FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Zully Cuchillo Hurtado, Victoria Eugenia Dauqui, Rómulo Campos Gaona Palmira, Mayo de 2010 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Autores: Zully Cuchillo Hurtado1 Victoria Eugenia Dauqui2 Rómulo Campos Gaona3 Zootecnista, UNC, Coautora Monografía Trabajo de Grado Zootecnista, UNC, Coautora Monografía Trabajo de Grado MV, MSc, Dsc, profesor Asociado, Departamento de Ciencia Animal, director trabajo de grado 1 2 3 Palmira, mayo de 2010 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 2 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE El presente documento constituye una revisión de literatura sobre el papel del recuento de células somáticas (RCS), para el diagnóstico de mastitis, en especial de la inflamación de tipo subclínico. La valoración del grado de la afección bien sea a nivel de individuo, como a nivel de leche de tanque, puede ser oportuna y confiable mediante el uso del recuento como prueba tamiz. Esta publicación es un producto académico, resultado parcial de una monografía de grado y de los trabajos de campo de las pasantías de estudiantes del programa curricular de Zootecnia. A solicitud de algunos productores, se recopilaron en forma resumida los principales factores que afectan el recuento de células, así mismo, se presenta una breve descripción de la mastitis y la incidencia de ésta sobre la calidad composicional de la leche y la rentabilidad de los sistemas de producción. Este material servirá como apoyo en las actividades de extensión extramural y como soporte documental para los estudiantes de los cursos de Sistemas de Producción de Ganado de Leche y de Tecnología de Leches. Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 4 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira TABLA DE CONTENIDO INTRODUCCIÓN 9 1. ¿QUÉ SON LAS CELULAS SOMÁTICAS? 1.1. Mecanismos de defensa de la glándula mamaria. 1.1.1. Mecanismos no inmunológicos. 1.1.2. Mecanismos Inmunológicos. 11 1 12 14 2. RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS. 17 3. CÓMO AFECTA EL RECUENTO SOMATICO LA CALIDAD DE LA LECHE. 19 4. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RCS. 4.1. Morfología y ubicación de la glándula mamaria. 4.2. Principales patógenos que influyen sobre los RCS. 4.2.1. Patógenos de tipo contagioso. 4.2.1.1. Staphylococcus aureus. 4.2.1.2. Streptococcus agalactiae. 4.2.2. Patógenos de tipo ambiental. 4.2.2.1. Escherichia coli. 4.2.2.2. Streptococcus uberis. 4.2.2.3. Streptococcus dysgalactiae. 4.3. Prácticas de manejo. 4.3.1. Correcta realización del Ordeño. 4.3.2. Equipo de Ordeño. 4.3.3. Desinfección de pezones. 4.3.4. Tratamiento. 4.3.5. Alojamiento. 4.4. Nutrición. 4.5. Estrés asociado a las condiciones climáticas. 4.6. Edad y etapa de lactancia. 4.7. Efecto del número de vacas en ordeño sobre el Recuento de Células Somáticas. 22 22 23 24 24 25 25 25 26 26 27 27 28 28 29 29 29 31 32 5. ESCORE DE CÉLULAS SOMÁTICAS (ECS). 35 6. TÉCNICAS DE LECTURA, MEDIANTE RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS EN LECHE. 38 6.1. Pruebas químicas. 6.1.1. Conductividad eléctrica de la leche. 6.1.2. Papel indicador de mastitis. 6.1.3. Prueba de Whiteside. 6.2. Pruebas biológicas. 6.2.1. California Mastitis Test (CMT). 6.2.2. Prueba de Wisconsin. 6.3. Métodos de conteo electrónico celular. 6.3.1. Fossomatic. 6.3.2. Counter Coulter. 6.3.3. Test DCC (DeLaval Direct Cell Counter). 6.3.4. Citometría de flujo. 38 38 38 39 39 39 40 40 40 41 41 41 33 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 5 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 6 7. PÉRDIDAS ECONÓMICAS POR ALTOS RCS EN LECHE 7.1. Perdidas económicas asociadas a mastitis clínica. 7.2. Pérdidas ocasionadas por mastitis subclínica. 43 44 45 8. PERSPECTIVAS DE USO DEL RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS (RCS). 48 BIBLIOGRAFÍA. 49 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira LISTADO DE CUADROS Cuadro 1.Tipos de células en la leche. 11 Cuadro 2. Diagnóstico de un cuarto según el conteo de células somáticas. 18 Cuadro 3. Efecto de la mastitis sobre las propiedades físicas de la leche. 20 Cuadro 4. Clasificación de los microorganismos causantes de mastitis. 23 Cuadro 5. Comparación del conteo de células somáticas por cuarto. 33 Cuadro 6. Relación entre el Escore de Células Somáticas (ECS) y el Recuento de Células Somáticas (RCS). 35 Cuadro 7. Relación entre el CMT y el RCS según el grado de reacción. 40 Cuadro 8. Cambio estimado en producción de leche asociada con un aumento en el Escore de Células Somáticas (ECS). 44 Cuadro 9. Relación entre conteo de células somáticas (RCS) medido en la leche del tanque a granel, pérdida de la producción y prevalencia de las mastitis subclínicas en el hato. 45 Cuadro 10. Pérdidas económicas y su relación con el RCS y CMT. 46 Cuadro 11. Relación entre el RCS de tanque, el porcentaje de cuartos infectados y el porcentaje de pérdidas en la producción de leche. 46 Cuadro 12. Estimación de las pérdidas diarias en la producción de leche debidas a la mastitis en 50 vacas. 47 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 7 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira LISTA DE FIGURAS 8 Figura 1. Esquema de la glándula mamaria indicando los factores anatómicos que actúan como barrera de defensa. 13 Figura 2. Fuentes de infección para una vaca sana. 28 Figura 3. Esquema del Citómetro de flujo. 42 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira INTRODUCCIÓN El Recuento de Células somáticas (RCS) se refiere al número de células que se encuentran presentes en la leche. La principal fuente de variación es la respuesta celular originada por la presencia o no de infecciones bacterianas en la glándula mamaria; otras fuentes de variación se deben al parto, fase de lactancia, estrés de origen metabólico o fisiológico, diferencias entre los cuartos y vacas, y errores en la técnica de medición (Green et al., 2006). Sin lugar a dudas, el principal factor que determina la elevación del recuento celular (RCS) es la mastitis, enfermedad que se define como la inflamación de la glándula mamaria, generalmente ocasionada por infecciones de tipo bacteriano. Puede ser clínica cuando los signos se hacen evidentes, o subclinica en ausencia de signos visibles, y su diagnóstico se obtiene a través de técnicas como el recuento de células somáticas (McDougall et al., 2009). La presencia de mastitis tiene efectos negativos sobre la calidad de la leche que afecta a la industria de lácteos, principalmente debido al bajo rendimiento y disminución de la vida útil de los productos lácteos, a causa decaracterísticas organolépticas indeseables principalmente ocasionadas por la acción de enzimas proteolíticas y lipolíticas (Fernandes Oliveira & Lima, 2007). Los métodos más utilizados para detección de mastitis subclínica son entre otros: Prueba de California para Mastitis (CMT), Prueba de Wisconsin (WMT), y Cuenta Microscópica de Células Somáticas (CMCS). Otros métodos utilizados actualmente por su rapidez y efectividad son los Contadores Electrónicos como el Fossomatic® (CE) y el Contador Infrarrojo (CI) también conocido como DeLaval Cell Counter (DCC®) (Bedolla, Castañeda & Wolter, 2007). La detección del número de células somáticas se puede realizar de dos maneras, individualmente o muestreando la leche directamente del tanque recolector. La prueba individual determina el estado de salud de cada una de las vacas e indica cuáles están enfermas; y el muestreo del tanque muestra el promedio del estado de salud de todas las vacas (Hernández & Bedolla, 2008). El conteo de células somáticas en leches de tanque permite conocer el grado de infección en el que está el hato para la posterior implementación de acciones correctivas sobre el problema. Las causas de los altos recuentos de células somáticas pueden obedecer a diversos factores, entre ellos: presencia de mastitis por infección con microorganismos patógenos, lesiones en la glándula mamaria, estrés y número de animales que se encuentren enfermos (Hernández & Bedolla, 2008). El objetivo de la presente revisión de literatura fue describir los principales factores que inciden en el recuento de células somáticas y su efecto sobre la calidad de la leche, así mismo, comprender las ventajas de un diagnóstico rápido y seguro para mastitis a nivel individual y de hato. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 9 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 10 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 1. ¿QUÉ SON LAS CELULAS SOMÁTICAS? Las células somáticas son células corporales que están conformadas por leucocitos y células epiteliales, migran desde la sangre a los tejidos y conductos de la glándula mamaria, actúan en respuesta defensiva contra una lesión inflamatoria generalmente de tipo infeccioso en la glándula y son un indicador directo de mastitis. Se encuentran constituidas en mayor proporción por leucocitos (macrófagos, linfocitos y neutrófilos) y en menor grado por células de descamación provenientes del epitelio del tejido glandular; el 98% de las células somáticas las conforman los leucocitos y solo un 2% corresponden a células del epitelio procedentes de la descamación por envejecimiento (Zemanate & Grass, 2005). Cuadro 1.Tipos de células en la leche. Tipo % leche normal % leche afectada Macrófagos 45-90 10-35 Neutrófilos 3-25 50-90 Linfocitos 7-35 1-20 0-2 0-2 células epiteliales Fuente: Monardes & Barria, 1995 Los leucocitos ingresan a la leche a través de la sangre y el tejido glandular como respuesta a la inflamación de la glándula mamaria que puede ser ocasionada por una infección o una lesión traumática (Hernández & Bedolla, 2008). Según Bedolla & Castañeda (2004); Wolter et al. (2004) citados por Hernández & Bedolla (2008), el estado de salud y funcionalidad de la glándula mamaria se puede conocer a través del contenido de células somáticas en la leche. Las células somáticas poseen un alto poder fagocitario y capacidad de destruir buena parte de los organismos invasores. La muerte de las células epiteliales glandulares como consecuencia de la acción de las bacterias, ocasiona el desprendimiento del tejido mamario y de gran parte de las bacterias que se encuentran adheridas convirtiéndose en un sistema de defensa adicional para la glándula mamaria (Zemanate & Grass, 2005). En una glándula mamaria sana la presencia de células somáticas es muy baja y corresponde a células epiteliales y células inmunes, tiene concentraciones de menos de 105 células somáticas por mililitro; no obstante, la variación individual es amplia y se informa de valores que oscilan entre 104 y 107 células por mililitro (Hamann, 2002; Jensen, Blanc & Patton, 1995) citados por Lindmark-Mansson et al., 2006. 1.1. Mecanismos de defensa de la glándula mamaria El sistema inmunológico tiene la capacidad de reconocer y diferenciar entre agentes extraños y moléculas propias producidas por el organismo (Meglia & Mata, 2001). La glándula mamaria lleva a cabo funciones inmunológicas que FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 11 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira le sirven como defensa; por ejemplo, en el periodo preparto la producción de anticuerpos que se secretan en el calostro le confieren protección al neonato contra agentes patógenos (Oviedo-Boyso et al., 2007). El tejido de la glándula mamaria está protegido por dos mecanismos de defensa: la inmunidad innata y la adquirida; ambos sistemas interactúan para brindar protección contra los microorganismos patógenos que causan la mastitis. La respuesta del sistema inmune natural o innato estimula la respuesta inmune adquirida y esta influenciada por su naturaleza (OviedoBoyso et al., 2007). La inmunidad natural, innata o propia del organismo prevalece durante la fase inicial de la infección y es mediada por macrófagos, neutrófilos, las células propias del tejido afectado y por las citocinas. Tiene la facultad de reconocer y dar respuesta al ataque de diferentes tipos de patógenos, aunque estos se encuentren invadiendo la glándula mamaria por primera vez (Oviedo-Boyso et al., 2007). Así mismo, la respuesta innata es de vital importancia en el control de la proliferación del microorganismo patógeno y en la eliminación de los gérmenes que atacan la glándula mamaria y se relaciona con la respuesta inmune adquirida para formar el mecanismo particular de memoria (Oviedo-Boyso et al., 2007). La respuesta inmune adquirida, emplea gran cantidad de sistemas efectores inmunes propios del organismo con el fin de reconocer y eliminar los patógenos y su acción incrementa la actividad antimicrobiana. La eficiencia de la capacidad de respuesta es el factor determinante del grado de susceptibilidad o de la resistencia a la enfermedad por parte de la glándula mamaria (Oviedo-Boyso et al., 2007). 1.1.1. Mecanismos no inmunológicos La glándula mamaria contiene agentes bacteriostáticos inespecíficos que actúan independientemente o en compañía de inmunoglobulinas. Uno de estos factores es la proteína lactoferrina producida en las células epiteliales y los fagocitos de la glándula mamaria; su concentración es generalmente baja, aumenta durante la involución de la glándula o cuando se presenta una inflamación (Meglia & Mata, 2001). La lactoferrina liga los iones férricos libres que se encuentran en la leche, haciéndolos indisponibles para las bacterias que requieren de este metal como factor de crecimiento o como fuente de hierro (por ejemplo E. coli, K. pneumoniae). No obstante, existen otras bacterias que utilizan la lactoferrina como una fuente de hierro (por ejemplo S. agalactiae). La función más importante de la lactoferrina es salvaguardar la glándula mamaria de infecciones con coliformes, sobre todo, en su fase de incubación, debido a la aceleración de la fagocitosis y la activación del sistema complemento (Oviedo-Boyso et al., 2007). La primera barrera de defensa contra los microorganismos patógenos causantes de la inflamación de la glándula mamaria está constituida por el canal 12 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira del pezón y la piel. Cuando la glándula mamaria está sana, la oportunidad de sobrevivencia de los agentes patógenos es limitada. La capa córnea de la piel puede sufrir cambios en el contenido de acido láctico, ácidos grasos libres y aminoácidos, lo cual deja la piel susceptible al ataque de microorganismos patógenos, causantes de infecciones en bovinos (Meglia & Mata, 2001). Figura 1. Esquema de la glándula mamaria indicando los factores anatómicos que actúan como barrera de defensa. Fuente: Oviedo-Boyso et al., 2007 Es por el canal del pezón por donde ingresan la mayor parte de los patógenos a la glándula mamaria (Meglia & Mata, 2001). Esto indica que cualquier daño en esta estructura dará como resultado un incremento en la incidencia de mastitis. El conducto del pezón se encuentra rodeado de músculo liso elástico lo cual mantiene cerrada la entrada de bacterias (Oviedo-Boyso et al., 2007). Durante el periodo de lactancia sucede todo lo contrario, el canal del pezón permanece abierto durante dos horas después de realizado el ordeño, lo que permite la entrada de patógenos al interior de la glándula mamaria (Meglia & Mata, 2001). El diámetro y longitud del pezón se encuentran directamente relacionados con la aparición de enfermedades intramamarias, siendo los pezones de mayor tamaño los más propensos a contraer nuevas infecciones. Algunos estudios han mostrado que el diámetro del canal del pezón cambia durante la lactancia y el periodo seco de la vaca. Se ha encontrado que existe una relación negativa entre la edad de la vaca y la obstrucción del canal del pezón ya que los animales más viejos poseen el canal del pezón dilatado, haciéndolos más propensos a adquirir infecciones intramamarias (Meglia & Mata, 2001). La resistencia que posee la glándula mamaria se debe en gran parte a que el canal del pezón está rodeado con queratina, proporcionando una barrera física adicional, previniendo la migración bacteriana hacia la cisterna de la glándula mamaria. Los ácidos grasos esterificados y no esterificados (mirístico, palmitoleico, y linoleico) actúan como bacteriostáticos y se FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 13 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira encuentran unidos a la queratina. Incluso algunas proteínas catiónicas asociadas a la queratina pueden adherirse a microorganismos patógenos causantes de mastitis, desarrollando susceptibilidad a cambios osmolares (Oviedo-Boyso et al., 2007). 1.1.2. Mecanismos Inmunológicos Los mecanismos inmunológicos solubles se clasifican en complemento (proteínas activadas que poseen diversas funciones inmunológicas) y las inmunoglobulinas (Meglia & Mata, 2001). Según Elfstrand et al. (2002) citado por Liu et al. (2009), la IgG predomina en el calostro y la leche, comprende entre el 80 y 90 % del contenido de inmunoglobulinas totales. La IgG como anticuerpo está involucrada en la opsonización favoreciendo el proceso de fagocitosis, activación del complemento, prevención de la adherencia de agentes patógenos, inhibición del metabolismo bacteriano, aglutinación bacterial y en la neutralización de virus y toxinas (Marnila & Korhonen, 2002 citado por Liu et al., 2009). En la glándula mamaria se encuentran 4 clases de inmunoglobulinas (IgA, IgE, IgG (IgG1, IgG2) e IgM) las cuales son producidas por ésta o se derivan del torrente sanguíneo. Según Tizard (1996) citado por Meglia & Mata (2001) “Entre el 50 y el 100 % de la IgA es producida localmente, pero a diferencia de otras especies, en la leche bovina esta Ig no se encuentra en una elevada concentración”. “El 75 % de la IgM es producida localmente, el 90 % para el caso de la IgG2, mientras que la IgG1 deriva principalmente del suero”. La concentración de IgG1 en leche esta mediada por diversos factores, en los que se incluyen influencias genéticas y hormonales, edad, parto, estado nutricional y etapa de lactancia de la vaca (Kruse, 1970; Guidry et al., 1980; Auldist et al., 1993; McFadden et al., 1997; Laegreid et al., 2002; Clawson et al., 2004 citados por Liu et al., 2009). Según Harmon et al. (1976) y Andersson & Andrews (1977) citados por Lindmark-Mansson et al. (2000), las concentraciones de inmunoglobulinas (IgG, IgA, IgM) son variables y se incrementan durante los procesos infecciosos (mastitis) debido a la producción de neutrófilos polimorfonucleares. En caso de que haya una invasión fuerte de bacterias se verá aumentado el número de granulocitos de los vasos sanguíneos, así como también el número de células somáticas en la leche. Diferentes mediadores químicos desencadenan esas reacciones inflamatorias como consecuencia de la acción de agentes patógenos u otros estímulos (Wolter et al., 2002). El complemento está formado por una serie de proteínas que, al ser activadas, ejercen diversas funciones inmunológicas, tales como opsonización de microorganismos, quimiotaxis de neutrófilos y lisis de bacterias. Recientemente, se ha señalado que el complemento puede actuar modulando la respuesta inmune. Sin embargo, tiene una función muy limitada en la protección de la glándula mamaria ya que se encuentra más concentrado en el suero que en la leche, viene en la sangre como respuesta 14 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira a una inflamación. Su concentración en la glándula mamaria depende del período de lactancia y del nivel de infección; se encuentra en el calostro, leche con mastitis y al final de la lactancia normal su concentración es elevada (Meglia & Mata, 2001). Existen diversas moléculas constituyentes del complemento, las cuales se requieren tanto para reclutar neutrófilos como para opsonizar y eliminar bacterias en la glándula mamaria. La opsonización suministra una vía adecuada para que se efectúe la fagocitosis de los macrófagos y leucocitos polimorfonucleares. Las acciones bactericidas y hemolíticas del complemento se incrementan cuando los cuartos de la glándula mamaria están inflamados. La intensidad de estas actividades están estrechamente relacionadas con la respuesta inflamatoria. Diversos estudios han demostrado que la actividad hemolítica y la concentración de la fracción del complemento C3 en la leche es más elevada en la glándula mamaria infectada con mastitis que en una glándula mamaria saludable (Oviedo-Boyso et al., 2007). Cuando los tejidos de la glándula mamaria son atacados por agentes patógenos, la respuesta del sistema inmune es realizada a través de las diferentes células que lo componen, en una secuencia de reacciones de defensa donde en primer lugar, el antígeno (Ag) componente soluble no reconocido por el organismo es capaz de crear una respuesta inmune local, éste es reconocido y fagocitado por parte de las células portadoras de antígenos (CPA); que pueden ser linfocitos B, macrófagos, o células dendríticas (Meglia & Mata, 2001). Una vez ha sido fagocitado el (Ag) es procesado y presentado en mezcla con el complejo mayor de histocompatibilidad tipo II (MHC II) y linfocitos T, esto depende del tipo de Ag que esté actuando, generando una respuesta inmune bien sea de tipo celular o de tipo humoral (en su mayoría producción de inmunoglobulinas). Como resultado de dicha interacción, las células manifestantes de antígenos secretan citocinas (IL-1 y el IFN-γ) que principalmente tienen funciones inmunomoduladoras sistémicas y locales (Meglia & Mata, 2001). Meglia & Mata (2001) señalan que, tras la acción sistémica de las citocinas se aumenta la síntesis de proteínas de las células hepáticas conocidas generalmente como proteínas de fase aguda, que ejercen funciones inmunomoduladoras que evitan la expansión de la infección. Un punto crítico que influye en la defensa del huésped es la presencia de leucocitos en la sangre, tras un ataque bacteriano. El desplazamiento de los leucocitos da lugar a una vertiginosa acumulación de neutrófilos en el sitio de la infección, siendo éstos considerados la primera barrera defensa celular contra las infecciones. Los linfocitos L transitan y migran hasta los tejidos más complejos, existiendo contrastes entre los linfocitos L sin memoria y los linfocitos L con memoria ó efectores. La acción de las células del sistema inmunológico en la fisiopatología de la mastitis bovina se encuentra parcialmente regulada por citocinas que son un grupo de proteínas sintetizadas de forma natural por las células del sistema inmune. Los linfocitos y macrófagos son la mayor fuente de citocinas, FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 15 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira las cuales poseen habilidad de regular su propia naturaleza y sostener la respuesta inmune en los procesos donde existe inflamación (Meglia & Mata, 2001). Inducen la concentración de neutrófilos en el área infectada, provocan la maduración de las células dendríticas e intervienen en la respuesta del sistema inmune adquirido (Oviedo-Boyso et al., 2007). 16 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 2. RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS Las células somáticas únicamente son liberadas en gran cantidad cuando y donde son necesitadas (sitios infectados/lesionados). Tras el ataque bacteriano al interior de la glándula mamaria se produce una respuesta del sistema inmune del organismo enviando glóbulos blancos de la sangre con el fin de neutralizar el efecto de los agentes patógenos causantes del daño a la glándula mamaria, el cual puede ser determinado por el número de células somáticas en la leche (García, 2004). El recuento de células somáticas es un procedimiento común usado para determinar el estado de salud de la glándula mamaria (Hernández & Bedolla, 2008). Además, pone de manifiesto el grado de infección e inflamación de la glándula tanto en cuartos separados de la glándula mamaria como en muestras mixtas de leche de cuartos de vacas individuales y en muestras provenientes del tanque de acopio (Curbelo, 2007). El recuento de células somáticas (RCS) se efectúa en leche de: cuartos individuales; vacas individuales; el hato completo y un grupo de hatos (Bedolla, Castañeda & Wolter, 2007). Una glándula mamaria que nunca se ha infectado, normalmente tienen RCS de 20,000 a 50,000/ml. Un elevado recuento de células somáticas en tanque es un índice de alto número de cuartos o de vacas infectadas en el hato, aunque no es posible determinar a partir de esta prueba cuántas vacas están infectadas y qué organismos patógenos de mastitis predominan en el hato (Hernández & Bedolla, 2008). Los cuartos infectados de la glándula mamaria tienen mayor variabilidad en cuanto a los RCS que aquellos de una glándula mamaria saludable, puesto que el animal en el primer caso es más sensible a diversos factores estresantes. Algunos reportes relacionados con el mejoramiento de los hatos lecheros mencionan que el RCS de vacas de baja producción aumenta el periodo seco, no obstante, estas diferencias no son altamente significativas para las vacas que producen mas de 4 kg de leche por día (Pantoja, Hulland & Ruegg, 2009). Rápidas velocidades de ordeño y un gran diámetro del canal del pezón tienen estrecha relación con el incremento de RCS (Bhutto, Murray & Woldehiwet, 2008). Las vacas con elevados RCS al inicio de la lactancia tienen mayor probabilidad de manifestar RCS elevados y por ende mayor riesgo de sufrir mastitis clínica o subclínica en lactancias sucesivas (Curbelo, 2007). En algunos estudios se menciona que existe un aumento paulatino en los RCS a medida que aumenta el número de lactancias, lo cual puede ser explicado, en parte, por el incremento de células epiteliales en vacas más viejas, así como también por un mayor riesgo de infección de la glándula mamaria (Cunha et al., 2008). Cuando la leche de todas las vacas en un hato se combina, el conteo de células somáticas en una muestra compuesta es un buen indicador de la FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 17 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira prevalencia de la mastitis en el hato. Los hatos con alto recuento de células somáticas son más propensos a presentar antibióticos en la leche, mastitis clínica y a tener mayores descartes de vacas por daños irreversibles en la glándula mamaria (Glauber, 2007). Actualmente se considera un cuarto de la glándula mamaria como sano, aquel que no muestra ninguna modificación patológica externa, la leche está libre de microorganismos patógenos y tiene un nivel de células somáticas < 100,000/ml (Hernández & Bedolla, 2008). Cuadro 2. Diagnóstico de un cuarto según el conteo de células somáticas. 18 Células/ml de leche Estado de la ubre Hasta 100.000 Sana, leche normal De 100.000 a 200.000 Sospechoso, nivel superior fisiológico Más de 200.000 Mastitis, leche anormal Fuente: Hernández & Bedolla, 2008 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 3. CÓMO AFECTA EL RECUENTO SOMATICO LA CALIDAD DE LA LECHE La mastitis subclínica es una enfermedad difícil de detectar y curar puesto que la vaca enferma aparentemente se encuentra sana sin estarlo, la glándula mamaria no muestra ningún signo de la enfermedad y la leche que produce es de una apariencia normal, sin ninguna variación observable en su composición o en sus características organolépticas (Valera et al., 2005). La mastitis produce en la leche secretada variaciones en la membrana del glóbulo de grasa promoviendo la lipólisis, incrementa las proteínas solubles y altera los balances de sal. Estos efectos sobre la composición de la leche son ocasionados por la disfunción de las células de la glándula mamaria y son la causa de la transferencia directa de los compuestos de la sangre a la leche (Coulon et al., 2004). El recuento de células somáticas además, se ha constituido en un buen indicador del porcentaje de cuartos infectados con mastitis de tipo clínica o subclínica y apoya en forma indirecta la evaluación de la calidad de la leche, debido a la asociación negativa que existe entre éstos y la producción de leche en ganado bovino (Curbelo, 2007). Dichos recuentos se utilizan para tomar medidas de manejo relacionadas con la prevención y control de mastitis en los hatos (Cerón et al., 2002). La proliferación de microorganismos patógenos, favorece la destrucción del tejido secretor, disminuyendo las concentraciones de caseína y lactosa sintetizadas en la glándula mamaria. Una vez lesionado el tejido de la glándula mamaria, es sustituido por tejido conectivo ocasionando la pérdida irreversible de la productividad láctea del animal (Curbelo, 2007). En la leche se presenta un incremento de inmunoglobulinas y lactoferrina cuando hay una infección de la glándula mamaria debido a que se producen gran número de células somáticas, también, se da un incremento de la permeabilidad capilar de los tejidos de la glándula mamaria, lo cual afecta la barrera sangre-leche, permitiendo el desplazamiento de las proteínas del suero de la sangre hacia la leche, lo que facilita que se incremente el tránsito de sustancias como sodio, cloro, inmunoglobulinas y otros compuestos que aparecen en la leche y ocasionan el incremento del pH normal (6.6) hasta 6.9 (Lindmark-Mansson et al., 2000). Para la compensación osmótica se disminuye la síntesis de lactosa con aumento de la concentración de cloruro de sodio en la leche (Curbelo, 2007). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 19 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Cuadro 3. Efecto de la mastitis sobre las propiedades físicas de la leche. Propiedad Dirección de cambio pH aumenta Conductividad aumenta Viscosidad aumenta Acidez titulable no cambia/disminuye Densidad disminuye Fuente: García, 1999 Diversas investigaciones han señalado que los altos recuentos de células somáticas son responsables de alteraciones en la composición de la leche, afectando de manera negativa la calidad y rendimiento de productos lácteos (Valera et al., 2005). Además de alterar el valor nutricional también es responsable de númerosas pérdidas en la industria de derivados lácteos, como en el caso de la elaboración de quesos, puesto que se ve aumentado el tiempo de coagulación, disminuye la estabilidad del cuajo (cuajo débil) y por ende disminuye la calidad y rendimiento del producto (Lindmark-Mansson et al., 2006). Asimismo, se produce un mayor arrastre de la caseína en el suero, una reducción en la calidad sensorial del queso y disminución de la vida útil de la leche pasteurizada (Curbelo, 2007). Respecto a las características sensoriales del queso, los primeros estudios realizados en este tema, subrayan que la leche con elevado recuento de células somáticas está asociada con defectos en el sabor en función del tipo de queso (Coulon et al., 2004). El alto recuento de células somáticas produce cambios severos sobre la composición de los sólidos no grasos y de la grasa butírica, ocasionando sabores desagradables. En el caso de la crema, ésta va a presentar un cuerpo débil, mayor separación y disminución en la vida de estantería del producto (Hernández & Bedolla, 2008). La leche con alto RCS tiene un nivel elevado de las enzimas lipasa y plasmina; el desdoblamiento de la grasa ocasionado por la acción de la enzima lipasa es lo que produce la rancidez de la leche e inhibe los cultivos iniciadores del yogurt, debido a esto, la utilización de leches con alto contenido de células somáticas en la elaboración de yogurt, afecta la calidad del producto; por el contrario el bajo recuento de células somáticas en la leche favorece el desarrollo del bacterias acido lácticas (Lindmark-Mansson et al., 2006; Lindmark et al., 2000). La plasmina ocasiona reducción de caseína en la leche y rendimiento quesero, y continúa su actividad sobre la leche aún después de almacenar, refrigerar y pasteurizar la misma (Hernández & Bedolla, 2008). La utilización de antibióticos para el tratamiento de mastitis y su presencia en la leche es un asunto de mucha importancia para la industria láctea y aun más para la salud pública, puesto que afecta la fabricación de algunos productos lácteos y pueden colocar en riesgo la salud del consumidor (Valera et al., 2005). 20 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Con menores conteos de células somáticas existe relación con la reducción de casos de mastitis clínica, mayor producción de leche, mayores porcentajes de grasa y caseína, leche menos contaminada y una mejor conservación de los productos lácteos (Monardes & Barria, 1995). Por el contrario, altos recuentos de células somáticas ocasionan disminución de la proteína y el contenido de lactosa (Feng & Zheng, 2005). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 21 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 4. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RCS 4.1. Morfología y ubicación de la glándula mamaria La morfología de la glándula mamaria y el pezón, son uno de los factores que inciden considerablemente en el recuento de células somáticas y en la presencia de mastitis clínica en vacas de leche, puesto que el tamaño y la morfología externa del canal del pezón hacen parte de los mecanismos anatómicos de resistencia individual a la mastitis. Estas son características que poseen alta heredabilidad razón por la cual es un parámetro de gran importancia en la evaluación y selección de vacas lecheras para la producción de leche y bajos recuentos de células somáticas. A pesar de que la característica de selección genética de más interés ha sido la producción de leche, la salud de la glándula mamaria y la resistencia a mastitis está cobrando importancia a nivel mundial (Riera et al., 2004). La susceptibilidad de la glándula mamaria a padecer infecciones por microorganismos patógenos está relacionada con la anatomía y estructura de la punta y canal del pezón, ya que actúan como mecanismos de defensa que evitan el paso de los agentes infecciosos al interior de la glándula mamaria (Riera et al., 2004). Factores tales como la forma, posición y longitud del pezón, están relacionados con el grado de laceración del extremo libre del pezón (Neijenhuis et al., 2001). Las características de conformación que más influyen en el estado sanitario de la glándula mamaria son: profundidad de la glándula mamaria, longitud y ubicación de los pezones con relación a la glándula y la distancia de la punta al piso (Fernández & Alenda, 2001). Cuando la glándula mamaria posee pezones separados y fuera del eje de los cuartos presenta menor probabilidad de contagio y menor RCS, a diferencia de las que poseen los pezones muy juntos. Una correcta longitud y ubicación de los pezones anteriores favorece la realización del ordeño y minimiza el riesgo de accidentes, puesto que los pezones excesivamente largos pueden dificultar el ordeño (Fernández & Alenda, 2001). Por otra parte, la profundidad de la glándula mamaria es importante porque aquellas vacas que presentan poca profundidad tienen baja producción de leche, mientras que las que tienen buena profundidad de la glándula mamaria son relativamente buenas productoras, pero susceptibles a padecer mastitis o lesiones de la glándula mamaria (Ayadi, 2003). En un estudio realizado por Riera et al. (2004), donde se estudiaron las características morfológicas de 2663 vacas Carora de dos y más lactancias y 486 vacas de primera lactancia, la evaluación describió tres diferentes formas de pezón: embudo, cilíndrico y en forma de botella; y siete categorías para la forma de la punta de los pezones: redondeado, puntiagudo, plano, prolapsado, disco, invertido y mixto. Los investigadores encontraron que los pezones en forma de embudo presentaron menor frecuencia a mastitis, los pezones en forma cilíndrica presentaron la mayor cantidad de casos de mastitis de tipo clínica y subclínica. 22 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Concordando con un estudio realizado por Hickman (1963) citado por Riera et al. (2004), “encontraron que en pezones en forma de embudo, la frecuencia de mastitis clínica y subclínica era más baja que en pezones cilíndricos y botella, lo que sería una característica favorable en las vacas Carora, debido a que la frecuencia de aparición de los pezones en embudo, es mayor que los pezones cilíndricos”. Según Bassalik (1978) citado por Riera et al. (2004), en los pezones de forma cilíndrica se produce un cierre en el flujo de leche ocasionando un incremento en el vacio de succión que finalmente lesiona el pezón, representando una causa directa de mastitis y una mayor frecuencia de la enfermedad en este tipo de pezón. Informes no publicados, señalan que la característica de pezón prolapsado, puede ser ocasionada por altas presiones de vacío de las maquinas de ordeño mecánico a las que no se les realiza mantenimiento con frecuencia. Según Chrystal (2001) citado por Riera et al. (2004), en los cuartos con pezones puntiagudos la prevalencia de mastitis era mayor que en los cuartos anteriores con pezones de puntas planas. Por otro lado los pezones con puntas invertidas tienen una mayor probabilidad de presentar mastitis, ya que son difíciles de lavar antes del ordeño ocasionando la acumulación de leche en la cavidad la cual es utilizada por las bacterias como fuente de alimento para su crecimiento. 4.2. Principales patógenos que influyen sobre los RCS Entre los factores asociados a aumento de RCS se encuentran las bacterias invasoras del canal del pezón, las cuales se pueden clasificar como ambientales o contagiosas. Cuadro 4. Clasificación de los microorganismos causantes de mastitis Contagiosos Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Actinomices (Corynebacterium) pyogenes, Mycoplasma. Ambientales E. Coli, Streptococcus uberis, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Pseudomona aeruginosa, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Pasteurella, Streptococcus faecalis, Hongos y levaduras. Oportunistas Staphylococcus coagulasa negativos, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae. Fuente: Duica, 2004 Los microorganismos contagiosos se localizan en el área de la piel de la glándula mamaria y los pezones, poseen la capacidad de diseminarse entre los pezones de una vaca o de una vaca a otra en los hatos donde no se realizan adecuadamente las prácticas de manejo del ordeño dando como resultado elevados RCS, caracterizados por la aparición de la infección en la glándula mamaria (Duica, 2004). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 23 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Los microorganismos ambientales se adquieren cuando la piel de la glándula mamaria entra en contacto con elementos contaminantes del entorno del animal, como son, estiércol, agua, suelo, establos y salas de ordeño sucias, cánulas intramamarias infectadas, etc., penetrando en la glándula mamaria si se presentan las condiciones adecuadas para su proliferación. Ocasionan un elevado recuento de células somáticas en la leche de vacas individuales o en la leche proveniente de tanque de enfriamiento, lo que indica invasión de las bacterias a la glándula mamaria (García, 2004). Los microorganismos oportunistas, se localizan en la epidermis de la glándula mamaria y de los pezones. La infección de estas bacterias se produce entre ordeños, por lo que se hace necesario realizar prácticas de desinfección para el control de los patógenos contagiosos, pero estas no son tan efectivas para el control de los microorganismos oportunistas (Duica, 2004). 4.2.1. Patógenos de tipo contagioso 4.2.1.1. Staphylococcus aureus Es el agente etiológico más importante de la mastitis contagiosa bovina, así mismo, es uno de los microorganismos patógenos responsable de daños al tejido mamario y disminuye hasta en un 15% la producción de leche por vaca infectada (Curbelo, 2007). La infección causada por S.aureus es persistente. Muestra una marcada ausencia de respuesta celular inmune tanto al staphylococo solo, como si se encuentra relacionado con otros patógenos, sin importar los hospederos ni los agentes antibacteriales empleados lo que hace difícil su control (Oviedo-Boyso et al., 2007). Según Radostits et al. (2000); Bradley (2002) citado por Kivaria, Noordhuizen & Nielen (2007), la mastitis ocasionada por Staphylococcus aureus es de tipo subclínica, la cual se manifiesta con un incremento en el recuento de células somáticas de la leche proveniente del cuarto afectado. En un estudio realizado por Haas et al. (2004) citado por Sorensen et al. (2008), estimaron casos de mastitis clínica asociada a microorganismos patógenos específicos y modelos de RCS basado en las desviaciones de una curva característica para RCS durante la lactancia. Los autores encontraron que la mastitis clínica causada por Escherichia coli se encontraba asociada con picos cortos de recuento de células somáticas, mientras que la mastitis causada por Staphylococcus aureus presentaba aumento de recuento de células somáticas durante un periodo prolongado. Según Schukken et al. (1999) citado por Zadoks et al. (2001), los recuentos crónicos de células somáticas a nivel de cuarto, se relacionan con bajos ataques bacteriales, pero ocasionan incremento en el riesgo de padecer mastitis causada por Staphylococcus aureus. Los cuartos con bajos recuentos de células somáticas no están directamente relacionados con el ritmo de crecimiento de la infección intramamaria con Streptococcus uberis o Staphylococcus aureus. 24 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira La tasa de curación para Staphylococcus aureus en cuartos que presentan un recuento de células somáticas superior a 1.000.000 es menor que en aquellos cuartos que tienen bajos recuentos de células somáticas. 4.2.1.2. Streptococcus agalactiae Según Curbelo (2007), este microorganismo se encuentra normalmente en la glándula mamaria y es el responsable de altos RCS así como de la disminución de la calidad y cantidad de los derivados de la leche. Es posible identificarlo debido a la presencia de una infección inicial de las cisternas y el sistema de conductos de la glándula mamaria, provocando irritación e inflamación subclínica de la misma. Es una bacteria que depende de la glándula mamaria para sobrevivir, vive en los conductos galactóforos, lo que permite que sea alcanzado por los antibióticos en los tratamientos intramamarios. También es muy sensible a la penicilina, por ello es posible eliminarlo de glándula mamaria a través de estrategias simples de control (Wolter et al., 2002). La mastitis causada por Streptococcus agalactiae, se caracteriza por causar cambios ligeros a moderados en la leche, mostrando aglutinaciones y coágulos que son fáciles de detectar con la prueba de Californian Mastitis Test (CMT). Los Streptococcus logran subsistir en la piel y pelo de la glándula mamaria hasta por tres semanas, después de su ingreso a la glándula mamaria, el período de incubación de este microorganismo patógeno se realiza entre uno y cuatro días y la presentación de signos de inflamación sucede entre los siguientes tres a cinco días (Duica, 2004). El exceso de residuos bacterianos origina una mayor respuesta inflamatoria, con lo cual se producen daños al tejido secretor. La gravedad de las cicatrices que se producen pueden llegar a afectar la producción de leche en las próximas lactancias (Curbelo, 2007). 4.2.2. Patógenos de tipo ambiental 4.2.2.1. Escherichia coli E. coli, es una bacteria Gram-negativa causante de mastitis ambiental. Los síntomas característicos de la inflamación de la glándula por esta bacteria son, entre otros, dolor, inflamación severa, fiebre y leche con coágulos de apariencia anormal. Esta enfermedad al ser tratada a tiempo puede ser erradicada en pocos días. Aparentemente, la gravedad de la mastitis está sujeta a la cepa bacteriana que infecte la glándula mamaria y a la velocidad con que los neutrófilos se transporten desde el flujo sanguíneo a la glándula mamaria (Oviedo-Boyso et al., 2007). Según Suriyasathaporn et al. (2000), Escherichia coli es la principal causante de la mastitis clínica en hatos con bajos recuentos de células somáticas. Con el fin de valorar el efecto de los agentes patógenos sobre el estado de gravedad de la mastitis se llevo a cabo un experimento preliminar mediante inoculación directa de la bacteria en la glándula. La prueba mostró menor FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 25 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira gravedad de mastitis para infecciones intramamarias causadas por E. coli en vacas con alto recuento de células somáticas antes de la inoculación, demostrando un grado de resistencia inducida. Sánchez (2006), mencionó que las vacas son más susceptibles de padecer la forma aguda y mortal de mastitis por E. Coli y otros tipos de mastitis, cuando presentan recuentos de células somáticas excesivamente bajos. En un estudio realizado en Holanda por De Haas, Barkema & Veerkamp (2002), en el cual fueron utilizados 274 hatos, con el fin de investigar el efecto de patógenos específicos causantes de mastitis clínica sobre la curva de lactancia y sobre el RCS; los investigadores encontraron que en lactancias donde se no se presentó ningún tipo de mastitis, el RCS fue alto después del parto, disminuyendo al mínimo transcurridos 50 días, y aumentando de manera gradual al final de la lactancia. Los efectos de la mastitis clínica sobre las curvas de lactancia para RCS difieren dependiendo de los patógenos aislados. 4.2.2.2. Streptococcus uberis Ramírez (2002), menciona que la infección clínica ocasionada por este microorganismo patógeno se manifiesta primordialmente en la lactancia temprana, a pesar que es durante el periodo seco cuando los animales son más susceptibles a presentar una infección. El patógeno puede ser diseminado a través de las heces de animales portadores de la infección. Zadoks et al. (2001), realizaron un estudio en tres hatos holandeses sobre factores de riesgo para infecciones intramamarias con Streptococcus uberis y Staphylococcus aureus bajo condiciones de campo, se tomaron muestras durante 18 meses de todos los cuartos en todas las lactancias, a intervalos de 3 semanas con conteos medios de células somáticas en tanque, los resultados encontrados mostraron que la tasa de infección con Streptococcus uberis fue más baja en vacas de primero y segundo parto que en vacas de más de dos lactancias, lo cual dependía de la fase de lactancia y la prevalencia de Streptococcus uberis o Staphylococcus aureus a nivel de hato. Bajo recuento de células somáticas en los cuartos no estuvieorn relacionados con el incremento de la tasa de infección por Streptococcus uberis o Staphylococcus aureus. 4.2.2.3. Streptococcus dysgalactiae Streptococcus dysgalactiae, induce un tipo de mastitis altamente variable, sin embargo, la mayoría de veces produce una mastitis subclínica contagiosa. Se ha observado que este microorganismo puede permanecer en el ambiente, debido a ello es considerada una especie intermedia entre los agentes promotores de mastitis contagiosa y los que ocasionan la mastitis ambiental (Duica, 2004). 26 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira El Streptococcus dysgalactiae al igual que el Streptococcus uberis se encuentra en la piel de la vaca y se transmiten del medio ambiente al pezón, en especial durante los ordeños. Como forman parte del medio ambiente no se considera viable su erradicación de los hatos (Wattiaux, sf). 4.3. Prácticas de manejo Los factores que afectan con mayor intensidad la variación en los RCS entre hatos con diferentes niveles de células somáticas son, entre otros, las prácticas de manejo tales como: desinfección y secado de los pezones antes y después del ordeño, así como la duración del tratamiento de mastitis clínica. Las conocidas rutinas de “pre y pos diping” generan evidentes beneficios como medidas de control (Curbelo, 2007). Es necesario vigilar el número de casos positivos a mastitis en el sistema de producción lechero y la susceptibilidad de la vaca (fase de lactancia, edad, genética, lesiones en el pezón, factores inmunitarios, entre otros). 4.3.1. Correcta realización del Ordeño Según Cotrino (2001), Saran & Chaffer (2000) citados por Méndez & Osuna (2007), uno de los elementos esenciales para controlar la mastitis es el personal encargado del ordeño. Es de vital importancia la capacitación de los operarios que efectúan el ordeño en todas las prácticas concernientes al cuidado de los animales, manejo adecuado de la leche, aseo y esterilización de los equipos y en general, todos los aspectos que garanticen la salubridad de la glándula mamaria asociado con una excelente calidad microbiológica. En un estudio realizado por Rodríguez (2006), se reportó que las vacas que son ordeñadas mecánicamente tienen un mayor porcentaje de casos de mastitis clínica y una elevada proporción de cuartos lesionados por vaca, tal vez, por el mayor número de factores que facilitan la transmisión horizontal de la enfermedad (tiempos de ordeño, contactos con pezoneras, salas de espera, velocidad de ordeño, entre otros). Entre las prácticas de manejo que se deben realizar en un hato lechero se encuentra el orden de ordeño, el cual se debe realizar de tal manera que las vacas sanas se ordeñen al inicio, luego las vacas que presenten un número elevado de células somáticas, enseguida las vacas con problemas de mastitis. Indiscutiblemente los animales que estén siendo tratados con antibióticos deben ser ordeñados al final (Wolter et al., 2002). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 27 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Figura 2. Fuentes de infección para una vaca sana. Fuente: Duica, 2004 4.3.2. Equipo de Ordeño Entre los factores que inciden en el RCS se encuentra el funcionamiento apropiado del equipo de ordeño, el cual debe garantizar un ordeño eficiente, ocasionando el menor daño posible a los pezones y reducir el contagio con agentes patógenos responsables de mastitis y utensilios que se manipulen en esta práctica. El mal estado o diseño de las instalaciones puede causar graves lesiones a la glándula mamaria, lo que se traduce en un alto recuento de células somáticas debido a condiciones de mal manejo (Hernández & Bedolla, 2008). Según Jones (1998) citado por Curbelo (2007), las disminuciones en la presión de vacío de la línea de leche pueden causar un incremento en la tasa de infección de mastitis. El movimiento de gotas de leche por las fluctuaciones de vacío en el colector de la leche es causante de una infección de los cuartos sanos con las bacterias provenientes de la leche contaminada. Cuando las pezoneras se desgastan deben ser sustituidas porque pueden constituirse en una fuente contaminante de mastitis entre vacas y entre ordeños. 4.3.3. Desinfección de pezones Para impedir el contagio de mastitis la práctica que más se utiliza y surte mayor efecto es la desinfección de pezones con sellador, que funciona como una barrera protectora creada para minimizar el grado de exposición a contaminación con bacterias ambientales o a contagios durante y entre ordeños. El sellador mientras se encuentre húmedo tiene un efecto protector 28 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira de amplio espectro sobre el pezón. Según Ruegg et al. (2000) citado por Curbelo (2007), la aplicación por rocío es conveniente ya que evita la contaminación del sellador con la leche pero no es la forma más eficiente, por lo tanto se recomienda la aplicación del sellador por inmersión. 4.3.4. Tratamiento La infusión intramamaria de antibióticos es una práctica que de ser mal utilizada puede causar una mayor contaminación e inclusión de patógenos ajenos a la infección que está siendo tratada en el interior del pezón. En investigaciones realizadas por Khaitsa et al. (1998) citados por Curbelo (2007), se encontró que en hatos donde los animales no recibían ningún tratamiento con antibióticos para mastitis, ni se les realizaba terapias selectivas de vacas horras, tuvieron una mayor presencia de mastitis. Aunque la fase de infección es el factor de mayor incidencia en el elevado RCS en la leche, el número de vacas infectadas con mastitis afecta de manera significativa la cifra de células somáticas en el tanque (Alvarado, 2006). 4.3.5. Alojamiento Por otra parte, se ha señalado que el ambiente del alojamiento tiene una gran influencia en la salud de la glándula mamaria; no obstante, actualmente no se ha podido demostrar cual es el sistema apropiado de alojamiento para reducir la incidencia de mastitis. Si bien, algunos autores han encontrado que la mastitis es más común en sistemas de estabulación que en sistemas de pastoreo al aire libre, otras investigaciones han indicado que no existe una relación entre el sistema de alojamiento y la incidencia de mastitis. La cama a menudo proporciona la fuente mas adecuada para el desarrollo de infecciones porque la glándula mamaria tiene contacto directo con agentes patógenos (Hospido & Sonesson, 2005). 4.4. Nutrición La mayor influencia en la salud de la glándula mamaria en la vaca y por ende en la calidad de leche la tiene la alimentación (tipo, calidad y cantidad del mismo, así como frecuencia del suministro), es así, como una mala nutrición debida a la deficiencia en los aportes de energía y proteína, debilita los mecanismos de defensa de la glándula mamaria. De la misma manera, la escasez de alimento y agua ocasiona disminuciones en la producción de leche y aumentos proporcionales en los RCS (Curbelo, 2007). En vacas viejas cebadas en ordeño y en vacas secas que presentan una deficiencia de energía, en el pico de la lactancia o cuando no se les suministra una cantidad adecuada de proteína vitaminas o minerales, muestran una menor respuesta del sistema de defensa de la glándula mamaria (Wolter et al., 2002). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 29 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Rajala-Schultz & Saville (2003) citado por Pedraza et al. (2006), reportaron que existía una asociación negativa entre el recuento de células somáticas y el contenido Nitrógeno Ureico en la leche (MUN) en hatos de alta producción lechera, mientras que en los de baja producción no había asociación. El déficit de Selenio, causa en el organismo una mayor exposición a contraer mastitis la cual representa alto costo en la producción de leche. El Selenio es de suma importancia ya que controla radicales libres, mejora la actividad celular fagocítica, la actividad antibacteriana no inespecífica en suero de leche y posee una alta capacidad oxido-reductora que protege la glándula mamaria. Al suplementar Selenio y vitamina E, se disminuye el riesgo de padecer mastitis clínica. El suministro de Selenio en la dieta de vacas en días próximos al parto es de gran efectividad para tratar y prevenir la mastitis y disminuir el RCS en la leche (Perilla, 2006). En una investigación realizada por Moyo et al. (2005) citado por Heinrichs, Costello & Jones (2009), donde se suplementó la dieta con vitamina E, se observó que dicha vitamina está asociada un 14% a la reducción del riesgo de infección intramamaria, así como, bajos recuentos celulares y una disminución del riesgo de sufrir mastitis clínica en un 30%. El alfa tocoferol del plasma ha demostrado ser importante en la disminución de la incidencia de nuevas infecciones intramamarias. El zinc esta relacionado con la reducción de células somáticas en algunos hatos. Es un elemento fundamental para el sostenimiento de la salud y la integridad del tejido mamario, por su función en la división celular y síntesis de proteína, es indispensable para la formación de cisteína en la queratina. El canal del pezón posee una capa de queratina que funciona como red para las bacterias impidiendo su penetración al interior de la glándula mamaria razón por la cual el zinc es empleado en la disminución del RCS (Andersson & León 2000). El cobre es otro mineral asociado con el funcionamiento del sistema inmunológico, tiene funciones antioxidantes y puede reducir la mastitis clínica en novillas. Es un componente de la ceruloplasmina, que facilita la absorción y el transporte del hierro. Además es considerado una parte importante de la enzima dismutasa superoxidasa, cuya función es defender las células de los efectos tóxicos de los metabolitos de oxígeno producidos durante la fagocitosis. Ambas funciones del Cu están relacionadas con la disminución de la incidencia de infección intramamaria en el peri parto, especialmente cuando se trata de mastitis causada por coliformes (Heinrichs, Costello & Jones, 2009). En un estudio llevado a cabo en Estados Unidos encontraron que vacas con bajos niveles de Cobre que recibieron un suplemento entre 40 y 80 ppm de Cobre quelatado lograron recuentos de células somáticas más bajos en el calostro que las vacas que recibieron un suplemento de entre 0 y 20 ppm del mismo productos (565.000 y 379.000 vs 1.746.000 y 1.628.000, respectivamente). Este estudio muestra que las vacas poseen una mayor susceptibilidad a padecer mastitis si no tienen un nivel adecuado de Cobre al momento del parto (Andersson & León, 2000), sin embargo, no se han 30 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira publicado estudios donde se demuestre la eficiencia de la suplementación con Cu sobre nuevos tipos de infección intramamaria o RCS (Heinrichs, Costello & Jones, 2009). La vitamina A y los beta carotenos están relacionados con la inmunidad a mastitis, además ayudan a mantener la salud de las mucosas. No obstante, la suplementación tanto con vitamina A como con beta caroteno ha mostrado resultados inconsistentes. Estos nutrientes son esenciales al conservar la salud del tejido epitelial, además ocupan un papel de suma importancia generando mayor resistencia a la entrada de patógenos (Heinrichs, Costello & Jones, 2009). Los beta carotenos además tiene propiedades antioxidantes reduciendo la formación de superóxido dentro del fagocito. Dicha función es importante porque la fagocitosis constituye un mecanismo primario utilizado por las células fagocíticas para eliminar la bacteria. Al parecer, tanto la vitamina A como los carotenos tienen efectos estimulantes de la inmunidad celular. Las vacas que tienen mayor puntuación en el California Mastitis Test (CMT) presentan bajas concentraciones de vitamina A y beta caroteno en el plasma, en comparación con las vacas que muestran bajas puntuaciones de CMT y que no presentan mastitis (Heinrichs, Costello & Jones, 2009). El manganeso es un mineral de gran importancia en la respuesta inmunológica ya que disminuye la formación de radicales libres por superóxidos, los cuales alteran la formación de membranas celulares, ocasionándole daños. Una investigación realizada en la isla sur de Nueva Zelanda, por Griffith, 2000; muestra que vacas que fueron alimentadas con una combinación de minerales Zinc, Manganeso, Cobre y Cobalto quelatados tuvieron poca incidencia de mastitis y bajos RCS en la leche (Andersson & León, 2000). 4.5. Estrés asociado a las condiciones climáticas Algunos factores estresantes de mayor importancia son: densidad de vacas en el establo, cambio constante del personal, mal manejo de las pezuñas, pérdida de adaptación (Wolter et al., 2002). La inflamación de la glándula mamaria en vacas afectadas con mastitis bacterial se incrementa si estos animales son expuestos a condiciones estresantes como largos desplazamientos hasta la sala de ordeño o en busca de alimento (Severin, 2008). Según Carrol (1977) citado por Alvarado (2006), en el estudio sobre la fisiología climática en el ganado bovino, los efectos que tiene el estrés calórico varían en relación a la raza del animal ya que algunos poseen la capacidad de adaptarse muy bien a condiciones climáticas extremas a diferencia de otros que debido a su raza no lo pueden hacer. El estrés calórico es responsable de la disminución en la producción lechera, afectando de esta manera el rendimiento productivo de las vacas Al mismo tiempo, Linn (2001) citado por Alvarado (2006), plantea que cualquier tipo de estrés a largo plazo puede resultar dañino y lesionar el sistema inmunológico de la vaca. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 31 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Según Linn (2001) citado por Alvarado (2006), el calor que se produce en áreas húmedas, es el responsable del aumento en el número de bacterias presentes en el estiércol. Por esta razón las vacas que se encuentran en establos sucios donde su glándula mamaria está en contacto directo con el estiércol son más susceptibles a padecer mastitis. Mahendra et al. (2001) citados por Alvarado (2006), afirman que el recuento de células somáticas se encuentra gravemente afectado por la estación del año; siendo más bajo en la época de frio (1.10 x 105 células/ml) y en clima caliente seco (1.11 x 105 células/ml) respecto a la época de clima caliente húmedo (2.14 x 105 células/ml). Los RCS son más elevados en climas templados durante los meses de verano, razón por la cual existe mayor incidencia de mastitis clínica. 4.6. Edad y etapa de lactancia Según Harmon (1994); Valde et al. (2004) citados por Curbelo (2007), los RCS se incrementan con la etapa de lactancia y la edad del animal. En estudios realizados por Sheldrake et al. (1983) citados por Curbelo (2007), confirman que la leche de cuartos no infectados con mastitis presenta aumentos en los RCS a medida que aumenta el número de lactancias. Según Carrión (2001) citado por Hernández & Bedolla (2008), cuando la vaca se encuentra en período seco o cuando éste no se realiza adecuadamente es probable que la primera semana después del parto se exhiban conteos celulares altos. Según Blowey & Edmondson (1995) citados por Hernández & Bedolla (2008), en el ordeño de la tarde los recuentos celulares somáticos tienden a ser ligeramente más elevados que en el ordeño de la mañana. Esto se debe al intervalo más corto entre ordeños y a la menor producción de leche que se convierte en un efecto de concentración. Las vacas de final de lactancia y que se les realizan ordeños interrumpidos tienen altos RCS, en ausencia de infección subclínica. Un estudio realizado por Fox (2009), indica que los recuentos iniciales de células somáticas en novillas son bajos, la gravedad con que se presenta la mastitis subclínica y el grado de afección de la glándula mamaria es menor en novillas que en vacas multíparas. Igualmente, en un trabajo realizado por De Vliegher et al. (2004) citado por Fox (2009), demostraron que los recuentos de células somáticas durante el peri parto son bajos, lo cual indica una baja incidencia de mastitis subclínica, que se incrementa al parto y disminuye a medida que avanzan los días de lactancia. La salud de la glándula mamaria durante toda la lactancia depende en gran parte de su estado en el primer mes después del parto, ya que es en este periodo donde se presenta con mayor frecuencia la mastitis clínica. Las vacas que presentan mastitis clínica y altos recuentos de células somáticas durante su primera lactancia, tienen alto riesgo que ambos problemas sean recurrentes en las próximas lactancias (Nyman et al., 2009). 32 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 4.7. Efecto del número de vacas en ordeño sobre el Recuento de Células Somáticas Los RCS de una vaca individual son la mejor forma de identificar las vacas con recuentos altos de células somáticas. Estos son calculados a partir de la toma de una muestra de leche de todos cuartos. La suma de los resultados de los cuartos individuales corresponde a los recuentos de células somáticas de toda la glándula mamaria. La comparación a nivel de cuartos es una medida ampliamente utilizada que permite conocer el estado de salubridad de la glándula mamaria y la calidad de la leche que produce (Hernández & Bedolla, 2008). Cuadro 5. Ejemplo de un conteo de células somáticas por cuarto. Cuarto Delantero derecho Trasero derecho Células/ml de leche 45,000 160,000* Delantero izquierdo 38,000 Trasero izquierdo 53,000 Fuente: Hernández & Bedolla, 2008 *cuarto susceptible de mastitis Es de gran importancia económica que los tratamientos para la mastitis clínica disminuyan el número de agentes patógenos, puesto que la infección de la glándula mamaria es el factor más relevante que incide en el recuento de células somáticas de la leche. Entre mayor sea el número de vacas con mastitis, mayor será el conteo de células somáticas presentes en la leche del tanque. La evaluación periódica del conteo de células somáticas que se realiza de manera individual, permite conocer el estado de salud de la glándula mamaria de cada uno de los animales del hato (Hernández & Bedolla, 2008). La reducción del número de bacterias tiene gran incidencia sobre las decisiones de descarte de vacas individuales a temprana edad y sobre la difusión de la mastitis en el todo el hato (Galicia de León, 2004). El análisis del RCS individual en las vacas permite conocer la naturaleza de la infección. Al momento de tomar alguna medida se requiere del análisis ,por lo menos, de tres muestras sucesivas; además es conveniente que las muestras sean analizadas periódicamente mínimo una vez al mes, así mismo, se hace necesario revisar los RCS de los últimos tres meses junto con el promedio de los recuentos de la lactancia. El aumento de células a nivel de hato, se incrementa por el mayor índice de vacas con altos recuentos individuales (Hernández & Bedolla, 2008). Con el propósito de obtener el máximo beneficio económico, los animales deben ser muestreados con frecuencia a fin de estudiar los recuentos promedios y no los resultados individuales. El resultado de un solo recuento celular alto es un indicador del actual estado de infección en que se puede encontrar un hato. No obstante la realización de exámenes posteriores, puede reportar bajos RCS (Hernández & Bedolla, 2008). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 33 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Los análisis de recuento de células somáticas a nivel individual, la prueba de mastitis de California y el recuento de células somáticas en tanque son aprovechados para diagnosticar en un hato lechero si hay o no mastitis. La prueba CMT identifica las vacas afectadas con mastitis subclínica, el RCS nos permite saber el grado de infección de la glándula mamaria a través de la cantidad de células somáticas presentes y el recuento de células somáticas en tanque (BTSCC, por sus siglas en inglés) permite conocer el estado de mastitis de un hato para ejercer control sobre el problema, el grado de mastitis subclínica es uno de los parámetros para medir la calidad de la leche (Cerón, Agudelo & Maldonado, 2007). Son muchos los hatos donde se utiliza la prueba de CMT como seguimiento regular de los animales en la detección de mastitis subclínicas y permite conocer el grado de infección de cada uno de los cuartos de cada una de las vacas, de manera individual. La prueba de BTSCC, se utiliza para valorar el estado de sanidad de todo hato, esta prueba es más eficiente que el CMT y para realizar una continua inspección de las empresas lecheras (Cerón, Agudelo & Maldonado, 2007). El RCS en el tanque permite precisar los mínimos valores de células somáticas que son permitidos para la leche de tanque, teniendo en cuenta que el porcentaje de vacas que presentan cuartos positivos al CMT es bajo, lo que concuerda con bajos recuentos de células somáticas. Estos valores son de suma importancia en cuanto al control de la calidad de la leche y del cumplimiento de los requisitos para su comercialización. El recuento de células somáticas en tanque es una herramienta de mucha utilidad que permite conocer el porcentaje de animales que están infectados con mastitis subclínica en una finca (Cerón, Agudelo & Maldonado, 2007). En varios estudios realizados a nivel individual en vacas se ha reportado que el aumento de la mastitis está condicionado en gran parte por el aumento en el recuento de células somáticas ya que éste es un indicador de la enfermedad. Así mismo, los valores de recuentos de células somáticas individuales corresponden al conteo de células de la totalidad de la glándula mamaria, sin embargo, alguno de los cuartos puede presentar altos o bajos recuentos de células somáticas, alterando el promedio esperado para el animal (Peeler et al., 2003). 34 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 5. ESCORE DE CÉLULAS SOMÁTICAS (ECS) Debido a que el RCS no posee una distribución normal, la transformación logarítmica del escore lineal de células somáticas homogeniza las varianzas. La presentación de los datos en una escala numérica simple permite entenderlos con más facilidad, además relaciona directamente las perdidas en la producción de leche ocasionadas por la mastitis con el escore lineal. El escore de células somáticas clasifica los valores de RCS en 10 categorías, es una técnica de gran importancia porque se encuentra estrechamente relacionada con la producción de leche. Por cada punto que aumenta el ECS la producción de leche disminuye en más o menos 200 litros, además es una técnica que tiene mayor precisión que el RCS para detectar la presencia de una infección intramamaria (Jiménez, 2008). Cuadro 6. Relación entre el Escore de Células Somáticas (ECS) y el Recuento de Células Somáticas (RCS). ECS Punto medio RCS (1000's/ml) Rango 0 12.5 0- 17 1 25 18- 34 2 50 35- 70 3 100 71- 140 4 200 141- 282 5 400 283- 565 6 800 566-1.130 7 1600 1.131-2.262 8 3200 2.263-4.525 9 6400 4.526 Fuente: NMC, 1996 La evaluación del estado de los hatos es más confiable si se realiza con el ECS puesto que los altos RCS alteran este valor para el hato en general, cuando en la evaluación se incluyen vacas individuales. “El ECS se ajusta a modelos más simétricos y conocidos como la campana de Gauss a diferencia de la distribución del RCS que es muy sesgada” (Jiménez, 2008). Concordando con un estudio realizado por Carneiro De Paula et al. (2004), con el objetivo de estimar los componentes de variación para el recuento (RCS), el escore (ECS) y el logaritmo del recuento de células somáticas (L2CS) y comparar las tres expresiones del RCS (recuento, escore y logaritmo) para leche de tanque; reportaron que los coeficientes de variación y desviación estándar son menores para ECS y L2CS con respecto al RCS, y los coeficientes de determinación de l ECS Y L2CS son mayores. Además, los autores indicaron que el uso del ECS y L2CS son más precisos que los RCS en los análisis estadísticos. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 35 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira En un estudio realizado por Carneiro De Paula et al. (2004), en el cual fueron analizadas 257.540 muestras de leche de tanque, que provenían de rebaños de 18 industrias lácteas, asociadas al Programa de Análisis de Rebaños Lecheros de Paraná (Brasil), durante el período de enero de 1999 a noviembre del 2001, con el objetivo de evaluar los factores que influencian los conteos de células somáticas en muestras de leche de tanque y analizar su distribución en las categorías del escore de células somáticas. En el estudio se incluyó en el modelo los efectos micro-región, efecto de año y mes del análisis, efecto de edad de la muestra y efecto de rebaño los cuales fueron significativos sobre el conteo de células somáticas encontrando gran variación en las medias de RCS en leche de tanque entre micro-regiones, para el efecto mes de análisis, el mayor valor se obtuvo en enero y el menor valor en septiembre concordando con lo reportado en otros estudios donde se observaron mayores RCS en los meses de verano; en cuanto al efecto año de análisis, el mayor promedio para CCS se observó en el año 2001. Los autores indican que el nivel de la producción y el tamaño del rebaño afectan los conteos de células somáticas, de las muestras analizadas el 64,6% se encontraron con un escore de cinco o mayor de cinco. Pohl, Carneiro De Paula & Cotarelli De Andrade (2004), realizaron un estudio similar en el cual se obtuvieron resultados semejantes. Fueron utilizadas 262.973 muestras de leche de tanque procedentes de rebaños inscritos en el Programa de Análisis de Rebaños Lecheros de Paraná y encontraron que los factores rebaño absorbido, micro-región, año de análisis, mes de análisis y edad de la muestra incluidos en el modelo, influencian de manera significativa el escore de células somáticas, en lo que respecta a la distribución de las muestras encontraron que el 80,5% de las muestras analizadas presentaron un escore lineal de cuatro, cinco y seis lo que indica un alto nivel de infección en los rebaños analizados que afecta la calidad del producto y la rentabilidad obtenida en el mismo. Berry et al. (2007), realizaron un estudio con el fin de determinar la relación existente entre los parámetros condición corporal, peso corporal y salud de la glándula mamaria como indicadores del ECS y mastitis clínica, utilizaron datos de 2635 lactancias de 523 vacas de la raza Hostein-Friesian y 374 Jersey en pastoreo. Los autores encontraron que existe una relación entre el incremento en la condición corporal y un bajo escore de células somáticas en vacas primerizas y de segundo parto, así como un elevado ECS en vacas de tercer parto. El peso corporal está estrechamente relacionado con el ECS, aunque el efecto es más pronunciado en vacas Jersey que en Holstein-Friesians. Al Incrementar el peso corporal y perder peso en la lactancia temprana disminuye el ECS, existe además una menor probabilidad de obtener un alto RCS cuando se realizan muestreos diarios. Diversas variables de peso corporal se relacionan con una mayor probabilidad de padecer mastitis clínica. Sin embargo, la mayoría de las asociaciones con salud de glándula mamaria carecen de trascendencia biológica dentro de los alcances de condición corporal y peso corporal (Berry et al., 2007). 36 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Los factores más relevantes que afectan los promedios de ECS a través de la lactancia son: raza, época del año y el parto. Los cuales están relacionados con la reproducción y la condición corporal, las vacas jóvenes en periodo de lactancia media con buena condición corporal presentan un bajo ECS a diferencia de las vacas viejas (Berry et al., 2007). Así mismo, indican que si el ECS o la mastitis clínica son utilizados como indicadores de salud de la glándula mamaria o del estado inmunológico, no existe ninguna relación entre la condición corporal y la capacidad para combatir un ataque bacteriano. El escore de células somáticas es afectado durante el período de lactancia por la condición corporal y peso corporal según el estado reproductivo (fase de la gestación), lo cual depende de la raza del animal y del intervalo entre partos. Durante la lactancia temprana no hay una asociación importante entre el peso corporal y un ECS alto. Con respecto a los altos ECS, las vacas jersey al parecer son más resistentes que las Holstein Friesian, lo cual puede estar relacionado con la resistencia individual de los animales a la mastitis clínica, tal vez, por la homeostasis, menor producción y mayor resistencia anatómica de la raza Jersey. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 37 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 6. TÉCNICAS DE LECTURA PARA EL RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS EN LECHE Existen diferentes procedimientos para realizar el conteo de células somáticas: a través de métodos físicos, químicos o biológicos, los cuales difieren en precisión, confiabilidad, practicidad y costo. Dichas técnicas constituyen un importante indicador directo de la salud de la glándula mamaria e indirecto de la calidad e higiene de la leche, es también útil en los programas de control de mastitis. Entre las pruebas más utilizadas se encuentran: 6.1. Pruebas químicas Entre ellas se encuentran: conductividad eléctrica de la leche, papel indicador de mastitis y la prueba de Whiteside. 6.1.1. Conductividad eléctrica de la leche Se basa en el aumento de conductividad eléctrica de la secreción de láctea debido a que en la leche producida por vacas con mastitis se presenta un aumento de la permeabilidad de los capilares sanguíneos, se destruyen las uniones celulares y los sistemas de transporte iónico ocasionando un alto contenido electrolítico fundamentalmente iones de sodio y cloro como resultado de la lesión en el tejido glandular. Sin embargo, la prueba tiene limitaciones que restringen su uso en vacas de alta producción mantenidas en pequeños establos, o en animales con dietas con sales especiales (Moraleda, 2005). La técnica se ha desarrollado como un método para monitorear el estado de la mastitis en la vaca y hace parte de ciertos equipos de ordeño computarizados, asimismo, se usan contadores portátiles, permitiendo el monitoreo individual a nivel de cuarto. Esta prueba es muy variable y hasta cierto punto subjetiva de baja confiabilidad, pues en ocasiones genera un elevado número de falsos positivos o de falsos negativos por lo que no es recomendable como prueba única (Moraleda, 2005). 6.1.2. Papel indicador de mastitis Este método consiste en hacer caer algunas gotas de leche o impregnar la punta del pezón sobre un papel filtro. Si se presenta una coloración correspondiente a un pH igual o superior a 7 se considera una leche sospechosa de estar infectada. La prueba detecta aproximadamente el 50% de las leches contaminadas, pero presenta alta variabilidad por el manejo del papel y las condiciones ambientales (Moraleda, 2005). 38 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 6.1.3. Prueba de Whiteside Consiste en mezclar la leche con una solución de NaOH al 4% lo que causa una gelificación de la leche que a su vez forma grumos visibles. A mayor número de células somáticas se presenta mayor formación de grumos. Es una prueba subjetiva e imprecisa, porque no se ha demostrado plenamente que las células somáticas por si solas ocasionen la gelificación (Moraleda, 2005). 6.2. Pruebas biológicas Dentro de estas se encuentran: el California Mastitis Test, prueba de Catalasa, prueba de Wisconsin, prueba de CAMP y el monitoreo de células somáticas, así como el diagnóstico bacteriológico por los métodos de aislamiento, cultivo, tinción, bioquímica e identificación específica de patógenos (Moraleda, 2005). 6.2.1. California Mastitis Test (CMT) Es una prueba sencilla de bajo costo, muy útil para detectar infecciones subclínicas (Gamarra & Salazar, 2001). Permite determinar el grado de afección en los cuartos individuales de vacas lecheras y detectar más de un 75% casos de mastitis subclínica. Sin embargo, no permite establecer el efecto en la producción y composición de la leche puesto que no suministra un resultado numérico, sino un indicio subjetivo de si el recuento es alto o bajo. El reactivo empleado es el lauril sulfato de sodio al 3%, el cual posee un tenso-activo que reduce la tensión superficial de los leucocitos presentes en la leche mastítica, provocando una ruptura de los leucocitos liberando el ADN, que al combinarse con agentes proteicos de la leche forma una gelatina (Moraleda, 2005). Cuando existe un alto número de células en la muestra de leche se libera una mayor concentración de ADN y por ende, se desarrolla una sustancia gelatinosa, lo que representa un grado elevado de inflamación. Esta prueba permite evaluar cualitativamente cada cuarto individual, al mezclar el reactivo (púrpura de bromocresol) con igual cantidad de leche en una paleta con cuatro pozos independientes y determinar la respuesta inflamatoria con base en la viscosidad del gel que se forma (Hernández & Bedolla, 2008). La prueba puede presentar falsos positivos en vacas con menos de ocho días posparto o con lactancias que superen los diez meses. En estos casos, la reacción de viscosidad es análoga en todos los cuartos, producto del aumento de las células epiteliales presentes en la leche, condiciones que fisiológicamente se dan en estos dos períodos de lactancia (Moraleda, 2005). El CMT es una prueba de campo simple y de rápida lectura para detectar la presencia o no de mastitis, mediante la estimación del número de células somáticas presentes en la leche. Esta técnica se relaciona directamente con el RCS. Por ejemplo, para un resultado negativo del CMT el número de células FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 39 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira somáticas en leche le corresponde valores de 0 - 200.000 (células por ml) y para el nivel 4 de mastitis clínica del CMT el número de células somáticas esta por encima de 5.000.000 (células/ml), como se muestra en el cuadro 7. Los altos recuentos de células somáticas son responsables de númerosas pérdidas económicas a causa de la disminución en la producción lechera, además afectan el potencial de industrialización de la leche y por ende el precio de comercialización de la misma. Cuadro 7. Relación entre el CMT y el RCS según el grado de reacción. Grado Tipo de Relación Células / ml Negativo Mezcla se mantiene líquida < 200.000 Trazas Ligera viscosidad 200.000 - 500.000 1 Mezcla viscosa no adherida al fondo 400.000 -1.500.000 2 Mezcla viscosa que se adhiere al fondo 800.000 - 5.000.000 3 Mezcla muy viscosa fuertemente adherida que forma un solo grumo. >5.000.000 Fuente: Cotrino, 2004 6.2.2. Prueba de Wisconsin Es utilizada para evaluar el contenido de células somáticas en muestras de leche fresca o leche de tanques de enfriamiento, igualmente para muestras de vacas individuales. Se emplea una solución parecida a la que se utiliza en la prueba de California, no obstante, a diferencia de esta última, en que los resultados se calculan cuantitativamente dependiendo de la viscosidad, en la prueba de Wisconsin, se emplea una tarjeta lectora con diferentes grados prefijados para una puntuación fija. Los hatos con baja puntuación (entre 3 y 12) se consideran en buenas condiciones o regulares, mientras que los hatos con puntuaciones altas (>12) requieren atención inmediata. El total de la puntuación es de 35 con 2.280 células somáticas/ml (Hernández & Bedolla, 2008). 6.3. Métodos de conteo electrónico celular Actualmente los equipos electrónicos son utilizados universalmente, más aún, en laboratorios de control lechero donde se procesan cientos de muestras o en los dedicados al diagnóstico o investigación de la mastitis, en ellos, se utilizan aparatos de recuentos celulares como el Fossomatic (Foss Electric, Dinamarca) y el Counter Coulter (Coulter, Inglaterra) (Hernández & Bedolla, 2008). 6.3.1. Fossomatic Este equipo es un contador específico de ADN basado en un principio óptico de tinción fluorométrica del material nuclear; se utiliza para determinar el 40 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira contenido de ADN que está estrechamente relacionado con el número de células presentes en la muestra de leche inicial. La muestra consiste en la filtración de una solución de leche mezclada con detergente (Triton X-100 EDTA) que pasa a través de una membrana fina. El fundamento de la prueba consiste en que el bromuro de etidio penetra al interior de la célula creando un complejo fluorescente con el ADN nuclear, con lo cual, cada célula emite un impulso eléctrico que se amplifica y se registra en instrumentos computacionales (Hernández & Bedolla, 2008). 6.3.2. Cell Counter Este equipo cuenta el número de impulsos eléctricos que resultan de las partículas que atraviesan dos electrodos pareados. En este caso las partículas son células de un diámetro determinado, pero en el rango de recuento ingresarían otras partículas, aumentando levemente el conteo en comparación con el Fossomatic (Hernández & Bedolla, 2008). 6.3.3. Test DCC (DeLaval Direct Cell Counter) Es un equipo portátil que posee un medidor óptico de células somáticas de la leche, permite evaluar el contenido de células somáticas a nivel de vaca y la leche del tanque de acopio (Bedolla, Castañeda & Wolter, 2007). Es utilizado cuando se requiere hacer un RCS rápido en campo pues permite ejecutar en menos de 1 minuto un conteo en un rango entre 10.000 a 40.000.000 de cél/mL (Moraleda, 2005). Consta de una cámara digital que utiliza casettes los cuales absorben pequeñas cantidades de leche mezclándose al interior con reactivos que llegan al núcleo de las células somáticas, lo cual permite su conteo individual, mediante un sensor de fluorescencia. En la pantalla del equipo aparece la lectura del número de células somáticas en la leche, su principio es equivalente al utilizado por el equipo Foss y proporciona datos puntuales sobre el estado de salud de la glándula mamaria (Bedolla, Castañeda & Wolter, 2007). 6.3.4. Citometría de flujo Es un método que requiere un alto número de células para realizar un estudio individual, de este modo permite obtener información acerca de distintas poblaciones celulares. Esta técnica es de rápida lectura y facilita el análisis de un elevado número de células (10.000 a 50.000 para cada anticuerpo monoclonal), suministra un registro computarizado de los resultados (Moraleda, 2005). Los citómetros de flujo analizan células en suspensión que interfieren en forma individual con una fuente de luz. Al encontrarse cada célula con la luz láser se presentan señales luminosas que permiten distinguir poblaciones celulares dentro de la muestra analizada, bien sea por su tamaño relativo, por sus granulaciones o por su reactividad con fluorocromos, previa incubaFACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 41 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira ción con distintos anticuerpos monoclonales. De otro lado, la citometría de flujo posibilita la cuantificación de ADN y la determinación de la actividad de diversas poblaciones celulares. En diferentes investigaciones de poblaciones celulares, involucradas en el proceso inflamatorio de la glándula mamaria, la técnica con citometría de flujo ha sido ampliamente utilizada (Moraleda, 2005). Figura 3. Esquema del Citómetro de flujo. Fuente: Moraleda, 2005 42 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 7. PÉRDIDAS ECONÓMICAS POR ALTOS RCS EN LECHE La mastitis bovina o inflamación de la glándula mamaria es la enfermedad más costosa, responsable de grandes pérdidas económicas en los hatos lecheros del mundo, debido a que ocasiona disminución en la producción, de la calidad de la leche y en consecuencia, reduce su precio e incrementa los costos de producción del hato. Estas pérdidas se hacen más evidentes cuando se corre con gastos en tratamientos veterinarios destinados a la prevención, tratamiento y control de la enfermedad y ocasiona descartes tempranos de animales con buen potencial genético para producción lechera. Ocupa el primer lugar en las pérdidas de la industria lechera de los Estados Unidos porque constituye el 70% de los gastos de los hatos lecheros en este país (Bedolla & Ponce, 2008). La presencia del Staphylococcus ocasiona incremento en el conteo de células somáticas, afectando la calidad de la leche para su comercialización (Ramírez, 2002). Las principales pérdidas económicas ocasionadas por la mastitis se clasifican en siete categorías: disminución de la producción lechera, descarte de leche, altos costos de reposición de animales, dinero invertido en medicamentos, instalaciones y mano de obra adicionales para el tratamiento de vacas infectadas con mastitis, honorarios del veterinario, pérdidas de unidades de producción (vacas infectadas) y de la genética de los animales (Bautista & Uribe, 200). A partir del conteo de células somáticas se pueden calcular las pérdidas económicas por disminución de la producción de lechera. Además, a los costos de la mastitis se deben incluir la leche descartada, y para casos agudos las pérdidas de cuartos afectados o de la totalidad de los animales. A largo plazo se presentan pérdidas por disminución en las posibilidades de selección de animales para reemplazo atribuidos a los descartes forzados. En un estudio realizado por Carrión (2002) citado por Bedolla & Ponce de León (2008), en hatos lecheros de los estados de Michoacán y Jalisco, Méjico, para 18 vacas en producción las pérdidas económicas a causa mastitis subclínica por la disminución en la producción de lechera, para un promedio de producción de 7.000 Kg. de leche vaca/ año y 1.000.000 células / ml las pérdidas en producción son de 1260 kg de leche/vaca, para 500.000 células /ml las pérdidas en producción son de 420 Kg. de leche. En los Estados Unidos es muy útil la herramienta Dairy Herd Improvement (DHI) para realizar el seguimiento y evaluación de los programas de control de mastitis de hatos lecheros y de muestras de leche tomadas de los tanques de enfriamiento. Cuando el valor aumenta se entiende que hay un incremento en la cantidad de animales afectados (Bautista & Uribe, 2000). Así, al identificar las vacas problema que tienen altos ECS como consecuencia de la mastitis se proponen opciones de manejo que contribuyan a disminuir el recuento y reducir las pérdidas económicas por mastitis (NMC, 1996). FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 43 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira Cuadro 8. Cambio estimado en producción de leche asociada con un aumento en el Escore de Células Somáticas (ECS). Lactación Media ECS Media RCS (1000's/ml) Disminución en la Producción de leche (lbs./305 días) Lactancia 1 Lactancia 2 0 12.5 --- --- 1 25 --- --- 2 50 --- --- 3 100 200 400 4 200 400 800 5 400 600 1200 6 800 800 1600 1600 1000 2000 7 Fuente: Adaptado de Universidad de Wisconsin Los altos recuentos de células somáticas en presencia de mastitis ocasionan numerosos cambios en la composición química de la leche principalmente disminución de algunos componentes como el calcio, fósforo, proteína y grasa; produciéndose un aumento en la concentración de enzimas en leche, con lo cual se reduce la síntesis de proteína y lactosa, además de alteraciones en la caseína por la acción de los microorganismos y enzimas proteolíticas que producen los leucocitos y bacterias contribuyendo al deterioro del producto. Esto influye de manera negativa en el precio de la leche por calidad. 7.1. Pérdidas económicas asociadas a mastitis clínica Los costos de la mastitis clínica dependen de la gravedad con la que se presente la enfermedad, la velocidad con la que responda al tratamiento, la duración del tratamiento, la cantidad de leche que se desecha por anormalidades y los residuos de antibióticos en la leche. Las pérdidas económicas por mastitis clínica varían dependiendo del país y los costos de producción (Bedolla & Ponce de León, 2008). • • • • • 44 Disminución de la producción lechera por alteraciones y cambios en su composición a causa de altos RCS. El impedimento de comercialización de la leche de los animales en fermos y de leche con residuos de antibióticos. Costos de tratamientos veterinarios. Baja productividad por descartes tempranos y animales con recuperaciones demoradas. Aumento del trabajo y de la mano de obra para el mayor cuidado requerido por los animales enfermos. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 7.2. Pérdidas ocasionadas por mastitis subclínica Según Bedolla & Ponce (2008), la mastitis subclínica es la forma más peligrosa de mastitis, su frecuencia es de 20 a 50 veces mayor a la mastitis clínica, porque no presenta sintomatología definida que permita su diagnóstico oportuno, produce disminución de la productividad en forma recurrente con alteraciones en la leche, en la mayoría de los casos difíciles de detectar. Como consecuencia del diagnóstico tardío de la enfermedad es difícil que los animales respondan positivamente al tratamiento. El mayor número de casos de mastitis obedece a mastitis subclínica, esta es responsable de una disminución del 5% en la producción de leche por cada 100.000 células somáticas/ml que se incrementen en la leche. La mastitis subclínica es responsable de la mayor cantidad de pérdidas de leche, ya que se presenta con mayor frecuencia que la mastitis clínica, estas pérdidas se prolongan por un largo periodo afectando la productividad de los animales infectados. Las medidas de tratamiento y control de este tipo de mastitis se deben realizar rigurosamente ya que las vacas enfermas de mastitis subclínica constituyen una fuente de infección para los animales sanos en el hato. Las falencias a nivel del plan de prevención, control, tratamiento de esta enfermedad y la falta de alternativas de tipo terapéutico se ven reflejadas en grandes pérdidas económicas, cuyo resultado es la baja producción de leche y mala calidad de la misma, a la vez de la reducción en la rentabilidad de la explotación (Valera et al., 2005). Lorbacher citado por Ceron et al. (2007), mencionó que más del 40% de los casos de mastitis que se presenta en un hato corresponden a mastitis de tipo subclínico a la cual se le atribuyen las pérdidas económicas. Se estima que en cada hato se pierde el 12% de la producción de leche al año a causa de esta enfermedad, solo en Estados Unidos las pérdidas en producción de leche atribuibles a la mastitis son aproximadamente de 2 billones de dólares. Cuadro 9. Relación entre conteo de células somáticas (RCS) medido en la leche del tanque a granel, pérdida de la producción y prevalencia de las mastitis subclínicas en el hato. Conteo de células somáticas Cuartos infectados Pérdida de producción (%) Mastitis subclínica < 200 000 6% 0-5 Cerca de cero 200.000 – 500.000 16% 6-9 Unos pocos casos 500.000 – 1.000.000 32% 10-18 Diseminada 48% 19-29 Epidémica > 1.000.000 Fuente: Salinas & Rivera, 2006 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 45 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira El recuento de células somáticas para la leche “normal” es casi siempre menor a 200.000 células / ml (menor para vacas de primera lactancia), mientras que hatos con un RCS mayor de 200.000 células/ml indican la presencia de mastitis subclínica. Los hatos que tienen RCS por debajo de 400.000 células/ml son característicos de los hatos que emplean buenas prácticas de manejo, pero que no se centran en el control de la mastitis. Respecto a los hatos que cuentan con un buen plan de manejo para controlar la mastitis presentan RCS menores a 100.000 células/ml. Los Recuentos de células somáticas por encima de 500.000 células/ml demuestran que un tercio de las glándulas mamarias se encuentran contaminadas y que la pérdida de leche causada por mastitis subclínica es mayor de 10% (NMC, 1996). Cuadro 10. Pérdidas económicas y su relación con el RCS y CMT. Pérdidas económicas CMT 1% RCS ECS # total 0 1 25.000 3,7% 1 2 50.000 11% 2 5 400.000 28% 3 6 800.000 4 9 6.400.000 48% Fuente: Cogancevalle, (sf) Cuadro 11. Relación entre el RCS de tanque, el porcentaje de cuartos infectados y el porcentaje de pérdidas en la producción de leche. RCS Tanque % cuartos infectados % pérdidas en la producción 200.000 6 0 500.000 16 6 1.000.000 32 18 48 29 1.500.000 Fuente: Laranja & Veiga, 2000 Según Laranja & Veiga (2000), los factores que tienen mayor efecto sobre el recuento de células somáticas se deben al nivel de infección de la glándula mamaria en el hato. En algunos estudios se menciona que existe elevada relación entre el RCS de tanque y el porcentaje de cuartos infectados en el hato. El aumento del conteo en tanques se refleja directamente en el aumento del número de cuartos infectados, lo que eleva las pérdidas económicas por producción lechera. De las tablas se deduce que si el ECS aumenta, el porcentaje de vacas y cuartos que están infectados también aumenta, en tanto que, la producción de leche disminuye. Por otra parte, las mermas en la producción implican la duplicación del recuento de células somáticas. Así mismo, si se realizan 46 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira conteos para una vaca individual en un mes, se estima que el ECS no se correlaciona bien con la pérdida de producción láctea en el mismo período. Sin embargo, la estimación de las pérdidas se puede realizar si se utiliza el promedio de ECS del total de lactancias de una vaca o el ECS promedio mensual de un hato completo (NMC, 1996). Rodríguez (2006) señala que sobre el comportamiento de la mastitis bovina en algunos hatos de la Sabana de Bogotá, los autores encontraron en cuanto al efecto de la infección sobre la producción, que se presentaron perdidas hasta de 5 litros diarios por vaca afectada teniendo como indicador el CMT y el pesaje de la leche, además de una disminución en la producción de leche por cuarto afectado de: 0,42; 0,90; 1,47; y 2,40 litros cuando se relacionaban con las lecturas en CMT de trazas, 1, 2 o 3. Los autores señalan que a partir de los resultados acumulados se pueden estimar las pérdidas por hato. Cuadro 12. Estimación de las pérdidas diarias en la producción de leche debidas a la mastitis en 50 vacas. Disminución diaria en la producción (1Lt) Cuartos afec- N° aprox. tados (%) Cuartos afectados Pérdida producción (Lt) 0,4236 4,82 10 CMT-1 0,9 6,32 13 11,7 CMT-2 1,747 5,78 12 20,96 CMT-3 2,405 2,84 6 14,43 Mastitis Clínica 2,405 2,22 4 9,62 Cuartos Perdidos 2,7843 1,6 3 8,35 23,58 48 69,3 CMT (Trazas) Total Fuente: Rodríguez, 2006 4,24 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE 47 Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira 8. PERSPECTIVAS DE USO DEL RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS (RCS) La producción de leche en la actualidad exige calidad, bajos costos de producción y alta competitividad, estos factores pueden ser analizados y potencializados a través de las buenas prácticas de producción, que deben incluir actividades para la prevención de problemas sanitarios, en especial de mastitis, así mismo, evaluar oportunamente el estado de la glándula mamaria. El recuento de células somáticas a nivel de tanque o individual ofrece una inigualable oportunidad, para que mediante el empleo de herramientas de diagnóstico confiables, se puedan tomar medidas de monitoreo y control, y generar medidas que disminuyan los riegos de lesiones de la glándula con el objetivo de reducir las pérdidas económicas por mastitis subclínicas, las cuales generan las mayores pérdidas en los sistemas de producción lechera. El RCS debe ser un método rutinario de seguimiento de los niveles de infección, solo así, se podrá en forma oportuna intervenir adecuadamente para favorecer la salud animal y la rentabilidad del productor. 48 FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira BIBLIOGRAFÍA Alvarado, C., 2006. Algunas variables climatológicas y ambientales, y su relación con el recuento celular somático en leche de estanques prediales de la provincia del Bio Bío, Chile. 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