g mg solución de Totales mL dL g 0.5 Albúmina 1 1000 * * = mL

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD
Escuela de Ciencias Agrícolas , Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA
Especialización en Nutrición Animal Sostenible-NAS
Laboratorio de Sistemas Metabólicos Nutricionales –SMN
Prof:Jairo Granados.,MSc
CÁLCULOS PARA ESPECTROFOTOMETRÍA
I.CURVA DE CALIBRACIÓN
1.Determinar la concentración de albúmina (CALB) en cada tubo (1 al 5)
C ALB 
mL Albúmina 0.5 g
dL  1000 mg
mL Totales de solución
1g
Por ejemplo para el tubo 1
C Alb (1) =
Repetir el cálculo para los demás tubos (2 al 5),teniendo en cuenta los mL de
albúmina adicionados a cada tubo
2..Elaborar la siguiente tabla para aplicar la técnica de REGRESIÓN LINEAL por
el método de MÍNIMOS CUADRADOS.
1
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Tabla 1.Datos para ajuste curva de calibración, método mínimos cuadrados
Tubo
CALB
(mg/dL)
A
A*C
A2
1
C1
A1
A1 C1
A1
2
C2
A2
A2 C2
A
3
C3
A3
A3 C3
A
4
C4
A4
A4 C4
A
C5
A5
SUMATORIAS
C
A
A5 C5
2
1
A*Corr (1)
2
C
2
2
A*Corr (2)
2
3
C 32
A*Corr (3)
2
4
C 24
A*Corr (4)
2
A*Corr (5)
2
A
5
C5
 A C  A2  C
X
A*Corr
C
2
2
5
C2
2
---------
Con base en las sumatorias hallar:
2.1 Pendiente (K) de la recta:
AC
K
C 2
2
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Trabajar con todas las cifras decimales para reportar el valor de
K
2.2 coeficiente de regresión (r)
r
 AC
 A    C 
2
ANALIZAR VALOR
2
r
2.3 Coeficientes de correlación y de determinación (C.D)

2
Coeficiente correlación = r
ANALIZAR

% CD = r2 x 100
d) Ecuación de regresión:
FUNCIÓN LINEAL
ECUACIÓN
:
y = mx + b
: A=KC
3
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donde: y=A ; X= CALB ; b=0
2.4 Absorbancias corregidas: A*corr
A*  K C1
A*  K C2
A*
cor r ( 1 )
cor r ( 4 )
cor r ( 2 )
*
A
cor r ( 3 )
A*
 K C3
Cor r ( 5 )
 K C4
 K C5
f) En Excel , trazar las siguientes gráficas:
1.
Aobservada Vs CALB (Gráfica dispersa)
*
2. Acorregida Vs CALB (Gráfica Ajustada)
de Lambert-Beer-Bruguer
Corresponde a la Ley
Gráfica
ajustada
A*
corregida
A=KC
*
C1
*
*
*
Puntos de
dispersión
*
Calb (mg/ dL)
C2
C3
C4
C5
4
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II. CONCENTRACIÓN DE NITRÓGENO TOTAL.
%NT=
Fd
III. CONCENTRACIÓN DE PROTEINA TOTAL (PROTEÍNA CRUDA)
%PT =
5
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IV.TABLA DE RESULTADOS
Muestras analizadas
Indicadores
Sangre
Orina
Harina ó forraje
%NT
%PT
6