Caenorhabditis elegans Survives Atmospheric Breakup of STS-107, Space Shuttle Columbia Ivia E. Rivera Agosto Universidad de Puerto Rico en Humacao Autores z El grupo de investigadores a cargo de este experimento trabajó como parte del NASA Ames Research Center en California. z Integrantes: - Nathaniel J. Szewczyk Rocco L. Mancinelli William McLamb David Reed Baruch S. Blumberg Catharine A. Conley z Los principales objetivos de este grupo fueron: - Entender los procesos naturales por los que la vida puede migrar de un planeta a otro. - Identificar los límites ambientales para examinar adaptaciones biológicas en condiciones extremas. z El líder de esta investigación fue: Rocco Mancinelli, junto a Nathaniel J. Szewczyk - Senior Research Scientist del SETI Institute en California (1986-presente) - Ph.D. en Ecología Microbiana de la Universidad de Colorado (1982) - M.A. en Ecología Microbiana de la Universidad de Colorado (1977) - B.A. en Biología Celular Molecular y del Desarrollo (1975) Resumen C. elegans es un nemátodo comúnmente usado para estudios biológicos. z Hace más de una década se ha estado desarrollando como sistema modelo de biología espacial. z z Para crecer C. elegans en el espacio se ha creado un nuevo medio de cultivo distinto a los medios de laboratorio comunes. z Es conocido como: “C. elegans Maintenance Medium” (CeMM). z CeMM facilita en gran manera el cultivo del organismo transformándolo en un proceso casi autónomo que requiere una atención mínima de la tripulación. z Antes utilizar el CeMM es necesario validarlo y probar que permite crecimiento y reproducción en un ambiente espacial. z Para validar este medio se cultivaron unos organismos en condiciones estándar de laboratorio y otros en el mismo. z Estos especímenes se colocaron a bordo de la nave STS-107, el transbordador espacial Columbia. z La misión del Columbia fue una de las misiones más ambiciosas que la NASA haya tenido en años. Aunque duró poco más de dos semanas. z Consistía de siete tripulantes que atendían casi 80 proyectos de investigación en turnos rotatorios. z Por desgracia, el transbordador espacial Columbia estalló durante su regreso a la Tierra al hacer contacto con la atmósfera. z Los siete tripulantes perecieron en este accidente, que ocurrió faltando solo seis minutos para llegar a casa. z Al recuperar los restos del accidente se encontraron cinco de los seis envases que contenían el experimento. z En cuatro de estos cinco envases se observaron especímenes vivos al ser encontrados. z Los datos recuperados muestran que C. elegans se mantiene vivo y viable en CeMM durante el viaje al espacio. z Además se desprende de ellos la posibilidad de que existen organismos vivos capaces de entrar en nuestra atmósfera relativamente desprotegidos. z Estos resultados son de suma importancia en áreas como: - Empaque de material biológico para viajes espaciales - Protección planetaria - Transferencia interplanetaria de la vida Trasfondo z El uso de Caenorhabditis elegans resulta conveniente en estudios biológicos por su corto periodo de gestación y gran cantidad de progenie. z Además hay una amplia comunidad científica que estudia C. elegans como modelo en procesos relevantes a la salud del astronauta. z Para crecer C. elegans en el laboratorio se utiliza el “Nematode Growth Medium” (NGM). Este se compone de agar con E. coli (muerta por exposición UV) como fuente alimenticia. z Este método resulta poco conveniente en el espacio ya que requiere la transferencia del organismo a placas nuevas casi semanalmente. z Otro problema que representa el usar NGM es que requiere que el organismo crezca en la superficie de la placa. z En el espacio la tensión superficial enmascara los efectos de la ausencia gravedad (microgravedad). z Esto puede alterar el resultado de los experimentos en los que se utilice NGM. z Previo a este experimento otras cepas de C. elegans habían viajado al espacio en las naves: STS-42: Completó dos ciclos de vida STS-76: Mutó debido a radiación cósmica STS-95: Murieron controles y también los experimentales posiblemente por anoxia. Métodos z Se crecieron dos grupos de organismos: - NGM: los que se crecieron en este medio se conocen como la cepa N2 - CeMM: los que se crecieron en este medio pasaron a ser la cepa CC1 z Se tomaron individuos de ambas cepas en la generación L1 (etapa larvaria) y se calculó el número inicial por conteo directo. z Luego, 26 horas previo al lanzamiento se colocaron en placas petri con agar y 5ml de medio, selladas con parafina. z Las placas se pusieron dentro de seis contenedores BRIC-60 (Biological Research In flight Canister). z A cada contenedor se le hicieron cuatro perforaciones en la tapa, para ventilación. z Dentro se colocaron aparatos de registrar la temperatura cada 30 minutos y en tres de ellos bolsas de LiOH que absorbe CO2 gaseoso. z Los controles se prepararon 24 horas después que los experimentales. z Los contenedores 2-6 se colocaron en una cámara programada para simular la temperatura y condiciones atmosféricas del Columbia con un retraso de 24 horas. z Se prepararon controles adicionales para medir los efectos del empaque, la temperatura constante (a 20°C) y la transportación. z Contenido inicial de los controles y experimentales: Resultados z El Columbia estalló el 1 de febrero de 2003 en la mesósfera a 61km de la superficie de la Tierra. z Cinco de los contenedores se recuperaron en Texas en fechas desde el 4 de febrero al 21 de marzo del 2003. z El envase 6, el “foam” que lo rodeaba y la bandeja de plástico no se encontraron. z Los contenedores 1-4 se recuperaron en el área de búsqueda inicial, mientras que el 5 relativamente lejos de la misma. z Se calcula que la bandeja en que se encontraban los contenedores fue expulsada la altura de 42-32km y a una velocidad de 660-1,050km/h. z El 28 de abril de 2003 se procedió a desmantelar los contenedores en presencia de técnicos de control de calidad de la NASA. z Después de fotografiar el contenido de cada envase se contaron los individuos vivos en los mismos. z Se encontraron individuos vivos en placas con el medio NGM y CeMM. z En el caso de las placas con CeMM los individuos permanecieron fértiles, aunque debido al accidente se contaminaron con un hongo. z En las placas con NGM los individuos estaban arrestados en etapas infértiles. z Luego se subcultivaron individuos de ambos medios y estos exhibieron: - Desarrollo normal - Cantidades normales de progenie - Ningún fenotipo mutante z La población control que se creció en la cámara simuladora de temperatura y atmósfera del Columbia no alcanzó el tamaño normal. z Esta resultó en una mezcla de adultos infértiles o arrestados en alguna etapa del desarrollo. z Los controles que se crecieron a 20°C alcanzaron el tamaño de población esperado bajo condiciones normales. z Por otra parte los controles utilizados para medir los efectos de la transportación resultaron en adultos infértiles con falta de coordinación y no alcanzaron el tamaño de las poblaciones normales. Discusión de Resultados z Dado que se observaron individuos vivos en ambos medios podemos establecer que sobrevivir al accidente no dependió del medio de cultivo. z Lo que si fue dependiente del medio de cultivo fue la condición en que los individuos sobrevivieron, ya sea fértiles o arrestados en etapas infértiles. z Los resultados también muestran que los individuos recuperados no se afectaron dramáticamente por el accidente, ni por la exposición al ambiente. z Factores como: la presencia del hongo, el accidente y el periodo de recuperación de los contenedores impiden evaluar cuan funcional fue el medio CeMM en el espacio. z Se cree que los controles crecidos en el simulador no alcanzaron el tamaño de población adecuado debido a que: - En la nave se registró un pico en la temperatura a los 27° C, sin embargo el material aislante del casillero que contenía los contenedores impidió que esta temperatura afectara los individuos durante el vuelo. - Al registrarse esta temperatura y aplicarla en el simulador se afectó el crecimiento. z Los resultados indican que los controles utilizados para medir los efectos de la transportación crecidos en CeMM son más susceptibles a estrés ambiental. Conclusiones z Este experimento demuestra que C. elegans puede sobrevivir a bordo de la nave espacial, aunque se ve afectado por los cambios de temperatura. z También prueba que aunque CeMM tiene algunas ventajas sobre el NGM, existen desventajas como: reducción en cantidad de progenie y mayor susceptibilidad a estrés ambiental. z Es imposible validar que CeMM es completamente funcional en el espacio debido a las condiciones accidentadas del experimento. z La capacidad de C. elegans de sobrevivir a la destrucción de la nave demuestra que existe la posibilidad de que otros organismos sobrevivan a este tipo de accidente tanto en nuestra atmósfera como en algunas otras. z Estos resultados prueban razonable pensar que algunos organismos más complejos que los procariotas pueden transferirse naturalmente entre planetas. Metas Futuras z Para poder validar el CeMM es necesario volver a realizar un experimento de este tipo, pero con modificaciones tales como el uso de un ambiente térmicamente controlado. z Otro enfoque de interés es experimentar con la forma de empacar especimenes que regresan a la Tierra en vehículos espaciales. ?