LABORATORIOS CONDA, S

INSTRUCCIONES DE USO
Revisión 0 Abril 2010
AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO (AGAR E.M.B)
Agar Eosina y azul de Metileno (AGAR E.M.B) presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1039
USO PREVISTO
Agar Eosina y Azul de Metileno está recomendado para el aislamiento, cultivo y diferenciación de bacilos entéricos
gram negativos en muestras clínicas.
FORMULA EN g/l
Peptona Bacteriológica
10.00
Eosina Y
0.04
Lactosa
5.00
Azul Metileno
0.065
Sacarosa
5.00
Agar Bacteriológico
13.50
Fosfato Dipotasico
2.00
Final pH 7.2 ± 0.2 at 25ºC
PREPARACION
Agar Eosina y azul de Metileno (AGAR E.M.B) presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 11039(Medio
deshidratado)
Suspender 36 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente. Dejar hervir
durante un minuto o hasta disolución completa. Distribuir en recipientes adecuados y esterilizar en autoclave a 121°C
durante 15 minutos. Enfriar a 45-50ºC. Remover con cuidado, evitando la formación de burbujas y verter cuidadosamente
en placas de Petri. NO SOBRECALENTAR. Las placas preparadas deben almacenarse 8-15°C. El color es azul-tornasol. La
esterilización reduce el azul de metileno, dejando el medio de color naranja. El color púrpura puede ser restaurado
mezclando el medio suavemente. El medio reducido debe mezclarse para que el azul de metileno se oxide, de otro modo,
aparecerá una zona oscura en la parte alta de la placa, que se irá extendiendo gradualmente hacia el fondo.
El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar
el medio.
PRINCIPIO Y APLICACION
AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO (E.M.B) es un medio diferencial similar al Agar Levine (Cat. 1050) y es utilizado
para el aislamiento de Enterobacterias. El uso de Eosina y Azul de Metileno permite la diferenciación entre organismos
fermentadores y no fermentadores de lactosa. Es muy utilizado en bacteriología médica. La Peptona aporta nitrógeno,
vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La Sacarosa se añade además de la lactosa como
carbohidrato fermentable, para detectar coliformes que fermentan la sacarosa más rápidamente que la lactosa. La
Eosina y azul de metileno son inhibidores parciales de bacterias Gram-positivas e indicadores de pH. Debido a la lactosa
y la sacarosa en el medio se puede diferencia en cultivo primario Salmonella y Shigella las cuales son lactosa negativo y
pueden ser diferenciados de otras lactosa negativos y sacarosa positivos tales como Proteus vulgaris, Citrobacter y
Aeromonas. El Fosfato dipotásico actúa como buffer del sistema y al Agar bacteriológico es el agente solidificante.
TIPO DE MUESTRAS
Heces, orina
La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en
Microbiología Clínica.
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PROCEDIMIENTO
1.- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo
2.- Incubar a 35 ± 2ºC durante 24-48 horas
3.- Lectura e interpretación de los resultados
Salmonella y Shigella colonias translucidas color ámbar o incoloras
Coliformes que fermentan la lactosa o la sacarosa producen colonias de azul oscuras con centros oscuros a verdosas
con brillo metálico. Otras coliformes como Entrobacter colonias aspecto mucoide, colonias rosas. Enterococcos faecalis
parcialmente inhibidos aparecen como colonias incoloras. Estafilococos, Estreptococos y levaduras pueden crecer en este
medio. Algunas bacterias gram-negativas no fermentadores pueden aparecer como no fermentadores de lactosa. A
veces son necesarios los test bioquímicos para identificación del género.
CONTROL MICROBIOLOGICO
Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo, después de incubación a
temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 24 - 48 horas.
Microorganismos
Enterobacter aerogenes ATCC 13048
Escherichia coli ATCC 25922
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Desarrollo
Color Colonia
Bueno
Bueno
Bueno
Bueno
Inhibido
Rosa
Verde con brillo metálico
Incolora
Incolora
Incolora
BIBLIOGRAPHY
American Public Heath Association. Diagnostic Procedures and Reagents. 2nd Ed. APHA, Inc. New York, 1950
A.P.H.A Examination of dairy products. 10th Ed. APHA, Inc. New York, 1953. Society of American Bacteriologists. Manual of
Microbiological Methods MacGraw-Hill New York, 1957.
Diagnostico in vitro
Solo para uso profesional
Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad
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ALMACENAMIENTO
Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación.
Utilizable hasta la fecha de caducidad.
25ºC
2ºC
Laboratorios Conda S.A
C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz
Madrid, España
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