Dogma central de la Biología Molecular Replicación ADN Transcripción ARN Traducción Proteínas Tema 7. Transcripción en procariotas Transcripción z Molde z Sustratos z Aparato de transcripción Molde Unidad de Transcripción z Promotor z Región codificante z Terminador Sustrato z rNTPs Aparato de transcripción z ARN polimerasa ω ω Transcripción en procariotas Etapas z Iniciación: z Aparato z Elongación z ARN z de transcripción + Promotor polimerasa Terminación z Separación Iniciación 1. Reconocimiento del promotor 2. Burbuja de transcripción 3. Enlaces entre rNTPs 4. Separación Aparato de transcripciónPromotor Promotores Elongación z z z Movimiento de la ARNpol en dirección 3’ Separación momentánea de la doble hebra de ADN: Burbuja Velocidad: 40 n/seg Terminación Fin de la síntesis de ARN z Separación ARN-ARNpol z Separación ARN-ADN z – – Dependientes de rho Independientes de rho Terminadores independientes de rho z z Repeticiones invertidas Hexa A Terminadores dependientes de rho z z ADN que provoca pausa ARN sin estructura secundaria → unión a rho Resumen z z z z z z z Transcripción: selectiva ARN a partir de ADN simple cadena Sustrato: RNTPs Dirección 5’ → 3’ ARN pol: compleja, multímero, core + σ Promotores: sec consenso Terminador Tema 9. Transcripción en eucariotas Transcripción en eucariotas z Iniciación z Elongación z Terminación ARN polimerasas z z z ARNpol I → ARNr grandes ARNpol II → pre ARNm ARNsn ARNsno ARNpol III → ARNt ARNr pequeño ARNrs Nucleosoma z z z Modificación estructural ADN laxo Diversas proteínas Iniciación Promotores z Potenciadores z ARNpol II + Factores de transcripción general → Aparato de transcripción basal z Proteínas activadoras z Promotores z Promotor mínimo z Promotor regulativo Ensamblaje Potenciadores Elongación z z Movimiento en dirección 3’ Complejo Terminación z ARN pol II transcribe mas allá de la señal de terminación pasando a través de varias regiones AATAAA. z El pre-ARNm que transporta esta señal en forma de AAUAAA se rompe por una endonucleasa que reconoce la señal y corta entre 11 y 30 residuos hacia el lado 3’ z Luego se añade una cola poli-A de hasta 200pb mediante una polimerasa especial que no esta dirigida por un molde Procesamiento del ARNm ¿Qué es un gen? z Factor hereditario que determina un rasgo. z Conjunto de nucleótidos que codifica la secuencia de aminoácidos de una proteína. z Incompletas, simplificadas. Organización del gen: colinealidad z z Bacterias y virus Excepción: codón stop ARN mensajero z z z Transportador de la información desde el ADN al ribosoma → proteína 1aa → 1 codón (triplete) Estructura Procesamiento del pre ARNm z Bacteria: transcripción y traducción simultáneas z Eucariotas: transcripción y traducción con separación espacial y temporal z Pre ARNm (transcripto primario) → ARNm (maduro) Procesamiento del pre ARNm z Extremo 5’: caperuza o capuchón z Extremo 3’: poliadenilación z Región codificante: corte y empalme Caperuza 5’ z z z Inicio de traducción Estabilidad del ARNm Participación en el corte y empalme Cola poliA z z 50 a 250 A Clivaje de extremo 3’ y adición de cola poliA z Estabilidad por proteínas de unión a la cola Intrones z z Regiones codificantes: Exones Regiones no codificantes: Intrones Características del corte y empalme z z Esencial para el traslado del ARN del núcleo al citoplasma No se altera el orden de los exones Corte y empalme: remoción de intrones Corte y empalme Empalmosoma z ARNsn + proteínas: RNPsn – z U1, U2, U4, U5 y U6 Proteínas no asociadas a ARNsn Autoempalme: Grupo I Autoempalme: Grupo II Procesamientos alternativos z Empalme alternativo z Múltiples sitios de clivaje 3’ z Proteínas diferentes a partir de la misma secuencia de ADN Empalme alternativo Múltiples sitios de clivaje 3’ Edición del ARN z DOGMAS z ¿Un gen: una proteína? z ¿Toda la información de la secuencia de aminoácidos de una proteína reside en el ADN? ARN de transferencia z z z z Adaptador entre Nucleótidos y AA. Un ARNt para cada AA. 30 a 40 tipos: codificados por genes distintos. 74 a 95 nucleótidos. Estructura: bases modificadas Procesamiento del ARNt z z z z Varios ARNt en un transcripto: corte Remoción de nucleótidos en 3’ y 5’ Modificación de bases Adición de bases Ribosomas z z z 20000 por célula + de 50 proteínas y ARN ribosomal Subunidad pequeña + subunidad grande ARN ribosomal: estructura