Nueva Metodología para la determinación de anhídrido sulfuroso en

NUEVA METODOLOGÍA PARA LA
DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
DEPARTAMENTO NORMAS ANALÍTICAS ESPECIALES
SUBGERENCIA DE INVESTIGACIÓN PARA LA FISCALIZACIÓN
BROM. VIVIANA TREBES
LIC. FANNY PRÉVIDE
DISERTANTE
BROM. VIVIANA TREBES
[email protected]
MÉTODOS ANALÍTICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
1- Método de Ripper, de referencia a nivel nacional.
2- Método de Paul-Rankine, de referencia a nivel internacional
propuesto por la OIV.
3- Métodos con Analizadores automáticos.
En el mercado existen diferentes equipos que cumplen con esta
función:
- Autoanalizadores en Flujo Continuo.
- Autoanalizadores de Análisis Secuencial .
HISTORIA…
Evolución del Análisis Automático en Enología
- 1970: Analizadores de Flujo Continuo
- 1980: Analizadores de Infrarrojo Cercano (NIR)
- 1990: Analizadores Secuenciales
- A finales de los 90’: Infrarrojo por Transformada de Fourrier (IRTF)
Según la IUPAC, los dispositivos Automáticos son
aquellos que efectúan acciones previamente
programadas en ciertos puntos del proceso sin
intervención humana.
VENTAJAS…
*La velocidad con que se realizan los análisis suele ser
significativamente más alta que cuando se utilizan
dispositivos manuales.
*Un analizador bien diseñado proporciona mayor
precisión durante largos períodos de tiempo de lo que lo
haría un operador usando un instrumento manual.
*Menores costos laborales: sistematizar y estandarizar
determinaciones de rutina; menor volumen de desechos, etc.
INCONVENIENTES…
* Menor versatilidad que los sistemas no
automáticos, aunque algunos sistemas
ofrecen variadas prestaciones.
* La inversión inicial suele ser elevada
Los Métodos Automáticos para el análisis de muestras en
disolución suelen clasificarse según el siguiente esquema
En los Métodos Discontinuos, las muestras se
mantienen como entidades separadas en
recipientes individuales, donde tienen lugar las
diferentes etapas del proceso analítico: dilución,
adición de los reactivos, mezcla, etc. Por último, las
muestras son llevan al detector, donde se obtiene la
señal correspondiente.
AUTOANALIZADOR SECUENCIAL
COLORIMÉTRICO
En los Sistemas Continuos, la muestra se incorpora a
un flujo de líquido o gas, donde es sometida a una
serie de procesos desde que se inyecta hasta que se
hace llegar al detector.
Método de flujo segmentado la muestra es
introducida de forma secuencial.
Método de flujo no segmentado, la muestra que es
inyectada directamente en el flujo. De estos sistemas,
el más representativo es el denominado ANÁLISIS POR
INYECCIÓN EN FLUJO (FIA).
DEFINICIONES
Sulfuroso Libre (SO2L)
La combustión del azufre (S) forma el gas SO2, que se transforma en ácido
sulfuroso H2SO3 en solución acuosa. Este ácido está asimismo disociado según los
siguientes equilibrios:
H2SO3
HSO3- H+
SO3= + 2H+
Estas tres formas constituyen, por definición, el “SO2 Libre”
Sulfuroso Combinado (SO2c)
En solución compleja, como los mostos y vinos, el SO2 reacciona con diversos
compuestos orgánicos con funciones carbonilo para formar el “SO2 combinado”
Sulfuroso Total (SO2T)
Es la suma de las dos fracciones anteriores:
SO2T = SO2L + SO2c
LEGISLACIÓN
PARÁMETRO
Anhídrido Sulfuroso
Total mg.L-1
LÍMITE
TOLERANCIA
OFICIALIZACIÓN
TÉCNICA
ANALÍTICA
130 mg.L-1 en Tintos hasta 4 g/L AR.
180 mg.L-1 en Tintos de más de 4 g/L
AR. 180 mg.L-1 en Blancos y Rosados
hasta 4 g/L AR. 210 mg.L-1 en
35 mg.L-1 en más ó
Blancos y Rosados de más de 4 g/L
en menos.
Resolución I.N.V. Nº
AR. Resolución I.N.V, Nº C-61/2012.
250 mg.L-1 en Dulce Natural.
Resolución I.N.V, Nº C-17/2012.
300 mg.L-1 en Vinos Caseros. Circular
Nº 007 G.F./2003
Resolución I.N.V. Nº
C-143/94.
C-227/91.
DETERMINACIÓN DE SO2 LIBRE Y TOTAL EN VINOS POR
SISTEMA FIA
Campo de Aplicación
Este método describe la determinación de SO2 Libre y
Total en Vinos.
El rango de concentración es:
SO2 Libre: 2-200 mg.L-1 SO2
SO2 Total: 5-250 mg.L-1 SO2
Con este método pueden analizarse 50 muestras/hora.
EQUIPO AUTOANALIZADOR FIA
Autoanalizador
• Módulos para Métodos de Análisis de SO2L y
SO2T
• Lámparas. Filtros de Interferencia: M= 420 nm y
R= 720 nm
• Autosampler
• Detector
•
EQUIPO AUTOANALIZADOR FIA
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Principio
SO2Total
La muestra es inyectada en una solución de buffer fosfato
a pH 8,4 (carrier). El reactivo DTNB (Ácido
Ditionitrobenzoico), es luego adicionado y la corriente de
flujo es calentada a 50ºC. El DTNB reacciona con todas las
formas de SO2 y produce un fuerte color amarillo que es
dializado en un adecuado rango de absorbancia. El color
final es medido a 420 nm.
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Principio
SO2 Libre
La muestra es inyectada en agua (carrier) y luego es
acidificada con HCl para liberar SO2 (g) de la muestra.
Este SO2 libre difunde a través de una membrana de
difusión de gases en una solución de buffer fosfato a pH
8,4. El reactivo DTNB es luego adicionado y reacciona con
el SO2 libre. El color de la reacción produce un fuerte
color amarillo, el cual es medido a 420 nm.
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Procedimiento
Muestreo y Preparación de la muestra
- Vinos terminados pueden ser analizados directamente.
- Vinos sin filtrar se deben centrifugar. Si las muestras
están todavía turbias, se requiere filtrarlas para evitar la
obstrucción del inyector de muestras.
- Vinos espumantes deben ser sometidos a ultrasonidos
durante 5 minutos para evitar falta de repetibilidad,
debido a burbujas en la muestra inyectada.
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Puesta en marcha del sistema
a- Encendido de los módulos, del autosampler y PC.
b- Apertura del Software y carga del método.
c- Encendido de bombas y bombeo de agua destilada para purgar el
sistema.
d- Calibración de filtros.
e- Medir línea de base con agua destilada.
SD (M-R) ˂ 0,1 mUA
f- Parar bombas y conectar todo el sistema a los correspondientes
reactivos intervinientes.
g- Bombear los reactivos y medir línea de base.
SO2L: SD (M-R) ˂ 0,5 mUA
SO2T: SD (M-R) ˂ 0,1 mUA
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Puesta en marcha del sistema…
h- Crear la correspondiente curva de calibración con solución patrón
de disulfito de sodio (Na2O5S2).
i- Realizar inyecciones de prueba con uno de los estándares de
concentración conocida para cada módulo, de modo de verificar que
el sistema está equilibrado. Las mediciones no deberán diferir en más
de un 2% en mAU o mg.L-1.
j- Crear la lista de muestras requerida.
K- Para análisis de rutina, es recomendable incluir un procedimiento
de control de calidad para asegurar que los datos son correctos.
k- Sistema de Muestra Urgente.
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Resultados
Curva de Calibración para SO2 Total en el rango de 0-250 mg/L
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Resultados
Ensayos Interlaboratorio
Resultados informados por BIPEA
Método Automático Por Inyección de Flujo (FIA)
nov-13
Vino Rosado
INV
BIPEA
SO2 Libre (mg/l)
29
27
INV
z
0,4
INV
BIPEA
SO2 Total (mg/l)
126
129
INV
z
-0,29
dic-13
Vino Tinto
24
23
0,2
62
68
-0,67
112
100
-1,05
-0,7
76
-0,21
ene-14
Vino Blanco
Vino Blanco Dulce Natural
12
10
15
15
-0,75
-1,25
101
93
feb-14
Vino Tinto
19
20
-0,22
74
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Plan de Mantenimiento
Mantenimiento Diario
Limpieza al final del día: con solución detergente (SCABA)
Mantenimiento Semanal
Al inicio o final del día: con solución de hipoclorito al 5%
Si el rendimiento de los controles (QC) disminuye, debe ser
reemplazada la membrana de diálisis del módulo de SO2T
Mantenimiento Mensual
Reemplazo de membrana de difusión de gases
Mantenimiento Semestral
Cambio de lámparas. Calibración de filtros. Limpieza del rotor de
válvulas. Cambio de todas las mangueras de conexión al sistema
Verificación del sistema.
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por
Método Paul-Rankine
Método de Referencia: OIV-MA-AS323-04A (Resolución Oeno
377/2009)
Fundamento
La determinación se basa en la liberación del SO2 libre por
acidificación con ácido fosfórico y se arrastra con una corriente de
aire o nitrógeno que se hace borbotear en una solución diluida y
neutra de peróxido de hidrógeno. Valoración del ácido sulfúrico
formado con solución valorada de NaOH.
El arrastre en frío (10ºC) garantiza la extracción únicamente del SO2L.
En caliente (100ºC aprox.) se extrae el SO2T.
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por
Método Paul-Rankine
Equipo Rankine para la determinación de SO2
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por
Método Paul-Rankine
Reactivos
- Ácido Fosfórico al 85%
- Solución de Peróxido de Hidrógeno de 3 Volúmenes
- Reactivo Indicador: - Rojo de Metilo
- Azul de Metileno
- Etanol 50% (v/v)
- Solución de hidróxido de Sodio 0,01 M
NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO
SULFUROSO EN VINOS
Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por
Método Paul-Rankine
Bibliografía
Reference method
PAUL F., Mitt. Klosterneuburg, Rebe u. Wein, 1958, ser. A, 821.
MUCHAS GRACIAS