Yarrowia lipolytica es capaz de convertir glicerol producto de descarte de la industria de los biocombustibles en ácido cítrico. La producción de este compuesto orgánico llega a 1.7 millones de toneladas anuales. En la tabla siguiente, se muestran los resultados obtenidos en experimentos llevados a cabo en un sistema continuo donde se utilizó al glicerol como substrato limitante a una concentración de 150 g/l. Resultados Obtenidos D (h-1) Biomasa g/l Glicerol g/l Cítrico g/l Isocitrico g/l 0.009 15.3 2.2 86.5 2.78 0.015 13.1 15.7 81.6 2.70 0.021 11.5 54.9 63.3 2.33 0.024 9.6 56.1 60.3 1.57 0.031 8.8 65.3 51.2 1.53 Preguntas 1. Indique el consumo especifico de substrato, el rendimiento de biomasa y producto, productividad específica a una D= 0.021 h-1. 2. Que velocidad de dilución elegiría para producir ácido cítrico. Si tuviera que decidir entre los diferentes sistemas de cultivo que conoce cual elegiría en base a los resultados que se muestran en la tabla. Justifique. 3. Que parámetros cinéticos podría estimar con los datos de la tabla. Indique como lo haría. 4. Le piden que diseñe un cultivo en batch alimentado con alimentación exponencial, donde las concentraciones iniciales de biomasa y volumen son 12.5 g/l y 14.5 l respectivamente. Cual será el flujo inicial y a las 12 hs. Cual será la biomasa (gr) y el ácido cítrico (gr) a las 16 hs de cultivo. 1. Indique el consumo especifico de substrato, el rendimiento de biomasa y producto, productividad específica a una D= 0.021 h-1. Sabemos que en un sistema continuo en el estado estacionario tanto μ ( D= μ) como X son constantes. Entonces la velocidad específica de consumos de sustrato, qs es igual a: qS µ = YXS = 0.021 h-1 = 0.17 ggli / g X * h 0.121 g X/ ggli Siendo Yxs: Yxs = 11.5 g/l X = (SR – s) 11.5 g/l = (150 g/l– 54.9 g/l) 95.1 g/l = 0.121 g X/ ggli En el estado estacionario el balance de formación de producto es: 0 = qP = dp = qP X - D p dt D p X = 0.021 h-1 63.3 g/l 11.5 g/l = 0.12 gcit / gX h 2. Que velocidad de dilución elegiría para producir ácido cítrico. Si tuviera que decidir entre los diferentes sistemas de cultivo que conoce cual elegiría en base a los resultados que se muestran en la tabla. Justifique. El criterio que se toma generalmente es el de productividad volumétrica, Qp: QP = D p D (h-1) 0.009 Biomasa g/l 15.3 Cítrico g/l 86.5 Qp g/ l h 0.778 0.015 13.1 81.6 1.224 0.021 11.5 63.3 1.33 0.024 9.6 60.3 1.45 0.031 8.8 51.2 1.59 3. Que parámetros cinéticos podría estimar con los datos de la tabla. Indique como lo haría. Empleando la ecuación de Lineweaver-Burk se puede Estimar Ks y µmax 1 = D KS 1 µmax s + 1 D 1 µmax 1 KS µMAX µmax 1 s - 1 Ks Empleando la ecuación se puede estimar ms y Yxs verdadero 1 YXS 1 YXS mS = 1 + µ YG 1 YG Pendiente = mS 1 D 4. Le piden que diseñe un cultivo en batch alimentado con alimentación exponencial, donde las concentraciones iniciales de biomasa y volumen son 12.5 g/l y 14.5 l respectivamente. Cual será el flujo inicial y a las 12 hs. Cual será la biomasa (gr) y el ácido cítrico (gr) a las 16 hs de cultivo. La ecuación general del batch alimentado exponencial es: Fo SR = µ X V e µt Yxs A tiempo 0 Fo = µ X V Yxs SR e µt = 1 e µt Fo = 0.031 h-1 12.5 g/l y 14.5 l 0.104 gX/ gglic 150 g/l Fo = 0.36 l/h *1 A tiempo 12 h el F12 será igual a: Ft12= µ X V Yxs SR e µt 0.031 h-1 * 12.5 g/l * 14.5 l * e 0.031 Ft12 = 0.104 gX/ gglic * 150 g/l Ft12 = 0.52 g/l h-1 * 12 La biomasa (gr) a las 16 hs de cultivo será igual a: X V = Xo Vo e µt X V = 12.5 g/l * 14.5 l * e 0.031 h-1 * 16 X V = 297.6 g de biomasa Para calcular la cantidad de ácido cítrico en gr debemos usar la ecuación de rendimiento: YPX = (pV)F - (pV)0 pV (X V)F - (X V)0 = YPX * XV P V = 5.33 gP/ gX * 297.6 g biomasa Si consideramos las condiciones iniciales despreciables 1587.2 g de cítrico