Técnica de recolección de muestras urinarias mini invasiva en ratas

XII Jornadas de Divulgación Técnico Científicas, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNR
Jornada Nacional de Divulgación Técnico Científica 2011
Facultad de Ciencias Veterinarias, UNR – UNL 250º Aniversario de la Enseñanza Veterinaria
Técnica de recolección de
invasivas en ratas
muestras urinarias
mini
Lupo, M.; García, B.; Rigalli, A.
Laboratorio de Biología Ósea. Cátedra de Química Biológica. Facultad de
Ciencias Médicas, UNR
La metodología empleada para la recolección de muestras en un
experimento siempre es un punto crítico a tener en cuenta a la hora de
preservar la salud del animal y por la dificultad planteada cuando se desea
realizar un muestreo a lo largo del tiempo en ratas. La obtención de
muestras urinarias de manera continua requiere habitualmente de
cateterismo vesical, que consiste en la incisión suprapúbica y la inserción de
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un catéter en vejiga . Esta técnica generalmente finaliza con la eutanasia
del animal y puede complicarse por la contaminación con sangre y la
presencia de coágulos sanguíneos que obstruyen el flujo urinario. Una
dificultad adicional es el mantenimiento de un flujo urinario constante. La
necesidad de mantener con vida al animal y obtener flujos urinarios
constantes obligó al desarrollo de técnicas de menor invasividad. El objetivo
de este trabajo fue el desarrollo de una técnica de obtención de muestras de
orina por cateterismo uretral con flujos urinarios constantes. Se utilizaron
ratas Sprague-Dalwley, de 60-200 días de edad, normales y con distintos
tratamientos (n= 17). Se realizó sedación y luego anestesia general con
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ketamina . Alcanzado el estado anestésico adecuado, se procedió a realizar
el cateterismo intrauretral. Para ello se utilizó un abocat 24 G modificado, sin
punta, con lubricante de uso interno. Se desarrolló una maniobra que
permite llegar a la vejiga evitando las posibilidades de lesión de las vías
urinarias. Se confirma la correcta colocación del catéter cuando comienza a
aparecer la orina y no hay pérdida de la misma por fuera del catéter.
Simultáneamente, con el cateterismo uretral, se introdujo una sonda K35 por
vía rectal conectada a una bomba peristáltica con la que se realiza una
infusión de solución fisiológica a un flujo constante de 8ml/hora. La
metodología descripta permitió obtener muestras de orina durante 3hs, con
flujo urinario promedio: 0.063 ± 0.036ml/min. No hubo diferencias
significativas entre los distintos tratamientos. El 100% de los animales en los
que se aplicó esta técnica, se recuperó y continuó con sus tratamientos
habituales. Se concluye que la técnica planteada es ventajosa respecto del
cateterismo vesical ya que permite obtener muestras de orina durante
períodos más largos, sin contaminación con sangre y con flujos urinarios
constantes. Por otra parte, la hidratación rectal tiene como ventaja sobre la
hidratación intravenosa el ser de más fácil realización dada las dimensiones
de las venas en la rata. A su vez, al reemplazar la hidratación orogástrica,
se evitan los inconvenientes derivados de la broncoaspiración.
XII Jornadas de Divulgación Técnico Científicas, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNR
Jornada Nacional de Divulgación Técnico Científica 2011
Facultad de Ciencias Veterinarias, UNR – UNL 250º Aniversario de la Enseñanza Veterinaria
BIBLIOGRAFÍA
1. De Candia, L.; Rigalli, A.; Di Loreto, V. Anesthesia and analgesia. En:
Experimental Surgical Models in the Laboratory Rat, 1º Ed. Rigalli A. Di
Loreto V. Eds. Taylor and Francis Group. CRC Press. Boca Ratón. USA. pp.
21-30. 2009
2. Di Loreto, V.; Pera, L.; Rigalli A. Samples. En: Experimental Surgical
Models in the Laboratory Rat, 1º Ed. Rigalli A. Di Loreto V. Eds. Taylor and
Francis Group. CRC Press. Boca Ratón. USA. pp. 63-71. 2009