MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1266 ___________________________________________________ AGAR DE BILIS Y ROJO VIOLETA CON GLUCOSA Y LACTOSA USO Es un medio selectivo para aislamiento y cuenta de Entrobacterias a partir de diversos alimentos. PRINCIPIO La concentración de sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de microorganismos Gram positivos. La fermentación de la glucosa da lugar a la formación ácido que se manifiesta por el vire a rojo, ocasionalmente puede haber precipitación de ácidos biliares alrededor de las colonias. Todas las Enterobacterias degradan la glucosa, con formación de acido y son fácilmente reconocidos por esta característica ya que algunos gérmenes como Aeromonas crecen al mismo tiempo y pueden dar la misma reacción. Los organismos coliformes al fermentar la lactosa forman colonias rojo púrpura con halo de precipitación de sales biliares. El medio de cultivo se utiliza de acuerdo al procedimiento de vaciado en placa. Incubar 24 h a 35ºC. Interpretación: Colonias rojas con halo de precipitación rojizo son Enterobacterias, colonias incoloras son microorganismos no clasificados en este género. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA Agar Cloruro de sodio Cristal violeta Glucosa Extracto de levadura 15.0 5.0 0.002 10.0 3.0 Lactosa Mezcla de sales biliares Peptona de gelatina Rojo neutro 10.0 1.5 7.0 0.03 pH 7.4 ± 0.2 PREPARACION Rehidratar 51.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45ºC y vaciar en cajas de Petri estériles en las que previamente se habrán depositado las alícuotas correspondientes de las muestras en estudio. (Método de Vaciado en Placa). Mezclar por rotación y dejar solidificar. Agregar aproximadamente 4 ml del mismo medio conservado aproximadamente a 45ºC para formar una capa superficial no sembrada. Dejar solidificar e incubar en posición invertida de 18 a 24 horas a 35ºC. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Salmonella typhimurium Shigella flexneri Micrococcus luteus Staphylococcus aureus CEPA ATCC 25922 ATCC 14028 ATCC 12022 ATCC 9341 ATCC 25923 CECIMIENTO Bueno, colonias rojo púrpura con halo de precipitación de sales biliares Bueno, colonias rojo púrpura con halo de precipitación de sales biliares Bueno, colonias rojo púrpura con halo de precipitación de sales biliares Inhibido Inhibido BIBLIOGRAFIA Mossel, D. A. A., Mengerink, W. H. J., a Scholts, H. H. A. : Use of a modofied Mac Conkey for the selective growth and enumeration of all Enterobacteriaceae. J. bact., 84; 381. 1962 Mossel, D. A., a Cornelissen, A. M. R. : The examination of foods for Enterobacteriaceae using a test of the type generally adopted for the detection of Salmonellae. J. Appl. Bact., 26; 444 – 45 PRESENTACION No. Cat. 1266 1266-E Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g No. Cat. 1266-A 1266-B Deshidratado 450 g Deshidratado 100 g DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3