Inmunodeficiencia Combinada Severa (SCID)
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Introducción (recuerdo inmunológico) Inmunodeficiencia Combinada Severa (SCID) Aspectos generales Base genética Diagnóstico . en caballos Tratamiento Bibliografía 1 Introducción Introducción (Recuerdo (Recuerdoinmunológico) inmunológico) Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS • Cadenas: • Ligera • Pesada • 110 Aminoácidos (Cadena ligera) • Dominio animoterminal Æ Muy variable • Dominio carboxiterminal Æ Bastante constante •Regiones (Cadena pesada): • Variable • Constante • Bisagra • Tipos de enlaces Aspectos generales Base genética Diagnóstico Tratamiento Bibliografía 2 GENES DE LAS INMUNOGLOBULINAS • Cadena Ligera • Regiones V, J y C Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) Aspectos generales Base genética • Cadena Pesada • Regiones V, D, J Æ Dominio variable • Región C Æ Dominio constante Diagnóstico Tratamiento • Hipermutación somática Bibliografía 3 RECOMBINACIÓN V(D)J • RAG 1 y 2 (Recombination Activating Gene) Æ Rotura de la doble cadena de DNA entre los fragmentos génicos a recombinar DNA - PK • DNA-PK (DNA dependent Protein Kinasa) ÆEnlace de fragmentos del DNA codificante y circularización de los segmentos de DNA cortados Æ Reparación del DNA Introducción INTRODUCCIÓN (recuerdo (Recuerdo inmunológico) inmunológico) Aspectos generales Base genética Diagnóstico Tratamiento Bibliografía Subunidad catalítica 4 Aspectos Aspectos Generales Generales Introducción (recuerdo inmunológico) • Síndrome raro que provoca deficiencia en número y función de linfocitos T y B, y, en muchas ocasiones, también células NK ASPECTOS Aspectos • Incapacidad para generar una respuesta inmune GENERALES generales • Mortalidad 100% Base genética • Especies afectadas • Caballos (Árabes) • Perros (Jack Russel Terriers) • Ratones • Humanos Diagnóstico Tratamiento Bibliografía 5 SCID EN CABALLOS • Primera inmunodeficiencia con características de SCID observada , en caballos árabes, en 1960, en Australia • Descrito como síndrome en 1973 • Origen de la mutación desconocido • Animales afectados no producen anticuerpos tras la infección o inmunización • No viven más de 5 meses, suelen morir por: • Adenovirus equino • Pneumociystis carinii • Cryptosporidium parvum • Otras bacterias Introducción (recuerdo inmunológico) ASPECTOS Aspectos GENERALES generales Base genética Diagnóstico Tratamiento • 8% de portadores aproximadamente • Suelen ser más propensos a desarrollar tumores Bibliografía 6 DEFECTO EN HUMANOS % HERENCIA CR • Deficiencia en la cadena γ común de los receptores de linfocitos T para factores de crecimiento 45 Recesiva ligada al cromosoma X X Bajo de linfocitos T Bajo de células NK Disminución función linfocitos B . (recuento normal) • Deficiencia en Kinasa Janus 3 (Jak 3) 10 Autosómica recesiva 19 Similar al anterior • Deficiencia de la cadena α del recpetor IL-7 5 Autosómica recesiva 5 Carencia de linfocitos T Mal funcionamiento de linfocito B • Deficiencia de Adenosina Deaminasa (ADA) 15 Autosómica recesica 20 Bajo de linfocitos T y B Bajo de células NK • Deficiencia de recombinasa activadora de genes (RAG) 25 Autosómica recesiva 11 Carencia de linfocitos T y B Normal de células NK ESPECIE TIPO HERENCIA RECUENTOS MUTACIÓN (en gen de la DNA-PK) • Caballos Autosómica recesiva Delección de 5 bp en codón 9480 Æ cambio marco de lectura Ædelección aminoácido 967Æ PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE • Perros Autosómica recesiva Codón stop en nucleótido 10828Æ terminación temprana en aminoácido 517 Æ ALELO FUNCIONALMENTE NULO • Ratones Autosómica recesiva Mutación en una base Æ Codón Stop prematuro Æ PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales BASE Base genética GENÉTICA Diagnóstico Tratamiento Bibliografía 7 Base Base Genética Genética Fallo en precursores de linfocitos Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales Incapaces de diferenciarse en maduros (incapaces para completar la señal de transducción por fallos en sus receptores para IL) BASE Base genética GENÉTICA Severa linfopenia y hipogammaglobulinemia Diagnóstico Fallo a nivel de la recombinación V(D)J • RAG Æ no hay descritos fallos a este nivel • DNA-PK Æ fallo a nivel de la DNA-PKcs (delección de 5 bp) Tratamiento Bibliografía 8 MUTACIÓN: MUTACIÓN delección de 5 bp en el gen que codifica para la DNA-PKcs, en el cromosoma 9 Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales Cambio en el marco de lectura del codón 3155 de transcripción BASE Delección del aminoácido 967 en C-terminal Base genética GENÉTICA Proteína inactiva Diagnóstico Bloqueo de la recombinación V(D)J Tratamiento Bloqueo de la diferenciación de linfocitos T y B INMUNODEFICIENCIA SEVERA Bibliografía 9 Otra consecuencia que se ha observado en los caballos heterocigotos para esta mutación, es que, al intervenir la DNA-PK en los procesos de reparación del DNA, estos animales son más propensos a padecer tumores Ejemplo de fibroblastos sometidos a radiaciones ionizantes. Diferencias entre una animal normal y un animal con SCID Æ Indican fallos en la reparación del DNA (y, por tanto, explican la propensión a padecer tumores) Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales BASE Base genética GENÉTICA Diagnóstico Tratamiento Los tumores que se presentan con mayor frecuencia son los sarcomas Bibliografía 10 Diagnóstico Diagnóstico Introducción (recuerdo inmunológico) • Antecedentes familiares Aspectos • Recuentos de células sanguíneas de la serie blanca Æ Bajos (y bajos niveles de Ig) generales • Pruebas de funcionalidad de los linfocitos (para diferenciar de otras causas de linfopenia Base genética • Histopatología: hipoplasia severa de timo y tejidos linfoides periféricos DIAGNÓSTICO Diagnóstico • Diagnóstico “in utero” (más común en medicina humana) por amniocentésis (células fetales) o análisis de las células de la placenta Tratamiento Bibliografía 11 DIAGNÓSTICO CLÍNICO: • Signos clínicos (1º-2º mes de vida): • Normal al nacimiento • Fiebre • Taquicardia – taquipnea • Retraso del crecimiento • Letargia • Secreción nasal bilateral, tos y disnea (Infección respiratoria) • Diarrea crónica • Alopecia y dermatitis • Gran cantidad de infecciones, de diversa consideración, entre las más graves destacan: • Neumonías • Meningitis • Infecciones septicémicas • Hepatitis • Infecciones por hongos en boca y periné • Mala respuesta a los tratamientos frente a infecciones Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales Base genética DIAGNÓSTICO Diagnóstico Tratamiento Bibliografía 12 MÉTODOS DIAGNÓSTICOS CON BASE MOLECULAR Æ P.C.R. • Solo se realiza en laboratorios muy especializados Introducción (recuerdo inmunológico) • Sirve para amplificar la región alterada. • Los primers que se utilizan son: Aspectos Foward primer Gen normal Gen SCID 5’- TGTTGCAAAAGGAGACAGAAT – 3’ … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT…. … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT… generales Base genética Reverse primer normal 3’ - AGAGTTTAAGGGAATTCTCTG - 5’ Gen normal … AATTTATCATCTCAAATTCCCTTAAGAGACTTCTAA… DIAGNÓSTICO Diagnóstico Gen SCID … AATTTATCA ( ----- ) AATTCCCTTAAGAGACTTCTAA… Reverse primer SCID 3’ – TAGT TTAAGGGAATTCTCTGAA – 5’ • Revelado por electroforesis en un gel PAGE al 6%, con un voltaje constante de 110 V durante 40 minutos • Visualizado con luz ultravioleta Tratamiento Bibliografía 13 Æ Pool con los 3 primers: Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales Æ PCR alelo específico (primers por separado): Base genética Prueba normal DIAGNÓSTICO Diagnóstico Prueba SCID Tratamiento Bibliografía 14 Tratamiento Tratamiento Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos CONSEJO GENÉTICO A CRIADORES Y PROPIETARIOS: Detección de portadores por PCR y excluirlos de los programas de reproducción, o, en caso de tener que utilizarlos, asegurarnos de no cruzarlos con otros heterocigotos Aún así, es mejor no utilizarlos ya que, además de seguir transmitiendo la enfermedad a la siguiente generación, los portadores tienen más probabilidades de padecer ciertos tipos de tumores. generales Base genética Diagnóstico TRATAMIENTO Tratamiento Bibliografía 15 TRATAMIENTO EN MEDICINA HUMANA • Tratamiento específico: • Transplantes de médula ósea • Inyecciones que ayuden a mejorar el sistema inmunológico del paciente Æ reemplazo de inmunoglobulina intravenosa (IVIG) Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales • Terapia génica • Tratamiento inespecífico: Base genética •Tratamiento rápido y adecuado de todas las infecciones Diagnóstico • Recomendaciones: • Aislar al niño con SCID de niños • Vigilar la nutrición • Prevenir infecciones por Pneumocystis carinii mediante trimethoprima-sulfamethoxazole • No vacunar con vacunas vivas • Transfusiones de sangre irradiadas y negativas a Citomegalovirus TRATAMIENTO Tratamiento Bibliografía 16 Bibliografía Bibliografía Introducción (recuerdo inmunológico) Æ Chapter V: Severe Combinated Inmunodeficiency Æ “DNA-PKcs mutations in dogs and horses: allele frequency and association with neoplasia” Qi Ding, Lori Bramble, Vilma Yuzbasiyan-gurkan, Thomas Bell, Katheryn Meek Gene (2001) Æ “Molecular Pathology of Severe Combined Immunodeficiency in mice, horse and dogs” – Animal models L.E. Perryman Veterinary Pathology (2004) Æ “Genetic Monitoring for severe immunodeficiency carriers in horse in Slovenia” Jana Zavratanik, Matjaž Mesarič, Gregor Majdič Slov Vet Res (2005) Æ “Frequency of the SCID gene among Arabian horses in the USA” D. Bernoco, E. Bailey Animal genetics (1998) Aspectos generales Base genética Diagnóstico Tratamiento BIBLIOGRAFÍA Bibliografía 17 Æ “Equine severe combined immunodeficiency: a defect in V(D)J recombination and DNA-dependent protein kinase activity” Rhonda Wiler, Ray Leber, Bethany B. Moore, Linda F. VanDyk, Lance E. Perryman & Katheryn Meek Proc. Natl. Acad. Sci. (1995) Introducción (recuerdo inmunológico) Æ www.poloargentino.com/nota_16_aguilar.html Aspectos Æ www.healthsystem.virginia.edu/UVAHealth/peds_allergy_sp/scid.cfm generales Æ www.veterinariargentina.com/res/resumenes186.htm#Inmunodeficiencia %20combinada %20severa%20del%20potrillo%20%E1rabe%20(SCID) Base genética Æ www.sanidadanimal.info/cursos/inmuno2/ca041.htm Æ “Conceptos y técnicas hematológicas para técnicos veterinarios” Gregg L. Voigt (2003) Æ “Inmunología clínica veterinaria” Richard E. W. Halliwell y Neil T. Gorman (1992) Æ “Inmunología veterinaria” Ian R. Tizard (2002) Diagnóstico Tratamiento BIBLIOGRAFÍA Bibliografía 18 MUCHAS GRACIAS Introducción (recuerdo inmunológico) Aspectos generales Base genética Diagnóstico Tratamiento Beatriz CatalánBibliografía Catalán 19
