HCG QUICK CHECK IVD Fabricante: RAL TECNICA PARA EL LABORATORIO, S.A. Av. Mare de Déu de Montserrat 51 08970 Sant Joan Despí (Barcelona) CARACTERÍSTICAS DEL METODO: PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO Sensibilidad y Especificidad: CONSERVAR A 4 - 30º C LEER LAS INSTRUCCIONES ANTES DEL USO Cont. REF Referencias: GN 06110: Presentaciones: 15 placas Exactitud: Detecta la HCG a concentraciones de 25 UI/L, según el 4º patrón internacional de la OMS (75/589). Suero: se analizaron 122 sueros positivos y negativos por medio de HCG Quick Check de Gernon y del reactivo de otro fabricante: Sensibilidad en muestras > 20 UI/L: 89/89 = 100% Sensibilidad en muestras de 10-20 UI/L: 92/93 = 98.9% Especificidad: 22/22 = 100% Orina: se analizaron 95 orinas positivas por medio de HCG Quick Check de Gernon y del reactivo de otro fabricante: Sensibilidad: 95/95 = 100% Se analizaron 31 orinas negativas de mujeres no embarazadas por medio de HCG Quick Check de Gernon y del reactivo de otro fabricante: Especificidad: 31/31 = 100% Efecto prozona: PRINCIPIO DEL MÉTODO: La prueba HCG Quick Check de Gernon detecta la presencia de hormona gonadotropina coriónica humana (hCG) en orina o suero por medio de una reacción inmunológica basada en la unión de la HCG humana con anticuerpos monoclonales ligados a oro coloidal. El arrastre a las zonas de reacción se produce por difusión de forma que en la zona del test, donde hay anticuerpos anti HCG, se forma en presencia de HCG una línea rosada. En una zona posterior hay un conjugado anti-IgG que liga el oro coloidal, dando una línea rosada siempre que el reactivo esté en buen estado. SIGNIFICACIÓN CLINICA: La hormona gonadotropina coriónica humana (HCG), es una hormona secretada después de la fertilización del óvulo. HCG Quick Check de Gernon tiene una sensibilidad de 25 UI/L. CONSERVACIÓN: Conservar a temperatura ambiente (entre 4 - 30ºC) hasta la fecha de caducidad. No congelar. PRECAUCIONES EN EL MANEJO: Éste es un test diseñado para diagnostico in vitro. Leer atentamente las instrucciones antes del uso. No utilizar el test después de la fecha de caducidad que aparece en la caja o si el estuche protector está dañado. MUESTRA: Suero: Debe ser tomado bajo condiciones de laboratorio standard (asépticamente para evitar hemólisis). No es necesario ni filtrar ni centrifugar. Si las muestras se van a analizar en las primeras 48 horas, conservar a 4-8ºC pero si se supera este tiempo, deben congelarse. Las muestras congeladas deberán estar descongeladas y a temperatura ambiente antes de su uso. Evitar congelar y descongelar repetidamente. En caso de gran viscosidad, turbidez o presencia de partículas en el suero, se deberá diluir la muestra en igual volumen de solución salina. Orina: Es preferible la muestra de la primera hora de la mañana, ya que contiene mayor cantidad de HCG. Recoger la muestra en un recipiente limpio sin conservantes. Si no se analiza la muestra inmediatamente, guardarla a 4-8ºC. Si no va a analizarse en 24 horas, debe congelarse. Evitar congelar y descongelar repetidamente. Las muestras deberán estar a temperatura ambiente antes de su uso. PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS: 1. La placa y las muestras deben estar a temperatura ambiente antes de realizar la prueba. 2. Tomar un sobre, abrirlo, extraer una placa y añadir 4 gotas (150 µL) en el orificio circular de dispensación de muestra. 3.- Leer los resultados a los 5 - 10 minutos. INTERPRETACION DE RESULTADOS: Resultado NEGATIVO: Aparece una línea rosada en CONTROL. Resultado POSITIVO: Aparecen dos líneas rosadas en CONTROL y TEST. Resultado NO VÁLIDO: No aparece ninguna línea. Repita la prueba. Se han obtenido resultados positivos para muestras de concentraciones de HCG muy elevadas (106 UI/L). Reacciones cruzadas: Las siguientes hormonas, a las concentraciones indicadas, no reaccionan con la prueba HCG Quick Check de Gernon: hTSH (1000 mUI/L; OMS 68/38), hLH (500 UI/L; OMS 2º IS 80/552) y hFSH (1000 UI/L; OMS 1º IS 83/575). No se ha hallado reactividad cruzada con orinas procedentes de mujeres no embarazadas o menopáusicas. Interferencias: No se han hallado interferencias con las siguientes sustancias a las siguientes concentraciones: Acetaminofeno (20 mg/dL), Ácido Ascórbico (20 mg/dL), Ácido Gentísico (20 mg/mL), Albúmina (1.4 g/dL), Ampicilina (20 mg/mL), Atropina (20 mg/dL), Bilirrubina (30 mg/mL), Cafeína (20 mg/mL), Glucosa (2 g/dL), Hemoglobina (30 mg/mL), Paracetamol (20 mg/dL), Tetraciclina (40 ng/mL). Precisión: Tras repetir ensayos de muestras de HCG de 0, 10, 25, 5000 y 500000 UI/L, se obtuvo una precisión del 100%, tanto en inter-ensayos como en intra-ensayos. LIMITACIONES: Las orinas de hombre sanos y de mujeres no embarazadas deben dar resultados negativos para la prueba HCG Quick Check de Gernon. A pesar de la variabilidad de valores de HCG en el inicio del embarazo en cada mujer, la prueba HCG Quick Check de Gernon generalmente puede detectar el embarazo desde el primer día en que falta el periodo. La concentración de HCG se eleva por encima de los valores normales en enfermedades trofoblásticas (coriocarcinoma y mola hidatiforme) por lo que deben descartarse antes del diagnóstico de embarazo. No es posible distinguir embarazos ectópicos de embarazos normales empleando este método. De igual forma, un aborto espontáneo puede dar un resultado anómalo. En embarazos muy tempranos, pueden obtenerse resultados dudosos o incluso negativos. En caso de duda se recomienda realizar de nuevo la prueba con muestra fresca al cabo de 48 horas. Tras un parto, normal o por cesárea, o un aborto, espontáneo o terapéutico, los niveles de HCG permanecen elevados durante varias semanas. Algunas muestras con concentración elevada de Factor reumatoideo, anticuerpos heterófilos o anticuerpos de Forssman pueden dar positivos no específicos. La prueba de HCG no es suficiente para diagnosticar el embarazo, siempre debe complementarse con otras pruebas clínicas. La hidroxietil-celulosa es un componente de los lubricantes de catéteres urinarios que puede dar lugar a resultados falsos positivos si su concentración es igual o superior a 0.1%. BIBLIOGRAFÍA: Braunstein, G.D., Rasor, J., AdLer, D., Danzer, H., Wade, M.E. and Maclyn, E., Am. J. Obstet. Gynecol., 126, 678-681 (1976). Braunstein, G.D., Vaitukaitis, J.L., Carbone, P.P., and Ross, G.T., Ann. Inter. Med., 78, 39-45 (1973). Morgan, F.J., Canfield, R.E., Vaitukaitis, J.L., and Ross, G.T., Endocrinology, 94, 1601-1606 (1974). Kohler, G. and Milstein, C., Nature, 256, 495-497 (1975). Thompson, R.J., Jackson, A.P., and Langlois, N., Clin. Chem., 32, 476-481 (1986). Engvall, E., Methods in Enzymology, 70, 419-439 (1980). Rasor, J.L., and Braunstein, G.D., Obstet. Gynecol., 50, 553-558 (1977). Lenton, E.A., Neal, L.M., and Sulaiman, R., Fertility and Sterility, 37, 773-778 (1982). Elliott, M.M., Kardana, A. Lustbader, J.W. and Cole L.A. Endocrine, 7, 15-32 (1997). Cola, L.A. Clin. Chem., 43, 2233-2243 (1997). IU/GN06110/R1/1210 Resultado negativo Resultado positivo Tel: (+34) 93 480 80 47 Fax: (+34) 93 373 00 92 e-mail: [email protected] web: www.ral-sa.com HCG QUICK CHECK MANUFACTURER: RAL TECNICA PARA EL LABORATORIO, S.A. Av. Mare de Déu de Montserrat 51 08970 Sant Joan Despí (Barcelona) - SPAIN IVD It is capable of detecting HCG levels of 25 IU/L, according to WHO 4th International Standard (# 75/589). Serum: A study was performed using a total of 122 positive and negative serum specimens by means of Gernon HCG Quick Check and other available commercial test, obtaining the following results: Sensitivity per samples > 20 IU/L: 89/89 = 100% Sensitivity per samples on the range 10-20 IU/L: 92/93 = 98.9% Specificity: 22/22 = 100% Urine: A study was performed using a total of 95 positive and negative specimens by means of Gernon HCG Quick Check and another available commercial test, obtaining the following results: Sensitivity: 95/95 = 100% 31 negative urine samples collected from non pregnant women have been tested using Gernon HCG Quick Check. The results obtained are as follows: Specificity: 31/31 = 100% STORE AT 4 - 30º C READ INSTRUCTIONS Cont. Reference: GN 06110: Accuracy: Sensitivity and specificity: FOR IN VITRO DIAGNOSTIC USE REF PERFORMANCE CHARACTERISTICS: Package: 15 devices PRINCIPLE: Immunological reaction based on the union between the human hCG and monoclonal antibodies linked to colloidal gold. The sample flows by chromatographic diffusion through the reaction zone, where there are anti HCG antibodies, in presence of HCG a pink line is formed. In a posterior zone there is an anti-IgG conjugate that binds the colloidal gold, showing a pink line if the reagent is in good conditions. SUMMARY: The human chorionic gonadotropin, is an after fertilization secreted hormone. The Gernon HCG Quick Check kit allows the pregnancy detection 7 days after the conception, since has a 25 IU/L sensitivity. STORAGE AND STABILITY: Storage at 4 - 30ºC, up to date of expiry. Do not freeze the test kits. WARNINGS AND PRECAUTIONS: 1. This test is designed for IN VITRO diagnostic use only. 2. Read carefully instructions notice before using this test. 3. Do not use beyond the expiration date which appears on the package label. SPECIMEN: Serum: It must be taken under Standard lab conditions (aseptically to avoid haemolysis). It is not necessary to filter or to centrifuge. If samples are tested in the first 48 hours keep refrigerated between 4-8ºC. If testing is not immediate, the samples should be frozen. Repeated freezing and thawing of samples is not recommended and may cause erroneous results. In case of appearing high viscosity or presence of particles in serum, dilute the sample in the same quantity of diluent buffer volume (v/v). Urine: Fresh urine preferably the first urine in the morning since it contains the highest concentration of HCG. If testing is not immediate, the specimen should be refrigerated (4-8ºC) or kept cool (below 25ºC) for up to 24 hours. PROCEDURE: 1. Bring all reagents at room temperature prior testing. 2. Remove the test device from the pouch. Add 4 drops (150 µL) of the extracted solution into the sample well. 3. Read the results of the test 5-10 minutes after addition of the sample to the device. RESULTS READING: POSITIVE: Two pink coloured lines appear in CONTROL zone. NEGATIVE: One pink line appear in CONTROL zone. NO VALID: None line in CONTROL or in TEST zones. Repeat the test. Hook effect: Positive results have been found for samples with high concentration of HCG (106 UI/L). Cross reactivity: The following concentration of homologous hormones are found to have no interferences with Gernon HCG Quick Check: hTSH (1000 mIU/L; WHO 68/38), hLH (500 IU/L; WHO 2nd IS 80/552) and hFSH (1000 IU/L; WHO 1st IS 83/575). No crossing reactivity has been found in urines collected from non pregnant or post-menopausal women. Interferences: No interferences have been found with the following substances and the indicated concentrations: Acetaminophen (20 mg/dL), Ascorbic Acid (20 mg/dL), Gentisic Acid (20 mg/mL), Albumin (1.4 g/dL), Ampicillin (20 mg/mL), Atropin (20 mg/dL), Bilirubin (30 mg/mL), Caffeine (20 mg/mL), Glucose (2 g/dL), Haemoglobin (30 mg/mL), Paracetamol (20 mg/dL), Tetracycline (40 ng/mL). Precision: After repeating the tests in samples with concentration of HCG of 0, 10, 25, 5000 and 500000 IU/L, a precision of 100% was obtained, on inter-essays and intra-essays. LIMITATIONS: Urine from healthy men and non-pregnant women will normally show negative result when using Gernon HCG Quick Check test. Although the HCG levels in normal early pregnant women are variable, the Gernon HCG Quick Check test is usually capable of confirming pregnancy by the first day of the missed menstrual period. HCG has been found in patients with throphoblastic disease (choriocarcinoma and hydatidiform mole), which should be diagnosed prior to pregnancy. A normal pregnancy can be distinguished from an ectopic pregnancy based on HCG levels alone. Also, spontaneous miscarriage may cause confusion in interpreting test results. A very early pregnancy containing an extremely low concentration of HCG can give a negative result. In this case, another specimen should be obtained at least 48 hours later and tested. HCG levels may remain detectable for several weeks after normal delivery, delivery by caesarean section, spontaneous abortion, or therapeutic abortion. Some serum specimens with high concentration of rheumatoid factor, heterophiles or Forssman antibodies may yield non specific positive results during testing. Such cases should be discriminated before testing. The HCG test in not enough to diagnose a pregnancy. It must always be complemented with other clinical essays. The presence of hydroxyethyl-cellulose in the composition of catheter lubricant may give false positive at a concentration equal or higher than 0.1%. LITERATURE: Negative result Positive result Braunstein, G.D., Rasor, J., AdLer, D., Danzer, H., Wade, M.E. and Maclyn, E., Am. J. Obstet. Gynecol., 126, 678-681 (1976). Braunstein, G.D., Vaitukaitis, J.L., Carbone, P.P., and Ross, G.T., Ann. Inter. Med., 78, 39-45 (1973). Morgan, F.J., Canfield, R.E., Vaitukaitis, J.L., and Ross, G.T., Endocrinology, 94, 1601-1606 (1974). Kohler, G. and Milstein, C., Nature, 256, 495-497 (1975). Thompson, R.J., Jackson, A.P., and Langlois, N., Clin. Chem., 32, 476-481 (1986). Engvall, E., Methods in Enzymology, 70, 419-439 (1980). Rasor, J.L., and Braunstein, G.D., Obstet. Gynecol., 50, 553-558 (1977). Lenton, E.A., Neal, L.M., and Sulaiman, R., Fertility and Sterility, 37, 773-778 (1982). Elliott, M.M., Kardana, A. Lustbader, J.W. and Cole L.A. Endocrine, 7, 15-32 (1997). Cola, L.A. Clin. Chem., 43, 2233-2243 (1997). IU/GN06110/R1/1210/EA Tel: (+34) 93 480 80 47 Fax: (+34) 93 373 00 92 e-mail: [email protected] web: www.ral-sa.com