INTERFERENCIAS ANALÍTICAS

INTERFERENCIAS ANALÍTICAS
El término interferencia analítica se usa, en un amplio sentido, para designar el efecto que ejerce una sustancia, distinta a la que estamos midiendo, en la determinación de la concentración o actividad del analito.
Siendo el analito el componente que intentamos medir en la muestra, y la interferencia, un componente de la
muestra, distinto del analito, que altera el resultado final.
Las interferencias analíticas pueden ser divididas en dos grandes grupos: las endógenas o directamente relacionadas con el paciente, y las exógenas o no relacionadas con el paciente. Las interferencias endógenas
pueden ser producidas por ciertas condiciones patológicas, son interacciones con metabolitos propios del
organismo (p.e., bilirrubina, lípidos, proteínas, hemoglobina, hemólisis, etc.). Las interferencias exógenas son
producidas por alteraciones ocasionadas durante la extracción y manejo de las muestras; también pueden
estar determinadas por una contaminación de la muestra (anticoagulantes, conservantes, separadores del
suero, etc.); o estar determinadas por la administración de medicamentos (eritromicina, levodopa, teofilina,
metamizol, barbitúricos, etc.); es decir, todas ellas interacciones independentes del paciente.
//////// INTERFERENCIAS ENDÓGENAS ////////
El plasma o suero es normalmente transparente en todas las especies. Es casi incoloro en pequeños animales, cerdos y ovejas. Este color puede variar de incoloro a amarillo claro en el ganado, en función de su
dieta (pigmentos carotenoides). Un cambio de color en el suero o el plasma debe hacernos sospechar de una
posible patología en el animal, que puede ocasionar errores en los resultados obtenidos en diferentes determinaciones analíticas.
1- ICTERICIA ///
El aumento de la coloración del plasma o suero que adquiere un tono amarillento (ictericia) por lo general
indica una mayor concentración de bilirrubina. El hallazgo laboratorial de plasma de color amarillo con un
hematocrito normal sugiere hiperbilirrubinemia secundaria a enfermedad hepática. Sin embargo, la hiperbilirrubinemia asociada a una marcada disminución del hematocrito sugiere un aumento de la destrucción de
los eritrocitos. No obstante, la presencia simultánea de enfermedad hepática y anemia hemolítica también
puede producir un resultado similar. El plasma o suero ictérico puede interferir en los resultados analíticos de
albúmina, colesterol, triglicéridos, glucosa y proteínas totales.
2- HEMÓLISIS ///
La coloración rojiza de plasma o suero indica la presencia de hemólisis. La hemólisis es el proceso de destrucción de los elementos formes de la sangre, que conlleva la liberación del contenido celular en el plasma
o suero alterando de este modo su composición. La hemólisis puede tener origen intravascular (que suele ir
acompañada de una cierta hemoglobinemia) o extravascular, originada durante la toma de la muestra o posteriormente.
Los tubos de vacío originan habitualmente hemólisis durante la extracción debido a la fuerte expansión de
sangre y la elevada presión con la discurre a través de la aguja, este fenómeno también puede aparecer al
emplear agujas muy finas con jeringas de gran calibre. La mezcla con anticoagulantes como el oxalato puede
también producir hemólisis.
Incluso después de la toma de la muestras se puede inducir hemólisis por un manejo brusco de la sangre, en
la centrifugación por ejemplo, o debido a una mayor fragilidad celular. Finalmente, el almacenamiento prolongado de las muestras también conlleva la destrucción de elementos formes de la sangre y la aparición de
hemólisis.
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El valor de hematocrito y la anamnesis pueden ayudar a determinar el origen de la hemólisis, el plasma de
color rojo y un hematocrito normal, sugiere una hemólisis in vitro, mientras que la aparición concomitante de
hemoglobinuria indica la presencia de hemólisis intravascular.
Los fenómenos de hemólisis, en función del grado, pueden inducir falsos incrementos en los valores séricos
de bilirrubina, potasio, magnesio, hierro, fósforo, actividades enzimáticas (ALT, AST, CK, FA, Amilasa) y proteínas totales; produciendo también un aumento en la actividad sérica de Fosfatasa ácida y en la concentración
de Albúmina. La hemolisis puede producir además una disminución en la concentración de Glucosa y Sodio
3- LIPÉMIA ///
La lipemia se reconoce como un aspecto blanco opaco causado por los quilomicrones y lipoproteínas de muy
baja densidad (VLDL). La presencia de lipemia es con frecuencia el resultado de una comida reciente (lipemia
posprandial), pero hay ciertas enfermedades incluyendo la diabetes mellitus, hiperadrenocorticismo, hipotiroidismo, pancreatitis, lipidosis hepática y colestasis, que pueden resultar en un importante incremento de la
lipemia en algunas especies.
Las causas hereditarias de hiperlipemia incluyen: la deficiencia de lipoproteína lipasa en los gatos y perros, y
la hiperlipidemia idiopática en perros miniatura entre otras. Algunas especies son susceptibles a desarrollar
lipemia asociada con el embarazo, la lactancia y / o anorexia. Estas condiciones dan como resultado la movilización de los ácidos grasos no esterificados a partir de tejido adiposo y la subsiguiente sobreproducción de
VLDL por el hígado.
Los sueros lipémicos pueden dar lugar también a incrementos en ciertos analitos bioquímicos, principalmente en los determinados por métodos espectrofotómetros. La lipemia provoca resultados elevados para
aquellas sustancias cuyas determinaciones se basan en la absorbancia, a las mismas longitudes de onda en
que las partículas de lípido también absorben luz.
Se pueden producir interferencias positivas, que aumentan artificialmente la lectura obtenida, en las determinaciones de albúmina, calcio y fosfato. O bien interferencias negativas, provocando una disminución de las
concentraciones de bilirrubina, urea y proteínas totales, o de actividades enzimáticas como de la amilasa, la
CK etc.
//////// INTERFERENCIAS EXÓGENAS ////////
Existen numerosos factores que forman parte de la fase preinstrumental o preanalítica del ensayo y que pueden originar importantes variaciones en la concentración de diferentes analitos. Entre estos factores destacamos el estrés, el ejercicio, la dieta, la postura del paciente en el momento de la extracción y la duración de
la aplicación del torniquete, entre otros. Además, debemos destacar las producidas por medicamentos o las
debidas a contaminantes (anticoagulantes, conservantes, etc.).
1- ANTICOAGULANTES ///
Determinados anticoagulantes como el oxalato potásico provocan un aumento de la presión osmótica del
plasma, dando lugar a un transporte de agua desde las células sanguíneas al plasma y a una dilución del mismo. Los quelantes del calcio (como el EDTA) producen inhibición en la actividad de diferentes enzimas para las
cuales este ión es fundamental. Se produce inhibición en la actividad de la Amilasa, CK, LDH, Fosfatasa alcalina y Fosfatasa ácida. Los tubos de recogida con trombina, los cuales acortan el tiempo de coagulación, producen algunas interferencias en determinados parámetros como los cloruros, el Calcio, el Potasio y la LDH.
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2- FÁRMACOS ///
Son numerosos las sustancias o fármacos que pueden dar lugar a variaciones en la medida de la concentración de un analito. En función de la naturaleza de la interferencia se pueden dividir en dos grandes grupos:
- Interferencias metodológicas (in vitro) o método dependiente: en éstas, el medicamento y /o sus metabolitos
pueden perturbar la valoración de un componente a cualquier nivel (estructura química similar al analito, pH,
etc..).
- Interferencia o efecto biológico (in vivo) o método independiente: en las cuales el medicamento provoca un
cambio en la magnitud biológica por medio de un mecanismo fisiológico, farmacológico o toxicológico. Este
término representa una parte de los efectos secundarios, deseables o indeseables de los medicamentos.
En la siguiente tabla podemos observar algunas de las interferencias encontradas en los parámetros analíticos estudiados según el efecto de algunos fármacos.
Metildopa
Glucosa
Ácido ascórbico
Teofilina
Incremento
Eritromicina
Isoniacida
Ácido ascórbico
Levodopa
Ác. paraminosalicílico
Incremento
Amilasa
Citrato
Oxalato
Incremento
Bilirubina
Dextrano
Novobiocina
disminución
Ácido ascórbico
Cafeína
Incremento
Calcio
Sales de citrato
EDTA
disminución
Cloro
Colesterol
Bromuro
Incremento
Creatinina
Ácido ascórbico
Barbitúricos
Cefalosporinas
Glucosa
Levodopa
Metildopa
Incremento
Ácido úrico
ALT/AST
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