se basa en que en la hipotalámica la osmolalidad sérica es alta y el nivel de ADH puede estar bajo o normal mientras que en la nefrogénica tanto la osmolalidad sérica como el nivel de ADH están elevados. La osmolalidad de una muestra de la primera orina de la mañana de < 300 mosm/kg simultáneamente con una osmolalidad sérica de >310 mosm/kg es diagnóstico de una forma severa o completa de DI (hipotalámica o nefrogénica) y no hace necesario que se haga la prueba de deprivación de agua. Puede haber niveles aumentados de ADH en pacientes que están en tratamiento con fenotiazina y carbamazepina. Manual de Procedimientos 11 319 HORMONA DE CRECIMIENTO (HGH, SOMATOTROPINA) Código 904104 HORMONA DEL CRECIMIENTO PRE Y POST EJERCICIO Código 904202 La HGH es un polipéptido que es estructuralmente similar a la prolactina y al lactógeno placentario. Se produce y se secreta en las células acidofílicas de la pituitaria anterior bajo el control de la hormona liberadora de HGH (GHRH) y la somatostatina del hipotálamo, las cuales respectivamente estimulan e inhiben su secreción. Los niveles basales en individuos normales son generalmente < 2 ng/mL, se mantienen estables durante el día aunque normalmente se elevan después de comida, ejercicio y durante el sueño. Sus efectos metabólicos son principalmente anabólicos (estimula producción de ARN) pues promueve conservación de proteínas y participa en una amplia gama de síntesis proteica. También estimula el transporte de la glucosa, facilita la formación de los depósitos de glicógeno, moviliza los ácidos grasos y está íntimamente relacionada con la insulina. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y haber descansado por lo menos 30 minutos antes de la toma de la muestra. Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 28 días congelada a -20°C. El resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia Valores de referencia: ng/mL Adultos: ≤ 6,5 Niños: ≤ 10,0 Acromegálicos: 10,0 - 300 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El exceso en la producción de HGH puede ser causado por un adenoma pituitario que en los adultos se manifiesta por acromegalia y en los niños por gigantismo. La producción insuficiente de HGH en niños resulta en retardo en el crecimiento y en los adultos en disminución de la masa muscular. La deficiencia de HGH, tanto en adultos como en niños, puede ser debida directamente por enfermedad infiltrativa o neoplásica de la glándula pituitaria. Tam- 320 Fundación Santa Fe de Bogotá bién puede ser la consecuencia de irradiación craneal por tumores cerebrales y otros neoplasmas. La determinación de HGH puede ser útil para evaluar la extensión o progresión de lesiones intracraneales que comprometen el hipotálamo o la pituitaria. Se puede confirmar el diagnóstico de acromegalia en adultos al encontrar niveles elevados o no suprimibles de HGH después de la administración de glucosa; se espera que después de una prueba de tolerancia a la glucosa se suprima la HGH a niveles por debajo de < 2 ng/mL pero esto no sucede en pacientes con acromegalia Las pruebas de estimulación (infusión de arginina, tolerancia a la insulina, Ldopa, glucagón, estimulación con clonidina, inducción por sueño y ejercicio) deben provocar un pico de >7 ng/mL en niños y de >5 ng/mL en adultos; un resultado menor puede indicar deficiencia. Los pacientes que están o han sido tratados con HGH pueden desarrollar antiHGH que da lugar a niveles bajos de la hormona por interferencia con la prueba. HORMONA TIROESTIMULANTE ULTRASENSIBLE (Tirotropina, TSH) Código 904904 TSH NEONATAL Código 904903 PRUEBA DE ESTIMULACIÓN TSH POST TRH Código 904906 Es una glicoproteína con dos subunidades, la a similar a la de FSH, LH y HCG y la b que es diferente y le confiere su especificidad bioquímica. Se sintetiza y secreta por la pituitaria anterior es respuesta a un mecanismo negativo de retroalimentación de las hormonas libres triyodotironina (T3 libre) y tiroxina (T4 libre). Niveles séricos aumentados de T3 y T4 deprimen la secreción de TSH (hipertiroidismo) mientras que niveles disminuidos resultan en exceso de TSH (hipotiroidismo). El tripéptido hipotalámico, hormona liberadora de tirotropina (TRH) estimula directamente la producción de TSH. La TSH se secreta de manera pulsátil y la amplitud de los pulsos se aumenta durante la noche produciendo concentraciones séricas ligeramente más elevadas en las muestras que se toman al final del día. La Asociación Americana de Tiroides recomienda que las pruebas de primera línea para el diagnóstico de enfermedades tiroideas deben ser la determinación de TSH ultrasensible y la de tiroxina libre (T4 libre). Manual de Procedimientos 11 321 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulante como heparina. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La muestra de sangre total para TSH neonatal se toma en un disco de papel de filtro por punción del talón o de la sangre del cordón umbilical y se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible a los 6 días a partir de la fecha de envío. Para la prueba de estimulación de TSH post TRH se obtiene una muestra basal y luego se inyectan IV 200 µg/mL de TRH y se toman muestras a los 30 y 60 minutos después de la infusión. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo por quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. Para la TSH neonatal se utiliza técnica cuantitativa inmunoradiométrica Valores de referencia: 0.340 – 5.600 u UIi/ml Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Tradicionalmente la TSH ha sido utilizada para hacer el diagnóstico de hipotiroidismo primario pero con la disponibilidad actual de la TSH ultrasensible, de tercera generación, la capacidad diagnóstica se ha expandido y es posible diferenciar entre niveles subnormales de TSH asociados con hipertiroidismo, de niveles bajos o normales en pacientes eutiroideos; esta habilidad está reemplazando la prueba de estimulación de TSH post TRH que se ha usado con ese fin. En hipotiroidismo secundario (pituitario) y en el terciario (hipotalámico) el nivel de TSH está disminuido; para diferenciar entre estos dos se hace la prueba de estimulación con TRH y se determinan los niveles séricos cada 15 minutos hasta 60 minutos post infusión de la TRH; si la TSH aumenta el hipotiroidismo es de origen hipotalámico; si permanece disminuido es debido a falla de la pituitaria. Hay elevación de la TSH en hipotiroidismo primario, hipotiroidismo subclínico, hipertiroidismo dependiente de TSH (enfermedad de Graves) y en resistencia al tratamiento con hormona tiroidea. También se eleva en tratamiento con drogas como antagonistas de dopamina, clorpromazina, haloperidol y compuestos de iodo. Hay disminución de la TSH en hipertiroidismo, hipertiroidismo secundario (tumores de la pituitaria) y terciario, enfermedad de Graves, secreción autónoma de hormona tiroidea y deficiencia de TSH y en tratamiento con drogas tales como hormona tiroidea, glucocorticoides, dopamina y sus agonistas, levodopa, apomorfina y piridoxina. En recién nacidos los niveles dudosos de TSH neonatal deben complementarse con niveles de T4 para confirmar o descartar hipotiroidismo congénito y en algunos casos se deben repetir los análisis 2-6 semanas después para reducir la inci- 322 Fundación Santa Fe de Bogotá dencia de falsos positivos o negativos. Se han reportado en neonatos hipotiroideos de 5 días de edad, niveles normales de TSH neonatal. Se pueden encontrar niveles elevados transitorios de TSH neonatal en ausencia de hipotiroidismo en prematuros, en niños de menos de 3 días de nacidos, o en aquellos cuyas madres usaron durante el embarazo medicamentos tópicos con contenido de iodo, o en recién nacidos expuestos a compuestos de iodo o en casos de deficiencia maternal de iodo en la dieta. HORMONA FOLÍCULO ESTIMULANTE (FSH) Código 904105 La FSH (folitropina) es una glicoproteína producida por las células b de la pituitaria anterior bajo el control de la hormona hipotalámica liberadora de gonadotropina (GnRH) y regulada también por las hormonas esteroideas gonadales. Tanto la FSH como la hormona luteinizante (LH) son secretadas de una manera intermitente que produce elevaciones rítmicas de las concentraciones séricas cada 60-100 minutos. La FSH facilita el desarrollo y mantenimiento de los tejidos gonadales de donde se sintetizan y secretan las hormonas esteroides. Los niveles circulantes de FSH están controlados, por las hormonas esteroides, a través de un mecanismo negativo de retroalimentación sobre el hipotálamo. Aunque la FSH y la LH se requieren para la función sexual normal, los patrones de secreción son muy diferentes en ambos sexos. En mujeres la FSH estimula el crecimiento folicular, prepara al folículo ovárico para que actúe la LH y estimula la descarga de estrógeno por la acción de LH y en los hombres estimula los túbulos seminíferos, el crecimiento testicular y participa en los estados tempranos de la espermatogénesis. Condiciones del paciente y/o de la muestra En la solicitud se debe especificar edad, sexo y fecha de última menstruación y si la paciente está en tratamiento con estrógenos. Muestra de suero o con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. Valores de referencia: Mujeres Hombres: Fase folicular: 3,85-8,78 mUI/mL; Pico ovulación: 4,54-22,51 mUI/mL; Fase luteal: 1,79-5,12 mUI/mL Menopausia: 16,74-113,59 mUI/mL 1,27-19,26 mUI/mL Manual de Procedimientos Niños años: 11 323 1-3 < 5,5 mUI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para evaluar pacientes con irregularidades del ciclo menstrual, hipogonadismo, problemas de infertilidad, trastornos de la pituitaria y para predecir tiempo de ovulación. Se produce elevación de FSH y LH en hipogonadismo primario, tumores de la pituitaria secretores de gonadotropina, hipofunción ovárica, alcoholismo, castración y en síndromes de Turner y Klinefelter. Hay disminución en hombres y mujeres por falla gonadal secundaria o terciaria causada por deficiencia hipotalámica de GnRh, deficiencia de FSH pituitaria, producción ectópica de hormonas esteroides, anorexia nerviosa, hemocromatosis, y/o tumores pituitarios. HORMONA LUTEINIZANTE (LH) Código 904107 La LH (lutropina) es una glicoproteína producida por las células b de la pituitaria anterior bajo el control de la hormona hipotalámica liberadora de gonadotropina (GnRH) y regulada también por las hormonas esteroideas gonadales. Tanto la LH como la hormona folículo-estimulante (FSH) son secretadas de una manera intermitente que produce elevaciones rítmicas de las concentraciones séricas cada 60-100 minutos. La LH consiste de dos subunidades a y b; la cadena a de la LH, FSH, TSH y HCG son bioquímicamente idénticas mientras que la cadena b es diferente lo que les confiere especificidad biológica e inmunológica. En mujeres, la LH estimula la ovulación y las células tecales del ovario para sintetizar y secretar estrógeno y progesterona. Estimula formación del cuerpo lúteo y durante la fase luteal permanece dominante para mantener el cuerpo lúteo y el endometrio ante la posibilidad de un embarazo. En el hombre estimula las células testiculares de Leydig para que secreten testosterona y por esto también ha sido llamada la hormona estimulante de células intersticiales. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. En la solicitud se debe especificar edad, sexo y fecha de última menstruación y si la paciente está en tratamiento con estrógenos. Muestra de suero. La muestra es estable 12 horas a temperatura ambiente, 24 horas refrigerada y 2 semanas congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas 324 Fundación Santa Fe de Bogotá paramagnéticas. Valores de referencia: Mujeres adultas Fase folicular: 2,12-10,89 mUI/mL; Pico ovulación: 19,18-103,53 mUI/mL; Fase luteal: 1,20-12,86 mUI/mL Menopausia: 10,87-58,64 mUI/mL Hombres adultos: 1,24-8,62 mUI/mL Niños 1-3 años: < 1,0 mUI/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Niveles aumentados de LH están asociados con menopausia, hipogonadismo masculino, castración masculina, hipofunción ovárica primaria, enfermedad poliquística del ovario y tumores pituitarios secretores de gonadotropina. Niveles disminuidos están asociados con deficiencia hipotalámica de GnRH, deficiencia pituitaria de LH, producción ectópica de hormonas esteroides y tratamiento con análogos de GnRH. HORMONA PARATIROIDEA (PTH, PARATOHORMONA) Código 904912 La PTH es un polipéptido de cadena simple , secretada por la glándula paratiroides, cuya vida media es solo de 2-5 minutos; se degrada en varios fragmentos peptídicos que tienen importancia fisiológica entre los que están el aminoN-terminal (1-34) que no es tan biológicamente activo como la PTH intacta y con una vida media de <5 minutos y el carboxilo C-terminal (35-84), que es biológicamente inactivo pero con una vida media de 25-30 minutos y con una concentración sérica 10 veces mayor que la de PTH intacta. La secreción de la PTH es modulada por la concentración de calcio sérico y la función principal es mantener los niveles de calcemia, dentro del estrecho rango de 8,9-10,1 mg/dL, aumentando la absorción de calcio del intestino, reteniéndolo por los riñones y movilizándolo del hueso. El efecto neto de estos mecanismos es aumentar la concentración de calcio y prevenir la hipocalcemia. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Debido a que los niveles de PTH intacta se elevan durante la noche las muestra debe tomarse entre las 7:00-10:00 AM. Muestra de suero. La muestra se debe dejar coagular completamente a temperatura ambiente (30-45 minutos) antes de centrifugarla y el suero se debe congelar dentro de las dos horas de recolección. Manual de Procedimientos 11 325 La muestra es estable 24 horas refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. Valores de referencia: 12–88 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de la PTH intacta es muy útil en: 1. Establecer el diagnóstico de hiperparatiroidismo primario; niveles elevados de calcio y de PTH son, en ausencia de falla renal o cáncer, una prueba confiable de hiperactividad paratiroidea. 2. Detectar hiperparatiroidismo secundario por insuficiencia renal crónica. 3. Establecer el diagnóstico diferencial de desordenes hipocalcémicos. 4. Establecer el diagnóstico diferencial de hipercalcemia debida a tumores malignos no-paratiroideos; niveles normales de PTH en presencia de severa hipercalcemia descartan la posibilidad de hiperparatiroidismo primario. La causa más común de hipercalcemia y PTH intacta elevada es hiperparatiroidismo primario. Los mecanismos causales del hiperparatiroidismo primario aun no son muy claros, pero generalmente están asociados con adenoma en una glándula paratiroides. Otra causa puede ser carcinoma o hiperplasia de las 4 glándulas que generalmente es familiar. Se debe considerar hipercalcemia por malignidad o intoxicación por vitamina D si el calcio está elevado y la PTH intacta es baja o normal. Comúnmente los tumores malignos, especialmente los sólidos, producen un péptido relacionado con la PTH (PTH-rP), el cual tiene muchas de las acciones de la PTH y frecuentemente puede producir hipercalcemia por malignidad; en estos casos se presenta PTH baja y PTH-rP elevada. La determinación de este péptido es de utilidad en el diagnóstico diferencial de hipercalcemia. Se presenta hipocalcemia y PTH disminuida en pacientes con hipoparatiroidismo primario que puede ser a consecuencia de enfermedad autoinmune o de ablación quirúrgica de las paratiroides. En los casos de pseudo hipoparatiroidismo se presenta PTH elevada e hipocalcemia; ésta es una enfermedad hereditaria que generalmente se presenta durante la niñez con hipocalcemia sintomática. También hay hipocalcemia y PTH baja en deficiencia de magnesio e hipocalcemia con PTH elevada en deficiencia de vitamina D e insuficiencia renal. HTLV-I/II, ANTICUERPOS Código 906232 326 Fundación Santa Fe de Bogotá HTLV I/II CONFIRMATORIO Código 906233 El virus linfotrópico T humano (HTLV-I) es un retrovirus tipo C que está asociado etiológicamente con la leucemia T del adulto (ATL) y a una enfermedad endémica neurológica desmielinizante llamada, en el Caribe, paraparesia espástica tropical (TSP) y en el Japón mielopatía asociada a HTLV-1 (HAM). La transmisión puede ocurrir transplacentariamente, por transfusiones de sangre contaminada, leche materna, contacto sexual y por compartir agujas entre drogadictos intravenosos. Aunque el HTLV-I es un virus remotamente relacionado con el virus del SIDA la sintomatología de la infección es completamente diferente y no hay reacción cruzada en las pruebas diagnósticas. La sintomatología de la leucemia puede desarrollarse 20-30 años después de la infección inicial y la de la paraparesia entre 4-10 años. El HTLV-II es un retrovirus estrechamente relacionado con el HTLV-I que fue aislado inicialmente de dos pacientes con leucemia de células peludas de fenotipo T y de un caso de linfoma CD8 asociado con una severa neutropenia y otros trastornos hematológicos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o con anticoagulantes como EDTA, heparina, citrato, oxalato y otros para obtener plasma . La muestra es estable 7 días refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba de anticuerpos se procesa diariamente y el resultado está disponible a las 24 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. La prueba confirmatoria se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis cualitativo por quimioluminiscencia de micropartícula (CMIA) Si la prueba es positiva se requiere confirmación por Inmunoblot o PCR para determinar cuál de los dos virus es el que está presente. Valores de referencia: Negativo Índice ≤ 1,00 Western-blot: no se observan bandas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de TSP (HAM) o ATL y para el estudio serológico de donantes de sangre. En casos positivos se requiere hacer la prueba confirmatoria para diferenciar infección por HTLV I del HTLV II. La presencia de falsos positivos es similar a la de la prueba de inmunoanálisis para VIH 1/2. Manual de Procedimientos 11 327 HORMONA SOMATOMEDINA-C (IGF-1) Código 904101 La somatomedina-C o factor 1 de crecimiento similar a la insulina (IGF-1) es un péptido que estimula el crecimiento somático y está regulado principalmente por la hormona de crecimiento (GH) y por la ingesta nutricional. Se han identificado dos péptidos, IGF-1 e IGF-2 que circulan unidos en un 95% a las proteínas transportadoras IGFBP-2 y IGFBP-3, pero el que tiene mayor actividad en estimular la proliferación celular y la síntesis proteica es la IGF-1 que se produce en el hígado. Las proteínas transportadoras mantienen niveles plasmáticos relativamente altos de IGF-1 y minimizan las fluctuaciones circulatorias de la hormona. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y en la solicitud debe anotarse la edad y sexo del paciente y las drogas que esté tomando. Muestra de suero que es estable 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de toma de la muestra. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: Niñas (ng/ml) Niños (ng/ml) 2m – 5a: 33,5 – 171,8 27,4 – 113,5 6 – 8a: 79,8 – 244,0 54,9 – 206,4 9 -11a: 87,4 – 399,3 85,2 – 248,8 12 -15a: 188,4 – 509,9 115,4 – 498,2 16 -20a: 267,5 – 470,8 247,3 – 481,7 Adultos Mujeres (ng/ml) Hombres (ng/ml) 21 – 24a: 149,1 – 332,3 187,9 – 400 25 – 39a: 107,8 – 246,7 96,4 – 227,8 40 – 54a: 92,7 – 244,6 88,3 – 209,9 >55a: 54,6 – 185,7 54,0 – 204,4 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles de IGF-1 son consistentemente bajos en niños con deficiencia de hormona de crecimiento (GH) (hipopituitarismo, enanismo) y se elevan con inyecciones de esta hormona. En general una concentración normal de IGF-1 en 328 Fundación Santa Fe de Bogotá un niño de baja estatura es una fuerte evidencia en contra del diagnóstico de deficiencia de hormona de crecimiento. También hay disminución en desnutrición, anorexia, deficiencia aislada de GH, enanismo de Laron (GH elevada) y en niños con craniofaringioma. Hay niveles elevados en embarazo, acromegalia y gigantismo debido a excesiva secreción de GH. Después de la resección de un tumor pituitario los niveles pueden demorarse hasta 4 días para volver a lo normal. Manual de Procedimientos 11 329 I IMIPRAMINA Código 835230F La imipramina es un fármaco antidepresivo cuyo nombre comercial más conocido es Tofranil. Se incluye dentro de los llamados antidepresivos tricíclicos. Su mecanismo de acción radica en su capacidad de inhibir la recaptación de noradrenalina y serotonina, aumentando la disponibilidad de estos neurotransmisores en el sistema nervioso central, si bien, a diferencia de los antidepresivos más modernos, también tiene numerosos efectos sobre receptores de otros muchos neurotransmisores, lo que explica sus frecuentes efectos adversos. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 2 días a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: Imipramina/Desipramina (ng/mL) 50 – 300 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar niveles terapéuticos y evitar toxicidad. INFLUENZA A Y B, PRUEBA DIRECTA PARA ANTÍGENO Código 862649F INFLUENZA TIPO A, ANTICUERPOS Código 906234 INFLUENZA TIPO B, ANTICUERPOS Código 906236 330 Fundación Santa Fe de Bogotá INFLUENZA A y B, ANTICUERPOS IgG/IgM Código 906235 La Influenza es generalmente una enfermedad leve del tracto respiratorio superior que puede dar lugar a cuatro tipos de síndromes: a) Signos físicos de compromiso del tracto respiratorio inferior sin evidencia radiológica de neumonía b) Influenza complicada con neumonía bacteriana c) Neumonía viral primaria por Influenza d) Neumonía combinada viral y bacteriana. Ambos virus producen brotes epidémicos siendo el más frecuente el producido por Influenza tipo A. Las infecciones por Influenza son más severas en pacientes con enfermedades preexistentes tales como enfermedad reumática cardíaca, enfermedad broncopulmonar, falla renal y diabetes mellitus. También en personas ancianas, mujeres embarazadas y pacientes inmunosuprimidos. La Influenza tipo A puede ser una enfermedad severa durante los primeros dos años de vida con síntomas de broncoespasmo, bronquitis y neumonía; también puede precipitar en niños ataques de asma y complicaciones en enfermedad pulmonar crónica. La Influenza tipo B generalmente es una enfermedad menos severa que la A. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de exudado nasal para la prueba de tamizaje y muestra de suero para los anticuerpos. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba de anticuerpos se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Tamizaje: Técnica de tira reactiva de membrana inmunocromatográfica Anticuerpos IgG/IgM: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Tamizaje: Negativo Anticuerpos IgG/IgA/IgM Negativo: Índice ≤ 0.9 Indeterminado: Índice 0.9 - 1.1 Positivo: ≥ 1,1 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinación de infección reciente por virus de Influenza tipo A y B. Manual de Procedimientos 11 331 INHIBIDOR-1 ACTIVADOR DEL PLASMINÓGENO Código 862606F Ver GENOTIPO, INHIBIDOR ACTIVADOR DEL PLASMINOGENO INHIBIDOR C1 DE ESTERASAS Código 906823 La deficiencia del C1-Inhibidor puede producir un angioedema que puede amenazar la vida de un paciente. Existen dos formas de deficiencia: congénita y adquirida. La forma adquirida está asociada con varias enfermedades, especialmente tumores linfoides malignos. Debido a que los signos y síntomas son muy variables es necesario hacer el diagnóstico demostrando una disminución marcada de los niveles funcionales del C1-inhibidor. Hay dos tipos de angioedema hereditario; en uno el 85% de los pacientes presentan niveles funcionales bajos así como disminución del antígeno y en el otro el 15% de los pacientes tienen niveles bajos funcionales pero antígeno aumentado. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. Inmediatamente después de tomar la muestra se debe colocar el tubo en hielo, centrifugarlo y separar rápidamente el suero y congelarlo. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría Valores de referencia: 21-39 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico de angioedema adquirido o hereditario INHIBIDOR FACTOR DE COAGULACIÓN Código 853350F Los inhibidores de los factores de coagulación son sustancias patógenas que inhiben directamente los factores o sus reacciones. Casi todos los inhibidores del factor VIII se reconocen por su interferencia o neutralización de la actividad procoagulante. Inhibidores específicos del factor VIII se presentan en las siguientes condiciones clínicas: hemofilia A, período post parto, desordenes inmunológicos y en ancianos sin enfermedad básica. Los inhibidores son generalmente inmunoglobulinas IgG que afectan el TPT/ PTT y que pueden actuar inmediatamente o ser tiempo dependientes; los que resultan del tratamiento con factor VIII en hemofílicos son tiempo dependientes. 332 Fundación Santa Fe de Bogotá Con menos frecuencia se pueden presentar inhibidores al factor IX y a los demás factores de la coagulación. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. La muestra debe tomarse antes del tratamiento del factor de coagulación Sangre total tomada en tubo con citrato de sodio como anticoagulante para obtener plasma. La muestra debe centrifugarse, retirar el plasma y este debe centrifugarse nuevamente para evitar contaminación por plaquetas. El plasma debe congelarse inmediatamente, si es posible, a -40°C. La muestra es estable 7 días congelada a -40°C. Se deben tener en cuenta las recomendaciones dadas para las pruebas TPT/PTT y TP/PT Metodología: Técnica de Bethesda que se basa en que el factor VIII de un plasma normal es inhibido por diluciones del plasma del paciente que contiene el inhibidor. Después de una pre-incubación de dos horas se realiza un TPT/PTT y la actividad inhibitoria del paciente se compara con la del plasma normal y la cantidad del inhibidor se calcula de una curva de calibración. La cantidad del inhibidor se reporta en unidades Bethesda. Una unidad Bethesda inhibe el 50% de la actividad del factor VIII en el plasma normal. Valores de referencia: Niveles del factor en estudio: >100% Prueba presuntiva para inhibidor: Negativa Prueba confirmatoria de Bethesda: < 0,5 Unidades Bethesda Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los inhibidores adquiridos del Factor VIII están generalmente asociados con una enfermedad básica o coexistente. Sin embargo casi la mitad de los inhibidores que se presentan de novo ocurren espontáneamente en pacientes ancianos sin una condición médica básica identificable. Los inhibidores espontáneos se presentan en enfermedades inmunológicas o autoinmunes como artritis reumatoidea, LES, poliarteritis nodosa, síndrome de Sjögren, miastenia gravis, arteritis temporal, trasplante de médula ósea y enfermedad de injerto contra huésped; en desordenes hemato y linfoproliferativos, enfermedades inflamatorias intestinales, hepatitis, asma, tuberculosis, psoriasis, pénfigo, carcinomas y en terapia con penicilinas, cefalosporinas, fenitoína, cloranfenicol, sulfonamidas e interferón alfa. INHIBINA A Código 835209 Manual de Procedimientos 11 333 INHIBINA B Código 835210F Las Inhibinas son hormonas glicoprotéicas heterodiméricas secretadas por las células de la granulosa del ovario en las mujeres y las células de Sertoli de los testículos en el hombre, que inhiben la secreción de la FSH pituitaria. Hay variaciones de la secreción de la hormona durante el ciclo menstrual estando los niveles más bajos en la fase folicular temprana y un pico que coincide con la fase luteal. Durante el embarazo la concentración de inhibina se eleva a las 5 semanas de gestación, hace un pico a las 8-10 semanas, disminuye durante el segundo trimestre para volver a elevarse en el tercer trimestre. En hombres hay secreción de inhibina, especialmente la subunidad B y las concentraciones se elevan en pacientes con tumores de las células de Sertoli y Leydig. La inhibina B también se detecta en mujeres durante el ciclo menstrual especialmente antes de la ovulación Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y para las mujeres se debe anotar la fecha de la última menstruación. Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 28 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica de inmunoanálisis por quimioluminiscencia Valores de referencia: Inhibina A en pg/mL Hombres: Menor de 2,0 Mujeres: Fase folicular temprana: 1,8 – 17,3 Fase folicular media: 3,5 – 31,7 Fase folicular tardia: 9,8 – 90,3 Mitad de ciclo: 16,9 – 91,8 Fase luteal temprana: 16,1 – 97,5 Fase luteal media: 3,9 – 87,7 Fase luteal tardía: 2,7 – 47,1 Post menopausia: Menor de 2,1 Inhibina B en pg/mL 334 Fundación Santa Fe de Bogotá Hombres: Mujeres: 5 - 9.9 años: 21 – 166 10 - 13.9 años: 41 – 328 14 - 17.9 años: 54-295 ≥ 18 años: 47 – 308 5 - 9.9 años: ≤ 18 10 - 13.9 años: ≤ 86 14 - 17.9 años: ≤ 123 Pre-menopausia: ≤ 153 Post-menopausia: ≤ 10 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La concentración de Inhibina A está marcadamente elevada en mujeres con tumor ovárico de células de la granulosa y la concentración disminuye con el tratamiento, lo que indica que la hormona es un buen marcador para detectar carga tumoral en este tipo de tumores. También se eleva en otros tumores ováricos como los carcinomas serosos, de células claras, mucinosos e indiferenciados, en cánceres pélvicos, en enfermedades benignas del ovario y en mola hidatidiforme. La concentración de FSH varía inversamente con la de inhibina en tumores de células de la granulosa mientras que, en tumores mucinosos ambas hormonas están elevadas lo que hace presumir que en el carcinoma mucinoso la inhibina es inactiva o hay otras hormonas que se secretan como la activina. En los casos de mola hidatidiforme los niveles disminuyen rápidamente después de la evacuación del útero y por esto puede ser de utilidad para evaluar pacientes con enfermedad trofoblástica gestacional. También se ha encontrado que en mujeres embarazadas con 7-8 semanas de gestación de un feto con síndrome de Down, la concentración de inhibina A es más del doble que la concentración promedio en un embarazo normal; por ésta razón la prueba mejora el índice de detección del síndrome de Down del 53% al 75%, con una rata de falsos positivos del 5%, si ésta prueba se añade al protocolo estándar de alfa fetoproteína, b-HCG y edad materna. La determinación de Inhibina B sirve como un marcador endocrino para monitorear la función gonadal tanto en hombres como mujeres. INMUNOELECTROFORESIS DE CUALQUIER MUESTRA Código 906824 INMUNOELECTROFORESIS EN SUERO (INMUNOFIJACIÓN) Código 906824-1 Manual de Procedimientos 11 335 INMUNOELECTROFORESIS EN ORINA (INMUNOFIJACIÓN) Código 906824-2 INMUNOELECTROFORESIS EN LCR (INMUNOFIJACIÓN) Código 906824-3 INMUNOFIJACIÓN DE PROTEÍNAS Código 906825 Las inmunoglobulinas monoclonales consisten de cadenas pesadas y livianas. Tanto las clases de cadenas pesadas como las livianas se designan por letras griegas. Las cadenas pesadas en las diferentes inmunoglobulinas son: gama (y) en IgG, alfa (a) en IgA, mu (µ) en IgM, delta (d) en IgD y epsilon (e) en IgE; las cadenas livianas son kappa (k) y lambda (l). En la orina se detecta la proteína de Bence Jones que es una inmunoglobulina monoclonal de cadena liviana kappa (k) y lambda (l); ésta puede producir insuficiencia renal y depósito de fibrillas amiloideas que dañan a los túbulos proximales produciendo el síndrome de Fanconi adquirido o depositarse en los glomérulos resultando en enfermedad por depósito de cadenas livianas. La inmunofijación es una técnica de laboratorio que se utiliza para identificar proteínas o anticuerpos en suero separados por electroforesis de proteínas; estos abarcan: IgG, IgM, IgA, cadena ligera lambda y cadena ligera kappa. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero, de LCR obtenido por el médico tratante por punción lumbar no traumática pues la contaminación con sangre falsea el resultado o de orina de micción simple. Tanto la orina como el LCR requieren proceso de concentración. Las muestras son estables 7 días en refrigeración s y 28 días congeladas a -20°C. Metodología: Electroforesis en agar Valores de referencia: Inmunoelectroforesis negativa para gamopatía monoclonal Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La presencia, en el suero, de una proteína monoclonal IgG, IgA, IgD, IgE kappa (k), o IgG, IgA, IgD, IgE lambda (l) lambda (l) sugiere gamopatía monoclonal y puede corresponder a múltiple mieloma, amiloidosis, enfermedad mieloproliferativa, macroglobulinemia, amiloidosis u otra entidad relacionada. La presencia de proteína monoclonal, kappa (k) o lambda (l), en la orina en un paciente con síndrome nefrótico, indica, en la mayoría de los casos, amiloidosis primaria o enfermedad de depósito de cadena liviana. 336 Fundación Santa Fe de Bogotá La enfermedad de cadenas livianas en la orina se encuentra en el 99% de los pacientes con mieloma múltiple y en el 80% de los pacientes con macroglobulinemia de Waldenströn. INMUNOGLOBULINA IgA Código 906827 INMUNOGLOBULINA IgA (saliva) Código 862765F INMUNOGLOBULINA IgG Subclases 1, 2, 3, 4 Código 906830 INMUNOGLOBULINA IgG (LCR) Código 827844F INMUNOGLOBULINA IgM Código 906832 INMUNOGLOBULINA IgG Código 906829 INMUNOGLOBULINA IgD Código 906833 IgG 4 SUBCLASES Código 827880F La banda de inmunoglobulinas gama que se observa en la electroforesis convencional consiste de cinco inmunoglobulinas en el suero normal donde el 80% es IgG, 15% IgA, 5% IgM, 0,2% IgD y solo unas trazas de IgE. La IgG es la inmunoglobulina más abundante en el suero, capaz de fijar complemento y se produce como respuesta a los antígenos de la mayoría de las bacterias, los virus y a antígenos proteicos pequeños y solubles; tiene 4 subclases denominadas IgG1(60-70%), IgG2 (14-20%), IgG3(4-8%) e IgG4 (2-6%) . Manual de Procedimientos 11 337 La concentración de cada una de las subclases de IgG varía de individuo a individuo y por esto la capacidad de cada persona de producir anticuerpos de una y otra subclase está bajo control genético. La IgG subclase 4 se usa para evaluar infecciones sino-pulmonares y asma. La IgG es la única clase de inmunoglobulinas que pasa la placenta humana y es la responsable por la protección del recién nacido durante los primeros meses de vida. Hay evidencia reciente de que muchas infecciones pueden ser debidas a falla en la producción de la proporción normal de las subclases, particularmente subclase IgG2. La deficiencia de IgG puede ser debida a pérdida de proteínas, defecto hereditario en la síntesis, defectos adquiridos en la producción, drogas inmunosupresoras o toxinas o secundaria a entidades malignas como mieloma múltiple o leucemia linfoide crónica. La IgA es la principal inmunoglobulina que se encuentra en la mayoría de las secreciones externas como lágrimas, sudor, saliva, leche y calostro y en las secreciones gastrointestinales y bronquiales. Es sintetizada por las células plasmáticas del intestino, los bronquios y por los ductos mamarios en la fase de lactación. El componente secretor de la IgA la hace más resistente a las enzimas y más capaz de proteger las mucosas de los virus y las bacterias y también afecta el desarrollo de reacciones alérgicas (IgE) a la ingestión de varios antígenos pues los captura e impide la respuesta de la IgE. La IgM es una macroglobulina y cada molécula se puede disociar en 5 subunidades. Los anticuerpos IgM tienen propiedades altamente aglutinantes y citolíticas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total con anticoagulantes como heparina de litio y EDTA bipotásico para obtener plasma. Las muestras para IgA son estables 8 meses a temperatura ambiente, refrigerada y/o congelada a -20°C; para IgG, 4 meses a temperatura ambiente y 8 meses refrigerada y/o congelada a -20°C; para IgM, 2 meses a temperatura ambiente, 4 meses refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. La prueba para las subclases de IgG se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días después de la fecha de envío y la IgD se procesa en Estados Unidos. Muestra de LCR para determinar IgG, tomada por el médico tratante y enviada rápidamente al laboratorio para su procesamiento. La muestra es estable 1 día a temperatura ambiente y 7 días refrigerada y Metodología: Inmunoglobulinas G, A y M: Inmunoturbidimetria 338 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Adultos IgG: 7-16 g/L; IgA: Adultos: 70 – 400 mg/dl Niños y Jovenes: 0 a 1 año : 1 a 3 años : 20 - 100 mg/dl 4 – 6 años : 27 - 195 mg/dl 7 - 9 años IgM: 0-0 – 83 mg/dl : 34 - 305 mg/dl 10 – 11 años: 53 - 204 mg/dl 12 – 13 años: 58 - 358 mg/dl 14 – 15 años: 47 - 249 mg/dl 16 – 19 años: 61 - 348 mg/dl 0,4-2,3 g/L. En niños la concentración es menor y varía con la edad por lo cual es necesario anotar la edad en la solicitud del examen para colocar en el resultado el valor de referencia correspondiente. IgG en LCR: 10-30 mg/L. IgG 4 subclases: < 2 años: 1 - 78 mg/dL < 4 años: 1 - 54 < 6 años: 2 - 112 < 8 años: 1 - 99 < 10 años: 2 - 93 < 12 años: 2 - 115 < 14 años: 4 - 136 < 18 años: 11 - 157 ≥18 years: 4 - 86 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Un aumento policlonal de IgG sérica es normal como respuesta a infecciones y a enfermedades autoinmunes y aumento monoclonal se encuentra en discrasias de células plasmáticas de tipo IgG. Hay aumento en la síntesis de IgG en la barrera hemato-encefálica en una gran variedad de infecciones y condiciones neoplásicas e inflamatorias del SNC. La mayoría (93-99%) de los pacientes con esclerosis múltiple tienen aumento de la síntesis de IgG y anormalidades oligoclonales en el líquido cefalorraquídeo. La deficiencia de IgM puede ser debida a pérdida de proteínas, defectos hereditarios primarios o a toxinas retenidas en falla renal o secundaria a entidades Manual de Procedimientos 11 339 malignas linfoides. Hay aumento policlonal en el suero como respuesta a las infecciones especialmente virales primarias y en sistémicas como la malaria; también hay aumento en cirrosis biliar primaria y en infecciones intrauterinas, la producción fetal de IgM aumenta produciéndose aumento de la IgM en sangre del cordón. Hay aumento monoclonal en la macroglobulinemia de Waldenströn y en crioglobulinemia monoclonal. El aumento en la síntesis de IgM en la barrera hemato-encefálica es característico en pacientes con meningoencefalitis infecciosa de origen viral o bacteriana y en la infección por Borrelia burgdorferi así como en el tratamiento de la neurosífilis. Hay aumento de la IgA sérica en pacientes con infecciones de piel, intestino, bronquios, riñón y en los casos de síndrome relacionado con SIDA; también puede estar elevada en cirrosis portal, tratamiento con asparaginasa, ejercicio, embarazo y alcoholismo. La deficiencia de IgA se encuentra en 1 de 750 pacientes y la ausencia se presenta en la ataxia telangiectasia. Un número importante de personas IgA-deficientes tienen anticuerpos anti-IgA circulantes los cuales pueden producir reacciones anafilácticas fatales cuando se les infunde IgA de cualquier origen como en una transfusión de sangre y/o componentes. INMUNOGLOBULINA IgE Código 906835 INMUNOGLOBULINA IgE ESPECÍFICA (RAST) Código 906834 Las manifestaciones clínicas de una reacción inmediata de hipersensibilidad (alérgica) se producen por la descarga de mediadores pro-inflamatorios tales como histamina, leucotrienos y prostaglandinas derivados de un complejo inmunoglobulina E/células efectoras (mastocitos y basófilos) cuando las células se unen a anticuerpos IgE que interactúan con el alérgeno. La determinación de los anticuerpos IgE séricos da una indicación de la respuesta inmune al alérgeno lo que puede estar asociado a una enfermedad alérgica. Los anticuerpos IgE intervienen en las enfermedades alérgicas porque sensibilizan a los mastocitos y los basófilos para que descarguen histamina y otros mediadores de inflamación cuando hay exposición a alérgenos. Los niveles séricos de IgE se elevan en muchos pacientes con enfermedades alérgicas tal como infecciones parasitarias, aspergilosis alérgica broncopulmonar y en el síndrome hiper IgE que es muy poco común. El RAST mide los niveles de anticuerpos circundantes específicos para un determinado alérgeno, entre los que se encuentran polen, epitelios de animales, hongos, mohos, ácaros, venenos de insectos y una gran variedad de alimentos. Es una prueba de gran utilidad para el estudio de las alergias. 340 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana refrigerada y 6 meses congelada a -20ºC. La muestra para RAST es estable 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. El resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: IgE: Inmunoanálisis de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas IgE RAST: IMMUNOCAP Valores de referencia: IgE: ≤ 100 UI/mL RAST en kU/L Clase 0 negativo: 0,00 – 0,34 Clase 1 baja detección: 0,35 – 0,69 Clase 2 moderada: 0,70 – 3,49 Clase 3 elevada: 3,50 – 17,49 Clase 4 alta: 17,50 – 49,99 Clase 5 muy alta: 50,00 – 99,99 Clase 6 demasiado alta: ≥ 100,00 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de los anticuerpos IgE es útil para establecer el diagnóstico de una enfermedad alérgica y para definir que alérgenos son los responsables de provocar los signos y síntomas entre los que pueden estar venenos de insectos, drogas, químicos, plantas o alimentos. La IgE se encuentra en procesos alérgicos, en las reacciones de hipersensibilidad y en enfermedades atópicas. Los receptores específicos de alta afinidad para la IgE se encuentran en las membranas de superficie de los mastocitos y basófilos y es por esto que juegan un papel clave en la generación de reacciones inmediatas de hipersensibilidad. Los niveles circulantes son extremadamente bajos, casi no detectables al nacimiento, pero aumentan con la edad. Manual de Procedimientos 11 341 INMUNOGLOBULINA ESTIMULANTE DE LA TIROIDES Código 904902F La enfermedad tiroidea autoinmune se caracteriza por la presencia de autoanticuerpos contra varios componentes tiroideos como el receptor de la hormona tiro-estimulante (TSHR), la peroxidasa tiroidea (TPO) y la tiroglobulina (Tg) así como por un infiltrado celular inflamatorio dentro de la glándula. Los autoanticuerpos a TSHR también se conocen como estimulador tiroideo de larga duración o inmunoglobulina estimulante del tiroides (TSI). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 90 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Bioanálisis recombinante Valores de referencia: Índice TSI ≤ 1,3 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta es una prueba de segundo orden para evaluar enfermedad tiroidea autoinmune en los siguientes casos: 1. Diagnóstico diferencial de la etiología de tirotoxicosis en pacientes con signos clínicos ambiguos y/o contraindicación para TAC (embarazo o lactancia) o resultado indeterminado del TAC. 2. Diagnóstico de enfermedad de Graves con evidencia clínica importante pero que presenta pruebas tiroideas normales. 3. Determinar el riesgo de tirotoxicosis neonatal en un feto de madre con enfermedad de Graves activa o reciente. 4. Establecer el diagnóstico diferencial, en el primer trimestre del embarazo, entre tirotoxicosis gestacional versus manifestación o recurrencia de enfermedad de Graves. 5. Evaluar el riesgo de recaída de enfermedad de Graves después de tratamiento anti-tiroideo. INSULINA ULTRASENSIBLE Código 904704 INSULINA, CURVA Código 904703 342 Fundación Santa Fe de Bogotá INSULINA LIBRE Código 862785F INSULINA, ANTICUERPOS [IAA] POR RIA Código 906425 INSULINA, ANTICUERPOS ISLOTES [ICA] Código 906426 La insulina es una hormona polipéptidica pequeña que se forma a partir de un precursor, la proinsulina, en las células b del páncreas y su principal función es regular el almacenamiento y producción de los carbohidratos, especialmente la glucosa. En la proinsulina las cadenas a y b están unidas por un péptido conector llamado “péptido C” que junto con la insulina se almacena y se secreta en los gránulos secretores de las células de los islotes del páncreas. La determinación de los niveles de insulina libre es comparable a la de insulina total en ausencia de anticuerpos anti-insulina. El tratamiento prolongado de la diabetes mellitus tipo 1 con insulina exógena derivada de diferentes fuentes como humana, buey o porcina puede dar lugar a la presencia de anticuerpos IgG debido a péptidos (impurezas) que están presentes en la mayoría de las preparaciones farmacológicas y que se constituyen en elementos inmunogénicos. Casi todos los pacientes (90%) que reciben insulina porcina o bovina y el 50% de los que reciben la humana desarrollan anticuerpos después de varias meses de tratamiento; la presencia de estos anticuerpos hacen imposible obtener valores exactos de insulina sérica y en estos casos el péptido-C es la mejor prueba para determinar secreción de insulina. También existen autoanticuerpos a insulina en individuos que nunca han sido tratados con la droga así como los anticuerpos a células de islotes del páncreas. Algunos individuos con desordenes inmunológicos (LES, artritis reumatoidea, enfermedad de Graves, mieloma múltiple y gamopatía monoclonal benigna) pueden desarrollar hipoglicemia asociada con anticuerpos anti-insulina. Este síndrome autoinmune se caracteriza por hiperglicemia postprandial e hipoglicemia en ayuno. En la mayoría de estos casos hay un aumento artificioso de insulina o péptido-C disminuido. Los auto-anticuerpos dirigidos contra las células de los islotes pancreáticos (ICA-IgG) son característicos de la diabetes tipo I o diabetes mellitus insulinodependiente (DMID). Aunque los anticuerpos atacan todas las células de los islotes, la destrucción celular parece ser específica para las células b productoras de insulina lo que lleva a una deficiencia de insulina. Manual de Procedimientos 11 343 Aproximadamente el 70% de pacientes recién diagnosticados como DMID tienen elevación de ICA-IgG; en individuos pre-diabéticos genéticamente, los autoanticuerpos se presentan muchos años antes de la aparición de la enfermedad. Títulos elevados de estos anticuerpos en parientes de pacientes con DMID confieren un riesgo relativo del 75% para el desarrollo de este tipo de diabetes; si la elevación del título se acompaña de una disminución marcada de la secreción de insulina hay una probabilidad del 95% de que el familiar desarrollará la diabetes en los próximos 12 meses. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se requiere que el paciente esté en ayunas y no se aceptan sueros hemolizados pues en estas muestras hay degradación de la hormona y se obtienen resultados falsamente disminuidos. Las muestras de pacientes diabéticos tratados con insulina bovina o porcina pueden contener anticuerpos anti-insulina que podrían producir interferencia con el resultado de la prueba. Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C.. Para realizar la curva de insulina se toma una muestra de sangre basal, se administran 75-100 g de glucosa oral en el adulto y 1,5 g por Kg de peso en niños y se toman tres muestras seriadas a los 30, 60 y 90 minutos. Para la prueba de insulina libre se requiere muestra de sangre total tomada con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 12 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Para los anticuerpos a insulina y anti-ICA se requiere muestra de suero que es estable 1 semana refrigerada y 2 meses congelada. Las pruebas de insulina libre, anticuerpos a insulina y anti-ICA se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Insulina e insulina libre: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Anticuerpos a insulina: Radioinmunoanálisis enzimático de enlace (RIA) Anticuerpos anti-ICA: Técnica de inmunofluorescencia indirecta Valores de referencia: Insulina ultrasensible: 1,9–23 µIU/mL Anticuerpos a insulina: ≤ 0,4 unidades kronus/mL Insulina libre: 1,5-14,9 µIU/mL 344 Fundación Santa Fe de Bogotá Anticuerpos anti-ICA: Negativo: ≤ 5 unidades JDF Las unidades del valor de referencia han sido estandarizadas con un suero suministrado por la Fundación Juvenil de Diabetes (JDF) de USA. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se encuentran valores elevados en pacientes con tumores pancreáticos secretores de insulina (insulinomas) que producen hipoglicemia; el hallazgo de hipoglicemia en ayunas (< 57 mg/dL) con concentraciones séricas elevadas de insulina (> 20 µUI/mL) es considerado como prueba diagnóstica de insulinoma. En casos dudosos la determinación de insulina, en conjunto con dosis de estímulo de tolbutamida o calcio juega un papel muy importante en la identificación y localización de insulinomas. También se pueden encontrar niveles elevados en hiperinsulinismo, algunos pacientes con diabetes tipo 2, obesidad, dieta alta en carbohidratos, inactividad, después de ingestión de alimentos, acromegalia, síndrome de Cushing, tirotoxicosis y en tratamiento con anticonceptivos orales. Después de administrar 100 g de glucosa la insulina hace un pico a la hora pero en individuos obesos o con diabetes incipiente el pico puede presentarse a las 2 horas. En diabéticos juveniles o con diabetes tipo 1 no hay elevación de la insulina. Hay disminución en ayuno prolongado de más de 72 horas y en casos de diabetes tipo 1 no tratada. La insulina libre se debe determinar cuándo se sabe que el paciente tiene anticuerpos anti-insulina. La prueba para anticuerpos anti-ICA es un marcador de destrucción autoinmune de células de islotes del páncreas y por lo tanto útil en el diagnóstico de diabetes tipo 1 y estados pre-diabéticos. Su resultado se debe correlacionar con los niveles de autoanticuerpos anti-insulina. INTERFERÓN ALFA Código 862727F INTERFERÓN BETA 1A (IFNB-1A) ANTICUERPOS NEUTRALIZANTES Código 862761F Manual de Procedimientos 11 345 INTERFERÓN BETA 1B (IFNB-1B) ANTICUERPOS NEUTRALIZANTES Código 862762F El Interferón- alfa es uno de las tres especies de interferón que posee varias propiedades biológicas entre ellas la actividad inmune-moduladora, la actividad anti-tumoral y la anti-viral. El interferón alfa es más efectivo para tratar los tumores de riñones, melanoma, mieloma múltiple, y algunos tipos de linfomas y leucemias. Niveles elevados de interferón-alfa se encuentran en enfermedad viral, síndrome disfuncional de fatiga crónica y en algunas enfermedades inflamatorias. El interferón beta es un interferón de tipo I producido por fibroblastos con efecto antiviral, antiproliferativo e inmunomodulador. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra de Interferón alfa es estable por 1 año congelada a -20ºC. La muestra de interferón beta es estable 5 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Interferón alfa: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Interferón beta: Inmunodetección Multianalítica (MAID) Valores de referencia Interferón alfa: ≤ 5 IU/mL Anticuerpos neutra- Interferón beta: Título ≤ 1:20 lizantes: Utilidad de la prueba e interpretación del resultado En pacientes que están en tratamiento con interferón-beta 1a/1b para esclerosis múltiple se han encontrado niveles elevados (Ac >1:100) de anticuerpos neutralizantes a interferón-beta que se correlacionan con pérdida de la bio-actividad del interferón. En pacientes con niveles de anticuerpos entre >1:20 a <1:100 todavía hay bio-actividad del interferón pero no se correlaciona con título exacto de anticuerpos. 346 Fundación Santa Fe de Bogotá INTERLEUQUINA 6 Código 862643F INTERLEUQUINA 5 Código 862597F INTERLEUQUINA 8 Código 862740F La IL-6 (Interleuquina-6) es una glicoproteína segregada por los macrófagos, células T, células endoteliales y fibroblastos. Su liberación está inducida por la IL-1 y se incrementa en respuesta al factor de necrosis tumoral alfa (TNFa). Es una citoquina con actividad antiinflamatoria y pro-inflamatoria. La Interleuquina 5 o IL-5 es producida por los Linfocitos T ayudadores-2 y los mastocitos. Sus funciones son estimular el crecimiento de las células B y aumentar la secreción de inmunoglobulinas. Actúa también como mediador en la activación de los eosinófilos. La interleuquina-8 (IL-8) es una citoquina de la familia de las quimiocinas, de naturaleza pro-inflamatoria. Su síntesis se realiza en fibroblastos, célula endotelial, monocito y macrófagos y en la célula dendrítica. Es un potente factor quimiotáctico de neutrófilos, regula la producción de proteínas de adhesión y la formación de lípidos bio-activos. Amplifica la respuesta inflamatoria local y estimula la angiogénesis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma para IL-6. La muestra es estable por 24 horas a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 7 meses congelada a -20°C. La muestra para determinar IL-5 es estable dos meses congelada a -20°C. Para IL-8 y IL-5 se requiere suero. La muestra es estable dos meses congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: IL-6 e IL-5: Inmunoanálisis enzimático de alta resolución (ELISA) IL-8: Radioinmunoanálisis enzimático (RIA) Valores de referencia: IL-6: 0,31-5 pg/mL IL-5: < 10,1 pg/mL IL-8: 10-80 pg/mL Manual de Procedimientos 11 347 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar los niveles de IL-6, IL-5 e IL-8. IONTOFORESIS, ELECTROLITOS EN SUDOR Código 903607 La fibrosis quística (mucoviscidosis, FQ) del páncreas es una entidad genética autosómica recesiva, que se presenta en niños, caracterizada por secreción anormal de varias glándulas exocrinas como son páncreas, salivares, peritraqueales, peri-bronquiales, lagrimales, sudoríparas y mucosas del intestino delgado. El diagnóstico por laboratorio depende en gran parte de la demostración del aumento del sodio y cloro en el sudor, aunque recientemente se puede hacer el diagnóstico por tecnología del ADN. Condiciones del paciente y/o de la muestra Recolección del sudor cutáneo por estimulación de las glándulas sudoríparas con pilocarpina. Esta recolección debe hacerse con dispositivo especial colocado en el brazo del paciente lavado previamente con alcohol y abundante agua desionizada. Metodología: Sistema Macroduct para la recolección de sudor. Iontoforesis en equipo Valores de referencia: Negativo 17-70 mmol/L Inconcluyente 70-90 mmol/L Positivo ≥ 90 nmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Para confirmar el diagnóstico de enfermedad fibroquística del páncreas. Esta prueba se debe realizar en niños con sintomatología clara de FQ. Una prueba positiva puede confirmar el diagnóstico clínico pero una prueba negativa no lo descarta. Se pueden presentar falsos positivos en desnutrición, displasia ectodérmica hiperhidrótica, diabetes insípida nefrogénica, insuficiencia renal, deficiencia de G-6-PD, hipotiroidismo, mucopolisacaridosis y fucosidosis. La prueba no tiene mucha validez en personas adultas pues la diferencia entre los niveles de electrolitos normales y anormales no es tan clara como en los niños. 348 Fundación Santa Fe de Bogotá ISOAGLUTININAS Código 906427 Ver determinación de grupos sanguíneos. Pag………………288 ITRACONAZOLE Código 862683F El Itraconazole (Onmel®, Sporanox®) es una droga que se usa para el tratamiento de infecciones pulmonares micóticas para evitar su diseminación a otras áreas del organismo. También se usa para tratar infecciones por hongos en uñas de pies y manos, en boca, garganta y esófago. Se requiere hacer monitoreo terapéutico porque hay posibilidad de absorción inadecuada e interacciones con otras drogas. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Rango terapéutico: Dosis constante de 200 mg: Intravenosa 7 días: 2,9 +/- 1,9 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para verificar absorción sistémica o eliminación rápida de la droga administrada por vía oral. Manual de Procedimientos 11 349 J JC (POLIOMA) VIRUS ANTICUERPOS Código 862738F El virus JC (JCV) es un miembro del genero Polyomavirus, pequeño no encapsulado que contiene ADN. La infección primaria ocurre en la infancia con una prevalencia del 80%. El virus puede permanecer latente por muchos años, pero se puede reactivar en pacientes inmunosuprimidos especialmente en los que padecen SIDA. El virus es el causante de la leucoencefalopatía multifocal progresiva que es una enfermedad desmielinizante severa, generalmente mortal, del SNC. Condiciones del paciente y/o de la muestra Líquido cefalorraquídeo tomado en tubo estéril por el médico tratante y enviado rápidamente al laboratorio. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 7 días a refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: PCR cuantitativa en tiempo real Valores de referencia: Carga viral: ≤ 500 copies/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Establecer el diagnóstico de la leucoencefalopatía multifocal progresiva. La detección del ADN del JC virus se basa en la amplificación del ADN total por medio de la PCR en tiempo real y la detección de las secuencias genómicas del virus a partir del ADN extraído de la muestra. Jo1, ANTICUERPOS Código 906327 Los autoanticuerpos al antígeno Jo-1 (histidyl-tRNA sintetasa) se encuentran en el 30% de pacientes adultos con miositis (polimiositis adquirida o idiopática, dermatomiositis y sus síndromes relacionados) y son particularmente comunes (60%) en pacientes con polimiositis asociada a fibrosis pulmonar intersticial o alveolitis fibrosante criptogénica. Es más frecuente la polimiositis que se presenta en la artritis reumatoidea inducida por d-penicilamina que la polimiositis idiopática y en estos casos el anticuerpo Jo-1 desaparece después de que se retira la droga. 350 Fundación Santa Fe de Bogotá En pacientes con el síndrome anti-sintetasa estos anticuerpos se encuentran más frecuentemente asociados a otras aminoacil-sintetasas, alanil, isoleucil y glicil; el síndrome se caracteriza por comienzo agudo, miositis que responde a esteroides con enfermedad pulmonar intersticial, fiebre, artritis simétrica y fenómeno de Raynaud. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica de inmunoanálisis enzimático en microplaca (MicroELISA) Valores de referencia: Negativo: < 20 unidades Positivo débil: 20-39 unidades Positivo moderado: 40-80 unidades Positivo alto: > 80 unidades Utilidad de la prueba e interpretación del resultado De ayuda en el diagnóstico y control del tratamiento en casos de polimiositis y dermatomiositis. La presencia del anticuerpo es más común en polimiositis que en dermatomiositis y raramente se encuentra en otras enfermedades del tejido conectivo. Un resultado positivo es consistente con el diagnóstico de polimiositis y sugiere un aumento en el riesgo de compromiso pulmonar en estos pacientes. Hay evidencia que los títulos del anti Jo-1 pueden fluctuar en concordancia con la actividad de la miositis y que su determinación es de gran utilidad en la evaluación clínica de estos pacientes. Manual de Procedimientos 11 351 L LA/SSB, ANTICUERPOS POR EIA Código 906430 Ver: Anticuerpos a antígenos nucleares extractables (anti-enas) pag…………106 LACTÓGENO PLACENTARIO HUMANO (HPL) Código 862632F El Lactógeno Placentario Humano llamado también somatomamotropina es un polipéptido que se produce durante el embarazo por las células trofoblásticas de la placenta. El nivel del HPL en el suero materno está directamente relacionado con la función placentaria y el bienestar del feto. La disminución de los niveles durante el embarazo es una indicación de sufrimiento fetal. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 2 semanas congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Hombres y mujeres no embarazadas: ≤ 0,10 μg/mL 1er trimestre del embarazo: 0,20-2,10 μg/mL 2do trimestre del embarazo: 0,50-6,70 μg/mL 3er trimestre del embarazo: 4,50-12,80 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar adecuada función placentaria y bienestar fetal. LAMOTRIGINA Código 905217F La droga Lamotrigina (Lamictal) está aprobada para tratamiento del trastorno bipolar tipo I y para una amplia variedad de desordenes convulsivos que incluyen el síndrome Lennox-Gastaut, las convulsiones tónico-clónicas generalizadas y las parciales. También se usa en el tratamiento de la migraña, la neuralgia del trigémino y en la depresión refractaria a tratamiento convencional. 352 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y la muestra debe ser tomada 8 a 12 horas después de la última dosis. Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulante heparina o EDTA para obtener plasma. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/MS). Rango terapéutico: 4-18,0 μg/mL. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba sirve para controlar los niveles séricos de lamotrigina, evaluar persistencia al tratamiento y ajustar la dosis de la droga cuando se da junto con otros anticonvulsivantes que interactúan fármaco-cinéticamente con lamotrigina. LEGIONELLA PNEUMONIAE, ANTICUERPOS Código 906027 LEGIONELLA, ANTÍGENO Código 906322 La Legionella pneumophila puede causar enfermedad pulmonar tanto en individuos normales como en inmunosuprimidos. La infección puede ser esporádica en la forma de neumonía adquirida en la comunidad o epidémica. La neumonía, que se conoce también como enfermedad de los legionarios, ocurre más frecuentemente en individuos severamente inmunosuprimidos y la forma más leve de la enfermedad, referida como fiebre Pontiac, es más prevalente en personas normales. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y2 meses congelada a -20°C Para la detección del antígeno se requiere muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. También puede utilizarse muestra de secreciones pulmonares como esputo, aspirado tras-traqueal, lavado. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Anticuerpos por Inmunofluorescencia indirecta. Manual de Procedimientos 11 353 Inmunofluorescencia directa para el antígeno en secreciones pulmonares. Antígeno en orina: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Antígeno: Anticuerpos IgM: Negativo IgG/ Título ≤ 1:64 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Aproximadamente el 85% de los casos documentados de infección por Legionella son causados por Legionella pneumophila de los serogrupos 1 a 6. El diagnóstico definitivo de la infección se hace por el aislamiento del microorganismo en medio de cultivo especializado (agar con extracto de levadura y carbón bufferizado). La sensibilidad del método de fluorescencia directa de las secreciones pulmonares es bajo pues está entre 25-70% por lo cual es más útil la determinación en orina del antígeno o la determinación de los anticuerpos séricos. LEISHMANIA MUCOCUTANEA [VISCERAL] ANTICUERPOS POR IFI Código 906121 La leishmaniasis visceral (kala azar) es una infección protozoaria intracelular diseminada que ataca principalmente el sistema reticuloendotelial (hígado, bazo, medula ósea) y es causada por las Leishmania donovani, Leishmania chagasi, o Leishmania infantum (complejo Leishmania donovani). La trasmisión es por la picadura de la mosca de la arena (sandflies). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Negativo Título ≤ 1:16 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El diagnóstico definitivo requiere la documentación microscópica de los amastigotes intracelulares característicos en extendidos teñidos obtenidos de cultivos de aspirados tisulares de bazo, ganglio linfático y medula ósea. La detección de los anticuerpos séricos al antígeno recombinante K39 de la Leishmania donovani es un método alterno, con buena sensibilidad (95-100%), no invasivo para el diagnóstico de la leishmaniasis visceral. 354 Fundación Santa Fe de Bogotá LEPTINA Código 839371 La leptina es una hormona derivada de los adipocitos que es esencial para la regulación del peso corporal. La producción de la leptina está bajo control neuroendocrino de tal manera que la concentración sérica varia directamente con la cantidad de triglicéridos almacenados en los depósitos de tejido adiposo. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 30 días congelada a -20°C. El suero debe separarse rápidamente y congelarse en el término de una hora. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (ELISA) Valores de referencia: Adultos Hombres: 2,0 - 5,6 ng/mL Mujeres: 3,7 – 11,1 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado´ Útil para el estudio de pacientes con problemas de obesidad. LEPTOSPIRA ANTICUERPOS IgM Código 862705F LEPTOSPIRA, SEROTIPIFICACIÓN Código 901311 La leptospirosis es una enfermedad zoonótica de prevalencia mundial. Aunque los animales salvajes son el reservorio natural de las cepas patógenas, la mayor fuente de infección en los humanos son los animales domésticos. La trasmisión se hace por contacto directo con la tierra, alimentos o agua contaminados con la orina del animal infectado. La enfermedad va desde una infección autolimitada hasta meningitis que se presenta en el 40% de los pacientes y falla hepatorrenal (síndrome de Weil) que puede ser fatal. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra para IgG es estable 14 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C; para IgM la muestra es estable 48 horas refrigerada y Manual de Procedimientos 11 355 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Serotipificación: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Anticuerpos IgM: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Anticuerpos IgG: Negativo <1:80 Anticuerpos IgM: Negativo: Índice menor de 0,9 Indeterminado: Índice 0,9 – 1,1 Positivo: ≥ 1,1 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Durante la primera semana de la infección las Leptospiras se detectan con mayor éxito en cultivos de sangre, orina y/o LCR. Después de este tiempo y por muchos meses después las Leptospiras se eliminan de una manera intermitente en la orina pero el número de microorganismos es bajo. La orina se debe cultivar inmediatamente después de tomada porque los microorganismos no sobreviven en orina acídica por más de una pocas horas. Hay 16 serotipos de Leptospira que pueden producir infección y la respuesta de anticuerpos puede ser del tipo IgG o IgM. El anticuerpo IgM se detecta dentro de las dos primeras semanas de la infección y hace un pico entre las 2-4 semanas. LEVETIRACETAM Código 862629F La droga Levetiracetam se utiliza en el tratamiento de convulsions parciales, mioclónicas y tónico-clónicas y también para estados maníacos y en la profilaxis de la migraña. Se excreta por vía renal con una vida media de 7 horas en adultos y ligeramente menor en niños. Por la posibilidad de producir daño renal se requiere controlar su nivel sérico y/o ajustar la dosis más conveniente. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra se debe tomar antes de la siguiente dosis Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulantes EDTA o heparina de sodio para obtener plasma. La muestra es estable por 14 días a temperatura ambiente, 28 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/MS) 356 Fundación Santa Fe de Bogotá Rango terapéutico: Valle 500 mg 3,1 – 10,0 1.000 mg 4,9 – 37,1 1.500 mg 7,0 – 34,0 Pico 500 mg 10,0 – 25,0 1.000 mg 30,0 – 40,0 1.500 mg 36,1 – 70,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación es útil para controlar el nivel sérico de la droga especialmente en pacientes con enfermedad renal, determinar si el paciente está tomando la droga y evaluar posibilidad de toxicidad. LIDOCAINA (MONOETILGLICINEXILIDIDA-MEGX) Código 905002 La droga Lidocaína se usa frecuentemente como anestésico local, pero también es efectiva para controlar, en adultos y niños, la arritmia y la fibrilación ventricular. La lidocaína se convierte en el hígado en la monoetilglicinexilidida (MEGX) sustancia cuya determinación tiene aplicación en evaluar la función hepática en trasplantes, medicina crítica y modelos experimentales debido a que tiene un metabolismo hepático muy rápido. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente, 30 días en refrigeración y 360 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de gas Rango terapéutico: 1,2-6,0 μg/mL Nivel tóxico: >6,0 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar la dosis óptima durante el manejo de las arritmias ventriculares después de un infarto del miocardio o durante la manipulación cardíaca durante cirugía. Manual de Procedimientos 11 357 LIPASA Código 903847 La lipasa es una glicoproteína que requiere para su actividad catalítica la presencia de sales biliares y un cofactor llamado colipasa. Está presente en cantidades significativas únicamente en el páncreas y en mucho menor cantidad en otros órganos como estómago, intestino, glándulas salivares, células grasas, leucocitos y leche. Es producida por las células acinares del páncreas exocrino; su papel fisiológico es el de hidrolizar, en el intestino delgado, los triglicéridos de cadena larga. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 21 días en refrigeración y 5 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible a las 48 horas a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría Valores de referencia: 23-300 U/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La lipasa sérica se eleva rápidamente en pacientes con lesiones del páncreas como pancreatitis aguda y recurrente, absceso o pseudoquiste, trauma y carcinoma; también se eleva en obstrucción del colédoco, peritonitis, infarto y obstrucción intestinal, abscesos abdominales, falla renal y por la acción de algunas drogas como anticolinérgicos y opiáceos. La lipasa tiene mayor especificidad (> 60%) que la amilasa para el diagnóstico de pancreatitis aguda y cuando se determina simultáneamente con la amilasa se obtiene una sensibilidad clínica del 95% para el diagnóstico. Los niveles de lipasa sérica cambian de manera similar a la amilasa después del comienzo de la pancreatitis aguda; se empiezan a elevar a las 2-6 horas, alcanzan su valor máximo entre 12-30 horas y permanecen elevadas por 2-4 días, aunque la lipasa generalmente puede permanecer elevada por más tiempo. LIPOPROTEÍNA A (Lpa) Código 903431 Pertenece a una familia heterogénea de partículas lipoprotéicas y consiste de una molécula de apolipoproteína (a) unida a una de apolipoproteína B-100 y un núcleo rico en lípidos parecida a LDL. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y no debe cambiar sus hábitos alimenticios en las tres semanas previas a la prueba, no ingerir bebidas alcohólicas en las 72 358 Fundación Santa Fe de Bogotá horas previas al examen y realizar ayuno completo 12 horas antes Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o heparina sódica para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: ≤ 75 nmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de la Lp(a) es útil para evaluar el riesgo de enfermedad coronaria y otras enfermedades vasculares en poblaciones específicas, cuando se usa en conjunto con otros factores de riesgo como historia familiar, hábito de fumar, hipertensión, diabetes, obesidad y otras pruebas de lípidos. Hay elevación de Lp(a) en ateroesclerosis, hipercolesterolemia familiar de tipo genético, en ciertos fenotipos Apo(a), enfermedad renal, síndrome nefrótico y diabetes mellitus con microalbuminuria. LÍQUIDO ASCÍTICO (EXAMEN FÍSICO Y CITOQUÍMICO) Código 903849 Normalmente hay 50 mL de líquido en la cavidad peritoneal producido por las células mesoteliales, cuya composición bioquímica (no celular) es muy similar a la de los líquidos pleural y pericárdico. El líquido peritoneal se debe analizar básicamente en tres condiciones: 1) Acumulación anormal de líquido en la cavidad peritoneal. 2) Estudio de líquido de diálisis y 3) Lavado peritoneal para la detección de sangrado intraabdominal o para citología cuando hay sospecha de carcinoma. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra de líquido debe tomarse por punción abdominal (paracentesis) utilizando jeringa estéril y colocarse en tubo estéril especialmente si va a hacerse cultivo microbiológico. La muestra es estable 30 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Metodología: Examen microscópico directo para evaluar celularidad y presencia de bacterias. Bioquímica de diferentes constituyentes del líquido como proteínas, glucosa, triglicéridos, colesterol, amilasa y fosfatasa alcalina. También se debe determinar el gradiente entre albúmina sérica y la del líquido (GASA). Cultivo bacteriológico Citología Valores de referencia: Proteínas elevadas (> 10g/L) en perforación intestinal Manual de Procedimientos 11 359 Glucosa similar a la del suero pero puede estar elevada en perforación intestinal y peritonitis bacteriana. Triglicéridos : > 110 mg/dL en ascitis quilosa Colesterol: > 45 mg/dL en ascitis por tumor maligno Amilasa: elevada en el 90% de los casos de pancreatitis, traumatismo pancreático y en pseudoquiste del páncreas. Fosfatasa alcalina: elevada en obstrucción biliar GASA= (albúmina sérica) – (albúmina de líquido peritoneal) Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Si el líquido es hemorrágico debe descartarse que la punción haya sido traumática o que se deba a hemorragia intraperitoneal. Si es opaco o turbio puede deberse a una pancreatitis, infarto intestinal, estrangulación de víscera o perforación intestinal traumática o a una infección bacteriana. Si el líquido es de aspecto lechoso puede ser debido a un derrame quiloso por lesión o bloqueo del conducto torácico debido a linfoma, carcinoma, tuberculosis o infección parasitaria. La determinación del gradiente GASA ayuda a determinar si la ascitis es debida a hipertensión portal o por otra causa. Un GASA ≥ 1,1 indica hipertensión portal (cirrosis, hepatitis severa, carcinoma hepático extenso, síndrome de Budd-Chiari, trombosis de la vena porta) con una sensibilidad del 90% y un GASA ≤ 1,1 indica ascitis por causa diferente; el GASA no es confiable en pacientes con hipoalbuminemia severa. LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR) Código 903850 El LCR se forma en un 60% en los plexos coroideos cerebrales de los ventrículos laterales y en menor proporción en los plexos de los ventrículos III y IV y del líquido extracelular a través del epéndimo del sistema ventricular. La producción del LCR es de 0.3-0,4 mL/minuto, su volumen total aproximado es de 150 mL y su función principal es hidrostática como soporte del cerebro y la médula espinal; regula la presión intra-craneana, realiza intercambio metabólico y participa en procesos inmunológicos. Su aspecto debe ser cristalino transparente de allí la definición “como agua de roca”. Condiciones del paciente y/o de la muestra Lo obtiene el médico por punción realizada en los espacios subaracnoideos (L3 - L4) o intraventricular. La punción no debe ser traumática pues la contaminación del LCR con sangre produce alteración del recuento celular y los parámetros bioquímicos. Metodología: Se utilizan diferentes metodologías, que van desde el examen 360 Fundación Santa Fe de Bogotá microscópico del LCR hasta análisis químicos y microbiológicos Valores de referencia: Edad Leucocitos total (mm3) Neutrófilos % del total Glucosa mg / dL Glucosa LCR / Proteínas sangre mg / dL Prematuros 0 – 29 0 – 66 24 - 63 0,55 - 1,05 65-150 RN a térmi- 0 – 22 no +/- 61 34 - 119 0,44 - 2,48 20 - 170 0 - 4 sema- < 22 nas 0 – 15 36 - 61 no reportado 35 - 189 4 - 8 sema- < 15 nas 0 – 42 29 - 62 no reportado 19 - 121 > 6 sema- < 5 nas 0 – 35 45 - 65 0,6 20 - 45 Adultos 0 – 35 50 - 85 0,6 - 0,7 15 - 45 <5 Referencia: Bonadio WA. Ped Infect Dis J. 1992;11: 423-432 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado En el cuadro siguiente se resume la interpretación en las entidades más comunes: Entidad Presión mm Apariencia Células mm3 Proteínas mg / dL Glucosa mg / dL Normal 50 – 200 Cristalino transparente 0-10 linfos y monos < 45 50 - 85 M e n i n g i t i s Aumentada b a c te r i a n a 200 – 500 aguda Turbio opalescente Puede coagularse 100 - 10.000 50 - 500 Predominio neutrófilos Muy baja o ausente M e n i n g i t i s Aumentada tuberculosa 200 – 500 o micótica Turbio con apariencia fibrinoide 10 - 500 10 - 300 Predominio linfocitos 20 - 40 M e n i n g i t i s Aumentada viral 200 – 500 Claro o ligeramente Turbio 10 - 500 45 - 200 Predominio linfocitos Normal E s c l e r o s i s Normal múltiple Claro incoloro Normal o 10- Normal o 50 linfocitos 45 - 100 Normal Generalmen- Normal o te normal 45 - 100 Normal Tr o m b o s i s Generalmen- Claro cerebral te normal Manual de Procedimientos 11 361 Hemorragia Generalmen- Hemorrágico o N u m e ro s o s 45 -100 cerebral te normal xantocrómico eritrocitos Normal o ligeramente aumentada Hemorragia Aumentada subaracnoi- 200 – 500 dea Normal Hemorrágico o N u m e ro s o s 50 - 1000 xantocrómico eritrocitos Tumor Generalmen- Claro o cerebral te xantocrómico M e tá s t a s i s elevada cerebrales 0 - 50 linfocitos Células atípicas Normal o Normal o liligeramen- geramente te disminuida Au m e n t a das Para determinar el posible agente etiológico de la meninigitis bacteriana se utiliza la prueba de antígenos bacterianos (ver esta prueba). En general se puede anotar que en los recién nacidos los organismos más frecuentes son bacilos Gram-negativos, Estreptococo grupo B y menos frecuente Listeria monocytogenes; en niños menores de dos meses es frecuente el Haemophilus influenzae tipo B y en adultos especialmente ancianos el Streptococcus pneumoniae y menos frecuente la Neisseria meningitidis. Hay otro grupo de enfermedades infecciosas que pueden comprometer el cerebro como son las infecciones oportunísticas en pacientes inmunosuprimidos por drogas, deficiencias congénitas o adquiridas como el SIDA, enfermedades malignas como leucemias y linfomas, post-trasplantados y post-esplenectomizados. En estos casos es frecuente encontrar meningitis por hongos tales como Histoplasma capsulatum, Criptococo neoformans y otros. LÍQUIDO PLEURAL Código 903852 El espacio pleural contiene normalmente entre 7-14mL de líquido pleural. Un incremento en su formación puede deberse a un aumento de la presión hidrostática o disminución de la presión oncótica determinando un trasudado, o a una alteración de la permeabilidad vascular, implante de células malignas en la pleura y/o bloqueo del drenaje linfático determinando un exudado. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra de líquido se toma por toracocentésis (punción intercostal), que debe ser realizada por el médico. Metodología: Se utilizan diferentes metodologías, que van desde el examen microscópico de examen directo hasta análisis químicos y microbiológicos Valores de referencia: Diferenciación entre exudado y trasudado Criterios de Light: 362 Fundación Santa Fe de Bogotá 1. Relación proteínas líquido pleural / plasma > 0,5 2. Relación LDH líquido pleural / plasma > 0,6 3. LDH líquido pleural > 200 Con uno solo de estos criterios se considera al líquido pleural como exudado. Los trasudados no presentan ninguno de estos parámetros. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los siguientes parámetros del líquido ayudan a hacer el diagnóstico de la etiología en los casos de derrame pleural: pH < 7.2: empiema, pleuritis tuberculosa, malignos, ruptura esofágica, reumatoideo, lupus, urinotorax. Glucosa <60 mg/dL: infeccioso, reumatoideo, tuberculoso, lupus, ruptura esofágica. Amilasa > 200 U/dL: pancreatitis, ruptura esofágica, malignos, ruptura de embarazo ectópico. Factor reumatoideo, anticuerpo antinuclear, células LE: enfermedades del tejido conectivo. Complemento disminuido: lupus, artritis reumatoidea. Hemotórax (Hto >20%): trauma, malignos, hematológicas, infarto pulmonar. Recuento celular con predominio de polimorfonucleares: derrame paraneumónico, TBC incipiente. Recuento celular con predominio mononuclear: neoplasia, TBC, proceso agudo en resolución. Quiloso (TAG >110mg /dL): ruptura del conducto torácico (linfoma, cirugía torácica, trauma). Seudoquiloso (aumento del colesterol): derrames crónicos (ej. TBC, reumatoideo). Citología: El 59% de los pacientes en los que se comprueba derrame neoplásico presenta una citología positiva en la primera muestra, 65% en la segunda, 70% en la tercera. Si se añade la biopsia, los resultados aumentan a 81%. LÍQUIDO SINOVIAL Código 838720 CUPS 903858 Es un dializado ultrafiltrado del plasma que pasa a través de las membranas sinoviales y secretado por un complejo hialuronato-proteína de la membrana sinovial. Tiene un pH de 7,3-7,4 y está constituido por proteínas (1-3 g/dL) especialmente albúmina (55-70%), glucosa (70-110 mg/dL), ácido úrico igual al sérico, lactato (10-20 mg/dL) y hialuronato (0,3-0,4 g/dL). Su función principal es lubricación y nutrición del cartílago articular. Manual de Procedimientos 11 363 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de líquido sinovial tomada en tubo con anticoagulante heparina para evitar coagulación. Metodología: Se utilizan diferentes metodologías, que van desde el examen directo microscópico del líquido con luz corriente y polarizada para recuento de células y detectar presencia de cristales hasta análisis químicos y microbiológicos. Valores de referencia: Constituyentes químicos: los anotados anteriormente Apariencia: cristalina Color: amarillento pálido Viscosidad: variable Leucocitos: < 200/ μ L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Ayuda en el diagnóstico de enfermedades articulares especialmente la artritis reumatoidea y la séptica. La decisión más crucial en el estudio de un líquido articular es poder diferenciar entre artritis inflamatoria y no inflamatoria y la de identificar las causas de la artritis séptica. Los hallazgos más típicos se dan en la siguiente tabla: Prueba Proceso no inflamatorio Artritis Inflamatoria Artritis Séptica Aspecto Transparente Translúcido u opaco Turbio Color Amarillento claro Amarillo o verdoso Variable Leucocitos < 2.000 < 100.000 > 100.000 P o l i m o r fo n u - < 50 % cleares 50 -90 % > 95 % Cristales Ninguno inespecíficos (drogas) Pseudogota : pirofosfato de calcio Gota : urato monosódico Ninguno Diagnóstico Osteoartritis Artritis reumatoidea Enfermedad de Reiter Infección séptica mal tratada Infección por hongos o virus Gota o pseudogota Fiebre reumática aguda Infección bacteriana En pseudogota los cristales de pirofosfato de calcio aparecen como agujas, rectángulos o romboides moderamente birrefringentes y en gota los cristales de urato monosódico aparecen como agujas o varillas birrefringentes. 364 Fundación Santa Fe de Bogotá LISOZIMA EN PLASMA Código 862744F LISOZIMA EN ORINA Código 839371F La lisozima (muramidasa) es una enzima bacteriolítica que se encuentra principalmente presente en los granulocitos, monocitos e histiocitos. Hay cantidades muy pequeñas en los linfocitos y no hay presencia en mieloblastos, eosinófilos y basófilos. La lisozima plasmática se produce principalmente por la degradación de los granulocitos y monocitos y su concentración refleja la renovación de estas células. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable por 30 días congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 3 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Determinación en plasma por turbidimetría. Determinación en orina por Inmunodifusión radial cuantitativa Extendido de sangre periférica para coloración por inmunohistoquímica Valores de referencia: Plasma 2,7-9,4 μg/mL Orina < 4,0 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La lisozima plasmática se eleva en pacientes con leucemias mielocítica crónica o monocítica, desordenes mieloproliferativos e histiocitosis maligna y se disminuye con tratamiento exitoso y también en procesos infecciosos o inflamatorios. Los pacientes con leucemia linfocítica pueden tener valores disminuidos. Niveles elevados de lisozima urinaria se encuentran en insuficiencia renal, rechazo de trasplante renal, infección urinaria, pielonefritis, glomerulonefritis y nefrosis. También puede haber elevación en leucemia mielomonocítica aguda (FAB-M4) y crónica y en la leucemia mielocítica crónica. Manual de Procedimientos 11 365 LITIO Código 905313 Es una droga que altera el metabolismo intraneuronal de las catecolaminas y se utiliza en el tratamiento de la psicosis maníaco-depresiva o enfermedad bipolar. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no requiere ayuno, pero si la muestra debe tomarse 8 a 12 horas después de la última dosis. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible a las 48 horas a partir de la fecha de toma de la muestra. Metodología: Electrodo de ion selectivo Rango terapéutico: 0,5 - 1,5 mmol/L Rango potencialmente tóxico: > 1,5 mmol/L Toxicidad severa: > 2,5 mmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación se usa para controlar el cumplimiento de la toma de la droga y para evitar toxicidad por sobredosis. Los síntomas de intoxicación por litio incluyen torpeza, adormecimiento, debilidad muscular y ataxia. Puede haber aumento fisiológico por drogas como bendrofluazide, bumetanide, diclofenaco, hidroclorotiazida, ibuprofeno, indometacina, metoclopramida y triamteren. 366 Fundación Santa Fe de Bogotá M MAGNESIO Código 903854 MAGNESIO EN ORINA MICCIÓN SIMPLE Codigo 903854-2 MAGNESIO EN ORINA 24 HORAS Código 903854-3 El magnesio (Mg) es uno de los cationes intracelulares más importantes del organismo, después del potasio. Participa como activador de varias enzimas como fosfatasas, transfosforilasas, pirofosfatasas, carboxilasas y hexoquinasa; además es esencial para la preservación de la estructura macromolecular del ADN, ARN y ribosomas. El organismo adulto contiene 20-30 g de Mg distribuidos así: 50% en hueso, 45% en líquido intracelular y 5% en extracelular. Condiciones del paciente y/o de la muestra Si la toma de la muestra de sangre se hace con guantes en los cuales se usa como talco el estearato de magnesio u otro tipo de polvo, puede haber resultados elevados por contaminación del talco en el momento de la toma o en el manejo de puntas de pipeta, pipetas de transferencia, copillas de muestra y tapones de tubos. Se recomienda el uso de guantes libres de talco o polvos o el manejo de los materiales con las manos limpias sin guantes. Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable7 días en refrigeración y 1 año congelada a -20°C. No se pueden procesar muestras hemolizadas pues los eritrocitos tienen alto contenido de magnesio (tres veces más que el suero). Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes; no se necesita preservativo Después de recogida la muestra se debe acidificar a un pH de 1,0. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Suero: 1,8 - 2,5 mg/dL Orina de 24 horas: 72,9 – 121,5 mg/día Manual de Procedimientos 11 367 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la evaluación de desordenes por malabsorción, pancreatitis, anormalidades asociadas con depuración renal y en el control del tratamiento de la toxemia del embarazo. La deficiencia de Mg puede causar debilidad, temblores, tetania y convulsiones; la hipomagnesemia está asociada a hipocalcemia, alcoholismo crónico, algunos tipos de malnutrición, malabsorción, hemodiálisis crónica, drenaje gástrico prolongado, pancreatitis aguda, hipoparatiroidismo, glomerulonefritis crónica, hiperaldosteronismo y embarazo. Hay hipermagnesemia en pacientes con falla renal, deshidratación y enfermedad de Addison. Hay aumento fisiológico en terapia con amiloride, aspirina, litio, antiácidos (sales de Mg), medroxiprogesterona, extracto paratiroideo y progesterona; hay disminución por albuterol, benrofluazide, sales de calcio, clortalidona, cisplatino, citratos, ciclosporina, furosemida, gentamicina, glucagón, hidroclorotiazida, diuréticos mercuriales y neomicina. MALARIA ANTÍGENO Código 862671F La malaria es causada por los protozoarios Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, Plasmodium malariae, and Plasmodium knowlesi En nuestro medio se encuentran el P. falciparum y el P. vivax y de estos dos el que produce la enfermedad clínica más severa es el P.falciparum. (ver coloración para hemoparásitos). La coloración de la gota gruesa y el extendido periférico es el método estándar para el diagnóstico de la malaria pero bajo condiciones óptimas la sensibilidad de la gota gruesa al examen microscópico se estima entre 10 a 30 parásitos por microlitro de sangre. Sin embargo el diagnóstico microscópico requiere mucha experiencia y puede resultar con baja sensibilidad y especificidad en manos inexpertas, además la prolongada exposición a EDTA, las condiciones del trasporte de la muestra y el uso previo de drogas antimaláricas pueden alterar la morfología del parásito e impactar negativamente el estudio microscópico. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante. La muestra es estable por 7 días refrigerada. No se debe congelar. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: PCR en tiempo real Valores de referencia: No aplicable Un resultado positivo indica la presencia del ADN del Plasmodio y se debe indicar la especie. 368 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La malaria es una enfermedad que puede ser mortal luego el diagnóstico se debe hacer lo más rápidamente posible para detectar el ADN del Plasmodio e identificar la especie. La detección del parásito por PCR es un método alterno de diagnóstico que tiene buena sensibilidad y especificidad especialmente en parasitemias bajas y muy útil para la identificación de especie. MANGANESO EN SUERO Código 862752F El manganeso (Mn) es un elemento traza esencial para el organismo que tiene muchos usos industriales. La deficiencia de manganeso produce trastornos en el crecimiento y en la reproducción y altera la formación del hueso y el cartílago. Los trabajadores industriales absorben manganeso a través de los pulmones en las áreas de producción de hierro y acero por la exposición a humo y polvo de manganeso en el ambiente lo que puede llevar a neurotoxicidad. Condiciones del paciente y/o de la muestra Limpiar cuidadosamente la piel antes de la venopunción evitando la hemólisis y usar guantes libres de polvo talco. Sangre total tomada en tubo especial (lavado con ácido), sin anticoagulante para recolección de metales (tapa azul rey) para obtener suero. La muestra se debe centrifugar dentro de las 4 horas de recolección y es estable por 7 días a temperatura ambiente, 30 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes y lavado con ácido. No se necesita preservativo La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La determinación de manganeso también puede hacerse en sangre total, glóbulos rojos, orina de micción simple y en muestra de cabello. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Plasma acoplado inductivamente/Espectrometría de masa (ICPMS) Valores de referencia: Plasma o suero ≤ 1,2 µg/mL Orina de 24 horas Hombres 0,5-3 µg/L Mujeres 0,5-1,8 µg/L Manual de Procedimientos 11 369 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para controlar exposición laboral a manganeso y su concentración en nutrición parenteral. MEMBRANA BASAL DEL GLOMÉRULO, ANTICUERPOS Código 906431 Los anticuerpos a los antígenos de la membrana basal glomerular se presentan en glomerulonefritis en el sindrome de Goodpasture y con menor posibilidad en hemosiderosis pulmonar. Hay alguna evidencia de asociación genética con el HLA-DR2. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 14 días a temperatura ambiente, 28 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valor de referencia: Negativo ≤ 21U Positivo débil: 21-30 U Positivo moderado o alto: ≥ 30 U Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para evaluar pacientes con falla renal o hemorragia pulmonar de comienzo rápido y también ayuda al diagnóstico de síndrome de Goodpasture. MERCAPTOPURINA Código 862581F Mercaptopurina (6-MP, Purinetol) es una droga antineoplásica que también aparece como el metabolito de la droga inmunosupresora azatioprina. Aún no se han establecido los rangos terapéuticos ni tóxicos. Las dosis terapéuticas usuales producen concentraciones séricas de menos de 1.000 ng/mL Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con heparina como anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente, 21 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detección ultravioleta 370 Fundación Santa Fe de Bogotá Rango terapéutico: ≤ 1.000 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Determinar la concentración sérica de la droga durante el tratamiento antineoplásico. MERCURIO, CABELLO Y UÑAS Código 905730 MERCURIO, ORINA Código 905731 MERCURIO, ORINA 24 HORAS Código 905731-2 MERCURIO, SANGRE Código 905731-1 El mercurio, en su forma elemental (Hgº), esencialmente no es tóxico. Puede ser consumido oralmente si no hay presencia de cualquier sistema químico o biológico que lo altere químicamente pero se vuelve tóxico si se convierte químicamente a la forma inorgánica ionizada (Hg++). Si hay una posterior bioconversión a mercurio alquilado, tal como el metil mercurio (CH3Hg+), se produce un Hg que es muy tóxico y altamente selectivo a tejidos ricos en lípidos tal como las neuronas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo especial para metales (tapa azul oscura) con EDTA como anticoagulante para utilizar sangre total. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente y 7 días en refrigeración y no se debe congelar. No se aceptan muestras hemolizadas. Orina recolectada durante 24 horas en recipiente de plástico sin preservativo pero lavado con ácido y que debe mantenerse refrigerado. La muestra es estable 2 días a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Enviar mechón del cabello arrancado de raíz del tamaño de un lápiz. Envolver el extremo de la raíz en papel de aluminio para el envío. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente. Enviar muestra de uñas cortadas de varios dedos. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente. Manual de Procedimientos 11 371 Las pruebas se procesan en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Sangre, orina y cabello: Plasma acoplado inductivamente/Espectrometría de masa (ICP/MS) Uñas: Absorción atómica. Valores de referencia: Sangre total: 0-9 ng/mL Orina de 24 horas: 0-9 μg/24 hrs Nivel tóxico: ≥ 50 μg/24 hrs Cabello: 0,4 – 1,2 µg/g Uñas: Negativo en ppm Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del Hg se realiza para evaluar posible intoxicación aguda o el grado de exposición crónica ocupacional. Para evaluar exposición crónica parece ser más confiable la determinación en la orina que la determinación en sangre y para intoxicación aguda la de sangre. Los órganos que se comprometen en la intoxicación crónica y aguda (acrodinia) son el tracto gastrointestinal, los riñones y el sistema nervioso central. La ingestión frecuente de pescado contaminado con Hg puede ser una fuente de intoxicación crónica, así como el manejo del metal en los trabajadores de minerías y fábricas de espejos. METACUALONA Código 905732 La metacualona es una droga hipnótica y que produce sedación y que se usa ilegalmente como droga recreacional o de abuso. Se detecta en la orina a las 4-6 horas después de su uso. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo o muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes. No se necesita preservativo La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 21 días en refrigeración y 12 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Tamizaje por inmunoanálisis enzimático (EIA) Prueba confirmatoria por Cromatografía de gas/Espectrometría de masa (GC/MS) 372 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Tamizaje por EIA: <300 ng/mL GC/MS: <100 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar abuso por la droga metacualona METALES PESADOS Código 905736a METALES PESADOS-TAMIZAJE Código 905736F Entre los metales pesados que se analizan en este grupo están arsénico (As), plomo (Pb), cadmio (Cd) y mercurio (Hg). El As existe en un gran número de formas tóxicas y no tóxicas. Las formas tóxicas son las especies inorgánicas(As+5) y As (+3) y sus metabolitos parcialmente detoxificados como monometilarsina (MMA) y dimetilarsina (DMA). Como resultado de la detoxificación en el hígado el As (+3) y el As (+5) aparecen en la orina poco tiempo después de su ingestión pero el MMA y el DMA aparecen a las 24 horas. La concentración de As en sangre se aumenta por un corto período de tiempo pues después desaparece rápidamente hacia los tejidos por su afinidad con las proteínas tisulares. El plomo (Pb) es un metal pesado que se encuentra muy distribuido en la naturaleza y como componente de la gasolina, pinturas, pigmentos y componentes cerámicos producidos para uso no doméstico y usados por artistas; el Pb puede contaminar alimentos guardados en utensilios que tienen Pb por acción de los ácidos y jugos de frutas. La toxicidad del Pb puede presentarse en forma aguda o crónica y los sitios que más se afectan son las células del tracto gastrointestinal y las células epiteliales de los túbulos proximales del riñón. El Cadmio (Cd) se encuentra en pinturas en aerosol de base orgánica y en el humo del cigarrillo. La toxicidad del Cd es similar a la de los otros metales pesados en que ataca el riñón produciendo falla renal con proteinuria de aparición lenta. La aspiración de humos de Cd conduce a deterioro del epitelio nasal y congestión pulmonar similar a enfisema crónico. El mercurio (Hg) ya fue analizado anteriormente Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe abstenerse de comer mariscos y pescado por 48 horas antes de Manual de Procedimientos 11 373 la toma de la muestra. Altas concentraciones de yodo y gadolinio interfieren con la mayoría de las pruebas para metales pesados. Si el paciente ha recibido algún medio de contraste que contenga estas sustancias se debe esperar 96 horas para la toma de la muestra. Sangre total tomada en tubo especial para metales (tapa azul oscuro) con EDTA como anticoagulante para utilizar sangre total. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y no se debe congelar. Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio, lavado con ácido y sin uso previo o muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes y también lavado con ácido. No se necesita preservativo La muestra es estable 7 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. El tamizaje para metales pesados también puede hacerse en muestra de uñas y pelo. La prueba de plomo y arsénico se procesan en laboratorio de referencia local, las otras se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Plasma acoplado inductivamente/Espectrometría de masa (ICP/ MS) Valores de referencia: Sangre total Nivel tóxico Arsénico: 0-12 ng/mL Plomo: 0-6 años: 0-4 μg/mL ≥ 7 años: 0-9 μg/mL Niños años: ≥ 15 ≥ 20 μg/mL Adultos ≥ 16 años: ≥ 70 μg/mL Cadmio: 0-9 μg/mL Orina 24 Arsénico: horas Plomo: Orina de micción simple 0-35 μg/por muestra 0-4 μg/por muestra Cadmio: ≥ 16 años: 0,0-1,3 μg/ muestra Arsénico: 0-35 μg/L Plomo: 0-4 μg/L Cadmio: ≥ 16 años: 0,0-1,3 μg/L De acuerdo a la clasificación del Centro de Control de Enfermedades (CDC) de Atlanta los niveles de plomo deben interpretarse de la siguiente manera para niños y adultos: 374 Fundación Santa Fe de Bogotá Clase Plomo sanguíneo en niños Interpretación I <10 μg/dL No hay intoxicación IIA 10-14,9 μg/dL Reexaminar en tres meses y aconsejar prevención IIIB 15-19,9 μg/dL Intervención nutricional y educativa. Reexaminar en 1-4 meses III 20-44,9 μg/dL Evaluar medio ambiente y considerar terapia con quelantes IV 45-69,9 μg/dL Intervenir medio ambiente y dar terapia quelante si hay síntomas V > 70 μg/dL Emergencia médica y dar tratamiento rápido Plomo sanguíneo Adultos Interpretación <10 μg/dL No hay intoxicación 10-24,9 μg/dL Identificar y minimizar exposición 25-49,9 μg/dL Si hay síntomas evitar más exposición 50-79,9 μg/dL Evaluación médica y eliminar exposición > 80 μg/dL Si hay síntomas iniciar terapia quelante Utilidad de las pruebas e interpretación del resultado Las pruebas sirven para determinar toxicidad por metales pesados. METANEFRINAS (Plasma y orina) Código 903025F/862603F Metanefrina y normetanefrina (metanefrinas) son los metabolitos 3-metoxi de epinefrina y norepinefrina respectivamente. La mayoría de las metanefrinas se excretan en forma conjugada con glucurónidos o sulfatos. El diagnóstico del feocromocitoma se puede confirmar determinando el nivel de catecolaminas o sus metabolitos en la orina que son metanefrinas (normetanefrina y metanefrina) y ácido vanilmandélico. La determinación de las metanefrinas urinarias es probablemente la única prueba más confiable para el diagnóstico del feocromocitoma. Se sabe que individuos hipertensos excretan metanefrinas en mayor cantidad que los normotensos pero en general los niveles de excreción son mucho más bajos que los que se ven en tumores neuroendocrinos, enfermedades graves y actividad física intensa. Manual de Procedimientos 11 375 Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y al momento de la toma debe estar relajado y en posición supina o parado. Antes de la toma de la muestra de sangre u orina debe evitar tomar café, alcohol, té, fumar cigarrillo y hacer ejercicio. Los antidepresivos tricíclicos, labetalol y sotalol pueden elevar los niveles de las metanefrinas produciendo resultados en orina que no se pueden interpretar por lo cual estas drogas debe descontinuarlas el médico por lo menos una semana antes de la recolección. Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. El tubo debe enfriarse previamente y la muestra mantenerse en hielo hasta su centrifugación (menos de 2 horas) y después el plasma debe refrigerarse inmediatamente La muestra es estable por 4 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes con 30 mL de HCl 6N como preservativo. También puede usarse como preservativo ácido bórico o ácido acético al 50%. La muestra debe mantenerse refrigerada durante la recolección y es estable 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC-MS/ MS). Valores de referencia: Plasma Metanefrinas totales: ≤ 206 pg/mL Normetanefrina: ≤ 149 pg/mL Metanefrina libre: ≤ 0,50 nmol/L Normetanefrina libre: ≤ 0,90 nmol/L Orina de 24 horas Metanefrinas totales: ≤ 900 μg/24 horas Normetanefrina: ≤ 600 μg/24 horas Metanefrina: ≤ 300 μg/24 horas Relación metanefrinas/creatini- ≤ 600 μg/24 horas na: Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se encuentran niveles elevados de metanefrinas en tumores derivados de las células de la cresta neural como feocromocitoma, neuroblastoma y paragangliomas. 376 Fundación Santa Fe de Bogotá También hay elevación en situaciones de stress físico o emocional y en recolección inapropiada de la orina. Las drogas que interfieren con el proceso analítico incluyen anfetaminas y sus análogos, supresores del apetito, bromocriptina, buspirona, propafenona (Rhythmonorm®, Rythmol®), cafeína, carbidopa-levodopa (Sinemet®), clonidina, dexametasona, diuréticos, metildopa (Aldomet®), inhibidores MAO, gotas nasales, antidepresivos tricíclicos, ditriazoato, derivados de la hidrazina, fenacetina, efedrina, epinefrina, colorantes intravenosos, hidrocloruro de labetalol, vasodilatadores y la mayoría de los agentes psicoactivos. METOTREXATE Código 835240F Es una droga antineoplásica cuyo metabolito activo es el 7-hidroximethotrexate, tiene una vida media inicial de 1,5-3,5 horas y terminal de 8-15 horas, el 50% está unido a proteínas, el tiempo para alcanzar el estado de equilibrio con dosificación crónica es de 12-24 horas y se excreta por vía renal. El methotrexate inhibe la enzima dihidrofolato reductasa lo que produce inhibición de la síntesis del ADN. Entre los efectos tóxicos están, náusea, vómito, mielosupresión, inflamación de mucosas, disfunción renal, leucoencefalopatía y sarpullido. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible a los 3 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cuantitativa de inmunoanálisis de polarización fluorescente (FPIA) Rango terapéutico: No ha sido definido un rango terapéutico habitual. La concentración citotóxica mínima es de aproximadamente 0,01 μmol/L y la concentración potencialmente tóxica es de > 5 μmol/L 24 horas después de la terapia con altas dosis de la droga. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La droga a dosis altas se utiliza para el tratamiento oncológico y en dosis bajas para enfermedades reumáticas, psoriasis severa, polimiositis y síndrome de Reiter. En los tratamientos con dosis altas se deben determinar los niveles sanguíneos para evitar los efectos tóxicos y garantizar una dosis adecuada. La concentración sérica de la droga se afecta por disminución en su eliminación en enfermedad renal, enfermedad hepática, aciduria, ascitis, derrame pleural, Manual de Procedimientos 11 377 obstrucción gastrointestinal, tratamiento previo con medicamentos nefrotóxicos, antibióticos no absorbibles, y con probenecid, salicilatos, sulfonamidas y kanamicina. MI- 2 ANTICUERPOS Código 862647F El autoanticuerpo Mi-2 se encuentra en el 5-10% de los casos de miositis y en el 5% de los pacientes con miositis juvenil. También puede estar positivo en dermatomiositis clásica. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 1 semana a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoprecipitación (RIPA) Valores de referencia: No detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de enfermedades musculares como miositis y dermatomiositis. MICROALBUMINURIA Código 903027 Es la cantidad excretada en la orina que es mayor al nivel normal (20 mg/L) pero menor al nivel detectado por las tiras reactivas para proteinuria (300 mg/L). Todas la personas excretan pequeñas cantidades de proteína (200 mg/ día) y aún de albúmina con < 30 mg/día. Los pacientes diabéticos tienen alto riesgo de sufrir alteraciones renales. La nefropatía diabética es la principal causa (30-40%) que lleva a falla renal terminal y posteriormente a diálisis o a trasplante renal. La microalbuminuria es la fase más temprana de la nefropatía diabética, es decir que los diabéticos que están progresando a falla renal, primero excretan micro-cantidades de albúmina y en esa fase el tratamiento adecuado puede revertir la proteinuria y posiblemente la progresión de la enfermedad; después de que se presenta la macroalbuminuria la lesión renal se puede volver irreversible. Hay estudios que muestran que la microalbuminuria es un marcador de enfermedad vascular generalizada y está asociada a ACV y enfermedad cardíaca. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe evitar ejercicio extremo antes de la toma y no debe recolectarse durante la menstruación. 378 Fundación Santa Fe de Bogotá Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo o muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes. No se necesita preservativo pero la muestra debe mantenerse refrigerada durante la recolección. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 30 días en refrigeración y 6 meses congelada a -20°C. Metodología: Turbidimetría Benedic y Cálculo Valores de referencia: Relación Albuminuria/Creati- Menor de 1.00 – 16 mg/g. nuria Albuminuria (Turbidimetria) < 5 a 37 mg/L Creatinuria (Benedic) < 15 a 500 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el control de pacientes diabéticos para prevenir daño renal irreversible. Los pacientes con diabetes tipo I/II que excretan más de 0,2 g de albúmina en 24 horas tienen un riesgo 100 veces mayor de morir por enfermedad macrovascular o enfermedad renal terminal. MICROPROTEÍNAS EN ORINA Y LCR Código El aumento en la proteína del LCR aparece en diversos estados patológicos entre los que están la meningitis, polineuritis y algunos tumores. Los aumentos en las proteínas en la orina se asocian con diversas condiciones como nefrosis, hipergammaglobulinemia, embarazo y lesiones destructivas del riñón. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina de micción simple y/o muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco sin preservativo que se debe mantener en el refrigerador durante la recolección. Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada al laboratorio rápidamente. La muestra es estable 10 días en refrigeración y/o congelada a -20ºC. Metodología: Espectrofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Orina de micción simple: ≤ 10 mg/dL Orina de 24 horas: 50-100 mg/24 horas LCR: 15-45 mg/dL Manual de Procedimientos 11 379 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el estudio de pacientes con problemas cerebrales o renales. MIELINA PROTEÍNA BASICA (MBP) Código 838730F La MBP es un péptido que comprende el 30% de la proteína de la banda de mielina. Los anticuerpos a las proteínas asociadas a la mielina están implicados como posible factor inductor de desmielinazación en enfermedades neurológicas. Entre estas están esclerosis múltiple, síndrome de Guillain-Barré, neuritis óptica aguda idiopática, panencefalitis esclerosante subaguda, poliradiculoneuritis recurrente crónica y polineuropatía carcinomatosa. En los pacientes con esclerosis múltiple (EM) los títulos de autoanticuerpos a mielina se correlacionan con exacerbación y recaída de la enfermedad; se encuentran en el 77% en EM y hasta en un 89% en neuritis óptica. También se encuentran en un 64% de pacientes con síndrome neurológico asociado a SIDA y en un 58% de niños autistas. La esclerosis múltiple es frecuentemente episódica y los niveles de MBP pueden ser indetectables entre ataques; y usualmente no se la detecta en los pacientes en remisión. Esta aumentada en un número de entidades en los cuales se produce ruptura de la mielina. Como en la hipoxia, trauma, neoplasia, leucodistrofia, enfermedad de Wernicke, Síndrome de Guillen – Barre y lupus del sistema nervioso central. Condiciones del paciente y/o de la muestra LCR tomado por el médico tratante y enviado rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica de inmunoanálisis enzimático (ELISA). Valores de referencia: L.C.R.: 0-4.0 µg/L Negativo 4.1-6.0 µg/L Débilmente Positivo >6.0 µg/L Positivo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Esta prueba provee una medida de los fragmentos de mielina liberados dentro del LCR como resultado de la ruptura de la mielina durante la fase aguda y en el curso de la enfermedad desmielinizante del sistema nervioso central. Se prefiere como diagnóstico inicial la determinación de bandas oligoclonales y 380 Fundación Santa Fe de Bogotá la síntesis de IgG de novo ya que son positivas en el 90% de los pacientes con esclerosis múltiple durante la enfermedad activa o en remisión y provee evidencia objetiva de la actividad de la enfermedad. La presencia de MBP en el LCR es un hallazgo inespecífico y se presenta en otras causas de daño a la mielina del SNC como trauma craneoencefálico, tumores, accidente cerebrovascular, trastornos convulsivos, leucoencefalopatía necrotizante secundaria a radioterapia o quimioterapia y encefalitis viral. MIELOPEROXIDASA, ANTICUERPOS Código 906416F La enzima mieloperoxidasa (MPO) se encuentra en los gránulos primarios de los neutrófilos y en las lisosomas de los monocitos. Los autoanticuerpos a MPO se encuentran en varias enfermedades y están comprometidos en la patogénesis de la inflamación vascular de la poliangeitis microscópica (MPA). Es un marcador general para daño renal asociado a la granulomatosis de Wegener, al síndrome de Goodpasture y al síndrome de Churg-Strauss. La MPO es el antígeno principal de los autoanticuerpos antineutrófilos citoplasmáticos (ANCA) lo que les da el patrón perinuclear en la inmunofluorescencia Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable, 14 días en refrigeración y 60 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: ≤ 9,0 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Un resultado positivo tiene un alto valor predictivo con una especificidad del 95% para el diagnóstico de poliangeitis microscópica en pacientes en los cuales se ha descartado los diagnósticos de LES y síndrome de Goodpasture. La prueba debe hacerse en conjunto con otras pruebas como ANCAs, pANCAs y Proteinasa 3 (PR3). La prueba también es útil para seguir la evolución del tratamiento o para controlar la actividad de la enfermedad en pacientes con MPA. Manual de Procedimientos 11 381 MIOGLOBINA Código 903031 Es la proteína de enlace del oxígeno que se encuentra en el músculo estriado. Cuando hay necrosis aguda de fibras musculares (rabdomiolísis) se libera la mioglobina que es rápidamente depurada de la circulación y excretada en la orina como un pigmento café-rojizo. La mioglobinuria depende de la cantidad total de la mioglobina descargada del músculo, de la velocidad de filtración glomerular y del volumen urinario por lo cual se correlaciona muy poco con la mioglobinemia. La mioglobina en concentraciones altas es nefrotóxica y puede producir daño renal agudo. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina recolectada por micción simple que debe ser neutralizada y refrigerada rápidamente pues el pH urinario afecta la estabilidad de la proteína. Se recomienda hacer la recolección después de ejercicio. No se necesita preservativo La muestra es estable 48 horas refrigerada y 30 días congelada a -20°C. Se debe observar el color de la orina pues un pigmento cafe-rojizo puede indicar que la concentración de mioglobina es más de 1 mg/mL. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría Valores de referencia: ≤ 28 μg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Hay mioglobinuria en infarto agudo del miocardio, infecciones virales, trauma muscular, procedimientos quirúrgicos, polimiositis, alcoholismo agudo con delirium tremens, ejercicio extremo, condiciones metabólicas que afectan el músculo estriado, deficiencia de fosforilasa, síndrome de aplastamiento, enfermedad muscular progresiva, injuria por calor (insolación severa) maniobras de resucitación y cualquier condición asociada a rabdomiolisis. Durante la evolución de un infarto cardíaco la mioglobina se libera del músculo cardíaco isquémico y puede alcanzar niveles 5-10 veces el normal durante las primeras 5-18 horas; se correlaciona bien con la CPK y a veces precede su elevación; los niveles caen rápidamente hacia la normalidad unas pocas horas después del infarto. La mioglobina del músculo esquelético es inmunológicamente diferente de la que se encuentra en el músculo cardíaco. La mioglobina es más nefrotóxica si está asociada con oliguria, aciduria y uricosuria. 382 Fundación Santa Fe de Bogotá MITOCONDRIA, ANTICUERPOS (AMA) Código 906433 Los anticuerpos anti-mitocondria (AMA)han sido reportados en más del 90% de pacientes con cirrosis biliar primaria (CBP) y ocasionalmente se encuentran en hepatitis crónica activa, cirrosis criptogénica y en pacientes con evidencia clínica pero no bioquímica de enfermedad hepática. Lo antígenos mitocondriales que se detectan en el suero de pacientes por anticuerpos anti-mitocondria se han clasificado numéricamente como M1 hasta M9 siendo el M2 el que se encuentra en pacientes con CBP. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 30 días congelada a -20°C. El resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de toma de la muestra. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Negativo: Título ≤ 20,0 Unidades Indeterminado: 20,1-24,9 U Positivo: ≥ 25,0 U Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para establecer el diagnóstico de CBP. El método IFI también detecta otros AMAs de diferentes especificidades en otras enfermedades por lo cual un resultado positivo para AMA de especificidad M2 es altamente específico para CBP y es raro un resultado falso negativo. El nivel del anticuerpo anti-mitocondrial no es útil para controlar el curso de la enfermedad ni para definir el pronóstico. El método EIA tiene una correlación del 90% con el método IFI. MOCO CERVICAL (Prueba de Sims-Huhner) Código 907202 Durante el ciclo menstrual el moco cervical sufre cambios tanto cualitativos como cuantitativos que se correlacionan con las diferentes fases del ciclo. En la fase ovulatoria de mitad del ciclo se produce la máxima cantidad de moco pero con una viscosidad marcadamente disminuida que permite la penetración del moco por el espermatozoide. En la fase secretora se aumenta la viscosidad por acción de la progesterona. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra del moco cervical debe ser tomada por el médico tratante. Metodología: Técnica cualitativa donde se mide volumen, apariencia, tenacidad y presencia de espermatozoides. Manual de Procedimientos 11 383 Valores de referencia: Reporte de las características del moco cervical. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evalúa la calidad del moco cervical y la habilidad de los espermatozoides para penetrar el moco sin perder viabilidad. Es de utilidad en estudios de infertilidad y para determinar si hay ovulación normal. Durante la fase ovulatoria el moco debe ser claro, acuoso, con buena tenacidad que se manifiesta por ser uno capaz de estirar una porción en una longitud de 10 centímetros sin que se rompa y debe tener en las 6-8 horas postcoito por lo menos 10 espermatozoides móviles por campo. MONÓXIDO DE CARBONO (CARBOXIHEMOGLOBINA) Código 905737 La intoxicación por monóxido de carbono (CO) produce anoxia porque el CO se une a la hemoglobina con una afinidad 240 veces mayor que la afinidad con el oxígeno, lo cual impide que los tejidos se puedan oxigenar. Generalmente hay muerte si la hemoglobina se satura en un 60% por CO lo que puede ocurrir si hay una parte de CO por 1.000 partes de aire. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulantes EDTA o heparina para utilizar la sangre total. La muestra es estable 10 horas a temperatura ambiente y 10 días en refrigeración y no se puede congelar. Después de la recolección de la muestra no se debe centrifugar ni abrir el tubo. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible a las 48 horas a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría Valores de referencia: Normal: <7% 1% (limite bajo de detección) <15% (fumadores) Concentración tóxica: > or =20% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La causa más común de intoxicación por CO es la exposición al humo del exosto de automóviles y en victimas de incendios por la inhalación de los humos que se generan durante la combustión de diferentes materiales. MUCOPOLISACÁRIDOS Código 862692F 384 Fundación Santa Fe de Bogotá MUCOPOLISACÁRIDOS (y CROMATOGRAFÍA) Código 908505 Las mucopolisacaridosis (MPSs) son un grupo de trastornos genéticos, autosómicos recesivos, causados por la deficiencia de alguna de las enzimas comprometidas en la degradación de los glicosaminoglicanos que están almacenados en los lisosomas y se excretan en la orina. Hay 11 deficiencias enzimáticas conocidas que resultan en MPPs y que producen 9 entidades diferentes de mucopolisacaridosis como los síndromes Hurler/Scheie, Hunter, Sanfilippo, Morquio A y B, Maroteaux-Lamy y Sly entre otros. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. No se necesita preservativo La muestra es estable 48 horas refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío Metodología: Prueba de tamizaje: Cromatografía de capa fina (TLC) Prueba cuantitativa: Espectrofotometría Valores de referencia: Prueba cualitativa: Se envía reporte Prueba cuantitativa en mg/mmol creatinina 0-4 meses: ≤ 53,0 5-18 meses: ≤ 31,0 19 meses-2 años: ≤ 24,0 3-5 años: ≤ 16,0 6-10 años: ≤ 12,0 11-14 años: ≤ 10,0 >14 años: ≤ 6,5 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La excreción anormal de glicosaminoglicanos (sulfatos de dermatan, heparan, queratan o condroitina) es característica de mucopolisacaridosis. Los niveles de glicosaminoglicanos se pueden normalizar o permanecer elevados en pacientes a quienes se les ha hecho trasplante de medula ósea o han recibido terapia enzimática de reemplazo. Pueden presentarse resultados falsos negativos en la prueba TLC y falsos positivos en pacientes tratados con heparina de bajo peso molecular, por contaminación de la muestra con polímeros acrílicos usados en pañales desechables y en situaciones asociadas con destrucción de tejido conectivo, en enfermedades de la vejiga y óseas. Manual de Procedimientos 11 385 MÚSCULO ESTRIADO, ANTICUERPOS Código 906435 Los autoanticuerpos dirigidos contra los elementos contráctiles del músculo estriado se encuentran en aproximadamente el 30% de pacientes adultos con miastenia gravis y más frecuentemente (80-100%) en aquellos con timoma. También pueden ser detectados en el síndrome miasténico Lambert-Eaton, en carcinoma de células pequeñas del pulmón, en pacientes tratados con Dpenicilamina y en receptores de trasplante de médula ósea que presenten enfermedad injerto contra huésped. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Negativo < 1:40 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil como ayuda serológica en el diagnóstico de timoma especialmente en pacientes que desarrollan miastenia gravis antes de los 40 años de edad. Se considera como una prueba de tamizaje para miastenia gravis en pacientes de mayor edad especialmente cuando son negativos los anticuerpos a receptores de acetilcolina. Para el seguimiento de la eficacia del tratamiento inmunosupresor en pacientes con miastenia es útil hacer determinaciones seriadas así como para controlar las complicaciones autoinmunes en la enfermedad injerto contra huésped y en el tratamiento del timoma para definir recurrencia. MÚSCULO LISO, ANTICUERPOS Código 906437 Son autoanticuerpos tipo IgG dirigidos contra antígenos del músculo liso que se encuentran en el 97% de pacientes con hepatitis crónica activa autoinmune y también se pueden encontrar en hepatitis viral. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 1 mes congelada a -20°C. El resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) 386 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Negativo: menor de 20 unidades Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para la evaluación de pacientes con enfermedad hepática crónica en los que se sospecha el diagnóstico de hepatitis crónica activa autoinmune. No es una prueba que sea predictiva del desarrollo de enfermedad hepática y no es útil para el pronóstico en pacientes con hepatitis autoinmune. En esta entidad el título de anticuerpos puede estar entre 1:80 a 1:320; niveles más bajos de menos de 1:80 ocurren en otras entidades que deben incluirse en el diagnóstico diferencial como son cirrosis biliar primaria, hepatitis viral crónica y hepatitis alcohólica crónica. También pueden encontrarse en un 3% de la población adulta normal. MUTACIÓN GENÉTICA, ENFERMEDAD DE GAUCHER Código 908608F La enfermedad de Gaucher es una enfermedad genética de depósito lisosomal, relativamente rara, que resulta de la deficiencia de la enzima beta-glucocerebrosidasa cuya actividad ausente o reducida causa la acumulación de su sustrato en lisosomas lo que interfiere con las funciones celulares. Se han encontrado más de 250 mutaciones en el gen GBA que causan las manifestaciones clínicas de la enfermedad de Gaucher. Las mutaciones N370S y L444P tienen la mayor prevalencia entre la mayoría de las poblaciones afectadas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA o ACD como anticoagulante para utilizar sangre total. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. La prueba también puede hacerse en otros tipos de especímenes. Metodología: PCR seguida de análisis de secuencias de ADN Valores de referencia: Ver reporte individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es necesario identificar la presencia de una mutación causante de una enfermedad en el miembro afectado de una familia antes de hacer las pruebas en los otros miembros de la familia. Manual de Procedimientos 11 387 MUTACIÓN PARA DISTROFIA MIOTÓNICA Código 862631F El Síndrome de Steinert (Distrofia Muscular Miotónica DMM) es una enfermedad hereditaria muscular de evolución lenta y progresiva, que suele manifestarse en la edad adulta y es caracterizada por: miotonía o dificultad para la relajación muscular. Hay una contracción mantenida del músculo, atrofia muscular lenta pero progresiva y manifestaciones sistémicas. Cuanto antes se presente la enfermedad, mayor es su grado de severidad. Hay una forma de comienzo precoz que que es la congénita, que se presenta en bebés que nacen de padres que tienen la forma adulta y no se ha manifestado todavía o la ha hecho de manera leve; esta es la forma más grave y normalmente, la madre tiene la enfermedad, aunque sus síntomas sean tan leves que no hayan sido detectados. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para utilizar sangre total. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: PCR seguida de análisis de secuencias de ADN Valores de referencia: Ver reporte individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en pacientes donde se sospeche problemas de relajación muscular. MICOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS, CULTIVO Código 901229 MICOBACTERIUM TUBERCULOSIS, CULTIVO Código 901230 MICOBACTERIUM, IDENTIFICACION Código 901313 388 Fundación Santa Fe de Bogotá MYCOBACTERIUM SPP, PRUEBAS DE SENSIBILIDAD Código 901007 En individuos inmunosuprimidos es frecuente encontrar micobacterias en sangre. La mayoría de las infecciones micobacterianas diseminadas son debidas al complejo Mycobacterium avium pero la bacteremia también puede ser debida a otras especies como el complejo Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium kansasii, Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium chelonae, Mycobacterium scrofulaceum, Mycobacterium szulgai, y Mycobacterium xenopi. Se deben tomar hemocultivos en pacientes que tengan signos y síntomas de sepsis, especialmente fiebre de origen indeterminado. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo especial para hemocultivo con anticoagulante para obtener sangre total para el cultivo. La muestra se debe incubar de acuerdo a las especificaciones de la técnica utilizada. La muestra se toma diariamente y el resultado está disponible después de terminado el tiempo de incubación del cultivo. El cultivo de micobacterias tuberculosas y no-tuberculosas también puede hacerse en otros tipos de especimes como esputo, líquidos, tejidos, orina, secreciones y material de biopsia. Metodología: Cultivo microbiológico automatizado Valores de referencia: Ver informe Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Después de obtener un cultivo positivo se debe continuar con la identificación de la micobacteria y con las pruebas de sensibilidad para determinar a que drogas es sensible o resistente el microorganismo. MYCOPLASMA PNEUMONIAE, ANTICUERPOS IgA/ IgG/ IgM Códigos 906033/906034/906035 MYCOPLASMA PNEUMONIAE, ANTICUERPOS TOTALES Código 906036 MYCOPLASMA, CULTIVO Código 901231 El género Mycoplasma agrupa tres especies antigénicamente similares y frecuentemente encontradas en el hombre, M pneumoniae, M. genitalium y M. penetrans. Los otros dos patógenos humanos Mycoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum no están serológicamente relacionados con los anteriores. Manual de Procedimientos 11 389 El M. pneumoniae es como patógeno primario en el hombre el causante del 15-20% de las neumonías y de otros síndromes como faringitis, traqueobronquitis e inflamación de la membrana timpánica (miringitis bullosa). La neumonía atípica primaria es de comienzo insidioso con fiebre, dolor de cabeza, malestar general y las complicaciones pulmonares generalmente se presentan 2-4 días después de los síntomas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días refrigerada y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Muestra de LCR tomada por el médico tratante y enviada al laboratorio rápidamente. La muestra es estable 2 semanas refrigerada y 2 meses congelada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. El cultivo se puede hacer en diferentes muestras como esputo, lavado bronquial o broncoalveolar, aspirado nasofaríngeo, hisopado de garganta o nasofaríngeo. Metodología: Suero:Anticuerpos IgG/IgM: Inmunoanálisis enzimático (EIA) LCR: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Cultivo bacteriológico Valores de referencia: Suero Anticuerpos IgG/IgM Negativo: Índice ≤ 0,90 Indeterminado: Índice entre 0,91 – 1,09 Positivo: Índice ≥ 1,10 LCR: Título ≤ 1:1 Cultivo: negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de la neumonía atípica primaria. Los anticuerpos IgM aumentan significativamente una semana después del comienzo de los síntomas clínicos y persisten de dos meses a un año después de la infección. La ausencia del anticuerpo IgM en el suero recolectado 10-20 días después del comienzo de la neumonía es una evidencia fuerte contra infección por Mycoplasma pneumoniae especialmente en niños. Los anticuerpos IgG se elevan después de la segunda semana. La prueba de aglutininas frías (IgM anti-I) no tiene buena sensibilidad ni especificidad y no es útil para el diagnóstico de esta entidad. 390 Fundación Santa Fe de Bogotá Los métodos de cultivo para M. pneumoniae son poco sensibles y un resultado negativo no excluye la infección. En la fase aguda de la infección la detección molecular tiene muy buena sensibilidad. Manual de Procedimientos 11 391 N NEISSERIA GONORRHOEAE, CULTIVO Código 901232 NEISSERIA MENINGITIDIS, CULTIVO Código 901233A NEISSERIA MENINGITIDIS, SEROTIFICACIÓN POR LÁTEX Código 901317 La Neisseria gonorrhoeae es la bacteria que causa la gonorrea, infección común de trasmisión sexual, que en las mujeres puede ser asintomática y además puede producir infecciones genito-urinarias tanto en mujeres como en hombres con síntomas de disuria y flujo vaginal, uretral o rectal. La Neisseria meningitides (grupos A, B, C, Y y W135) es una de las bacterias que causa meningitis bacteriana y sepsis neonatal junto con la Escherichia coli (K1). Condiciones del paciente y/o de la muestra Para la detección de la N. gonorrhoeae se requiere muestra de secreción uretral, ojos (cornea o conjuntiva), boca, recto o ano, que debe ser llevada rápidamente al laboratorio para cultivo o para detección molecular. El hisopo se debe colocar en un tubo especial de transporte y la muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente. Para la detección de la N. meningitidis se requiere muestra de LCR o de sangre total para hemocultivo. También se puede cultivar en muestra de fosas nasales para búsqueda de portadores. Para la serotipificación por látex se requiere muestra de suero que es estable 5 días a temperatura ambiente, 30 días en refrigeración y 14 días congelada a -20°C Metodología: Cultivo bacteriológico para el aislamiento de las bacterias Aglutinación de látex Valores de referencia: Cultivo negativo Aglutinación de latex: N. meningitidis no detectable 392 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El cultivo ha sido considerado como el estándar de oro para el diagnóstico de la infección por N. gonorrhoeae. Sin embargo los microorganismos son muy lábiles in vitro y se requiere que la recolección de la muestra, el transporte y las condiciones de procesamiento mantengan la viabilidad de la bacteria para que el cultivo sea exitoso. Por esta razón la prueba de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) se recomienda actualmente para el diagnóstico de la infección pues tiene muy buena sensibilidad y especificidad. La N. meningitides se puede separar serológicamente en varios grupos en base a sus antígenos capsulares. Aunque hay actualmente 13 serogrupos reconocidos las infecciones más serias son causadas por los microorganimos que pertenecen a los serogrupos A, B, C, Y y W135. La E. coli K1 es antigénicamente indistinguible de la N. meningitidis del grupo B por el método de la aglutinación de látex por lo cual un resultado positivo obtenido en un espécimen de un paciente neonatal lo más probable sea que corresponde a infección por E. coli K1, mientras que en pacientes de mayor edad la probabilidad sea que corresponda a meningococo del grupo B. En estos casos se recomienda hacer cultivo bacteriológico. NETILMICINA Código 905407 Es un antibiótico aminoglicósido que ha demostrado eficacia comparable a gentamicina, sisomicina, tobramicina y amicacina contra bacterias resistentes a los aminoglicósidos. Es potencialmente ototóxico y nefrotóxico aunque en menor escala que la gentamicina. La vida media de eliminación en adultos de < 30 años es de 0,5-3 horas y en >30 años es de 1,5-15 horas; en los niños es de 0,5-2,5 horas y en los neonatos de 2-9 horas. El 0-10% está unido a proteínas y el 90% se elimina por vía renal en forma inalterada. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. El tiempo habitual de muestreo puede ser en el pico (30 minutos después de la dosis IV o una hora después de la dosis IM) o en el valle inmediatamente antes de la siguiente dosis. La muestra es estable 14 días en refrigeración y/o congelada a -20°C. Metodología: Técnica de inmunoanálisis de polarización fluorescente (FPIA) Rango terapéutico: 6-10 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el control del tratamiento con el antibiótico para obtener un buen resultado y evitar efectos tóxicos. Concentraciones altas de ciertas penicilinas (carbenicilina) pueden inactivar los Manual de Procedimientos 11 393 aminoglicósidos tanto in vitro como in vivo. NEUROQUININA A Código 862748F La neuroquinina A es un neuropéptido de la clase de las taquininas que son neurotransmisores. La neuroquinina A se encuentra en los tejidos periféricos y es descargada a la circulación por las terminaciones nerviosas en respuesta a estímulos físicos y no físicos. La descarga es lenta y de larga duración y su efecto hormonal se disminuye por la acción de las proteasas del neuropéptido. La elevación de la neuroquinina A en la circulación está asociada a carcinomas del intestino medio y a episodios de asma bronquial. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayuno de 10-12 horas y por 48 horas antes de la toma de la muestra no debe tomar drogas antiácidas o drogas que se utilizan para hipertensión, analgésicos ni aquellas que alteren la función gastrointestinal. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA que contenga el preservativo GI (Z-tubo) para obtener plasma. El plasma se debe separar lo más rápidamente posible y congelarse inmediatamente. La muestra es estable 31 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanalisis (RIA) Valores de referencia: ≤ 40.1 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en casos donde se sospeche carcinoma intestinal. NEUROMIELITIS ÓPTICA ANTICUERPOS IgG EN LCR Código 862604F NEUROMIELITIS ÓPTICA ANTICUERPOS IgG EN SUERO Código 862656F La neuromielitis óptica (NMO) o enfermedad de Devic, es un trastorno del SNC, severo, desmielinizante, inflamatorio, autoinmune con recaidas que afecta principalmente el nervio óptico y la medula espinal. En los niños se puede presentar como una encefalopatía y cuyos síntomas iniciales son episodios intratables de náusea y vómitos. Muchos pacientes con NMO se diagnostican como si tuvieran esclerosis múltiple y tanto el pronóstico como el tratamiento es diferente en las dos enfermedades por lo cual hacer el diagnóstico precoz y establecer el tratamiento es importante para la evolución de la enfermedad. 394 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente y14 días en refrigeración .. LCR tomado por el médico y enviado en tubo especial estéril. La muestra es estable 2 semanas refrigerada y 1 año congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: LCR: Inmnofluorescencia indirecta (IFI) Suero: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Suero Negativo: ≤ 3 U/mL Inconcluyente: 3-5 U/mL Positivo: ≥ 5 U/mL LCR: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Un resultado positivo, tanto en suero o en LCR, es consistente con NMO y justifica la iniciación de la terapia inmunosupresora en el menor tiempo posible. Es útil para diferenciar precozmente la NMO de la esclerosis múltiple. Este autoanticuerpo no se encuentra en personas sanas. NEUTRALIZACIÓN PLAQUETARIA (NP) Código 902119 La NP se utiliza para confirmar o descartar junto con otras pruebas de coagulación la presencia de un anticoagulante circulante (AC) inhibidor similar al anticoagulante lúpico. Los AC son anticuerpos dirigidos contra fosfolípidos, negativamente cargados que interfieren con las pruebas de coagulación produciendo tiempos de coagulación prolongados (ver Anticoagulante Circulante). La NP representa un tiempo parcial de tromboplastina activado (TPT), modificado, en el cual una suspensión de plaquetas descongeladas y lavadas se añade al plasma del paciente como fosfolípido adicional el cual al parecer absorbe el AC del paciente acortando el TPT. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con el anticoagulante citrato de sodio (tubo tapa Manual de Procedimientos 11 395 azul) para obtener plasma. El paciente no debe estar anticoagulado con cumarínicos o heparina. La muestra no puede procesarse si el tubo no está completamente lleno, está hemolizada, coagulada o tiene más de dos horas de haber sido tomada. Metodología: Tiempo parcial de tromboplastina (TPT) Valores de referencia: Ver reporte individual. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para excluir o confirmar la presencia de AC, distinguir un AC de un inhibidor específico de un factor de coagulación y evaluar tiempo de protrombina (TP) o TPT prolongados inexplicablemente. Los resultados de NP se consideran diagnósticos cuando se cumplen los siguientes criterios: • TPT prolongado >3-5 minutos sobre el límite superior del valor de referencia. • Inhibición de TPT demostrada en mezclas con plasma normal; si la mezcla 1:1 no normaliza el TPT o la mezcla 1:9 no acorta por lo menos en un 50% el TPT prolongado. • La NP acorta el TPT en más de 4-5 segndos y el buffer control es mayor en 4-5 segundos que el resultado de NP. • No hay evidencia de heparina ni de un inhibidor específico de factor (especialmente de factor V) en la muestra. • Cuando la NP corrige el TPT se puede definir que hay un AC; cuando no lo corrige se presume que hay un inhibidor específico del factor de coagulación. Los AC están asociados con LES, desordenes autoinmunes, enfermedades del colágeno vascular, infecciones, fenómenos tromboembólicos, abortos espontáneos, terapia con procainamida, quinidina, hidralazina y fenotiazinas. NIACINA (Vitamina B3) Código 862602F La Vitamina B3, llamada también niacina o ácido nicotínico, es una vitamina hidrosoluble que juega un papel importante en la descarga de energía de los carbohidratos y grasas, metaboliza proteínas y ayuda en la producción de ciertas hormonas y en la formación de los eritrocitos. La deficiencia de la vitamina B3 produce la pelagra. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con EDTA como anticoagulante para obtener plasma. La muestra se debe proteger de la luz envolviendo el tubo en papel de aluminio y el plasma separarse dentro de los 30 minutos después de la centrifugación y congelarse inmediatamente. La muestra es estable por 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. 396 Fundación Santa Fe de Bogotá Metodología: Cromatografia líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: 0,5-8,45 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de pelagra. NICOTINA Y METABOLITOS EN SALIVA Código 862610F NICOTINA-COTININA Código 838870F La adicción al tabaco es muy perfudicial a la salud y contribuye a la mortalidad en muchos pacientes porque es un vicio muy difícil de dejar. La nicotina estimula la descarga de dopamina y aumenta la concentración de la dopamina en el núcleo accumbens lo que se cree que es la base para la adicción a las drogas de abuso. La nicotina se metaboliza rápidamente en el hígado a cotinina y tiene una vida media de eliminación de 2 horas y la conitina de 15 horas. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable por 2 semanas a 72 horas a temperatura ambiente, 21 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. Muestra de saliva recolectada en frasco estéril. La muestra es estable por 10 días en refrigeración y 8 meses congelada a -20°C. Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. No se necesita preservativo La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografia líquida/Espectrometria de masa en tándem. Valores de referencia: Suero Nicotina <2,0-10,0 ng/mL en fumadores No fumadores: ≤4 ng/mL Cotinina 16-145 ng/mL en fumadores No fumadores: ≤8 ng/mL Manual de Procedimientos 11 397 Orina Nicotina en fumadores: 200-700 ng/mL No fumadores: ≤17 ng/mL Cotinina 300-1.300 ng/mL en fumadores No fumadores: ≤20 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar la nicotina y cotinina en suero o plasma y determinar exposición al tabaco por un individuo. La nicotina tiene una vida media muy corta de aproximadamente 40 minutos y su presencia puede indicar exposición reciente; la cotinina, el principal metabolito de la nicotina, tiene una vida media de 24 horas y es detectable varias días después de haber dejado de fumar. Una concentración en suero en el rango entre 30-50 ng/mL con cotinina en el rango entre 200-800 ng/mL indica que el individuo usa muy frecuentemente productos de tabaco o que está en un programa de reemplazo de nicotina. NITRÓGENO URÉICO [BUN] Código 903856 NITRÓGENO URÉICO [BUN] EN ORINA DE 24 H Código 903857a NITRÓGENO URÉICO EN ORINA (MICCIÓN SIMPLE) Código 903857-2 ÚREA Código 903869 La mayor vía de excreción de compuestos nitrogenados es en forma de úrea que se sintetiza en el hígado. La úrea es el producto de degradación del metabolismo de las proteínas y los aminoácidos. En este proceso se forma amoníaco que se sintetiza a úrea en el hígado, se libera a la circulación y se depura por los riñones; pequeñas cantidades también se excretan por el sudor y otra parte se degrada por las bacterias intestinales. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o sangre total con anticoagulantes como heparina de amoníaco, litio o sodio, oxalato de potasio o fluoruro de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 12 meses congelada a -20°C. 398 Fundación Santa Fe de Bogotá Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo o muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes. No se necesita preservativo La muestra es estable, 72 horas refrigerada y 6 meses congelada a -20°C. Los factores de conversión entre BUN y urea son: 1 mg/dL de BUN es igual a 2,14 mg/dL de úrea Metodología: Cinética enzimática Valores de referencia: Suero o plasma: Adultos: 6 – 20 mg/dl 1 a 5 años: 5 – 27 mg/dl 5 a 15 años: 7 – 22 mg/dl. Orina 24 hrs: 6 – 20 gr/24 Horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Las tres causas generales de elevación del nitrógeno uréico son disminución de la filtración glomerular (hipoperfusión o falla renal), aumento de la carga de úrea para su excreción proveniente de la dieta o del metabolismo tisular y aumento de la reabsorción tubular de la úrea y su posterior descarga a la circulación. Hay elevación del BUN en falla renal aguda o crónica, deshidratación, choque, fiebre , stress, quemaduras de tercer grado, hipovolemia, insuficiencia cardíaca congestiva, obstrucción y hemorragia gastrointestinal, necrosis tisular, diarreas, coma diabético, estenosis y trombosis de la arteria renal, enfermedad de Addison, terapia con esteroides. El BUN generalmente no se aumenta significativamente sino hasta que la filtración glomerular se disminuye en por lo menos un 50%, por lo tanto no es un indicador precoz de daño renal como es la creatinina. La disminución del BUN ocurre en muy pocos casos entre los que están síndrome de secreción inapropiada de hormona antidiurética, enfermedad hepática, sobrehidratación, tratamiento con hormonas anabólicas, desnutrición y embarazo. Con la determinación simultánea del BUN y la creatinina se puede calcular la relación BUN/creatinina que normalmente es de 10:1 y que puede servir para clasificar el tipo de azohemia. En azohemia prerenal ésta relación es mayor de 10:1 porque hay hipoperfusión del riñón y reabsorción ávida de sodio y agua por los glomérulos; en la renal la relación es de 10:1y en la postrenal es de 5:1. También se encuentra una alta relación en pacientes con masa muscular disminuida y en aquellos que tienen compromiso de la función renal y alta ingestión de proteínas, necrosis tisular, tirotoxicosis y síndrome de Cushing. Manual de Procedimientos 11 399 O OLIGOSACÁRIDOS EN ORINA Código 908707 Los oligosacáridos se excretan normalmente en la orina. En individuos que tienen alguna de las mucolipidosis y en ciertas enfermedades de depósito de glicoproteínas hay un aumento en la excreción de los oligosacáridos; estas enfermedades son causadas por deficiencias enzimáticas que se requieren para la degradación de las cadenas de oligosacáridos. Entre las enfermedades que pueden excretar oligosacáridos están: alfa-manosidosis, alfa-fucosidosis, sialidosis, galactosialidosis, aspartilglucosaminuria, enfermedad de SchindLer y mucopolidosis III. Condiciones del paciente y/o de la muestra Se debe solicitar historia clínica del paciente, hallazgos clínicos, tipo de dieta y anotar las drogas que está tomando Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio, sin preservativo, y sin uso previo que debe congelarse rápidamente. La muestra es estable 48 horas refrigerada y 3 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de capa fina (TLC) Valores de referencia: Ver reporte individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es un método de tamizaje y no detecta todas las oligosacaridosis. No es posible detectar la sialidosis y la mucopolidosis II y III y se requiere confirmar por análisis de enzimas los resultados anormales. OPIÁCEOS Código 905740 Son las drogas naturales o sintéticas que tienen una acción farmacológicamente similar a la morfina. Se usan principalmente para aliviar el dolor pero pueden producir dependencia física y sicológica . Se absorben fácilmente por el tracto gastrointestinal, mucosa nasal, pulmones y por vía subcutánea e intramuscular. Se excretan por vía renal principalmente por filtración glomerular en forma libre o conjugada. 400 Fundación Santa Fe de Bogotá Dentro de este grupo están codeína, morfina, heroína, hidromorfona, y oxicodona. Condiciones del paciente y/o de la muestra En pacientes ambulatorios, por sus implicaciones legales, la orina debe recolectarse en el laboratorio previa identificación del paciente. Muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo. No se necesita preservativo La muestra es estable 4 días en refrigeración. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cualitativa de tamizaje por inmunoanálisis de polarización fluorescente (FPIA). Las pruebas positivas deben confirmarse por un método de referencia como cromatografia de gas o espectrometría de masa pues el método cualitativo no distingue entre los diferentes opiáceos Valores de referencia: Negativo para opiáceos. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar presencia de opiáceos en la orina. ORGANOFOSFORADOS Código 905742 Los organofosforados son ésteres orgánicos del ácido fosfórico y sus derivados, con acción inhibitoria sobre las esterasas, fundamentalmente sobre la colinesterasa. Los síntomas de intoxicación se dividen en: efectos muscarínicos, que incluyen diaforesis, pupilas puntiformes, sialorrea, epífora, broncoconstricción, aumento de secreción de las glándulas bronquiales, espasmo abdominal con vómito y diarrea y bradicardia. Efectos nicotínicos, que incluyen taquicardia, fasciculaciones musculares o contracciones espasmódicas de los músculos finos, y en los casos más severos del diafragma y músculos respiratorios. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener sangre total. Muestra de orina de micción simple. Las muestras son estables 4 días en refrigeración. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: Negativo para organofosforados Manual de Procedimientos 11 401 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para detectar presencia de organofosforados en trabajadores agrícolas que tienen funciones de fumigación. OSMOLALIDAD Código 903033 OSMOLARIDAD Código 903034 La osmolaridad mide la concentración de partículas en una solución, independiente de su tamaño o carga eléctrica; se encuentra aumentada en la deshidratación y disminuida con la hiperhidratación. El aumento estimula la secreción de la hormona antidiuretica (ADH) y una osmolaridad baja la suprime con disminución de la reabsorción de agua y emisión de grandes cantidades de orina diluida. Es de gran utilidad para evaluar los desequilibrios de líquidos y electrolitos, la presencia de ácidos orgánicos, azucares o etanol. Ofrece utilidad en el estudio de convulsiones, enfermedad hepática, estado de hidratación, equilibrio ácido básico y valorar la función de ADH. La osmolalidad es una medida del número de partículas de solutos que están en solución. La osmolalidad del suero es aproximadamente 285 a 295 de los cuales el 90% son contribución del ión sodio y los aniones cloro y bicarbonato. La osmolalidad calculada a partir de las concentraciones de solutos se llama delta osmolalidad y es ligeramente menor que la calculada en un osmómetro. mOsm/kg H2O = 2Na+ + Glucosa/20 + BUN/2,8 Para que se produzcan signos o síntomas clínicos de desbalance se requiere una osmolalidad mayor a 350 mOsm/L o menor a 250 mOsm/L pero pueden ocurrir con valores menores si el cambio en la osmolalidad se ha desarrollado rápidamente. La osmolalidad urinaria depende de la energía producida por los túbulos renales para que el riñón tenga la habilidad de mantener tanto la tonicidad como el balance de agua extracelular. En el individuo sano hay correlación directa entre la osmolalidad y la densidad urinaria; la relación entre la osmolalidad urinaria y la sérica es de 1:3. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de orina de micción simple recolectada en recipiente limpio y sin uso previo o muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes. No se necesita preservativo. Las muestras son estables 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración s y 2 meses congeladas a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está dispo- 402 Fundación Santa Fe de Bogotá nible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica de medición por medio de osmómetro de presión de vapor o punto de rocío (dew point) Valores de referencia: Suero: 275 - 295 mOsm/Kg Orina: 300 - 800 mOsm/Kg Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La osmolalidad sérica sirve para evaluar pacientes críticamente enfermos o comatosos. Si la osmolalidad medida menos la calculada es mayor a 10 mOsm/ Kg de agua (gap osmolal) se deben considerar dos alternativas: 1) Disminución del contenido de agua sérica como en hiperlipidemia o hiperproteinemia 2) Presencia de sustancias de bajo peso molecular en el suero como etanol, metanol, isopropanol, paraaldehido, etilenglicol, manitol y acetona; es de mal pronóstico si la diferencia entre las dos es mayor a 40 mOsm/Kg . La osmolalidad sérica aumenta en hipernatremia, hiperglicemia, uremia, sustancias tóxicas, diabetes insípida, deshidratación y disminuye con sobrehidratación, hiponatremia y síndrome inapropiado de hormona antidurética. La osmolalidad urinaria se utiliza para evaluar la capacidad de concentración del riñón y en deshidratación debe ser 3-4 veces la sérica. OSTEOCALCINA Código 903035 Es la proteína no colágena G1a del hueso maduro que contiene tres ácidos gama-carboxiglutámicos. Es sintetizada por los osteoblastos e incorporada a la matriz ósea, aunque una fracción de la osteocalcina recién sintetizada se libera a la circulación. Es una de las proteínas más abundantes del hueso y constituye el 3% de las proteínas óseas. La velocidad de la síntesis de la osteocalcina es proporcional a la síntesis del colágeno y por esto es un marcador bioquímico ideal de formación ósea. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. El tubo debe ser enfriado previamente en hielo y después de tomada la muestra mantenerse en baño de hielo y centrifugarse en centrífuga refrigerada para separar el suero. La muestra es estable por 72 horas refrigerada y 3 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis por electroquimioluminiscencia Valores de referencia: ≥ 18 años: 9-42 ng/mL Manual de Procedimientos 11 403 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil en la evaluación de la enfermedad ósea con alto recambio óseo. Hay niveles elevados en pacientes con enfermedad de Paget, hiperparatiroidismo primario, osteodistrofia renal, pacientes con cáncer metastásico a hueso, acromegalia, osteoporóticos tratados con dihidroxivitamina D 1,25, en niños con deficiencia de hormona de crecimiento después del tratamiento con la hormona, en pacientes con osteoporosis inducida por corticosteroides después de tratamiento con fluoruros. Se ha demostrado que la determinación de osteocalcina en conjunto con otros marcadores bioquímicos tales como fosfatasa alcalina ósea y telopéptido amino terminal refleja y predice la rata de pérdida de hueso en pacientes postmenopaúsicas e indica la velocidad de recambio óseo. Los niveles de osteocalcina son más altos en niños que en adultos y en neonatos la concentración se eleva durante el primer mes de vida y permanece alta hasta el años de vida. OXALATOS URINARIOS Código 903036 OXALATOS SÉRICOS Código 839451F Aunque los oxalatos fueron reconocidos como constituyentes normales de la orina desde 1951, solo hasta ahora se le ha dado importancia a la cristaluria de oxalato de calcio por la relación que tiene en la génesis de cálculos urinarios debido a que los oxalatos son insolubles en la orina. La oxaluria se puede originar como producto final del metabolismo intermediario (deficiencias enzimáticas) o como proveniente de la dieta (carne, vitamina C o alimentos que contienen oxalatos); también puede derivarse de desordenes gastrointestinales asociados a malabsorción de calcio. La concentración de los oxalatos en plasma o suero es un reflejo del tamaño de los depósitos corporales de oxalato. Cuando los depósitos se aumentan por dieta, anormalidades gastrointestinales, disminución en la excreción o deficiencias enzimáticas el oxalato se puede precipitar en los tejidos y causar toxicidad. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. El paciente, 48 horas antes de la toma o recolección de la muestra de la sangre o la orina no debe tomar ácido ascórbico (vitamina C) o alimentos ricos en oxalato como espinacas, café, te, chocolate o ruibarbo. Muestra de suero o sangre total tomada en tubo con heparina de sodio para obtener plasma que debe colocarse inmediatamente en hielo y congelarse rápidamente.La muestra de suero es estable por 5 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La muestra de plasma es 404 Fundación Santa Fe de Bogotá estable por 7 días congelada a .a -20°C Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco libre de contaminantes que contenga 25 mL de HCl 6N como preservativo para mantener el pH de la orina por debajo de 3. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 4 meses congelada a -20°C. Se le debe informar al paciente que debe evitar el contacto de la piel y mucosas con el preservativo pues es altamente caústico. Las pruebas se procesan en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Orina y plasma: Técnica espectrofotométrica Suero: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Orina Hombres: 7-44 mg/24 hrs Mujeres: 4-31 mg/24 hrs Niños: 13-38 mg/24 hrs Suero: ≤ 27,0 μmol/L Plasma: ≤ 1,8 μmol/L en pacientes con función renal normal Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el control del tratamiento para urolitiasis y también para identificar riesgo de desarrollar cálculos renales. La disminución de oxalatos en la orina está asociada con hiperglicinemia e hiperglicinuria. El aumento en la excreción urinaria de oxalatos (> 0,46 mmol/día) puede ser primaria o secundaria. Entre las secundarias están: ingestión de sustancias precursoras de oxalatos, alimentos ricos en oxalato, intoxicación por oxalatos, envenenamiento por etilenglicol, infección por aspergillus, deficiencia de vitamina B6, anestesia con metoxiflurano, xilitol parenteral, irrigación con glicina post prostatectomia y trastornos gastrointestinales como resección o “bypass” de intestino delgado, pancreatitis crónica, cirrosis biliar primaria y linfangiectasia intestinal o sugerir enfermedades como malabsorción de grasas. Las hiperoxalurias primarias son de dos tipos: La tipo I tiene 3 grupos: grupo A, B y C en donde hay deficiencia de la enzima alanina glioxalato transferasa en diferentes modalidades y la tipo II (muy rara) donde hay deficiencia de la D-glicerato dehidrogenasa. En estas entidades hay acumulación de oxalato en diferentes tejidos y se manifiestan típicamente por urolitiasis y por elevación de oxalatos en sangre en las dos primeras décadas de la vida. Manual de Procedimientos 11 405 OXCARBAZEPINA Código 862575F La droga oxcarbazepina (Trileptal®) se utiliza sola o en combinación con otras drogas anti-convulsivas para el tratamiento de convulsiones parciales o generalizadas tanto en adultos como en niños. Condiciones el paciente y/o de la muestra La muestra debe tomarse inmediatamente antes de la siguiente dosis. Muestra de suero. La muestra es estable por 5 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Rango terapéutico: 10-32 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La oxcarbazepina se determina por su metabolito 10-hidroxioxcarbazepina y la concentración pico en plasma ocurre 4-6 horas después de haber tomado una dosis. OXYCODONA Código 862681F La oxicodona es un analgésico opioide, efectivo por vía oral, muy potente y potencialmente adictivo y se sintetiza a partir de la tebaína. La oxicodona es el metiléter de la oximorfona (3-metiloximorfona), también puede describirse como 14-hidroxicodeinona y usualmente se emplea como clorhidrato de oxicodona. La oxicodona tiene efectos similares a la heroína y la morfina, y tiene una tipología de abuso parecida. Al igual que otros opioides, la oxicodona puede ser letal si su uso se da en combinación con sustancias depresoras del sistema nervioso central, como el alcohol. Condiciones el paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple que es estable 1 semana a temperatura ambiente, refrigerada y/o congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Rango terapeutico: ≤ 50 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para determinar abuso de drogas opiodes 406 Fundación Santa Fe de Bogotá P PAPILOMA VIRUS HUMANO (VPH) TIPIFICACIÓN Código La infección persistente con el VPH es la causa principal del 99% de los cánceres de cérvix y de la neoplasia intraepitelial cervical. EL VPH es un virus ADN de doble cadena, pequeño, no encapsulado con un genoma de 8.000 nucleótidos. Hay más de 180 tipos diferentes de VPH y en los estudios se ha encontrado que 14 de estos tipos son considerados de alto riesgo. Entre estos están los tipos 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, y 68 y dentro de estos el 16 y el 18 son los genotipos más implicados en la progresión a cáncer cervical; el 16 es el más carcinogénico y produce el 60% de todos los cánceres y el 18 entre 10-15%. Condiciones del paciente y/o la muestra La paciente no debe aplicarse duchas intravaginales, cremas, óvulos, tampones, ni anticonceptivos vaginales 48 horas antes de la toma de la muestra Muestras de cepillado cervical o de secreción uretral que son estables 24 horas a temperatura ambiente y 4 días en refrigeración. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Reacción en cadena de polimerasa (PCR) Valor de referencia: Negativo para genotipos del VPH 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 y 68 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para detectar los genotipos del VPH que son de alto riesgo para el desarrollo de carcinoma de cérvix y también para el tamizaje de mujeres con resultado anormal en la citología vaginal PAPP-A Código 829980F La Proteína Plasmática Asociada al Embarazo (PAPPA-A) es una glicoproteína derivada de la placenta; durante el embarazo es producida en altas concentraciones por el trofoblasto y liberada a la circulación materna. Los niveles en suero materno se elevan en forma constante con la edad gestacional, siendo la evaluación oportuna entre las semanas 11 y 14 de gestación. Condiciones el paciente y/o de la muestra La paciente debe estar en ayunas y se debe anotar la semanas de gestación. Manual de Procedimientos 11 407 Muestra de suero que es estable 72 horas refrigerada y 3 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Electroquimioluminiscencia Valores de referencia: ≤ 0,4 múltiplos de la mediana (MOM) La interpretación del resultado debe ser interpretado a criterio médico, debido a que el valor de las medianas para la población colombiana no ha sido establecido. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba tiene utilidad importante en la detección del síndrome de Down y otras anomalías cromosómicas; una combinación del riesgo materno relacionado con la edad, la B-HCG libre y mediciones de la translucencia nucal (NT) incrementa la eficacia de detección prenatal. PAROTIDITIS, ANTICUERPOS IgG Código 906238 PAROTIDITIS, ANTICUERPOS IgG E IgM Código 862734F La parotiditis o paperas es una inflamación de las glándulas salivares acompañada de fiebre, malestar general y dolor de cabeza. Es ocasionada por un virus de la familia de los Paramyxoviridae que incluye también a los virus de parainfluenza, sarampión, sincicial respiratorio y el metapneumovirus. Puede ocasionar complicaciones como orquitis, ooforitis, pancreatitis y meningitis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: IgM Negativo: ≤ 0,80 Indeterminado: 0,80 – 1,20 Positivo: ≥ 1,20 408 Fundación Santa Fe de Bogotá IgG Negativo: ≤ 0,91 Indeterminado: 0,91 – 1,09 Positivo: ≥ 1,09 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La presencia de anticuerpos IgG sugiere vacunación previa o exposición al virus de las paperas e indica inmunidad que protege contra re-infección . Un resultado IgG positivo con un IgM positivo sugiere infección viral reciente. Un resultado negativo de ambos anticuerpos indica ausencia de exposición previa y de inmunidad. PARVOVIRUS, IgG, IgM Código 862680F Ver Anticuerpos a Parvovirus B19 IgG/IgM pag………………….98 PEPSINÓGENO I (P1) Código 903047F PEPSINÓGENO II (PII) Código 862677F Los pepsinógenos I y II son zimógenos gástricos. El PI se produce principalmente en la mucosa glandular oxintica del estómago y se secreta hacia el lúmen gástrico y luego a la circulación. El PII tiene muy poca actividad biológica pero en medio ácido se convierte a pepsina la cual tiene acción proteolítica. Se ha demostrado que el PI tiene buena correlación con la presencia de úlcera duodenal de tipo genético y se ha usado como un marcador de riesgo para carcinoma de estómago. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayuno de 10-12 horas y se deben descontinuar por 48 horas, antes de la toma de la muestra, los antiácidos y otras drogas que alteren la motilidad gastrointestinal. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 12 meses congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis directo (RIA) Valores de referencia: Pepsinógeno I: 28 - 100 ng/mL Pepsinógeno II: < 22.0 ng/mL Manual de Procedimientos 11 409 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los pacientes gastrectomizados y con anemia perniciosa tienen niveles muy bajos o no detectables de PI. Los niveles de PI se elevan ligeramente en pacientes con úlcera gástrica, más en úlcera gastroduodenal y están muy elevados en úlcera duodenal asi como en paciente con el sindrome de Zollinger Ellison. Los niveles de PII se elevan ligeramente en úlcera gástrica pero la elevación es mayor en el sindrome de Zollinger Ellison. PÉPTIDO C Código 904706 El péptido C es secretado por las células beta del páncreas en concentraciones equimolares con la insulina. También es llamado péptido conector porque conecta las cadenas A y B de la proinsulina y es metabólicamente inactivo. El péptido C, durante la conversión de proinsulina a insulina, es separado de las moléculas de la proinsulina formándose la insulina. El péptido C tiene una vida media mas larga que la de la insulina, 30-35 minutos versus 5-10 minutos. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 1 semana congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: 0,9-7,1 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para el diagnóstico de hipoglicemia, para determinar la posibilidad de hipoglicemia falseada por administración ilegal de insulina, evaluación de un posible insulinoma, para evaluar la reserva de secreción de insulina en pacientes diabéticos que tienen autoanticuerpos a insulina o que reciben tratamiento con insulina. PÉPTIDOS DE GLUTEN Y CASEÍNA Código 862685F Cada vez más médicos y terapeutas recomiendan una dieta libre de gluten y caseína para tratar las enfermedades neurológicas y los trastornos del comportamiento en pacientes que tienen intolerancia a estos péptidos y que presentan autismo, esquizofrenia, epilepsia, hiperactividad, hipoactividad, déficit de atención, dislexia y otros problemas escolares. 410 Fundación Santa Fe de Bogotá Esta intolerancia se debe a un fallo enzimático de la peptidasa del intestino que impide la correcta transformación de las proteínas de los cereales, el gluten, y de la leche, la caseína, en sus aminoácidos básicos. Como resultado se obtienen trocitos de gluten y caseína mal digeridos, parcialmente descompuestos, llamados péptidos. Estos péptidos atraviesan la pared intestinal debido a una permeabilidad intestinal demasiado elevada y llegan hasta la circulación y de allí pueden llegar hasta el cerebro si la permeabilidad de la barrera hemato-encefálica está también alterada. Resulta que los péptidos del gluten y la caseína pueden fijarse a los receptores que están destinados a los neurotransmisores (serotonina, dopamina, noradrenalina) de forma que perturban la función de éstos, afectando, por lo tanto, el correcto funcionamiento cerebral. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple. La muestra es estable 72 horas en refrigeración. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis Valores de referencia: Ver reporte individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Valoración de pacientes con autismo o esquizofrenia. PIRUVATO QUINASA EN ERITROCITOS Código 903111F PIRUVATO QUINASA Código 908305 Las deficiencias de la mayoría de las enzimas de la vía glicolítica incluyen la de la piruvato quinasa (PQ). Es una deficiencia rara pero es la causa más común de anemia hemolítica congénita no esferocitica Se trasmite como un trastorno autosómico recesivo heredado de padres heterocigotes. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante como citrato o EDTA para utilizar la sangre total. La muestra es estable 4 días en refrigeración. No se debe congelar. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Espectrofotometría cinética de punto final. Manual de Procedimientos 11 411 Valores de referencia: Menor de 25 años: 1,5 – 11,8 UI/g Hb 26 - 50 años: 1,85 – 9,86 UI/g Hb 51 - 67 años: 1,5 – 11,8 UI/g Hb Mayor de 68 años: 2,47 – 11,19 UI/g Hb Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para el estudio de la anemia hemolítica no esferocitica y para investigar familias con deficiencia de la enzima, determinar el patrón de herencia y dar consejería genética. Hay un 5-25% de actividad enzimática normal en la mayoría de los pacientes con deficiencia de la enzima. En pacientes que tienen poblaciones de eritrocitos jóvenes como recién nacidos o con reticulocitosis como respuesta a la anemia se puede encontrar PQ elevada. PLAQUETARIOS, ANTICUERPOS Código 906443 Los anticuerpos circulantes contra plaquetas se han asociado a trombocitopenia inmune o inducida por drogas. Los anticuerpos anti-plaquetarios juegan un papel importante an la destrucción de las plaquetas y pueden consistir de un solo isotipo (IgG, IgM o IgA) o cualquier combinación de estos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 3 meses congelada. Metodología: Citometría de flujo Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para la evaluación de casos de trombocitopenia inmune resistente al tratamiento con infusión de plaquetas, de púrpura post-trasfusional y de púrpura trombocitopénica neonatal aloinmune. También permite seleccionar plaquetas compatibles con paciente refractarios en pacientes en tratamiento con transfusiones plaquetarias. 412 Fundación Santa Fe de Bogotá PLASMINÓGENO Código 902029 El plasminógeno se sintetiza en el hígado, su vida media biológica es de aproximadamente dos días, es componente primario del sistema fibrinolítico y cuando se activa a plasmina degrada la fibrina o el fibrinógeno o proteoliza los factores V y VIII. El precursor de la plasmina es el plasminógeno; la plasmina produce la lisis de los coágulos de fibrina. La deficiencia congénita o la anormalidad funcional predisponen al desarrollo de fenómenos trombóticos. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato para obtener plasma. El tubo debe ser mantenido en hielo hasta la separación del plasma que debe mantenerse congelado. La muestra es estable 14 días congelada. Metodología: Técnica cromogénica de punto final. Valores de referencia: 75-140% Utilidad e interpretación del resultado Útil para el diagnóstico de deficiencias congénitas, para evaluar fibrinolísis y coagulación intravascular diseminada (CID) cuando se mide en conjunto con dímero-D, fibrinógeno y alfa-2-antiplasmina. Se pueden encontrar niveles disminuidos en deficiencia congénita del plasminógeno, CID, fibrinolísis y enfermedad hepática severa.La actividad del plasminógeno se aumenta en el embarazo y es un reactante de fase aguda. PLOMO EN SANGRE Código 836550F PLOMO EN ORINA Código 836551F Ver Metales Pesados, página…………372 Manual de Procedimientos POLIPÉPTIDO INTESTINAL VASOACTIVO 11 413 (VIP) Código 845860F Este polipéptido es un neurotransmisor que está presente en los nervios del tracto gastrointestinal, tejidos vasculares y SNC. En el sistema cardiovascular induce vasodilatación y en el sistema respiratorio dilatación bronquial; en el sistema digestivo estimula la secreción de agua y electrolitos, relajación del músculo liso intestinal y estimula la liberación de las hormonas pancreáticas, insulina y glucagón. Los tumores secretores de VIP se encuentran generalmente en la cola del páncreas. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA que debe enfriarse previamente y añadirle 200 μL de trasylol. Centrifugue inmediatamente para obtener plasma libre de hemólisis. La muestra de plasma debe permanecer congelada hasta el momento de su procesamiento. La muestra es estable por 72 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 28 días congelada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: RIA Valores de referencia: 20,0-42 pg/mL Utilidad e interpretación del resultado El VIP es útil para evaluar ciertos tipos de tumores de células de islotes pancreáticos que secretan el péptido en cantidades excesivas (síndrome de Verner-Morrison). Este síndrome se caracteriza por diarrea acuosa refractaria, hipocalemia y acloridia; los individuos con este síndrome secretan niveles de VIP marcadamente elevados que pueden ser de miles de veces el valor normal; hay otra forma similar que tiene características clínicas similares (pseudo Verner-Morrison) pero los niveles de VIP están dentro de límites normales. Otros tumores que también pueden producir VIP elevado son ganglioneuroblastoma, carcinoma broncogénico, feocromocitoma, carcinoma medular de tiroides e histiocitoma retroperitoneal. POLIPÉPTIDO PANCREÁTICO Código 903014F El polipéptido pancreático (PP) es secretado por el páncreas en respuesta a hipoglicemia, ingestión de alimentos o alimentación falseada (los alimentos son mascados pero no deglutidos) secundaria a estimulación del nervio vago. La secreción de PP se bloquea por vagotomía o atropina. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La 414 Fundación Santa Fe de Bogotá muestra es estable 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Extracción y radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: pg/mL Adultos hombres y mujeres: Rangos pediátricos: 18-29 años: ≤ 480 30-39 años: 70-400 40-49 años: 70-430 50-62 años: 100-780 3- 9 años: ≤ 519 10-13 años: ≤ 361 14-17 años: ≤ 297 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación del PP se utiliza en la evaluación de la masa tumoral pancreática y para el diagnóstico de tumores endocrinos pancreáticos (insulinoma, glucagonoma, PPoma). La medida de la concentración se usa para el control del tratamiento del carcinoma pancreático y para predecir la recurrencia del tumor. Los pacientes diabéticos pueden tener niveles elevados de PP. La destrucción extensa del páncreas por pancreatitis crónica o por cáncer puede resultar en niveles bajos de PP por falta de respuesta a la alimentación falseada. POLIPOSIS ADENOMATOSA FAMILIAR (PAF) Código 862693F La PAF es una condición autosómica dominante producida por mutaciones en el gen APC localizadas en el brazo largo del cromosoma 5 (5q21). La PAF clásica se caracteriza por el desarrollo progresivo de muchísimos pólipos adenomatosos del colon que se desarrollan durante la primera década de la vida y en la mayoría de los pacientes sin tratamiento se puede presentar cáncer de colon desde la edad de 40 años. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable por 48 horas a temperatura ambiente y 14 días en refrigeración. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: PCR Valores de referencia: Ver reporte individual. Manual de Procedimientos 11 415 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para predecir la PAF en otros miembros de la familia cuando se ha identificado la mutación en un familiar afectado por la poliposis. PORFIRINAS CUANTITATIVAS EN ORINA Código 903040F PORFIRINAS EN SANGRE Código 983038 Hay muchas clases de porfirinas conocidas pero solo tres tienen significado clínico: uroporfirinas, coproporfirinas y protoporfirinas. El paso inicial en la síntesis hepática de las porfirinas es la formación del ácido deltaamino levulínico (ALA) que requiere la presencia de fosfato de piridoxal y de la enzima ALA sintetasa. La condensación de ALA a porfobilinógeno (PBG) requiere la acción de la enzima la cual se encuentra en las células hepáticas y en las de la médula ósea. Los síntomas clínicos se pueden manifestar de varias maneras como dolor abdominal agudo, neuropatía periférica y cambios del comportamiento tales como depresión y sicosis. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayuno de 12-14 horas y solamente puede tomar agua; debe abstenerse de tomar alcohol por 24 horas y no tomar ninguna medicación por lo menos una semana antes de la toma de la muestra. Si no puede suspender alguna droga se debe anotar cual droga está tomando. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA o heparina de sodio o litio para obtener plasma que debe colocarse inmediatamente en hielo. La muestra es estable por 72 horas en refrigeración y 3 meses congelada a -20ºC. La prueba de porfirinas en sangre se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. La muestra se debe proteger de la luz envolviendo el tubo con la muestra en papel de aluminio. Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco con 5 g de carbonato de sodio como preservativo para mantener un pH menor a 7. La muestra es estable 12 horas en refrigeración y 1 semana congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Sangre: Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) Orina: Espectrofluorometría 416 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Porfirinas totales en plasma: 1,0-5,6 µg/L Orina en µg/24h Porfobilinógeno 0-2 Uroporfirinas 0 - 60 Coproporfirinas 0-160 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de porfirinas en sangre es útil para el diagnóstico de 1) la protoporfiria eritropoyética congénita y adquirida, 2) Para la evaluación de intoxicación crónica por exposición a una variedad de agentes como metales pesados y sustancias químicas y 3) Para diferenciar la anemia por deficiencia de hierro de otras causas por niveles elevados de porfirinas. La determinación en orina es la prueba de preferencia durante los periodos sintomáticos de la porfiria intermitente aguda, la coproporfiria hereditaria y la variegada. También para la evaluación de la porfiria eritropoyética congénita y la porfiria cutánea tarda. La determinación en orina debe confirmarse con pruebas adicionales para establecer el diagnóstico. PORFOBILINÓGENO (PBG) EN ORINA DE MICCIÓN SIMPLE Código 903040 PORFOBILINÓGENO (PBG) EN ORINA DE 24 HORAS Código 903041 En las porfirias tanto neurológica como cutánea hay acumulación del ácido delta-amino-levulinico como de porfobilinógeno. La porfiria intermitente aguda resulta de una reducción del 50% de la enzima porfobilinógeno deaminasa y los ataques agudos están asociados con una gran variedad de drogas tales como etanol, barbitúricos, ciertos antibióticos, clorpropamida, estrógenos, glutetimide, grisefulvina, meprobamato, metildopa, anticonceptivos orales, sulfonamidas, tolbutamida y anticonvulsivantes como fenitoína. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina recolectada por micción simple en frasco oscuro y que debe protegerse de la luz. También puede realizarse en orina recolectada durante 24 horas en frasco oscuro con 5 g de carbonato de sodio como preservativo para mantener el pH entre 6-7 y debe mantenerse refrigerada durante la recolección. La muestra es estable 7 días en refrigeración y/o congelada. Para la prueba cuantitativa de PBG la muestra se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica cualitativa colorimétrica que utiliza la reacción de WatsonSchwartz. Manual de Procedimientos 11 417 Técnica cuantitativa: Cromatografia de intercambio iónico o Cromatografía líquida con espectrometría de masa en tándem (LC-MS/MS). Utilidad e interpretación del resultado La prueba de PBG en orina es la más importante cuando se sospecha porfiria aguda. Durante un ataque agudo el PBG urinario está marcadamente elevado. Una muestra de orina de micción simple recolectada durante un episodio sintomático es una muestra excelente para el diagnóstico y confirmación de porfiria aguda. Por varias razones es difícil hacer el diagnóstico de porfiria aguda en medio de períodos de remisión de los ataques; primero porque más del 90% de los individuos que portan el gene defectuoso nunca experimentan un ataque y segundo porque las concentraciones anormales de PBG se normalizan en los períodos de remisión. Hay aumento del PBG por interferencia analítica por acetilacetona, ácido aminosalicílico, apronalida, clorpromazina, fenotiazinas, y procainamida y disminución por ácido ascórbico tioles y úrea. (Ver ácido-delta- aminolevulínico). POTASIO (K+) EN SANGRE Código 903859 POTASIO EN ORINA Códigos 903860/903860-2 Es el principal catión intracelular pues solamente el 2% del total de K+ corporal es extracelular. La dieta normal suministra 50-150 mEq/día y por vía renal se excreta el 80-90% de lo ingerido; a diferencia del sodio no hay umbral para el K+ y aun en estados de depleción (10-20 mEq/día) se continua excretando algo de K+. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Se debe evitar el uso prolongado de torniquete durante la venopunción y no estimular ejercicio con la mano pues esto aumenta el K+ de un 10-20%. Muestra de suero o de sangre total tomada con anticoagulante como heparina de amonio, litio o sodio para obtener plasma. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 1 semana congelada a-20ºC. No se pueden procesar sueros hemolizados pues los eritrocitos tienen alto contenido de K+ y la lisis de solo 0,5% de los eritrocitos aumenta los niveles de potasio en 0,5 mEq/L. Muestra de orina recolectada durante 24 horas, sin preservativo, o de micción simple tomada al azar. La muestra es estable 4 días en refrigeración. Metodología: Técnica de potenciometría directa que utiliza electrodos de ión 418 Fundación Santa Fe de Bogotá selectivo específicos para potasio. Valores de referencia: Suero: 3,6 -5,1 mmol/L/mEq/L Orina: 25,0-125,0 mmol/día Utilidad e interpretación del resultado Útil para detectar estados metabólicos donde se presenten variaciones en la concentración de potasio sérico y/o urinario tales como desbalance hidroelectrolítico, arritmias, debilidad muscular, encefalopatía hepática y falla renal. Hay hipercalemia en insuficiencia renal aguda y crónica, enfermedad de Addison, síndrome adrenogenital (deficiencia de 21-hidroxilasa), insuficiencia suprarrenal, transfusión de sangre con largo tiempo de almacenamiento, ayuno prolongado, deshidratación, trauma severo, anemias hemolíticas, deficiencia de insulina, parálisis periódica, hiporeninemia, pseudohipoaldosteronismo, vómito, diarrea, adenoma velloso, sudoración excesiva, lesión tisular extensa y acidosis metabólica o respiratoria; en pacientes con trombocitosis o leucocitosis hay hipercalemia in vitro pues se produce liberación del K+ plaquetario, en el tubo, durante la formación del coágulo. Hay hipercaluria en dietas ricas en K+ hiperaldosteronismo, acidosis tubular renal, y al comienzo de alcalosis. Hay hipocalemia en diarreas y vómito profuso, succión nasogástrica, malabsorción, adenoma velloso, enemas y abuso de laxantes, drenaje biliar, fístula entérica, depleción de magnesio, uso prolongado de antibióticos (carbenicilina, anfotericina B), acidosis tubular renal, síndrome de Bartter, enfermedad o síndrome de Cushing, hiperplasia suprarrenal congénita, sudoración profusa, estados de alcalosis, parálisis periódica familiar hipocalémica, intoxicación por bario, hipotermia, leucemia mieloide aguda aldosteronismo e hipertensión, alcoholismo, deficiencia de ácido fólico y en pérdidas renales especialmente debidas a uso de diuréticos (tiazidas, furosemida, ácido etacrínico). Hay aumento por interferencia analítica por liposol, lipemia, hemólisis, procainamida y NH4 y disminución por EDTA, citrato de sodio, y sulfasalazine. PRA (Panel reactive antigen) HLA clase I/II Identificación Código 862570F PRA (Panel reactive antigen) HLA clase I/II tamizaje Código 862569F El panel de antígenos reactivos (PRA) se utiliza en los pacientes que van a ser trasplantados. Manual de Procedimientos 11 419 La presencia de anticuerpos contra moléculas HLA Clase I o Clase II es un factor de riesgo de rechazo y pérdida de injertos trasplantados. La estimación del panel de anticuerpos reactivos (PRA) se utiliza para identificar pacientes sensibilizados previos a trasplante de órganos sólidos PREALBÚMINA Código 906912 Es una proteína transportadora de tiroxina que tiene una alta concentración de triptófano, un aminoácido que se ha demostrado que juega un papel importante en la iniciación de la síntesis de proteínas. La prealbúmina (PAB, transthyretin) tiene una vida media de dos días mientras que la de la albúmina es de 20 días; ésta característica hace que su concentración sérica sea muy sensible a la ingesta de proteínas y por lo tanto sea un marcador efectivo para evaluar el estado nutricional en pacientes críticamente enfermos y hospitalizados. La PAB también es una proteína reactante de fase aguda negativa. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. El suero debe separarse rápidamente de los glóbulos rojos. La proteína es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 4 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Nefelometría cinética Valores de referencia: mg/dL 0 - 5 días: 6 - 21 1 - 5 años: 14 - 30 6 - 9 años: 15 - 33 10 - 13 años: 20 - 36 Mayor de 17 años: 17 - 34 Utilidad e interpretación del resultado Los niveles séricos estan bajos por síntesis disminuida en procesos inflamatorios agudos o crónicos, enfermedades malignas, cirrosis hepática y enfermedades con pérdida de proteínas del tracto gastrointestinal y renal. Hay niveles elevados en enfermedad de Hodgkin, tratamiento con hemodiálisis, anticonceptivos orales, corticosteroides y esteroides anabólicos. 420 Fundación Santa Fe de Bogotá PREGABALINA Código 862684F La pregabalina (Lyrica®) es un medicamento que se usa para aliviar el dolor neuropático de las extremidades superiores o inferiores en pacientes diabéticos, o para el sarpullido doloroso que se produce después de la infección con herpes zóster. También se usa para tratar la fibromialgia y con otros medicamentos para tratar determinados tipos de convulsiones en personas con epilepsia. Actúa disminuyendo la cantidad de señales de dolor que los nervios dañados del cuerpo envían al cerebro Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA o citrato para obtener plasma. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Rango terapéutico: No está establecido. El rango esperado en pacientes que toman dosificaciones recomendadas diarias es hasta de 10 µg/mL. Utilidad e interpretación del resultado Útil para controlar el tratamiento de la pregabalina y evitar niveles tóxicos. PREGNANETRIOL Código 841470F El pregnanetriol es un metabolito de la 17-hidroxiprogesterona. La enzima 21-hidroxilasa cataliza la conversión de la 17-hidroxiprogesterona a 11-deoxicortisol. Cuando hay disminución de la actividad enzimática, la 17-hidroxiprogesterona se acumula en la sangre y sus productos metabólicos como el pregnanetriol se excretan y acumulan en la orina. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco con 0,5 g de ácido bórico como preservativo y que debe mantenerse en nevera. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 1 semana refrigerada y 1 año congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía de gas/Espectrometría de masa (GC/MS) Manual de Procedimientos 11 421 Valores de referencia: Hombres: 71-1.000 µg/24 horas Mujeres: 47-790 µg/24 horas Utilidad e interpretación del resultado La prueba es útil para el diagnóstico de hiperplasia adrenal congénita por deficiencia de 21-hidroxilasa y para el control terapéutico de los pacientes con esta deficiencia. Tambien para la evaluación de pacientes con el síndrome de SteinLevinthal, tumores adrenales y ováricos y falla ovárica post-pubertad. PREGNENOLONA Código 841430F Pregnenolona es una hormona esteroidea producida a partir del colesterol e involucrada en la esteroidogénesis de la progesterona, mineralocorticoides, glucocorticoides, andrógenos, y estrógenos. Como tal, es una prohormona. El sulfato de pregnenolona es antagonista del receptor GABAB e incrementa la neurogénesis en el hipocampo. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de sangre tomada en tubo sin anticoagulante para obtener suero. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 12 meses congelada. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: ng/dL Hombres 18 - 58 años: 13 - 208 Mujeres Premenopausia 18 - 51 años: 7 - 188 Mujeres Post-menopausia 59 - 81 años: 13 – 111 Valores pediátricos en ng/dL 1 día - 59 días: 12 – 1.331 60 días - 1 año: ≤ 170 2 - 6 años: ≤ 107 422 Fundación Santa Fe de Bogotá 7 - 9 años: ≤ 114 10 - 12 años: ≤ 163 13 - 17 años: ≤ 325 Utilidad e interpretación del resultado Es una prueba auxiliar para el diagnóstico de hiperplasia adrenal congénita particularmente en casos donde se ha descartado el diagnóstico de deficiencia de las enzimas 21-hidroxilasa y 11-hidroxilasa. Sirva también para confirmar el diagnóstico de la deficiencia de 3-beta-hidroxi dehidrogenasa. PRIMIDONA SEMICUANTITATIVA Código 905750 Es un anticonvulsivante que se usa para el control de convulsiones psicomotoras o de tipo focal y en epilepsia tipo gran mal cuando las convulsiones son refractarias a otras drogas. El fenobarbital es uno de los metabolitos de la primidona así como la feniletilmalonamida (PEMA). El 30% de la droga se une a las proteínas, la vida media de eliminación es de 6-8 horas, se metaboliza en el hígado y se elimina por vía renal. El tiempo para alcanzar el estado de equilibrio es de más o menos dos días de dosificación continua y el tiempo para alcanzar la concentración sérica máxima es de 3 horas después de la administración oral. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y el tiempo habitual de muestreo es inmediatamente antes de la siguiente dosis y se debe anotar que otras drogas está tomando el paciente. Muestra de suero. No se deben usar tubos con gel o con sistemas de separación. La muestra es estable 1 semana a temperatura ambiente y/o refrigerada y 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis Enzimático Múltiple (EMIT) Rango terapéutico: 5-12 μg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el control de la terapia en pacientes epilépticos. La fenitoína aumenta la conversión de la primidona a fenobarbital y la isoniazida la disminuye; el ácido valproico produce incremento en las niveles de fenobarbital y primidona. PROCALCITONINA (PCT) CUALITATIVA Código 906622F Manual de Procedimientos 11 423 PROCALCITONINA (PCT) CUANTITATIVA Código 906621F La PCT es la prohormona de calcitonina (CT). Mientras que la CT es secretada por las células C del tiroides tras estimulación hormonal, la PCT puede ser producida por numerosos tipos de células y órganos después de una estimulación proinflamatoria, especialmente cuando es causada por una infección bacteriana. En personas sanas, las concentraciones de PCT en plasma se encuentran por debajo de 0,05 ng/mL, pero pueden aumentar hasta 1.000 ng/mL en pacientes con sepsis severa o choque séptico. Los niveles altos de PCT indican una infección bacteriana acompañada por una reacción inflamatoria sistémica. Las infecciones localizadas no causan, en general, aumentos de la PCT circulante. En casos de sepsis severa o choque séptico, se han observado valores muy elevados de PCT en la infección aguda con reacciones sistémicas severas a una infección. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de sangre tomada en tubo sin anticoagulante para obtener suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 9 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Análisis Enzimático Ligado a Fluorescencia (ELFA) Valores de referencia: Ver interpretación del resultado. Utilidad e interpretación del resultado PCT < 0.5 ng/mL No es probable una infección sistémica (sepsis). Riesgo bajo de progresión a infección sistémica severa (sepsis severa) Posible infección bacteriana local. Precaución: Los niveles de PCT por debajo de 0,5 ng/mL no excluyen una infección, porque las infecciones localizadas (sin signos sistémicos) pueden estar relacionadas con esos bajos niveles. Además, si la PCT se mide muy precozmente tras una infección bacteriana normalmente < 6 horas, estos valores pueden ser todavía bajos. En este caso, la PCT debería ser reevaluada pasadas 6-24 horas. PCT ≥ 0.5 y < 2 ng/mL Es posible la infección sistémica (sepsis), pero se conocen otras condiciones que también inducen la PCT. Riesgo moderado de progresión a infección sistémica severa (sepsis severa). El paciente debería ser supervisado de cerca tanto clínicamente como por reevaluación de la PCT en el plazo de 6-24 horas. 424 Fundación Santa Fe de Bogotá PCT ≥ 2 y < 10 ng/mL Es probable una infección sistémica, a menos que se conozcan otras causas. Riesgo alto de progresión a infección sistémica severa (sepsis severa). PCT ≥ 10 ng/mL Importante respuesta inflamatoria sistémica, debida casi exclusivamente a sepsis bacteriana severa o choque séptico. Alta probabilidad de infección sistémica severa (sepsis severa) PROGESTERONA Código 904510 La progesterona es un esteroide C-21 que se produce en el ovario y en la placenta y que como hormona sexual femenina regula, junto con los estrógenos, los órganos accesorios femeninos durante el ciclo menstrual. También es la encargada de preparar el útero para la implantación del blastocisto y mantener la viabilidad del embarazo. Es sintetizada a partir de colesterol, vía pregnenolona y luego metabolizada rápidamente, en el higado, a pregnanediol. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de sangre tomada en tubo sin anticoagulante para obtener suero. La muestra 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Análisis Enzimático (ELFA). Valores de referencia: Mujeres : Fase folicular : 0.00 – 0.30 ng/mL Fase luteal : 1.2 – 15.9 ng/mL Post menopausia : 0.10 – 0.20 ng/mL Primer trimestre de gestación : 2.8 – 147.3 ng/mL Segundo trimestre de gestación :22.5 – 95.3 ng/mL Tercer trimestre de gestación : 27.90 – 242.5 ng/mL Hombres: 0.10 – 0.20 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de progesterona es útil en evaluar función ovárica para determinar si la ovulación ha ocurrido durante el ciclo menstrual, evaluar la función placentaria en el embarazo y en la detección de tumores secretores de progesterona. Evaluación de pacientes con tumores adrenales o testiculares. Manual de Procedimientos 11 425 Se encuentran niveles disminuidos en amenorrea, muerte fetal in útero, amenaza de aborto y agenésis gonadal y aumentados en la fase luteal del ciclo menstrual, tumores ováricos, embarazo, tumores suprarrenales y en defectos selectivos de la biosíntesis de las hormonas esteroides. PROINSULINA Código 862670F La proinsulina es el nombre de la hormona precursora de la insulina, sintetizada por el retículo endoplasmico de las células beta de los islotes de Langerhans del páncreas y luego es transportada al aparato de Golgi donde es empaquetada dentro de vesículas secretoras y procesada por proteasas para formar la hormona insulina. De la reacción se forma el péptido C. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 72 horas en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: < 18.9 pmol/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para la evaluación de pacientes con sospecha de insulinoma, de deficiencia de las convertasas de la prohormona (PC1/3 y PC2) y con sospecha de mutaciones en la molécula de la proinsulina. PROLACTINA BASAL Código 904108 PROLACTINA (TRES MUESTRAS) Código 904108 La prolactina (PRL) es una hormona estructuralmente similar a la hormona de crecimiento. Es secretada por las células acidofílicas lactotropas de la pituitaria anterior bajo el control del hipotálamo y también por la placenta. Fisiológicamente la PRL inicia y mantiene la lactancia y el estímulo primario para su descarga es la succión del pezón. En período de no lactación la PRL se descarga episódicamente con picos durante el sueño y en la mitad del día. La hormona liberadora de tirotropina (TRH) es un estimulante potente para la liberación de la PRL. La secreción de PRL se disminuye por la acción de la dopamina y sus agonistas como la bromocriptina. 426 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y es preferible tomar la muestra 2 horas después de que el paciente se haya despertado y levantado y anotar las drogas que este tomando. Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 60 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. Valores de referencia: Hombres: 2,64-13,13 ng/mL Mujeres premenopaúsicas: 3,34-26,72 ng/mL Mujeres postmenopaúsicas: 2,74-19,64 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es de utilidad en la evaluación de tumores pituitarios, amenorrea, galactorrea, infertilidad e hipogonadismo. También para el control del tratamiento de tumores productores de prolactina. Hay un gran número de drogas que elevan el nivel de la prolactina como son fenotiazinas, metoclopramida, opiáceos, anfetaminas, estrógenos y cimetidina; disminuyen el nivel los dopaminérgicos y las hormonas tiroideas. Disminuyen la secreción la L-dopa y la bromocriptina. Los niveles de prolactina se encuentran elevados durante el post-parto y en recién nacidos. La hiperprolactinemia inhibe la secreción de gonadotropina y puede producir hipogonadismo en hombres y mujeres acompañado de niveles bajos de LH y FSH. PROPERDINA FACTOR B (PFB) Código 903022 La properdina (P) es una proteína constituida por 4 subunidades aparentemente idénticas asociadas entre sí de manera no covalente. Este factor se une al complejo del complemento C3bBb, que es lábil, dando lugar a C3bBbP que es más estable lo que contribuye a la amplificación. El depósito de PFB en los tejidos corporales o una disminución de la cantidad de PFB en el suero es evidencia del compromiso de la vía alterna del complemento. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 3 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 30 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Manual de Procedimientos 11 427 Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: 22,3-67,6 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de PFB ayuda al diagnóstico de enfermedades renales severas como glomerulonefritis crónica, nefritis lupica asi como varias enfermedades de la piel. Otras enfermedades en las cuales hay activación de la via alterna del complemento son la artritis reumatoidea, anemia de células falciformes y bacteremia por Gram-negativos. PROPOXIFENO Código 905751 Es un analgésico cuyo nombre comercial es Darvon o Wigesic. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoensayo Enzimático Múltiple (EMIT) Prueba confirmatoria cromatografía de gas con espectrometría de masa. Rango terapéutico: No detectable Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Control del tratamiento a largo plazo del analgésico. PROTEÍNA BÁSICA DE LA MIELINA (PBM) Código 862601F Ver Mielina Proteína Básica…………………Pag……….379 PROTEÍNA DE BENCE JONES Código 907103 En la orina se detecta la proteína de Bence Jones que es una inmunoglobulina monoclonal de cadena liviana kappa (k) y lambda (l); ésta puede producir insuficiencia renal y depósito de fibrillas amiloides que dañan los túbulos proximales produciendo el síndrome de Fanconi adquirido o depositarse en los glomérulos resultando en enfermedad por depósito de cadenas livianas. Esta prueba ha sido reemplazada por la electroforesis de proteínas en orina con inmunofijación. 428 Fundación Santa Fe de Bogotá PROTEÍNA C DE LA COAGULACIÓN Código 902033 Es una proteína natural vitamina K dependiente, que tiene dos cadenas, una pesada que le da la actividad y una liviana que contiene los residuos ácido glutámico carboxilos de la vitamina K. Es sintetizada en el hígado, su vida media biológica es aproximadamente de 6-10 horas y es activada por trombina en presencia de un cofactor de células endoteliales (trombomodulina) que la convierte en la enzima activa o proteína C activada (PCA). Funciona como anticoagulante inactivando proteolíticamente las formas activadas de los factores de coagulación V y VIII. La expresión de la actividad anticoagulante es estimulada por otro cofactor, la proteína S, que también depende de la vitamina K. Por lo tanto la PCA combinada con la proteína S, el fosfolípido de superficie y iones de calcio forman un complejo enzimático funcional. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas y se debe anotar si esta recibiendo cumadin o warfarina pues estas drogas disminuyen la proteína C. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato para obtener plasma. La muestra es estable por 14 días congelada a -40ºC. La lipemia interfiere con el procesamiento de la muestra. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cinética Valores de referencia: 70-150%. Los niños recién nacidos a término y normales pueden tener niveles disminuidos de actividad de la proteína C (15-50%) y puede que no alcancen el nivel del adulto hasta la niñez o la adolescencia temprana. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es de utilidad en la evaluación inicial de pacientes que tengan historia familiar de trombosis y debe realizarse dos meses después del evento trombótico y en el momento en que el paciente no esté recibiendo anticoagulantes. Hay tres síndromes clínicos asociados con deficiencia de Proteína C: 1) Tromboembolismo venoso 2) púrpura neonatal fulminante y 3) Necrosis de piel inducida por warfarina. La deficiencia de proteína C es la causa principal de las trombosis hereditarias. La forma homozigota congénita resulta en una diátesis trombótica severa, evidente en el período neonatal y que se asemeja a una púrpura fulminante; la deficiencia heterozigota predispone a fenómenos trombóticos, principalmente tromboembolismo venoso y al desarrollo de necrosis cutáneas asociadas a tratamiento con cumarínicos. Hay dos tipos de deficiencia heterozigota hereditaria: a) Tipo I que tiene disminución de PC funcional y antigénica y b) Tipo II que tiene disminución funcional pero la cantidad de la PC es normal. Manual de Procedimientos 11 429 PROTEÍNA C ACTIVADA, RESISTENCIA (FACTOR V LEIDEN) Código 902039 La resistencia a la proteína C activada (PCA) es la trombofilia hereditaria más habitual, y el factor V Leiden es la causa más común de resistencia a la PCA. Este trastorno hemostático se caracteriza por una respuesta anticoagulante pobre a la PCA. Esto se traduce en un mayor riesgo de trombosis venosa, que puede desencadenar problemas con la circulación tales como tromboembolismo pulmonar. El trastorno puede ser adquirido o heredado, la forma hereditaria tiene un patrón de herencia autosómico dominante Hasta en el 64% de los pacientes con tromboembolismo venoso puede haber resistencia a la proteína C activada. La resistencia a la proteína C activada es la incapacidad de la proteína C para escindir factor Va o Factor VIII, que permite una mayor duración de la generación de trombina y puede conducir a un estado hipercoagulable. La más conocida y la forma hereditaria más común es el factor V de Leiden. Las formas adquiridas se producen en presencia de elevadas concentraciones del factor VIII. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas y la prueba no debe realizarse en individuos bajo tratamiento anticoagulante o en plasma de individuos con deficiencia de factores o inhibidores adquiridos de la coagulación. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato para obtener plasma pobre en plaquetas. La muestra es estable 2 meses congelada a -20ºC. La determinación sólo puede hacerse si el PTT es normal. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Coagulometría. Se realiza un PTT en presencia y en ausencia de una cantidad de proteína C activada estandarizada y el cociente entre los dos tiempos de coagulación se convierte en la relación de proteína C activada. La prueba confirmatoria se hace por PCR. Valor de referencia: Relación RPCA: < 2: en estos casos se debe buscar factor V de Leiden < 3: descarta la mutación Entre 2-3: debe estudiarse con predilución 1/5 de la muestra con plasma deficiente en factor V para compensar los defectos de factores. 430 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad e interpretacion del resultado Útil para la evaluación de pacientes con trombofilias. PROTEÍNA C REACTIVA (PCR) Código 906913 La PCR es sintetizada en el hígado y tiene una vida media de 20-30 horas; pertenece a las llamadas proteínas de fase aguda y cuando forma complejos con polisacáridos la PCR se convierte en activador de la vía clásica del complemento; reconoce potencialmente sustancias autógenas tóxicas que liberan los tejidos lesionados, se une a estas sustancias, las detoxifica y depura de la circulación. Es una proteína que se une a polisacáridos presentes en muchas bacterias, hongos y protozoarios; también se une a fosfocolina, lecitinas y polianiones como los ácidos nucléicos. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no requiere ayuno y la prueba se haga en suero. Muestra de suero o de sangre total tomada con anticoagulantes como heparina de litio o sodio para obtener plasma La muestra es estable 7 días en refrigeración y 60 días congelada a -20ºC. Metodología: Inmunoturbidimetría cinética de alta sensibilidad Valores de referencia: ≤ 0,748 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La PCR es la más sensible de las proteínas de fase aguda. Se eleva dentro de las dos horas después de una lesión aguda, hace un pico y empieza a disminuir a las 48 horas si no hay un nuevo evento. Es un indicador de procesos inflamatorios más sensible que la sedimentación globular y el leucograma. Aumenta significativamente después de infarto agudo del miocardio, trauma, infecciones, procesos inflamatorios, cirugía y proliferación neoplásica. PROTEÍNA EOSINOFÍLICA CATIÓNICA Código 862642F La proteína catiónica eosinofílica, también conocida como RNAsa 3 o ribonucleasa 3, es una proteína cuya actividad biológica más destacable es la elevada citotoxicidad que presenta frente a helmintos, hemoflagelados, bacterias, virus de ssRNA, células y tejidos de mamífero. El gen de la misma se localiza (en humanos) en el cromosoma 14, exactamente en 14q24-q31. Manual de Procedimientos 11 431 La proteína es producida en los eosinófilos y almacenada en la matriz de los gránulos secundarios específicos. Estos gránulos ya maduros saldrán al torrente sanguíneo y secretarán la proteína junto con un gran número de inmunoglobulinas y componentes del sistema del complemento (entre otros) una vez reciba la señal de infección en algún tejido. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 5 días en refrigeración y 1 año congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis de polarización fluorescente (FPIA). Valores de referencia: 2-10 µg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La determinación de los niveles de la proteína catiónica eosinofilica es importante para diagnosticar trastornos alérgicos y otras condiciones clínicas asociadas con activación de eosinófilos. PROTEÍNA S DE LA COAGULACIÓN, ACTIVIDAD Código 902035 PROTEÍNA S DE LA COAGULACIÓN, ANTÍGENO LIBRE Código 902037 PROTEÍNA S DE LA COAGULACIÓN, ANTÍGENO TOTAL Código 902036 La proteína S es una proteína anticoagulante dependiente de la vitamina K que es sintetizada en el hígado y en el endotelio y también se encuentra en las plaquetas; la vida media biológica es de 2-3 días. Circula en forma libre y unida reversiblemente a una proteína reguladora que es la C4b, la cual como reactante de fase aguda puede estar elevada en procesos inflamatorios, lo que produce una disminución adquirida de la proteína S libre que es la única que tiene poder anticoagulante. Los pacientes que tienen disminución congénita de la proteína S libre presentan aumento en el riesgo de trombosis principalmente venosa y de necrosis dérmicas en los que están en tratamiento con cumarínicos. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas para evitar la lipemia que interfiere con el resultado y se debe anotar si está recibiendo cumadin o warfarina pues estas 432 Fundación Santa Fe de Bogotá drogas disminuyen la proteína S funcional y en lo posible deben suspender estas drogas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma. La muestra para el antígeno libre es estable 30 días congelada a -20ºC, se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Antígeno libre: Turbidimetría. Prueba funcional: Nefelometría Valores de referencia: Antígeno libre: Hombres 57-171%, mujeres: 50-147% Actividad funcional de proteína 60-150% S: Antígeno total: 70-140% Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La deficiencia de Proteína S es causa de trombosis hereditarias. La forma adquirida se presenta con mayor frecuencia que la congénita y es debida a deficiencia de vitamina K, tratamiento con anticoagulantes orales, enfermedad hepática, coagulación intravascular diseminada (CID), púrpura trombocitopénica trombótica, enfermedades inflamatorias agudas, embarazo, terapia con estrógenos, síndrome nefrótico y enfermedad de células falciformes. La prueba funcional detecta deficiencias cualitativa y cuantitativa de la proteína y es de utilidad en pacientes con trombosis venosas o arteriales recurrentes. La prueba debe realizarse dos meses después del evento trombótico y en el momento en que el paciente no esté recibiendo anticoagulantes. Hay valores falsamente disminuidos en pacientes con niveles anormalmente elevados de factor VIII y valores falsamente aumentados en pacientes que están en tratamiento con heparina. PROTEÍNA TAU Código 863172F La proteína microtubular TAU desempeña un papel crítico en la patogenia de la enfermedad de Alzheimer (AE), así como en los desordenes conocidos como Tauopatías. El desarrollo de la patología de esta proteína se asocia con pérdida neuronal progresiva y deterioro cognoscitivo. Condiciones del paciente y/o de la muestra LCR tomado por el médico tratante y enviado al laboratorio rápidamente. La muestra es estable 24 horas refrigerada y 1 año congelada a -20ºC. La prueba se Manual de Procedimientos 11 433 procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: ELISA Valores de referencia: Ver reporte individual Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en la evaluación de pacientes con enfermedad de Alzheimer y en la investigación de enfermedades neurodegenerativas. PROTEÍNA TRASPORTADORA DE HORMONAS SEXUALES (PTHS) Código 903042 Ver globulina de enlace de hormonas sexuales página………………… 471 PROTEÍNAS DIFERENCIADAS (ALBÚMINA-GLOBULINA) Código 903861 PROTEÍNAS TOTALES Código 903863 Las proteínas totales del plasma comprenden un amplio grupo de sustancias con diferentes funciones específicas y representan la suma de las proteínas circulantes de la sangre. La proteína más abundante es la albúmina, con una importante función en la regulación osmótica del plasma. El otro gran grupo lo constituyen los factores de coagulación, enzimas, proteínas transportadoras, inmunoglobulinas y hormonas. La mayoría se sintetizan en el hígado con excepción de las gamaglobulinas La concentración de las proteínas séricas está directamente relacionada con dos factores: el metabolismo y el aporte al equilibrio hídrico. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y seis meses congelada a -20ºC. Metodología: Para proteínas totales, cinético de biuret Valores de referencia: Proteínas totales: 6,5-8,1 g/dL 434 Fundación Santa Fe de Bogotá Albúmina: Adultos: 6.1 – 7.9 gr/dl 0 a 1 año: 4.3 – 6.9 gr/dl 1 a 3 años: 5.2 – 7-4 gr/dl 3 a 6 años: 5.6 a 7.7 gr/dl 6 a 10 años: 6.5 – 8.3 gr/dl 10 a 19 años: 6.1 – 8.0 gr/dl Globulinas: 2,8-3,2 g/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La concentración de proteínas séricas refleja principalmente la disminución de la síntesis hepática o la pérdida protéica por el riñón. Elevación de proteínas totales se encuentra en deshidratación, macroglobulinemia de Waldenström, mieloma múltiple, hiperglobulinemia, enfermedades granulomatosas, del colágeno y ciertas enfermedades tropicales. Hay disminución por dieta baja en proteínas, desnutrición, malabsorción, enfermedad hepática severa, quemaduras extensas, alcoholismo crónico, falla cardíaca, neoplasias, sobrehidratación, trastornos gastrointestinales, enfermedad renal como glomerulonefritis, síndrome nefrótico y lesión tubular proximal. Hay elevación de albúmina en deshidratación y disminución por dieta baja en proteínas, desnutrición, malabsorción, enfermedad hepática severa, quemaduras extensas, alcoholismo crónico, falla cardíaca, neoplasias, sobrehidratación, trastornos gastrointestinales, disfunción tiroidea, úlcera péptica, enfermedad inflamatoria crónica, enfermedad renal como glomerulonefritis, síndrome nefrótico y lesión tubular proximal. Hay aumento fisiológico por ACTH, corticosteroides, esteroides anabólicos y androgénicos. PROTEÍNAS EN ORINA (MICCIÓN SIMPLE) Código 903862-2 PROTEÍNAS EN ORINA DE 24 HORAS Código 903862 Normalmente la cantidad de proteínas urinarias es muy pequeña y puede ser de 150 mg/24 horas o 8-10 mg/dL lo que depende del volumen urinario. La proteinuria se deriva del plasma y del tracto urinario; la albúmina hace una tercera parte y el resto son proteínas con pesos moleculares entre 50.00060.000 daltons, algunas de las cuales se reabsorben en los túbulos renales; la albúmina se filtra en cantidades muy pequeñas. Manual de Procedimientos 11 435 Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de orina de micción simple o recolectada durante 24 horas en frasco sin preservativo. Durante la recolección la muestra debe mantenerse refrigerada. La orina no debe recolectarse después de ejercicio extremo, sobrehidratación o deprivación de líquidos. No se aceptan orinas visiblemente contaminadas con sangre. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración o congelada a -20ºC. Metodología: Espectofotometría de punto final a tiempo fijo Valores de referencia: Muestra de micción simple: < 12 mg/dL Muestra de 24 horas: 50- 100 mg/24 horas Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Son funciones importantes de un riñón sano la filtración y reabsorción de las proteínas plasmáticas en la formación de la orina. Hay proteinuria masiva cuando se eliminan > 4,0g/día; esta situación es característica del síndrome nefrótico pero también de la glomerulonefritis aguda y crónica, nefritis lúpica, amiloidosis renal y congestión venosa renal severa. Hay proteinuria moderada cuando se eliminan 0,5-4,0 g/día lo que se observa en nefropatías, nefroesclerosis, y pielonefritis asociada a hipertensión. La proteinuria mínima de < 0,5 mg/día se presenta en pielonefritis crónica, riñón poliquístico, lesiones renales tubulares, proteinurias funcionales o posturales que pueden encontrarse en adultos sanos donde hay proteinuria durante el día pero no en la noche cuando se está en posición de decúbito. Las funcionales se asocian a fiebre, exposición al frío, tensión emocional y ejercicios físicos extremos. PROTEINASA 3 (PR-3), AUTO-ANTICUERPOS Código 906417F El PR-3 es el antígeno proteasa serina que existe como una proteína triple en los neutrófilos humanos y contra el cual los auto-anticuerpos antineutrofílicos citoplasmáticos dan un patrón de inmunofluorescencia (C-ANCA) citoplasmático. Niveles elevados de auto-anticuerpos se observan en pacientes con granulomatosis de Wegener, especialmente en la enfermedad activa y menos frecuentemente en otras formas de vasculitis. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. 436 Fundación Santa Fe de Bogotá Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: < 3,5 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para evaluar pacientes en los cuales se sospeche que tienen granulomatosis de Wegener y para distinguirla de otras formas de vasculitis, en conjunto con anticuerpos a mieloperoxidasa, IgG y ANCAS. Puede ser útil para hacer el seguimiento del tratamiento y la actividad de la enfermedad en pacientes con anticuerpos a mieloperoxidasa. PROTOPORFIRINA ZINC (ZPP) Código 903433F PROTOPORFIRINA ZINC ERITROCITARIA (ZPP) Código 903433 La protoporfirina de zinc se acumula en los eritrocitos como resultado de intoxicación crónica de plomo o en anemia por deficiencia de hierro. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo, especial para metales, con EDTA o heparina de sodio como anticoagulantes para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente y 30 días en refrigeración .Se debe proteger de la luz envolviendo el tubo en papel de alumino, no se debe congelar ni se aceptan muestras hemolizadas o parcialmente coaguladas. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Fluorometría Valores de referencia: ≤ 70 µg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es de utilidad en el diagnóstico de protoporfiria eritropoyética tanto congénita como adquirida. Evaluación de intoxicación crónica por una variedad de agentes que incluyen metales pesados y químicos. Útil para diferenciar anemia por deficiencia de hierro de otras causas de niveles elevados de porfirinas. Manual de Procedimientos 11 437 PRUEBA DE CÉLULAS FALCIFORMES O DREPANOCITOS Código 902121 La forma homocigota de la hemoglobinopatía o hemoglobina anormal S o anemia de células falciformes o drepanocítica es una anemia hemolítica congénita crónica y severa que se manifiesta en la niñez y se encuentra casi exclusivamente en la población de raza negra o afroamericana. Ocurre en forma homo o homocigota y compromete la cadena b de la molécula de hemoglobina. La forma heterocigota produce sintomatología leve. La hemoglobina S es soluble cuando está oxigenada pero cuando hay anoxia se polimeriza formando tactoides que hacen que los glóbulos rojos se vuelvan rígidos, deformes y alargados adquiriendo la forma de hoz. Condiciones del paciente y/o de la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener glóbulos rojos. La muestra es estable 12 horas a temperatura ambiente y no se debe congelar. Metodología: Reacción con metabisulfito de sodio. Valores de referencia: Negativo para células falciformes Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Prueba de tamizaje para detectar hemoglobina S anormal. Una prueba positiva no diferencia entre el rasgo, la anemia de células falciformes y otros síndromes de HbS ya que todos los eritrocitos pueden adquirir la forma falciforme; sin embargo entre mayor sea la cantidad de HbS más rápidamente se deforma el glóbulo rojo. Se puede encontrar una prueba positiva en otras hemoglobinopatías raras como HbC Harlem, HbI, Hb Bart etc. Puede presentarse un resultado falso negativo si la concentración de la HbS es de menos del 10% o cuando el contenido de Hb fetal sea más del 5% y falso positivo en tratamiento con prostaglandinas. Toda prueba positiva se debe confirmar por electroforesis de hemoglobina. PRUEBA DE COMPATIBILIDAD Y RASTREO DE ANTICUERPOS Códigos 911021 Las pruebas pretransfusionales tienen el propósito de seleccionar para el receptor, componentes sanguíneos que cuando se transfundan tengan una sobrevida aceptable y no le causen destrucción de sus propios glóbulos rojos ni le produzcan reacciones trasfusionales. 438 Fundación Santa Fe de Bogotá La mayoría de las reacciones hemolíticas posttransfusionales ocurren por errores en la identificación del paciente o la muestra pero hay casos de anticuerpos que no se pueden detectar con las técnicas serológicas estándar. Las pruebas pretransfusionales no detectan todos los anticuerpos irregulares eritrocitarios del receptor a pesar de todos los avances en la serología de los grupos sanguíneos ni garantizan una sobrevida normal de los glóbulos rojos transfundidos. La prueba de compatibilidad incluye la verificación del grupo ABO y Rh del donante y el receptor, el rastreo de anticuerpos y la compatibilidad mayor entre los glóbulos rojos del donante y el suero del receptor. Para el rastreo de anticuerpos se hace reaccionar el suero o plasma del receptor con suspensiones comerciales de glóbulos rojos 0+ que contienen los antígenos D, C, E, c, e, MNS, s, P1, Le (a,b) Kk, Fy (a,b) y Jk (a,b) para detectar presencia de anticuerpos a cualquiera de estos antígenos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestras de suero y de sangre total con anticoagulante EDTA para obtener glóbulos rojos tanto del donante como del receptor. Metodología: Técnica manual o automatizada de aglutinación entre el suero, plasma o glóbulos rojos del receptor y glóbulos rojos y suero o plasma del donante. Valores de referencia: Compatibilidad entre donante y receptor para hacer la transfusión. Rastreo de anticuerpos negativo. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Las pruebas pretransfusionales son indispensables para que la transfusión sanguínea, considerada un transplante de órgano, sea un procedimiento seguro y cumpla el objetivo para el cual fue solicitada y realizada. PRUEBA DE HAM Código 902115 La prueba de ham y de Sucrosa no se realizan estas fueron remplazadas por una prueba de citometría de flujo HPN. Manual de Procedimientos 11 439 PRUEBA DE SUCROSA Código 908307 La hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN) es una anemia hemolítica crónica rara y adquirida debida a un defecto intrínseco de los glóbulos rojos que los hace inusualmente sensibles a complemento. La naturaleza del defecto es desconocida, pero las células de HPN se unen más fácilmente a C3 que los eritrocitos normales, independientemente de que el complemento sea activado por la vía clásica o la alterna. La anemia puede estar asociada a hemosiderinuria, pancitopenia y a veces se presenta con anemia ferropriva, anemia aplástica, leucemia y mielofibrosis; en un 25% de los casos la excreción de hemoglobina urinaria episódica ocurre después del sueño nocturno; un 50% de los casos se presenta entre los 20-40 años y las células HPN también tienen deficiencia de actividad de acetilcolinesterasa. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas Muestras de suero y de sangre total con anticoagulante EDTA o citrato para obtener glóbulos rojos. Las muestras para la prueba de sucrosa son estables 48 horas a temperatura ambiente y 72 horas refrigeradas y para la prueba de Ham, 4 horas a temperatura ambiente y 12 horas refrigeradas. Metodología: Hemólisis de glóbulos rojos. Valores de referencia Prueba de Ham: negativa Prueba de sucrosa: < 5% de hemólisis Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba de sucrosa se considera la prueba de tamizaje y la prueba de Ham es la prueba confirmatoria y que hace el diagnóstico definitivo de HPN. Esto quiere decir que si la prueba de sucrosa es negativa no se justifica hacer la prueba de Ham o prueba del suero acidificado. En HPN la prueba de Ham muestra lisis en el 10-50% de los glóbulos rojos; si se presenta lisis con suero inactivado por calor la prueba no debe considerarse positiva para HPN y se debe pensar en esferocitosis o sensibilización de los eritrocitos por anticuerpos. La prueba también es positiva en anemia diseritropoyética congénita tipo II o HEM-PAS pero en esta entidad la lisis no ocurre con el suero del paciente y solamente en un 30% con suero normal. La prueba puede ser falsa positiva en anemias hemolíticas autoinmunes. En la prueba de sucrosa un 5-10% de hemólisis sugiere HPN y más del 10% es practicamente diagnóstica de la entidad. Se pueden encontrar resultados falsos 440 Fundación Santa Fe de Bogotá positivos en anemias megaloblásticas y hemolíticas autoinmunes. En la HPN también se encuentra disminuida la acetilcolinesterasa eritrocitaria. PRUEBA ENFERMEDAD GRANULOMATOSA CRÓNICA Código 863840F REDUCCIÓN AZUL DE TETRAZOLIUM (NBT) Código 864770F La enfermedad granulomatosa crónica (EGC) es un trastorno heterogéneo de los fagocitos en el cual la enzima NADPH oxidasa, responsable del estallido respiratorio de los neutrófilos, es defectuosa e impide la producción de los mecanismos reactivos del oxígeno. Esto da como resultado la falta de producción de radicales oxidativos y por esto los fagocitos no pueden destruir microorganismos ingeridos, particularmente a los catalasa positivos que degradan el peróxido de hidrógeno. Esto significa que la función fagocítica de los neutrófilos es normal pero hay un defecto en destruir intracelularmente las bacterias y por esta razón los pacientes con EGC tienen riesgo de sufrir infecciones piógenas recurrentes y severas. La EGC es una enfermedad que tiene una incidencia de 1 en un millón y que se hereda de varias maneras, un 60% de los pacientes la heredan ligada al cromosoma X y un 40% de una manera autosómica recesiva. La mayoría de las infecciones se deben a Staphylococcus aureus, Pseudomonas cepacia, Serratia marcescens, nocardía, y aspergillus. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante heparina o ACD para obtener sangre total que debe mantenerse a temperatura ambiente. Simultáneamente se debe tomar muestra control a un individuo normal sin parentesco con el paciente. No se aceptan muestras coaguladas, refrigeradas o que hayan sido congeladas. La muestra es estable por 24 horas. La prueba de NBT se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Coloración azul de tetrazolium (NBT) Valores de referencia: Ver reporte individual Utilidad e interpretacion del resultado La prueba se utiliza para el diagnóstico de la EGC en individuos que presentan infecciones bacterianas a repetición con bacterias tales como Staphylococcus aureus, Klebsiella sp, Serratia marcescens, Escherichia coli, Aspergillus sp, Burkholderia cepacia, Cándida albicans, Salmonella sp, Micobacterias y Pneumocystis ca- Manual de Procedimientos 11 441 rinii. Clinicamente se presenta neumonia, linfadenitis y abscesos en pulmones, hígado ganglios linfáticos y piel. Hay otra prueba similar al NBT que es el test de reducción de 123-Dihidrorodamina que se hace por citometría de flujo y tiene mejor sensibilidad. PURKINJE, CÉLULAS CITOPLASMÁTICAS (YO) AUTOANTICUERPOS Código 906410 Ver células de Purkinje, página………….164 442 Fundación Santa Fe de Bogotá Q QUANTIFERON TB GOLD Código 862758F La tuberculosis es una enfermedad contagiosa causada por el Mycobacterium tuberculosis que infecta principalmente los pulmones pero se puede diseminar a otros órganos del cuerpo. El bacilo se disemina por la via respiratoria a través de las secreciones que el paciente exala cuando tose o estornuda sobre otros individuos. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada directamente en cada uno de los tres tubos de recolección de QuantiFERON®-TB Gold. Los tubos deben estar a temperatura ambiente antes de la recolección. Agitar vigorosamente, por lo menos 10 veces los tubos, para asegurar que toda la superficie del tubo este cubierta con sangre con el fin de solubilizar los antígenos que hay en la pared del tubo. Incubar los 3 tubos verticalmente a 36-38ºC por 16-24 horas. La muestra hasta ese momento es estable 72 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada. Después de la incubación centrifugue cada uno de los 3 tubos por 15 minutos a 2.000-3000 RCF. Identifique los tubos con el nombre del paciente y la fecha de recolección. Las muestras centrifugadas son estables por 28 días en refrigeración. El resultado esta disponible 15 días a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo Utilidad e interpretación del resultado QuantiFERON®-TB Gold es una prueba indirecta para detectar infección por el Mycobacterium tuberculosis y se debe usar en conjunto con la evaluación clínica del paciente, radiografía y otras evaluaciones diagnósticas. Manual de Procedimientos 11 443 QUININA/QUINIDINA Código 905753 La quinidina es un medicamento que actúa a nivel del corazón como agente antiarrítmico clase I y, químicamente, es un estereoisómero de la quinina, un derivado original de la corteza desecada de tallos y raíces de la quina (Cinchona calisaya, Rubiaceae). Se indica en el tratamiento de la frecuencia cardíaca anormal y otros trastornos del ritmo cardíaco, haciendo que el corazón sea más resistente a la actividad eléctrica anormal. La quinidina también se indica en el tratamiento de la malaria. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o muestra de sangre total tomada con anticoagulante para obtener plasma. La muestra es estable 14 días refrigerada y 21 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado esta disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis de polarización fluorescente Rango terapéutico: 2 - 5 mg/ Utilidad e interpretación del resultado La prueba es útil para evitar toxicidad por la droga. Los síntomas de toxicidad (cinchonismo) incluyen tinitus, mareos, contracciones ventriculares prematuras y trastornos gastrointestinales. 444 Fundación Santa Fe de Bogotá R RAPAMICINA (SIROLIMUS) Código 849991F La droga Sirolimus es agente inmunosupresor que se usa para evitar rechazo de órganos trasplantados. El monitoreo de la droga sirve para optimizar la dosis y evitar toxicidad. La concentración pico se alcanza 2 horas después de la administración oral. La vida media en hombres es de aproximadamente 72 horas y en mujeres de 61 horas. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente y 10 días en refrigeración . La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografia líquida de alta resolución/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/MS) Rango terapéutico: 3 - 18 µg/L Utilidad e interpretación del resultado Útil para controlar la concentración de la droga durante el tratamiento, especialmente en los pacientes a quienes se les administra con otros substratos CYP3A4, inhibidores o inductores. Sirve para ajustar la dosis óptima para la inmunosupresión y minimizar la posibilidad de toxicidad asi como para saber si el paciente se esta tomando la droga. RAST IgE ESPECÍFICA Código 862735F Ver Inmunoglobulina E especifica. Página……………………….336 RECEPTORES DE ACETILCOLINA (MODULADORES) Código 835192F RECEPTORES DE ACETILCOLINA ANTICUERPOS Código 835190F Ver Acetilcolina receptores pag……………..38 Manual de Procedimientos 11 445 RECUENTO DE ADDIS Código 907104 Aunque este es un método para evaluar cambios cuantitativos en los elementos formes del sedimento urinario actualmente se usa muy poco en la rutina díaria. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina recolectada durante 12 horas nocturnas en frasco sin preservativo. Metodología Recuento en un hemacitómetro de elementos formes encontrados en una muestra de orina sin centrifugar previo mezclado del especímen. Valores de referencia Leucocitos y células epiteliales: 1’800.000/12 horas Glóbulos rojos: 500.000/12 horas Cilindros hialinos: 0-5.000/12 horas Utilidad e interpretacion del resultado Puede tener valor en el seguimiento de la evolución de enfermedad renal activa especialmente glomerulonefritis crónica. RECUENTO DE EOSINÓFILOS EN CUALQUIER MUESTRA Código 902218 RECUENTO DE EOSINÓFILO EN MOCO NASAL Código 902219 Los eosinófilos son responsables de muchas funciones pro inflamatorias, principalmente en la patogénesis de las enfermedades alérgicas, como célula efectora de hipersensibilidad inmediata, así como en la muerte de parásitos. Una de las enzimas más importantes contenidas en los gránulos es la histaminasa, esta es la que se encarga de hidrolizar la histamina regulando así la respuesta alérgica. Condiciones del paciente y/o la muestra SMoco nasal tomado con isopo de dacrón y hacer extendido en dos laminas. Metodología: Microscopia de luz Valores de referencia: < 20 % eosinófilos en moco nasal 446 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad e interpretacion del resultado Útil en la evaluación de pacientes con problemas alérgicos. RECUENTO DE PLAQUETAS Código 902220 Después de una injuria vascular las plaquetas se adhieren rápidamente al subendotelio expuesto, con la ayuda de varios factores como el colágeno, otras estructuras subendoteliales y la producción de la trombina. Estos factores hacen cambiar la forma de las plaquetas de discoide a esférica, extender los pseudópodos, producir contracción interna que lleva a centralización de los gránulos alfa y a su descarga de la célula. Durante ésta activación también ocurren cambios en la membrana glicoprotéica formándose receptores para glicoproteínas plasmáticas, fibrinógeno y factor de von Willebrand; todo estos procesos resultan en agregación plaquetaria que junto con la fibrina forman el coágulo. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA. No se debe usar heparina pues produce agregación plaquetaria ni realizar la prueba por punción digital porque el recuento puede ser hasta un 25% más bajo que el valor real. No se aceptan muestras hemolizadas ni coaguladas porque hay disminución del recuento plaquetario. Metodología: Recuento instrumental en equipo automatizado o recuento en extendido periférico con microscopio de luz. Valores de referencia: 150.000-400.000 mm3 (1,5-4,0 x 1012 /L) Utilidad e interpretacion del resultado El recuento plaquetario se determina en pacientes con sospecha de enfermedad hemorrágica, púrpura o petequias, prolongación del tiempo de sangría, leucemia/linfoma, DIC, quimioterapia y para determinar la respuesta de los pacientes que están recibiendo transfusiones de plaquetas. RECUENTO DE RETICULOCITOS Código 902223 Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros no nucleados que contienen ácido ribonucléico (ARN) y que continuan sintetizando hemoglobina después de perder el núcleo. Pierden el RNA entre 24-48 horas después de haber entrado a la circulación. El recuento de reticulocitos es un índice de la eritropoyésis efectiva. La policromatofilia que se observa en los extendidos periféricos corresponde a eritrocitos inmaduros y debe correlacionarse con el recuento de reticulocitos. Manual de Procedimientos 11 447 Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante como EDTA. La muestra es estable 72 horas refrigerada. Metodología: Recuento manual, instrumental o por citometría de flujo. Valores de referencia: Adultos: 0,5 - 3% Recien nacidos (< de 2 semanas): 2,5 - 6,5% El valor de referencia puede variar en mujeres que están menstruando. Utilidad e interpretacion del resultado El recuento de reticulocitos se aumenta en anemia hemolítica y hemólisis, hemorragia aguda, procesos infiltrativos de la médula ósea y como respuesta al tratamiento específico de anemia por deficiencia de hierro, vitamina B12 y ácido fólico. Después de un suceso hemorrágico el recuento de reticulocitos se dobla en las primeras 24 horas debido a una descarga prematura de reticulocitos de “stress”. Después de 7-10 días se produce un pico (3 veces el valor base) debido a que los reticulocitos recién producidos entran a la circulación. En procesos infiltrativos hay glóbulos rojos inmaduros que se escapan a la circulación desde la médula o desde focos eritopoyéticos del hígado y del bazo. Para corregir en casos de hematocrito anormal se hace la siguiente fórmula: Recuento de reticulocitos corregido = % de reticulocitos x hematocrito del paciente /45 Bajo condiciones normales diariamente salen a la sangre periférica el 1% de los reticulocitos; estas células permanecen por un día en la circulación antes de perder el retículo de ARN y luego se convierten en eritrocitos jóvenes. Si hay aumento en la eritropoyésis (hipoxia o estimulación por eritropoyetina) hay descarga prematura de reticulocitos grandes jóvenes que sobreviven por 48 horas o por el doble de un glóbulo rojo normal. En estos casos se aplica un factor de corrección de 2 para compensar la mayor sobrevida 2) Para corregir por disminución en el hematocrito y la descarga prematura de reticulocitos jóvenes se utiliza el Índice de Producción de Reticulocitos (IPR) según la fórmula de Finch. IPR = % de reticulocitos x hematocrito del paciente /45 ---------------------------------------------------------------------------------------- 2 (tiempo de maduración del reticulocito) 448 Fundación Santa Fe de Bogotá RECUENTO DE HAMBURGUER Código 907105 Es un análisis de orina que permite valorar la funcionalidad renal mediante el estudio microscópico de los sedimentos urinarios. La prueba consiste en el conteo celular y de cilindros en la orina centrifugada, donde el paciente es sometido a una dieta restrictiva de líquidos, para luego recolectar la orina, la cual debe hacerse de forma cronometrada en 2 h, 3h, 4 h o 24 h. Condiciones del paciente y/o la muestra Descartar la primera orina de la mañana, a partir de este momento, contar 3 horas y durante este tiempo recolecte toda la orina. La muestra es estable 2 horas a temperatura ambiente y 24 horas refrigerada. La ingesta de líquidos debe restringirse durante el periodo de recogida en la medida que lo permita el estado del paciente. Tener cuidado especial en evitar la contaminación de la muestra con secreciones vaginales o heces. Metodología: Microscopia de luz para observar una alícuota de orina Valores de referencia: Células epiteliales 0-1.000/minuto Leucocitos 0-500/minuto Glóbulos rojos: 0-500/minuto Cilindros: 0/minuto Utilidad e interpretacion del resultado Es una prueba sencilla de función renal, especialmente glomerular. RENINA Código 904003 RENINA PLASMÁTICA ACTIVIDAD Código 862648F Manual de Procedimientos 11 449 RELACIÓN ALDOSTERONA/ACTIVIDAD DE LA RENINA PLASMÁTICA Código 862713F Es una enzima proteolítica (aspartilproteasa) producida como prerenina en el hígado y activada a renina por las células yuxtaglomerulares renales. La renina cataliza la conversión del angiotensinógeno a angiotensina I (Ag I) la cual es biológicamente inactiva y a su vez es convertida a angiotensina II (Ag II) por la enzima convertidora de angiotensina (ACE). La Ag II es un potente vasoconstrictor y un regulador importante de la secreción de aldosterona porque estimula la zona glomerulosa de la suprarrenal. La secreción de la renina es estimulada por caídas de la presión de perfusión de la arteria renal, por hiponatremia o por baja en el volumen plasmático renal. El hiperaldosteronismo primario (HAP) es una de las causas conocidas de hipertensión arterial. Estudios recientes han demostrado que el HAP puede ser mucho más prevalente cuando se miden aldosterona plasmática (AP), la actividad de renina plasmática (ARP) y la relación AP/ARP para el screening de esta enfermedad. Condiciones del paciente y/o la muestra Es preferible tomar la muestra con el paciente en ayunas y anotar las drogas que esté tomando. Según criterio médico y si el estado clínico del paciente lo permite es preferible suspender, 2-4 semanas antes de la prueba, las drogas antihipertensivas, progestágenos, estrógenos y diuréticos. Si la muestra se va a tomar con el paciente de pie (sentado o parado) debe haber estado en esta posición por lo menos por dos horas antes, es decir que debe tomarse por lo menos dos horas después de haberse levantado de la cama. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. La muestra debe mantenerse a temperatura ambiente hasta la separación del plasma y éste congelarse inmediatamente despues si no se va a procesar en las proximas 24 horas. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente y 28 días congelada a -20ºC. La prueba de renina total se procesa en laboratorio de referencia local y la de actividad plasmática se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. El enfriamiento de la muestra de sangre total puede producir crioactivación y hacer que se convierta el precursor inactivo de la enzima (prerenina) a renina activa. Esto ocurre cuando las muestras se enfrían o se exponen a temperaturas de 4ºC por períodos prolongados de tiempo; si esto sucede se obtienen resultados de actividad plasmática de renina falsamente elevados. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) 450 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia: Renina total en pg/mL De pie: 2,64 – 27,66 Acostado: 1,68 – 23,94 Neonatos de 1-3 meses: 2-6 veces más que el valor en adultos 3-12 meses: 1-3 veces más que el valor en adultos Actividad plasmática de 0,25 – 5,82 ng/mL/hora renina: Relación AP/ARP: ≤ 24. Para el cálculo la ARP no debe ser menor de 0,3 ng/mL/ hora Utilidad e interpretacion del resultado La renina activa, Ag I, Ag II y la ACE se denominan colectivamente como el sistema renina-angiotensina. Bajo condiciones normales y en muchas situaciones patológicas, la cantidad de renina secretada por los riñones determina la actividad del sistema y por esta razón es un buen indicador de su funcionamiento. La determinación de renina es útil para diferenciar entre aldosteronismo primario y secundario, diagnosticar hipertensión renovascular y controlar el tratamiento con mineralocorticoides. La causa más común de hipertensión renino-dependiente es la hipertensión debida a estenosis de la arteria renal, hipertensión renovascular e hiperaldosteronismo. En hipertensión esencial o primaria la causa es desconocida y típicamente en estos casos la renina está normal o baja (75%); en un 25% de estos casos la renina esta disminuida y aproximadamente en un 15% se presenta renina elevada; en este último grupo al parecer hay un riesgo mayor de ACV e infarto del miocardio. Entre las causas de hipertensión asociadas a renina elevada están tumores reninosecretores, hipertensión maligna asociada a hipersecreción de aldosterona, hipertensión renovascular (hiperaldosteronismo secundario), insuficiencia renal crónica, síndrome de Cushing, enfermedad de Addison, hipoaldosteronismo secundario y causas iatrogénicas como tratamiento con diuréticos, vasodilatadores, glucocorticoides y estrógenos. Entre las causas de hipertensión asociadas a renina baja están el exceso de mineralocorticoides tanto primario como secundario como en aldosteronismo primario o idiopático, exceso de 11-deoxi-corticosterona , carcinoma suprarrenal, ingestión excesiva de sodio, síndrome de disminución de renina y aldosterona en hipertensión de larga data y en diabetes mellitus. Manual de Procedimientos 11 451 RESISTENCIA A LA PROTEÍNA C ACTIVADA (FACTOR V LEIDEN) Código 902039 Ver Proteína C Resistencia, página………………..428 RETRACCIÓN DEL COÁGULO Código 902041 La retracción del coágulo depende de que las plaquetas estén intactas y de la presencia de una proteína contráctil de las plaquetas llamada trombastenina. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante para utilizar la sangre total. No se aceptan muestras hemolizadas y debe anotarse las drogas que esté tomando el paciente pues la terapia con anticoagulantes y otras drogas que tienen efecto anticoagulante evitan la formación del coágulo. Metodología: Se coloca 1.0 ml de sangre total en cada uno de tres tubos de 10x5 mm que se incuban en un baño a 37 oC. Los tubos se examinan después de dos horas de incubación y el resultado se informa como positivo si hay retracción en cualquiera de los tubos. Valores de referencia: Normalmente después de tomada la muestra el coágulo empieza a formarse y retraerse a los 30 minutos y se completa a las 24 horas . Utilidad e interpretacion del resultado El tiempo de retracción del coágulo es un indicador de disfunción plaquetaria o de la funciónalidad de las plaquetas. Se requiere que el nivel del fibrinógeno y el hematocrito sea normal. Se considera una prueba de tamizaje que tiene poca sensibilidad y especificidad. Hay retracción anormal del coágulo en trombocitopenia, trombastenia de Glanzmann, coagulación intravascular diseminada (CID), policitemia, hemofilia severa, hipofrinogenemia y terapia con aspirina y con antiagregantes plaquetarios. RIBOFLAVINA (VITAMINA B2) Código 862623F La riboflavina es una vitamina B. Se puede encontrar en ciertos alimentos como leche, carne, huevos, nueces, harina enriquecida y las verduras de color verde.La riboflavina es con frecuencia utilizada en combinación con otras vitaminas B en productos de vitaminas del complejo B. El complejo de vitamina B generalmente incluye la vitamina B1 (tiamina), la vitamina B2 (riboflavina), la vitamina B3 (niacina/niacinamida), la vitamina B5 (ácido pantoténico), la vitamina B6 (piridoxina), la vitamina B12 (cianocobalamina) y el ácido fólico. 452 Fundación Santa Fe de Bogotá Sin embargo, algunos productos no contienen todos estos ingredientes y algunos pueden incluir otros, como biotina, ácido para-aminobenzoico (PABA), bitartrato de colina e inositol. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para obtener plasma. El tubo se debe envolver en papel de aluminio para proteger la muestra de la luz. La muestra es estable 4 horas a temperatura ambiente, 24 horas refrigerada y 30 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografia líquida de alta resolución (HPLC) Valores de referencia: 6,2-39 nmol/L Utilidad e interpretacion del resultado La determinación de la vitamina B2 es útil para prevenir la deficiencia en riboflavina que tiene varias manifestaciones clínicas fáciles de identificar debido a su expresión visible en zonas como piel, lengua, labios, entre los signos y síntomas están: • Glositis: Es una afección caracterizada por la hinchazón de la lengua, pérdida de papilas gustativas y apariencia lisa del órgano. • Queilitis angular: Lesiones inflamatorias en la comisura de los labios, frecuentemente bilateral. En casos extremos, se puede presentar la formación de pequeñas úlceras y maceración del epitelio. • Dermatitis seborreica: Formación de escamas en la piel, con carácter inflamatorio. Se presenta comúnmente en áreas ricas en compuestos lipoides como el cuero cabelludo. RIBOSOMAL P, ANTICUERPOS Código 862662F Se ha encontrado que el suero de pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) reacciona con antígenos proteicos ribosomales por lo cual estos anticuerpos se consideran altamente específicos para el LES y se han reportado en pacientes con compromiso del SNC en la asi llamada psicosis lúpica. La frecuencia de estos anticuerpos en pacientes con LES es de aproximadamente el 12%. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir del envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático/Inmunoanálisis por látex. Valores de referencia: Negativo ≤ 11,00 Unidades Manual de Procedimientos Indeterminado: 11-20 Positivo: ≥ 20 11 453 Utilidad e interpretacion del resultado Útil como prueba auxiliar para la evaluación de pacientes con LES y como ayuda para el diagnóstico diferencial de pacientes con LES y síntomas neuropsiquiátricos. RICKETTSIA CONORI IgG/ IgM Código 862718F La infección por la Rickettsia conori llamada también fiebre botonosa o fiebre manchada del Mediterraneo se encuentra en la Indía, Africa y el área mediterránea. La medición de los anticuerpos IgG/IgM contra R. conori es de ayuda diagnóstica para la infección y para evaluar el tiempo transcurrido desde la exposición. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 2 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM: Título ≤ 1:16 Utilidad e interpretacion del resultado Diagnóstico de infección por Rickettsia conori. ROTAVIRUS, ANTÍGENOS Código 906327 El Rotavirus pertenece a la familia reoviridae y es el agente causal primario de gastroenteritis no bacteriana aguda especialmente en bebés y niños menores de dos años. Se transmite por contacto orofecal y tiene un período de incubación de 1-3 días. Produce en niños desde una diarrea leve hasta un proceso diarreico severo con deshidratación que puede ser fatal. En adultos la sintomatología es subclínica pero puede ser más severa en ancianos confinados en casas de reposo y en pacientes inmunosuprimidos o transplantados. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de materia fecal recolectada en recipiente estéril dentro de la primera semana del comienzo de los síntomas pues después de 8 días de infección el número de partículas virales disminuye significativamente haciendo que el resultado sea negativo. Las heces se pueden recolectar con escobillón siempre 454 Fundación Santa Fe de Bogotá y cuando se obtengan por lo menos 0,2 mL. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 7 días congelada a-20ºC. Metodología: Prueba rápida por Inmunocromatografía Valores de referencia: Negativo para Adenovirus y Rotavirus Utilidad e interpretacion del resultado Útil en el diagnóstico diferencial de la enfermedad diarreica aguda en bebés y niños menores de 2 años. RUBÉOLA, ANTICUERPOS IgG Código 906241 RUBÉOLA, ANTICUERPOS IgM Código 906243 El virus de la rubéola (sarampión alemán) es un virus ARN miembro de la familia Togaviridae, género Rubivirus que produce una enfermedad eruptiva, infecciosa de poca gravedad que generalmente afecta a los niños. Sólo al ser contraída por la madre durante el embarazo, supone una grave amenaza para el feto porque puede producir anomalías congénitas; produce abortos espontáneos en el 20% de los casos. Se caracteriza por una erupción en la piel, linfadenopatías y, especialmente en los adultos, dolores en las articulaciones. Por lo general la erupción en la piel dura unos tres días y puede presentarse acompañada de una ligera fiebre. Hasta la mitad de las personas afectadas no presenta ningún síntoma en absoluto. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o de sangre total con anticoagulante como EDTA potásico, heparina de litio o citrato de sodio para obtener plasma. La muestra es estable 4 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a -20ºC. Metodología: Técnica de inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Valores de referencia: IgG: Negativo: 0,0-4,9 IU/mL Zona gris: 5,0-9,9 IU/mL Positivo: ≥ 10,0 IU/mL IgM: Negativo Índice < 1,20 Zona gris: 1,20-1,60 Positivo Índice ≥ 1,60 Manual de Procedimientos 11 455 Utilidad e interpretacion del resultado La detección de IgG indica infección pasada o estado de inmunidad natural. La detección de IgM indica infección aguda. Si no hay historia de exposición al virus de la rubéola es difícil interpretar el resultado de los anticuerpos IgM debido de que puede ser un falso positivo por Parvovirus, factor reumatoideo, Citomegalovirus o el anticuerpo puede permanecer positivo por más de un año después de vacunación o infección. En los casos de la rubéola congénita los anticuerpos se deben medir tanto en la madre como en el recién nacido; si hay positividad en el suero del recién nacido es probable que haya habido paso transplacentario de la infección. 456 Fundación Santa Fe de Bogotá S SALICILATOS Còdigo 905756 Son un grupo de compuestos usados como analgésicos, antipiréticos y antiinflamatorios cuya actividad farmacológica se deriva del ácido salicílico que es muy irritante y solo puede usarse tópicamente. El ácido acetilsalicílico (ASA, aspirina) y el salicilato de sodio son los compuestos que más comunmente se usan en forma oral. El ASA se hidroliza rápidamente en el torrente circulatorio a ácido salicílico y como éste tiene una vida media muy corta (15-20 minutos) lo que se mide es el salicilato de sodio que tiene una vida media más larga que de acuerdo a la dosis puede estar entre 2-3 horas y 20-30 horas. El metabolismo del salicilato ocurre principalmente en el hígado donde se convierte a ácido salicilúrico y un 5% de la droga se excreta sin cambios por la orina. El tiempo para alcanzar el estado de equilibrio es de 1-5 días de dosificación oral continua. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero o de sangre total con anticoagulantes como heparina de litio o EDTA bipotásico para obtener plasma. No se debe utilizar tubo con gel. Las muestras son estables 2 semanas en refrigeración. Metodología: Enzimática Rango terapéutico: 30-100 µg/dL como analgésico y antipirético 150-300 µg/dL como antiinflamatorio en fiebre reumática Nivel tóxico ≥ 300 µg/dL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los síntomas de toxicidad por salicilatos incluyen náusea, vómito, tinitus, dolor de cabeza, confusión, hipertemia, dificultad para hablar y convulsiones. Se recomienda la determinación de los niveles de esta droga en casos de sobredosis o en pacientes con artritis reumatoidea donde se deben mantener niveles terapéuticos entre 15-30 mg/dL. En pacientes intoxicados con acetaminofen que están siendo tratados con Nacetilcisteína I.V. los niveles de salicilatos están falsamente disminuidos. Manual de Procedimientos 11 457 SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL Código 907008 El examen de sangre oculta es una parte importante del coprológico como método de tamizaje para detectar cáncer colorectal o hemorragia gastrointestinal de otro origen; las drogas como aspirina, indometacina, fenilbutazona, reserpina, hierro, corticosteroides, antiinflamatorios no esteroideos y el alcohol pueden producir hemorragia y dar reacción positiva. La vitamina C puede dar lugar a falsos negativos y las dietas basadas en productos cárnicos o peroxidasas de plantas como las del rábano, manzanas, naranjas y banano dan lugar a falsos positivos. Condiciones del paciente y/o de la muestra Recolección de muestra de materia fecal en recipiente limpio que permita cierre hermético. La muestra es estable 12 horas refrigerada. La muestra debe ser entregada en el laboratorio, debidamente identificada, en el menor tiempo posible para evitar degradación y destrucción de componentes y microorganismos. En la mayoria de los casos se requieren tres muestras seriadas tomadas en diferentes días. Metodología: Se realiza con el reactivo Hemosure que trata de anticuerpos contra la Hemoglobina humana en materia fecal. No requiere ningún tipo de dieta Valores de referencia: Negativo para sangre oculta Utilidad e interpretación del resultado Investigar posibilidad de cáncer colorrectal o hemorragia gastrointestinal SARAMPIÓN ANTICUERPOS IgM Código 862706F SARAMPIÓN, ANTICUERPOS IgG Código 906245 El virus del sarampión es un miembro de la familia Paramixoviridae, género Morbillivirus que produce una enfermedad eruptiva, altamente contagiosa que se presenta en niños y que gracias a la vacunación permanente en la comunidad ha disminuido dramáticamente. Es una infección aguda, autolimitante, sin serias consecuencias en personas normales, no asi en inmunodeficientes. Una complicación tardía y poco común del sarampión, que ocurre en niños entre las edades de 5-14 años, es la panencefalitis esclerosante subaguda que tiene un comienzo insidioso y progresivo, es generalmente fatal y ocurre en aproximadamente 1/100.000 casos. 458 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o de LCR tomado en tubo estéril. La muestra de suero es estable 1 semana refrigerada y 2 meses congelada a -20ºC. La muestra del LCR es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 30 días congelada a-20ºC. La prueba de LCR para anticuerpos IgM se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Suero IgG/IgM: Inmunoanálisis enzimático (EIA) LCR: IgG: Inmunofluorescencia (IFA) IgM: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Suero: IgG/IgM Negativo: Índice ≤ 0,90 Indeterminado: Índice entre 0,91 – 1,09 Positivo: Índice ≥ 1,10 LCR: IgG: ≤ 1:64 IgM: Negativo Índice ≤ 1,1 Utilidad e interpretacion del resultado La detección de IgG indica infección pasada o estado de inmunidad natural o por vacunación. La detección de IgM indica infección aguda y es detectable 2-3 semanas después de la aparición del sarpullido. SCL 70, ANTI-ESCLERODERMA IgG Código 906455 Son autoanticuerpos dirigidos contra el antígeno nuclear ScL-70, también conocido como DNA-topoisomerasa-1, que es un marcador específico para escleroderma. El ScL-70 se encuentra más frecuentemente (20-60%) en las formas de escleroderma severa progresiva y difusa y solo en un 20% en el CREST donde son más característicos los ANA anticentrómero. La presencia de este anticuerpo aumenta en aproximadamente 17 veces el riesgo de desarrollar fibrosis pulmonar en escleroderma, riesgo que justifica la necesidad de controlar la función pulmonar en estos pacientes. También indica un mal pronóstico en pacientes con fenómeno de Raynaud. Manual de Procedimientos 11 459 Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 48 horas en refrigeración y 2 meses congelada. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Técnica semicuantitativa de inmunoanálisis enzimático en fase sólida (microELISA) Valores de referencia: Negativo: < 20 unidades Positivo débil: 20-39 unidades Positivo: 40-80 unidades Positivo fuerte; >80 unidades Utilidad e interpretacion del resultado Para diagnóstico y evaluación de pacientes con escleroderma y fenómeno de Raynaud. No es útil hacer esta prueba en pacientes que no sean positivos para anticuerpos antinucleares. SEROLOGÍA SÍFILIS RPR Código 906915 Ver Treponema pallidum serología RPR, VDRL, página………………..490 SEROTONINA-5 HIDROXI-TRIPTAMINA Código 903434 SEROTONINA -5 HIDROXI-TRIPTAMINA EN ORINA DE 24H Código 903435 La serotonina se deriva del triptófano y el 95% es trasportada por las plaquetas; es un estimulante del músculo liso y es deaminada oxidativamente al ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA). Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente no debe haber ingerido aguacate, banano, piña, ciruelas, tomate, berenjena ni nueces en las 48 horas previas al examen. Hay drogas que afectan los niveles de serotonina como son reserpina, metildopa, inhibidores MAO, litio y morfina. Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo especial con anticoagulante EDTA y ácido ascórbico para obtener sangre total. El suero debe separarse rápidamente y mantenerse congelado en tubo plástico hasta el momento de proce- 460 Fundación Santa Fe de Bogotá samiento. La muestra de sangre total es estable 42 días en refrigeración y la de suero es estable 24 horas refrigerada y 90 días congelada a -20ºC. La muestra de orina debe recolectarse durante 24 horas y mantenerse en frasco con 25 ml de ácido acético al 50%. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografia líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: Suero: ng/mL Mujeres: 100 - 225 Hombres: 90 - 195 Niños: ≤ 301 Sindrome Carcinoide: 500.0 - 3500.0 Sangre total: ≤ 330 ng/mL Orina: ≤ 210 μg/24 hrs Utilidad e interpretacion del resultado Se han encontrado concentraciones elevadas en varias condiciones patológicas que comprometen mecanismos serotonérgicos periféricos como síndrome carcinoide, migraña, esquizofrenia, hipertensión esencial, enfermedad de Huntington y distrofia muscular de Duchenne. Elevaciones moderadas se encuentran en obstrucción intestinal aguda, fibrosis quística, infarto agudo del miocardio y sprue no-tropical. En tumores carcinoides, dependiendo del tejido de origen es variable el metabolismo de la serotonina a 5-HIAA. La mayoría de los pacientes generalmente tienen niveles muy elevados de 5-HIAA y los tumores carcinoides metastásicos producen niveles por encima de 400 ng/mL. SHIGELLA, SEROTIPIFICACIÓN Código 901319 Las especies de Shigella se pueden separar usando anticuerpos específicos en S. dystenteriae (grupo A), S. flexneri (grupo B), S. boydii (grupo C), y S. sonnei (grupo D). Esta última es el serotipo más comúnmente asociado con diarrea, aunque los síntomas tienden a ser leves o asintomáticos. La S. dystenteriae es la que menos se recupera pero es la más virulenta. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de la bacteria tomada de un cultivo puro de Shigella que ha crecido en Manual de Procedimientos 11 461 agar. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente. Metodología: Seroaglutinación con antisueros específicos. Valores de referencia: Se incluye reporte del resultado. Utilidad e interpretacion del resultado Útil para diferenciar las distintas especies de Shigella. SÍNDROME PARANEOPLÁSICO, EVALUACIÓN Código 862672F Los trastornos neurológicos del sindrome paraneoplásico autoinmune son el reflejo de las respuestas celular y humoral al cáncer de aparición reciente o recurrente entre los que están carcinoma pulmonar de célula pequeña, timoma, carcinoma de ovario, de seno y linfoma de Hodgkin; en niños el neuroblastoma, timoma, linfoma de Hodgkin y condroblastoma. Los autoanticuerpos específicos para proteínas onconeurales encontrados en las membranas, citoplasma y núcleo de las neuronas, glía o músculo se generan como resultado de la respuesta inmune y sirven como marcadores serológicos de la autoinmunidad paraneoplásica. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente y 14 días en refrigeración. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Diferentes tecnologías serológicas. Valores de referencia: Ver reporte de los resultados de todas las pruebas realizadas Utilidad e interpretacion del resultado Entre las pruebas que se hacen están: Anticuerpos antinucleares neuronales (ANNAs 1, 2 y 3); anticuerpos anti-glial/neuronal nuclear (AGNA-1 y aka Sox1); anticuerpo citoplasmático neuronal y muscular (PCA 1, 2, Tr, CRMP-5, anfifisina y estriacional; receptores de acetil-colina y otros. Todos estos autoanticuerpos son efectores potenciales de disfunción neurológica. Sm, ANTICUERPOS Código 906456 Ver Anticuerpos antinucleares……………pag.....106 SODIO Código 903864 462 Fundación Santa Fe de Bogotá SODIO EN ORINA (micción simple) Código 903865-2 SODIO EN ORINA DE 24 HORAS Código 903865 Es el mayor catión (+) del líquido extracelular; la dieta normal contiene de 100250 nmol/L y los riñones regulan el contenido del sodio corporal. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o sangre total tomada con anticoagulante como heparina de litio, amonio o sodio para obtener plasma (la heparina sódica incrementa los niveles de sodio en aproximadamente 0,5 mmol/L). La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 28 días congelada a -20ºC Muestra de orina de micción simple o recolectada durante 24 horas en frasco sin preservativo. Las muestras son estables 14 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 2 meses congelada a -20ºC. Metodología: Potenciometría indirecta que utiliza electrodos de ión selectivo específicos para sodio. Valores de referencia: Suero o plasma: 137-145 mEq/L Orina de 24 horas: 52-380 mEq/día Orina micción simple: 28-272 mEq/L Utilidad e interpretacion del resultado De utilidad en la evaluación de los trastornos del equilibrio ácido-básico en pacientes descompensados hemodinámicamente. Ademas es de ayuda en el diagnóstico y tratamiento del aldosteronismo, diabetes insípida, hipertensión, enfermedad de Addison, deshidratación, secreción inapropiada de la hormona antidiurética y otras enfermedades que comprometan el balance de los electrolitos El valor diagnóstico de la determinación del sodio urinario es para la evaluación de pacientes que presentan hiponatremia, oliguria aguda (azohemia prerenal, necrosis tubular aguda) y depleción de volumen (pérdida extrarenal de sodio por sudor, tracto gastrointestinal y “tercer espacio”); en los dos últimos casos el sodio urinario está bajo entre 0-30 mmol/L . También se encuentra bajo en estados edematosos por insuficiencia cardíaca congestiva, enfermedad hepática, síndrome nefrótico, síndrome de hormona antidiurética y enfermedad de Addison. Manual de Procedimientos 11 463 SOMATOMEDINA C (IGF-1) Código 904101 PROTEÍNA TRASPORTADORA DE LA SOMATOMEDINA Código 904110 La somatomedina-C o factor 1 de crecimiento similar a la insulina (IGF-1) es un péptido que estimula el crecimiento somático y está regulado principalmente por la hormona de crecimiento (GH) y por la ingesta nutricional. Se han identificado dos péptidos, IGF-1 e IGF-2 que circulan unidos en un 95% a las proteínas transportadoras IGFBP-2 y IGFBP-3, pero el que tiene mayor actividad en estimular la proliferación celular y la síntesis protéica es la IGF-1 que se produce en el hígado. Las proteínas transportadoras mantienen niveles plasmáticos relativamente altos de IGF-1 y minimizan las fluctuaciones circulatorias de la hormona. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas. Muestra de suero. La muestra es estable 24 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 28 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Quimioluminiscencia Valores de referencia: ng/mL Niños Niñas 2m -5 años: 33,5 – 171,8 27,4 – 113,5 6 - 8 años: 79,8 – 244,0 54,9 – 206,4 9- 11 años: 87,4 – 399,3 85,2 – 248,8 12 -15años: 188,4 – 509,9 115,4 – 498,2 16 -20 años: 267,5 – 470,8 247,3 – 481,7 Adultos Hombres Mujeres 21 - 24años: 149,1 – 332,3 187,9 - 400 25 - 39años: 107,8 – 246,7 96,4 – 227,8 40 - 54años: 92,7 – 244,6 88,3 – 209,9 >55años: 54,0 – 204,4 54,6 – 185,7 464 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los niveles de IGF-1 son consistentemente bajos en niños con deficiencia de GH (hipopituitarismo, enanismo) y se elevan con inyecciones de esta hormona. En general una concentración normal de IGF-1 en un niño de baja estatura es una fuerte evidencia en contra del diagnóstico de deficiencia de hormona de crecimiento. También hay disminución en desnutrición, anorexia, deficiencia aislada de GH, enanismo de Laron (GH elevada) y en niños con craniofaringioma. Hay niveles elevados en embarazo, acromegalia y gigantismo debido a excesiva secreción de GH. Después de la resección de un tumor pituitario los niveles pueden demorarse hasta 4 días para volver a lo normal. SOMATOSTATINA Código 904708 La somatostatina es una neurohormona producida en el cerebro, hipotálamo y tracto gastrointestinal. Es un regulador fisiológico de las funciones gastrointestinales y de las células de islotes y es supresora de muchas de las hormonas de la pituitaria como la hormona de crecimiento, prolactina y tirotropina o TSH. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente debe estar en ayunas 10-12 horas antes de la toma de la muestra y no debe recibir medicación de antiácidos o que afecten la secreción de insulina o la motilidad intestinal por lo menos por 48 horas antes de la toma de la muestra. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA, previamente congelado, para obtener plasma que debe congelarse inmediatamente. Solamente debe descongelarse cuando se va a hacer el procedimiento. La muestra es estable por 8 horas a temperatura ambiente y/o refrigerada y 28 días congelada a -20°C. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Radioinmunoanálisis (RIA) Valores de referencia: ≤ 31 pg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para diagnosticar tumores productores de somatostatina. Niveles elevados se encuentran en somatostatinoma, carcinoma medular de tiroides y feocromocitoma. También puede haber elevación en APUDomas como VIPoma, insulinoma, glucagonoma y gastrinomas. Manual de Procedimientos 11 465 STREPTOCOCCUS BETA HEMOLÍTICO GRUPO A (Prueba rápida) Código 901321 La infección por Streptococcus del grupo A (St pyogenes) en la faringe y en la piel (erisipela, piodermitis) son comunes y fácilmente diagnosticadas por cultivo pero pueden dar lugar a complicaciones tardías (1-5 semanas) más severas como fiebre reumática y glomerulonefritis. La faringitis producida por St pyogenes se caracteriza por fiebre, dolor faríngeo, faringitis o tonsilitis exudativa, linfadenopatías cervicales dolorosas, edema y enrojecimiento de la faringe, pilares tonsilares y paladar blando. Concomitantemente puede haber otitis media y abscesos peritonsilares. Condiciones del paciente y/o la muestra Recolectar el exudado faríngeo utilizando un escobillón de dacrón o rayón frotando cuidadosamente la faringe posterior y ambas amígdalas o la fosa amigdaliana. No utilizar escobillones de alginato de calcio ni impregnados con carbón. La muestra debe enviarse al laboratorio en tubo seco tapado. Si se solicita además cultivo faríngeo deben enviarse dos escobillones separados. Metodología: Aglutinación de partículas de látex Valores de referencia: Negativo Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Diagnóstico de faringitis producida por St. pyogenes grupo A. La prueba tiene una sensibilidad de 97,3% y especificidad de 98,6%. STREPTOCOCCUS pneumoniae Ac IgG, 7 SEROTIPOS Código 862622F STREPTOCOCCUS pneumoniae Ac IgG, 14 SEROTIPOS Código 862638F STREPTOCOCCUS pneumoniae Ac, IgG 23 SEROTIPOS Código 901322F El Streptococcus pneumoniae es una bacteria Gram-positiva que causa una gran variedad de infecciones en niños y adultos, incluyendo enfermedad invasiva como bacteremia y meningitis e infecciones del tracto respiratorio como neumonia y otitis media. 466 Fundación Santa Fe de Bogotá Las vacunas que contienen polisacáridos bacteriales son efectivas para generar una respuesta inmune que resulta en la producción de anticuerpos IgG los cuales protegen a un individuo contra la enfermedad bacteriana. La inmunización activa de niños mayores de 2 años y adultos se hace con vacunas de polisacáridos no conjugados que contienen 23 serotipos llamados 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F, y 33F. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada. Se debe obtener una muestra antes de la vacunación y otra después de 4-6 semanas post-vacunación para calcular la efectividad de la vacuna. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: La relación entre la muestra pre y post vacunación ≥ a 4 indica que el individuo tuvo una buena respuesta a los serotipos de la vacuna. Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Evaluar la respuesta del anticuerpo IgG a la inmunización activa con las vacunas no-conjugadas de 7, 13 y 23 serotipos del Streptococcus pneumoniae. SUBCLASES IgG 4 Código 827880F Ver Inmunoglobulinas pag……………336 SULFÁTIDOS, ANTICUERPOS Código 862658F Estos anticuerpos están asociados a polineuropatías con importante componente sensitivo y neuropatía desmielinizante. En algunos casos los pacientes sufren el síndrome de GALOP (Gait disorder; Autoantibody; Late-age Onset; Polyneuropathy), sin embargo, los anticuerpos policlonales antisulfátidos se asocian más a neuropatía axonal. Algunas neuropatías con anticuerpos antisulfátidos mejoran con tratamiento inmunosupresor. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 2 semanas refrigerada y/o congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Manual de Procedimientos 11 467 Valores de referencia: Anticuerpos IgG/IgM: Título ≤ 1.500 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Los anticuerpos antisulfátidos asociados a paraproteinemia IgM se relacionan fundamentalmente con la neuropatía desmielinizante. SULFATO EN ORINA Código 862634F La concentración del sulfato urinario es un reflejo de la ingesta diaria de proteínas como carne, pescado y pollo, los cuales son ricos en los aminoácidos metionina y cisteína que contienen sulfuros. El sulfato urinario se puede usar para evaluar la ingesta de proteínas para propósitos nutricionales. Una dieta rica en proteínas se ha asociado con un aumento en el riesgo de cálculos renales posiblemente debido a la excreción del calcio urinario causada por la producción de ácido a partir del metabolismo de aminoácidos que contienen sulfuros. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina recolectada durante 24 horas en frasco con 10 g de ácido borico o 10 mL de HCl 6N como preservativos. La muestra es estable 7 días en refrigeración y/o congelada. Mezcle bien y anote el volumen total antes de tomar la alícuota para la prueba. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoquimioluminiscencia Valores de referencia: < 30,0 mmol/24hr Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para evaluar la ingesta nutricional de proteínas animales. SULFONILUREAS TAMIZAJE DE DROGAS Código 862715F Las sulfonilureas son medicamentos pertenecientes a la clase de antidiabéticos orales indicados en el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2. Actúan aumentando la liberación de insulina de las células beta del páncreas. Las diferentes sulfonilureas tienen farmacocinéticas propias, la elección depende en lo propenso que esté el paciente de desarrollar una hipoglucemia, puesto que las sulfonilureas de acción extendida que producen metabolitos activos tienden a inducir hipoglicemias. 468 Fundación Santa Fe de Bogotá Sin embargo, son capaces de alcanzar un buen control de la glicemia cuando el paciente tolera el medicamento. Los agentes de acción rápida pueden no ser capaces de controlar adecuadamente los niveles de glucosa en sangre. Las sulfonilureas de primera generación son: Acetohexamida, Clorpropamida, Tolbutamida y Tolazamida. Las de segunda generación son: Glipizida, Gliclazida, Glibenclamida (gliburida) y GLíquidona y la de tercera generación es Glimepirida Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de orina de micción simple sin preservativo. La muestra es estable 72 horas a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y/o congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/ MS) Valores de referencia: Acetohexamida: 20-60 µg/mL Clorpropamida: 75-250 µg/mL Tolbutamida: 40-100 µg/mL Tolazamida: hasta 80 µg/mL 2ª Generación Glipizida: 200-1.000 ng/mL Gliburida: hasta 1.500 ng/mL Nateglinide, ng/mL: hasta 10.000 ng/mL Repaglinide, ng/mL: hasta 200 ng/mL 3ª Generación Glimepiride, ng/mL: 80-250 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Control de los agentes anti-diabéticos para un tratamiento adecuado y evitar toxicidad. Manual de Procedimientos 11 469 T TACROLIMUS (FK -506) Código 849995F El tacrolimus es un agente inmunosupresor que ha demostrado ser efectivo en el tratamiento para evitar el rechazo del órgano trasplantado. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA para utilizar sangre total. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20ºC. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Rango terapéutico: 5,0-20,0 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para controlar el tratamiento con Tacrolimus particularmente en individuos que reciben conjuntamente sustratos CYP3A4, inhibidores e inductores, para ajustar la dosis óptima de la inmunosupresión y minimizar toxicidad y para evaluar si el paciente se está tomando el medicamento. TALIO (SUERO, ORINA) Código 844440F TALIO EN ORINA DE 24 H Código 905760 El talio es un subproducto de la fundición del plomo que es muy usado como rodenticida en productos como matasiete, zelio, exterminol, fulmicida y otros. Se absorbe rápidamente vía ingestión, inhalación, contacto con la piel y a través de las membranas mucosas. Se considera igual de tóxico que el plomo y el mercurio con iguales sitios de acción. La sintomatología clínica de la intoxicación se caracteriza inicialmente por enteritis con diarrea y vómito y 1-3 semanas después caída del cabello, neuropatía periférica, convulsiones y falla renal. La dosis mínima letal es de 12 mg/kg de peso. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no debe consumir comida de mar, antiácidos y vitaminas con suple- 470 Fundación Santa Fe de Bogotá mentos minerales, antes de la recolección de la muestra. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante EDTA. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente y 5 días en refrigeración . Recolección de orina durante 24 horas en frasco lavado con ácido y sin preservativo. La muestra es estable 48 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 14 días congelada a -20ºC. Las muestra se procesan en USA y el resultado está diponible 10 después del envío. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Metodología: Plasma acoplado inductivamente/Espectrometría de masa (ICP/ MS). Valores de referencia: Sangre total < 5.1 µg/L Orina < 3 µg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Detectar exposición tóxica aguda o crónica por talio. TEOFILINA Código 905607 Es el compuesto 1,3-dimetilxantina de ocurrencia natural, con efecto broncodilatador y que se utiliza para el tratamiento del asma. Tiene una vida media en niños y adultos fumadores de 3-12 horas, en no fumadores de 4 horas y en cirróticos de más de 30 horas. El estado de equilibrio en niños y adultos se alcanza de 1-2 días de dosificación continua, en niños lactantes de 1-5 días, en neonatos en 120 horas y en neonatos prematuros a las 150 horas. En los adultos el 55-65% de la droga se une a proteínas y en los neonatos y adultos cirróticos el 36%. Presenta como la fenitoína una cinética de depuración de orden cero, es decir que pequeños aumentos en la dosis producen aumentos desproporcionados en la concentración sérica. Condiciones del paciente y/o de la muestra El paciente no requiere ayuno, pero si se toma antes de la siguiente dosis de medicamento, es remitido a nuestro laboratorio de apoyo diagnostico y el resultado se demora 6 días hábiles. El tiempo habitual de muestreo en administración oral es en el pico o sea 2 horas después de la toma de un producto de liberación rápida o 4 horas después de uno de liberación lenta; también se puede tomar la muestra en el valle o sea inmediatamente antes de la siguiente dosis matinal. Manual de Procedimientos 11 471 En los pacientes urémicos hay un incremento del rango terapéutico de 3-5 μg/ mL. Muestra de suero. La muestra es estable por 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 14 días congelada. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Rango terapéutico: Niños y adultos: 10-20 µg/mL Apnea neonatal: 6,0-11,0 µg/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para controlar la dosis indicada en el tratamiento del asma y evitar los efectos tóxicos de la droga que se manifiestan por náusea, vómito, diarrea, dolor de cabeza, taquicardia, arritmias y convulsiones. Los efectos terapéuticos y tóxicos están relacionados con la concentración plasmática de la droga. TESTOSTERONA TOTAL Código 904602 TESTOSTERONA LIBRE Código 904601 GLOBULINA DE ENLACE DE HORMONAS SEXUALES (SHBG) Código 844061 TESTOSTERONA BIODISPONIBLE Código 862653F Es la principal hormona androgénica, secretada principalmente por las células intersticiales de Leydig del testículo e indirectamente, via androstenediona, por la glándula suprarrenal y el ovario en la mujer; es regulada por la hormona estimulante de las células intersticiales (ICSH) y por la hormona luteinizante de la pituitaria anterior (la contraparte femenina de la ICSH) por un mecanismo negativo de retroalimentación. 472 Fundación Santa Fe de Bogotá En hombres el 78 % de la hormona circula unida a la globulina de enlace de hormonas sexuales (SHBG), el 19 % a albúmina y solo una pequeña fracción (2-3%) circula en forma libre; en mujeres, aproximadamente el 80% de la testosterona circula unida a SHBG, el 19 % a albúmina y el 1% está libre. Debido a que los niveles de SHBG se pueden alterar por diferentes factores la determinación de la testosterona libre refleja con mayor exactitud la cantidad de hormona disponible a los órganos que estimula. En los hombres los niveles de testosterona siguen un ritmo circadiano y los niveles son más altos en la madrugada. La SHBG es una glicoproteína que se sintetiza en el hígado y transporta tanto los andrógenos como los estrógenos; esta proteína también sirve como un índice de la respuesta de los tejidos a la hormona tiroidea. Históricamente se creía que solo la testosterona libre era el componente biológicamente activo; sin embargo la testosterona se une débilmente a la albúmina y se disocia libremente en el lecho capilar y queda fácilmente disponible para ser captada por los tejidos por lo tanto la testosterona que no se une a la SHBG se considera biodisponible. Condiciones del paciente y/o la muestra Se debe anotar la edad, el sexo y las drogas que esté tomando el paciente. Muestra de suero.. Las muestras son estables 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 24 meses congelada a -20ºC. Las pruebas de SHBG y de testosterona libre se procesan en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodologia: Testosterona total y SGHB: Inmunoanálisis competititivo por quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. Testosterona libre: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa en tándem (LC/MS/MS) Valores de referencia Testosterona total en suero en ng/mL Hombres: (18-66 años) 1,75-7,81 Mujeres: (21-73 años) ≤ 0,1-0,75 Testosterona total en plasma en ng/mL Hombres: (18-66 años) 1,68-7,58 Mujeres: (21-73 años) ≤ 0,1-0,90 Testosterona libre en pg/mL Manual de Procedimientos Hombres: 9-47 11 473 Mujeres: 0,7-3,6 SHGB en nmol/L Hombres ≤ 56 años 10-50 Mujeres ≤ 56 años 17-124 Hombres ≥ 56 años 22-77 Mujeres ≥ 56 años 14-73 Testosterona biodisponible en ng/dL Hombres ≤ 18 años 8-210 Mujeres ≤ 18 años ≤ 7,9 Hombres ≤ 70 años 110-575 Mujeres ≤ 70 años 0,5-8,5 Hombres ≤ 90 años 15-150 Mujeres ≤ 90 años 0,5-8,8 SHBG: Hombres Mujeres 3-9 años: 32-158 nmol/L 32-158 nmol/L 10-13 años: 20-166 nmol/L 24-120 nmol/L 14-17 años: 20-87 nmol/L 12-150 nmol/L 18-55 años: 10-50 nmol/L 17-124 nmol/L >55 años: 22-77 nmol/L 14-73 nmol/L En ambos sexos la concentración sérica de testosterona total durante la primera semana de vida está en un promedio de 2,5 ng/ml. En niños los valores aumentan rápidamente en la segunda semana hasta un máximo, a los seis meses de vida, de aproximadamente 17,5 ng/ml. En niñas los valores disminuyen después de la primera semana de vida y permanecen bajos durante la infancia, para aumentar durante la pubertad a los valores de adulta y están más relacionados con el estadío puberal que con la edad cronológica. Utilidad e interpretacion del resultado La determinación de testosterona total y libre es de utilidad en el hombre en la evaluación de hipogonadismo, infertilidad e impotencia y en la mujer en hirsutismo y síndromes de virilización. Hay elevación de los niveles de testosterona total y/o libre en tumores adrenales y gonadales, hiperplasia adrenal, enfermedad de Cushing, síndrome de resistencia androgénica, hipertiroidismo (elevación de SHGB), pubertad precoz masculina, virilización femenina por administración de andrógenos y síndrome de ovarios poliquísticos (Stein-Leventhal) y disminución en hipogonadismo masculino, hipopituitarismo, orquidectomía, deficiencia de gonadotropina, síndrome de Klinefelter, terapia con estrógenos, feminización testicular y cirrosis hepática. En mujeres, el hirsutismo puede ser de origen adrenal u ovárico y es causado por exceso de andrógenos; la testosterona es un buen marcador de función ovárica mientras que la DHEA-S es mejor marcador de la función adrenal. La determinación del nivel de SHBG es de utilidad en la interpretación del nivel sérico de testosterona. La alteración en el nivel de SHBG puede dar lugar a que el nivel de testosterona no refleje exactamente la biodisponibilidad de esta hormona y en estos casos es mejor determinar la testosterona libre. El nivel de SHBG 474 Fundación Santa Fe de Bogotá puede estar disminuido en obesidad, hipotiroidismo, uso o abuso de andrógenos, síndrome nefrótico, enfermedad de Cushing y acromegalia; puede estar aumentado en cirrosis hepática, hipertiroidismo, uso de estrógenos, anticonceptivos orales, alcoholismo y embarazo. Útil en el diagnóstico y seguimiento de mujeres con signos y síntomas de androginismo como en el síndrome de ovarios poliquísticos y en el hirsutismo idiopático. De ayuda en el control y en la terapia anti-androgénica. También puede ser útil en el estudio de los trastornos de la pubertad y de la anorexia nerviosa. TÉTANO IgG ANTICUERPOS Código 862607FA TÉTANO PRE Y POST-VACUNACIÓN Código 862561F El tétano es una enfermedad del SNC caracterizada por espasmos musculares severos causados por la toxina tétanoespasmin producida por el microorganismo Clostridium tetani. La enfermedad es prevenible por la vacunación con el toxoide tetánico que es un excelente inmunogénico que desarrolla anticuerpos antitetánicos. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. La muestra post-vacuna se debe obtener 3-4 semanas después de la primera vacunación o el refuerzo. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: ≥ 0,150 IU/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es útil para avaluar la respuesta inmune del paciente a la vacunación con el toxoide tetánico TIEMPO DE COAGULACIÓN (Lee-White) Código 902043 Esta prueba se ha usado para controlar tratamiento con heparina y da un índice del sistema de coagulación general. No se recomienda para evaluar actividad de heparina porque no tiene buena reproducibilidad y ya no se practica en muchos laboratorios pues ha sido reemplazado por el tiempo parcial de tromboplastina (TPT, PTT). Manual de Procedimientos 11 475 Además la sensibilidad de la prueba es muy baja para detectar deficiencias en los factores de la coagulación y el nivel plasmático de los factores deben caer a niveles muy bajos para que sea detectado por el tiempo de coagulación. Un tiempo de coagulación normal no garantiza que el sistema de la coagulación sea normal. TIEMPO DE LISIS DE LA EUGLOBULINA Código 902044 Esta prueba da una evaluación total del sistema fibrinolitico porque mide el tiempo para la disolución in vitro de un coágulo en ausencia de los inhibidores normales de la plasmina. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato para obtener plasma. La muestra es estable 30 días congelada a -20ºC. Metodología: Coagulometría Valores de referencia: ≥ 60 minutos Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba es útil para evaluar y controlar el sistema fibrinolítico en pacientes que van a recibir tratamiento con uroquinasa y estreptoquinasa. TIEMPO DE PROTROMBINA (TP/PT), INR Código 902045 La detención de un episodio hemorrágico depende de la formación del coágulo primario formado por las plaquetas junto con la producción de un coágulo estable de fibrina. La formación de este coágulo se basa en la interacción secuencial de una serie de proteínas plasmáticas en un modelo altamente organizado y complejo así como en la interacción de estos complejos con las plaquetas y con constituyentes liberados de los tejidos. La anticoagulación oral con antagonistas de la vitamina K como es la warfarina, se usa comúnmente para la prevención y tratamiento de fenómenos tromboembólicos. La ingestión de derivados de la 4-hidroxicumarina produce inhabilidad hepática para carboxilar los residuos de glutamil de los factores de coagulación vitamino-K dependientes y esto hace que las proteínas resultantes se vuelvan inactivas y no puedan estimular la formación del coágulo. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas y se le debe preguntar si está anticoagulado oralmente y que otras drogas está tomando. Sangre total tomada en tubo con anticoagulante citrato de sodio para obtener plasma. Es muy importante que el tubo quede más del 90% lleno con sangre 476 Fundación Santa Fe de Bogotá pues la relación sangre/anticoagulante (9:1) es crítica para obtener un resultado confiable. Cuando se van a tomar varios tubos, la muestra para PT/TP debe tomarse después de tomar el tubo sin aditivos como un tubo tapa roja, aunque varios estudios de la Sociedad Americana de Patólogos (ASCP) han demostrado que no es necesario tomar un tubo de descarte antes. No se aceptan muestras con volumen bajo de sangre, hemolizadas, parcial o totalmente coaguladas y que hayan sido tomadas más de 4 horas.. Centrifugar las muestras de sangre lo antes posible, una vez tomada la muestra, durante un mínimo de 15 minutos a 1.500 g y a temperatura ambiente. La muestra es estable 2 semanas congelada a -20ºC. En los pacientes que tienen hematocrito (Ht) mayor a 50% es necesario antes de tomar la muestra calcular la cantidad de anticoagulante de acuerdo a la siguiente fórmula: Volumen anticoagulante = 0,00185 x mL de sangre x (100-Ht) Metodologia: Coagulometría manual o automatizada Valores de referencia: 12,8 - 15,8 segundos Utilidad e interpretacion del resultado El PT/TP evalúa trastornos de la coagulación que comprometen el sistema extrínseco y la vía común de la coagulación; detecta deficiencias congénitas y adquiridas de los factores II, V, VII, IX y X, I, combinación de estos y si hay presencia de inhibidores de factores.Su mayor utilidad clínica radica en el control de anticoagulación oral con cumarínicos (warfarina); tambien puede prolongarse en el tratamiento a largo plazo con heparina. El TP/PT se prolonga en tratamiento con cumadin, deficiencia de vitamina K, enfermedad hepática, hipofibrinogenemia, disfifribrinogenemia, coagulación intravascular diseminada, deficiencia de menos del 50% de factores I, II, V, VII, IX y X. Para el control de la anticoagulación oral se utiliza el Índice Internacional Normalizado (INR) que correlaciona la sensibilidad de los reactivos del PT con un estándar internacional, de tal manera que la efectividad de la anticoagulación oral puede ser controlada independientemente de los cambios de reactivos y permite la comparación entre distintos laboratorios. De una manera muy simple el INR se puede definir como un “Tiempo de protrombina corregido” y representa la relación entre el PT del paciente y el PT del control normal realizado con una tromboplastina de referencia estandarizada por la OMS. El cálculo para el resultado del INR se obtiene automáticamente del intrumento. La OMS y el Comité Internacional en Trombosis y Hemostásis han recomendado que en el resultado del PT se incluya siempre el valor del INR para pacientes en anticoagulación oral estable. Manual de Procedimientos 11 477 Los rangos terapéuticos sugeridos son: Dosis INR Indicaciones Estándar 2,0-3,0 Profiláxis y tratamiento de trombosis venosa, embolismo pulmonar, válvulas cardíacas, infarto del miocardio, fibrilación ventricular y prevención embolismo sistémico. Alta 2,5-3,5 Válvula cardíaca mecánica TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA (TPT/PTT) Código 902049 El TPT/PTT es un simple tiempo de coagulación con dos variables controladas: 1) Variabilidad plaquetaria, ausencia del factor tisular y sustitución de las plaquetas por una preparación estandarizada de fosfolípidos (parcial) 2) Variabilidad de los factores de contacto del plasma los cuales se activan por medio de partículas cargadas negativamente como caolín, ácido elágico o sílice. Es una medida de todos los factores de coagulación con excepción del factor VII y mide principalmente el factor XI activado el cual convierte el factor IX a IXa en presencia de factor VIII, calcio y fosfolípidos plaquetarios. Condiciones del paciente y/o la muestra La toma de la muestra requiere las mismas condiciones que para el tiempo de protrombina. Metodologia: Coagulometría manual o automatizada Valores de referencia: 28-35 segundos Utilidad e interpretacion del resultado Su principal utilidad es el control de la anticoagulación con heparina pero también es útil en la evaluación de deficiencias de factores de coagulación del sistema intrínseco y de la vía común incluyendo los factores II, V, VIII, IX, X, XI y XII. El TPT/PTT se prolonga en terapia con heparina, deficiencia de vitamina K, enfermedad hepática, hipofibrinogenemia, coagulación intravascular diseminada, deficiencia de más del 30% de los factores antes anotados, anticuerpos antifactores o inhibidores, enfermedad de von Willebrand (pseudohemofilia), anticoagulante lúpico, síndrome nefrótico (pérdida de factor IX en orina), deficiencia de prekalicreína y quininógenos, disproteínemias (macroglobulinemia de Waldenström) en algunas disfibrinogenemias y en enfermedad de Gaucher. En la terapia con heparina del tromboembolismo el TPT/PTT generalmente se mantiene entre 1,5-2,5 veces del valor límite superior (50-65 segundos) lo que 478 Fundación Santa Fe de Bogotá corresponde a un nivel de heparina de 0,2-0,4 unidades/mL cuando se hace la titulación con protamina. TIEMPO DE SANGRÍA (TS) Código 902046 El TS es una prueba in vivo que evalúa la actividad hemostática y la funcionalidad, tanto por cantidad como por calidad, de las plaquetas; también evalúa factores tisulares locales y otros componentes de los mecanismos de coagulación. Condiciones del paciente y/o la muestra Se deben anotar las drogas que esté recibiendo el paciente La prueba no se debe realizar en pacientes que esten tomando aspirina o antiinflamatorios no esteroideos (aines) y se debe esperar 5 días para que pase el efecto de dichas drogas; tampoco se debe realizar cuando hay trombocitopenia de <50.000 μl. Metodologia 1. Se coloca el mango de un tensiómetro por encima del codo y se infla hasta una presión de 40 mmHg. 2. Se limpia con alcohol un área de la cara interna del antebrazo cercana al codo donde no tenga venas visibles. Se deja secar. 3. Hacer una incisión en la piel con una lanceta calibrada y accionada por una guillotina que produce una herida superficial de 5 mm de longitud y 1 mm de profundidad. 4. Con un círculo de papel de filtro se seca cada 30 segundos la sangre que produce la incisión. Solamente se debe tocar el borde de la gota para no alterar el agregado de plaquetas que se va formando. La mancha en el papel de filtro debe variar con el tiempo de rojo al rojo amarillento y por último a un rojizo muy pálido. El punto final está entre el rojo amarillento y el claro. En los casos anormales la prueba se debe llevar hasta los 20 minutos. Valores de referencia: Adultos: 2-10 minutos Niños: 2-8 minutos Utilidad e interpretacion del resultado Se usa como prueba de tamizaje para trastornos de la función plaquetaria congénitos o adquiridos. Puede estar más prolongado en mujeres que en hombres y es más corto en ancianos El tiempo de sangría es proporcional al recuento de plaquetas cuando están por debajo de 100.000 μl. Manual de Procedimientos 11 479 Las enfermedades hereditarias asociadas generalmente a TS prolongado son: trombastenia de Glanzman, dis/afibrinogenemia, deficiencia de factores I, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, enfermedad de depósito, síndrome de Wiskott-Aldrich, síndrome de Bernard Soulier, enfermedad de von Willebrand, deficiencia de factores V y VIII, osteogénesis imperfecta y enfermedad congénita cardíaca. Entre las entidades adquiridas están cirugía cardiovascular, coagulación intravascular diseminada, anemia, uremia, hemoperfusión, leucemias, hipotiroidismo, amiloidosis, púrpura trombocitopénica, enfermedad hepática y púrpura de Szechuan ( aceite de pescado). Cuando el recuento de plaquetas está bajo el TS esperado se puede calcular de la siguiente fórmula: TS = 30,5 - recuento plaquetas (mm3) ______________________ 3850 Un tiempo de sangría más prolongado que el calculado en la fórmula sugiere que hay también defecto funcional plaquetario.Un tiempo de sangría más corto que el calculado sugiere la presencia de plaquetas jóvenes activas como en púrpura trombocitopénica idiopática. TIEMPO DE TROMBINA Código 902048 La formación de trombina marca un evento crítico en el proceso hemostático. La trombina rompe directamente los fragmentos peptídicos de las cadenas alfa y beta del fibrinógeno (fibrinopéptidos A y B respectivamente) para crear monómeros de fibrina que posteriormente se organizan en un coágulo polimérico de fibrina. La trombina también funciona como un estímulo fisiológico extremadamente potente para activación plaquetaria. Condiciones del paciente y/o la muestra Se deben anotar las drogas que esté recibiendo el paciente. La toma de la muestra requiere las mismas condiciones que para el tiempo de protrombina. Metodologia: Coagulometría Valores de referencia: 5-15 segundos. Utilidad e interpretacion del resultado El TT se determina para detectar hipofibrinogenemia, presencia de heparina u otros inhibidores de la polimerización de la trombina y para monitorizar terapia trombolítica. Es de utilidad en la investigación de un TPT/PTT prolongado y es una medida de la velocidad de la conversión de fibrinógeno a fibrina y de la polimerización de la fibrina. 480 Fundación Santa Fe de Bogotá Entre las causas de TT prolongado están tratamiento o contaminación de la muestra con heparina, hipofibrinogenemia severa (<80 mg/dl), inhibidores de la polimerización de la fibrina como productos de degradación del fibrinógeno, dímero-D, paraproteínas, disfibrinogenemia y uremia. Cuando exista TT prolongado y se haya descartado contaminación con heparina debe solicitarse determinación de fibrinógeno y dímero-D. TIROGLOBULINA (Tg) Código 904920 Es una iodoglicoproteína heterogénea con una vida medIa de 3-4 días y que se sintetiza exclusivamente en las células foliculares de la glándula tiroides bajo el estímulo de la tirotropina (TSH); es la precursora de la tiroxina (T4) y la triyodotironina (T3). La mayoría de la Tg sintetizada se almacena como coloide dentro de las células foliculares para ser descargada posteriormente como T4 y T3; pequeñas cantidades son secretadas directamente del retículo endoplásmico durante el proceso de síntesis. Condiciones del paciente y/o de la muestra La muestra no debe tomarse en pacientes que hayan tenido recientemente biopsia de tiroides y en los casos de tiroidectomía o terapia con 131I y se debe esperar 6 semanas para realizar el examen. La determinación debe hacerse antes de la administración de 131I para escanografía porque aún un número muy pequeño de células pueden liberar grandes cantidades de tiroglobulina durante el procedimiento. Muestra de suero o con anticoagulante como heparina para obtener plasma. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20°C. Metodología: Ensayo Inmunoenzimático Quimioluminiscente Valores de referencia: 0.73 - 84 ng/ml Utilidad de la prueba e interpretación del resultado El uso más importante para medir los niveles de Tg es el control de pacientes con carcinoma tiroideo (papilar o folicular o Hurthle) localizado y/o metastásico; en estos casos los niveles de Tg están elevados y disminuyen después de la tiroidectomía total y la radioablación con 131I. Se encuentran valores elevados en tiroidectomía o irradiación a la glandula tiroides, tiroiditis, deficiencia de la globulina de enlace de T4, en administración de TRH, TSH, hormona tiroidea, yodo y con drogas anti-cancerosas. También en bocio y en hipertiroidismo. La ausencia de tiroglobulina en el suero de neonatos sugiere atireosis congénita. Manual de Procedimientos 11 481 TIROIDEOS MICROSOMALES, ANTICUERPOS Código 906458 ver TIROIDEOS PEROXIDASA, ANTICUERPOS TIROGLOBULINA, ANTICUERPOS Código 906464 Los autoanticuerpos microsomales van dirigidos contra antígenos de membranas lipoprotéicas de los microsomas del citoplasma de las células epiteliales tiroideas. Ambos autoanticuerpos (microsomales y tiroglobulina) pueden causar destrucción del tejido tiroideo y producir hipertiroidismo transitorio e hipotiroidismo de larga evolución. Ambas pruebas, cuando se usan en conjunto, aumentan la especificidad y la sensibilidad para detectar tiroiditis autoinmune (enfermedad de Hashimoto), tiroiditis atrófica (mixedema) y enfermedad de Graves (70-90%). Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. El resultado está disponible 4 días a partir de la fecha de la toma de la muestra. Metodologia: Anticuerpos antitiroglobulina: Quimioluminiscencia Valores de referencia: 5 - 100 UI/mL Utilidad e interpretacion del resultado El 75-95% de los pacientes con enfermedad de Hashimoto activa tienen uno o ambos anticuerpos presentes en el suero. Las pruebas de anticuerpos microsomales y/o tiroglobulina no son específicas para la tiroiditis pues también hay positividad en mixedema ideopático (65-75%), Graves (70-90%) y bocio no tóxico (20-30%). También puede haber positividad en carcinoma de tiroides, anemia perniciosa y aun en el 10% de personas normales. Actualmente se considera que el componente antigénico primario de los microsomas de la célula tiroidea es la enzima peroxidasa tiroidea por lo cual la prueba para detección de estos anticuerpos tiene mayor sensibilidad y especificidad. 482 Fundación Santa Fe de Bogotá TIROIDEOS PEROXIDASA, ANTICUERPOS Código 906462 Los anticuerpos antitiroideos peroxidasa (anti-TPO) son autoanticuerpos dirigidos contra la enzima peroxidasa tiroidea. Esta enzima cataliza la iodinación de tirosina en la tiroglobulina durante la biosíntesis de T3 y T4. Históricamente estos anticuerpos se han conocido como anticuerpos antitiroideos microsomales porque los anticuerpos se unen a la parte microsomal de las células tiroideas. Investigaciones recientes han identificado la peroxidasa tiroidea como el componente antigénico primario de los microsomas. La enfermedad tiroidea autoinmune es el principal factor básico para la presencia de hipo e hipertiroidismo y tiene tendencia a presentarse en poblaciones genéticamente predispuestas. Las principales enfermedades autoinmunes tiroideas son: tiroiditis de Hashimoto y enfermedad de Graves. Los autoanticuerpos TPO estan elevados en prácticamente todos los casos de Hashimoto y en la mayoría de los pacientes que sufren enfermedad de Graves. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja) para obtener suero o con anticoagulante como EDTA o heparina de litio para obtener plasma. La muestra es estable 5 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC Metodologia: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartícula (CMIA) Valores de referencia: Negativo < 5,61 UI/mL. Utilidad e interpretacion del resultado Confirmación del diagnóstico de tiroiditis de Hashimoto en pacientes con hallazgos clínicos de hipotiroidismo y niveles elevados de anti-TPO. Niveles ligeramente elevados se pueden encontrar hasta en un 10% de la población normal y en pacientes con enfermedades no tiroideas tal como enfermedad reumática inflamatoria. TIROXINA LIBRE (T4 LIBRE) Código 904921 Manual de Procedimientos 11 483 TIROXINA TOTAL (T4 TOTAL) Código 904922 La T4 es la hormona tiroidea metabólicamente activa que contiene 4 átomos de iodo y circula unida casi exclusivamente a proteínas como son la globulina de enlace de tiroxina (TBG), la prealbúmina de enlace de tiroxina (TBPA) y la albúmina. La concentración sérica deT4 libre es de solo 0,03% de la concentración de T4 total. Existe una correlación directa entre hipertiroidismo y niveles elevados de T4 total y entre hipotiroidismo y niveles disminuidos. La excepción a esto se presenta cuando los niveles de TBG están aumentados o disminuidos pues se altera el equilibrio de enlace de la hormona; por el contrario la variación en las proteínas de enlace no altera la concentración de T4 libre. De aqui se deduce que la concentración de T4 libre correlaciona mejor con el estado clínico tiroideo pues un T4 total anormal puede indicar una disfunción tiroidea o simplemente una variación fisiológica o patológica en la proteína transportadora. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 8 horas a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20°C. La prueba de T4 total se procesa en laboratorio de referencia local y la prueba de T4 libre se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Valores de referencia: T4 total: 78.38 - 157.4 nmol/L T4 libre: 0,6 - 1,6 ng/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil en el diagnóstico de hipo e hipertiroidismo tanto primario como secundario y terciario. La T4 total está elevada en hipertiroidismo de cualquier naturaleza y en casos en que la TBG está aumentada como en embarazo, hiperproteinemia, porfiria intermitente aguda, hepatitis aguda, anticuerpos anti- T4, elevación congénita de TBG, terapia con estrógenos, anticonceptivos orales, clofibrato y perfenazina. Está disminuida en hipotiroidismo y en casos en que la TBG está disminuida como falla renal, nefrosis, desnutrición, acromegalia activa, enfermedades graves tumorales, infecciosas, etc y en tratamiento con andrógenos, testosterona, esteroides anabólicos, fenitoína, salicilatos y corticoides a dosis altas y fenilbutazona. Para corregir la influencia de la TBG sobre los niveles de T4 se puede determinar la prueba de captación de T3 (T3 UP); el producto del valor de T4 y T3 UP dividido 484 Fundación Santa Fe de Bogotá por 100 se conoce con el nombre de índice de tiroxina libre (FTI) y ha sido un buen indicador del estado de la glándula tiroides, especialmente cuando no había como determinar directamente la T4 libre. La hormona libre es independiente de la TBG y sus niveles permanecen casi constantes en la circulación. TOPIRAMATO Código 862736F El Topiramato (Topamax®) es un fármaco antiepiléptico y estabilizador del estado de ánimo, usado principalmente para tratar la epilepsia tanto en niños como adultos, la migraña y en numerosas ocasiones para la profilaxis del trastorno bipolar. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas. Informar dosis, fecha y hora de la última toma, fecha y hora de la toma de la muestra, vía de administración y diagnóstico del paciente. Muestra de suero. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 14 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis por Fluorescencia Polarizada (FPIA) Rango terapéutico: Dosis Pico Valle 100 6,5 – 9,2 4,5 – 6,6 200 12,6 – 16,0 8,0 – 12,0 400 20,0 – 30,0 14,0 – 20 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Monitoreo de pacientes en tratamiento por crisis convulsivas relacionadas con la epilepsia. TOXINA CLOSTRIDIUM DIFFICILE A Y B Código 862572F El Clostridium difficile es una bacteria que produce esporas y hace parte de la flora normal intestinal. En los pacientes con tratamiento prolongado antimicrobiano puede haber un crecimiento exagerado del Clostridium difficile y es una causa importante de diarrea y colitis asociada a antibióticos; el Clostridium difficile también es la causa principal de la colitis pseudomembranosa. La bacteria produce las citotoxinas A y B que producen diarrea líquida de olor muy desagradable. Manual de Procedimientos 11 485 Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de 5 g de material fecal recolectada en frasco de plástico. La muestra es estable 72 horas refrigerada y 1 semana congelada a -20ºC. El resultado está disponible 5 días hábiles a partir de la fecha de toma de la muestra. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Toxina A: No detectable Toxina B: No detectable Utilidad e interpretación del resultado Diagnóstico de colitis relacionada con antibióticos. TOXOCARA CANIS, ANTICUERPOS 862593F TOXOCARA CANIS, ANTICUERPOS 906125 El parásito Toxocara canis es un helminto de distribución mundial que parasita perros y otros cánidos. Los humanos, como otros posibles hospedadores, pueden ser infectados por ingestión de huevos de T. canis. La enfermedad, toxocariasis, es causada por la migración de las larvas a diversos órganos del cuerpo, causando dos posibles síndromes, conocidos como larva migrans ocular y larva migrans visceral, según los órganos invadidos sean los ojos, o el corazón o el hígado, respectivamente. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o con anticoagulantes como citrato de sodio, EDTA o heparina para obtener plasma. La muestra es estable 14 días a temperatura ambiente, 2 meses refrigerada y 12 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: Negativo ≤ 1,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Generalmente los niveles de anticuerpos son mas altos en pacientes con larva migrans visceral que con la ocular o con la infección asintomática. Aunque un resultado negativo no descarta la infección por Toxocara spp el análisis de muestras seriadas en paralelo puede ser útil para seguir la evolución de pacientes donde se sospeche toxocariasis. 486 Fundación Santa Fe de Bogotá TOXOIDE DIFTÉRICO ANTICUERPOS IgG Código 862618F TOXOIDE DIFTÉRICO PRE Y POST-VACUNACIÓN Código 862562F El toxoide diftérico es administrado a niños como parte de la vacuna triple difteria-tetano-tosferina. Como respuesta a la vacuna se producen anticuerpos contra el toxoide diftérico. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante para obtener suero. Se deben tomar dos muestras, una en el periodo convaleciente y la otra 3-4 semanas postvacunación. Las muestras son estables 7 días a temperatura ambiente, 2 meses refrigeradas y/o congeladas a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanalisis enzimático (EIA). La relación pre y post vacunación se obtiene por cálculo. Valores de referencia: Muestras pre y post-vacunación ≥ 0,099 UI/mL Relación pre y post ≥ 4,0 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Se usa para evaluar la eficacia de la vacunación contra difteria. Se considera una buena repuesta inmune cuando la relación pre y post es ≥ 4,0. TOXOPLASMA GONDII, ANTICUERPOS Ig A Código 906126 TOXOPLASMA GONDII, ANTICUERPOS IgG POR EIA Código 906127 TOXOPLASMA GONDII, ANTICUERPOS IgM POR EIA Código 906129 Manual de Procedimientos 11 487 TOXOPLASMA IgG AVIDEZ Código 862741F El Toxoplasma gondii es un parásito intracelular esporozoo que infecta al hombre y a animales domésticos y salvajes. El hombre adquiere la infección por ingestión de alimentos contaminados con las heces de los animales, crudos o mal cocinados o por contacto permanente con gatos. La infección también puede transmitirse transplacentariamente de madre a hijo produciendo la toxoplasmosis congénita que puede ser letal para el feto o producir corioretinitis, calcificaciones cerebrales, ceguera, trastornos convulsivos y retardo mental especialmente cuando el feto la adquiere en el primer trimestre del embarazo. En adultos inmunosuprimidos por cáncer, SIDA, quimioterapia o drogas inmunosupresoras la infección puede ser multisistémica y fatal. Los anticuerpos IgA contra Toxoplasma gondii se han detectado en la toxoplasmosis aguda, pero no en los casos de toxoplasmosis crónica o en individuos no infectados. T. gondii IgA es, pues, una herramienta valiosa para la detección precoz de la enfermedad aguda en las mujeres embarazadas y personas con VIH. Debido a que los anticuerpos IgA no atraviesan la placenta, la evaluación de los anticuerpos IgA contra T. gondii es también un método fiable para detectar la infección por T. gondii congénita. La determinación del índice de avidez es una prueba complementaria a la detección de IgG e IgM anti-toxoplasmáticas. Posterior a una primera detección de IgG e IgM, el índice de avidez contribuye a la exclusión de infecciones recientes de menos de 4 meses por toxoplasma. En la infección reciente la unión es débil, mientras que en la infección crónica es más fuerte; el cambio de avidez se produce alrededor de los seis meses. Esta prueba permite diferenciar mejor que la determinación de la IgM, una infección aguda de la reciente no activa. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante como EDTA, citrato de sodio o heparina litio o sodio para obtener plasma. Las muestras para anticuerpos IgG/IgM son estables 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración s y 60 días congeladas a -20ºC. La muestra para los anticuerpos IgA es estable 7 días a temperatura ambiente, 60 días en refrigeración y 12 meses congelada a -20ºC, se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. La muestra para la avidez es estable 5 días en refrigeración y 60 días congelada a -20ºC, se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 8 días a partir de la fecha de envío. Metodologia: Anticuerpos IgG/IgM: Inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) Anticuerpos IgA: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Prueba de avidez: Análisis enzimático ligado a fluorescencia (ELFA. 488 Fundación Santa Fe de Bogotá Valores de referencia Toxo IgG No reactivo < 1,6 UI/mL Zona gris: 1,6-3,0 UI/mL Positivo: ≥ 3,0 UI/mL Toxo IgM Índice < 0,50 Zona gris: 0,50-0,60 Positivo: Índice ≥ 0,60 Toxo IgA: Anticuerpos no detectados Indice ≤ Menor de 0,90 Zona gris: Índice 0,9 – 1,09 Anticuerpos detectados Índice ≥ 1,10 Toxo avidez Índice ≤ 0,20: Se consideran débiles, es decir uniones de reciente formación, compatibles con una infección reciente, presente en los últimos 4 meses. Índice ≥ 0,30: Sugestivo de infección antigua de más de 4 meses. Índices entre Se considera zona indeterminada o gris y en este caso se sugiere repetir la prueba en 4 semanas en 0,21 y 0,30: el mismo laboratorio y/o hacer estudios complementarios de IgM o IgA por inmunocaptura. Por lo tanto se deduce que es absolutamente necesario tener títulos positivos para IgG para poder evaluar la avidez. Utilidad e interpretacion del resultado Es díficil determinar la presencia de toxoplasmosis aguda porque puede pasar hasta un mes después de la infección para que sea detectable el anticuerpo específico IgM y porque este puede permanecer positivo hasta en un 40% de los pacientes por un período de un año o más. También se ha encontrado que el llamado anticuerpo natural IgM contra T. gondii crea un problema de potenciales falsos positivos en ELISA e inmunoblot aunque las diferencias cuantitativas en la intensidad de la reacción pueden ser útiles para diferenciar entre el anticuerpo natural y el IgM específico inducido por infección. En los casos difíciles, como la sospecha de infección en embarazo, pueden ser de ayuda otras técnicas con mayor sensibilidad como la prueba de aglutinación por inmunoglobulina M inmunoabsorbida (ISAGA) pues una prueba ISAGA negativa es una evidencia fuerte contra una infección reciente cuando haya síntomatología clínica con anticuerpo IgM por ELISA negativo; también la prueba ISAGA puede permanecer positiva en un 80% de los casos hasta por un año. No se recomienda determinar el tiempo de aparición de la infección basándose Manual de Procedimientos 11 489 únicamente en un resultado positivo de la prueba IgM y por esto se recomienda evaluar los títulos de los anticuerpos IgG e IgM al inicio del embarazo. TRANSAMINASA ASPARTATO AMINOTRANSFERASA Código 903867 TRANSAMINASA ALANINO AMINO TRANSFERASA Código 903866 Ver Alanino Amino Transferasas Página………………….63 TRANSFERRINA Código 903046 Es la proteína transportadora del hierro que tiene la movilidad electroforética de una globulina b1; se sintetiza en el hígado y la vida media biológica es de 10 días. Cada molécula es capaz de enlazar dos átomos de hierro férrico y ser transportado a los tejidos de almacenamiento y a la médula ósea; la transferrina se puede unir brevemente a la membrana de los normoblastos haciendo que el hierro pase directamente a incorporarse al heme del eritrocito joven. Posteriormente la transferrina vuelve a la circulación para captar más hierro y de los eritrocitos desintegrados el hierro se separa de la hemoglobina en el sistema retículo endotelial y vuelve al plasma donde es captado nuevamente por la transferrina. Una pequeña porción del hierro liberado puede entrar al plasma en forma de ferritina. La capacidad de combinación del hierro (TIBC) y la transferrina son equivalentes en la acción que desarrollan. Condiciones del paciente y/o la muestra Hay variación diurna en los niveles de transferrina con valores más altos en la mañana. Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante para obtener suero y con anticoagulante como heparina de litio para obtener plasma. Las muestras son estables 7 días a temperatura ambiente y/o refrigeradas y 6 meses congeladas a -20ºC. La prueba se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodologia: Inmunoturbidimetría Valores de referencia: 200 - 420 mg/dL Utilidad e interpretacion del resultado La determinación de transferrina se usa principalmente en la evaluación de anemias. Es una prueba alterna a la capacidad de combinación del hierro y no parece haber alguna ventaja de un método sobre el otro para el diagnóstico de 490 Fundación Santa Fe de Bogotá deficiencia temprana de hierro; sirve para evaluar pacientes a quienes se les sospeche anormalidades congénitas de la transferrina. Los cambios en la concentración de la transferrina ocurren como respuesta a deficiencia crónica del hierro así como los cambios en la TIBC. Se eleva en anemia ferropriva, anticonceptivos orales, tercer trimestre del embarazo y hepatitis viral. Se disminuye en infecciones crónicas, tumores malignos, envenenamiento por hierro, anemia hemolítica, hemocromatosis, nefrosis, kwashiorkor, talasemia y después de tratamiento con vitamina B12 o ácido fólico. TRANSGLUTAMINASA, ANTICUERPOS IgA Código 841452F TRANSGLUTAMINASA, ANTICUERPOS IgG Código 841451F A la transglutaminasa tisular (tTG) se la conoce sobre todo por su papel en la enfermedad celíaca. En los pacientes con esta enfermedad, se producen anticuerpos anti-transglutaminasa (ATA), que resultan en una forma de sensibilidad al gluten en la que una respuesta celular al gluten unido a tTG es capaz de estimular respuestas específicas contra la transglutaminasa por parte de los linfocitos B, lo cual desencadena la producción de autoanticuerpos ATA IgA e IgG. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 2 meses congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el reultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis enzimático (EIA) Valores de referencia: IgG ≤ 6,0 U/mL IgA ≤ 4,0 U/mL Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Ayuda diagnóstica en enfermedad celíaca. TREPONEMA PALLIDUM SEROLOGÍA RPR, VDRL Código 906915 TREPONEMA PALLIDUM, ANTICUERPOS (FTA-ABS) Código 906039 Manual de Procedimientos 11 491 TREPONEMA PALLIDUM, ANTICUERPOS IgM Código 906040 La sífilis es una enfermedad aguda y crónica producida por la espiroqueta T. pallidum y caracterizada clínicamente por una lesión genital primaria, erupción cutánea, largos períodos de latencia y lesiones tardías que comprometen piel, huesos, visceras, corazon, vasos sanguíneos y SNC. Se transmite por contacto directo o sexual con exudados infecciosos de genitales, piel y mucosas, líquidos corporales (saliva, semen, sangre, vagina) y por transfusiones de sangre. En la sífilis se producen anticuerpos (reaginas) no treponémicos (VDRL, RPR) dirigidos hacia antígenos lipoídicos que probablemente resultan de la interacción del T. pallidum con los tejidos del huésped; también hay anticuerpos treponémicos como los detectados por la prueba FTA-ABS y la de microhemaglutinación. La detección de las reaginas constituyó la base para el desarrollo del reactivo de extractos de varios componentes tisulares como cardiolipina, lecitina y colesterol lo que compone el antígeno VDRL clásico; el RPR es una modificación que contiene carbono microparticulado que aumenta la floculación microscópica de las partículas para que haya una mejor diferenciación entre la prueba positiva y la negativa. La sífilis congénita se puede diagnosticar entre los 3-14 meses auncuando la madre y el niño fueran negativos al momento del parto. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra para VDRL o RPR es estable 4 días a temperatura ambiente, 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20ºC. La muestra para FTA es estable 5 días en refrigeración y 14 días congelada a -20ºC. La muestra para anticuerpos IgM es estable 2 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración y 360 días congelada a -20ºC. Muestra de LCR tomada por el médico tratante, sin evidencia macroscópica de hemólisis y enviada rápidamente al laboratorio. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20ºC. La prueba FTA se procesa en laboratorio de referencia local y el resultado está disponible 1o días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodologia: Aglutinación: VDRL y RPR FTA-ABS: Inmunofluorescencia indirecta Valores de referencia: VDRL o RPR: No reactivo FTA-ABS: Negativo Anticuerpo IgM: No reactivo 492 Fundación Santa Fe de Bogotá Utilidad e interpretacion del resultado El método de tamizaje (VDRL o RPR) está indicado para la detección rápida de la infección en pacientes y donantes de sangre y para el control de la respuesta inmunológica al tratamiento. Debido a la presencia de falsos positivos (0,03%) toda prueba positiva debe confirmarse por FTA-ABS o hemaglutinación. Falsos positivos biológicos se encuentran en embarazo, infecciones agudas, vacunaciones, mononucleosis infecciosa, vaccinea por rubéola, varicela, malaria, pneumonía atípica, enfermedades del colágeno, lepra, metástasis hepáticas, cirrosis, tiroiditis de Hashimoto, síndrome de Sjôgren, sarcoidiosis, linfomas, mieloma múltiple y adicción a narcóticos. EL VDRL/RPR son pruebas muy sensibles para sífilis temprana pero generalmente son no reactivas en sífilis tardía en donde el FTA-ABS/MHA-TP son típicamente positivas. Como resultado del tratamiento, en pacientes con sífilis primaria o secundaria, el título del VDRL/RPR debe disminuir en por lo menos 4 diluciones a los tres meses y en 8 diluciones a los 6 meses; disminuciones menores se presentan en individuos tratados en la fase latente de la sífilis y en reinfectados o por falla de la terapia. En el 85% de los casos tratados las pruebas de FTA-ABS/MHA-TP permanecen positivas de por vida y por lo tanto no son diagnósticas de infección reciente pero si son negativas son útiles para excluir la sífilis exceptuando los estadíos tempranos de la enfermedad. TRIGLICÉRIDOS Código 903868 Los triglicéridos, ésteres de ácidos grasos del glicerol, representan la principal forma de la grasa corporal; su función principal es el de almacenar y proveer la energía celular. La concentración plasmática de los triglicéridos representa el balance entre la velocidad de entrada y de remoción de la grasa corporal, varía con la edad y con el sexo y aumentos moderados ocurren durante la etapa de crecimiento y desarrollo. Los triglicéridos son insolubles en la sangre y por esto no circulan libremente en el suero sino que son transportados como quilomicrones (80%) y lipoproteínas pre-beta (55%); se elevan marcadamente después de una comida y hay una demora de 10-12 horas para que se depuren de la circulación después de haber comido; el pico de la lipemia se alcanza a las 3-5 horas de haber comido y persiste por otras 6-8 horas. Condiciones del paciente y/o la muestra El paciente debe estar en ayunas de 8 a 12 horas y haber ingerido la noche anterior una comida liviana sin grasa. Manual de Procedimientos 11 493 Muestra de suero o sangre total con anticoagulantes como heparina de litio, de amoníaco o de sodio para obtener plasma. Las muestras son estables 5 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 28 días congelada a -20ºC. Metodologia: Método de punto final a tiempo fijo. Valores de referencia Normal: < 150 mg/dL Límite máximo: 150-199 mg/dL Alto: 200-500 mg/dL Muy alto: > 500 mg/dL Utilidad de la prueba e interpretacion del resultado Las principales razones para la determinación de los triglicéridos son: Evaluar el perfil lipídico de un paciente con riesgo de enfermedad cardíaca coronaria, determinar si la disminución del colesterol de alta densidad (HDL, AD) es el resultado de una hipertrigliceridemia,evaluar riesgo de pancreatitis por hipertrigliceridemia cuando los niveles están por encima de 500 mg/dL Hay hipertrigliceridemia en muestras de pacientes sin ayuno y en hiperlipoproteinemia primaria ( tipos I, IIb, III, IV, V). En hiperlipoproteinemias secundarias debidas a infusión de lípidos parenterales en pacientes hospitalizados, diabetes mellitus, isquemia cardíaca, cetoacidosis diabética, alcoholismo agudo, anticonceptivos orales, síndrome nefrótico, insuficiencia renal crónica, esteroides, pancreatitis aguda, gota, hipotiroidismo, embarazo, infecciones por Gram (-) y enfermedad de depósito de glicógeno. Hay hipotrigliceridemia en dieta restrictiva de grasas, hipertiroidismo, drogas hiperlipídicas, síndromes de malabsorción, desnutrición severa y en abeta o hipobetalipoproteinemia hereditaria. TRIPSINA FECAL Código 835212F TRIPSINA EN SUERO Código 903047 Es una enzima pancreática proteolítica que en casos de pancreatitis aguda puede pasar a líquido intersticial y al torrente sanguíneo. La concentración de tripsina se eleva en pancreatitis aguda y en recidivante crónica. Utilizada en el tamizaje de fibrosis quística. La tripsina fecal es una prueba sencilla de tamizaje utilizada en ocasiones para evaluar niños pequeños en los cuales hay sospecha de fibrosis quística, la cual provoca formación de tapones de mucosa que pueden obstruir los conductos pancreáticos que desembocan en el intestino delgado. 494 Fundación Santa Fe de Bogotá Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 30 días congelada a -20ºC. Muestra de materia fecal tomada en recipiente plástico con tapa. La muestra es estable 5 días en refrigeración. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Suero: Radioinmunoanálisis (RIA) Heces: Digestión enzimática de gelatina Valores de referencia Suero: 19 – 68 ng/mL Heces: Dilución: ≥ 1:80 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Es una prueba diagnóstica específica y confiable de la función pancreática exógena. TRIPTASA Código 906834F La triptasa es el principal componente de los gránulos secretorios de todos los mastocitos humanos; es una proteasa neutra liberada junto con la histamina por mastocitos inmunológicamente activados. Se presentan altos niveles de triptasa en suero y en líquido nasal tras la activación de mastocitos en anafilaxia en casos de rinitis alérgica y en suero en mastocitosis sistémica. Bajos niveles de triptasa son clínicamente insignificantes. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada con anticoagulantes como EDTA o heparina para obtener plasma. Las muestras son estables 48 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 60 días congeladas a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis fluoroenzimático (FEIA) - INMUNOCAP Valores de referencia: < 11,0 µg/L Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para evaluar pacientes con problemas alérgicos y anafilaxia. Manual de Procedimientos 11 495 TRIPTÓFANO Código 862689F El triptófano es un aminoácido esencial y necesario para la síntesis de la serotonina, melatonina y niacina. Los niveles bajos de triptófano en plasma se han asociado con insomnio, ansiedad y depresión. La acidemia glutarica tipo 1 es un desorden autosómico recesivo del triptófano y la lisina causado por una deficiencia de la enzima glutaril-CoA deshidrogenasa. Es importante hacer un diagnóstico temprano para prevenir crisis encefalopáticas que llevan a daño cerebral que pueden ser provocadas por infecciones, trauma, fiebre y ayuno prolongado. Condiciones del paciente y/o la muestra Sangre total tomada en tubo con anticoagulante heparina para obtener plasma. La muestra es estable 7 días en refrigeración y 30 días congelada a -20ºC. La prueba se procesa en Estados Unidos y el resultado está disponible 10 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Cromatografía líquida/Espectrometría de masa (LC/MS) Valores de referencia: < 30 días: 17 - 85 µmol/L < 24 meses: 16 - 92 < 18 años: 30 - 94 ≥ 18 años: 40 - 91 Utilidad de la prueba e interpretación del resultado Útil para investigar inadecuada ingesta de triptófano y controlar el tratamiento dietético. TRIYODOTIRONINA TOTAL, T3 TOTAL Código 904925 TRIYODOTIRONINA, CAPTACIÓN O UPTAKE T3, (T3UP) Código 904923 496 Fundación Santa Fe de Bogotá TRIYODOTIRONINA LIBRE, T3 LIBRE Código 904924 La T3 tiene tres átomos de yodo y el 80% se produce por deyodonización extratiroidea de la T4 y un 20% por secreción directa de la glándula tiroides; bajo condiciones normales representa aproximadamente el 5% de las hormonas tiroideas. Aunque está presente en condiciones más bajas, la T3 tiene una actividad metabólica intrínseca mucho mayor, recambio más rápido y un volumen más grande de distribución que la T4 circulante; solo una pequeña fracción (0,3%) es libre y está rápidamente disponible para intercambio tisular e interacción con sus receptores nucleares. El enlace con la TBG es más débil (6 veces menor) que el de la T4 pero de todas maneras la concentración de T3 total depende también de la concentración de las proteínas de enlace y por esto es importante, en algunos casos, determinar también la T3 libre. La prueba de captación tiroidea (T3 UP), como medida indirecta de la concentración de TBG, se usa casi siempre en conjunto con la prueba de T3 para corregir la influencia que los niveles de TBG tienen sobre los niveles de T3. Los niveles del % de captación de T3 se elevan concomitantemente con los de T4 y cuando hay desacuerdo entre los dos resultados se debe calcular el índice de tiroxina libre (FTI) o la T3 libre para determinar si la alteración de los niveles es por la hormona o por los niveles de TBG. Condiciones del paciente y/o de la muestra Muestra de suero. La muestra es estable 7 días a temperatura ambiente y/o refrigerada y 3 meses congelada a -20°C. Las pruebas de T3 libre y T3 de captación procesan en el laboratorio de la fundación santa fe y el resultado está disponible 6 días hábiles a partir de la fecha de envío. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas. Valores de referencia: Adultos T3 libre: 2,5 – 3,9 pg/mL T3 total : 0.89 - 2.44 nmol/L T3 captación: 24 - 35 % Utilidad de la prueba e interpretación del resultado La prueba de T3 total es útil en la evaluación de los diferentes trastornos de la función tiroidea y especialmente para determinar estados de eutiroidismo e hipertiroidismo en conjunto con T4 libre y total, TSH, T3 libre y captación de T3. Aunque el hipertiroidismo está generalmente acompañado de elevación en T3 y T4, la enfermedad de Graves de carácter leve está más asociada con elevación de Manual de Procedimientos 11 497 T3 y la tiroiditis subaguda con elevación de T4. Hay varias condiciones no relacionadas con disfunción tiroidea que pueden producir niveles bajos de T3 como son pacientes agudamente enfermos y niveles anormales de TBG y albúmina ya descritos en la prueba de T4. La elevación anormal de T3 total puede ocurrir en presencia de T4 total normal y TSH disminuida en un pequeño % de pacientes con una condición que se conoce como “tirotoxicosis T3”. Resultados más frecuentes de las pruebas de función tiroidea: T4 total T3 UP T4 libre - T3 FTI total TSH Tg Condición Bajo Bajo Bajo Bajo Alto normal Hipotiroidismo primario Bajo Bajo Bajo Bajo Baja normal Hipotiroidismo secundario Alto Alto Alto Alto Baja Alta Hipertiroidismo Alto Alto Alto Alto Baja Baja Tiroiditis falsa por hormona exógena Normal Normal Normal Alto Baja Normal Tirotoxicosis T3 TROPONINA I, CUALITATIVA Código 903436 TROPONINA I, CUANTITATIVA Código 903437 La troponina es un complejo proteico que consiste de tres subunidades con diferentes estructuras y funciones: a) troponina T b) troponina I (TnI) y c) Troponina C (TnC). La TnI está presente exclusivamente en el músculo cardiaco por lo cual se considera un buen marcador de infarto del miocardio (IM) o daño miocárdico. Se eleva precozmente en pacientes con IM y alcanza niveles que son claramente distinguibles del valor basal de tal manera que a las 7 horas después del IM, la TnI detecta el 95% de los pacientes en los cuales se ha confirmado el diagnóstico. Los niveles plasmáticos permanecen elevados varios días lo cual permite una ventana muy amplia para detectar el daño cardíaco. También se ha demostrado que tiene valor para predecir riesgo de mortalidad en angina inestable y en IM sin onda Q. 498 Fundación Santa Fe de Bogotá La TnI ha demostrado que tiene una exactitud diagnóstica para IM equivalente a la LDH tipo I y a la CK-MB y puede aclarar el diagnóstico cuando la elevación de la CK-MB no pueda ser atribuida con certeza a daño cardíaco como en lesión traumática, falla renal, convulsiones y miopatía del músculo esquelético. También es un marcador sensible para IM en pacientes en postoperatorio inmediato de puentes coronarios. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante como heparina de litio o EDTA para obtener plasma. El uso de anticoagulantes produce resultados más bajos por tal razón para seguimiento se debe usar siempre el mismo tipo de muestra. La TnI es estable por 2 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrigeración y 1 mes congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas Inmunoanálisis cuantitativo de quimioluminiscencia de micropartícula (CMIA) para pruebas urgentes. Valores de referencia 0.000 - 0.300 ng/ml Utilidad e interpretacion del resultado El IM agudo se diagnostica generalmente por dolor precordial, cambios electrocardiográficos y elevación de las enzimas cardíacas. En las últimas dos décadas la más usada ha sido la isoenzima CK-MB pero su especificidad no es tan buena como la de TnI pues la CK-MB también se eleva en pacientes con enfermedad muscular aguda y crónica. Hay interferencia en la determinación por factor reumatoideo, fosfatasa alcalina endógena y fibrina. En casos donde la determinación se haga muy temprano después del comienzo de los síntomas es necesario hacer determinaciones seriadas para confirmar o excluir el diagnóstico y repetir el procedimiento en 4-6 horas. TROPONINA I DE ALTA SENSIBILIDAD Código La troponina I es una subunidad reguladora del complejo troponina asociada con el filamento delgado de actina en las células musculares cardiacas. La troponina I, junto con la troponina C y troponina T, desempeña una función esencial en la regulación de la contracción muscular. Manual de Procedimientos 11 499 Se ha demostrado en estudios clínicos que la liberación de Troponina I en el torrente sanguíneo se produce en las horas posteriores a un infarto de miocardio) o a una lesión isquémica. Los ensayos de alta sensibilidad pueden detectar concentraciones elevadas de Troponina I (por encima del percentil 99) en las 2 horas siguientes al inicio del dolor pectoral. Se recomienda la extracción seriada de muestras para detectar el ascenso o descenso temporal de las concentraciones de troponina para diferenciar entre un episodio cardiaco agudo o una enfermedad cardiaca crónica. Las ventajas de una Troponina de Alta sensiblidad son: - La tercera definición universal de infarto miocárdico incluye como criterio la magnitud del cambio en los niveles de troponina durante las primeras horas posteriores al inicio de los síntomas. Al tener un menor CV% en concentraciones extremadamente bajas las pruebas de alta sensibilidad detectan esa tendencia con mayor certeza aportando información de mejor calidad al clínico. - Existe evidencia previa que demuestra un mejor desempeño diagnóstico de las pruebas de Troponina I de Alta Sensibilidad respecto a las pruebas de la generación anterior. - El uso de anticuerpos monoclonales dirigidos a epítopes específicos de la isoforma cardiaca reduce el riesgo de falsos positivos por ejercicio intenso o lesión de músculo esquelético. - Pacientes que tenían elevaciones menores al límite de detección de las pruebas anteriores, pueden tener mediciones confiables con la Troponina I de Alta Sensibilidad reduciendo la tasa de falsos negativos. Qué condiciones pueden elevar la Troponina de Alta Sensibilidad y llevar a un Diagnóstico falso positivo de Infarto Agudo de Miocardio - - - - - - - Enfermedad coronaria estable (sin evento agudo). Falla renal Hipertrofia ventricular izquierda. Falla cardiaca. Taquiarritmias supraventriculares. Tromboembolismo pulmonar agudo. Miocarditis o pericarditis. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o de sangre total tomada en tubo con anticoagulante como heparina de litio o EDTA para obtener plasma. El uso de anticoagulantes produce resultados más bajos por tal razón para seguimiento se debe usar siempre el mismo tipo de muestra. La Troponina I es estable por 2 horas a temperatura ambiente, 5 días en refrige- 500 Fundación Santa Fe de Bogotá ración y 1 mes congelada a -20°C. Metodología: Inmunoanálisis quimioluminiscencia de micropartículas (CMIA) Valores de referencia: Mujeres : 0.0 - 16 ng/L Hombres: 0.0 – 26 ng/L TRYPANOSOMA CRUZI (Chagas), ANTICUERPOS Código 906131 TRYPANOSOMA CRUZI ANTICUERPOS IgM Código 862637F La tripanosomiasis americana o enfermedad de Chagas es causada por el parásito hemoflagelado, intracelular T. cruzi que requiere un insecto vector (Reduviidae o pito) para su transmisión a los seres humanos y animales. El insecto o pito al momento de picar para chupar sangre deposita las heces infectadas en la piel del huésped produciéndose la entrada del parásito por la picadura y su diseminación a otros órganos. Se caracteriza por una fase aguda que generalmente dura aproximadamente dos meses seguida de una fase crónica que se hace latente por el resto de la vida y cuya mayor complicación es una miocarditis con marcada hipertrofia cardíaca que lleva a insuficiencia cardíaca crónica. La infección también puede adquirirse por transfusiones de sangre de donantes infectados que viven en áreas endémicas. Condiciones del paciente y/o la muestra Muestra de suero o sangre total con anticoagulantes como EDTA, citrato de sodio, oxalato de sodio o heparina para obtener plasma. Las muestras son estables 7 días a temperatura ambiente, 14 días en refrigeración s y 30 días congeladas a -20ºC. Metodologia: Inmunoanálisis cualitativo quimioluminiscente de micropartícula (CMIA). Valores de referencia: No reactivo ≤ 0,80 S/CO Zona gris: 0,80-1,00 Reactivo: ≥ 1,00 Manual de Procedimientos 11 501 Utilidad de la prueba e interpretacion del resultado Útil para diagnóstico de la enfermedad de Chagas y para el tamizaje de donantes de sangre. La sensibilidad y especificidad del método son de 99,7%. 502 Fundación Santa Fe de Bogotá U UNIDAD DE CRIOPRECIPITADO Código 911105 El crioprecipitado es la fracción proteica precipitable que se obtiene del plasma fresco congelado a temperatura de -70 °C y que se mantiene precipitada al descongelarse en condiciones controladas. Cada unidad de crioprecipitado es un concentrado de factor VIII (80-120 unidades), fibrinógeno (150-250 mg/dL), fibronectina (30-50 mg), factor de von Willebrand (40-70%) y factor XIII (20-30%). Una unidad de crioprecipitado por cada 10 kg de peso eleva la concentración de fibrinógeno plasmático en 50 mg/dL en ausencia de una coagulopatía de consumo o de una hemorragia masiva. Condiciones del paciente y/o la muestra En el banco de sangre cada bolsa de crioprecipitado se descongela en baño maría entre +30 y +37 °C dentro de una bolsa de plástico y se reconstituye, en caso necesario, con solución salina para un volumen final de 10 mL por bolsa. Generalmente las unidades se mezclan en forma aséptica y se colectan en una sola bolsa (pool) el número de unidades que van a ser administradas. Deben de transfundirse antes de las siguientes seis horas después de descongelarse previa homogeneización. Deberá ser transfundido con filtro estándar de 170 a 210 micras. Realizar la transfusión a una velocidad que no exceda de 10 mL/min. Metodología: Preparar las unidades de crioprecipitado de acuerdo a lo especificado en el manual del Banco de sangre. Valores de referencia: La dosis recomendada en pacientes adultos con hipofibrinogenemia es de 8-10 unidades. Utilidad del procedimiento e interpretación del resultado 1. Profilaxis en pacientes preparto o prequirúrgicos sin sangrado que presentan deficiencia congénita de fibrinógeno o enfermedad de von Willebrand que no responda al tratamiento con DDAVP (desmopresina). 2. Episodios hemorrágicos en pacientes con hipo o disfibrinogenemias (fibrinógeno < 100 mg/dL) o con enfermedad de von Willebrand. 3. Corrección de hemorragia microvascular en pacientes transfundidos masivamente con concentraciones de fibrinógeno menores a 80-100 mg/dL o cuando la concentración de fibrinógeno no pueda ser determinada en forma continua. 4. En pacientes con hemofilia A (deficiencia de factor VIII) no se recomienda Manual de Procedimientos 11 503 el uso a repetición de crioprecipitado en estados hemorrágicos debido a la posibilidad de transmisión de enfermedades infecciosas. Estos pacientes deben ser tratados con concentrados comerciales de factor VIII. UNIDAD DE GLÓBULOS ROJOS: LAVADOS Código 911110 LEUCORREDUCIDOS Código 911107 IRRADIADOS, LAVADOS Y LEUCORREDUCIDOS Código 911109 UNIDAD DE SANGRE TOTAL Código 911112 El concentrado de glóbulos rojos tiene un volumen de 250 mL, muy poca cantidad de plasma, leucocitos y plaquetas y el hematocrito está entre 70-80%. La indicación clínica para una transfusión se puede clasificar en tres categorías: 1. anemia aguda que incluye la producida intraoperatoriamente 2. anemia hemolítica 3. anemia hipoproliferativa 4. anemia por pérdida crónica de sangre. Las transfusiones de glóbulos rojos no deben estar indicadas por el valor de la hemoglobina o del hematocrito pues el organismo desarrolla una serie de adaptaciones fisiológicas a la anemia ya sea aguda o crónica. Una unidad de sangre total contiene 400 mL de sangre más 63 mL de anticoagulante-preservativo (hematocrito 35-45%). Después de 24 horas de almacenada tiene muy pocos leucocitos y plaquetas viables y niveles de factores V y VIII disminuidos. Las indicaciones para transfundir sangre total son mínimas y se reducen a cirugía cardíaca (bypass coronario), oxigenación de membrana extracorpórea y exanguinotransfusiones en neonatos. La sangre escogida debe ser Rh negativa y compatible con el suero de la madre y el niño. La unidad debe tener menos de 4 días de almacenamiento para asegurar la máxima viabilidad de los glóbulos rojos, evitar pH ácido, disminución del 2,3-DPG y altos niveles de potasio. Condiciones del paciente y/o la muestra Antes de iniciar la transfusión de glóbulos rojos se deben hacer la solicitud de reserva de sangre a través del sistema y en la historia clínica indicando el componente deseado y la cantidad. Solicitar también un rastreo de anticuerpos del 504 Fundación Santa Fe de Bogotá receptor y por cada unidad de glóbulos rojos a reservar solicitar una prueba de compatibilidad. La prueba de compatibilidad y el rastreo de anticuerpos se hacen para prevenir una reacción hemolítica transfusional producida por anticuerpos al sistema ABO o por anticuerpos a otros antígenos de los grupos sanguíneos. Si el/la paciente ha sido transfundido(a) con un componente sanguíneo o ha estado embarazada en los últimos 3 meses, la muestra debe obtenerse tres días antes de la fecha de la transfusión debido a que un paciente potencialmente inmunizado puede desarrollar una respuesta primaria a un anticuerpo, en cualquier momento, dentro de los primeros tres meses después de la inmunización. Metodología: Preparar las unidades de glóbulos rojos y de sangre total de acuerdo a lo especificado en el manual del Banco de sangre. Valores de referencia: En un adulto de 70 kg, que no esté sangrando, la transfusión de una unidad de glóbulos rojos aumenta el hematocrito en promedio 3% y la concentración de hemoglobina en 1g/dL; en niños esta elevación se consigue con transfundir 3 mL/kg. Utilidad del procedimiento e interpretación del resultado La transfusión de glóbulos rojos está indicada en los casos de anemia aguda y crónica según los criterios siguientes: Anemia aguda 1. 2. 3. 4. 5. 6. Asegúrese que el paciente está normovolémico. Restaure el volumen intravascular con cristaloides Evalúe riesgo de isquemia u otra enfermedad concomitante Estime y/o anticipe el grado de pérdida de sangre > 30-40% de pérdida rápida de sangre: transfunda glóbulos rojos <30-40% de pérdid
