Laboratorio # 10 Supervivencia de Bacterias en diferentes ambientes: Parte A Biol 3725 L Objetivos Determinar qué factores pueden afectar la supervivencia de los microorganismos. Conocer qué estrategias desarrollan los organismos para supervivencia. Evaluar si diferentes organismos tienen la misma capacidad de sobrevivir en diferentes ambientes. Area of wood contaminated with small bacteria Introducción Los microorganismos son capaces de adaptarse a una gran variedad de factores ambientales. ◦ La adaptación de los microorganismos es un ajuste complejo en su bioquímica y genética que le permiten largos periodos de supervivencia y crecimiento. Para muchos microorganismos factores ambientales afectan las funciones de las enzimas metabólicas (controlan crecimiento microbiano). Es importante saber diferenciar entre crecimiento en un ambiente y tolerancia (supervivencia sin crecimiento). Crecimiento y Tolerancia Crecimiento de bacteria: Producir biomasa y mecanismos necesarios para sobrevivir. Es el desarrollo y replicación del organismo. Tolerancia a un ambiente: Capacidad de un organismo de permanecer con vida en condiciones no favorables Ejemplo: producción de esporas Factores que afectan la supervivencia Factores físicos Temperatura Rango óptimo es variable para cada organismo Psicrófilos (temperaturas bajas: 4-15 °C) Mesófilos (Temperatura ambiente: 20- 45 °C) Termófilos (Temperaturas altas: mas de 45 °C) Requerimiento de Gases Oxígeno y CO2 Aerobios, Anaerobio Facultativos y estrictos Presión Osmótica Mayoría existen en condiciones isotónicas o hipotónicas. Staphylococcus aureus puede crecer en NaCl en concentraciones de 0.1% hasta 20% pH Acidofílos y alcalinofílos Factores que afectan la supervivencia Factores Nutricionales Fuente de Carbono azúcares Nutrientes Nitrógeno Fósforo Minerales y Vitaminas Estrategias de supervivencia Asociaciones microbianas Simbióticas Mutualismo Los dos se benefician Comensalismo Uno de los dos se beneficia, el otro ni se perjudica ni se beneficia Parasitismo Uno de los dos se beneficia, el otro se perjudica No simbióticas Sinergismo Miembros cooperan y comparten nutrientes Antagonismo Algunos inhiben o destruyen a otros Desarrollo de estructuras de supervivencia Esporas Bacillus spp. Desarrollo de mecanismos de protección Agentes antimicrobianos Ejemplo: B- lactamasa Esporas A 48-hr-old culture of a large spore-forming bacterium with unusually large spores. Isolated from contaminated adhesive. A 48-hr-old culture of a large sporeforming bacterium. Isolated from contaminated adhesive. Spore stain preparation Stained with phenol cotton blue Desarrollo de biopelículas Biopelículas: comunidades complejas de microorganismos y polímeros extracelulares, con capacidad de colonizar y posteriormente fijarse y desarrollarse sobre superficies. Biopelícula de S. aureus en Se pueden encontrar en todos los un catéter. medios donde existan bacterias: en el medio natural, clínico o industrial Requerimientos: entorno hidratado y una mínima presencia de nutrientes para desarrollarse. Productores más comunes de biopelículas: Bacillus - contaminantes habituales del medioambiente. Enterobacteriaceae contaminantes fecales Pseudomonas contaminantes habituales del agua y de alimentos proteicos, especialmente los de origen animal. Staphylococcus - contaminantes de la piel de animales y humanos. Biopelícula de Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas spp Parte práctica Práctica Se utilizará el tubo de la semana anterior. Cada grupo tomará el material asignado y realizará diluciones en serie. El material está estéril Todos los tubos se incubaran y se observaran a las 24hrs Práctica: Supervivencia de microorganismos Transfiera todo el liquido Mezcle 3X 1 ml Vortex 10 ml TSB Tubo de la semana anterior 9 ml Diluciones 1/10 Incube las diluciones @ 37˚C Leer resultados @ 24hrs Repaso ¿Qué factores pueden afectar la supervivencia de una bacteria? ¿ Qué estrategias puede desarrollar un microorganismo para sobrevivir en el ambiente? ¿ Qué es una biopelícula? ¿ Cuál es su hipótesis con relación a los microorganismos y los materiales inoculados?