TRATAMIENTO DE BROZA DE CAFÉ CON MICROORGANISMOS TERRA BIOSA OBJETIVO DE LA EVALUACIÓN: • Evaluar la Eficacia Biológica de Terra Biosa como acelerador de la descomposición de la broza de café. VARIABLES A EVALUAR: • Efecto sobre la aceleración en la descomposición de broza. • Efecto sobre disminución de olores y la presencia de moscas • Efecto de la calidad microbiológica del compost producido • Calidad de Abonos Orgánico TRATAMIENTOS: • Broza + 1litro TB/m3 + cobertura de plástico • Broza + 1litro TB/m3 Sin cobertura de plástico • Broza testigo METODOLOGÍA Formación de 3 montículos de broza de 12m3 c/u y con los siguientes tratamientos # 1: Terra Biosa, dosis 1L/m3, cubierto de plástico. # 2 : Terra Biosa, dosis 1L/m3, sin plástico. # 3 : Testigo absoluto. Volteos del material, monitoreo de temperaturas y observaciones de los montículos a los 8 y 30 dda. A los 45 dda se llevan las muestra a: Laboratorio LAMA para análisis de ADN Laboratorio CIA-UCR para análisis completos de Abonos Orgánicos, E.coli, % Germinación, % Raíz, Tasa de Respiración. ANALISIS VISUAL Y TEMPERATURAS REGISTRO DE TEMPERATURA Y VOLTEOS Fecha Formación de montículos y aplicación del producto: 10 febrero TB plástico Temperatura ºC TB sin plástico Observaciones Testigo TB sin plástico Testigo Notas formación de los montículos 46.75 45.87 47.07 Peso del material + Peso del material + Peso del material + bolsa 2550 gramos bolsa 2570 gramos bolsa 2590 gramos No hay larvas de moscas vivas, mayor olor a fermento fresco, no hay prescencia de moscas, prescencia e hongo blanco Hay larvas de moscas vivas, olor leve a fermento fresco, pocas moscas adultas sobre superficie del montículo Muchas larvas de Volteo del material moscas vivas, olor muy leve a fermento, pocas moscas sobre superficie del montículo Volteo del material Peso del material + bolsa 1670 gramos Material muy descompuesto, listo para secar y aplicar al cultivo Peso del material + bolsa 1420 gramos. Material semidescompuesto se puede secar y aplicar al cultivo Peso del material + Se llevan muestras al bolsa 1100 gramos. laboratorio para análisis Material mu poco decompuesto y no se recomieda aplicar al cultivo, debe de dársele más tratamiento 8 dda: 17 febrero 57.9 60.7 52.9 30 dda: 10 marzo 48.38 52.08 52.7 45 dda: 24 marzo TB plástico 47.12 51.92 47.02 Temperatura de Compost , Cafetalera Tirrá 65 60,7 Grados Centígrados 60 57,9 52,7 55 50 45 40 52,08 51,92 52,9 47,07 48,38 47,02 46,75 47,12 45,87 35 30 1 2 3 Número de monitoreo 4 TB+plástico TB intemperie Testigo FOTO 1. INOCULACIÓN DE TERRA BIOSA DOSIS DE 1 LITRO/m3 FOTO 2. TRATAMIENTO # 1 CON COBERTUA PLÁSTICA. FOTO 3. VOLTEO DEL MATERIAL. 8 y 30 dda. FOTO 4. MONITOREOS DE TEMPERATURA FOTO 5. CONTROL DE LARVAS DE MOSCA POR COBERTURA PLÁSTICA. FOTO 4. MONITOREOS DE MUESTRAS TERRA BIOSA + PLÁSTICO SOLO TERRA BIOSA TESTIGO MICROORGANISMOS BENÉFICOS Identificación de la muestra Broza fresca 10 febrero β-Proteobacteria Firmicutes Actinomicetes Streptomyces sp. Bacillus sp. Algas verdes y protistas Pseudomonas sp. Bacterias fototrópicas Desnitrificantes Fijadores de nitrógeno Oxidadores de amonio TB+Plástico TB pg de ADN/g Microorganismo α-Proteobacteria Testigo 32 14 5 2 4 32 298 6543 9 38 142 7 213 213 132 121 165 212 75 543 0 11 21 74 321 543 765 321 345 1011 45 987 9453 76 121 67 234 987 4235 987 2312 3276 354 212 87 231 56 543 Identificación de la muestra Broza fresca 10 febrero Testigo TB pg de ADN/g Microorganismo Azospirillum sp. Bacillus pumilus Bacillus subtilis Bacillus thuringiensis Burkholderia cepacia Lactobacillus acidophilus Lactobacillus brevis Lactobacillus bulgaricus Lactobacillus casei Lactobacillus cellobiosus Lactobacillus crispatus Lactobacillus curvatus Lactobacillus delbrueckii Lactobacillus fermentum Lactobacillus helveticus Lactobacillus jensenii Lactobacillus johnsonii Lactobacillus lactis cremoris Lactobacillus plantarum Lactobacillus reuteri Lactobacillus rhamnosus Lactobacillus salivarius TB+Plástico 14 53 38 453 32 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 6 0 7 0 0 0 0 0 8 0 32 0 0 465 211 0 0 2132 333 324 765 5 22 232 234 323 66 231 654 8 87 187 0 0 154 76 65 34 9 0 45 86 422 543 22 234 0 0 0 0 0 0 0 76 0 0 543 876 32 87 30 234 122 0 0 0 Identificación de la muestra Broza fresca 10 febrero Testigo TB pg de ADN/g Microorganismo Nitrosomonas multiformis Pseudomonas fluorescens Rhodopseudomonas palustris Streptococcus diacetylactis Streptococcus faecium Streptococcus intermedius Streptococcus salivaris Streptomyces antibioticus Streptomyces aureus Streptomyces globus Streptomyces thermophilus Bifidobacterium sp. Aspergillus penicilloides Mucor sp Paecilomyces lilacinus Trichoderma spp. Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces boulardii Total Benéficos TB+Plástico 42 0 0 0 0 0 0 0 126 72 0 0 0 4 4 0 0 0 25 6 6 0 0 0 939 0 65 22 26 0 21 231 652 0 0 1867 432 23 123 534 344 643 176 444 2 765 320 65 63 29 0 21 0 0 23 0 76 23 0 221 0 324 432 0 432 0 298 65 0 3 7 543 8071 2847 24880 21831 Actinomicetes, Bacillus sp., Pertenece al Phylum Firmicutes, bacteria gram positiva, aeróbica, que forma endosporas con alta resistencia a estrés ambiental (luz ultravioleta, desecación). Es capaz de fijar nitrógeno, se utiliza en control biológico por su actividad antibacteriana (Pseudomonas siringe, Erwinia) y antifungica (Mildius, Alternaria, Colletotrichum, Botrytis). Puede presentarse como endófito de las plantas con una función promotora del crecimiento de las plantas. Lactobacillus: Producen ompuestos antimicrobianos (ácido acético, ácido láctico, peróxido de hidrógeno, varias bacteriocinas, y compuestos antihongos. Se ha demostrado sus efectos sobre patógenos de plantas como Colletotrichum, Fusarium oxysporum, oomycetes como Pythium ultimum, Penicillum, Aspergillus, bacterias como Xanthomonas campestris, Ralstonia solanacearum, Pectobacterium carotovorum. Las bacterias lácticas pueden colonizar el sistema radical de las plantas y formar parte del microbioma de las plantas, promueven el crecimiento de las plantas, producen y estimulan la producción de fitohormonas , algunas especies producen sideróforos implicados en control biológico y solubilizan fósforo. Aceleran la descomposición de enmiendas orgánicas en suelos y liberan nutrimentos para la absorción de las plantas. Disminuye malos olores en sistemas de compostaje, corrales de ganado y otros sistemas de producción. Streptomyces: Bacterias gram positivas, saprofitas, endófitas de plantas, aerobias, forma filamentosa similar a hongos. Tienen la habilidad de producir metabolitos secundarios bioactivos, tales como antihongos, antivirales y antibióticos. Se presentan en simbiosis con las plantas defendiéndolas de patógenos y estimulando el crecimiento, mientras las plantas suministran exudados. Capaces de degradar, mediantes sus enzimas extracelulares, sustancias complejas como lignina y quitina, contribuyendo en la mineralización de sustancias orgánicas en el suelo y compostaje. Producen más de 6000 productos químicos distintos entre agentes antimicrobianos, antifúngicos, sustancias promotoras de crecimiento vegetal. Con comprobado efecto sobre patógenos como Rhizoctonia, Alternaria, Fusarium, Colletotrichum Rhodopseudomonas palustris : capaces de producir energía mediante fotosíntesis (contienen bacterioclorofila) y utilizan el dióxido de carbono atmosférico para convertirlo en su biomasa. Pertenecen al grupo de las α y β-Proteobacteria. Pueden degradar y reciclar ligninas principal constituyente de los tejidos leñosos de plantas, es el segundo polímero más importante en la tierra y principal componente del humus. Además de cumplir una función importante en la degradación de desechos orgánicos, disminuyen la intensidad de malos olores. Son un componente importante en las cadenas tróficas porque sus productos de desechos y su biomasa son utilizados por otros procariotas. Puede colonizar el suelo y sustratos orgánicos, contribuyendo en la mineralización de las sustancias orgánicas de difícil degradación y eliminado malos olores en lagunas de oxidación y composteras. MICROORGANISMOS PATÓGENOS Identificación de la muestra Broza fresca 10 febrero TB+Plástico TB pg de ADN/g Microorganismo Agrobacterium spp. Agrobacterium tumefaciens Erwinia sp. Pseudomonas agarici Pseudomonas apii Pseudomonas corrugata Pseudomonas delphinii Pseudomonas maculicola Pseudomonas syringae Pseudomonas tagetis Ralstonia spp. Xanthomonas sp. Armillariella mellea Ceratocystis sp. Claviceps sp. Cylindrocarpon sp. Dematophora sp. Fusarium sp. Fusarium oxysporium sp. Macrophomina phaseolina Nectria nauritiicola Phomopsis sp. Phytophthora sp. Plasmodiophora sp. Pythium sp. Rhizoctonia sp. Thielaviopsis sp. Testigo 2 5 6 65 217 127 214 164 16 111 65 5 5 25 6 12 32 534 43 94 6 0 3 0 26 3 0 321 64 435 25 66 65 143 123 32 3 65 765 122 12 543 234 23 876 423 234 33 1 123 12 543 765 4 78 765 0 12 98 98 26 43 43 100 3 55 37 0 23 45 76 67 0 69 75 312 120 98 86 124 45 254 32 50 1 66 0 0 0 4 0 6 57 43 0 0 0 0 756 46 123 0 0 231 7 99 65 0 Identificación de la muestra Microorganismo Globodera sp. Bacteroides Ruminococcus sp Peptostreptococcus sp Peptococcus sp Heterodera sp. Clostridium sp Campylobacter sp Escherichia coli Staphylococcus aureus Meloidogyne sp. Pratylenchus sp. Rotylenchus sp. Xiphinema sp. Total Patógenos Broza fresca 10 febrero 0 432 65 765 231 0 154 65 22 323 0 0 0 0 3843 Testigo TB+Plástico pg de ADN/g 65 0 0 0 0 0 0 0 0 0 43 11 0 0 0 0 0 0 0 0 76 3 51 21 3 5 43 22 6336 2560 TB 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 6 5 0 6 1860 El material sin tratamiento con microorganismos Biosa se pueden observar poblaciones de microorganismos patógenos para los cultivos y que potencialmente podríamos estar llevando al campo como: Agrobacterium sp, Erwinia, Psedomonas, Raldstonia, Xantomonas, Armillariella mella, Claviceps, Cylindrocarpon, Fusarium, Macrophomina phaseolina, Phytophtora sp, Pythium, Rhrizoctonia RESUMEN Identificación de la muestra Microorganismo BENEFICOS PATÓGENOS Broza fresca 10 febrero 8071 3843 Testigo TB+Plástico 45 dda 45 dda pg de ADN/g 2847 6336 24880 2560 TB 45 dda 21831 1860 ANÁLSIS DE ABONOS ORGÁNICO ANÁLISIS QUÍMICO ANÁLISIS QUÍMICO DE ABONOS ORGÁNICOS mg/kg ID USUARIO IDLAB N P Ca Mg K S Fe Cu Zn Mn B SOL: BROSA TERRABIOSA + PLASTICO AO-15-00084 3.87 0.24 0.98 0.26 6.15 0.32 13213 56 32 436 76 SOL: BROSA + TERRABIOSA AO-15-00085 4.19 0.22 0.92 0.24 5.16 0.31 11413 48 28 343 66 SOL: BROSA TESTIGO AO-15-00086 4.36 0.21 1.01 0.24 5.44 0.32 2626 34 20 188 53 ANÁLISIS QUÍMICO DE ABONOS ORGÁNICOS % H2O mS/cm % Relación IDLAB HUM pH CE C C/N SOL: BROSA TERRABIOSA + PLASTICO AO-15-00084 81 10.0 10.8 37.99 9.8 SOL: BROSA + TERRABIOSA AO-15-00085 80 9.8 6.4 38.87 9.3 SOL: BROSA TESTIGO AO-15-00086 82 10.0 4.8 43.24 9.9 ID USUARIO INOCUIDAD DEL MATERIAL E.coli % DE GERMINACIÓN % LONGITUD DE LA RAÍZ ESTABILIDAD DEL ABONO ANEXOS LAMA: ADN BROZA SIN TRATAR LAMA: ADN BROZA DE CADA TRATAMIENTO REPORTE DE ENSAYO SC12-LSF-I01-R01 (v7) LABORATORIO DE SUELOS Y FOLIARES REPORTE DE ENSAYO 53621 Nº DE REPORTE: USUARIO: BIOSA CENTROAMERICA SUBCLIENTE CAFETALERA TIRRA RESPONSABLE CRISTIAN NUÑEZ CORREO [email protected]/[email protected] TELÉFONO: 2283-7071 PROVINCIA: CANTÓN: ALAJUELA PALMARES CULTIVO: ABONO SOLIDO SC12-LSF-I01-R01 (v7) 53621 ANÁLISIS: QC,pH,CE FECHA RECEPCIÓN: 24/03/2015 EMISIÓN DE REPORTE:13/04/2015 Nº DE MUESTRAS TOTAL: 3 PÁGINA: 1/2 ANÁLISIS QUÍMICO DE ABONOS ORGÁNICOS ID USUARIO IDLAB N P Ca Mg K S Fe Cu mg/kg Zn Mn B SOL: B ROSA TERRA B IOSA + P LA STICO AO-15-00084 3.87 0.24 0.98 0.26 6.15 0.32 13213 56 32 436 76 SOL: B ROSA + TERRA B IOSA AO-15-00085 4.19 0.22 0.92 0.24 5.16 0.31 11413 48 28 343 66 SOL: B ROSA TESTIGO AO-15-00086 4.36 0.21 1.01 0.24 5.44 0.32 2626 20 188 53 34 Nº DE REPORTE: USUARIO: BIOSA CENTROAMERICA SUBCLIENTE CAFETALERA TIRRA RESPONSABLE: CRISTIAN NUÑEZ CORREO [email protected]/[email protected] TELÉFONO: 2283-7071 PROVINCIA: CANTÓN: ALAJUELA PALMARES CULTIVO: ABONO SOLIDO ANÁLISIS: QC,pH,CE FECHA RECEPCIÓN: 24/03/2015 EMISIÓN DE REPORTE: 13/04/2015 Nº DE MUESTRAS TOTAL: 3 PÁGINA: 2/2 ANÁLISIS QUÍMICO DE ABONOS ORGÁNICOS IDLAB % HUM H2O pH mS/cm CE % C Relación C/N SOL: BROSA TERRABIOSA + PLASTICO AO-15-00084 81 10.0 10.8 37.99 9.8 SOL: BROSA + TERRABIOSA AO-15-00085 80 9.8 6.4 38.87 9.3 SOL: BROSA TESTIGO AO-15-00086 82 10.0 4.8 43.24 9.9 ID USUARIO OBSERVACIÓN 1: El % C y N totales se determinaron con el Autoanalizador de C/N por combustión seca. Los valores de % C total correlacionan muy bien (R2≥0,95) con el % de MO. Si quiere estimar el valor del % MO a partir del dato de % C total determinado con esta metodología, multiplique el % C total por 1,43. OBSERVACIÓN 2: La CE fue determinada en una proporción de 10 g de material: 40 mL de agua, hasta alcanzar el punto de saturación de la pasta. Las lecturas se hicieron del ex tracto filtrado con succión. 1. Las unidades están expresadas en base seca, en m/m. 2. Procedimiento: en sólidos, N por combustión seca en Autoanalizador de acuerdo al SC09-LSF-01-P06; y en líquidos por digestión húmeda; P, Ca, Mg, K, S, Na, Fe, Cu, Zn, Mn, B y Al por digestión húmeda con HNO 3 y determinación por Espectrometría de Emisión Atómica con Plasma (ICP) de acuerdo al SC09-LSF-01-P10. 3. El muestreo es responsabilidad del usuario. 4. Los resultados se refieren únicam ente a las muestras ensayadas. 5. El tiempo de custodia de las muestras es de 45 días a partir del ingreso de la muestra. 6. El Reporte de Ensayo válido es el ori ginal firmado y sellado que se imprime a solicitud expresa del usuario; cuando el usuario solicita el envío del reporte por correo electrónico o fax libera al Laboratorio de re sguardar la integridad y confidencialidad de sus resultados. 1. El muestreo es responsabilidad del usuario. 2. Los resultados se refieren únicamente a las muestras ensayadas. 3. El tiem po de custodia de las muestras es de 45 días a partir del ingreso de la muestra. 4. El Reporte de Ensayo válido es el original firmado y sellado que se imprime a solicitud expresa de l usuario; cuando el usuario solicita el envío del reporte por correo electrónico o fax libera al Laboratorio de resguardar la integridad y confidencialidad de sus resultados. CIA-UCR: Análisis Químico de Abonos Orgánicos CIA-UCR: E.coli, %Germinación, %Radícula, Tasa de Respiración TRATAMIENTO DE BROZA DE CAFÉ CON MICROORGANISMOS TERRA BIOSA