Bioluminiscencia ATP Microbiano

3M Food Safety
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Edición #7 Julio – Setiembre 2012 – Boletín Coleccionable
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Bioluminiscencia
de
ATP Microbiano
Solución Sencilla y Rápida
para el Control de Esterilidad de Productos UHT
ÍNDICE:
Página 2 – Innovando en Seguridad Alimentaria.
Liberación Rápida de Productos UHT
Guadalupe Mondragón– Especialista en Servicio Técnico
3M Food Safety México
Página 3 – Amigos de la Seguridad Alimentaria.
Control de Esterilidad de Productos UHT
Gabriela Stancanelli – Especialista en Servicio Técnico
3M Food Safety Argentina & Uruguay
Innovando en
Seguridad Alimentaria
Liberación Rápida de Productos UHT
3M™ Sistema de Luminiscencia Microbiano MLS II
Guadalupe Mondragón Herrera
Maestría en Ciencia e Ingeniería de Alimentos
Universidad Politécnica de Valencia, España
Ingeniería en Alimentos
Universidad Iberoamericana, México
Especialista en Servicio Técnico
3M Food Safety México
Productos Ultra-Pasteurizados (UHT)
Hoy en día la demanda de productos UHT en la industria láctea ha
ido en aumento, esto debido principalmente a la eficiencia del
proceso, al aumento de la vida útil del producto, a la conservación
de propiedades (vitaminas, minerales, etc) y a la eliminación de
temperaturas de refrigeración durante el almacenamiento y
distribución. Aunado a ello el consumidor ha mostrado preferencia
por la variedad de productos disponibles en el mercado así como
por la reducción de gastos que el almacenamiento prolongado de
los productos UHT le permite.
Durante el proceso UHT, los productos lácteos son sometidos a un
tratamiento térmico mayor a 135°C por un periodo de tiempo muy
corto y seguido de un envasado aséptico. El proceso tiene como
objetivo la destrucción de las células viables y esporas hasta un
nivel que garantice la seguridad al consumidor y la vida útil del
producto, lo que se conoce como esterilidad comercial.
Métodos de Monitoreo y Liberación Rápida de Productos UHT
En este tipo de productos, el monitoreo de contaminación
microbiológica es fundamental para su liberación al mercado, sin
embargo, los métodos convencionales de análisis implican largos
tiempos de respuesta en los que es necesario permitir el
crecimiento de los microorganismos en los medios de cultivo por
un período de 48-72horas o mayor, por otro lado los métodos
alternativos se han enfocado en determinar si existe
contaminación microbiológica que pueda ser detectada sin
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necesidad de crecimiento o enumeración así como también en la
reducción de tiempos de respuesta. Una de las tecnologías que ha
cobrado mayor relevancia para la industria es la bioluminiscencia,
la cual puede describirse como una reacción en la que se produce
luz a partir del ATP (Trifosfato de adenosina) de células viables,
esto cobra relevancia dado que cada microorganismo contribuye
a la señal de luz generada en la reacción, sin importar sus
condiciones de crecimiento (aerobios, anaerobios o
microaerofílicos).
El Sistema 3M™ de Luminiscencia Microbiano MLSII permite el
monitoreo rápido de producto terminado combinando la
tecnología de Biolumiscencia por ATP que permite detectar
contaminación microbiana a partir de 1 UFC/muestra en
productos lácteos comercialmente estériles, tras un periodo de
incubación se permite el desarrollo de los microorganismos hasta
niveles de detección. La reducción sustancial de ATP somático y
libre también es crucial para permitir una detección precisa del
ATP microbiano, lo cual se logra empleando una enzima que
degrada el ATP libre y somático llamada ATPasa. El ATP
microbiano reacciona entonces con la enzima Luciferasa que
junto con su sustrato D-luciferin desencadena la reacción de
bioluminiscencia cuyo producto final es luz, la cual es medida en
el equipo empleando un Software para el manejo e interpretación
de resultados que le permiten conocerlos rápidamente y de
manera visual así como también analizar, graficar y evaluar
tendencias.
El tamaño de mercado de productos lácteos UHT varia de un país
a otro, sin embargo en países en vías de desarrollo es uno de los
métodos de conservación más eficientes y su demanda continua
en aumento, es por ello que resulta primordial emplear métodos
de análisis y liberación más eficientes.
Amigos de la
Seguridad Alimentaria
Control de Esterilidad de Productos UHT
3M™ Sistema de Luminiscencia Microbiano MLS II
microorganismos de posible/común ocurrencia en este tipo
de productos, entre otros bacillus (coagulans, subtilis),
lactobacillus (buchneri, fructivorans, lactis subsp. Cremoris),
levaduras (picchia terrícola, Candida, bailli) y E. coli como
representante de Enterobacterias.
Gabriela Stancanelli
Licenciada en "Tecnología Industrial de los Alimentos"
Universidad Argentina de la Empresa
Maestría en "Especialista en Ingeniería en Calidad"
Universidad Tecnológica Nacional
Servicio Profesional 3M Food Safety Argentina & Uruguay
Los sistemas de calidad en la industria alimenticia deben
permitir el control de una manera fácil y eficaz en todo el
proceso de elaboración, desde la materia prima hasta el
producto terminado listo para consumir.
Errores o demoras en obtención de resultados de análisis en
el control de calidad pueden conducir a costos adicionales
innecesarios, podrían poner en riesgo la salud del consumidor
pero aun más, podrían resultar en pérdidas económicas y
desequilibrio del proceso de manufactura.
Para el análisis de productos estériles envasados de forma
aséptica, existen diversos sistemas de control de calidad de la
esterilidad del producto. 3M Food Safety ha sido pionero en el
análisis de esterilidad de dichos productos con el sistema
3M™ MLS (Sistema de Luminiscencia Microbiano) el cual
ofrece una rápida solución de detección microbiológica
resultante de la posible contaminación pos-tratamiento
térmico en la elaboración de productos estériles. Es además,
una alternativa sencilla y rápida de implementar dentro del
control microbiológico de productos comercialmente estériles.
Se ha llevado a cabo una evaluación preliminar del
desempeño de la tecnología 3M™ MLS para la detección del
ATP microbial de productos estériles base puré de tomate. Se
han utilizado muestras de producto estéril y se han
contaminado artificialmente con una variedad de cepas de
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Se han utilizado tres protocolos de ensayo diferentes para
determinar cual se adecua mejor al pH acidico (promedio pH
4.2) que presentan las muestras y se determinó que
agregando una pequeña cantidad (0.5 mL) de Buffer de
Fosfatos de pH 7.0 a la enzima ATPasa ya reconstituida
permite una mejor reacción de las enzimas y obtener menores
valores de luz de fondo así como mayores señales en
muestras contaminadas, reduciendo también los resultados
falsos positivos (<2%).
De forma similar, se han determinado los límites de
aceptación y rechazo en base a la luz de fondo. La señal de
luz de fondo se debe al ATP residual del producto que no ha
sido digerido durante el paso de degradación con la enzima
ATPasa, o aquel al que la ATPasa no puede acceder. Cabe
mencionar que el nivel de ATP de fondo es altamente
dependiente de la muestra, composición y condiciones de
proceso. También es dependiente de la edad de la muestra,
tiempo de pre-incubación y temperatura. El establecimiento
de los limites de Aceptación y Rechazo tienen como objetivo
maximizar la detección de una muestra positiva y minimizar el
número de falsos positivos o resultados erróneos que
implicarían volver a analizar la muestra.
También se hicieron ensayos para determinar los tiempos de
incubación necesarios que permitan una detección confiable.
Se incubaron muestras contaminadas desde 72 hasta 168
horas a 35°C, al cabo del cual algunos lactobacillus y
levaduras fueron evidentes en la determinación de ATP por
bioluminiscencia.
Los resultados de esta evaluación preliminar indican que
3M™ MLS puede ser una alternativa confiable para la
detección de la contaminación microbiológica en productos
no lácteos procesados con tratamiento UHT y envasado
aséptico.
3M Food Safety
3M™ Sistema de Luminiscencia Microbiano (MLS II)
Tecnología
Potente
Reducción del
Tiempo en la Obtención de los Resultados
El sistema 3M™ MLS II utiliza la tecnología de bioluminiscencia mediante la detección de ATP (trifosfato de adenosina).
Debido a que el ATP está presente en todas las células vivas, se puede utilizar como indicador de la contaminación biológica.
Con los métodos tradicionales, no solamente se tienen que pre-incubar los envases de leche, también usted tiene que esperar
a que los microorganismos se reproduzcan en una placa de agar durante 2 - 3 días y en algunas ocasiones durante más
tiempo.
Con el sistema 3M™ MLS II, el segundo período de incubación se puede eliminar. No todos los microorganismos crecerán
en medios de cultivo o serán capaces de modificar el pH o producirán CO2. La prueba de ATP funciona para
aerobios,anaerobios y microaerofílicos.
¿Por qué utilizar el Sistema 3M™ MLS II para sus pruebas?
VELOCIDAD = DINERO
El 3M™ Sistema de Luminiscencia Microbiano (MLS II) está diseñado para la liberación rápida de productos lácteos
ultrapasteurizados, leche de arroz, leche de soya y otros productos relacionados con procesos de ultra pasteurización (UHT).
Permite detectar la presencia de contaminación microbiana en productos terminados. Este sistema le ofrece:
• Protección a la marca
• Reducción de costos mediante una mejor productividad
• Reducción del tiempo de rotación de inventarios
• Resultados confiables que mejoran las decisiones de control de calidad.
• Con más de 10 años de experiencia en el mercado.
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