RECOPILADO POR: EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS NMX-K-081-1976. DETERMINACIÓN DE LA SOLUBILIDAD EN ETANOL DE ACEITES ESENCIALES Y PRODUCTOS AROMÁTICOS. METHOD OF TEST FOR SOLUBILITY OF ESSENTIAL OILS AND AROMATIC PRODUCTS IN ETHANOL. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS. PREFACIO En la elaboración de esta Norma, participaron los siguientes Organismos e Instituciones: Secretaria de Hacienda y Crédito Publico. Laboratorio Central. Comisión Nacional de Fruticultura. Fideicomiso del Limón. Pepsi - Cola Mexicana, S.A. The Coca - Cola Export Corporation. Rhodia Mexicana, S.A. 1. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN. Esta Norma establece el método a emplear y las observaciones visuales a efectuar, para la determinación del grado de solubilidad de los aceites esenciales y productos aromáticos, en disoluciones de etanol en concentraciones que van del 50 al 95% con intervalos de 5%. 2. REFERENCIAS NMX-K-144. Norma Mexicana “Método de Muestreo de Aceites Esenciales y Productos Aromáticos” NMX-K-245. Norma Mexicana “Preparación de la Muestra de Aceites Esenciales y Productos Aromáticos” 3. DEFINICIONES 3.1 Se dice que un volumen del producto es soluble en V y más volúmenes de etanol de concentración C, cuando la disolución límpida en V volúmenes permanece así después de la adición de alcohol de la misma concentración hasta un total de 20 volúmenes. 3.2 Se dice que un volumen del producto es soluble en V volúmenes de etanol de una concentración C y se enturbia al diluir, cuando la disolución límpida en V volúmenes se torna turbia y permanece así después de la adición de alcohol de la misma concentración hasta un total de 20 volúmenes (ver 12.2). 3.3 Se dice que un volumen de producto es soluble en V volúmenes de etanol de concentración C y se enturbia a V' volúmenes (V'< 20), cuando la disolución límpida en V volúmenes se torna turbia y permanece así después de la adición gradual de V' volúmenes de etanol de la misma concentración. 3.4 Se dice que un volumen de producto es soluble con opalescencia, cuando la disolución alcohólica presenta una opalescencia análoga a la mostrada por un testigo recién preparado de acuerdo con lo indicado en 5.2. 4. PRINCIPIO O FUNDAMENTO. El método se basa en el grado de miscibilidad observado a 20°C, durante la adición progresiva de una disolución acuosa de etanol de concentración conocida a un aceite esencial o producto aromático. 5. REACTIVOS Y MATERIALES 5.1 Disoluciones acuosas de etanol al 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 y 95% v/v. Para preparar estas disoluciones usar etanol tan puro como sea posible siguiendo las instrucciones dadas en 12.3. Verificar la concentración con un densímetro. 5.2 Disolución testigo de opalescencia. A 50 ml de disolución 0.0002 N de cloruro de sodio se agregan 0.5 ml de disolución de nitrato de plata 0.1 N y una gota de ácido nítrico al 25% p/p. Se agita bien la disolución y se deja en reposo 5 minutos. 6. APARATOS E INSTRUMENTOS • • • • • Bureta de 25 ó 50 ml graduada en 0.1 ml Pipeta volumétrica de 1 ml Probeta de vidrio de 25 ml con tapón esmerilado Baño con control de temperatura con precisión de ± 0.2°C Termómetro calibrado, graduado en 0.1°C para leer temperaturas entre 10 y 30°C. 7. PREPARACIÓN Y CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS Ver NMX-K-144 y NMX-K-245 8. PROCEDIMIENTO Se toma con una pipeta 1.0 ml (ver 12.1) del producto y se transfiere a la probeta, la cual se introduce en el baño a 20°C. En estas condiciones de temperatura, con la bureta se agrega etanol de la concentración indicada en la Norma del Producto correspondiente, en porciones de 0.1 ml hasta disolución del aceite y sucesivamente en porciones de 0.5 ml hasta un volumen máximo de 20 ml, agitando vigorosamente después de cada adición. Cuando se ha obtenido una disolución límpida, se anota el volumen V de etanol utilizando y se continúa agregando etanol en las condiciones ya descritas. Si se produce turbidez antes de haber agregado los 20 ml de etanol, se anota el volumen V' con el que apareció la turbidez y eventualmente el volumen V" con el cual desaparece. 9. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS a) Cálculos La solubilidad del producto en etanol de concentración C, es de un volumen de producto en V volúmenes de etanol de concentración C, con posible turbidez del sistema entre V' y V" volúmenes donde: V = volumen expresado en ml de etanol, a la concentración C, necesario para obtener la disolución límpida. V'= volumen expresado en ml de etanol, a la concentración C, necesario para obtener el enturbiamiento sucesivo a la limpidez, si esto se presenta. V" = volumen expresado en ml de etanol, a la concentración C, con el cual desaparece la turbidez. Los valores de V, V' y V" se expresan hasta la primera cifra decimal. Si el sistema no es transparente si no opalescente se describe la opalescencia como "mayor", "igual" o "menor" que el testigo. 10. BIBLIOGRAFÍA ISO RECOMENDATION R-875. Determination of Solubility of Essential Oils in Ethanol (1968). Food Chemical Codex II. National Academy of Sciences. Washington D.C. 1972. Solubility in Alcohol Pag.899. Norma Unichim 27/8. Olii Essenziale. Determinazione del grado di Solubilita in Etanolo. Norma AFNOR. NFT 75-101. Huiles essentielles evaluation de la miscibilite des huiles essentielles a l'éthanol (1969). NMX-R-050-1975 Norma Mexicana. Guía para la Redacción, Estructuración y Presentación de las Normas Mexicanas. 11. CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES Esta Norma concuerda en todo con ISO RECOMENDATION R-875.Determination of Solubility of Essential Oils in Ethanol (1968). Esta Norma concuerda parcialmente con la Norma de Food Chemical Codex II. National Academy of Sciences Washington D.C. 1972. Solubility in Alcohol Pag. 899. 12. APÉNDICE 12.1 Tabla 1 TABLA 1 Disoluciones de etanol por volumen y por masa 12.2 Si el estado físico del producto no permite utilizar una pipeta, se pesa en gramo ± 0.005 g del producto. En este caso los resultados se expresan en masa y volumen. 12.3 Cuando la disolución, se enturbia después de haber estado límpida, indica insolubilidad parcial. Esta Norma cancela a la: NMX-K-081-1973