INTERFERENCIA DE LA TIROGLOBULINA (Tg) EN LA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS ANTITIROGLOBULINA (ATg) EN EL LÍQUIDO DE LAVADO DE AGUJA DE PUNCION GANGLIONAR Ibañez N, Cavallo A.C*, Smithius F, Beattie E, Lambertini R, Aranda C, Oneto A. TCba-Centro de Diagnóstico. Servicio de Endocrinología, Hospital Universitario Austral* Salguero 560. CABA. En el Carcinoma Diferenciado de Tiroides (CDT) han sido reportadas más de un 60% de metástasis ganglionares, incluso en microcarcinomas papilares. La citología ganglionar por punción transecográfica es el método más sensible y específico, pero está referido un 8% de material insatisfactorio. La medición de Tg en el líquido de lavado de aguja de punción ganglionar es una técnica sencilla y de bajo costo que nos permite aumentar la eficacia diagnóstica de la citología en la detección de ganglios metastásicos en pacientes con cáncer diferenciado de tiroides. Pacientes con ATg sérico positivo no son excluidos de ésta técnica. La interferencia que los ATg producen sobre la medición de Tg sigue siendo la principal limitación en la utilidad clínica de este marcador. Dicha interferencia ha sido bien estudiada por numerosos autores, sin embargo, la interferencia que pueden producir las altas concentraciones de Tg sobre la determinación de ATg no está clara. OBJETIVO: El objetivo del presente trabajo fue investigar la interferencia que las altas concentraciones de Tg características de los ganglios metastásicos pueden producir sobre la determinación de los ATg en el líquido de lavado de aguja de punción ganglionar. MATERIALES Y METODOS: Se estudiaron las muestras provenientes de la punción de adenopatías cervicales sospechosas de 19 pacientes postiroidectomía por CDT. Para éste procedimiento se utilizó aguja 23G y luego de la preparación del extendido para el estudio citológico se procedió al lavado de la aguja con 500 µl de solución fisiológica para determinar Tg y ATg en el líquido de lavado de aguja de punción ganglionar. La medición de Tg se hizo por ensayo quimioluminiscente Immulite 2000 (Sensibilidad Funcional 0,3ng/ml). Los ATg se midieron utilizando dos ensayos: Immulite 2000 ensayo no competitivo quimioluminiscente (Q ) y Cobas e411 ensayo competitivo electroquimioluminiscente (Eq) de dos pasos. Se consideró ATg negativo valores <20UI/ml para las dos metodologías. Estudio de Interferencia: Se realizaron diluciones apropiadas de la muestra 16* para medir ATg por los dos métodos. RESULTADOS: Los resultados se muestran en la tabla 1.. Tabla 1: Valores de Tg(ng/ml) y ATg(UI/ml) (Q y Eq) en el líquido de lavado de aguja de punción ganglionar Pacientes Tg ATg Eq ATg q 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 15185 15569 32475 31451 38444 44706 68990 79126 81242 89039 90980 99703 128349 204744 289082 106 123 150 226 182 312 280 895 306 739 588 522 788 1375 2493 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 <20 16* 17 18 19 306326 323266 431804 1141275 2780 3120 >4000 >4000 <20 <20 <20 <20 En todas las muestras analizadas las concentraciones de Tg en el líquido de lavado de aguja de punción ganglionar mostraron valores muy elevados (rango: 15185-1141275ng/ml). Los resultados de los ATg fueron negativos en el 100% de las muestras cuando se midieron por el método no competitivo (Q) y francamente positivos en un rango de 106 a > 4000UI/ml cuando se midieron por el método competitivo (Eq), siendo estos valores proporcionales a la concentración de Tg en la muestra. En la figura 1 se grafica la regresión lineal. Se observa una correlación positiva 2 entre los niveles de concentración de Tg y los anticuerpos medidos por Eq (R =0,9594; p<0,001). Figura 1: Regresión lineal Atg (UI/ml) por Eq vs Tg (ng/ml) 4000 Atg (kUI/L) 3000 2000 1000 0 0 100000 200000 300000 400000 Tiroglobulina (ng/ml) Se observó una falta de linealidad en las diluciones realizadas para las concentraciones de ATg medidas por Eq. Cuando las concentraciones de Tg fueron inferiores a 3000ng/ml, los anticuerpos por Eq se negativizaron. Los ATg medidos por Q arrojaron valores negativos en todas las diluciones. Tabla 2. Tabla2: Estudiodediluciones de la muestra 16 Muestra 16 Directo Dil 1/10 Dil 1/100* Dil 1/1000 Dil 1/10000 Tgng/ml Valor medido >300 >300 >300 >300 30.6 Tgng/ml (cc final teórica) 306.326 30.632 3063* 306,3 30,6 ATg UI/ml Eq 2780 850 <20 <20 <20 ATg UI/ml q <20 <20 <20 <20 <20 CONCLUSION: Las altas concentraciones de Tg interfieren en la medición de los ATg cuando los mismos son medidos por un método competitivo electroquimioluminiscente. La interferencia es proporcional a las concentraciones de Tg. Se recomienda que en los líquidos de lavado de aguja de punción ganglionar los ATg sean medidos por un método no competitivo quimioluminiscente ya que no parece estar interferido por las altas concentraciones de Tg característica de los ganglios metastásicos. BIBLIOGRAFÍA: 1. Thyroglobulin Autoantibodies in Patients with Papillary Thyroid Carcinoma: Comparison of Different Assays and Evaluation of Causes of Discrepancies. Latrofa et al. JCEM, Nov 2012, 97 (11). 2. Causes of discordance between thyroglobulin antibody assays. Pickett et al. Annals of Clinical Biochemestry 2012; 49:463-467.