Taller Factores de Crecimiento Plasmático Mercedes Corbacho Francisca Muñoz 29 de Noviembre de 2013 Regeneración § Proceso fisiológico § Actividad continua de los tejidos § Durante toda la vida Regeneración § Tejidos dañados Proceso de reparación § Tras producirse un daño 0sular se desencadenan una serie de procesos intracelulares y intercelulares con el obje0vo de restaurar la integridad del tejido y su hemostasia Proceso de reparación § El proceso normal de reparación implica la puesta en marcha de los mecanismos de sus0tución y reparación de los tejidos dañados. Proceso de reparación § Fase Temprana – Hemostasia – Inflamación § Fase Intermedia – Proliferación – Angiogénesis § Fase Tardía – Síntesis Colágeno – Contracción – Remodelación Fase Temprana – Tras producirse un daño tisular el primer mecanismo que se pone en marcha es el de la hemorragia, y para su control va a ser necesaria la , generando un coagulo de fibrina y plaquetas que ocluye los vasos dañados Fase Temprana – La es la respuesta al trauma0smo, y se compone de una reacción vascular y celular inespecífica que destruye material extraño y tejido desvitalizado preparando la zona lesionada para su reparación Fase Intermedia – Entre el segundo y el cuarto día se produce la migración de células mesenquimales y su Fase Intermedia – Los fibroblastos protagonizan la actividad de reparación: desde tejido sano perilesional migran a la zona lesionada atraídos por las citoquinas liberadas en la fase temprana. A su vez, ellos harán que migren más fibroblastos y células que apoyen la reparación . Fase Intermedia – La hace que se creen nuevos vasos a partir de la migración de células endoteliales desde vénulas perilesionales, entrando en contacto entre sí y conformando lo que será la nueva red, que deberá madurar mediante la agregación de capilares que constituyen vasos de mayor calibre. Fase Tardía – , está influida por la edad, la tensión de los tejidos, la presión superficial, la ac0vidad de las citoquinas que influyen en la fibroplasia y el estrés al que está some0da la zona en reparación Fase Tardía – : mecanismo protagonizado por el miofibroblasto, que aparece en el tercer día desde la producción de la lesión y permanecerá presente hasta la tercera semana Myofibroblast adherens junctions http://www.molbiolcell.org Fase Tardía y tejido regenerado del Proceso de reparación § Las fases del proceso de reparación se solapan entre sí, por lo que si se altera el proceso, la fase afectada se desarrolla de manera irregular retrasando la siguiente, aumenta el número de manipulaciones, se alarga el 0empo de recuperación, y el resultado final es menos previsible Fallos en la reparación Pseudoartrosis Fallos en la reparación Herida crónica Componentes de la reparación § El componente celular § Matriz extracelular § Moduladores biológicos • Factores de crecimiento • Citoquinas ¿Qué son los Factores de Crecimiento? § Proteínas que desarrollan funciones esenciales en los procesos de reparación y regeneración de los tejidos. Se pueden encontrar en macrófagos, células endoteliales, monocitos, fibroblastos, matriz ósea y ¿Qué son los Factores de Crecimiento? § Establecen la relación entre células y transmiten la información al interaccionar con los receptores de la membrana celular. © electriceye ¿Qué son los Factores de Crecimiento? § Posibilitan efectos biológicos como la migración, la proliferación y la diferenciación celular ¿Qué son los Factores de Crecimiento? § Los factores de crecimiento que vamos a obtener se encuentran en el interior de las plaquetas. § Son liberados en las zonas donde hay daño tisular, al romperse las plaquetas y salir su contenido al exterior. – – – – – Hueso CarLlago Tendón Ligamento Músculo… ¿Cómo funcionan? § Los factores de crecimiento ayudan a promover la angiogénesis § Los nuevos vasos sanguíneos suministrarán oxígeno y nutrientes al tejido dañado § Se genera también matriz extracelular provisional que sirve de soporte a las nuevas células y esLmulo bioquímico y Psico de la mo0lidad celular ¿Cómo funcionan? § (Plateled Derived Growth Factor) – Favorece la angiogénesis y los pasos intermedios en la formación del tejido óseo. § (Transforming Growth Factor β) – Puede inhibir o potenciar su efecto dependiendo del tipo celular sobre el que actúa. – Aumenta la síntesis de proteínas derivadas del colágeno tipo I y V. – Aumenta la mineralización de la matriz ósea e inhibe la formación de osteoclastos. – Influye en la estimulación y coordinación del crecimiento, mantenimiento y reparación tisular. ¿Cómo funcionan? § (Factor crecimiento fibroblástico) – Responsable de proliferación, diferenciación y otras funciones celulares § (Factor crecimiento vascular endotelial) – Efecto angiogénico § (Factor crecimiento epidérmico) – Diferenciación celular y estimulo reepitelización, angiogénesis y actividad de la colagenasa § (Factor crecimiento insulínico. Tipo I) – Formación de hueso y biosíntesis de colágeno tipo I. Bases de utilización § Seleccionar los factores de crecimiento, mejorar su concentración y aplicarlos directamente en el punto de la lesión § El Plasma Rico en Plaquetas (PRP) es aquel que contiene por encima de 300.000 plaquetas/µL PRP como Medicamento § Informe de la Agencia Española de Medicamentos y Productos Sanitarios sobre el uso de Plasma Rico en Plaquetas PRP como Medicamento § “…cabe considerar la aplicación de PRP como un medicamento de uso humano” § “… no cabe considerarlo como un medicamento industrial. Tampoco cabe considerarlo como un medicamento de terapia avanzada” Desarrollo de sistemas de obtención § Múl0ples sistemas de obtención § paciente : sangre del § Manipulación controlada § U0lización del producto resultante Desarrollo de sistemas de obtención Extracción sanguínea § Extracción sanguínea al paciente previa a la aplicación Manipulación de la muestra § Sistema abierto: – Material a demanda Manipulación de la muestra § Sistema cerrado – Kit Desechable Separación del plasma § Centrifugado de la muestra Separación del plasma § El coagulo de hematíes se deposita en el fondo del tubo por centrifugado § Se separa claramente del líquido sobrenadante Productos resultantes § Según el método de separación empleado – Preparado Rico Factores Crecimiento – Plasma Rico Plaquetas y Factores Crecimiento – Plasma Rico en Plaquetas – Plasma Pobre en Plaquetas – Plasma Rico en Plaquetas y Leucocitos – Plasma Rico en Plaquetas Pobre Leucocitos Separación Fases del Plasma § La separación de las fases se puede hacer por barreras físicas Separación Fases del Plasma § Por aspiración directa de las fases Formas de Aplicación § Tras la activación con ClCa § Inyección directa del plasma rico en plaquetas § En forma de spray § Lámina - gel § Paso al taller práctico 40 Gracias