Charcoal Agar

Charcoal Agar
DM109. Para el aislamiento de Bordetella pertussis, o
para uso como transporte y para el cultivo de
Haemophilus spp.
Contenido: Ver etiqueta del envase.
Composición*
Concentración del
medio:
Peptona bacteriológica
2.5 g/litro
Extracto de carne
10.0 g/litro
Almidon soluble
7.5 g/litro
Carbón vegetal
8.0 g/litro
Cloruro de sodio
5.0 g/litro
Ácido nicotínico
0.001 g/litro
Agar
12.0 g/litro
pH final: 7.4  0.2
Almacenamiento y caducidad
Todos los contenedores de medios de cultivo
deshidratados deben permanecer herméticamente
cerrados y almacenados en un lugar seco a 10 a 25°C
hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del
envase.
Precauciones
Exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Respetar
las precauciones de seguridad y utilizar técnicas
asépticas. Debe ser utilizado solo por personal de
laboratorio cualificado y con experiencia. Antes del
desecho, esterilizar todo el material biológico. Referirse a
la hoja de seguridad del producto (disponible si se
requiere o a través de la página web de MAST).
Materiales requeridos pero no proporcionados
7. El medio de transporte puede ser preparado usando
MAST Charcoal Agar (DM109) de media fuerza
suplementado como se indica arriba y distribuido en
tubos estériles cerrados con rosca. Invertir antes de
colorar para distribuir uniformemente el carbón
vegetal.
8. Las placas de cultivo preparadas pueden ser usadas
inmediatamente o almacenadas en bolsas de plástico
a 2 a 8C hasta un máximo de una semana antes de
su uso.
9. Inocular fuertemente la superficie de las placas
preparadas con muestra de los hisopos peri nasales,
nasofaríngeos o aspirados nasofaríngeos. Las
muestras deben ser inoculadas directamente o
transferidas al laboratorio en un medio de transporte.
10. Incubar a 35 a 37° C en una atmósfera húmeda, hasta
un máximo de 7 días.
11. El medio MAST Charcoal Agar (DM109) puede ser
también usado para el cultivo de Haemophilus spp.
omitiendo el suplemento antibiótico y usando el 10%
de sangre (chocolateada).
Interpretación de resultados
Registrar el crecimiento de microorganismos después de
4 y 7 días de incubación. La mayoría de las Bordetella
spp. crecerán como pequeñas, colonias convexas
redondas y de color blanco con una superficie brillante.
Control de calidad
Comprobar si hay signos de deterioro. Se recomienda
que el control de calidad se lleve a cabo con al menos un
microorganismo que demuestre una reacción esperada.
No usar el producto si la reacción con el microorganismo
de control es incorrecta. La lista de abajo ilustra una
variedad de actuaciones de las cepas de control de uso
rutinario, que el usuario final puede obtener facilmente.
Bordetella pertussis
Microorganismos
Resultado
Crecimiento
Haemophilus influenzae*
Crecimiento
Staphylococcus aureus
Ningún
crecimiento
ATCC 8467
Accesorios y productos para análisis microbiológico de
base, por ejemplo: lazos, suplementos selectivos MAST,
hisopos, palillos aplicadores, incineradores e
incubadores, etc.... así como reagentes bioquímicos y
aditivos como sangre).
ATCC 25923
* En medio no selectivo
Procedimiento
Referencias
1. Suspender arremolinando 45.0g de polvos en 1 litro
de agua destilada o desionizada.
2. Autoclave a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos.
3. Enfriar a 50 a 55C y mantener a esta temperatura en
una cubeta.
4. Añadir MAST Cephalexin Selectatab (MS10 Series)
según se especifica.
5. Suplementar el medio con el 10% v/v de sangre
desfibrinada y estéril de caballo.
6. Mezclar bien, verter en las placas gruesas
(aproximadamente 24ml en cada placa) y dejar
solidificar.
ATCC 49766
Bibliografía disponible si se requiere.
IFU309 ES 06/16 V4
MAST es una marca registrada
ATCC es una marca registrada de la American
Type Culture Collection, Manassas, Virginia, USA
*La formulación puede cambiar para seguir los criterios de actuación