antígeno prostático específico psa en líquido seminal

ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO
PSA EN LÍQUIDO SEMINAL
TIPO DE ENSAYO
MUESTRA
SENSIBILIDAD
ESPECIFICIDAD
MÉTODO
PRESENTACIÓN
SEMI-CUANTITATIVO
LIQUIDO SEMINAL
100%
100%
INMUNOCROMATOGRÁFICO
CASSETTE
PRECAUCIONES.




INTRODUCCIÓN

El dispositivo de diagnóstico XERION PSA-LIQUIDO SEMINAL en formato
cassette permite mediante un ensayo Inmunocromatográfico, la
determinación visual semi-cuantitativa en un sólo paso de la presencia
de Antígeno Prostático Específico en muestras de Líquido Seminal en un
niveles de PSA 4.0 ng/ml
Los resultados de la prueba son rápidos, fáciles de interpretar de manera
visual y no se requiere de instrumentación o reactivos adicionales.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA
El Antígeno Prostático Específico (PSA) es una glicoproteína producida
exclusivamente por la glándula prostática. Es una glicoproteína con
actividad enzimática tipo proteico cuya función es licuar el líquido
seminal y se encuentra en una concentración de 0.2mg/ml a 3.0mg/ml
El PSA es un marcador interesante en la ciencia forense para la detección
de pequeñas cantidades de líquido seminal.
Las ventajas de la
determinación del PSA son:

Detección del PSA en casos donde no existan espermatozoides,
hombres con vasectomía.

Se pueden detectar cantidades muy pequeñas de PSA, estudios
realizados por MACALUSO en 1999, detectaron que 10l de
líquido seminal incrementan el PSA en el líquido vaginal hasta
en 200 veces.

El PSA es muy estable, en el flujo vaginal se detecta entre14 a
47 horas después de …..

El PSA es un marcador más específico que la Fosfatasa Acida.
El PSA se encuentra en otros líquidos del cuerpo con la sangre y la orina.
Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del
procedimiento de ensayo con el objeto de realizarlo en forma
correcta.
Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben
considerarse como potencialmente infecciosos. Manipúlelos y
deséchelos de acuerdo con las normas vigentes.
Exclusivamente para diagnóstico IN VITRO y para ser usados por
profesionales.
No utilice el dispositivo de diagnóstico después de la fecha de
vencimiento indicada en el empaque de Aluminio.
No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de
diagnóstico.
Evite humedecer el área de la ventana de visualización de
resultados
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Los dispositivos de diagnóstico XERION PSA-Líquido Seminal deben
permanecer hasta la fecha de vencimiento en sus respectivos empaques
de Aluminio sin abrir, refrigerados o a temperatura ambiente (2C a
30C), alejados de la luz solar directa, la humedad y el calor excesivo.
No Congelar.
La exposición del dispositivo de diagnóstico a temperaturas mayores a
30ºC, puede reducir la vida media del producto o incluso ocasionar el
daño definitivo del mismo.
MATERIALES SUMINISTRADOS
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


Un dispositivo de diagnóstico Cassette XERION PSA-Líquido
Seminal
Gotero dispensador de la muestra.
Buffer
Inserto
MATERIALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS


Reloj o Timer
Elementos para obtención y almacenamiento de la muestra
PRINCIPIO
OBTENCION Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
El dispositivo XERION PSA es un inmunoensayo cromatográfico semi
cuantitativo que detecta PSA en líquidos corporales. Contiene 2
anticuerpos monoclonales como componentes activos. Uno de estos Ac
es inmovilizado en la región del Test de la membrana. La almohadilla de
color blanco conjugado contiene anticuerpos monoclonales anti-PSA
conjugados con oro coloidal, que reaccionaran con la Antígeno
Prostático Específico presente en la muestra y hay otros Ac policlonales
de cabra y ratón que reaccionaran con el complejo marcado con oro
coloidal permitiendo visualizar las líneas rojas del Control, que me indica
que el dispositivo está funcionando correctamente.
Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaución como
si fuera potencial infecciosa.
 Líquido seminal debe ser diluido al menos 1:500 antes de su
uso debido a su alto nivel de viscosidad, la dilución debe
realizarse con solución tampón TRIS, de pH neutro, 8,2
Las manchas de semen o hisopos deben extraerse por
agitación aproximadamente durante 2 horas. Las manchas
frescas requieren una agitación de 13 minutos.
 Se utiliza el sobrenadante, si está muy viscoso debe diluirse.
 Las partículas de tejido no interfieren con el resultado de la
prueba.
 La alta viscosidad de la muestra puede interferir con la
capilaridad de la membrana, donde hace migración la
muestra.
 Un valor de pH menor de dos en la muestra puede causar
falsos
positivos
o
resultados
inválidos.
Cuando un volumen adecuado de muestra se distribuye en la
plataforma de la tira de prueba, la muestra migra por acción capilar a
través de la tira. El anti-PSA Ac se une al Ac de ratón en la región del
control y la región del patrón interno desarrollando 2 líneas rojas,
estas dos líneas son independientes del PSA de la muestra sólo indican
la correcta ejecución de la prueba. Si la muestra contiene PSA, el PSA
oro anti-PSA marcado con Ac complejos se une al Ac monoclonal,
formando una banda T de color, lo que indica que en un resultado
positivo se deben observar tres líneas y en el resultado negativo dos
líneas. La concentración que detecta es de 4ng/ml en Líquido
Seminal.
PROCEDIMIENTO
Todos los materiales deben estar a temperatura ambiente antes del
ensayo.
 Extraiga el dispositivo XERION PSA Líquido Seminal Cassette y
Gotero del empaque de Aluminio.
Identifíquelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio.
 Cuando utilice líquido seminal coloque 3 gotas (120 l) de la
muestra en el orificio absorbente del Cassette.

Leer los resultados a los 10 minutos, de lo contrario puede tener
resultados incorrectos.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Utilice buena iluminación durante la interpretación de resultados.
No interprete los resultados después de 10 minutos de iniciado el ensayo
ya que después de este tiempo la interpretación puede ser equivocada.
Negativo: una muestra de PSA Negativo muestra 2 líneas, mientras que
el PSA positivo forma 3 líneas.
Aparecen dos bandas de color, una en la región de control (C) y otra en la
región de referencia (R o T1). No hay una banda visible en la región de
prueba (T o T2). Indica que la concentración de PSA en la muestra es
cercana o menor de 4 ng/ml.
Las características cualitativas son confirmadas por un Control de
Calidad final, estándar de la OMS y con la norma internacional NIBSC
código 96/670.
Características de Rendimiento
Las siguientes características se observaron en una concentración de
2ng/ml de PSA.
Sensibilidad Relativa:
100%
Especificidad Relativa:
100%
Valor predictivo Positivo:
100%
Valor predictivo negativo: 100%
Reproducibilidad:
100%
ESPECIFICIDAD
No presenta reactividad cruzada con otras proteínas del Líquido
Seminal. No presenta reactividad cruzada con el suero sanguíneo.
Positivo: Aparecen tres bandas de color, una en la región de control (C),
una en la región de referencia (R o T1) y otra en la región de prueba (T o
T2).
Prueba Inválida: No se visualiza bandas de color en la región de
control (C) o en la región de referencia (R o T1) dentro de los primeros
5 minutos después de haber depositado la muestra de Líquido Seminal
en el orificio absorbente del Cassette.
Puede deberse al uso en el ensayo de un volumen de muestra
equivocado (insuficiente o excesivo) o a un procedimiento realizado de
manera incorrecta. Repita el procedimiento utilizando un nuevo
Cassette.
CONTROL DE CALIDAD
La región de control (C) es el control interno del dispositivo que permite
confirmar que el volumen de muestras utilizado en el ensayo ha sido el
adecuado y el procedimiento ha sido realizado de manera correcta.
Las Buenas Prácticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto
tiempo que los componentes de los dispositivos de diagnóstico operan
correctamente utilizando materiales de control diseñados para este fin.
LIMITACIONES DEL ENSAYO
El diagnóstico y la terapéutica no pueden ser originados por el resultado
de un único test. Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una
evaluación clínica de la condición del paciente y su historia antes de
establecer un diagnóstico definitivo.
Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor
comuníquese con el departamento de servicio al usuario de XERION.
INTERFERENCIAS
Ninguna conocida.
CRITERIOS DE DESEMPEÑO
SENSIBILIDAD
La prueba detecta PSA en concentraciones de 2ng/ml a 100ng/ml,
cuando se tiene concentraciones muy altas de PSA puede darnos falso
positivos por el Efecto de Hook.
BIBLIOGRAFIA
1Hochmeister et al. (1999) Evaluation of Prostate- Specific
Antigen (PSA)
Membrane Test Assays for the Forensic Identification of Seminal Fluid:
J Forensic
Sci Vol 44: 1057-1060
2Lawson et al. (1998) Objective markers of condom failure. Sex Transm
Dis 25:
427-423
3Macaluso et al. (1999) Prostate-specific antigen in vaginal fluid as a
biologic
marker of condome failure. Contraception 59: 195-201
4Sato et al. (2002) Use of the „SMITEST” PSA card to identify the
presence of
prostate –specific antigen in semen and male urine. Forensic Sci Int
127: 71-74
5Hochmeister et al. (1997) Evaluation of Prostrate-Specific Antigen
(PSA)
Membrane Tests for the Forensic Identification of Semen. 8th
International
Symposium on Human Identification at
http://www.promega.com/geneticidproc/ussymp8proc/33.html
6Laux et al., Forensic Detection of Semen III. Detection of PSA Using
Membrane
Based Tests: Sensitivity Issues with Regards to the presence of PSA in
other
Body Fluids. http://mafs.net/pdf/forensicdetectionsemen3.pdf
7Laux et al., Forensic Detection of Semen II. Comparison of the Abacus
Diagnostics OneStep ABA card p30 Test and the SERATEC_ PSA
Semiquant Kit
for the Determination of the Presence of Semen in Forensic Cases.
http://mafs.net/pdf/laux2.pdf
8Gartside et al., Estimation of Prostate-Specific Antigen (PSA)
Extraction
Efficiency from Forensic Samples Using the SERATEC_ PSA Semiquant
Semiquantitative Membrane Test. Forensic Science Communications
2003 April;
5 (2). http://www.fbi.gov/hq/lab/fsc/backissu/april2003/gartside.htm
9SERATEC GmbH: Summary about PSA in body fluids:
http://www.seratec.com/docs/user_instructions/psa_in_body_fluids
Ref.: Cassette
Lote: F12481/V: 11-2014
Rev.: 04/2013
Lote: F12131/V: 03-2014