Inmunohematología (Notas de clase)

INMUNOLOGÍA APLICADA
Notas de Clase
María Dolores Lastra A.
INMUNOHEMATOLOGIA
En 1901 Karl Landsteiner demostró la existencia de los antígenos de los grupos
sanguíneos en los eritrocitos humanos, así como de anticuerpos dirigidos contra
estos antígenos en el suero humano. Landsteiner verdaderamente abrió las
puertas del banco de sangre con eL descubrimiento del primer sistema de grupo
sanguíneo, el ABO.
Esto marcó el principio del concepto de lo único individual definido por los
antígenos eritrocitarios presentes en su membrana. El sistema ABO permanece
como el más importante en la práctica de la transfusión. La transfusión de un tipo
incorrecto de ABO puede provocar la muerte del paciente.
Los antígenos de grupo sanguíneo son marcadores de superficie en el exterior de
la membrana del eritrocito. Son proteínas y carbohidratos, unidos a lípidos y a
proteínas.
La terminología utilizada actualmente para denominar los grupos sanguíneos es
inconsistente. Algunos antígenos se denominaron por el individuo o familia cuyos
eritrocitos tenian el antígeno o por el que hizo el primer anticuerpo que reconoció
al an tígeno., a otros se les asignó una dnominación numérica o alfabética. Aun
dentro del mismo grupo, se han utilizadp diferentes formas de nombrar a los
antígenos.
La Asociación Internacional para laTransfusión Sanguínea (siglas en inglés,ISBT)
ha establecido un sistema de letras mayúsculas y números para representar los
sistemas y los antígenos de grupo sanguíneo en un formato, que permitirá una
ampliación y un registro en sistemas de cómputo. Por ejemplo:
Sistema ABO
Nombre del sistema:
ABO
Símbolo ISBT:
ABO
Número ISBT
001
Número de antígenos:
4
Nombre de los genes:
ABO
Localización cromosómica: 9q34.1-q34.2
Expresión
En forma soluble en todos los fluidos corporales (excepto líquidocéfalo
raquídeo)en secretores.
Además de la membrana del eritrocito, en linfocitos y palquetas sólo adheridoa del
plasma. En la mayor parte delas células epiteliales y/o endoteliales. Distribución
amplia en tejidos.
En términos generales, la vía bioquímica de los grupos sanguíneos produce el
antígeno H (antígeno presente en las personas de grupo O) y se modifica el
antígeno H a antígeno A (presente en individuos A) y el antígeno B (presente en
las personas B). La enzima A se codifica por el alelo del gen ABO y la enzima B
por el alelo correspondiente del gen ABO. El alelo O u H, no codifica una enzima
así que el individuo que es homocigoto ii no puede modificar el antígeno H, ya sea
el A o el B, así permanece como tipo sanguíneo 0 ó cero. Los individuos que son
heterocigotos para los alelos A y B (AB), codifican para ambas, la enzima A y la
enzima B y producen ambos antígenos A y B. El gen ABO se localiza en el
cromosoma 9 (9q34.1-q34.2). Otros rasgos asociados con genes del cromosoma 9
son la galactosemia, el síndrome de "nail-patella" y el de "xeroderma
pigmentosum".
Secretores
Las secreciones son, saliva, sudor, lágrimas, leche, jugo gástrico, etc.
Genes
Secretores gen: Se/Se,Se/se Se:carácter dominante, se: carácter recesivo
No secretores
gen:
se
Frecuencia
Secretores
78% población
No secretores
22%
“
En secreciones,
O
A
B
AB
tiene H
tiene A y H
tiene B y H
tiene A, B y H
Los individuos homocigotos para se/se, no secretan antígenos A, B y H, aunque
tengan los genes A, B y H. La secreción de estas personas contiene cadenas tipo
1 y tipo 2 pero no actividad A, B y H. La enzima codificada por el gen h actúa
principalmente en cadenas tipo 2 y en las membranas de eritrocitos. La enzima
producida por Se prefiere tipo 1 y actúa principalmente en las glándulas
secretoras. El rol sugerido para la transferasa Se, (L-fucosiltransferasa) es
transferir L-fucosa a la galactosa terminal de cadenas tipo 1 que forma la
substancia h en las secreciones. Es la presencia de fucosiltransferasa que
subsecuentemente determina si las substancias A, B y H solubles, se secretan por
que la substancia H debe sintetizarse, antes de la formación de las substancias A
o B.
Otros antígenos en secreciones: Lewis, Chido, Rodgers, I, etc.
Las pruebas para secreciones pueden ayudar a establecer el verdadero tipo ABO
en individuos con antígeno eritrocitarios poco desarrollados. Y su demostración en
saliva es evidencia para la herencia del gen A, B y H. Y Se.
Desarrollo y distribución de los grupos ABO
Los antígenos A y B no están completamente desarrollados en los recién nacidos,
pero se puede detectar algún desarrollo antigénico en los eritrocitos embrionarios
a las 5 semanas de edad gestional. Aunque la fuerza de los antígenos A y B no
aumenta durante la vida fetal, estos antígenos ganan fuerza enseguida del
nacimiento. Se observan reacciones de aglutinación débiles con los eritrocitos y de
neonatos comparadas con las de eritrocitos adultos.
Se ha propuesto que las diferencias en la actividad celular de A, B y H entre
infantes y adultos puede relacionarse con el número de estructuras ramificadas en
las membranas celulares de cada grupo. El número y fuerza de los sitios
antigénicos son menores en los infantes que en los adultos.
Los bebes del grupo A pueden ser tipo A2 al nacer pero subsecuentemente, tener
reacciones de tipo A1 a los 6 a 18 meses de edad.
Bioquímica y desarrollo de los antígenos A, B y H
El gen H codifica para la producción de alfa-L-fucosiltransferasa que cataliza la
adición de L-fucosa, el aminoazúcar dominante del antígeno H, a dos estructuras
ligeramente diferentes conocidas como cadenas precursoras 1 y 2 ( estas se
denominan así por las uniones entre la N-acetilglucosamina y la galactosa
terminal,en la 1 la unión es beta 1-3 y en la 2, es beta 1-4). Una vez que actúa el
gen H, las enzimas codificadas por los genes A y B, pueden añadir los
monosacáridos correspondientes (que dan especificidad) a las cadenas H
preformadas.
Las enzimas transferasas son los productos de los genes A y B.
La substancia precursora está constituída por glucosa-galactosa-Nacetilglucosamina-galactosa. En la substancia H existe una L-fucosa insertada en
la D-galactosa terminal, la L-fucosa es el azúcar inmunodominante. En la
substancia A el azúcar inmunodominante en la N-acetil D-galactosamina insertada
en la D-galactosa terminal; en la B es D-galactosa-insertada en la D-galactosa
terminal.
La L-fucosa es el azúcar responsable de la especificidad H. El gen A codifica para
la producción de N-acetilgalactosaminil transferasa que transfiere Nacetilgalactosamina de nucleótido uridín-difosfato-N-acetil-D-galactosa-a las
estructura H. El gen A produce mayor concentración de glicosiltransferasa que el
gen B. Esto hace que prácticamente todo el antígeno H en la membrana del
eritrocito se convierta a antígeno. Hay de 810,000 a 1,170,000 sitios antigénicos
de A, en la célula adulta.
El gen B codifica para la D-galactosiltransferasa que transfiere D-galactosa del
uridín-difosfato galactosa a la substancia H. Este azúcar en posición terminal es
inmunoespecífico para la substancia B. Existen de 600,000 a 830,000 sitios
antigénicos B en el eritrocito. Cuando se heredan A y B, la enzima B parece
competir más eficientemente por la estructura H que la A. Así el número de ags. A
en el eritrocito A es de 600,000 comparada con un promedio de 720,000 sitios
ags. B.
Variaciones de las transferasas
Aunque son específicas para un mismo monosacárido y utilizan la misma molécula
aceptora, las transferasas producidas por los genes A1 y A2 son diferentes
cuantitativa y cualitativamente. Se ha demostrado que los niveles de transferasa
son de 5 a 10 veces mayores en personas A1, que en las A2, los individuos y las
transferasas difieren en requerimientos químicos tales como el pH óptimo.
Configuración molecular de A, B y H
Los óligosacáridos A o B se insertan en la banda 3 y en la 4.5 y son partes
integrales de la membrana de los eritrocitos y de las células endoteliales y
epiteliales. Estos óligosacáridos también están presentes en forma soluble en el
plasma. Las glicoproteínas que llevan óligosacáridos idénticos son responsables
de la actividad A y B en las secreciones como la saliva. Se encuentran
óligosacáridos A y B que carecen de proteína acarreadora o lípidos, en la leche y
la orina.
Cadenas tipo 1 y tipo 2
Los antígenos H se sintetizan en cadenas precursoras o core que terminan en
enlaces tipo 1 y tipo 2. Las cadenas difieren solo en el enlce de la beta galactosa
al residuo terminal beta-N-acetilglucosamina. El carbón beta-1,3 representa la
cadenas tipo 1; en enlace beta-1,4 representa una cadena tipo 2. Los azúcares
inmunodominantes A, B ya se pueden añadir a cualquiera de las dos cadenas.
Las cadenas tipo 1; son las principales acarreadoras de A, B y H en secreciones y
fluidos corporales. Los antígenos A, y H aparecen como oligosacáridos libres en la
leche y la orina y en glicolípidos del plasma. En la saliva, los antígenos A, B y H,
se llevan en glicoproteínas con cadenas tipo 1 y tipo 2. Las cadenas tipo 2 casi
exclusivamente forman los antígenos A, B y H presentes en las membranas de los
eritrocitos. Estudios recientes indican que puede haber cadenas tipo 3 y tipo 4.
Los antígenos ABO están estructuralmente relacionados a la banda 3 y a la banda
4.5 intercambiadora de glucosa.
La estructura química básica de los antígenos ABO, se encuentra en la
presentación en power-point, correspondiente.
Subgrupos sanguíneos de ABO
A1, A2, A3, Ax, Am, etc.
Transparencia
Los antígenos del grupo A se pueden diferenciar en subgrupos principales: A1 y
A2. Aproximadamente 80% de los A, son A1, la mayoría de los restantes son
grupo A2. Los patrones hereditarios de los fenotipos A1 y A2 sugieren que los
genes A1 y 2 codifican para diferentes transferasas.
Al menos cuatro tipos diferentes de substancias activas A y H, se han aislado de
los eritrocitos. Las H se clasifican H1, H2, H3 y H4.
El suero de individuos B contiene una mezcla de dos acs, anti A y anti A1 que se
pueden separar por absorción. Las células A que reaccionan sólo con anti A y no
con anti A1, se clasifican como de subgrupo A2. Cuando el anti A se absorbe con
células A2, el suero que queda es el anti A1. Las células A que reaccionan con
anti A y anti A1, se clasifican como A1. Otra fuente de anti A1 es la lectina de
Dolichos biflorus. De anti H, es la lectina de Ulex europeus.
Existen así, cuatros tipos diferentes de A y H activos, las cadenas H se clasifican
en H1, H2, H3 y H4 y las cadenas A se refieren como Aa, Ab, Ac, Ad. Estas
cadenas varían en longitud y complejidad de las ramificaciones. Las cadenas más
lineales son: H1 y H2; Aa y Ab. Las cadenas más ramificadas son H3, H4 y Ac y
Ad.
Los grupos que amplían la determinación de ABO son el A1 y el A2, y A1B y A2B.
Reacciones serológicas de estos fenotipos en transparencia y material impreso .
Los otros subgrupos A3, Ax, Am, Aend y otros son menos frecuentes por lo tanto
en rutina no se investigan.
Grupo Bombay
Se presenta una situación interesante cuando un individuo no es capaz de hacer
antígeno H. Esta persona, no puede producir antígeno H, y aun cuando tenga
enzimas A y B, no puede hacer estos antígenos, porque no existe el precursor
para los antígenos sobre el que ejercer una acción.
Un individuo que no puede producir antígeno H, parecerá de grupo O, ya que este
grupo no presenta A, ni B, además el Bombay tampoco produce H. Esto se
documentó por primera vez en Bombay, por Bhenda y así se le conoce como
fenotipo Bombay. Estos individuospueden presentar anti A, anti B y anti H , en
secreciones.
Reacción con anti H de los grupos del sistema ABO:
Reacción con anti H: O > A2> A2B> B> A1> A1B