MEDIO DE CULTIVO Micología General _ Catálogo 1006 ___________________________________________________ AGAR CITRATO DE SIMMONS USO Para identificación biquímica de Enterobacterias en base a la utilización del citrato como única fuente de carbono. PRINCIPIO El citrato de sodio es la única fuente de carbono. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico del medio. Cuando las bacterias utilizan el citrato, el medio se alcaliniza y cambia el color inicial verde (neutro), que esta dado por la presencia del azul de bromotimol a color azul (alcalino, prueba positiva). La reacción negativa se manifiesta por ausencia de crecimiento y no hay cambio de color. Salmonella typhi, Salmonella paratyphi y Shigella se pueden diferenciar de S. schottmuelleri, S. enteritidis y S.. typhimurium siendo este último grupo capaz de utilizar el citrato, mientras que el primero no puede hacerlo. El medio se puede emplear de la misma forma que el Citrato de Koser para realizar la prueba de utilización del citrato como una de las reacciones del IMVIC. Inocular el medio de cultivo a partir de una colonia estriando la superficie. Incubar 24 – 48 h a 35ºC. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA Agar Azul de bromotimol Citrato de sodio Cloruro de sodio 15.0 0.08 2.0 5.0 Fosfato dihidrogenado de amonio Fosfato dipotásico Sulfato de magnesio 1.0 1.0 0.2 pH 6.9 ± 0.2 PREPARACION Rehidratar 24.2 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Distribuir volúmenes de 3 a 5 ml en tubos de 13 x 100 mm. Esterilizar a 121ºC ( 15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar en posición inclinada de manera que el medio en el fondo del tubo alcance una profundidad de 1.0 a 1.5 cm. Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Enterobacter cloacae Klebsiella pneumoniae Salmonella typhi Serratia marcescens Shigella flexneri ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC CEPA 25922 13047 10031 19430 13880 12022 o 9199 RESULTADO Negativo Positivo Positivo Negativo Positivo Negativo Prueba positiva = crecimiento, cambia a color azul Prueba negativa = sin crecimiento, no hay cambio de color BIBLIOGRAFIA Simmons J. Inf. Dis. 39 : 209, 1926. Standard Methods for the examination of Water and Wastewater. 11th Ed., APHA Inc. New York 1960. Mac Faddin, 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenence of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore. PRESENTACION No. Cat. 1006 1006-E 1006-A Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g No. Cat. 1006-B 1006-TC 1006-TCP DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. Deshidratado 100 g Preparado tubo 13x100 mm Preparado paquete con 10 tubos 3