k OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS 19 k ES 2 086 887 kInt. Cl. : A01K 63/04 11 N.◦ de publicación: 6 51 ESPAÑA k TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA 12 kNúmero de solicitud europea: 93400172.8 kFecha de presentación : 26.01.93 kNúmero de publicación de la solicitud: 0 555 120 kFecha de publicación de la solicitud: 11.08.93 T3 86 86 87 87 k 54 Tı́tulo: Utilización de aguas madres de mareas salantes para la realización de una composición de agua mar reconstituida. k 73 Titular/es: Compagnie des Salins du Midi et k 72 Inventor/es: Beyna, Jean-Marie y 30 Prioridad: 07.02.92 FR 92 01410 des Salines de l’Est, Société Anonyme dite 51 Rue d’Anjou F-75008 Paris, FR 45 Fecha de la publicación de la mención BOPI: 01.07.96 k 45 Fecha de la publicación del folleto de patente: ES 2 086 887 T3 01.07.96 Aviso: k k Dupeux, Dominique k 74 Agente: Hernández Covarrubias, Arturo En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletı́n europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art◦ 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascı́culos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, 1 – 28036 Madrid ES 2 086 887 T3 DESCRIPCION Utilización de aguas madres de mareas salantes para la realización de una composición de agua mar reconstituida. 5 10 15 20 25 30 35 40 La presente invención se refiere a la utilización de aguas madres de mareas salantes para la realización de una composición de agua de mar reconstituida. La invención se refiere igualmente al agua de mar reconstituida preparada a partir de tales aguas madres. Para diversas utilizaciones, principalmente en el campo de la acuacultura y de la crı́a o del mantenimiento de peces ornamentales o de otras especies animales, en acuarios o en parques acuáticos de dimensiones extremadamente variables, se ha buscado, desde siempre, reconstituir el medio en el cual vive, de manera natural, la especie considerada. En el caso de animales de origen marino, se ha propuesto la incorporación al agua de partida de los acuarios, composiciones de diversas sales marinas - cloruros, bromuros, sulfatos u otros, de diversos metales, principalmente de metales alcalinos o alcalino-térreos-, en proporciones relativas correspondientes a las del medio natural de estos animales (véase, por ejemplo, la GB-A-1 128 503). En el caso de los acuarios públicos de dimensiones muy grandes, se ha considerado también la utilización de agua procedente de perforaciones subterráneas, que presentan la ventaja de tener una temperatura constante y una excelente cantidad óptica, al mismo tiempo que está desprovista de gérmenes patógenos. Sin embargo, la salinidad de estas aguas de perforación es generalmente baja y las proporciones entre los diferentes elementos minerales que contienen varı́an frecuentemente. Además pueden contener compuestos indeseables y, aun cuando los peces de la mayor parte de las especies llegan a adoptarse generalmente a las variaciones de composición quı́mica de tal medio ambiente, los invertebrados, animales inferiores que tienen mecanismos de osmorregulación más rudimentarios, llegan a tolerar de una manera mucho más difı́cil tales variaciones. Ahora bien, estos invertebrados presentan una gran importancia en los acuarios o en acuacultura, debido a su belleza, a su riqueza decorativa y a su biologı́a. Para resolver este problema, podrı́a considerarse, naturalmente, recurrir al agua de mar natural captada y distribuida a los utilizadores, pero una operación de este tipo, incluso a gran escala, serı́a compleja y costosa. La presente invención trata de remediar este inconveniente proponiendo una composición de agua de mar reconstituida, que comprenda tanto la mayor parte de las sales marinas presentes en el agua de mar natural como los oligo-elementos caracterı́sticos de esta. A este efecto, la invención propone recurrir, fuera del agua de dilución, únicamente a productos de origen marino. Un primer objeto de la invención consiste, consecuentemente, en la utilización de aguas madres de mareas salantes para la realización de una composición de agua de mar reconstituida. 45 50 Más precisamente, la invención tiene por objeto la incorporación, en agua dulce, de aguas madres de mareas salantes y cloruro de sodio de origen marino (sal de mar), para la realización de un agua de mar reconstituida. Un segundo objeto de la invención está constituido por una composición de agua de mar, reconstituida, caracterizada porque contiene aguas madres de mareas salantes. Más precisamente, la composición de agua de mar según la invención contiene, en dilución en agua dulce, aguas madres de mareas salantes y cloruro de sodio de origen marino (sal de mar). 55 Ventajosamente, por cada 100 litros de la composición según la invención, se utilizarán: - entre 0,5 y 3 litros de aguas madres de mareas salantes, - entre 2.800 y 3.000 g de cloruro de sodio de origen marino (sal de mar), 60 estando constituido el resto por agua dulce de dilución. Se recordará que las aguas madres de mareas salantes son soluciones salinas próximas al agua de mar, 2 ES 2 086 887 T3 pero con una concentración muy fuerte en sales, en equilibrio con la sal que se deposita por evaporación de estas soluciones en las mareas salantes. Una composición tipo de tales aguas madres es la siguiente: - 5 10 15 20 Mg Cl2 NaCl Mg SO4 KCl : : : : 200 a 285 28 a 43 80 a 120 27 a 53 g/l, g/l, g/l, g/l. Debido al origen natural de los constituyentes de la composición de agua de mar reconstituidas según la invención, esta presenta caracterı́sticas fı́sico-quı́micas extremadamente próximas a las del agua de mar natural, y conviene, consecuentemente, de manera particularmente buena para una utilización en acuarios, en parques acuáticos o incluso en acuacultura. En efecto, no solamente aporta a los peces de origen marino condiciones de vida próximas a las de su medio natural, sino que conviene particularmente bien para el desarrollo de los organismos invertebrados presentes habitualmente en el agua de mar. Esto es lo que surge de los ensayos efectuados por la solicitante, uno de los cuales se describirá en detalle a continuación. Ejemplo. 25 Se ha efectuado un ensayo en un acuario que contiene un volumen de 500 litros de una composición según la invención, que comprende: - 14 kilos de sal marina (NaCl), - 6 litros de aguas madres de mareas salantes, 30 - 494 litros de agua dulce. El objeto de este ensayo era el de verificar, durante un tiempo prolongado, las condiciones de supervivencia, en esta composición, de diversos animales marinos. 35 El dispositivo utilizado se ha representado en la figura única del dibujo adjunto. Este comprende un acuario rectangular 1, en cuyo lı́quido 2 está sumergido un difusor 3 de aire bajo presión. 40 45 50 55 60 La circulación, el removido y la purificación del lı́quido están asegurados en una extremidad del acuario 3, en compartimentos contiguos 4, 5 y 6, uno de los cuales, el 4, contiene un bloque 7 de una espuma de poliéster que sirve de filtro mecánico, que está horadado verticalmente por un pasaje en el que se ha insertado un conducto vertical 8. En este conducto 8 está sumergido un tubo 9 de introducción de aire bajo presión que se termina en un difusor no representado, destinado a asegurar el ascenso del lı́quido que haya atravesado el bloque de espuma 7 y el vertido de este lı́quido por medio de un codo 10 del conducto 8 en el compartimento contiguo 5. Este contiene gránulos de arcilla expandida, mezclados con arena coralina grosera, constituyendo el conjunto un filtro biológico 11. El compartimento 5 comunica en su base a través de orificios con el compartimento contiguo 6, en el que está sumergido un tubo vertical 12, en cuya base se ha dispuesto, interiormente, un difusor de aire 13, alimentado con aire bajo presión a través de un conducto 14, que asegura el ascenso del agua purificada y su reciclado hasta el acuario 1, en el que se vierte a través de un codo 15 previsto en la parte superior del tubo 12. La iluminación está asegurada por dos tubos de neón 16, con una potencia de 65 watios, dispuestos por debajo de un reflector 17. La temperatura del agua está termorregulada entre 19◦ C y 22, 5◦ C, por climatizado del local en el que se ha dispuesto el acuario. No se ha previsto ningún dispositivo de esterilización, de manera que no se enmascare un aporte eventual de gérmenes patógenos por el agua madre utilizado. 3 ES 2 086 887 T3 5 En ningún momento durante toda la duración del ensayo se ha renovado el agua de la cubeta. nicamente se ha efectuado algunos complementos de agua dulce para compensar la evaporación del agua y evitar una elevación demasiado fuerte de la salinidad. Esta se ha mantenido voluntariamente entre 32 y 34%o. Este ensayo se ha efectuado con la población siguiente: - Peces: - Dicentrarchus labrax (lubina) Labrus merula (merlo) - Invertebrados: - Echinaster sepositus (estrella roja) Eunicella stricta (gorgona blanca) Eunicella cavolini (gorgona amarilla) Cerianthus membranaceus (cerianta) Halocynthia papillosa (ascilla roja) Spirographis spallanzani (espirógrafo) Sphaerechinus granularis (erizo violeta) Abracia lixula (erizo negro) Anemonia sulcata (anémona de mar) Parazoanthus axinellae (anémona amarilla incrustada) Murex brandaris (cañadilla) - Algas: - Codium tomentosum (codio) Caulerpa taxifolia (caulerpa de origen tropical, que puede aclimatarse en agua templada: 10 15 20 25 30 35 : 1 : 1 : : : : : : : : : : : 2 1 1 2 2 1 1 1 1 1 1 colonia : 1 manojo : 5 plantas. 40 Entre esta población, algunas especies pueden considerarse como “rústicas”, es decir capaces de adaptarse a los cambios inherentes a la vida en medio confinado (por ejemplo en lubina). Otras son más delicadas, con un metabolismo más rudimentario, y son mucho más exigentes en cuanto a la composición fı́sico-quı́mica del agua (por ejemplo los erizos). 45 Una gran mayorı́a de esta población se ha constituido voluntariamente por animales invertebrados, considerados como verdaderos animales testigo, en cuanto a la composición fı́sico-quı́mica del agua. Los peces, por su parte, juegan un papel importante y completamente diferente: sirven de eventuales portadores de sı́ntomas patológicos visibles, que permiten identificar los gérmenes patógenos que podrı́an contener el agua madre. 50 El ensayo se ha extendido desde el 24 de Mayo de 1.990 hasta el 19 de Octubre de 1.990, es decir durante 5 meses y 25 dı́as. 55 El 24 de Mayo de 1.990 se ha puesto en servicio el acuario, desinfectado y enjuagado, por llenado con agua dulce, sometida a una descloración previa durante 24 horas por aireación intensa, y a continuación con el agua madre y la sal marina. Se ha introducido en el comportamiento 5 de filtración biológica un medio biológico activado procedente de una reserva en la que se han cultivado bacterias nitrificantes con aporte regular de cloruro de amonio, estando exenta esta reserva de gérmenes patógenos. 60 El filtro mecánico, constituido por arena coralina y por granulados de arcilla expandida se ha introducido igualmente en el compartimento 5. Un filtro de este tipo es favorable para el mantenimiento de un pH elevado (entre 8 y 8,3 partes), para la fijación de las bacterias útiles y para la implantación de 4 ES 2 086 887 T3 invertebrados o de algas. Los peces se han introducido en el acuario el 28 de Mayo de 1.990 y los invertebrados se han introducido en el mismo desde el 29 hasta el 31 de Mayo. 5 10 La evolución de los parámetros fisiológicos no se ha medido más que hasta el 17 de Agosto de 1.990, fecha en la cual la temperatura del agua se ha elevado hasta 23◦ C, debido a la climatización de vida al sol ambiental. A partir de este umbral térmico, en efecto, pueden aparecer problemas biológicos en el caso de los invertebrados, que toleran mal temperaturas demasiado elevadas, mientras que los riesgos patológicos quedan acrecentados para los peces. La tabla siguiente resume la evolución de los parámetros biológicos durante este perı́odo. TABLA 15 20 25 Perı́odo T◦ (C) S% O2 pH NH4 + NO2 27 Mayo al 31 Mayo 19 a 19,5◦C 29,9 a 30% 85 a 100% 8,1 a 8,3 0,04 a 0,1 ppm 0,02 a 0,05ppm 31 Mayo al 3 Julio 19,5 a 21,6◦C 30 a 34% 89 a 95% 8,2 a 8,45 0,01 a 0,05ppm 0,02 a 0,06ppm 3 Julio a 17 Agosto 21,6 a 23◦ C 32 a 34% 80 a 90% 8,1 a 8,4 0,01 a 0,03ppm 0,05 a 0,09ppm 30 35 40 45 El grado de nitrantes, muy poco reciclados debido a una falta de vegetales y de bacterias anaerobias desnitrificantes, se ha elevado progresivamente, para alcanzar un valor próximo a 70 ppm hacia el 15 de Agosto de 1.990, lo que representa, para los invertebrados, un umbral letal, más allá del cual aparecen las primeras defunciones. Debido a esto, el perı́odo comprendido entre el 15 de Agosto y el 17 de Octubre de 1.990, durante el cual el grado de mortalidad de los animales más frágiles ha aumentado, no debe tenerse en consideración. Los organismos vivos mantenidos en el acuario se han alimentado según las modalidades semanales siguientes: - 5 dı́as de alimentación “consistente”, a razón de una distribución por dı́a (camarones, mochones y artemias adultas descongeladas, nauplios de artemia, huevos de abadejo y plancton); 50 - un dı́a de estricto ayuno; - un dı́a de alimentación por medio de pitas a base de espirulina. Se han efectuado las observaciones siguientes: 55 60 El 31 de Mayo, 3 dı́as después de la primera introducción, los peces, a pesar del miedo, clásico durante la aclimatación, tienen un comportamiento normal, igual que su apariencia externa. Se han conservado sus reflejos alimentarios. Los invertebrados se encuentran en un estado general bastante bueno: esfirógrafos con penacho frecuentemente desplegado, pólipos de las gorgonas y corales anémona bien extendidos, anémona y ceianta bien desplegados. Su actividad alimentaria es aparentemente normal. 5 ES 2 086 887 T3 Las estrellas de mar tienen un comportamiento normal. 5 Sin embargo, un erizo (Abracia lixura) ha perdido algunas púas, mientras que las otras púas están abatidas. El segundo, (Sphaerechinus granularis) representa un comportamiento normal y comienza a camuflarse y a cubrirse con residuos tomados sobre el substrato. Dos ascillas rojas están completamente achaparradas y una de ellas deja escapar una substancia mucosa anarajanda. 10 El 3 de Junio de 1.990, los peces tienen un buen comportamiento, una apariencia externa y una alimentación normales. Entre los invertebrados, los acidios muertos han sido reemplazados el primero de Junio por nuevos individuos que mantienen una apariencia muy bella. 15 El erizo que habı́a perdido púas parece que se comporta mejor. Los otros invertebrados tienen un estado y un comportamiento satisfactorios, con desplazamientos normales, pólipos desplegados, etc.... . 20 Las algas tienen un crecimiento normal. 25 Una estrella de mar roja, que mostraba signos de debilidad y que adoptaba posturas aberrantes en otro depósito, ha sido introducida el primero de Junio en la cubeta de experimentación. Esta parece retomar una apariencia completamente normal en esta cubeta. El 3 de Julio de 1.990, aparecen algas verdes filamentosas del género Derbesia sobre el fondo y sobre la coquilla de la cañadilla. 30 Por lo demás se observa un buen estado general del conjunto de los animales. El 13 de Julio de 1.990, una estrella de mar presenta zonas esclerosadas, y algunos estrangulamientos al nivel de los brazos, pero los otros animales tienen todavı́a un buen estado general. 35 Se desarrollan algas verdes filamentosas sobre el fondo del acuario de forma esparcida. El 14 de Agosto de 1.990, se observa la muerte de un erizo negro, la degeneración de Parazoanthus axinellae, y la degeneración del alga verde filamentosa. 40 El 17 de Agosto de 1.990, se comprueba una casi desaparición del alga verde filamentosa. A todo lo largo de la experiencia se comprueba por esta degeneración y la muerte de algunos invertebrados. Pueden evocarse varias razones: 45 - una captura o una cuarentena difı́cil pueden ser, de manera clásica, el origen de mortalidad en el caso de los invertebrados; - algunos invertebrados encuentran difı́cilmente en cautividad una fuente de alimentación correspondiente a sus ábitos alimentarios naturales (caso de un “rozador” tal como el erizo); 50 - otros son muy poco tolerantes frente a un calentamiento del agua, incluso gradual, o frente a los nitratos, o frente a cualquier otro producto procedente de la descomposición de las materias orgánicas. 55 60 La salinidad representa finalmente un parámetro primordial. Algunos trastornos visibles exteriormente en el caso de los invertebrados parecen manifiestamente desprenderse de problemas de osmorregulación, como se observa frecuentemente en diferentes cubetas de exposición. Las dosis de NaCl y de agua madre utilizadas para reconstituir el agua de mar llevan su salinidad global a un valor de casi el 30%o. Esta salinidad es baja comparada con la del medio natural, y los erizos y los ascidios rojos muestran, desde el inicio, signos de trastornos fisiológicos. El aumento de la salinidad, debida a la evaporación hasta valores comprendidos entre el 32 y el 34%o, 6 ES 2 086 887 T3 tiene un efecto benéfico sobre estas dos especies de invertebrados, y los complementos de agua dulce ulteriores se han efectuado con el fin de mantener estos valores. 5 En lo que se refiere a las algas, no se ha observado ninguna proliferación visible de Dunaliella, habiendo aparecido en el transcurso de la experiencia un alga verde filamentosa, del género derbesia. Esta no ha sido introducida visiblemente por intermedio de la población, y no figura en los otros acuarios de cuarentena o de exposición utilizados. 10 Su presencia podrı́a encontrar su origen en la salmuera, que serı́a portadora de formas de diseminación de este alga, pero nada lo demuestra en esta experiencia. 15 A pesar de la degeneración y a veces la muerte de algunos invertebrados, se ha podido constatar, para dos especies de peces, un comportamiento y un aspecto externos completamente normales y sanos, y para la mayorı́a de los invertebrados, signos de buena sanidad caracterı́sticos: claro despliegue de los pólipos de los gargones, de los tentáculos de las anémonas y de los ceriantas, de los penachos de los espirógrafos, turgescencia de los ascidios, y comportamientos alimentarios normales. 20 No se ha observado ningún sı́ntoma patológico en el caso de los peces, a pesar de la ausencia de dispositivo de esterilización. Parece que ningún género patógeno, digno de este nombre, contamina el agua madre sometida al ensayo. Este ensayo demuestra por lo tanto la excelente reproductibilidad, merced al agua de mar reconstituida, según la invención, de las propiedades del agua de mar natural. 25 30 35 40 45 50 55 60 7 ES 2 086 887 T3 REIVINDICACIONES 1. Utilización de aguas madres de mareas salantes, para la realización de una composición de agua de mar reconstituida. 5 10 2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada por la incorporación en agua dulce, además de aguas madres de mareas salantes, de cloruro de sodio de origen marino (sal de mar). 3. Composición de agua de mar reconstituida, caracterizada porque contiene aguas madres y mareas salantes. 4. Composición según la reivindicación 3, caracterizada porque contiene además cloruro de sodio de origen marino (sal de mar). 15 5. Composición según la reivindicación 4, caracterizada porque, por cada 100 litros de composición, comprende: - entre 0,5 y 3 litros de aguas madres de mareas salantes, 20 - entre 2.800 y 3.000 g de cloruro de sodio de origen marino (sal de mar), estando constituido el resto por agua dulce de dilución. 25 30 35 40 45 50 55 60 NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a España y solicitadas antes del 7-10-1992, no producirán ningún efecto en España en la medida en que confieran protección a productos quı́micos y farmacéuticos como tales. Esta información no prejuzga que la patente esté o no incluı́da en la mencionada reserva. 8 ES 2 086 887 T3 9