INSTRUCCIONES DE USO Revisión 0 Abril 2010 BASE DE AGAR SANGRE + ACIDO NALIDIXICO Base de Agar Sangre + acido nalidixico presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1128 USO PREVISTO Base de Agar Sangre + Acido nalidixico está recomendado para la diferenciación de la actividad hemolítica de Estreptococos a partir de muestras clínicas. FORMULA EN g/l Infusión corazón 10.00 Acido Nalidixico 0.04 Peptona Carne 10.00 Agar Bacteriológico 15.00 Cloruro sódico 5.00 Final pH 7.3 ± 0.2 at 25ºC PREPARACION Base de Agar Sangre + acido nalidixico presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1128 (Medio deshidratado) Suspender 40 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar agitando frecuentemente. Hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121° C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C y añadir de 5-10 % de sangre desfibrinada y estéril, homogeneizar evitando la formación de burbujas y verter en placas de Petri. Las placas preparadas deben almacenarse entre 8-15°C. El color del medio preparado es ámbar ligeramente opalescente. El color del medio preparado con sangre es rojo cereza. El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. PRINCIPIOS Y APLICACION BASE DE AGAR SANGRE CON ACIDO NALIDIXICO es una modificación del Base de Agar Sangre con la adición de ácido nalidixico como inhibidor de la flora acompañante. El ácido nalidixico bloquea la replicación del DNA de bacterias susceptibles y actúa contra muchas bacterias gran negativas. Infusión de Corazón y Peptona de Carne son fuentes ricas de nitrógeno, vitaminas, minerales y amino ácidos esenciales para el crecimiento. Cloruro sódico mantiene el balance osmótico. La sangre es una fuente adicional de factores de crecimiento para los microorganismos y es la base para la determinación de las reacciones hemolíticas. El agar es el agente solificante TIPO DE MUESTRAS Secreciones del tracto respiratorio, esputos. La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1.- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo 2.- Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 18-24 horas. 3.- Lectura e interpretación de los resultados Resultados: 1. Alpha-hemolisis: decoloración verdosa de medio 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com 2 .Beta-hemolisis: zona clara alrededor de la colonia 3. Gamma-hemolisis: sin cambio CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo con el 5% de sangre desfibrinada de carnero, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 24 - 48 horas. Microorganismos Desarrollo Bueno Hemolisis Beta Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 Bueno - Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 Bueno Alpha Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Bueno Beta Inhibida - Staphylococcus aureus ATCC 25923 Escherichia coli ATCC 25922 BIBLIOGRAFIA Cruikshank, R. (1 972) Medical Microbiology. 11th Edition. Livingstone. London. Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación Utilizable hasta la fecha de caducidad. 25ºC 2ºC Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com