Nuevos conceptos en la mastitis causada por Klebsiella Ruth Zadoks La Doctora Zadoks es investigadora de la Universidad de Cornell en Ithaca, New York y es directora del Departamento de Biología Molecular del Quality Milk Production Services (QMPS). Ponencia de Ruth Zadoks, DVM, PhD, realizada en las VI Jornadas Técnicas de Vacuno Lechero organizadas por Servet Talavera SL. Klebsiella pneumoniae es una bacteria englobada dentro del grupo de los coliformes causante de mastitis clínica y subclínica. Es una bacteria Gram negativa, que en medios de cultivo microbiológicos tradicionales forma colonias más o menos grandes, de entre 3 y 5 mm, de aspecto mucoide y color rosáceo. 62 C&S 19 jose.indd 62 Placa Klebsiella. La importancia de las mastitis por Klebsiella radica por una parte en su capacidad de producir mamitis clínicas hiperagudas, llegando a originar la muerte del animal. Pero también hay que considerar otros costes económicos asociados a esta enfermedad; pues se produce un notable descenso de la producción lechera, con pérdidas de entre 7 y 10 Kg /día, tanto en vacas como en novillas. En el caso de mastitis subclínicas las perdidas originadas por este coliforme son igualmente importantes manteniéndose a lo largo de toda la lactación. Además, debe tenerse en cuenta, a la hora de considerar los costes económicos originados por la enfermedad, que los elevados y persistentes recuentos de células somáticas provocados por la invasión intramamaria de este germen suponen una reducción de la calidad final de la leche del rebaño y, por consiguiente, los pagos que se efectúen por la leche se ven afectados negativamente. En la mayoría de los casos de mastitis clínicas por Klebsiella spp. se establecen tratamientos con el objetivo principal de mantener al animal vivo, recurriendo para ello a la fluidoterapia, al uso de antiinflamatorios y antibióticos que tratan de evitar una septicemia. Normalmente, si el animal sobrevive, la glándula mamaria suele quedar afectada, entre un 34% y un 37% de los casos no curan, quedando estos animales con mamitis crónica. Esto suele ocurrir también con E. Coli, pero con una diferencia notable, la curación en este caso es mayor, del 71% al 81% de los casos responden favorablemente al tratamiento. Lo más común y lo más efectivo termina siendo la eliminación o desecho de los animales, lo que incrementa mucho los costes debidos a este tipo de mastitis. En la última década los casos de mastitis originados por esta bacteria han ido aumentando. Concretamente en el estado de Nueva York, donde aproximadamente 411 rebaños de vacuno lechero son muestreados al año, se ha observado como del 5% de rebaños positivos a Klebsiella spp. en el año 1992 ha pasado a un 25 % de rebaños positivos en el 2004; entendiendo como positivos aquellos rebaños donde al menos se ha diagnosticado un caso de mastitis por Klebsiella spp. Si se compara la evolución de los distintos gérmenes implicados en los casos de mastitis, se observa como Klebsiella aumenta considerablemente en los aislamientos realizados a partir de muestras de mastitis clínica. Antes de abordar el origen y control de la mastitis originada por Klebsiella spp. debemos decir que aunque se trate de una bacteria emergente y capaz de originar patologías en los humanos, como neumonías, diarreas y septicemias, nunca se ha probado que exista una transmisión de Klebsiella desde la leche o de las vacas 25/4/08 14:17:28 Nuevos conceptos en lademastitis causadas por klebsiella Efectos del tipo de conservante añadido al ensilado trigo sobre la producción y composición química de la leche nº 19 17 nº 13 a las personas y, por tanto, no hay un riesgo sobre la salud pública. En bóvidos, tradicionalmente el origen de las mastitis por Klebsiella se ha asociado al uso de serrín y virutas de madera en los alojamientos de las vacas. Esto se puede deber a que la Klebsiella puede aislarse a partir de la savia de los árboles. Por tanto los procesos de tala y posterior transformación de la madera en viruta o serrín pueden contribuir a la diseminación de esta bacteria, por ejemplo dentro de los procesos de tala se incluye el transporte de la madera por el suelo o el uso de maquinaria infectada con este microorganismo poniendo en contacto las zonas expuesta a la sabia de los árboles. Efectivamente, reducir la exposición a la viruta o al serrín se ha considerado como la solución más sencilla para prevenir problemas de mastitis causada por Klebsiella. Vaca muerta. Esto no es tan sencillo como cambiar la cama de serrín por arena u otro tipo de cama de material inorgánico. Por ejemplo, en una granja del Estado de New York donde se estaba usando serrín como material de cama se optó por cambiar la cama de serrín por arena. Este cambio no se hizo por mejorar el confort de los animales ni por prevenir las cojeras sino con el objetivo de reducir la mastitis por Klebsiella, sin embargo, tras el cambio no se observó ninguna disminución en la prevalencia de mastitis por Klebsiella. Cuando se analizaba la arena sin utilizar de cama, los niveles tanto de Klebsiella como de E. Coli eran nulos, no obstante, cuando se analizaba la arena utilizada como cama en los cubículos tanto de los corrales de primera y/o más lactaciones se observaron niveles de 1000 a 100000 ufc/ gr de cama, de Klebsiella y E. Coli. Así pues, la arena se contaminaba una vez que se utilizaba como cama. Esto nos plantea una pregunta, ¿de dónde viene esta Klebsiella?. Se sabía por estudios en hospitales que las heces podían ser una fuente de Klebsiella y, si podía ocurrir esto en personas, era posible que también ocurriera en las vacas. Así pues, debemos buscar Klebsiella en las heces, utilizando para ello medios diferentes de aislamiento que permitieran realizar un screening de vacas portadoras o no de Klebsiella spp. Se realizaron dos estudios, uno se hizo en una granja donde se realizó el seguimiento de unas 100 vacas a lo largo de 5 meses; una vez al mes se tomaban muestras de heces y así se determino que el 81% de los muestras eran positivas a Klebsiella pneumoniae, esto significa que 4 de cada 5 vacas sanas excretan en heces esta bacteria. La eliminación era intermitente y no seguía ningún patrón. En otro estudio se contó con 10 rebaños repartidos por todo el Estado de Nueva York, en cada granja se realizaba el seguimiento a 10 animales y encontramos que mas del 80% de animales excretaban Klebsiellas en heces. Por tanto la conclusión es que los animales sanos pueden excretar Klebsiella en heces y, consecuentemente, todo tipo de camas son susceptibles de contener esta bacteria. Así pues, el sustituir un tipo de cama por otro no solucionará el problema de mastitis por Klebsiella. En cualquier caso, la principal herramienta de control para intentar solucionar una problema de mastitis causada por Klebsiella es contar con un laboratorio capaz de distinguir entre los distintos coliformes (especialmente entre E. Coli y Klebsiella) de las muestras remitidas. Estas muestras pueden ser bien de leche procedente de vacas con elevados recuentos celulares o con mastitis clínicas, bien muestras de cama. Por otro lado, hay que tener una visión global del problema y considerar el manejo como el factor fundamental para reducir la incidencia de este tipo de mastitis. C&S 19 jose.indd 63 Sabemos que a partir de las heces de las vacas todo el entorno es susceptible de contaminarse con Klebsiella, por ejemplo los pasillos, el agua, las patas de las vacas, los pezones de las vacas, etc. Dentro de los distintos muestreos efectuados de pasillos, patas, camas y pezones se ha observado un 90% de positividad a Klebsiella en las muestras recogidas en los pasillos de transito de las vacas, un 60% de las muestras tomadas de las patas de los animales contenía Klebsiella, muy similar es el porcentaje obtenido en las muestras de camas. Como promedio un 41% de las ubres estaban infectadas por este coliforme, aunque en algunas ocasiones se ha podido observar que hasta el 100% de los pezones antes del ordeño contenían Klebsiella, reduciéndose a un 34% tras la aplicación de un producto desinfectante previo al ordeño. Por lo tanto, las vacas son expuestas a un gran numero de fuentes de contaminación antes de llegar a la sala de ordeño. Se crea un circulo cerrado, las heces de vacas sanas contaminan las camas sobre las que descansan los pezones aumentando la probabilidad de infección, pero también contaminan los pasillos por donde transitan los animales y de este modo sus patas se convierten en fuente de Klebsiella, de modo que al tumbarse las patas de los animales entran en íntimo contacto con los pezones lo que incrementa la posibilidad de infección de la ubre. A su vez, la leche procedente de vacas infectadas es susceptible de contaminar las camas y así infectar a nuevos animales. Una herramienta de futuro será sin duda la tipificación de cepas bacterianas. Ante un problemas de mastitis el uso de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) nos permitirá determinar si nos encontramos frente un problema medioambiental o frente un problema contagioso. En el caso de que se trate de un problema 63 25/4/08 14:17:29 Zadoks, R. medioambiental se aislaran múltiples cepas, cada vaca probablemente tendrá una cepa diferente de Klebsiella. Sin embargo, si se trata de un problema contagioso, y por tanto transmisible de vaca a vaca, todos los animales presentaran la misma cepa de Klebsiella. Esto se pudo observar en una granja de 400 vacas divididas en lotes de 100 animales. Cuando apareció un brote de Klebsiella, 9 casos de Klebsiella fueron causados por la misma cepa y un único caso fue causado por otro tipo de cepa. Estos nueve casos se dieron en vacas alojadas en el mismo corral, entonces la presencia del mismo tipo de cepa nos hizo pensar que se trataba de una cepa contagiosa y por tanto con capacidad de transmitirse de vaca a vaca. Rápidamente esto nos llevó a pensar en la maquina de ordeño como vehiculo de transmisión. Pese a ello, al tomar muestras de las pezoneras y someter a la tipificación de cepas las muestras obtenidas, no se puedo considerar a la maquina como fuente de transmisión, pues había una gran variedad de cepas. Lo que si se observó en esta granja, y concretamente en el corral del brote, es que había charcos de leche en los cubículos y estos si contenían gran cantidad de la cepa en cuestión, esto nos ayudo a determinar la existencia de un animal infectado que eliminaba grandes cantidades de esa cepa de Klebsiella en leche y de este modo las camas se convertían en fuente de contagio. De no ser por la tipificación no se podría haber llegado a la conclusión de que se trataba de un caso de mamitis contagiosa. Como conclusión cabría hacerse una pregunta: ¿Cómo manejamos un problema de mastitis por Klebsiella?. El manejo de la mastitis tiene 3 componentes muy importantes. Como premisa fundamental es de suma importancia que el diagnóstico sea correcto, para ello es muy importante contar con un buen laboratorio de diagnóstico de mastitis que diferencie entre los distintos coliformes. Después, tenemos las propias vacas, esto es, los hospedadores y su resistencia frente a las bacterias, desafor- Tipificación. tunadamente no hay mucho que podamos hacer para mejorar la resistencia del huésped pues las vacunas no son efectivas frente a la Klebsiella. El Selenio y la vitamina E se ha visto que son efectivos en la prevención de mastitis por E. Coli, pero se desconoce su papel frente e Klebsiella, se les supone un cometido importante dentro de los mecanismos de inmunidad. En segundo lugar, debemos tener en cuenta las características ya no solo de la propia bacteria sino de las distintas cepas existentes, para esto la biología molecular es decisiva para determinar cual es el comportamiento de las distintas cepas. Todavía no conocemos a la Klebsiella tan bien como a otras bacterias tales como S.aureus o S.agalactiae, de éstas conocemos claramente su naturaleza contagiosa, pero aún no sabemos lo suficiente sobre Klebsiella para poder decir de ella si se trata o no de un germen de características contagiosas. En tercer y ultimo lugar, para el control de la mastitis es necesario controlar el medio ambiente y aquí cabe recordar que existe la posibilidad de encontrar múltiples fuentes de Klebsiella, debemos olvidar el serrín como única fuente de este germen como tradicionalmente se creído. ¡¡SUSCRIPCIÓN GRATUíTA !! UNA HERRAMIENTA IMPRESCINDIBLE PARA TU LABOR CrÍa y Salud BOLETíN DE SUSCRIPCIÓN Nombre* .......................................... Apellidos*...................................................................... Nº de colegiado y Colegio al que pertenece ................................................................ 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