Sistema de Revisiones en Investigación Veterinaria de San Marcos UTILIZACIÓN DEL SEMEN SEXADO EN PRODUCCIÓN DE VACUNOS REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA Autor: Olger Ramos Coaguila Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria DICIEMBRE 2013 TABLA DE CONTENIDO 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. PRESENTACIÓN ...................................................................................................... 2 CARACTERÍSTICAS DEL SEMEN DE BOVINOS ............................................... 3 CITOMETRÍA DE FLUJO PARA A DETERMINACIÓN DEL SEXADO DE SEMEN ....................................................................................................................... 4 VENTAJAS DEL USO DE SEMEN SEXADO ........................................................ 5 RESULTADOS OBTENIDOS MEDIANTE EL USO DE SEMEN SEXADO ....... 6 UTILIZACIÓN DEL SEMEN SEXADO EN BIOTECNOLOGÍAS REPRODUCTIVAS .................................................................................................... 7 PERSPECTIVAS DEL USO DE SEMEN SEXADO EN SISTEMAS DE PRODUCCIÓN LECHERA ....................................................................................... 9 CONCLUSIONES ..................................................................................................... 9 LITERATURA CITADA ......................................................................................... 10 UTILIZACIÓN DEL SEMEN PRODUCCIÓN DE VACUNOS SEXADO EN M.V.Z Olger Ramos Coaguila 1. PRESENTACIÓN Durante los avance se dio en 1981 cuando pudo últimos años la comunidad científica y diversas empresas de inseminación artificial a nivel mundial han comenzado a investigar sobre la posibilidad de poder determinar el sexo de las crías de vacunos al nacimiento, pensando sobre todo en la utilidad de un mayor nacimiento de hembras para el ganado lechero. Es por ello que el uso de semen sexado en los programas de inseminación artificial ha despertado un gran interés como una herramienta de gran importancia en la industria ganadera. demostrarse de que el material genético contenido en el semen podía ser medido. Los avances subsecuentes de ensayos como la Citometría de Flujo proporcionó el número mínimo de espermatozoides para su uso en inseminación artificial. Sus efectos sobre la tasa de parición de crías hembras alteraría de forma positiva los porcentajes de reposición y los costos de crianza de animales machos (Garner&Seidel, 2008). Sin embargo, algunas de sus limitaciones se deben a las bajas tasas de concepción, por lo que se restringe su uso casi exclusivo a novillas primerizas. Luego de varios años de esfuerzos para poder determinar el material espermático que produzca animales hembras del que produzca animales machos, un gran A continuación presentamos una revisión bibliográfica detallada sobre los aspectos de mayor importancia en relación a El espermatozoide la metodología del sexaje del semen así altamente especializada con función como los principales estudios llevados a especializada para la fecundación del cabo en la industria ganadera. ovocito (Faulkner & Pineda, 1978). Dentro 2. CARACTERÍSTICAS DEL SEMEN DE BOVINOS Existen varios parámetros utilizados para la evaluación de la calidad del semen bovino. Entre las evaluaciones tenemos al volumen, concentración y motilidad espermática así como medidas bioquímicas y pruebas funcionales. En relación al volumen del semen, este es de gran importancia en relación al número de dosis que pueden obtenerse a partir del eyaculado. Asimismo, la exhibición de la motilidad progresiva es una medida aproximada de la viabilidad del semen (Urbina, 2012). de es sus una célula características morfológicas la cabeza es una de las estructuras de mayor importancia dada su capacidad para penetrar la célula y depositar el material genético (Olivera, 2009). El acrosoma es un saco delgado membranoso en forma de casquete, que contiene enzimas acrosina, hialuronidasa. Asimismo, la cola forma la porción motora de la célula para poder alcanzar al oocito (Olivera, 2009). Por todas estas características resulta importante evaluar al semen procedente de bovinos antes de la determinación del sexado del mismo. e Y a partir de su contenido de DNA. El semen a ser evaluado en esta prueba es Figura 1. Célula espermática bovina normal (izquierda); célula espermática con acrosoma dañado (derecha). Fuente http://www.serida.org/publicacionesdetal le.php?id=1495 teñido con el colorante Hoechst 33342 que tiñe el ADN de los espermatozoides y emitir fluorescencia al ser sometido a luz láser (Pérez, 2012). A mayor cantidad de espermatozoides con cromosoma X habrá 3. CITOMETRÍA DE FLUJO PARA A DETERMINACIÓN DEL SEXADO DE SEMEN La citometria de flujo es una técnica que permite la separación de espermatozoides X mayor fluorescencia debido a un mayor porcentaje de ADN en estos cromosomas comparados a los cromosomas Y. Para poder detectar la diferencia de fluorescencia y separar los espermatozoides requeridos, se utiliza un citómetro de flujo el cual consiste en un circuito cerrado de alta velocidad de dosis de semen sexado contiene en promedio flujo de líquidos que permite alinear y leer un 90% de espermatozoides del sexo los espermatozoides en microgotas. deseado, además de que no contiene espermatozoides muertos o dañados ya que La fluorescencia de los espermatozoides será estos son separados en la citometría (ECM procesada por un software que le permite al 2012). operador seleccionar espermática con la mínima población o máxima 4. VENTAJAS DEL USO DE SEMEN SEXADO luminosidad, según el sexo a separar (Oses & Teruel, 2009). Para ello, los espermatozoides elegidos serán cargados eléctricamente, original en finalmente se un serán desviarán campo del flujo magnético recolectados para y su congelación posterior (Ver Figura 1). Del total de muestra obtenida en el eyaculado inicial aproximadamente 20% de los espermatozoides es colectado en la fracción X, 20% en la fracción Y mientras que el 60% restante lo constituyen espermatozoides que no pudieron ser detectados por la A partir del ensayo de citometría de flujo se obtiene el denominado semen sexado. La diferencia en la proporción de DNA es lo que posibilita la diferenciación del sexo del espermatozoide, ya que los espermatozoides tienen representa El uso de semen sexado constituye una tecnología de creciente utilización en programas de inseminación artificial en vacunos lecheros, ya que vacas con mayor mérito se podrían se podrían destinar a la producción de crías hembra. Además, el sexaje de espermatozoides tiene un gran interés en la cría de animales para la producción de carne o leche así como en técnica. X El epitelio de la mucosa intestinal 3.8% más ADN que los espermatozoides Y (CAMC, 2008). Cada sistemas productivos donde la productividad se ve favorecida por el mayor número de crías hembra. Una de las demandas de mayor importancia en los sistemas de producción bovina actual es poder controlar el sexo de las crías, ya que la industria lechera se ve favorecida por el mayor número de crías hembra que machos (Urbina, 2012). 5. RESULTADOS OBTENIDOS MEDIANTE EL USO DE SEMEN SEXADO El uso de semen sexado puede contribuir con el incremento en la ganancia de producción lechera en una variedad de vías. Puede ser usado para producir una descendencia de crías de un sexo específico Figura 2. Representación básica de la metodología de citometria de flujo para el sexado de semen. Fuente:http://www.cbm.uam.es/mkfactory.es domain/webs/CBMSO/plt_Servicio_Pagina. aspx?IdServicio=5&IdObjeto=217 para propósitos específicos. En la industria lechera es deseable el nacimiento de un Diversos estudios científicos mayor número de crías hembra como mediante el uso de semen sexado han sido animales de reemplazo. Además, el uso de llevados a cabo en Estados Unidos. En semen sexado podría ser útil en pruebas de dichos estudios se utilizaron principalmente progenie, ya que menos apareamientos novillas vírgenes debido a que presentan serían necesarios para poder producir un mejores tasas de concepción que animales número requerido de hijas (Hohenboken, adultos. 1999). realizados en vaquillas Holstein en Colorado indicaron Los que resultados la tasa de de estudios concepción promedio con semen sexado se encontró entre 48 a 55%, comparado al 69% obtenido mediante semen no sexado, no del 56% con semen no sexado y del 39% con demostrándose efecto significativo de la semensexado; en vacas las tasas de concentración del semen ni el lugar de concepción fue de 30% con semen no colocación del semen (Weigel, 2004). Por sexado y 25% con semen sexado. otro lado, Tubmanet al (2004) reportaron en un estudio mediante utilización de semen sexado 87.8% de nacimientos de hembras (utilizando semen X) y 92.1% de 6. UTILIZACIÓN DEL SEMEN SEXADO EN BIOTECNOLOGÍAS REPRODUCTIVAS El uso de semen sexado nacimientos de machos (utilizando semen Y) conjuntamente comparado a un 49.2% de machos mediante embriones el uso de semen no sexado. potencialmente eficiente para obtener crías in con vitro la producción es un de medio de un determinado sexo (Wheeleret al., Los resultados del éxito mediante el 2006). Varias preocupaciones en relación al uso de semen sexado en hatos lecheros han uso de semen sexadoincluyen la baja sido demostrados por DeJarnetteet al (2009), fertilidad aparente en su uso, la baja tasa de donde las tasas de concepción al primer supervivencia luego de la criopreservación y servicio fueron 47% en vaquillas Holstein y el reducido número de espermatozoides que 53% para vaquillas Jersey. Norman et al pueden ser separados en un período de (2010); reportaron el efecto del empleo del tiempo específico. Zhang et al (2003) semen sexado en la tasa de concepción, el evaluaron el uso de semen sexado sobre la sexo de la cría, las distocias y los mortinatos tasa de división y formación de blastocistos. en vaquillas como en vacas. La tasa Para ello, se utilizó semen sexado marcado deconcepción promedio para vaquillas fue con tinción Hoeschst, semen teñido pero no sexado y semen control. A pesar de que los resultados de división y formación de porcentaje de blastocistos (Blondínet al., 2009). blastocistos fueron ligeramente superiores en el control (69.7%) comparado a las muestras La calidad y estructura funcional del teñidas (53.1% y 59.9%) no se demostró semen sexado ha sido evaluada por Carvalho diferencia estadística significativa, lo cual et al. (2010) quienes demostraron que sumado al hecho de obtener un 90% de muestras de semen bovino no sexado hembras nacidas con semen sexado puede presentaron mejores niveles de calidad, constituirse alternativa incluyendo motilidad y mayor porcentaje de biotecnológica de gran utilidad en la membrana celular y acrosoma intactos en industria lechera. comparación con muestras de semen sexado como una (tanto X como Y; p<0.05); no obstante no se Por otro lado, algunos estudios han demostrado alteraciones tasas de fertilización división entre grupos morfológicas en embriones podrían deberse (p>0.05). Por lo tanto, a pesar de que los a calidad procesamientos del sexado de semen las espermática durante la técnica de separación características espermáticas, no afectaron mediante citometria (Palma et al., 2008). Por significativamente la fertilización y la tasa tales motivos, resulta de gran importancia de desarrollo embrionario (Carvalho et al., determinar y caracterizar los parámetros del 2010) efectos eyaculado condiciones que algunas demostraron diferencias significativas en las ocasionados y en determinar para producir la las mejores el máximo programas de inseminación artificial se ha 7. PERSPECTIVAS DEL USO DE venido utilizando en diferentes partes del SEMEN SEXADO EN SISTEMAS DE PRODUCCIÓN LECHERA trópico para producir crías hembra F1 con características productivas de diferentes La disponibilidad del semen sexado en la industria de vacas lecheras ha sido anticipada por muchos años. Sin embargo, razas que podrían servir para potenciar la productividad en determinadas áreas, como por ejemplo el trópico peruano. existen dos limitantes a considerar como son la velocidad de producción de pajillas (y por lo tanto el precio) así como la tasa de concepción in vivoWeigel (2004) menciona que cerca de 150 a 200 pajillas son procesadas por máquina/día y esto comprende menos del 0.5% de la demanda de semen en la industria lechera. Además , como se ha mencionado anteriormente las tasas de concepción en diferentes ensayos clínicos que incluyen vaquillas primerizas, oscilan entre 35 a 40% con semen sexado, comparado a un 60% obtenido con semen no sexado. Por tales motivos no se recomienda su uso en vacas (Linderoth, 2008). No obstante, el uso de semen sexado en 8. CONCLUSIONES La explotación de ganado vacuno lechero constituye una de las principales industrias de producción animal a nivel mundial. Es por ello que existen alternativas para maximizar la eficiencia productiva de los animales como la inseminación artificial y la transferencia de embriones. El uso de semen sexado en programas de inseminación artificial se ha convertido en una práctica cada vez más utilizada con la finalidad de incrementar el número de crías hembras de reemplazo, dado su mayor valor económico. Asimismo, el sexaje de semen permite el aprovechamiento del potencial genético de las madres a través de un mayor número de hijas. A pesar de una serie de limitantes como el costo y las tasas de concepción más bajas en comparación al semen no sexado, su uso ha demostrado ser eficiente en muchos centros de producción a nivel mundial. Además, esta tecnología permitiría la introducción de crías hembra F1 a partir de cruces de razas para potencializar su eficiencia productiva en el trópico. 9. LITERATURA CITADA Blondin P, Beaulieau M, Fournier V, Morin N, Crawford L, Madam P, King WA. 2009. 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