Métodos analíticos y detección - Universidad Autónoma de Nuevo

Trabajos libres
Métodos analíticos y detección
Métodos Analíticos y de detección
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Evaluación del Sistema TEMPO® vs. Normas Oficiales Mexicanas y
Petrifilm™ E.coli-Coliformes para la enumeración de bacterias aerobias,
coliformes y E. coli. en muestras de carnes y productos cárnicos
I.Broquet ¹ G.Isunza Riuz ² F.Gallegos Sola ²
¹ bioMerieux Marcy l’Etoile Francia, ² bioMerieux México
comparó TEMPO® TVC (Total Viable
Count), CC (Coliform Count) y EC
(Escherichia coli) con la cuenta de
bacterias aerobias en placa (NOM-092SSA1-1994), de coliformes totales
(NOM-113-SSA1-1994) y Petrifilm™
E.coli-Coliformes. La comparación de
resultados fue realizada utilizando la guía
estadística CAMPDEM para métodos de
microbiología de alimentos. Resultados:
El análisis de regresión indica que los
métodos presentan resultados similares.
El porcentaje de acuerdo entre los dos
métodos fue de 93% para Materia Prima
Carnica, 95% para Jamones, 94% para
Salchichas y 97% para muestras
ambientales. Conclusiones: TEMPO®
TVC y CC dan resultados comparables
con NOM-092-SSA1-1994, NOM-113SSA1-1994. TEMPO® EC da resultados
comparables con Petrifilm™ E.coliColiformes y adicionalmente reduce el
tiempo de análisis en 24 hs. El Sistema
TEMPO® es un método simple, rápido y
estandarizado que logra ahorrar tiempo
permitiendo realizar tareas de mayor
valor agregado en laboratorios de
microbiología de industrias cárnicas.
Introducción:
Las
industrias
de
alimentos requieren de métodos que
simplifiquen el trabajo del laboratorio y
provean en forma rápida y precisa, de
información que permita acelerar la toma
de decisiones en la gestión de calidad de
las mismas. El método TEMPO® fue
desarrollado para mejorar la eficiencia
del laboratorio y reemplazar los métodos
actuales de cuenta en placa ó series de
tubos que requieren de un trabajo
intenso y consumen una gran cantidad
de tiempo. TEMPO® es un sistema
automatizado que utiliza una tarjeta de
48 pocillos con tres series de 16 tubos de
diferente volumen y medios de cultivos
selectivos,
miniaturizando
y
automatizando la técnica del Numero
Mas Probable (NMP). En este estudio, se
comparó el Sistema TEMPO® con los
métodos habituales de rutina de un
laboratorio de una Industria cárnica en
México para la enumeración de bacterias
aerobias,
coliformes
y
E.
coli.
Metodología:
Se
analizaron
108
muestras conformadas por materia prima
cárnica (cerdo, ave y res), producto
terminado salchichas (vienesa, cocktail y
pavo), producto terminado jamones y
muestras
ambientales
(líneas
de
producción y manipuladores).
Se
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Calidad sanitaria de frutas y hortalizas frescas: Detección de Salmonella sp
por PCR e inmunoensayo
García-Camarena M.G., Robles-Cabrera A., Vargas-Arispuro I. y Martínez-Téllez M.A.
Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. Unidad Hermosillo.
Coordinación de Tecnología de Alimentos de Origen Vegetal. Carr. A La Victoria Km 0.6,
A.P. 1735, 83000, Hermosillo, Sonora, México.e-mail: [email protected]
cada producto. El análisis de Salmonella
sp realizó mediante la técnica de PCR
(Gen ori-C, producto de 500 pb, # acceso
GenBank J01808, y la técnica de
inmunoensayo
“Assurance
EIA
Salmonella”. Resultados: Todos los
productos
analizados
presentaron
evidencias
de
haber
estado
contaminados con Salmonella, según los
resultados de la técnica de PCR, que
detecta células viables y no viables. De
los productos analizados, el lote de fruta
de mayor riesgo de ocasionar ETA´s a la
población fue el melón cantaloupe, por
presentar células viables de Salmonella
al momento de su comercialización. La
técnica de PCR resultó ser 8.018 veces
más sensible que la técnica de
inmunoensayo para la detección de
contaminación
por Salmonella
en
productos agrícolas frescos.
Introducción: En los últimos diez años,
a nivel mundial, se han incrementado los
brotes de enfermedades transmitidas por
alimentos (ETA´s) en los que se han
visto involucradas las frutas y hortalizas
frescas.
La
reducción
de
la
contaminación biológica en los productos
agrícolas frescos se logra mediante la
aplicación de las buenas prácticas
agrícolas (BPA´s) en el campo y las
buenas prácticas de manejo (BPM) en el
empaque. Objetivo: Este trabajo tiene el
objetivo de evaluar la presencia de
Salmonella sp en frutas y hortalizas
frescas expuestas para su venta al
público en la ciudad de Hermosillo,
Sonora. Metodología: Se analizó la
presencia de Salmonella sp en rábano,
cebollín, melón cantaloupe, lechuga y
cilantro,
cultivados
localmente
e
importados, expuestos a su venta en 2
supermercados y un mercado de
abastos. Se analizaron 5 repeticiones de
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Evaluación del método Petrifilm para la determinación de bacterias
coliformes en agua mineral envasada.
Molina, Noreldy*; Ballester, Lelis; Rodríguez, Carlos; Araque, Judith; Andueza,
Félix.
Universidad de los Andes. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. E. Mail: [email protected]
Introducción: El método de recuento en
consumo en la ciudad de Mérida. La
placas Petrifilm se ha desarrollado para
correlación se calculó por el método de
determinar
de
Pearson. Resultados: La media de los
calidad sanitaria en alimentos, entre ellos
valores logarítmicos y las desviaciones
el grupo de coliformes. Sin embargo, no
estándar
se ha evaluado el método en aguas
para los valores obtenidos con ambos
minerales
métodos,
diferentes
indicadores
fueron
similares
Objetivo:
El
trabajo
fue
correlación de 0,94. El método Petrifilm
comparar este método con el método de
resulto comparable con el método de
filtración
filtración, para el recuento de coliformes
objetivo
envasadas.
calculadas
del
en
cuantificación
presente
membrana,
de
para
la
microorganismos
en
obteniendo coeficientes
agua
mineral
de
envasada,
aerobios en agua mineral envasada
representando un método alternativo
(APHA, 1998). Metodología: Se han
para el control microbiológico de estas
estudiado
aguas.
50
muestras
de
distintas
marcas de agua mineral envasada de
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Evaluación del método de Petrifilm para la determinación de bacterias
aerobias mesófilas, en agua mineral envasada
Morillo, Alba*, Rodríguez R., Carlos, Ballester, Lelis, Araque, Judith y Andueza,
Félix.
Universidad de los Andes. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Mérida. Venezuela. E.
Mail. [email protected]
Introducción: El método de recuento en
envasada de consumo en la ciudad de
placas Petrifilm fue desarrollado para
Mérida, Venezuela. La correlación se
determinar
de
calculó por el método de Pearson.
microorganismos mesófilos aerobios en
Resultados: La media de los valores
alimentos. Objetivo: El objetivo del
logarítmicos y las desviaciones estándar
presente
este
calculadas fueron similares para los
método con el método estándar de
valores obtenidos con ambos métodos,
siembra en placa para la cuantificación
obteniendo coeficientes de correlación
de microorganismos mesófilos aerobios
de 0,85. El método Petrifilm resultó
en
envasada.
comparable con el método estándar,
Metodología: Para el caso de la siembra
para el recuento de microorganismos
con el método estándar se siguió la
mesófilos aerobios en agua mineral
metodología propuesta por la APHA
natural
(1998) y para la siembra con Petrifilm la
método
señalada por la empresa fabricante 3M
microbiológico de estas aguas.
el
trabajo
agua
número
fue
comparar
mineral
envasada,
alternativo
representando
para
el
un
control
(2005). Se han estudiado 50 muestras de
distintas
marcas
de
agua
mineral
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Detección de Salmonella en productos vegetales frescos cortados por PCR
en tiempo real
Saúl Ruiz-Cruz1*, Arvind Bhagwat2 y Gustavo González-Aguilar3
Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. (CIAD, A.C). Av. 4ta. Sur No.
3820. Fracc. Vencedores del Desierto, Delicias, Chihuahua, México, 83089, Tel-Fax: 639474-8400. E-mail: [email protected] 2Produce Quality and Safety Laboratory, Henry Wallace
Beltsville Agricultural Research Service, Agricultural Research Service, USDA, 10300
Baltimore Avenue, Bldg. 002, Room 117, BARC-W, Beltsville, MD 20705-2350, USA.
3
CIAD, Carretera a la Victoria km 0.6, Hermosillo, Sonora, México, 83000, Tel-Fax: 662280-0422.
1
un nivel de contaminación bajo (aprox. 38 células/25 g), excepto para el caso de
zanahoria, en la cual no se detectó
Salmonella por el método tradicional. El
tiempo
requerido
para
detectar
Salmonella por el método de PCR en
tiempo real (iQ-Check, Bio-Rad Lab) fue
de 20 h, comparado con el método
tradicional de PCR que requiere de 27.5
h y los medios selectivos que toman de 3
a 5 días para obtener resultados
definitivos. Este es uno de los primeros
trabajos del uso de marcadores
moleculares Beacon utilizado para la
detección en tiempo real de Salmonella
en VFC. Este nuevo método podría tener
grandes ventajas en la industria de
alimentos, para la detección rápida de
Salmonella. De esta forma, poder reducir
a
tiempo
algunos
riesgos
de
enfermedades
gastrointestinales
causadas por el consumo de vegetales
contaminados con este patógeno.
Introducción:
Los
métodos
convencionales para detectar Salmonella
spp. en alimentos puede tomar hasta una
semana. Considerando la vida útil corta
de los alimentos preparados (listos para
consumir), así como el producto fresco,
es necesario métodos rápidos para la
detección de patógenos. La detección en
tiempo real de Salmonella spp. podría
ampliar nuestra capacidad de realizar un
número grande de muestras en un corto
plazo. Objetivo: El objetivo de este
estudio fue evaluar un marcador
molecular Beacon en análisis en tiempo
real de PCR, para detectar la presencia
de Salmonella en vegetales frescos
cortados (VFC).
Metodología: Se
inocularon VFC con aprox. 2-4 células/25
g de Salmonella y se enriqueció por 17
horas en buffer agua peptona. La PCR
en tiempo real y el método tradicional
(inoculación en placas de agar bismuto
sulfito) fue llevada a cabo en paralelo
para detectar la presencia de Salmonella
en VFC. Resultados: Ambos métodos
fueron capaces de detectar Salmonella a
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Desarrollo y validación de un método alternativo rápido para la detección de
Bacillus sporothermodurans y G. estearothermophilus en leche grado UHT.
QFB. Rosa Ma. Casillas Buenrostro*, Dra. Norma L. Heredia Rojas, Dr. José Santos
García Alvarado y Rafael Martínez1,
Laboratorio de Bioquímica y Genética de Microorganismos, Facultad de Ciencias
Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León. 13M de México
[email protected].
requirió de producción de esporas en
caldo de infusión cerebro corazón (ICC)
a 37oC/72 h y caldo de soya tripticasa
(TSC) por 42oC/48 h utilizando ambos
métodos. La leche se incubo por 0, 24 y
72 horas, las placas PetrifilmTM y
Introducción
Bacillus
sporothermodurans
y
Geobacillus
stearothermopilus,
sobreviven
a
procesos de ultrapasteurización y
pasteuriuzación respectivamente debido
a sus esporas que permite desarrollarse
en leche empacada. Para corroborar la
calidad
microbiológica
de
estos
productos usualmente la industria aplica
métodos tradicionales que consumen
tiempo y espacio Objetivos: Determinar
el límite de detección en leche UHT de
B.sporothermodurans
y
G.stearothermophilus por sistema rápido
(PetrifilmTM) y método tradicional. 2.-
método tradicional por 24 h a 37 y 55 oC.
Se analizó la calidad de la leche que se
expende en el área metropolitana de
Monterrey N. L. utilizando ambos
métodos. Resultados: El límite de
detección de G. stearothermophillus y B.
sporothermodurans fue de 102 UFC/mL
apartir
de
las
6
y
9
horas
TM
respectivamente por el Petrifilm y de
12 y 18 por el tradicional. Datos
estadísticos indican una diferencia
significativa entre ambos métodos. No se
detecto
la
presencia
de
B.
sporothermodurans
y
G.
stearothermophilus
en
las
leches
analizadas. Conclusiones: el análisis de
la calidad de la leche grado UHT es más
sensible y eficiente utilizando el sistema
rápido (PetrifilmTM) en comparación con
el método tradicional.
Determinar la validez del método rápido
(Petrifilm™) 3.- Establecer la calidad de
la leche grado UHT que se expende en
el área metropolitana de Monterrey N. L.
mediante el método PetrifilmTM y
tradicional. Metodología: se determinó la
presencia de bacterias mesofílicas,
termofílicas y esporulados, mediante
siembra por estría y cuenta de
esporulados. Para el límite de detección
de esporas de B. sporothermodurans y
G. stearothermophilus en leche UHT, se
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