DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES Ing. Agr. Clara Linardelli DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES “Diagnóstico en patología, es el reconocimiento de una enfermedad o anormalidad, y la identificación de su agente causal” “ Identificación de una enfermedad o anormalidad y la de su agente causal” Objetivos Reconocer que una planta u órgano vegetal está sufriendo una dolencia o alteración. Determinar la enfermedad que está presente. Identificar el agente causal. Sugerir medidas de control y manejo adecuadas. TIPOS DE DIAGNÓSTICO SINTOMATOLÓGICO ETIOLÓGICO TIPOS DE DIAGNÓSTICO DIAGNÓSTICO SINTOMATOLÓGICO Se basa en los síntomas que manifiesta el individuo. Posee importancia decisiva el “síndrome o cuadro etiológico de la enfermedad”. DIAGNÓSTICO SINTOMATOLÓGICO DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO De rutina: Signos espontáneos Signos inducidos Serológicos, fisicoquímicos, hibridación de ácidos nucleicos, etc. Experimental o científico: Aislamiento del patógeno a fin de permitir su identificación. Cumplimento de los “Postulados de Koch”. “Postulados de Koch” 1) El patógeno debe encontrarse asociado con la enfermedad en todos los individuos enfermos que se examinan. 2) El patógeno debe aislarse: Parásito no obligado: en medio nutritivo Parásito obligado: en tejido vivo. 3) Reproducción de la enfermedad en la misma variedad o especie. 4) Reaislamiento en cultivo puro del patógeno y sus características deben coincidir con el 2° postulado DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO Por el lugar de realización. A. In situ o a campo: Reconocimiento de síntomas y/o signos. Evaluación de daños. Dispersión. Recolección de muestra representativa. DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO B. En gabinete y/o laboratorio: Los pasos a seguir son: 1. Identificación de la muestra en el libro de entradas. 2. Ordenamiento de la muestra Importante: el material no debe ser lavado DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO 3. Observación macroscópica Material sin lavar - A “ojo desnudo” - A la lupa binocular Fundamental para observar la presencia de signos del patógeno 4. Lavado del material (prolijamente) Repetir los pasos anteriores 5. Promover la formación de signos Cámara húmeda DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO 6. Observación microscópica del material enfermo. - Con signos superficiales a) Raspado de tejido epidérmico arrastrando los signos superficiales. b) Montaje de tiras de epidermis c) Montaje con ayuda de adhesivos anaerobios. DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO - Ausencia de signos superficiales a) Macerado de tejidos y aplastamiento entre portaobjeto y cubreobjeto b) Macerado, difusión y frotis (bacterias) c) Técnica del exudado (bacterias) - Cortes histológicos: a) A mano libre. b) Con micrótomo. 1) Cortes de material en fresco. Micrótomos de mano o micrótomos de congelación. 2) Material fijado y conservado. DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO - Técnicas de montaje: Vitales Agua o soluciones acuosas de colorantes vitales. No vitales a) Preparados temporarios. 1) Incoloros 2) Coloreados b) Preparados permanentes. DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO 7. Descripción literal. Dibujo a la cámara clara, fotografía, filmación 8. Revisión bibliográfica 9. Casos especiales - Aislamiento en cultivo puro Monospórico Siembra de tejidos enfermos (hongos y bacterias) DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO Pasos a seguir: 1) 2) 3) 4) 5) Selección del material Cortar trozos de 4-5 mm de lado Lavar 7-8 veces con agua corriente. Pasaje por alcohol 70% por 15-30 segundos. Esterilización superficial con Cl2, hipoclorito de calcio o sodio o bicloruro de mercurio. * 6) 7) 8) 9) Sembrar en cajas de petri con medio de cultivo Incubar en estufa a temperatura adecuada. Repicar la colonia a pico de flauta. Estudio del agente causal. DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO Macerado y difusión (bacterias) 1) Estriado en superficie. 2) Incorporación de la suspensión bacteriana al medio de cultivo antes de solidificar. Técnica de punción de Goth (bacterias) 10) Consulta bibliográfica 11) Cumplimiento 1º y 2º Post. de Koch 12) 3º Postulado: Reproducción de la enfermedad 13) 4º Postulado: Reaislamiento Resultado: Diagnóstico etiológico científico experimental de total certeza PASOS DE UN DIAGNÓSTICO I) Observación “a ojo desnudo” Síntoma Signo PASOS DE UN DIAGNÓSTICO Observación bajo lupa síntoma signo PASOS DE UN DIAGNÓSTICO Lavado del material Repetición de los pasos I y II. Realizar las técnicas microscópicas más apropiadas de acuerdo al material y al tipo de agente patógeno del cual se sospecha. PASOS DE UN DIAGNÓSTICO Observación microscópica. Eflorescencia por raspado Corte de tejido Descripción literal y fotográfica Revisión bibliográfica Entrega de informe.