ÁCIDO ÚRICO

ÁCIDO ÚRICO
Método Enzimático-Colorimétrico
Fabricante: RAL TECNICA PARA EL LABORATORIO, S.A.
Av. Mare de Déu de Montserrat 51
08970 Sant Joan Despí (Barcelona) - España
IVD
PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO
CONSERVAR A 2 - 8º C
Método Monoreactivo
Blanco
Muestra / Calibrador
Muestra / Calibrador
20 µL
Agua destilada
20 µL
Reactivo
1000 µL
1000 µL
Mezclar e incubar 10 minutos a 37ºC ó 30 minutos a 20-25ºC.
Leer la absorbancia frente al blanco antes de 30 minutos.
Método Bireactivo
Blanco
LEER LAS INSTRUCCIONES ANTES DEL USO
REF
Std/Muestra
20 µL
Std/Muestra
Agua destilada
Reactivo 1
Cont.
Referencia:
GN 10125:
GN 10500:
GN 11000:
Presentación:
5 x 20 mL reactivo 1 + 25 mL reactivo 2
5 x 80 mL reactivo 1 + 100 mL reactivo 2
800 mL reactivo 1 + 200 mL reactivo 2
GN 1015000:
4 x 50 mL reactivo 1 + 50 mL reactivo 2*
(* para autoanalizadores DIRUI)
PRINCIPIO DEL METODO:
El reactivo Ácido Úrico de Gernon determina la concentración de ácido úrico en
suero, plasma y orina por medio de Uricasa y POD:
Uricasa
Ácido Úrico + O2 + H2O --------------→ Alantoína + CO2 + H2O2
Peroxidasa
2 H2O2 + 4-AF + DCPS ------------------→ Quinonaimina + 3H2O
SIGNIFICACIÓN CLINICA:
El ácido úrico y sus sales son los productos finales del metabolismo de la Purina.
La gota es la complicación más común de la hiperuricemia. Niveles elevados de
ácido úrico en suero inducen a la formación de cristales de urato monosódico
alrededor de las articulaciones.
Las concentraciones elevadas de Úrico en sangre pueden estar causadas por:
enfermedades renales que ocasionan una disminución en la excreción de
productos residuales, estados de malnutrición, abuso de drogas (alcohol incluido)
y el uso de ciertos medicamentos. Niveles altos de ácido úrico constituyen un
factor de riesgo indirecto de sufrir enfermedades coronarias. La hipouricemia no
se observa frecuentemente y se asocia con trastornos metabólicos hereditarios.
REACTIVOS:
Se encuentran listos para el uso.
20 µL
1000 µL
1000 µL
Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC.
Reactivo 2
250 µL
250 µL
Mezclar e incubar 10 minutos a 37ºC ó 30 minutos a 20-25ºC.
Leer la absorbancia frente al blanco antes de 30 minutos.
CALCULO:
Con calibrador:
[Urico]muestra(mg/dL)=[Urico]cal(mg/dL)*(∆Amuestra/∆Acal)
CALIBRADORES Y CONTROLES:
Se recomienda el uso del multicalibrador Biocal (GN 90999) para calibrar la
técnica.
Se recomienda el uso de Gernorm (GN 90998) y Gerpath (GN 90997) para
controlar a dos niveles la técnica.
CARACTERÍSTICAS DEL METODO:
Rango de medida:
Pueden determinarse concentraciones de ácido úrico entre 0.03-25 mg/dL. Si los
valores exceden el límite máximo, debe diluirse la muestra en solución salina
(1+1) y multiplicar el resultado obtenido por 2.
Especificidad / Interferencias:
No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 umol/L, hemoglobina
hasta 130 mg/dL y ácido ascórbico hasta 570 umol/L.
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
determinación del Ácido Úrico.
Sensibilidad / Límite de detección:
El límite inferior de detección es 1 mg/dL.
Precisión intra ensayo (n=20):
Muestra 1 (mg/dL): media: 4.7, SD: 0.03, CV: 0.63%
Muestra 2 (mg/dL): media: 11.4, SD: 0.06, CV: 0.56%
Reactivo 1:
Fosfato (pH: 7.4)
2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS)
4.7 g/L
0.97 g/L
Reactivo 2:
Peroxidasa (POD)
Uricasa
Ascorbato Oxidasa
4-Aminoantipirina
Precisión inter ensayo (n=20):
Muestra 1 (mg/dL): media: 4.7, SD: 0.07, CV: 1.58%
Muestra 2 (mg/dL): media: 11.2, SD: 0.15, CV: 1.36%
<600 U/L
<50 U/L
<180 U/L
0.2 g/L
Método comparativo:
Se han analizado 50 muestras utilizando el reactivo Gernon (y) y otro de un
fabricante de la competencia (x)
La correlación ha sido r = 0.99
La relación ha sido: y = 1.005 x + 0.001 mg/dL
Para trabajar en modo monorreactivo mezclar 4 partes de R1 por una parte de R2.
Proteger el monorreactivo de la luz. La estabilidad del monorreactivo es de 1
semana a 2-8ºC ó 4 días a 15-25ºC.
CONSERVACIÓN:
El reactivo es estable hasta fecha de caducidad si se mantiene a 2-8ºC, protegido
de la luz y contaminantes. No congelar los reactivos.
Los reactivos deben estar libres de turbidez y de partículas. El color del reactivo
puede modificarse con el tiempo, pero no interfiere en la medida si la absorbancia
a 546 nm es inferior a 0.5.
PRECAUCIONES EN EL MANEJO:
El reactivo contiene azida sódica (0.95 g/L). Evítese cualquier contacto con piel y
membranas. No ingerir.
Deben tomarse las precauciones necesarias en el uso de reactivos de laboratorio
clínico.
Deben seguirse las disposiciones locales para la gestión de residuos.
VALORES NORMALES:
Suero/Plasma
Mujeres:
2.6 - 6.8 mg/dL
Hombres:
3.6 - 7.7 mg/dL
Orina:
250 - 750 mg / 24 h
Cada laboratorio debe establecer su propio rango de referencia.
BIBLIOGRAFÍA:
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
IU/GN/10125/R2/0612
MUESTRA:
Suero, plasma u orina. La muestra de orina debe diluirse 1+10 con agua destilada
y multiplicar el resultado por 11.
Estabilidad en suero o plasma:
6 meses a –20ºC
3-5 días a 4-8ºC
Estabilidad en orina:
3 días a 20-25ºC.
Descartar muestras contaminadas.
PROCEDIMIENTO:
Existen aplicaciones para los principales sistemas automáticos.
Longitud de onda: 520 nm
Paso óptico: 1 cm
Temperatura: T ambiente (20-25ºC) / 37ºC
Reacción: punto final
Medida: contra blanco de reactivo
Tel: (+34) 93 480 80 47
Fax: (+34) 93 373 00 92
e-mail: [email protected]
web: www.ral-sa.com
URIC ACID
Enzymatic-Colorimetric Method
Manufacturer: RAL TECNICA PARA EL LABORATORIO, S.A.
Av. Mare de Déu de Montserrat 51
08970 Sant Joan Despí (Spain)
IVD
FOR IN VITRO DIAGNOSTIC USE
STORE AT 2 - 8º C
Blank
Std/Sample
Std/Sample
20 µL
Dist. Water
20 µL
Reagent
1000 µL
1000 µL
Mix and incubate for 10 minutes at 37ºC. Read the
absorbance against reagent blank within 30 minutes.
Bireagent method
Blank
READ INSTRUCTIONS
REF
Monoreagent method
Std/Sample
Dist. Water
Reagent 1
Cont.
Reference:
GN 10125:
GN 10500:
GN 11000:
Package:
5 x 20 mL reagent 1 + 25 mL reagent 2
5 x 80 mL reagent 1 + 100 mL reagent 2
800 mL reagent 1 + 200 mL reagent 2
GN 1015000:
4 x 50 mL reagent 1 + 50 mL reagent 2*
(*for DIRUI autoanalyzers)
PRINCIPLE:
Gernon Uric acid reagent quantifies Uric acid concentration in serum, plasma and
urine samples by using Uricase-POD method:
Uricase
Uric Acid + O2 + H2O --------------→ Allantoin + CO2 + H2O2
Peroxidase
2 H2O2 + 4Aminoantipyrine + DCPS -------------------→ Quinoneimine + 3H2O
SUMMARY:
Uric Acid and its salts are end products of the purine metabolism. In gout, the most
common complication of hyperuricemia, increased serum levels of Uric Acid lead to
formation of monosodium urate crystals around the joints. Further, causes of elevated
blood concentrations of Uric Acid are renal diseases with decreased excretion of waste
products, starvation, drug abuse and increased alcohol consume as well as use of
certain medicaments. High Uric Acid levels also constitute an indirect risk factor for
coronary heart disease. Hypouricemia is seldomly observed and associated with rare
hereditary metabolic disorders.
REAGENTS:
Reagents are ready to use.
Std/Sample
20 µL
20 µL
1000 µL
1000 µL
Mix, incubate 5 min. at 37ºC.
Reagent 2
250 µL
250 µL
Mix and incubate for 10 minutes at 37ºC. Read the
absorbance against reagent blank within 30 minutes.
CALCULATION:
With calibrator:
[Uric]sample(mg/dL)=[Uric]std(mg/dL)*(∆Asample/∆Astd)
CALIBRATORS AND CONTROLS:
It is recommended to use the multicalibrator Biocal (GN 90999) to calibrate the
method.
It is recommended the use of the controls Gernorm (GN 90998) and Gerpath (GN
90997) to control at two levels the method.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS:
Measuring range:
The test has been developed to determine Uric Acid concentrations within a measuring
range from 0.03-25 mg/dL. When values exceed this range samples should be diluted
(1+1) with NaCl solution and the result multiplied by 2.
Specificity / Interferences:
No interferences were observed to bilirubin up to 170 umol/L, haemoglobin up to 130
mg/dL and ascorbic acid up to 570 umol/L. A list of drugs and other interfering
substances with uric acid determination has been reported.
Sensitivity/ Limit of detection:
The lower limit of detection is 1 mg/dL.
Precision intra assay (n=20):
Sample 1 (mg/dL): mean: 4.74, SD: 0.03, CV: 0.63%
Sample 2 (mg/dL): mean: 11.4, SD: 0.06, CV: 0.56%
Reagent 1:
Phosphate (pH: 7.4):
2-4 Dichlorophenol Sulfonate (DCPS):
4.7 g/L
0.97 g/L
Precision inter assay (n=20):
Sample 1 (mg/dL): mean: 4.72, SD: 0.07, CV: 1.58%
Sample 2 (mg/dL): mean: 11.2, SD: 0.15, CV: 1.36%
Reagent 2:
Peroxidase:
Uricase:
Ascorbate Oxidase:
4-Aminoantipyrine:
<600 U/L
<50 U/L
<180 U/L
0.2 g/L
Method comparison:
A comparison between Gernon reagent (y) and a commercially available test (x) using
50 samples gave following results:
y=1.005 x + 0.001 mg/dL
r= 0.99
In case of monoreagent use, mix R1 and R2 in a 4+1 ratio. Protect monoreagent from
light. It is stable 1 week stored at 2-8ºC or 4 days at room temperature.
STORAGE:
Reagents are stable up to the end of the indicated month of expiry, if stored at 2-8ºC,
protected from light and contamination is avoided. Do not freeze reagents.
The reagents must be free of turbidity and particles. It has to be mentioned, that
measurement is not influenced by occasionally colour changes, as long as the
absorbance of the monoreagent is < 0.5 at 546 nm.
WARNINGS AND PRECAUTIONS:
The reagent contains sodium azide (0.95 g/L) as preservative. Do not swallow.
Avoid contact with skin and mucous membranes.
Take the necessary precautions for the use of laboratory reagents. For waste
management, please refer to local legal requirements.
REFERENCE RANGE:
Serum / plasma:
Women:
2.6 - 6.8 mg/dL
Men:
3.6 - 7.7 mg/dL
Urine:
250-750 mg/24 h
Each laboratory should establish its own reference range.
LITERATURE:
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
IU/GN/10125/R2/0612/EA
SPECIMEN:
Serum, plasma or urine. Dilute urine 1+10 with distilled water and multiply the results
by 11.
Stability in serum or plasma:
6 months at –20ºC
3-5 days at 4-8ºC
Stability in urine:
3 days at 20-25ºC.
Discard contaminated specimens.
PROCEDURE:
Application sheets for main automated systems are available on request.
Wavelength: 520 nm
Optical path: 1 cm
Temperature: R.T. (20-25ºC) / 37ºC
Reaction: End Point
Measurement: against reagent blank
Tel: (+34) 93 480 80 47
Fax: (+34) 93 373 00 92
e-mail: [email protected]
web: www.ral-sa.com