C-212-docu

La depolarización con KCl moviliza a la de Rho cinasa de la región no
caveolar a la caveolar en la membrana celular del músculo liso de vías
aéreas de bovino
Juarez U1,4 , Sommer B1, Ortega A2, Ramirez-Oseguera R2, Irles C2, Daniel
EE3, Montaño LM4
1 Departamento de Investigacion en Hiperreactividad Bronquial, Instituto
Nacional de Enfermedades Respiratorias, Mexico DF, Mexico. 2 Departamento
de Bioquimica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autonoma de
Mexico 3 Department of Pharmacology, University of Alberta, Edmonton,
Alberta, Canada 4 Departamento de Farmacologia, Facultad de Medicina,
Universidad Nacional Autonoma de Mexico. Mexico DF, Mexico.
[email protected],mx
En la membrana celular se encuentran unas invaginaciones ricas en caveolina
llamadas caveolas, consideradas como sitios para el apropiado ensamblaje de
algunas vías de señalización. La caveolina-1 (Cav-1) es la más abundante en
el músculo liso y su co-localización con los canales de Ca2+ tipo L dependientes
de voltaje (VDCC) ha sido propuesta. Hasta hace poco, la despolarización de la
membrana inducida por KCl era considerada una herramienta para inducir la
apertura de VDCC y consecuentemente incrementar la concentración de Ca2+
intracelular que produce la contracción muscular, pero se ha establecido que la
participación de Rho cinasa (ROCK) tiene un rol importante en este fenómeno.
Además, hemos reportado que en el músculo liso de vías aéreas de bovino
(MLVA-B), la alteración de la estructura caveolar por medio de metil-β
ciclodextrina (MβCD) modifica la respuesta a KCl, reduciéndola en ~30%. En
este resumen, informamos que estudios preliminares de MLVA-B tratados con
MβCD señalan que la señal fluorescente de VDCC en imágenes confocales
disminuye, al igual que la señal para Cav-1. En experimentos de órganos
aislados, los tejidos tratados con MβCD, y posteriormente estimulados con KCl,
relajaron ~98% con la adición de nifedipina (10-6M), mientras que los tejidos
control estimulados con KCl relajaron únicamente ~70%. El remanente de
~30% fue debido a ROCK, ya que fue bloqueado por la adición de Y-27632 (105M). La presencia de Cav-1, el VDCC y ROCK en fracciones membranales
caveolares y no-caveolares del MLVA-B estimulados con KCl y sin estimular
fue corroborado por densitometría. Los resultados señalan que, en el MLVA-B,
la alteración de las caveolas con MβCD modifica la presencia de ROCK en la
membrana celular, es decir, se mueve de la región no-caveolar a la caveolar
después del estímulo con KCl. En conclusión, el correcto ensamblado de la vía
de señalización de Rho/ROCK inducida por KCl en el MLVA-B depende de la
integridad de las caveolas y de la transferencia de ROCK de las regiones
membranales no-caveolares a las caveolares.