Embriones, germinación y plántula de especies leñosas de Corrientes

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000
Embriones, germinación y plántula
de especies leñosas de Corrientes
Franceschini, María C.
SGCyT - UNNE. Instituto de Botánica del Nordeste.
Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina.
Fax: +54 (03783) 427131 - E-mail: ibone @espacio.com.ar
ANTECEDENTES
El estudio de las especies en estadio de plántula resulta de gran valor para encarar relevamientos, censos de
vegetación, estudios morfológicos y sistemáticos. En la gran mayoría de los casos la identificación se vuelve
dificultosa porque la plántula es muy pequeña para presentar nomofilos o si los presenta éstos son muy
diferentes a los nomofilos del ejemplar adulto. Para el conocimiento de la plántula se hace indispensable
conocer con detalle todo el proceso de germinación y la morfología del embrión. Es importante también
considerar la morfología de las semillas, dado que en muchas especies la cubierta seminal permanece unida a
los cotiledones después de que éstos se despliegan.
Se han registrado pocos estudios de germinación y plántula para especies del NE argentino (Gartland et al.,
1990 y 1991; Orfila, 1995).
El objetivo del presente trabajo es describir el tipo de germinación, las características más sobresalientes de la
semilla y del embrión, y los distintos estadios de plántula de cuatro especies leñosas nativas de bosques del
nordeste argentino: Lithrea molleoides (Vell.) Engl. (Anacardiaceae), Polygala albicans (A.W. Benn.)
Grondona (Polygalaceae), Rollinia salicifolia Schltdl. (Annonaceae), Sapium haematospermun Müll. Arg.
(Euphorbiaceae).
MATERIALES Y METODOS
Se recolectaron frutos y se prepararon ejemplares testigos que se depositaron en el herbario CTES. También
se conservaron ejemplares de distintos estadios de las plántulas estudiadas.
La extracción de las semillas se realizó manualmente, en los casos que fueron necesarios se lavaron las
semillas y se secaron al aire libre. Se aplicaron tratamientos de escarificación mecánica y química con ácido
sulfúrico.
Para la germinación, se colocaron 100 semillas por especie, sobre una base de papel de filtro y algodón, en
cajas de plástico transparente, posteriormente se transplantaron las plántulas en macetas en una mezcla de
tierra y perlita. El material fue regado con fungicida y cultivado a temperatura ambiente. En tres especies se
tomaron como referencia 7 días para registrar el poder germinativo (PG); por la escaséz de semillas de una
especies no se ha podido registrar este valor.
Para conocer la naturaleza de las sustancias de reserva de la semilla se usó Sudán IV (solución alcohólica
saturada) y Lugol (D'Ambrogio de Argüeso, 1986); para la descripción del embrión en los casos posibles se
siguió la terminología de Martin (Duke, 1969).
Se describieron e ilustraron a escala los diferentes estadios con un microscopio estereoscópico Wild M5 y su
respectiva cámara clara. Sólo con fines descriptivos, se considera como “plántula” al estadio en el cual han
aparecido por lo menos los dos primeros nomofilos.
Material estudiado:
Lithrea molleoides: Argentina, Prov. Corrientes, Dep. Santo Tomé, Colonia Galarza, 19-20/01/00, Arbo et al.
8591.
Polygala albicans: Argentina, Prov. Corrientes, Dep. Capital, Molina Punta, 15/12/99, Franceschini 40.
Rollinia salicifolia: Argentina, Prov. Misiones, Dep. Guaraní, Predio Guaraní, 24/04/99, Tressens 6124.
Sapium haematospermun: Argentina, Prov. Formosa, Dep. Patiño, Gral. Güemes, 11/01/99, Franceschini 22.
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DISCUSION DE RESULTADOS
Lithrea molleoides
Semilla: 4 mm long. x 0,5 mm lat. x 3,5-4 mm; endospermada, elíptica, comprimida lateralmente; cubierta
seminal membranácea, superficie lisa, ocrácea, castaña en la zona del hilo. Endosperma poco notorio; semilla
cubierta por un endocarpo en el cual se puede distinguir tres zonas: una externa leñosa, una media
cartilaginosa y una interna de consistencia pétrea.
Embrión: 6,5 m long. x 3 mm lat.; axial foliar inclinado, glabro, ebúrneo; eje embrionario 2,5 mm long., x 0,5
mm lat., curvado por la base hacia adelante, plúmula pequeña cubierta por los cotiledones; cotiledones de 4
mm long. x 3 mm lat. elípticos, laminares, carnosos.
Germinación y crecimiento: epigea, fanerocotilar. Se realizaron tratamientos con ácido en distintos tiempos:
15, 30 y 60 minutos; el PG fue 2 % en los dos primeros casos y 1% en el último caso.
1ra. semana: la raíz emerge por una ranura lateral del endocarpo.
2da. semana: se alarga considerablemente el hipocótilo. Los cotiledones empiezan a emerger del endocarpo y
toman un color verde lustroso.
3ra. semana: se desprende el endocarpo mientras se inicia el despliegue de los cotiledones.
16va. semana: se alarga el epicótilo y aparecen el primer par de protofilos.
24va. semana: se presentan bien diferenciados el segundo par de protofilos. Hasta este momento no se había
producido la germinación del testigo (sin tratamiento).
Plántula: Hipocótilo pubérulo, verde claro, cilíndrico. Epicótilo pubescente, cilíndrico, verde amarronado.
Cotiledones opuestos, pecíolo de 1,5 mm long., pubérulo, cara adaxial plana, cara abaxial convexa; lámina de
9-10 mm long. x 6-7 mm lat., elíptica, herbácea a subcarnosa, glabra, de color verde profundo; ápice obtuso,
base aguda, margen entero. Protofilos simples, alternos; pecíolo de 0,5 mm long., glabro, cara adaxial
cóncava, cara abaxial convexa; lámina de 8-17 mm long. x 2-6 mm lat., angustielíptica, glabra, herbácea;
ápice agudo, base aguda, margen entero.
Polygala albicans
Semilla: 4-5 mm long. x 4,5-5,5 mm lat.; exendospermada, globosa; cubierta seminal coriácea, superficie
pulida, escasamente pubérula, con pelos simples, castaña negruzca, persistente en la plántula; arilo carnoso,
blanco.
Embrión: 4-5 mm long. x 4 -4,5 mm lat., globoso, glabro, níveo; eje embrionario 1 mm long., con la radícula
como una diminuta prominencia ubicada en una leve depresión del embrión, plúmula cónica, pequeña,
cubierta por los cotiledones; cotiledones reservantes, plano-convexos, carnosos, formando casi la totalidad del
embrión.
Germinación y crecimiento: hipogea, criptocotilar. PG 6 %. Se utilizaron semillas sin arilo.
1era. semana: la radícula emerge en el lugar donde se encontraba el arilo, llegando a medir hasta 6 mm long.
2da. semana: germina el 87 % de las semillas; el epicótilo, en forma de gancho, emerge entre los pecíolos de
los cotiledones, la radícula con pelos densos y cortos, alcanza hasta 15 mm long.
3ra. semana: germina el 95 % de las semillas; se alarga el epicótilo hasta 25 mm long., comienzan a
evidenciarse en el ápice los dos primeros nomofilos.
4ta. semana: germina el 100% de las semillas; considerable aumento en el tamaño de los nomofilos; se inicia
el despliegue de los mismos. El epicótilo llega a medir hasta 40 mm long.
5ta. semana: los nomofilos están completamente desplegados.
7ma. semana: los nomofilos membranáceos adquieren una consistencia papirácea.
Plántula: pubérula; hipocótilo ausente; epicótilo cilíndrico, muy delgado, castaño. Nomofilos simples,
opuestos; pecíolo de 1-1,5 mm long., cilíndrico, pubérulo; lámina de 9-21 mm long. x 6-15 mm lat., elíptica,
membranácea al principio, tornándose papirácea, pubérula con pelos uncinulados en la cara abaxial, ápice
agudo, base aguda y margen entero, nervadura pinnada, notoria en toda la superficie de la lámina.
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Rollinia salicifolia
Semilla: 15-17 mm long. x 10 -11 mm lat. x 7 mm; obovada , elíptica u ovada; endospermada; cubierta
seminal leñosa, superficie pulida, castaña, persistente en la plántula; endosperma ruminado.
Embrión: 3 mm long. x 1 mm lat., axial lineal, glabro, níveo; eje embrionario 1,8 mm long. x 0,5 mm lat.,
cilíndrico, plúmula cubierta por los cotiledones; cotiledones 1,2 mm long. x 1 mm lat., elípticos, no
reservantes.
Germinación y crecimiento: epigea, criptocotilar. Se aplicó escarificación mecánica, perforándose el hilo de
la semilla. La germinación se llevó a cabo en dos casos y a la 8va. semana de siembra.
1era. semana: se produce la emergencia de la radícula. El eje alcanza a medir 25 mm long., se engrosa en la
parte media e inferior mientras que en la parte superior se adelgaza. La raíz primaria no presenta pelos
absorbentes.
2da. semana: continúa alargándose el eje llegando a medir 35 mm long.; el engrosamiento se vuelve cada vez
más notorio; en la base de esta zona comienzan a emerger raíces secundarias.
3ra. semana: La zona engrosada del hipocótilo se torna de color verde oliváceo. El eje alcanza a medir hasta
46 mm long.
5ta. semana: el eje llega a medir 55 mm long.
11va. semana: se produce la abscisión de los cotiledones que permanecen encerrados en la cubierta seminal.
La cicatriz de los cotiledones es evidente porque presenta pelos simples rodeándola. El epicótilo a medida que
crece lleva en el extremo a la cubierta seminal, en la cual son notorios los pecíolos de los cotiledones.
13ra. semana: cae la cubierta seminal y emergen los nomofilos.
17va. semana: están perfectamente diferenciados hasta el tercer nomofilo.
Plántula: hipocótilo glabro, cilíndrico, verde claro, con rayas cortas y paralelas entre sí, engrosado hacia su
parte inferior; epicótilo cilíndrico, delgado, verde claro, pubérulo, con dos mechones de pelos en la cicatriz
dejada por la abscisión los cotiledones. Nomofilos simples, alternos; pecíolo de 2-4 mm long., acanalado,
pubérulo; lámina de 15-44 mm long. x 9-18 mm lat., elíptica, herbácea, pubérula en la cara abaxial., verde
clara; ápice agudo, base aguda y margen entero.
Observaciones: se han colocado a germinar semillas de Rollinia emarginata Schltdl., las cuales hasta el
momento no han iniciado la germinación.
Sapium haematospermun
Semilla: 6-7 mm long. x 5,5-6 mm lat., x 3,5-4 mm; endospermada, biconvexa; cubierta seminal ósea,
superficie lisa, negra, totalmente cubierta por un arilo rojo. Endosperma carnoso, jugoso, blanquecino,
persistente en los primeros estadios de la germinación. Las pruebas de endosperma dieron positivo al test de
Sudán IV para grasas y aceites y negativo al de Lugol para hidratos de carbono.
Embrión: 3,5 mm long. x 2,5 mm lat. axial, foliar, espatulado, blanquecino, glabro; eje embrionario 1,5 mm
long. x 0,7 mm lat., cónico levemente engrosado; cotiledones 2 mm long. x 2,5 mm lat., circulares, delgados,
base cordada, margen entero.
Germinación y crecimiento: epigea, fanerocotilar. La germinación se llevó a cabo por escarificación química
con ácido sulfúrico, siendo el PG 36 % con ácido durante 60 minutos y 4 % con ácido por 30 minutos.
1era. semana: La cubierta seminal se rompe en varias partes por la acción del ácido. Se evidencia el
endosperma blanquecino; el eje llega a medir hasta 5 mm long.
2da. semana: el hipocótilo se torna rojizo hacia la radícula, llegando a medir 21 mm long.
3ra. semana: los cotiledones continúan cubiertos por el endosperma, se visualizan los pecíolos y entre éstos la
plúmula.
4ta. semana: los cotiledones emergen, enverdecen y se mantienen unidos en el ápice de la lámina por restos de
la cubierta seminal; el endosperma persiste como una membrana delgada y castaña; el eje alcanza a medir
hasta 45 mm long.
5ta. semana: se despliegan los cotiledones; el eje llega a medir hasta 55 mm long.
6ta. semana: aparecen los dos primeros nomofilos y el eje alcanza 65 mm long. Todo el hipocótilo se torna
rojizo.
11va. semana: el hipocótilo se vuelve verde claro y se inicia la caída de los cotiledones.
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Plántula: glabra; látex blanquecino. Hipocótilo glabro, verde claro, cilíndrico. Epicótilo glabro, cilíndrico,
rosado, tornándose verde claro cuando aparecen los nomofilos. Cotiledones opuestos, pecíolo de 2-8 mm
long., cara adaxial plana, cara abaxial convexa; lámina de 9-12 mm long. x 6,5-10 mm lat., obovada,
cartácea a subcarnosa, glabra, de color verde profundo en la cara adaxial y verde claro en la abaxial; ápice
obtuso, base aguda, margen entero. Nomofilos simples, opuestos; pecíolo de 1,5-2 mm long., cara adaxial
cóncava, cara abaxial convexa; lámina de 10,5-12 mm long. x 4-6 mm lat., lanceolada, herbácea; ápice agudo,
base aguda, margen crenado, con glándulas en las crenas.
CONCLUSIONES
Lithrea molleoides presenta las primeras hojas notablemente diferentes a la planta adulta, por lo que la
morfología de la plántula sería de gran importancia para la identificación de la especie en este estadio.
Polygala albicans es el único representante leñoso de la familia en nuestro país; los caracteres útiles para su
identificación son la germinación criptocotilar hipogea, los restos de la cubierta seminal que permanecen en la
plántula, el epicótilo castaño y muy delgado y las nervaduras notorias de los nomofilos.
El engrosamiento considerable del hipocótilo en Rollinia salicifolia podría estar relacionado con la
germinación criptocotilar epigea. Se han registrado pocos casos en la bibliografía en donde la germinación
criptocotilar es epigea (Flores y Rivera, 1989; Flores, 1994). Los caracteres útiles para la identificación de la
plántula se establecerían con el estudio de la plántula de R. emarginata.
Los caracteres más relevantes para la identificación de las plántulas de Sapium haematospermun son
nomofilos lanceolados, ausencia de estípulas, yemas cotiledonares y catafilos. Se ha observado en esta especie
tricotilia en embriones y en plántulas
BIBLIOGRAFIA
D'AMBROGIO DE ARGÜESO, A. 1986. Manual de técnicas en histología vegetal. Ed. Hemisferio Sur S.A.
83 pp.
DUKE, J.A. 1965. Keys for the identification of seedlings of some prominent woody species in eight forest
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FLORES, E. M. & D. I. RIVERA. 1989. Criptocotilia en algunas Dicotiledoneas tropicales. Brenesia 32: 1926.
FLORES, E. M. 1994. Arboles y semillas del Neotropico. Museo Nacional de Costa Rica, 3 (2): 1-26.
GARTLAND, H. M., A.V. BOHREN, D. MUÑOZ y G. F. OTTENWELLER. 1990. Descripción y
reconocimiento de las principales especies forestales de la selva misionera en el estado de plántula. Yvyraretá
1 (1): 67-90.
---. 1991. Descripción y reconocimiento de las principales especies forestales de la selva misionera en estado
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ORFILA, E. N. 1995. Frutos, semillas y plántulas de la flora leñosa argentina. Ediciones Sur, La Plata. 156
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ZULOAGA, F.O. & O. MORRONE. 1999. Annonaceae. En F.O. Zuloaga & O. Morrone (eds.), Catálogo de
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Garden 74: 46.