factores que inciden en el recuento de células somáticas

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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
FACTORES QUE INCIDEN EN EL
RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS
(RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
Zully Cuchillo Hurtado, Victoria Eugenia Dauqui, Rómulo Campos Gaona
Palmira, Mayo de 2010
FACTORES QUE INCIDEN EN EL
RECUENTO DE CELULAS SOMÁTICAS
(RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
Autores:
Zully Cuchillo Hurtado1
Victoria Eugenia Dauqui2
Rómulo Campos Gaona3
Zootecnista, UNC, Coautora Monografía Trabajo de Grado
Zootecnista, UNC, Coautora Monografía Trabajo de Grado
MV, MSc, Dsc, profesor Asociado, Departamento de Ciencia Animal, director trabajo de grado
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Palmira, mayo de 2010
Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira
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FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
El presente documento constituye una revisión de literatura sobre el papel
del recuento de células somáticas (RCS), para el diagnóstico de mastitis,
en especial de la inflamación de tipo subclínico. La valoración del grado de
la afección bien sea a nivel de individuo, como a nivel de leche de tanque,
puede ser oportuna y confiable mediante el uso del recuento como prueba
tamiz.
Esta publicación es un producto académico, resultado parcial de una monografía de grado y de los trabajos de campo de las pasantías de estudiantes
del programa curricular de Zootecnia. A solicitud de algunos productores,
se recopilaron en forma resumida los principales factores que afectan el
recuento de células, así mismo, se presenta una breve descripción de la
mastitis y la incidencia de ésta sobre la calidad composicional de la leche y
la rentabilidad de los sistemas de producción.
Este material servirá como apoyo en las actividades de extensión extramural
y como soporte documental para los estudiantes de los cursos de Sistemas
de Producción de Ganado de Leche y de Tecnología de Leches.
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CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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TABLA DE CONTENIDO
INTRODUCCIÓN
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1. ¿QUÉ SON LAS CELULAS SOMÁTICAS?
1.1. Mecanismos de defensa de la glándula mamaria.
1.1.1. Mecanismos no inmunológicos.
1.1.2. Mecanismos Inmunológicos.
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2. RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS.
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3. CÓMO AFECTA EL RECUENTO SOMATICO LA CALIDAD
DE LA LECHE.
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4. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RCS.
4.1. Morfología y ubicación de la glándula mamaria.
4.2. Principales patógenos que influyen sobre los RCS.
4.2.1. Patógenos de tipo contagioso.
4.2.1.1. Staphylococcus aureus.
4.2.1.2. Streptococcus agalactiae.
4.2.2. Patógenos de tipo ambiental.
4.2.2.1. Escherichia coli.
4.2.2.2. Streptococcus uberis.
4.2.2.3. Streptococcus dysgalactiae.
4.3. Prácticas de manejo.
4.3.1. Correcta realización del Ordeño.
4.3.2. Equipo de Ordeño.
4.3.3. Desinfección de pezones.
4.3.4. Tratamiento.
4.3.5. Alojamiento.
4.4. Nutrición.
4.5. Estrés asociado a las condiciones climáticas.
4.6. Edad y etapa de lactancia.
4.7. Efecto del número de vacas en ordeño sobre el Recuento de
Células Somáticas.
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5. ESCORE DE CÉLULAS SOMÁTICAS (ECS).
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6. TÉCNICAS DE LECTURA, MEDIANTE RECUENTO DE
CÉLULAS SOMÁTICAS EN LECHE.
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6.1. Pruebas químicas.
6.1.1. Conductividad eléctrica de la leche.
6.1.2. Papel indicador de mastitis.
6.1.3. Prueba de Whiteside.
6.2. Pruebas biológicas.
6.2.1. California Mastitis Test (CMT).
6.2.2. Prueba de Wisconsin.
6.3. Métodos de conteo electrónico celular.
6.3.1. Fossomatic.
6.3.2. Counter Coulter.
6.3.3. Test DCC (DeLaval Direct Cell Counter).
6.3.4. Citometría de flujo.
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7. PÉRDIDAS ECONÓMICAS POR ALTOS RCS EN LECHE
7.1. Perdidas económicas asociadas a mastitis clínica.
7.2. Pérdidas ocasionadas por mastitis subclínica.
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8. PERSPECTIVAS DE USO DEL RECUENTO DE
CÉLULAS SOMÁTICAS (RCS).
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BIBLIOGRAFÍA.
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LISTADO DE CUADROS
Cuadro 1.Tipos de células en la leche.
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Cuadro 2. Diagnóstico de un cuarto según el conteo de
células somáticas.
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Cuadro 3. Efecto de la mastitis sobre las
propiedades físicas de la leche.
20
Cuadro 4. Clasificación de los microorganismos
causantes de mastitis.
23
Cuadro 5. Comparación del conteo de células somáticas por cuarto.
33
Cuadro 6. Relación entre el Escore de Células Somáticas (ECS)
y el Recuento de Células Somáticas (RCS).
35
Cuadro 7. Relación entre el CMT y el RCS según
el grado de reacción.
40
Cuadro 8. Cambio estimado en producción de leche asociada
con un aumento en el Escore de Células Somáticas (ECS).
44
Cuadro 9. Relación entre conteo de células somáticas (RCS) medido
en la leche del tanque a granel, pérdida de la producción y
prevalencia de las mastitis subclínicas en el hato.
45
Cuadro 10. Pérdidas económicas y su relación con el RCS y CMT.
46
Cuadro 11. Relación entre el RCS de tanque, el porcentaje de
cuartos infectados y el porcentaje de pérdidas en la
producción de leche.
46
Cuadro 12. Estimación de las pérdidas diarias en la producción de
leche debidas a la mastitis en 50 vacas.
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LISTA DE FIGURAS
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Figura 1. Esquema de la glándula mamaria indicando los factores
anatómicos que actúan como barrera de defensa.
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Figura 2. Fuentes de infección para una vaca sana.
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Figura 3. Esquema del Citómetro de flujo.
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INTRODUCCIÓN
El Recuento de Células somáticas (RCS) se refiere al número de células que
se encuentran presentes en la leche. La principal fuente de variación es la
respuesta celular originada por la presencia o no de infecciones bacterianas
en la glándula mamaria; otras fuentes de variación se deben al parto, fase
de lactancia, estrés de origen metabólico o fisiológico, diferencias entre los
cuartos y vacas, y errores en la técnica de medición (Green et al., 2006).
Sin lugar a dudas, el principal factor que determina la elevación del recuento
celular (RCS) es la mastitis, enfermedad que se define como la inflamación
de la glándula mamaria, generalmente ocasionada por infecciones de tipo
bacteriano. Puede ser clínica cuando los signos se hacen evidentes, o subclinica en ausencia de signos visibles, y su diagnóstico se obtiene a través de
técnicas como el recuento de células somáticas (McDougall et al., 2009).
La presencia de mastitis tiene efectos negativos sobre la calidad de la leche
que afecta a la industria de lácteos, principalmente debido al bajo rendimiento y disminución de la vida útil de los productos lácteos, a causa decaracterísticas organolépticas indeseables principalmente ocasionadas por
la acción de enzimas proteolíticas y lipolíticas (Fernandes Oliveira & Lima,
2007).
Los métodos más utilizados para detección de mastitis subclínica son entre otros: Prueba de California para Mastitis (CMT), Prueba de Wisconsin
(WMT), y Cuenta Microscópica de Células Somáticas (CMCS). Otros métodos
utilizados actualmente por su rapidez y efectividad son los Contadores Electrónicos como el Fossomatic® (CE) y el Contador Infrarrojo (CI) también
conocido como DeLaval Cell Counter (DCC®) (Bedolla, Castañeda & Wolter,
2007).
La detección del número de células somáticas se puede realizar de dos maneras, individualmente o muestreando la leche directamente del tanque recolector. La prueba individual determina el estado de salud de cada una de
las vacas e indica cuáles están enfermas; y el muestreo del tanque muestra
el promedio del estado de salud de todas las vacas (Hernández & Bedolla,
2008).
El conteo de células somáticas en leches de tanque permite conocer el grado de infección en el que está el hato para la posterior implementación de
acciones correctivas sobre el problema. Las causas de los altos recuentos
de células somáticas pueden obedecer a diversos factores, entre ellos: presencia de mastitis por infección con microorganismos patógenos, lesiones
en la glándula mamaria, estrés y número de animales que se encuentren
enfermos (Hernández & Bedolla, 2008).
El objetivo de la presente revisión de literatura fue describir los principales
factores que inciden en el recuento de células somáticas y su efecto sobre la
calidad de la leche, así mismo, comprender las ventajas de un diagnóstico
rápido y seguro para mastitis a nivel individual y de hato.
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1. ¿QUÉ SON LAS CELULAS SOMÁTICAS?
Las células somáticas son células corporales que están conformadas por
leucocitos y células epiteliales, migran desde la sangre a los tejidos y conductos de la glándula mamaria, actúan en respuesta defensiva contra una
lesión inflamatoria generalmente de tipo infeccioso en la glándula y son un
indicador directo de mastitis. Se encuentran constituidas en mayor proporción por leucocitos (macrófagos, linfocitos y neutrófilos) y en menor grado
por células de descamación provenientes del epitelio del tejido glandular;
el 98% de las células somáticas las conforman los leucocitos y solo un 2%
corresponden a células del epitelio procedentes de la descamación por envejecimiento (Zemanate & Grass, 2005).
Cuadro 1.Tipos de células en la leche.
Tipo
% leche normal
% leche afectada
Macrófagos
45-90
10-35
Neutrófilos
3-25
50-90
Linfocitos
7-35
1-20
0-2
0-2
células epiteliales
Fuente: Monardes & Barria, 1995
Los leucocitos ingresan a la leche a través de la sangre y el tejido glandular como respuesta a la inflamación de la glándula mamaria que puede ser
ocasionada por una infección o una lesión traumática (Hernández & Bedolla,
2008). Según Bedolla & Castañeda (2004); Wolter et al. (2004) citados por
Hernández & Bedolla (2008), el estado de salud y funcionalidad de la glándula mamaria se puede conocer a través del contenido de células somáticas
en la leche.
Las células somáticas poseen un alto poder fagocitario y capacidad de destruir buena parte de los organismos invasores. La muerte de las células
epiteliales glandulares como consecuencia de la acción de las bacterias, ocasiona el desprendimiento del tejido mamario y de gran parte de las bacterias
que se encuentran adheridas convirtiéndose en un sistema de defensa adicional para la glándula mamaria (Zemanate & Grass, 2005).
En una glándula mamaria sana la presencia de células somáticas es muy
baja y corresponde a células epiteliales y células inmunes, tiene concentraciones de menos de 105 células somáticas por mililitro; no obstante, la
variación individual es amplia y se informa de valores que oscilan entre 104
y 107 células por mililitro (Hamann, 2002; Jensen, Blanc & Patton, 1995)
citados por Lindmark-Mansson et al., 2006.
1.1. Mecanismos de defensa de la glándula mamaria
El sistema inmunológico tiene la capacidad de reconocer y diferenciar entre
agentes extraños y moléculas propias producidas por el organismo (Meglia &
Mata, 2001). La glándula mamaria lleva a cabo funciones inmunológicas que
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le sirven como defensa; por ejemplo, en el periodo preparto la producción de
anticuerpos que se secretan en el calostro le confieren protección al neonato
contra agentes patógenos (Oviedo-Boyso et al., 2007).
El tejido de la glándula mamaria está protegido por dos mecanismos de
defensa: la inmunidad innata y la adquirida; ambos sistemas interactúan
para brindar protección contra los microorganismos patógenos que causan
la mastitis. La respuesta del sistema inmune natural o innato estimula la
respuesta inmune adquirida y esta influenciada por su naturaleza (OviedoBoyso et al., 2007).
La inmunidad natural, innata o propia del organismo prevalece durante la
fase inicial de la infección y es mediada por macrófagos, neutrófilos, las
células propias del tejido afectado y por las citocinas. Tiene la facultad de
reconocer y dar respuesta al ataque de diferentes tipos de patógenos, aunque estos se encuentren invadiendo la glándula mamaria por primera vez
(Oviedo-Boyso et al., 2007). Así mismo, la respuesta innata es de vital importancia en el control de la proliferación del microorganismo patógeno y en
la eliminación de los gérmenes que atacan la glándula mamaria y se relaciona con la respuesta inmune adquirida para formar el mecanismo particular
de memoria (Oviedo-Boyso et al., 2007).
La respuesta inmune adquirida, emplea gran cantidad de sistemas efectores
inmunes propios del organismo con el fin de reconocer y eliminar los patógenos y su acción incrementa la actividad antimicrobiana. La eficiencia de la
capacidad de respuesta es el factor determinante del grado de susceptibilidad o de la resistencia a la enfermedad por parte de la glándula mamaria
(Oviedo-Boyso et al., 2007).
1.1.1. Mecanismos no inmunológicos
La glándula mamaria contiene agentes bacteriostáticos inespecíficos que actúan independientemente o en compañía de inmunoglobulinas. Uno de estos
factores es la proteína lactoferrina producida en las células epiteliales y los
fagocitos de la glándula mamaria; su concentración es generalmente baja,
aumenta durante la involución de la glándula o cuando se presenta una inflamación (Meglia & Mata, 2001).
La lactoferrina liga los iones férricos libres que se encuentran en la leche,
haciéndolos indisponibles para las bacterias que requieren de este metal
como factor de crecimiento o como fuente de hierro (por ejemplo E. coli,
K. pneumoniae). No obstante, existen otras bacterias que utilizan la lactoferrina como una fuente de hierro (por ejemplo S. agalactiae). La función
más importante de la lactoferrina es salvaguardar la glándula mamaria de
infecciones con coliformes, sobre todo, en su fase de incubación, debido
a la aceleración de la fagocitosis y la activación del sistema complemento
(Oviedo-Boyso et al., 2007).
La primera barrera de defensa contra los microorganismos patógenos causantes de la inflamación de la glándula mamaria está constituida por el canal
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del pezón y la piel. Cuando la glándula mamaria está sana, la oportunidad
de sobrevivencia de los agentes patógenos es limitada. La capa córnea de
la piel puede sufrir cambios en el contenido de acido láctico, ácidos grasos
libres y aminoácidos, lo cual deja la piel susceptible al ataque de microorganismos patógenos, causantes de infecciones en bovinos (Meglia & Mata,
2001).
Figura 1. Esquema de la glándula mamaria indicando los factores anatómicos que actúan como barrera de defensa.
Fuente: Oviedo-Boyso et al., 2007
Es por el canal del pezón por donde ingresan la mayor parte de los patógenos
a la glándula mamaria (Meglia & Mata, 2001). Esto indica que cualquier
daño en esta estructura dará como resultado un incremento en la incidencia
de mastitis. El conducto del pezón se encuentra rodeado de músculo liso
elástico lo cual mantiene cerrada la entrada de bacterias (Oviedo-Boyso
et al., 2007). Durante el periodo de lactancia sucede todo lo contrario, el
canal del pezón permanece abierto durante dos horas después de realizado
el ordeño, lo que permite la entrada de patógenos al interior de la glándula
mamaria (Meglia & Mata, 2001).
El diámetro y longitud del pezón se encuentran directamente relacionados
con la aparición de enfermedades intramamarias, siendo los pezones de
mayor tamaño los más propensos a contraer nuevas infecciones. Algunos
estudios han mostrado que el diámetro del canal del pezón cambia durante
la lactancia y el periodo seco de la vaca. Se ha encontrado que existe una
relación negativa entre la edad de la vaca y la obstrucción del canal del
pezón ya que los animales más viejos poseen el canal del pezón dilatado,
haciéndolos más propensos a adquirir infecciones intramamarias (Meglia &
Mata, 2001).
La resistencia que posee la glándula mamaria se debe en gran parte a
que el canal del pezón está rodeado con queratina, proporcionando una
barrera física adicional, previniendo la migración bacteriana hacia la cisterna
de la glándula mamaria. Los ácidos grasos esterificados y no esterificados
(mirístico, palmitoleico, y linoleico) actúan como bacteriostáticos y se
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encuentran unidos a la queratina. Incluso algunas proteínas catiónicas
asociadas a la queratina pueden adherirse a microorganismos patógenos
causantes de mastitis, desarrollando susceptibilidad a cambios osmolares
(Oviedo-Boyso et al., 2007).
1.1.2. Mecanismos Inmunológicos
Los mecanismos inmunológicos solubles se clasifican en complemento
(proteínas activadas que poseen diversas funciones inmunológicas) y las
inmunoglobulinas (Meglia & Mata, 2001).
Según Elfstrand et al. (2002) citado por Liu et al. (2009), la IgG predomina
en el calostro y la leche, comprende entre el 80 y 90 % del contenido
de inmunoglobulinas totales. La IgG como anticuerpo está involucrada
en la opsonización favoreciendo el proceso de fagocitosis, activación del
complemento, prevención de la adherencia de agentes patógenos, inhibición
del metabolismo bacteriano, aglutinación bacterial y en la neutralización de
virus y toxinas (Marnila & Korhonen, 2002 citado por Liu et al., 2009).
En la glándula mamaria se encuentran 4 clases de inmunoglobulinas (IgA,
IgE, IgG (IgG1, IgG2) e IgM) las cuales son producidas por ésta o se derivan
del torrente sanguíneo. Según Tizard (1996) citado por Meglia & Mata (2001)
“Entre el 50 y el 100 % de la IgA es producida localmente, pero a diferencia
de otras especies, en la leche bovina esta Ig no se encuentra en una elevada
concentración”. “El 75 % de la IgM es producida localmente, el 90 % para el
caso de la IgG2, mientras que la IgG1 deriva principalmente del suero”.
La concentración de IgG1 en leche esta mediada por diversos factores, en
los que se incluyen influencias genéticas y hormonales, edad, parto, estado
nutricional y etapa de lactancia de la vaca (Kruse, 1970; Guidry et al., 1980;
Auldist et al., 1993; McFadden et al., 1997; Laegreid et al., 2002; Clawson
et al., 2004 citados por Liu et al., 2009).
Según Harmon et al. (1976) y Andersson & Andrews (1977) citados por
Lindmark-Mansson et al. (2000), las concentraciones de inmunoglobulinas
(IgG, IgA, IgM) son variables y se incrementan durante los procesos infecciosos
(mastitis) debido a la producción de neutrófilos polimorfonucleares. En caso
de que haya una invasión fuerte de bacterias se verá aumentado el número
de granulocitos de los vasos sanguíneos, así como también el número de
células somáticas en la leche. Diferentes mediadores químicos desencadenan
esas reacciones inflamatorias como consecuencia de la acción de agentes
patógenos u otros estímulos (Wolter et al., 2002).
El complemento está formado por una serie de proteínas que, al
ser activadas, ejercen diversas funciones inmunológicas, tales como
opsonización de microorganismos, quimiotaxis de neutrófilos y lisis de
bacterias. Recientemente, se ha señalado que el complemento puede actuar
modulando la respuesta inmune. Sin embargo, tiene una función muy
limitada en la protección de la glándula mamaria ya que se encuentra más
concentrado en el suero que en la leche, viene en la sangre como respuesta
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a una inflamación. Su concentración en la glándula mamaria depende del
período de lactancia y del nivel de infección; se encuentra en el calostro,
leche con mastitis y al final de la lactancia normal su concentración es
elevada (Meglia & Mata, 2001).
Existen diversas moléculas constituyentes del complemento, las cuales se
requieren tanto para reclutar neutrófilos como para opsonizar y eliminar
bacterias en la glándula mamaria. La opsonización suministra una vía
adecuada para que se efectúe la fagocitosis de los macrófagos y leucocitos
polimorfonucleares. Las acciones bactericidas y hemolíticas del complemento
se incrementan cuando los cuartos de la glándula mamaria están inflamados.
La intensidad de estas actividades están estrechamente relacionadas con la
respuesta inflamatoria. Diversos estudios han demostrado que la actividad
hemolítica y la concentración de la fracción del complemento C3 en la leche
es más elevada en la glándula mamaria infectada con mastitis que en una
glándula mamaria saludable (Oviedo-Boyso et al., 2007).
Cuando los tejidos de la glándula mamaria son atacados por agentes
patógenos, la respuesta del sistema inmune es realizada a través de
las diferentes células que lo componen, en una secuencia de reacciones
de defensa donde en primer lugar, el antígeno (Ag) componente soluble
no reconocido por el organismo es capaz de crear una respuesta inmune
local, éste es reconocido y fagocitado por parte de las células portadoras
de antígenos (CPA); que pueden ser linfocitos B, macrófagos, o células
dendríticas (Meglia & Mata, 2001).
Una vez ha sido fagocitado el (Ag) es procesado y presentado en mezcla
con el complejo mayor de histocompatibilidad tipo II (MHC II) y linfocitos T,
esto depende del tipo de Ag que esté actuando, generando una respuesta
inmune bien sea de tipo celular o de tipo humoral (en su mayoría producción
de inmunoglobulinas). Como resultado de dicha interacción, las células
manifestantes de antígenos secretan citocinas (IL-1 y el IFN-γ) que
principalmente tienen funciones inmunomoduladoras sistémicas y locales
(Meglia & Mata, 2001).
Meglia & Mata (2001) señalan que, tras la acción sistémica de las citocinas
se aumenta la síntesis de proteínas de las células hepáticas conocidas
generalmente como proteínas de fase aguda, que ejercen funciones
inmunomoduladoras que evitan la expansión de la infección. Un punto crítico
que influye en la defensa del huésped es la presencia de leucocitos en la
sangre, tras un ataque bacteriano. El desplazamiento de los leucocitos da
lugar a una vertiginosa acumulación de neutrófilos en el sitio de la infección,
siendo éstos considerados la primera barrera defensa celular contra
las infecciones. Los linfocitos L transitan y migran hasta los tejidos más
complejos, existiendo contrastes entre los linfocitos L sin memoria y los
linfocitos L con memoria ó efectores.
La acción de las células del sistema inmunológico en la fisiopatología de la
mastitis bovina se encuentra parcialmente regulada por citocinas que son un
grupo de proteínas sintetizadas de forma natural por las células del sistema
inmune. Los linfocitos y macrófagos son la mayor fuente de citocinas,
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las cuales poseen habilidad de regular su propia naturaleza y sostener la
respuesta inmune en los procesos donde existe inflamación (Meglia & Mata,
2001). Inducen la concentración de neutrófilos en el área infectada, provocan
la maduración de las células dendríticas e intervienen en la respuesta del
sistema inmune adquirido (Oviedo-Boyso et al., 2007).
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2. RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS
Las células somáticas únicamente son liberadas en gran cantidad cuando y
donde son necesitadas (sitios infectados/lesionados). Tras el ataque bacteriano al interior de la glándula mamaria se produce una respuesta del sistema inmune del organismo enviando glóbulos blancos de la sangre con el
fin de neutralizar el efecto de los agentes patógenos causantes del daño a la
glándula mamaria, el cual puede ser determinado por el número de células
somáticas en la leche (García, 2004).
El recuento de células somáticas es un procedimiento común usado para
determinar el estado de salud de la glándula mamaria (Hernández & Bedolla, 2008). Además, pone de manifiesto el grado de infección e inflamación
de la glándula tanto en cuartos separados de la glándula mamaria como en
muestras mixtas de leche de cuartos de vacas individuales y en muestras
provenientes del tanque de acopio (Curbelo, 2007).
El recuento de células somáticas (RCS) se efectúa en leche de: cuartos individuales; vacas individuales; el hato completo y un grupo de hatos (Bedolla,
Castañeda & Wolter, 2007). Una glándula mamaria que nunca se ha infectado, normalmente tienen RCS de 20,000 a 50,000/ml. Un elevado recuento
de células somáticas en tanque es un índice de alto número de cuartos o
de vacas infectadas en el hato, aunque no es posible determinar a partir de
esta prueba cuántas vacas están infectadas y qué organismos patógenos de
mastitis predominan en el hato (Hernández & Bedolla, 2008).
Los cuartos infectados de la glándula mamaria tienen mayor variabilidad en
cuanto a los RCS que aquellos de una glándula mamaria saludable, puesto
que el animal en el primer caso es más sensible a diversos factores estresantes. Algunos reportes relacionados con el mejoramiento de los hatos
lecheros mencionan que el RCS de vacas de baja producción aumenta el
periodo seco, no obstante, estas diferencias no son altamente significativas
para las vacas que producen mas de 4 kg de leche por día (Pantoja, Hulland
& Ruegg, 2009).
Rápidas velocidades de ordeño y un gran diámetro del canal del pezón tienen estrecha relación con el incremento de RCS (Bhutto, Murray & Woldehiwet, 2008).
Las vacas con elevados RCS al inicio de la lactancia tienen mayor probabilidad de manifestar RCS elevados y por ende mayor riesgo de sufrir mastitis
clínica o subclínica en lactancias sucesivas (Curbelo, 2007). En algunos estudios se menciona que existe un aumento paulatino en los RCS a medida
que aumenta el número de lactancias, lo cual puede ser explicado, en parte,
por el incremento de células epiteliales en vacas más viejas, así como también por un mayor riesgo de infección de la glándula mamaria (Cunha et al.,
2008).
Cuando la leche de todas las vacas en un hato se combina, el conteo de
células somáticas en una muestra compuesta es un buen indicador de la
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prevalencia de la mastitis en el hato. Los hatos con alto recuento de células
somáticas son más propensos a presentar antibióticos en la leche, mastitis
clínica y a tener mayores descartes de vacas por daños irreversibles en la
glándula mamaria (Glauber, 2007).
Actualmente se considera un cuarto de la glándula mamaria como sano,
aquel que no muestra ninguna modificación patológica externa, la leche está
libre de microorganismos patógenos y tiene un nivel de células somáticas <
100,000/ml (Hernández & Bedolla, 2008).
Cuadro 2. Diagnóstico de un cuarto según el conteo de células somáticas.
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Células/ml de leche
Estado de la ubre
Hasta 100.000
Sana, leche normal
De 100.000 a 200.000
Sospechoso, nivel superior fisiológico
Más de 200.000
Mastitis, leche anormal
Fuente: Hernández & Bedolla, 2008
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3. CÓMO AFECTA EL RECUENTO
SOMATICO LA CALIDAD DE LA LECHE
La mastitis subclínica es una enfermedad difícil de detectar y curar puesto
que la vaca enferma aparentemente se encuentra sana sin estarlo, la glándula mamaria no muestra ningún signo de la enfermedad y la leche que produce es de una apariencia normal, sin ninguna variación observable en su
composición o en sus características organolépticas (Valera et al., 2005).
La mastitis produce en la leche secretada variaciones en la membrana del
glóbulo de grasa promoviendo la lipólisis, incrementa las proteínas solubles
y altera los balances de sal. Estos efectos sobre la composición de la leche
son ocasionados por la disfunción de las células de la glándula mamaria y
son la causa de la transferencia directa de los compuestos de la sangre a la
leche (Coulon et al., 2004).
El recuento de células somáticas además, se ha constituido en un buen indicador del porcentaje de cuartos infectados con mastitis de tipo clínica o
subclínica y apoya en forma indirecta la evaluación de la calidad de la leche,
debido a la asociación negativa que existe entre éstos y la producción de
leche en ganado bovino (Curbelo, 2007). Dichos recuentos se utilizan para
tomar medidas de manejo relacionadas con la prevención y control de mastitis en los hatos (Cerón et al., 2002).
La proliferación de microorganismos patógenos, favorece la destrucción del
tejido secretor, disminuyendo las concentraciones de caseína y lactosa sintetizadas en la glándula mamaria. Una vez lesionado el tejido de la glándula
mamaria, es sustituido por tejido conectivo ocasionando la pérdida irreversible de la productividad láctea del animal (Curbelo, 2007).
En la leche se presenta un incremento de inmunoglobulinas y lactoferrina
cuando hay una infección de la glándula mamaria debido a que se producen gran número de células somáticas, también, se da un incremento de la
permeabilidad capilar de los tejidos de la glándula mamaria, lo cual afecta
la barrera sangre-leche, permitiendo el desplazamiento de las proteínas del
suero de la sangre hacia la leche, lo que facilita que se incremente el tránsito
de sustancias como sodio, cloro, inmunoglobulinas y otros compuestos que
aparecen en la leche y ocasionan el incremento del pH normal (6.6) hasta
6.9 (Lindmark-Mansson et al., 2000). Para la compensación osmótica se
disminuye la síntesis de lactosa con aumento de la concentración de cloruro
de sodio en la leche (Curbelo, 2007).
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Cuadro 3. Efecto de la mastitis sobre las propiedades físicas de la leche.
Propiedad
Dirección de cambio
pH
aumenta
Conductividad
aumenta
Viscosidad
aumenta
Acidez titulable
no cambia/disminuye
Densidad
disminuye
Fuente: García, 1999
Diversas investigaciones han señalado que los altos recuentos de células
somáticas son responsables de alteraciones en la composición de la leche,
afectando de manera negativa la calidad y rendimiento de productos lácteos (Valera et al., 2005). Además de alterar el valor nutricional también
es responsable de númerosas pérdidas en la industria de derivados lácteos,
como en el caso de la elaboración de quesos, puesto que se ve aumentado el
tiempo de coagulación, disminuye la estabilidad del cuajo (cuajo débil) y por
ende disminuye la calidad y rendimiento del producto (Lindmark-Mansson
et al., 2006).
Asimismo, se produce un mayor arrastre de la caseína en el suero, una reducción en la calidad sensorial del queso y disminución de la vida útil de la
leche pasteurizada (Curbelo, 2007). Respecto a las características sensoriales del queso, los primeros estudios realizados en este tema, subrayan que
la leche con elevado recuento de células somáticas está asociada con defectos en el sabor en función del tipo de queso (Coulon et al., 2004).
El alto recuento de células somáticas produce cambios severos sobre la
composición de los sólidos no grasos y de la grasa butírica, ocasionando sabores desagradables. En el caso de la crema, ésta va a presentar un cuerpo
débil, mayor separación y disminución en la vida de estantería del producto
(Hernández & Bedolla, 2008).
La leche con alto RCS tiene un nivel elevado de las enzimas lipasa y plasmina; el desdoblamiento de la grasa ocasionado por la acción de la enzima
lipasa es lo que produce la rancidez de la leche e inhibe los cultivos iniciadores del yogurt, debido a esto, la utilización de leches con alto contenido de
células somáticas en la elaboración de yogurt, afecta la calidad del producto;
por el contrario el bajo recuento de células somáticas en la leche favorece el
desarrollo del bacterias acido lácticas (Lindmark-Mansson et al., 2006; Lindmark et al., 2000). La plasmina ocasiona reducción de caseína en la leche y
rendimiento quesero, y continúa su actividad sobre la leche aún después de
almacenar, refrigerar y pasteurizar la misma (Hernández & Bedolla, 2008).
La utilización de antibióticos para el tratamiento de mastitis y su presencia
en la leche es un asunto de mucha importancia para la industria láctea y
aun más para la salud pública, puesto que afecta la fabricación de algunos
productos lácteos y pueden colocar en riesgo la salud del consumidor (Valera et al., 2005).
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Con menores conteos de células somáticas existe relación con la reducción
de casos de mastitis clínica, mayor producción de leche, mayores porcentajes de grasa y caseína, leche menos contaminada y una mejor conservación
de los productos lácteos (Monardes & Barria, 1995). Por el contrario, altos
recuentos de células somáticas ocasionan disminución de la proteína y el
contenido de lactosa (Feng & Zheng, 2005).
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4. FACTORES QUE INCIDEN EN EL RCS
4.1. Morfología y ubicación de la glándula mamaria
La morfología de la glándula mamaria y el pezón, son uno de los factores
que inciden considerablemente en el recuento de células somáticas y en
la presencia de mastitis clínica en vacas de leche, puesto que el tamaño y
la morfología externa del canal del pezón hacen parte de los mecanismos
anatómicos de resistencia individual a la mastitis. Estas son características
que poseen alta heredabilidad razón por la cual es un parámetro de gran importancia en la evaluación y selección de vacas lecheras para la producción
de leche y bajos recuentos de células somáticas. A pesar de que la característica de selección genética de más interés ha sido la producción de leche,
la salud de la glándula mamaria y la resistencia a mastitis está cobrando
importancia a nivel mundial (Riera et al., 2004).
La susceptibilidad de la glándula mamaria a padecer infecciones por microorganismos patógenos está relacionada con la anatomía y estructura de la
punta y canal del pezón, ya que actúan como mecanismos de defensa que
evitan el paso de los agentes infecciosos al interior de la glándula mamaria
(Riera et al., 2004). Factores tales como la forma, posición y longitud del
pezón, están relacionados con el grado de laceración del extremo libre del
pezón (Neijenhuis et al., 2001). Las características de conformación que
más influyen en el estado sanitario de la glándula mamaria son: profundidad
de la glándula mamaria, longitud y ubicación de los pezones con relación a la
glándula y la distancia de la punta al piso (Fernández & Alenda, 2001).
Cuando la glándula mamaria posee pezones separados y fuera del eje de los
cuartos presenta menor probabilidad de contagio y menor RCS, a diferencia
de las que poseen los pezones muy juntos. Una correcta longitud y ubicación
de los pezones anteriores favorece la realización del ordeño y minimiza el
riesgo de accidentes, puesto que los pezones excesivamente largos pueden
dificultar el ordeño (Fernández & Alenda, 2001). Por otra parte, la profundidad de la glándula mamaria es importante porque aquellas vacas que presentan poca profundidad tienen baja producción de leche, mientras que las
que tienen buena profundidad de la glándula mamaria son relativamente
buenas productoras, pero susceptibles a padecer mastitis o lesiones de la
glándula mamaria (Ayadi, 2003).
En un estudio realizado por Riera et al. (2004), donde se estudiaron las
características morfológicas de 2663 vacas Carora de dos y más lactancias
y 486 vacas de primera lactancia, la evaluación describió tres diferentes formas de pezón: embudo, cilíndrico y en forma de botella; y siete categorías
para la forma de la punta de los pezones: redondeado, puntiagudo, plano,
prolapsado, disco, invertido y mixto. Los investigadores encontraron que
los pezones en forma de embudo presentaron menor frecuencia a mastitis,
los pezones en forma cilíndrica presentaron la mayor cantidad de casos de
mastitis de tipo clínica y subclínica.
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Concordando con un estudio realizado por Hickman (1963) citado por Riera
et al. (2004), “encontraron que en pezones en forma de embudo, la frecuencia de mastitis clínica y subclínica era más baja que en pezones cilíndricos y
botella, lo que sería una característica favorable en las vacas Carora, debido
a que la frecuencia de aparición de los pezones en embudo, es mayor que
los pezones cilíndricos”.
Según Bassalik (1978) citado por Riera et al. (2004), en los pezones de forma cilíndrica se produce un cierre en el flujo de leche ocasionando un incremento en el vacio de succión que finalmente lesiona el pezón, representando una causa directa de mastitis y una mayor frecuencia de la enfermedad
en este tipo de pezón. Informes no publicados, señalan que la característica
de pezón prolapsado, puede ser ocasionada por altas presiones de vacío de
las maquinas de ordeño mecánico a las que no se les realiza mantenimiento
con frecuencia.
Según Chrystal (2001) citado por Riera et al. (2004), en los cuartos con pezones puntiagudos la prevalencia de mastitis era mayor que en los cuartos
anteriores con pezones de puntas planas. Por otro lado los pezones con puntas invertidas tienen una mayor probabilidad de presentar mastitis, ya que
son difíciles de lavar antes del ordeño ocasionando la acumulación de leche
en la cavidad la cual es utilizada por las bacterias como fuente de alimento
para su crecimiento.
4.2. Principales patógenos que influyen sobre los RCS
Entre los factores asociados a aumento de RCS se encuentran las bacterias
invasoras del canal del pezón, las cuales se pueden clasificar como ambientales o contagiosas.
Cuadro 4. Clasificación de los microorganismos causantes de mastitis
Contagiosos
Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae,
Streptococcus dysgalactiae, Actinomices (Corynebacterium) pyogenes, Mycoplasma.
Ambientales
E. Coli, Streptococcus uberis, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Pseudomona aeruginosa, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Pasteurella, Streptococcus
faecalis, Hongos y levaduras.
Oportunistas
Staphylococcus coagulasa negativos, Staphylococcus
aureus, Streptococcus agalactiae.
Fuente: Duica, 2004
Los microorganismos contagiosos se localizan en el área de la piel de la
glándula mamaria y los pezones, poseen la capacidad de diseminarse entre los pezones de una vaca o de una vaca a otra en los hatos donde no se
realizan adecuadamente las prácticas de manejo del ordeño dando como
resultado elevados RCS, caracterizados por la aparición de la infección en la
glándula mamaria (Duica, 2004).
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Los microorganismos ambientales se adquieren cuando la piel de la glándula
mamaria entra en contacto con elementos contaminantes del entorno del
animal, como son, estiércol, agua, suelo, establos y salas de ordeño sucias,
cánulas intramamarias infectadas, etc., penetrando en la glándula mamaria
si se presentan las condiciones adecuadas para su proliferación. Ocasionan
un elevado recuento de células somáticas en la leche de vacas individuales
o en la leche proveniente de tanque de enfriamiento, lo que indica invasión
de las bacterias a la glándula mamaria (García, 2004).
Los microorganismos oportunistas, se localizan en la epidermis de la glándula mamaria y de los pezones. La infección de estas bacterias se produce entre ordeños, por lo que se hace necesario realizar prácticas de desinfección
para el control de los patógenos contagiosos, pero estas no son tan efectivas
para el control de los microorganismos oportunistas (Duica, 2004).
4.2.1. Patógenos de tipo contagioso
4.2.1.1. Staphylococcus aureus
Es el agente etiológico más importante de la mastitis contagiosa bovina, así
mismo, es uno de los microorganismos patógenos responsable de daños al
tejido mamario y disminuye hasta en un 15% la producción de leche por
vaca infectada (Curbelo, 2007). La infección causada por S.aureus es persistente. Muestra una marcada ausencia de respuesta celular inmune tanto
al staphylococo solo, como si se encuentra relacionado con otros patógenos,
sin importar los hospederos ni los agentes antibacteriales empleados lo que
hace difícil su control (Oviedo-Boyso et al., 2007).
Según Radostits et al. (2000); Bradley (2002) citado por Kivaria, Noordhuizen & Nielen (2007), la mastitis ocasionada por Staphylococcus aureus es de
tipo subclínica, la cual se manifiesta con un incremento en el recuento de
células somáticas de la leche proveniente del cuarto afectado.
En un estudio realizado por Haas et al. (2004) citado por Sorensen et al.
(2008), estimaron casos de mastitis clínica asociada a microorganismos patógenos específicos y modelos de RCS basado en las desviaciones de una
curva característica para RCS durante la lactancia. Los autores encontraron
que la mastitis clínica causada por Escherichia coli se encontraba asociada
con picos cortos de recuento de células somáticas, mientras que la mastitis
causada por Staphylococcus aureus presentaba aumento de recuento de
células somáticas durante un periodo prolongado.
Según Schukken et al. (1999) citado por Zadoks et al. (2001), los recuentos
crónicos de células somáticas a nivel de cuarto, se relacionan con bajos ataques bacteriales, pero ocasionan incremento en el riesgo de padecer mastitis causada por Staphylococcus aureus. Los cuartos con bajos recuentos
de células somáticas no están directamente relacionados con el ritmo de
crecimiento de la infección intramamaria con Streptococcus uberis o Staphylococcus aureus.
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La tasa de curación para Staphylococcus aureus en cuartos que presentan
un recuento de células somáticas superior a 1.000.000 es menor que en
aquellos cuartos que tienen bajos recuentos de células somáticas.
4.2.1.2. Streptococcus agalactiae
Según Curbelo (2007), este microorganismo se encuentra normalmente en
la glándula mamaria y es el responsable de altos RCS así como de la disminución de la calidad y cantidad de los derivados de la leche. Es posible
identificarlo debido a la presencia de una infección inicial de las cisternas y el
sistema de conductos de la glándula mamaria, provocando irritación e inflamación subclínica de la misma. Es una bacteria que depende de la glándula
mamaria para sobrevivir, vive en los conductos galactóforos, lo que permite
que sea alcanzado por los antibióticos en los tratamientos intramamarios.
También es muy sensible a la penicilina, por ello es posible eliminarlo de
glándula mamaria a través de estrategias simples de control (Wolter et al.,
2002).
La mastitis causada por Streptococcus agalactiae, se caracteriza por causar
cambios ligeros a moderados en la leche, mostrando aglutinaciones y coágulos que son fáciles de detectar con la prueba de Californian Mastitis Test
(CMT). Los Streptococcus logran subsistir en la piel y pelo de la glándula
mamaria hasta por tres semanas, después de su ingreso a la glándula mamaria, el período de incubación de este microorganismo patógeno se realiza
entre uno y cuatro días y la presentación de signos de inflamación sucede
entre los siguientes tres a cinco días (Duica, 2004). El exceso de residuos
bacterianos origina una mayor respuesta inflamatoria, con lo cual se producen daños al tejido secretor. La gravedad de las cicatrices que se producen
pueden llegar a afectar la producción de leche en las próximas lactancias
(Curbelo, 2007).
4.2.2. Patógenos de tipo ambiental
4.2.2.1. Escherichia coli
E. coli, es una bacteria Gram-negativa causante de mastitis ambiental. Los
síntomas característicos de la inflamación de la glándula por esta bacteria
son, entre otros, dolor, inflamación severa, fiebre y leche con coágulos de
apariencia anormal. Esta enfermedad al ser tratada a tiempo puede ser
erradicada en pocos días. Aparentemente, la gravedad de la mastitis está
sujeta a la cepa bacteriana que infecte la glándula mamaria y a la velocidad
con que los neutrófilos se transporten desde el flujo sanguíneo a la glándula
mamaria (Oviedo-Boyso et al., 2007).
Según Suriyasathaporn et al. (2000), Escherichia coli es la principal causante de la mastitis clínica en hatos con bajos recuentos de células somáticas.
Con el fin de valorar el efecto de los agentes patógenos sobre el estado de
gravedad de la mastitis se llevo a cabo un experimento preliminar mediante
inoculación directa de la bacteria en la glándula. La prueba mostró menor
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
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gravedad de mastitis para infecciones intramamarias causadas por E. coli
en vacas con alto recuento de células somáticas antes de la inoculación,
demostrando un grado de resistencia inducida.
Sánchez (2006), mencionó que las vacas son más susceptibles de padecer la
forma aguda y mortal de mastitis por E. Coli y otros tipos de mastitis, cuando presentan recuentos de células somáticas excesivamente bajos.
En un estudio realizado en Holanda por De Haas, Barkema & Veerkamp
(2002), en el cual fueron utilizados 274 hatos, con el fin de investigar el
efecto de patógenos específicos causantes de mastitis clínica sobre la curva
de lactancia y sobre el RCS; los investigadores encontraron que en lactancias donde se no se presentó ningún tipo de mastitis, el RCS fue alto
después del parto, disminuyendo al mínimo transcurridos 50 días, y aumentando de manera gradual al final de la lactancia. Los efectos de la mastitis
clínica sobre las curvas de lactancia para RCS difieren dependiendo de los
patógenos aislados.
4.2.2.2. Streptococcus uberis
Ramírez (2002), menciona que la infección clínica ocasionada por este microorganismo patógeno se manifiesta primordialmente en la lactancia temprana, a pesar que es durante el periodo seco cuando los animales son más
susceptibles a presentar una infección. El patógeno puede ser diseminado a
través de las heces de animales portadores de la infección.
Zadoks et al. (2001), realizaron un estudio en tres hatos holandeses sobre
factores de riesgo para infecciones intramamarias con Streptococcus uberis
y Staphylococcus aureus bajo condiciones de campo, se tomaron muestras
durante 18 meses de todos los cuartos en todas las lactancias, a intervalos
de 3 semanas con conteos medios de células somáticas en tanque, los resultados encontrados mostraron que la tasa de infección con Streptococcus
uberis fue más baja en vacas de primero y segundo parto que en vacas de
más de dos lactancias, lo cual dependía de la fase de lactancia y la prevalencia de Streptococcus uberis o Staphylococcus aureus a nivel de hato. Bajo
recuento de células somáticas en los cuartos no estuvieorn relacionados con
el incremento de la tasa de infección por Streptococcus uberis o Staphylococcus aureus.
4.2.2.3. Streptococcus dysgalactiae
Streptococcus dysgalactiae, induce un tipo de mastitis altamente variable,
sin embargo, la mayoría de veces produce una mastitis subclínica contagiosa. Se ha observado que este microorganismo puede permanecer en el
ambiente, debido a ello es considerada una especie intermedia entre los
agentes promotores de mastitis contagiosa y los que ocasionan la mastitis
ambiental (Duica, 2004).
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El Streptococcus dysgalactiae al igual que el Streptococcus uberis se encuentra en la piel de la vaca y se transmiten del medio ambiente al pezón,
en especial durante los ordeños. Como forman parte del medio ambiente no
se considera viable su erradicación de los hatos (Wattiaux, sf).
4.3. Prácticas de manejo
Los factores que afectan con mayor intensidad la variación en los RCS entre
hatos con diferentes niveles de células somáticas son, entre otros, las prácticas de manejo tales como: desinfección y secado de los pezones antes y
después del ordeño, así como la duración del tratamiento de mastitis clínica.
Las conocidas rutinas de “pre y pos diping” generan evidentes beneficios
como medidas de control (Curbelo, 2007).
Es necesario vigilar el número de casos positivos a mastitis en el sistema de
producción lechero y la susceptibilidad de la vaca (fase de lactancia, edad,
genética, lesiones en el pezón, factores inmunitarios, entre otros).
4.3.1. Correcta realización del Ordeño
Según Cotrino (2001), Saran & Chaffer (2000) citados por Méndez & Osuna
(2007), uno de los elementos esenciales para controlar la mastitis es el personal encargado del ordeño. Es de vital importancia la capacitación de los
operarios que efectúan el ordeño en todas las prácticas concernientes al cuidado de los animales, manejo adecuado de la leche, aseo y esterilización de
los equipos y en general, todos los aspectos que garanticen la salubridad de
la glándula mamaria asociado con una excelente calidad microbiológica. En
un estudio realizado por Rodríguez (2006), se reportó que las vacas que son
ordeñadas mecánicamente tienen un mayor porcentaje de casos de mastitis
clínica y una elevada proporción de cuartos lesionados por vaca, tal vez, por
el mayor número de factores que facilitan la transmisión horizontal de la
enfermedad (tiempos de ordeño, contactos con pezoneras, salas de espera,
velocidad de ordeño, entre otros).
Entre las prácticas de manejo que se deben realizar en un hato lechero se
encuentra el orden de ordeño, el cual se debe realizar de tal manera que las
vacas sanas se ordeñen al inicio, luego las vacas que presenten un número
elevado de células somáticas, enseguida las vacas con problemas de mastitis. Indiscutiblemente los animales que estén siendo tratados con antibióticos deben ser ordeñados al final (Wolter et al., 2002).
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
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Figura 2. Fuentes de infección para una vaca sana.
Fuente: Duica, 2004
4.3.2. Equipo de Ordeño
Entre los factores que inciden en el RCS se encuentra el funcionamiento
apropiado del equipo de ordeño, el cual debe garantizar un ordeño eficiente,
ocasionando el menor daño posible a los pezones y reducir el contagio con
agentes patógenos responsables de mastitis y utensilios que se manipulen
en esta práctica. El mal estado o diseño de las instalaciones puede causar
graves lesiones a la glándula mamaria, lo que se traduce en un alto recuento
de células somáticas debido a condiciones de mal manejo (Hernández &
Bedolla, 2008).
Según Jones (1998) citado por Curbelo (2007), las disminuciones en
la presión de vacío de la línea de leche pueden causar un incremento en
la tasa de infección de mastitis. El movimiento de gotas de leche por las
fluctuaciones de vacío en el colector de la leche es causante de una infección
de los cuartos sanos con las bacterias provenientes de la leche contaminada.
Cuando las pezoneras se desgastan deben ser sustituidas porque pueden
constituirse en una fuente contaminante de mastitis entre vacas y entre
ordeños.
4.3.3. Desinfección de pezones
Para impedir el contagio de mastitis la práctica que más se utiliza y surte
mayor efecto es la desinfección de pezones con sellador, que funciona
como una barrera protectora creada para minimizar el grado de exposición
a contaminación con bacterias ambientales o a contagios durante y entre
ordeños. El sellador mientras se encuentre húmedo tiene un efecto protector
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de amplio espectro sobre el pezón. Según Ruegg et al. (2000) citado por
Curbelo (2007), la aplicación por rocío es conveniente ya que evita la
contaminación del sellador con la leche pero no es la forma más eficiente,
por lo tanto se recomienda la aplicación del sellador por inmersión.
4.3.4. Tratamiento
La infusión intramamaria de antibióticos es una práctica que de ser mal
utilizada puede causar una mayor contaminación e inclusión de patógenos
ajenos a la infección que está siendo tratada en el interior del pezón. En
investigaciones realizadas por Khaitsa et al. (1998) citados por Curbelo
(2007), se encontró que en hatos donde los animales no recibían ningún
tratamiento con antibióticos para mastitis, ni se les realizaba terapias
selectivas de vacas horras, tuvieron una mayor presencia de mastitis. Aunque
la fase de infección es el factor de mayor incidencia en el elevado RCS
en la leche, el número de vacas infectadas con mastitis afecta de manera
significativa la cifra de células somáticas en el tanque (Alvarado, 2006).
4.3.5. Alojamiento
Por otra parte, se ha señalado que el ambiente del alojamiento tiene una
gran influencia en la salud de la glándula mamaria; no obstante, actualmente
no se ha podido demostrar cual es el sistema apropiado de alojamiento para
reducir la incidencia de mastitis. Si bien, algunos autores han encontrado
que la mastitis es más común en sistemas de estabulación que en sistemas
de pastoreo al aire libre, otras investigaciones han indicado que no existe
una relación entre el sistema de alojamiento y la incidencia de mastitis. La
cama a menudo proporciona la fuente mas adecuada para el desarrollo de
infecciones porque la glándula mamaria tiene contacto directo con agentes
patógenos (Hospido & Sonesson, 2005).
4.4. Nutrición
La mayor influencia en la salud de la glándula mamaria en la vaca y por ende
en la calidad de leche la tiene la alimentación (tipo, calidad y cantidad del
mismo, así como frecuencia del suministro), es así, como una mala nutrición
debida a la deficiencia en los aportes de energía y proteína, debilita los
mecanismos de defensa de la glándula mamaria.
De la misma manera, la escasez de alimento y agua ocasiona disminuciones
en la producción de leche y aumentos proporcionales en los RCS (Curbelo,
2007). En vacas viejas cebadas en ordeño y en vacas secas que presentan
una deficiencia de energía, en el pico de la lactancia o cuando no se les
suministra una cantidad adecuada de proteína vitaminas o minerales,
muestran una menor respuesta del sistema de defensa de la glándula
mamaria (Wolter et al., 2002).
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
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Rajala-Schultz & Saville (2003) citado por Pedraza et al. (2006), reportaron
que existía una asociación negativa entre el recuento de células somáticas y
el contenido Nitrógeno Ureico en la leche (MUN) en hatos de alta producción
lechera, mientras que en los de baja producción no había asociación.
El déficit de Selenio, causa en el organismo una mayor exposición a contraer
mastitis la cual representa alto costo en la producción de leche. El Selenio
es de suma importancia ya que controla radicales libres, mejora la actividad
celular fagocítica, la actividad antibacteriana no inespecífica en suero de
leche y posee una alta capacidad oxido-reductora que protege la glándula
mamaria. Al suplementar Selenio y vitamina E, se disminuye el riesgo de
padecer mastitis clínica. El suministro de Selenio en la dieta de vacas en días
próximos al parto es de gran efectividad para tratar y prevenir la mastitis y
disminuir el RCS en la leche (Perilla, 2006).
En una investigación realizada por Moyo et al. (2005) citado por Heinrichs,
Costello & Jones (2009), donde se suplementó la dieta con vitamina E,
se observó que dicha vitamina está asociada un 14% a la reducción del
riesgo de infección intramamaria, así como, bajos recuentos celulares y una
disminución del riesgo de sufrir mastitis clínica en un 30%. El alfa tocoferol
del plasma ha demostrado ser importante en la disminución de la incidencia
de nuevas infecciones intramamarias.
El zinc esta relacionado con la reducción de células somáticas en algunos
hatos. Es un elemento fundamental para el sostenimiento de la salud y la
integridad del tejido mamario, por su función en la división celular y síntesis
de proteína, es indispensable para la formación de cisteína en la queratina.
El canal del pezón posee una capa de queratina que funciona como red para
las bacterias impidiendo su penetración al interior de la glándula mamaria
razón por la cual el zinc es empleado en la disminución del RCS (Andersson
& León 2000).
El cobre es otro mineral asociado con el funcionamiento del sistema
inmunológico, tiene funciones antioxidantes y puede reducir la mastitis clínica
en novillas. Es un componente de la ceruloplasmina, que facilita la absorción
y el transporte del hierro. Además es considerado una parte importante
de la enzima dismutasa superoxidasa, cuya función es defender las células
de los efectos tóxicos de los metabolitos de oxígeno producidos durante la
fagocitosis. Ambas funciones del Cu están relacionadas con la disminución
de la incidencia de infección intramamaria en el peri parto, especialmente
cuando se trata de mastitis causada por coliformes (Heinrichs, Costello &
Jones, 2009).
En un estudio llevado a cabo en Estados Unidos encontraron que vacas con
bajos niveles de Cobre que recibieron un suplemento entre 40 y 80 ppm
de Cobre quelatado lograron recuentos de células somáticas más bajos en
el calostro que las vacas que recibieron un suplemento de entre 0 y 20
ppm del mismo productos (565.000 y 379.000 vs 1.746.000 y 1.628.000,
respectivamente). Este estudio muestra que las vacas poseen una mayor
susceptibilidad a padecer mastitis si no tienen un nivel adecuado de Cobre
al momento del parto (Andersson & León, 2000), sin embargo, no se han
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FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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publicado estudios donde se demuestre la eficiencia de la suplementación
con Cu sobre nuevos tipos de infección intramamaria o RCS (Heinrichs,
Costello & Jones, 2009).
La vitamina A y los beta carotenos están relacionados con la inmunidad a
mastitis, además ayudan a mantener la salud de las mucosas. No obstante,
la suplementación tanto con vitamina A como con beta caroteno ha mostrado
resultados inconsistentes. Estos nutrientes son esenciales al conservar la
salud del tejido epitelial, además ocupan un papel de suma importancia
generando mayor resistencia a la entrada de patógenos (Heinrichs, Costello
& Jones, 2009).
Los beta carotenos además tiene propiedades antioxidantes reduciendo la
formación de superóxido dentro del fagocito. Dicha función es importante
porque la fagocitosis constituye un mecanismo primario utilizado por las
células fagocíticas para eliminar la bacteria. Al parecer, tanto la vitamina
A como los carotenos tienen efectos estimulantes de la inmunidad celular.
Las vacas que tienen mayor puntuación en el California Mastitis Test (CMT)
presentan bajas concentraciones de vitamina A y beta caroteno en el plasma,
en comparación con las vacas que muestran bajas puntuaciones de CMT y
que no presentan mastitis (Heinrichs, Costello & Jones, 2009).
El manganeso es un mineral de gran importancia en la respuesta inmunológica
ya que disminuye la formación de radicales libres por superóxidos, los cuales
alteran la formación de membranas celulares, ocasionándole daños. Una
investigación realizada en la isla sur de Nueva Zelanda, por Griffith, 2000;
muestra que vacas que fueron alimentadas con una combinación de minerales
Zinc, Manganeso, Cobre y Cobalto quelatados tuvieron poca incidencia de
mastitis y bajos RCS en la leche (Andersson & León, 2000).
4.5. Estrés asociado a las condiciones climáticas
Algunos factores estresantes de mayor importancia son: densidad de
vacas en el establo, cambio constante del personal, mal manejo de las
pezuñas, pérdida de adaptación (Wolter et al., 2002). La inflamación de la
glándula mamaria en vacas afectadas con mastitis bacterial se incrementa
si estos animales son expuestos a condiciones estresantes como largos
desplazamientos hasta la sala de ordeño o en busca de alimento (Severin,
2008).
Según Carrol (1977) citado por Alvarado (2006), en el estudio sobre la
fisiología climática en el ganado bovino, los efectos que tiene el estrés calórico
varían en relación a la raza del animal ya que algunos poseen la capacidad de
adaptarse muy bien a condiciones climáticas extremas a diferencia de otros
que debido a su raza no lo pueden hacer. El estrés calórico es responsable
de la disminución en la producción lechera, afectando de esta manera el
rendimiento productivo de las vacas Al mismo tiempo, Linn (2001) citado
por Alvarado (2006), plantea que cualquier tipo de estrés a largo plazo
puede resultar dañino y lesionar el sistema inmunológico de la vaca.
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Según Linn (2001) citado por Alvarado (2006), el calor que se produce en
áreas húmedas, es el responsable del aumento en el número de bacterias
presentes en el estiércol. Por esta razón las vacas que se encuentran en
establos sucios donde su glándula mamaria está en contacto directo con el
estiércol son más susceptibles a padecer mastitis.
Mahendra et al. (2001) citados por Alvarado (2006), afirman que el recuento
de células somáticas se encuentra gravemente afectado por la estación del
año; siendo más bajo en la época de frio (1.10 x 105 células/ml) y en clima
caliente seco (1.11 x 105 células/ml) respecto a la época de clima caliente
húmedo (2.14 x 105 células/ml). Los RCS son más elevados en climas
templados durante los meses de verano, razón por la cual existe mayor
incidencia de mastitis clínica.
4.6. Edad y etapa de lactancia
Según Harmon (1994); Valde et al. (2004) citados por Curbelo (2007), los
RCS se incrementan con la etapa de lactancia y la edad del animal. En estudios
realizados por Sheldrake et al. (1983) citados por Curbelo (2007), confirman
que la leche de cuartos no infectados con mastitis presenta aumentos en los
RCS a medida que aumenta el número de lactancias. Según Carrión (2001)
citado por Hernández & Bedolla (2008), cuando la vaca se encuentra en
período seco o cuando éste no se realiza adecuadamente es probable que la
primera semana después del parto se exhiban conteos celulares altos.
Según Blowey & Edmondson (1995) citados por Hernández & Bedolla (2008),
en el ordeño de la tarde los recuentos celulares somáticos tienden a ser
ligeramente más elevados que en el ordeño de la mañana. Esto se debe al
intervalo más corto entre ordeños y a la menor producción de leche que se
convierte en un efecto de concentración. Las vacas de final de lactancia y
que se les realizan ordeños interrumpidos tienen altos RCS, en ausencia de
infección subclínica.
Un estudio realizado por Fox (2009), indica que los recuentos iniciales de
células somáticas en novillas son bajos, la gravedad con que se presenta la
mastitis subclínica y el grado de afección de la glándula mamaria es menor
en novillas que en vacas multíparas. Igualmente, en un trabajo realizado
por De Vliegher et al. (2004) citado por Fox (2009), demostraron que los
recuentos de células somáticas durante el peri parto son bajos, lo cual indica
una baja incidencia de mastitis subclínica, que se incrementa al parto y
disminuye a medida que avanzan los días de lactancia.
La salud de la glándula mamaria durante toda la lactancia depende en gran
parte de su estado en el primer mes después del parto, ya que es en este
periodo donde se presenta con mayor frecuencia la mastitis clínica. Las
vacas que presentan mastitis clínica y altos recuentos de células somáticas
durante su primera lactancia, tienen alto riesgo que ambos problemas sean
recurrentes en las próximas lactancias (Nyman et al., 2009).
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4.7. Efecto del número de vacas en ordeño sobre el Recuento de
Células Somáticas
Los RCS de una vaca individual son la mejor forma de identificar las vacas
con recuentos altos de células somáticas. Estos son calculados a partir de la
toma de una muestra de leche de todos cuartos. La suma de los resultados
de los cuartos individuales corresponde a los recuentos de células somáticas
de toda la glándula mamaria. La comparación a nivel de cuartos es una
medida ampliamente utilizada que permite conocer el estado de salubridad
de la glándula mamaria y la calidad de la leche que produce (Hernández &
Bedolla, 2008).
Cuadro 5. Ejemplo de un conteo de células somáticas por cuarto.
Cuarto
Delantero derecho
Trasero derecho
Células/ml de leche
45,000
160,000*
Delantero izquierdo
38,000
Trasero izquierdo
53,000
Fuente: Hernández & Bedolla, 2008 *cuarto susceptible de mastitis
Es de gran importancia económica que los tratamientos para la mastitis
clínica disminuyan el número de agentes patógenos, puesto que la infección
de la glándula mamaria es el factor más relevante que incide en el recuento
de células somáticas de la leche. Entre mayor sea el número de vacas con
mastitis, mayor será el conteo de células somáticas presentes en la leche
del tanque. La evaluación periódica del conteo de células somáticas que
se realiza de manera individual, permite conocer el estado de salud de
la glándula mamaria de cada uno de los animales del hato (Hernández &
Bedolla, 2008). La reducción del número de bacterias tiene gran incidencia
sobre las decisiones de descarte de vacas individuales a temprana edad y
sobre la difusión de la mastitis en el todo el hato (Galicia de León, 2004).
El análisis del RCS individual en las vacas permite conocer la naturaleza de
la infección. Al momento de tomar alguna medida se requiere del análisis
,por lo menos, de tres muestras sucesivas; además es conveniente que
las muestras sean analizadas periódicamente mínimo una vez al mes, así
mismo, se hace necesario revisar los RCS de los últimos tres meses junto
con el promedio de los recuentos de la lactancia. El aumento de células a
nivel de hato, se incrementa por el mayor índice de vacas con altos recuentos
individuales (Hernández & Bedolla, 2008).
Con el propósito de obtener el máximo beneficio económico, los animales
deben ser muestreados con frecuencia a fin de estudiar los recuentos
promedios y no los resultados individuales. El resultado de un solo recuento
celular alto es un indicador del actual estado de infección en que se puede
encontrar un hato. No obstante la realización de exámenes posteriores,
puede reportar bajos RCS (Hernández & Bedolla, 2008).
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Los análisis de recuento de células somáticas a nivel individual, la prueba
de mastitis de California y el recuento de células somáticas en tanque son
aprovechados para diagnosticar en un hato lechero si hay o no mastitis. La
prueba CMT identifica las vacas afectadas con mastitis subclínica, el RCS nos
permite saber el grado de infección de la glándula mamaria a través de la
cantidad de células somáticas presentes y el recuento de células somáticas
en tanque (BTSCC, por sus siglas en inglés) permite conocer el estado de
mastitis de un hato para ejercer control sobre el problema, el grado de
mastitis subclínica es uno de los parámetros para medir la calidad de la leche
(Cerón, Agudelo & Maldonado, 2007).
Son muchos los hatos donde se utiliza la prueba de CMT como seguimiento
regular de los animales en la detección de mastitis subclínicas y permite
conocer el grado de infección de cada uno de los cuartos de cada una de las
vacas, de manera individual. La prueba de BTSCC, se utiliza para valorar el
estado de sanidad de todo hato, esta prueba es más eficiente que el CMT
y para realizar una continua inspección de las empresas lecheras (Cerón,
Agudelo & Maldonado, 2007).
El RCS en el tanque permite precisar los mínimos valores de células
somáticas que son permitidos para la leche de tanque, teniendo en cuenta
que el porcentaje de vacas que presentan cuartos positivos al CMT es bajo,
lo que concuerda con bajos recuentos de células somáticas. Estos valores
son de suma importancia en cuanto al control de la calidad de la leche y
del cumplimiento de los requisitos para su comercialización. El recuento
de células somáticas en tanque es una herramienta de mucha utilidad que
permite conocer el porcentaje de animales que están infectados con mastitis
subclínica en una finca (Cerón, Agudelo & Maldonado, 2007).
En varios estudios realizados a nivel individual en vacas se ha reportado
que el aumento de la mastitis está condicionado en gran parte por el
aumento en el recuento de células somáticas ya que éste es un indicador
de la enfermedad. Así mismo, los valores de recuentos de células somáticas
individuales corresponden al conteo de células de la totalidad de la glándula
mamaria, sin embargo, alguno de los cuartos puede presentar altos o bajos
recuentos de células somáticas, alterando el promedio esperado para el
animal (Peeler et al., 2003).
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5. ESCORE DE CÉLULAS SOMÁTICAS (ECS)
Debido a que el RCS no posee una distribución normal, la transformación
logarítmica del escore lineal de células somáticas homogeniza las varianzas.
La presentación de los datos en una escala numérica simple permite entenderlos con más facilidad, además relaciona directamente las perdidas en la
producción de leche ocasionadas por la mastitis con el escore lineal.
El escore de células somáticas clasifica los valores de RCS en 10 categorías,
es una técnica de gran importancia porque se encuentra estrechamente relacionada con la producción de leche. Por cada punto que aumenta el ECS la
producción de leche disminuye en más o menos 200 litros, además es una
técnica que tiene mayor precisión que el RCS para detectar la presencia de
una infección intramamaria (Jiménez, 2008).
Cuadro 6. Relación entre el Escore de Células Somáticas (ECS) y el Recuento de Células Somáticas (RCS).
ECS
Punto medio RCS (1000's/ml)
Rango
0
12.5
0- 17
1
25
18- 34
2
50
35- 70
3
100
71- 140
4
200
141- 282
5
400
283- 565
6
800
566-1.130
7
1600
1.131-2.262
8
3200
2.263-4.525
9
6400
4.526
Fuente: NMC, 1996
La evaluación del estado de los hatos es más confiable si se realiza con el
ECS puesto que los altos RCS alteran este valor para el hato en general,
cuando en la evaluación se incluyen vacas individuales. “El ECS se ajusta a
modelos más simétricos y conocidos como la campana de Gauss a diferencia
de la distribución del RCS que es muy sesgada” (Jiménez, 2008).
Concordando con un estudio realizado por Carneiro De Paula et al. (2004),
con el objetivo de estimar los componentes de variación para el recuento
(RCS), el escore (ECS) y el logaritmo del recuento de células somáticas
(L2CS) y comparar las tres expresiones del RCS (recuento, escore y logaritmo) para leche de tanque; reportaron que los coeficientes de variación y
desviación estándar son menores para ECS y L2CS con respecto al RCS, y
los coeficientes de determinación de l ECS Y L2CS son mayores. Además,
los autores indicaron que el uso del ECS y L2CS son más precisos que los
RCS en los análisis estadísticos.
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En un estudio realizado por Carneiro De Paula et al. (2004), en el cual fueron analizadas 257.540 muestras de leche de tanque, que provenían de
rebaños de 18 industrias lácteas, asociadas al Programa de Análisis de Rebaños Lecheros de Paraná (Brasil), durante el período de enero de 1999 a
noviembre del 2001, con el objetivo de evaluar los factores que influencian
los conteos de células somáticas en muestras de leche de tanque y analizar su distribución en las categorías del escore de células somáticas. En el
estudio se incluyó en el modelo los efectos micro-región, efecto de año y
mes del análisis, efecto de edad de la muestra y efecto de rebaño los cuales
fueron significativos sobre el conteo de células somáticas encontrando gran
variación en las medias de RCS en leche de tanque entre micro-regiones,
para el efecto mes de análisis, el mayor valor se obtuvo en enero y el menor
valor en septiembre concordando con lo reportado en otros estudios donde
se observaron mayores RCS en los meses de verano; en cuanto al efecto
año de análisis, el mayor promedio para CCS se observó en el año 2001. Los
autores indican que el nivel de la producción y el tamaño del rebaño afectan
los conteos de células somáticas, de las muestras analizadas el 64,6% se
encontraron con un escore de cinco o mayor de cinco.
Pohl, Carneiro De Paula & Cotarelli De Andrade (2004), realizaron un estudio
similar en el cual se obtuvieron resultados semejantes. Fueron utilizadas
262.973 muestras de leche de tanque procedentes de rebaños inscritos en el
Programa de Análisis de Rebaños Lecheros de Paraná y encontraron que los
factores rebaño absorbido, micro-región, año de análisis, mes de análisis y
edad de la muestra incluidos en el modelo, influencian de manera significativa el escore de células somáticas, en lo que respecta a la distribución de las
muestras encontraron que el 80,5% de las muestras analizadas presentaron
un escore lineal de cuatro, cinco y seis lo que indica un alto nivel de infección
en los rebaños analizados que afecta la calidad del producto y la rentabilidad
obtenida en el mismo.
Berry et al. (2007), realizaron un estudio con el fin de determinar la relación
existente entre los parámetros condición corporal, peso corporal y salud de
la glándula mamaria como indicadores del ECS y mastitis clínica, utilizaron
datos de 2635 lactancias de 523 vacas de la raza Hostein-Friesian y 374
Jersey en pastoreo. Los autores encontraron que existe una relación entre
el incremento en la condición corporal y un bajo escore de células somáticas
en vacas primerizas y de segundo parto, así como un elevado ECS en vacas
de tercer parto.
El peso corporal está estrechamente relacionado con el ECS, aunque el efecto es más pronunciado en vacas Jersey que en Holstein-Friesians. Al Incrementar el peso corporal y perder peso en la lactancia temprana disminuye el
ECS, existe además una menor probabilidad de obtener un alto RCS cuando
se realizan muestreos diarios. Diversas variables de peso corporal se relacionan con una mayor probabilidad de padecer mastitis clínica. Sin embargo,
la mayoría de las asociaciones con salud de glándula mamaria carecen de
trascendencia biológica dentro de los alcances de condición corporal y peso
corporal (Berry et al., 2007).
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Los factores más relevantes que afectan los promedios de ECS a través de la
lactancia son: raza, época del año y el parto. Los cuales están relacionados
con la reproducción y la condición corporal, las vacas jóvenes en periodo
de lactancia media con buena condición corporal presentan un bajo ECS a
diferencia de las vacas viejas (Berry et al., 2007). Así mismo, indican que
si el ECS o la mastitis clínica son utilizados como indicadores de salud de la
glándula mamaria o del estado inmunológico, no existe ninguna relación entre la condición corporal y la capacidad para combatir un ataque bacteriano.
El escore de células somáticas es afectado durante el período de lactancia
por la condición corporal y peso corporal según el estado reproductivo (fase
de la gestación), lo cual depende de la raza del animal y del intervalo entre
partos.
Durante la lactancia temprana no hay una asociación importante entre el
peso corporal y un ECS alto. Con respecto a los altos ECS, las vacas jersey
al parecer son más resistentes que las Holstein Friesian, lo cual puede estar
relacionado con la resistencia individual de los animales a la mastitis clínica,
tal vez, por la homeostasis, menor producción y mayor resistencia anatómica de la raza Jersey.
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6. TÉCNICAS DE LECTURA PARA EL RECUENTO DE
CÉLULAS SOMÁTICAS EN LECHE
Existen diferentes procedimientos para realizar el conteo de células somáticas: a través de métodos físicos, químicos o biológicos, los cuales difieren en
precisión, confiabilidad, practicidad y costo. Dichas técnicas constituyen un
importante indicador directo de la salud de la glándula mamaria e indirecto
de la calidad e higiene de la leche, es también útil en los programas de control de mastitis. Entre las pruebas más utilizadas se encuentran:
6.1. Pruebas químicas
Entre ellas se encuentran: conductividad eléctrica de la leche, papel indicador de mastitis y la prueba de Whiteside.
6.1.1. Conductividad eléctrica de la leche
Se basa en el aumento de conductividad eléctrica de la secreción de láctea debido a que en la leche producida por vacas con mastitis se presenta
un aumento de la permeabilidad de los capilares sanguíneos, se destruyen
las uniones celulares y los sistemas de transporte iónico ocasionando un
alto contenido electrolítico fundamentalmente iones de sodio y cloro como
resultado de la lesión en el tejido glandular. Sin embargo, la prueba tiene
limitaciones que restringen su uso en vacas de alta producción mantenidas
en pequeños establos, o en animales con dietas con sales especiales (Moraleda, 2005).
La técnica se ha desarrollado como un método para monitorear el estado de
la mastitis en la vaca y hace parte de ciertos equipos de ordeño computarizados, asimismo, se usan contadores portátiles, permitiendo el monitoreo
individual a nivel de cuarto. Esta prueba es muy variable y hasta cierto
punto subjetiva de baja confiabilidad, pues en ocasiones genera un elevado
número de falsos positivos o de falsos negativos por lo que no es recomendable como prueba única (Moraleda, 2005).
6.1.2. Papel indicador de mastitis
Este método consiste en hacer caer algunas gotas de leche o impregnar la
punta del pezón sobre un papel filtro. Si se presenta una coloración correspondiente a un pH igual o superior a 7 se considera una leche sospechosa de
estar infectada. La prueba detecta aproximadamente el 50% de las leches
contaminadas, pero presenta alta variabilidad por el manejo del papel y las
condiciones ambientales (Moraleda, 2005).
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6.1.3. Prueba de Whiteside
Consiste en mezclar la leche con una solución de NaOH al 4% lo que causa
una gelificación de la leche que a su vez forma grumos visibles. A mayor
número de células somáticas se presenta mayor formación de grumos. Es
una prueba subjetiva e imprecisa, porque no se ha demostrado plenamente
que las células somáticas por si solas ocasionen la gelificación (Moraleda,
2005).
6.2. Pruebas biológicas
Dentro de estas se encuentran: el California Mastitis Test, prueba de Catalasa, prueba de Wisconsin, prueba de CAMP y el monitoreo de células
somáticas, así como el diagnóstico bacteriológico por los métodos de aislamiento, cultivo, tinción, bioquímica e identificación específica de patógenos
(Moraleda, 2005).
6.2.1. California Mastitis Test (CMT)
Es una prueba sencilla de bajo costo, muy útil para detectar infecciones subclínicas (Gamarra & Salazar, 2001). Permite determinar el grado de afección
en los cuartos individuales de vacas lecheras y detectar más de un 75%
casos de mastitis subclínica. Sin embargo, no permite establecer el efecto
en la producción y composición de la leche puesto que no suministra un resultado numérico, sino un indicio subjetivo de si el recuento es alto o bajo.
El reactivo empleado es el lauril sulfato de sodio al 3%, el cual posee un
tenso-activo que reduce la tensión superficial de los leucocitos presentes
en la leche mastítica, provocando una ruptura de los leucocitos liberando el
ADN, que al combinarse con agentes proteicos de la leche forma una gelatina (Moraleda, 2005). Cuando existe un alto número de células en la muestra
de leche se libera una mayor concentración de ADN y por ende, se desarrolla
una sustancia gelatinosa, lo que representa un grado elevado de inflamación. Esta prueba permite evaluar cualitativamente cada cuarto individual,
al mezclar el reactivo (púrpura de bromocresol) con igual cantidad de leche
en una paleta con cuatro pozos independientes y determinar la respuesta
inflamatoria con base en la viscosidad del gel que se forma (Hernández &
Bedolla, 2008).
La prueba puede presentar falsos positivos en vacas con menos de ocho días
posparto o con lactancias que superen los diez meses. En estos casos, la reacción de viscosidad es análoga en todos los cuartos, producto del aumento
de las células epiteliales presentes en la leche, condiciones que fisiológicamente se dan en estos dos períodos de lactancia (Moraleda, 2005).
El CMT es una prueba de campo simple y de rápida lectura para detectar la
presencia o no de mastitis, mediante la estimación del número de células somáticas presentes en la leche. Esta técnica se relaciona directamente con el
RCS. Por ejemplo, para un resultado negativo del CMT el número de células
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somáticas en leche le corresponde valores de 0 - 200.000 (células por ml)
y para el nivel 4 de mastitis clínica del CMT el número de células somáticas
esta por encima de 5.000.000 (células/ml), como se muestra en el cuadro
7. Los altos recuentos de células somáticas son responsables de númerosas
pérdidas económicas a causa de la disminución en la producción lechera,
además afectan el potencial de industrialización de la leche y por ende el
precio de comercialización de la misma.
Cuadro 7. Relación entre el CMT y el RCS según el grado de reacción.
Grado
Tipo de Relación
Células / ml
Negativo Mezcla se mantiene líquida
< 200.000
Trazas
Ligera viscosidad
200.000 - 500.000
1
Mezcla viscosa no adherida al fondo
400.000 -1.500.000
2
Mezcla viscosa que se adhiere al
fondo
800.000 - 5.000.000
3
Mezcla muy viscosa fuertemente adherida que forma un solo grumo.
>5.000.000
Fuente: Cotrino, 2004
6.2.2. Prueba de Wisconsin
Es utilizada para evaluar el contenido de células somáticas en muestras de
leche fresca o leche de tanques de enfriamiento, igualmente para muestras
de vacas individuales. Se emplea una solución parecida a la que se utiliza en
la prueba de California, no obstante, a diferencia de esta última, en que los
resultados se calculan cuantitativamente dependiendo de la viscosidad, en
la prueba de Wisconsin, se emplea una tarjeta lectora con diferentes grados
prefijados para una puntuación fija. Los hatos con baja puntuación (entre
3 y 12) se consideran en buenas condiciones o regulares, mientras que los
hatos con puntuaciones altas (>12) requieren atención inmediata. El total
de la puntuación es de 35 con 2.280 células somáticas/ml (Hernández &
Bedolla, 2008).
6.3. Métodos de conteo electrónico celular
Actualmente los equipos electrónicos son utilizados universalmente, más
aún, en laboratorios de control lechero donde se procesan cientos de muestras o en los dedicados al diagnóstico o investigación de la mastitis, en
ellos, se utilizan aparatos de recuentos celulares como el Fossomatic (Foss
Electric, Dinamarca) y el Counter Coulter (Coulter, Inglaterra) (Hernández
& Bedolla, 2008).
6.3.1. Fossomatic
Este equipo es un contador específico de ADN basado en un principio óptico
de tinción fluorométrica del material nuclear; se utiliza para determinar el
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contenido de ADN que está estrechamente relacionado con el número de
células presentes en la muestra de leche inicial. La muestra consiste en la
filtración de una solución de leche mezclada con detergente (Triton X-100
EDTA) que pasa a través de una membrana fina. El fundamento de la prueba
consiste en que el bromuro de etidio penetra al interior de la célula creando
un complejo fluorescente con el ADN nuclear, con lo cual, cada célula emite
un impulso eléctrico que se amplifica y se registra en instrumentos computacionales (Hernández & Bedolla, 2008).
6.3.2. Cell Counter
Este equipo cuenta el número de impulsos eléctricos que resultan de las partículas que atraviesan dos electrodos pareados. En este caso las partículas
son células de un diámetro determinado, pero en el rango de recuento ingresarían otras partículas, aumentando levemente el conteo en comparación
con el Fossomatic (Hernández & Bedolla, 2008).
6.3.3. Test DCC (DeLaval Direct Cell Counter)
Es un equipo portátil que posee un medidor óptico de células somáticas de la
leche, permite evaluar el contenido de células somáticas a nivel de vaca y la
leche del tanque de acopio (Bedolla, Castañeda & Wolter, 2007). Es utilizado
cuando se requiere hacer un RCS rápido en campo pues permite ejecutar en
menos de 1 minuto un conteo en un rango entre 10.000 a 40.000.000 de
cél/mL (Moraleda, 2005).
Consta de una cámara digital que utiliza casettes los cuales absorben pequeñas cantidades de leche mezclándose al interior con reactivos que llegan
al núcleo de las células somáticas, lo cual permite su conteo individual, mediante un sensor de fluorescencia. En la pantalla del equipo aparece la lectura del número de células somáticas en la leche, su principio es equivalente
al utilizado por el equipo Foss y proporciona datos puntuales sobre el estado
de salud de la glándula mamaria (Bedolla, Castañeda & Wolter, 2007).
6.3.4. Citometría de flujo
Es un método que requiere un alto número de células para realizar un estudio individual, de este modo permite obtener información acerca de distintas
poblaciones celulares. Esta técnica es de rápida lectura y facilita el análisis
de un elevado número de células (10.000 a 50.000 para cada anticuerpo
monoclonal), suministra un registro computarizado de los resultados (Moraleda, 2005).
Los citómetros de flujo analizan células en suspensión que interfieren en
forma individual con una fuente de luz. Al encontrarse cada célula con la luz
láser se presentan señales luminosas que permiten distinguir poblaciones
celulares dentro de la muestra analizada, bien sea por su tamaño relativo,
por sus granulaciones o por su reactividad con fluorocromos, previa incubaFACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
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ción con distintos anticuerpos monoclonales. De otro lado, la citometría de
flujo posibilita la cuantificación de ADN y la determinación de la actividad de
diversas poblaciones celulares. En diferentes investigaciones de poblaciones
celulares, involucradas en el proceso inflamatorio de la glándula mamaria,
la técnica con citometría de flujo ha sido ampliamente utilizada (Moraleda,
2005).
Figura 3. Esquema del Citómetro de flujo.
Fuente: Moraleda, 2005
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7. PÉRDIDAS ECONÓMICAS POR
ALTOS RCS EN LECHE
La mastitis bovina o inflamación de la glándula mamaria es la enfermedad
más costosa, responsable de grandes pérdidas económicas en los hatos lecheros del mundo, debido a que ocasiona disminución en la producción,
de la calidad de la leche y en consecuencia, reduce su precio e incrementa
los costos de producción del hato. Estas pérdidas se hacen más evidentes
cuando se corre con gastos en tratamientos veterinarios destinados a la prevención, tratamiento y control de la enfermedad y ocasiona descartes tempranos de animales con buen potencial genético para producción lechera.
Ocupa el primer lugar en las pérdidas de la industria lechera de los Estados
Unidos porque constituye el 70% de los gastos de los hatos lecheros en este
país (Bedolla & Ponce, 2008). La presencia del Staphylococcus ocasiona incremento en el conteo de células somáticas, afectando la calidad de la leche
para su comercialización (Ramírez, 2002).
Las principales pérdidas económicas ocasionadas por la mastitis se clasifican
en siete categorías: disminución de la producción lechera, descarte de leche,
altos costos de reposición de animales, dinero invertido en medicamentos,
instalaciones y mano de obra adicionales para el tratamiento de vacas infectadas con mastitis, honorarios del veterinario, pérdidas de unidades de
producción (vacas infectadas) y de la genética de los animales (Bautista &
Uribe, 200).
A partir del conteo de células somáticas se pueden calcular las pérdidas económicas por disminución de la producción de lechera. Además, a los costos
de la mastitis se deben incluir la leche descartada, y para casos agudos las
pérdidas de cuartos afectados o de la totalidad de los animales. A largo plazo
se presentan pérdidas por disminución en las posibilidades de selección de
animales para reemplazo atribuidos a los descartes forzados.
En un estudio realizado por Carrión (2002) citado por Bedolla & Ponce de
León (2008), en hatos lecheros de los estados de Michoacán y Jalisco, Méjico, para 18 vacas en producción las pérdidas económicas a causa mastitis
subclínica por la disminución en la producción de lechera, para un promedio
de producción de 7.000 Kg. de leche vaca/ año y 1.000.000 células / ml las
pérdidas en producción son de 1260 kg de leche/vaca, para 500.000 células
/ml las pérdidas en producción son de 420 Kg. de leche.
En los Estados Unidos es muy útil la herramienta Dairy Herd Improvement
(DHI) para realizar el seguimiento y evaluación de los programas de control
de mastitis de hatos lecheros y de muestras de leche tomadas de los tanques
de enfriamiento. Cuando el valor aumenta se entiende que hay un incremento en la cantidad de animales afectados (Bautista & Uribe, 2000). Así, al
identificar las vacas problema que tienen altos ECS como consecuencia de
la mastitis se proponen opciones de manejo que contribuyan a disminuir el
recuento y reducir las pérdidas económicas por mastitis (NMC, 1996).
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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Cuadro 8. Cambio estimado en producción de leche asociada con un aumento en el Escore de Células Somáticas (ECS).
Lactación
Media ECS
Media RCS
(1000's/ml)
Disminución en la Producción
de leche (lbs./305 días)
Lactancia 1
Lactancia 2
0
12.5
---
---
1
25
---
---
2
50
---
---
3
100
200
400
4
200
400
800
5
400
600
1200
6
800
800
1600
1600
1000
2000
7
Fuente: Adaptado de Universidad de Wisconsin
Los altos recuentos de células somáticas en presencia de mastitis ocasionan
numerosos cambios en la composición química de la leche principalmente
disminución de algunos componentes como el calcio, fósforo, proteína y grasa; produciéndose un aumento en la concentración de enzimas en leche, con
lo cual se reduce la síntesis de proteína y lactosa, además de alteraciones
en la caseína por la acción de los microorganismos y enzimas proteolíticas
que producen los leucocitos y bacterias contribuyendo al deterioro del producto. Esto influye de manera negativa en el precio de la leche por calidad.
7.1. Pérdidas económicas asociadas a mastitis clínica
Los costos de la mastitis clínica dependen de la gravedad con la que se
presente la enfermedad, la velocidad con la que responda al tratamiento, la
duración del tratamiento, la cantidad de leche que se desecha por anormalidades y los residuos de antibióticos en la leche. Las pérdidas económicas
por mastitis clínica varían dependiendo del país y los costos de producción
(Bedolla & Ponce de León, 2008).
•
•
•
•
•
44
Disminución de la producción lechera por alteraciones y cambios en su composición a causa de altos RCS.
El impedimento de comercialización de la leche de los animales en
fermos y de leche con residuos de antibióticos.
Costos de tratamientos veterinarios.
Baja productividad por descartes tempranos y animales con recuperaciones demoradas.
Aumento del trabajo y de la mano de obra para el mayor cuidado requerido por los animales enfermos.
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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7.2. Pérdidas ocasionadas por mastitis subclínica
Según Bedolla & Ponce (2008), la mastitis subclínica es la forma más peligrosa de mastitis, su frecuencia es de 20 a 50 veces mayor a la mastitis
clínica, porque no presenta sintomatología definida que permita su diagnóstico oportuno, produce disminución de la productividad en forma recurrente
con alteraciones en la leche, en la mayoría de los casos difíciles de detectar.
Como consecuencia del diagnóstico tardío de la enfermedad es difícil que
los animales respondan positivamente al tratamiento. El mayor número de
casos de mastitis obedece a mastitis subclínica, esta es responsable de una
disminución del 5% en la producción de leche por cada 100.000 células somáticas/ml que se incrementen en la leche.
La mastitis subclínica es responsable de la mayor cantidad de pérdidas de
leche, ya que se presenta con mayor frecuencia que la mastitis clínica, estas
pérdidas se prolongan por un largo periodo afectando la productividad de
los animales infectados. Las medidas de tratamiento y control de este tipo
de mastitis se deben realizar rigurosamente ya que las vacas enfermas de
mastitis subclínica constituyen una fuente de infección para los animales
sanos en el hato. Las falencias a nivel del plan de prevención, control, tratamiento de esta enfermedad y la falta de alternativas de tipo terapéutico se
ven reflejadas en grandes pérdidas económicas, cuyo resultado es la baja
producción de leche y mala calidad de la misma, a la vez de la reducción en
la rentabilidad de la explotación (Valera et al., 2005).
Lorbacher citado por Ceron et al. (2007), mencionó que más del 40% de los
casos de mastitis que se presenta en un hato corresponden a mastitis de
tipo subclínico a la cual se le atribuyen las pérdidas económicas. Se estima
que en cada hato se pierde el 12% de la producción de leche al año a causa
de esta enfermedad, solo en Estados Unidos las pérdidas en producción de
leche atribuibles a la mastitis son aproximadamente de 2 billones de dólares.
Cuadro 9. Relación entre conteo de células somáticas (RCS) medido en
la leche del tanque a granel, pérdida de la producción y prevalencia de las
mastitis subclínicas en el hato.
Conteo de
células
somáticas
Cuartos
infectados
Pérdida de
producción
(%)
Mastitis
subclínica
< 200 000
6%
0-5
Cerca de cero
200.000 – 500.000
16%
6-9
Unos pocos casos
500.000 – 1.000.000
32%
10-18
Diseminada
48%
19-29
Epidémica
> 1.000.000
Fuente: Salinas & Rivera, 2006
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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El recuento de células somáticas para la leche “normal” es casi siempre menor a 200.000 células / ml (menor para vacas de primera lactancia), mientras que hatos con un RCS mayor de 200.000 células/ml indican la presencia
de mastitis subclínica. Los hatos que tienen RCS por debajo de 400.000
células/ml son característicos de los hatos que emplean buenas prácticas de
manejo, pero que no se centran en el control de la mastitis. Respecto a los
hatos que cuentan con un buen plan de manejo para controlar la mastitis
presentan RCS menores a 100.000 células/ml. Los Recuentos de células somáticas por encima de 500.000 células/ml demuestran que un tercio de las
glándulas mamarias se encuentran contaminadas y que la pérdida de leche
causada por mastitis subclínica es mayor de 10% (NMC, 1996).
Cuadro 10. Pérdidas económicas y su relación con el RCS y CMT.
Pérdidas económicas
CMT
1%
RCS
ECS
# total
0
1
25.000
3,7%
1
2
50.000
11%
2
5
400.000
28%
3
6
800.000
4
9
6.400.000
48%
Fuente: Cogancevalle, (sf)
Cuadro 11. Relación entre el RCS de tanque, el porcentaje de cuartos infectados y el porcentaje de pérdidas en la producción de leche.
RCS Tanque
% cuartos infectados
% pérdidas en la producción
200.000
6
0
500.000
16
6
1.000.000
32
18
48
29
1.500.000
Fuente: Laranja & Veiga, 2000
Según Laranja & Veiga (2000), los factores que tienen mayor efecto sobre el
recuento de células somáticas se deben al nivel de infección de la glándula
mamaria en el hato. En algunos estudios se menciona que existe elevada
relación entre el RCS de tanque y el porcentaje de cuartos infectados en el
hato. El aumento del conteo en tanques se refleja directamente en el aumento del número de cuartos infectados, lo que eleva las pérdidas económicas por producción lechera.
De las tablas se deduce que si el ECS aumenta, el porcentaje de vacas y
cuartos que están infectados también aumenta, en tanto que, la producción
de leche disminuye. Por otra parte, las mermas en la producción implican
la duplicación del recuento de células somáticas. Así mismo, si se realizan
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CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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conteos para una vaca individual en un mes, se estima que el ECS no se
correlaciona bien con la pérdida de producción láctea en el mismo período.
Sin embargo, la estimación de las pérdidas se puede realizar si se utiliza
el promedio de ECS del total de lactancias de una vaca o el ECS promedio
mensual de un hato completo (NMC, 1996).
Rodríguez (2006) señala que sobre el comportamiento de la mastitis bovina
en algunos hatos de la Sabana de Bogotá, los autores encontraron en cuanto
al efecto de la infección sobre la producción, que se presentaron perdidas
hasta de 5 litros diarios por vaca afectada teniendo como indicador el CMT y
el pesaje de la leche, además de una disminución en la producción de leche
por cuarto afectado de: 0,42; 0,90; 1,47; y 2,40 litros cuando se relacionaban con las lecturas en CMT de trazas, 1, 2 o 3. Los autores señalan que
a partir de los resultados acumulados se pueden estimar las pérdidas por
hato.
Cuadro 12. Estimación de las pérdidas diarias en la producción de leche
debidas a la mastitis en 50 vacas.
Disminución
diaria en la
producción
(1Lt)
Cuartos afec- N° aprox.
tados (%)
Cuartos
afectados
Pérdida
producción
(Lt)
0,4236
4,82
10
CMT-1
0,9
6,32
13
11,7
CMT-2
1,747
5,78
12
20,96
CMT-3
2,405
2,84
6
14,43
Mastitis
Clínica
2,405
2,22
4
9,62
Cuartos
Perdidos
2,7843
1,6
3
8,35
23,58
48
69,3
CMT (Trazas)
Total
Fuente: Rodríguez, 2006
4,24
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CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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8. PERSPECTIVAS DE USO DEL RECUENTO DE
CÉLULAS SOMÁTICAS (RCS)
La producción de leche en la actualidad exige calidad, bajos costos de producción y alta competitividad, estos factores pueden ser analizados y potencializados a través de las buenas prácticas de producción, que deben incluir
actividades para la prevención de problemas sanitarios, en especial de mastitis, así mismo, evaluar oportunamente el estado de la glándula mamaria.
El recuento de células somáticas a nivel de tanque o individual ofrece una
inigualable oportunidad, para que mediante el empleo de herramientas de
diagnóstico confiables, se puedan tomar medidas de monitoreo y control, y
generar medidas que disminuyan los riegos de lesiones de la glándula con
el objetivo de reducir las pérdidas económicas por mastitis subclínicas, las
cuales generan las mayores pérdidas en los sistemas de producción lechera.
El RCS debe ser un método rutinario de seguimiento de los niveles de infección, solo así, se podrá en forma oportuna intervenir adecuadamente para
favorecer la salud animal y la rentabilidad del productor.
48
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RECUENTO DE
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CELULAS SOMÁTICAS (RCS) Y LA CALIDAD DE LA LECHE
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