ALTERACIONES MORFOLOGICAS E HISTOQUIMICAS DEL RIÑON

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ALTERACIONES MORFOLOGICAS E HISTOQUIMICAS DEL RIÑON ISQUEMIADO
Dres, Carlos A . S ó e n z , Rúrico Ibarra.
La magnitud del daño que sufre el riñón cuando es privado de su circulación es un p r o blema que se plantean a menudo el urólogo y el cirujano vascular.
El primero para realizar intervenciones conservadoras sobre el riñón, sus vasos o la vía
excretora (nefrostomlas, nefrectomlas parciales, plásticas, etc.); el cirujano vascular
cuando debe clampear la aorta por encima del nacimiento de las arterias renales.
Eisendrath yStrauss en 1910 (5) estudiaron las alteraciones histológicas producidas por la
isquemia. Donnet y Pruneyre en 1953 (4) se ocuparon de los transtornos funcionales; y
en los últimos años como consecuencia de la posibilidad del iransplante renal gran n ú mero de autores han reactualizado el tema.
Jones, Politano(7) y C a l n e (2) aseguran Ja restitución funcional de ríñones kquemiados
hasta 60 minutos a la temperatura del cuerpo.
Es lógico que la a n o x i q renal produzca transtornos hemodindmicos con interferencias
en el sistema enzimdtico, los cuales serian causa de daño celular posterior al restablecimiento del flujo sanguíneo normal; el demostrarlo correlacionándolo con el tiempo
de isquemia ha sido el objeto de este trabajo.
M a t e r i a l y M é t o d o : Se utilizaron 17 perros distribuidos en dos grupos.
Primer grupo: Bajo anestesia general se real izó nefrectomla en dos perros de 13 y 15 Kgs.
de peso corporal. Los órganos se fijaron y se enviaran al laboratorio para estudio del
riñón normal.
Segundo grupo: En 15 perros con un peso corporal medio de 15 Kgs. se realizó bajo
anestesia general:
a) laparotomía mediana.
b) biopsia de ambos riñones.
c) liberación y denervación de ambos órganos.
d) clampeo de los vasos del pedículo y del ureter del riñón izquierdo durante períodos
de 15, 30, 45 y 6 0 minutos (en 3 , 3 , 3 , y 6 anímales respectivamente).
El órgano permaneció ese tiempo " i n s i t u " , a la temperatura del cuerpo. El riñón d e recho actuó como control.
e) Cierre de la pared abdominal por planos.
En ese grupo se repitieron las biopsias a c i e l o abierto a los siete días de la isquemia.
A n e s t e s i a : Se utilizó pentobarbital sódico intravenoso en dosis de 32 mgrs. por K g .
de peso corporal.
A l i m e n t a c i ó n : A todos los animales se les suministró alimento desecado de composición química uniforme y a g u a .
E s t u d i o h i s t o l ó g i c o e h i s t o q u i m i c o : Previa fijación en formol y montaje
en parafina se cortó y coloreó con H. E. En a'gunos preparados se usó el P.A. S.
El material para histoquímica se fijó de inmediato en formol c a l c i o (pH7. 2 - 7 - 4 ) . a 4oC
por un corto período ( 1 2 - 1 5 horas) (8).
De a l l í pasó a baño de goma ardbiga sucrosa fría por tiempo variable hasta 15 días. Se
cortó por congelación lenta y se recogió en agua destilada fría.
Para cada enzima en particular se u t i l i z ó el método que se detalla a continuación:
Fosfata a l c a l i n a , método de G o m o r i , substrato p-glicerofosfato de sodio a 37°C durante
5 - 8 - 1 0 minutos (6).
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Fosfatasa á c i d a , método del metal s a l , substrato y B - g l i c e r o f o s f a t o de sodio a 3 7 ° C
durante 2 5 - 3 0 - 4 0 minutos.
A d e n o s i n e trifosfatasa (ATP) método d e W a s c h t e i n y M e i s e l , substrato adenosintrifosfato
a 3 7 ° C durante 10, 2 0 y 4 0 minutos,
Dífosforopiridl n nucfeotidasa ( D P N H C . reductasa) método de N O V I K O F F , substrato
difósforopiridln n u c l e ó t i c o a 3 7 ° C durante 10, 15 y 2 5 minutos.
Esterasas inespecíficas, método del o C naftil a c e t a t o , substrato ©C naftil acetato a
temperatura ambiente durante 1, 2 y 3 minutos.
Se investigaron también grasas neutras con el método del aceite rojo 0.
RESULTADOS
H i s t o l o g i a : H i s t o l ó g i c a m e n t e , las lesiones fueron muy variadas en intensidad y de
distintos sectores del riñón.
1) El compromiso glomerular en generaJ fue leve;, sólo.hemos podido observar e n casos
aislados h i p e r c e l u l a r i d a d moderada del o v i l l e j o y adherencias laxas de éste a la capsula
de Bowman; ésto lo interpretamos como una glomerulitis r e a c c i o n a I incaracterística.
2) A n i v e l de los túbulos contorneados muchas veces las c é l u l a s se vieron v a c u o l a d a s ; si
bien en oportunidades el lo correspondía a sustancia g r a s a , demostrada específicamente,
en otras debieron interpretarse como lesiones del tipo de imbibición acuosa. Lesiones
típicas de necrosis tubular difusa no fueron r e c o n o c i d a s , pero se vieron algunos tubos
aislados necróticos o necrobióticos rodeados por infiltrados linfoplasmocitarios. A d e m á s
s s visualizaron túbulos dilatados a i s l a d o s , y en dos de los casos con isquémia p r o l o n g a d a , este estado era g e n e r a l i z a d o , sobré todo de los colectores; estos tubos dilatados se
h a l l a b a n taponados de sustancia aljjuminoidea y ocasionalmente con concreciones c r i s talinas en sus luces. En dos de los casos observados también se h a l l ó un a c ú m u l o de
pigmento a m a r i l l o - v e r d o s o en las c é l u l a s parietales de túbulos contorneados.
3) El intersticio en pocas ocasiones mostró m o v i l i z a c i ó n de tipo inflamatoria a g u d a , y
en un caso, presentó las características de una pielonefritis a g u d a intensa. Una a t e n c i ó n especial mereció el intersticio perivascular.
En 3 de los ríñones isquemiados, se pudo apreciar verdadera r e a c c i ó n granulomatosa
perivascular de tipo linfoplasmocitario; acúmulos pequeños de estos mismos elementos
se vieron difusamente en otro de los casos.
F i g . N ° 1: H i p e r c e l u l a r i d a d y s e g m e n tación del o v i l l e j o , pegoteamiento l a x o a la c á p s u l a . Isquemia 6 0 min. H. E.
100 x .
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Fig. N ° 2: V a c u o l i z a c i ó n citoplasmática intensa de túbulos renales. Isquemia 15 min.
H. E. 4 0 0 x .
Fig. N ° 3: Z o n a medular. Intersticio perivascular con infiltrados linfoplasmocitarios y
edema. V a c u o l i z a c i ó n intensa de los túbulos. Isquemia 15 min. H. E. 100 x .
Fig. N ° 4: Foco intersticial de infiltración linfoplasmocitaria. Isquemia 15 min. H. E.
4 0 0 x.
Fig. N ° 5: M o v i l i z a c i ó n linfoplasmocitaria alrededor de túbulo n e c r o b i ó t i c o , cortado
tangenciaImente. Isquemia 15 min. H. E. 4 0 0 x.
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H i s t o q u í m i c a : Los resultados pueden sintetizarse de la siguiente manera:
1) D é f i c i t a i s l a d o de a l g u n a o varias de las enzimas. En este c a s o , la e x p l i c a c i ó n del
hecho puede relacionarse con el c o n o c i m i e n t o de que cada enzima tiene intervención
y u b i c a c i ó n especial dentro de las células. La probidad de los métodos utilizados s o s tienen su s i g n i f i c a c i ó n , pero es probable que represente una alteración momentánea y
reversible.
2) D é f i c i t global de las enzimas. En estos casos, la situación es mucho más g r a v e , c o n figurando un riñón en molos c o n d i c i o n e s biológicas/este estado por otro parte coínci—
d i ó en general c o n lesiones morfológicas intensas que confirmaron la gravedad del caso.
Creemos que en conjunto estas observaciones hacen más inciertas la e v o l u c i ó n de las
lesiones.
3) Reacciones normales de las enzimas. En este g r u p o , en los que se h a l l a n c o m p r e n d i dos la mayor parte de los casos con tiempos cortos de isquemia, no hemos podido s o r prender déficit e n z i m á t i c o histoquímicamente; filio puede indicar que este nunca ha
e x i s t i d o , o que escapa a nuestros métodos por su mínima expresión; también puede s i g nificar que son compensados rápidamente.
F i g . N ° 6: Tübulos proximales conteniendo grasas neutras. Riñón control,normal„ A c e i te rojo 0.100 x .
Fig. N ° 7: Túbulos dilatados con abundante cantidad de grasas neutras. Isquemia 3 0
min. A c e i t e rojo 0 . 1 0 0 x .
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F i g . N ° 8: Corresponde a f i g . N ° 7 a gran aumento. Grasas neutras a nivel de túbulos,
parietal de la cápsula de Bowman y capilares glomerulares. A c e i t e rojo 0.400 x .
Fig. N ° 9: D P N H 25 minutos de i n c u b a c i ó n . Reacción irregular y negativa en sectores.
Isquemia 6 0 min. 100 x .
Fig. N ° 10: D P N H 25 minutos de i n c u b a c i ó n . Detalle de figura anterior, 2 5 0 x .
Fig. N ° 11: D P N H 25 minutos de i n c u b a c i ó n . Reacción i r r e g u l a r . G l o m é r u l o con r e a c c i ó n negativa. Isquemia 6 0 min. 100 x .
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f i g . N ° 12: A T P 2 0 minutos de i n c ü b a c i ó n . R e a c c i ó n positiva normal en vasos intrarenales, intralobulillares, aferente y eferente del glomérulo y en capilares. Isquemia 3 0
minutos. 100 x .
F i g . N ° 13: Fosfatasa a l c a l i n a , 10 minutos de i n c u b a c i ó n . Reacción positiva normal en
ribete en c e p i l l o de túbulos proximales. Riñón normal, biopsia previa a la isquemia.
250 x.
CONSIDERACIONES
El presente trabajo se r e a l i z ó con ambos riñones " i n s i t u " a la temperatura del cuerpo.
L a d e n e r v a c i ó n de ambos órganos con iguales maniobras de liberación permiten e s t a b l e cer comparaciones del efecto de»la a n o x i a exclusivamente.
A l mismo tiempo el riñón no isquemiado, testigo, colabora en la depuración del medio
interno. Esto último tiene gran valor ya que a n u l a un factor de error como serla la sobre
carga de elementos osmóticamente a c t i v o s y a ú n tóxicos que a c t u a r í a n sobre el p a r é n quima dañado.
El eféctuar los exámenes previamente posibilita también el cotejo con los resultados
posteriores.
Las lesiones histológicas observadas confirman investigaciones anteriores ( 1 - 3 - 5 - 7 ) en
cuanto a la lesión predominante del túbulo proximal y a la presencia de c é l u l a s l i n f o plasmocitarias en el intersticio (5).
D e las reacciones de histoquímica es interesante hacer notar que eri nuestras o b s e r v a ciones el sistema vascular renal no manifestó nunca ópticamente alteraciones e n z i m d ticas; en efecto, a la integridad h i s t o l ó g i c a , debe agregarse el hecho de que la r e a c c i ó n para A T P a s a , de especifica l o c a l i z a c i ó n en las paredes arteriales y c a p i l a r e s ,
permaneció sin m o d i f i c a c i o n e s , a ú n en los casos con lesiones más severas en las otras
estructuras; igual observación puede hacerse del D P N H , de rica a p a r i c i ó n en las capas
musculares de arterias.
La presencia de grasas neutras, fue un h a l l a z g o frecuente tanto en los casos isquemiados como en los controles, lo que confirma el hecho c o n o c i d o de la f i s i o l o g í a del riñón
del perro. La sustancia grasa que rellena la pared de grupos de túbulos, también se s o r prende muchas veces c i r c u l a n d o o en las luces tubulares. En uno de los casos i s q u e m i a dos se visual i z ó un o b j e t i v o a u m e n t o de la sustancia g r a s a , a p a r e c i e n d o además en b u e na cantidad en glomérulos, en cápsulas de Bowman y alrededor de los vasos arteriales
del polo vascular glomerular.
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CONCLUSIONES
1) En el riñon isquemiado de perro hay evidentes lesiones histológicas y de déficit e n z i m d t i c o , histoqulmicamente, aunque de variada intensidad.
2) Si bien estas lesiones guardan en general relación con el tiempo de isquemia, p u e den verse aisladas y c o n intensidad moderada en casos con tiempos cortos de isquemia.
3) Las alteraciones que obedecen a la isquemia misma, pero probablemente también al
terreno y a los métodos operatorios uti lizados, son más i n t e n s a s e n
las isquemias p r o -
longadas.
4) El sistema vascular no participa del d a ñ o e n u n c i a d o .
RESUMEN
Se r e a l i z ó isquemia renal durante 1 5 , 3 0 , 4 5 y 60 minutos en 15 perros.
Se isquemió el riñón i z q u i e r d o , a c t u a n d o el derecho como control.
Se hicieron estudios histológicos e histoqulmicos de ambos riñones antes de laprueba
a la semana.
Las alteraciones predominantes fueron tubulares.
y
i
BIBLIOGRAFIA
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* Traba i o preliminar r e a l i z a d o en el Laboratorio de Patología y C i r u g í a Experimental y
en la 2a. Cátedra de A n a t o m í a P a t o l ó g i c a , de la Facultad de C i e n c i a s M é d i c a s de
Buenos A i r e s .
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DISCUSION
D R . T R A B U C C O . - Pido la palabra.
Q u e r í a p r e g u n t a r , a titulo informativo si la isquemia que se ha hecho en el riñón fue
por ligadura total de p e d í c u l o o por ligadura de la arteria solamente, porque podrían
dar como resultado lesiones de distinto tipo. N o he oído o se me ha escapado si la l i gadura fue parcial o total.
D R . S A E N Z . - S I , lo dijimos. Se h i z o el clampeo de la arteria, de la vena y del uréter.
D R . T R A B U C C O . - Sería interesante repetir el experimento h a c i é n d o l a ligadura e x c l u s i v a de la artería para comparar entonces las lesiones que puede haber. Q u e se permita
la descarga al riñón, a ver si las lesiones que han expuesto ustedes, son exclusivamente
debidas a la isquemia.
D R . S A E N Z . - A g r a d e z c o la sugerencia del doctor Trabucco. El trabajo se h i z o en r e a l i d a d , como parte de uno más completo para aislamiento total del riñon. Ahora lo que se
propone, es muy interesante y también podría hacerse.