Ácidos carboxílicos del fruto

Rev Cubana Farm 2001;35(2):122-5
Productos Naturales
Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana
ÁCIDOS CARBOXÍLICOS DEL FRUTO DE BROMELIA PINGUIN
L. (PIÑA DE RATÓN) POR HPLC
Juan Abreu Payrol,1 Migdalia Miranda Martínez, 1 Osmaida Castillo García3 y Delfa
Redondo López4
RESUMEN
Se realizó el estudio de un extracto acuoalcohólico del fruto de B. pinguin L.
(piña de ratón) por cromatografía líquida de alta presión (HPLC), con el objetivo
de detectar la presencia de ácidos carboxílicos. Se ratificó la presencia de ácido
cítrico, y por primera vez se señala la existencia de ácidos glicólico, málico,
láctico, succínico y aconítico. Estos compuestos se identificaron por sus tiempos
de retención contra patrones.
DeCS: PLANTAS MEDICINALES; EXTRACTOS VEGETALES; ACIDOS
CAROBOXILICOS/análisis; ACIDOS CARBOXILICOS/farmacología;
CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PRESION; QUIMICA
FARMACEUTICA.
La elevada frecuencia de la presencia,
desde el punto de vista bioquímico, del
grupo carboxilo, significa que los ácidos se
encuentran en todos los organismos vivos,
ellos mismos y, como derivados, en todos
los grupos metabólicos mayores. Esta
propiedad puede presentarse en ausencia
de este grupo funcional, como en los
fenoles y el ácido ascórbico (enol).
Participan en el metabolismo esencial y, en
1
2
3
4
este papel, se alinean desde los ácidos
sencillos de la frecuencia respiratoria a los
complejos ácidos desoxirribonucleicos,
implicados en la conservación y transmisión de los caracteres hereditarios. En los
ciclos metabólicos suelen funcionar
asociados con coenzimas, y acumularse
como sales simples, ésteres y amidas o,
menos frecuentemente, en estado
libre.1,2
Master en Ciencias. Profesor Auxiliar.
Doctora en Ciencias. Profesora Titular.
Licenciada en Ciencias Farmacéuticas.
Licenciada en Química. Investigadora Agregada. Instituto Cubano de Investigaciones de
Derivados de la Caña de Azúcar (ICIDCA).
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MÉTODOS
La mayoría de los ácidos se han aislado
de los frutos, aunque se supone que gran
parte de ellos se sintetizan en hojas y raíces,
y de aquí son translocados. Existen
argumentos a favor de esta hipótesis.3 La
aplicación de la técnica de cromatografía
líquida de alta presión (HPLC) al estudio de
los ácidos carboxílicos se realiza hoy
rutinariamente. Inabarcables son los
reportes que refieren su empleo en el
estudio de ácidos carboxílicos de diferentes
fuentes naturales, entre las que resaltan los
jugos y extractos de frutas. En este último
caso generalmente se emplea una columna
de fase reversa (C18, ODS-2), con una fase
móvil constituida por una solución acuosa
de pH 2-2,5 y la utilización de un detector
UV a una longitud de onda que puede variar
de 206 a 215 nm.
Con estas condiciones se han
separado mezclas de ácidos, entre los que
se pueden citar: oxálico, tartárico, málico,
acético, cítrico, succínico, ascórbico,
dehidroascórbico, quínico, shiquímico,
láctico, etc. Los experimentos han permitido
la cuantificación de los ácidos encontrados,
y se han diseñado técnicas con este fin.4-10
EtOH 96 %
Pulpa
del fruto
1,3 kg
Se obtuvo el extracto estudiado
mediante el procedimiento expuesto en la
figura 1.
El experimento se realizó en un
cromatógrafo KNAUER, con un integrador
SHIMADZU. Se utilizó una columna
Hypersil C18 (fase reversa) de 25 cm de longitud
y d.i. 4,6 mm. La presión de trabajo fue de 7,8-8
MPa y la velocidad de flujo de 0,6 mL/min. El
tiempo de corrida fue de 30 min.
Como solvente de elución se empleó
buffer fosfato a pH 2,5; se utilizó un detector
UV a λ 210 nm.
Se inyectó una solución de la muestra,
de concentración 1 µ g/1 mL. Se identificaron los ácidos por sus tiempos de retención
en comparación con patrones.
TABLA. HPLC de los ácidos de la muestra
Tiempo de retención
(min)
6,25
7,665
8,76
14,225
16,245
24,958
EtOH 85 % 10 : 1
Maceración
21 días
Reposo hasta
obtener líquido
sobrenadante claro
Decantar
Suspensión
turbia
Compuesto
Ácido glicólico
Ácido (+) - málico
Ácido (+) - láctico
Ácido cítrico
Ácido succínico
Ácido aconítico
EtOH 85 % 10 : 1
0,029
0,048
0,129
0,366
0,208
-
Centrifugar
1 800 r.p.m.
10 min
Sobrenadante
Reunir
EXTRACTO
HIDROALCOHÓLICO
EVALUADO
Concentración
(g.L-1)
Concentración al 200 mL
en rotoevaporador
FIG. 1. Procedimiento de extraccion de fracciones del fruto.
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Extracto A
Sobrenadante Sólido
RESULTADOS
DISCUSIÓN
En el cromatograma del extracto (fig. 2),
bajo las condiciones de estudio antes
descritas, se observaron más de 20 picos.
Varios de estos picos pudieron ser
identificados como hidroxiácidos por sus
tiempos de retención, en comparación con
patrones estudiados en estas mismas
condiciones (tabla).
Se pudieron identificar los ácidos
glicólico, málico, láctico, cítrico, succínico
y aconítico; este último en forma de trazas,
teniendo en cuenta su tiempo de retención
contra patrones, lo que permitió su
cuantificación parcial. Se confirma la
presencia de ácido cítrico, anunciada por
Abreu J (Estudio químico y farmacognóstico preliminar de Bromelia pinguin L. [ piña
de ratón). Tesis. Universidad de La Habana,
Instituto de Farmacia y Alimentos. 1996),
con el empleo de CG-EM, y se detecta la
presencia de un importante grupo de
hidroxiácidos por primera vez en los frutos
maduros de B. pinguin L.
Se identifican por primera vez los ácidos
glicólico, málico, láctico, succínico y
aconítico en este fruto.
También se ratifica el hecho de la
composición compleja en ácidos orgánicos
del fruto de B. pinguin L. Se precisa un
estudio más detallado para llegar a conocer
completamente los componentes de la
fracción acídica de este fruto.
8,76 14,225
7,665
6,25
0
16,245 24,958
30 t / min
FIG. 2. Cromatograma del HPLC de los ácidos de la muestra.
SUMMARY
The study of an aqueous-alcoholic extract from B.Pinguin L.(piña de ratón)
fruit by high-performance liquid chromatography (HPLC) was conducted to
detect carboxylic acids. The presence of citric acid was confirmed and for the
first time, glycolic, malic, lactic, succinic and aconitic acids were detected.
These compounds were identified by their holding times when compared to the
patterns.
Subject headings: PLANTS, MEDICINAL; PLANT EXTRACTS;
CARBOXYLIC ACIDS/analysis; CARBOXYLIC ACIDS/pharmacology;
CHROMATOGRAPHY; HIGH PRESSURE LIQUID; CHEMISTRY PHARMACEUTICAL.
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Recibido: 18 de diciembre del 2000. Aprobado: 26 de enero del 2001.
M.Sc. Juan Abreu Payrol. Instituto de Farmacia y Alimentos. Universidad de La Habana. Ave. 23 No. 21422
entre 214 y 222, La Coronela, municipio La Lisa, Ciudad de La Habana, Cuba.
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