Daño y Reparación de DNA

Daño y Reparación de DNA Consecuencias del daño al DNA Reparación/
Corrección errores No hay reparación No hay consecuencias Modificación heredable, cambio feno>pico detectable o no Ac@vación de los sistemas de reparación Mutaciones espontáneas se producen de manera natural. Mutaciones inducidas se producen por la influencia de cualquier factor externo. 104 a 106eventos/día Errores en la replicación del DNA Cambios tautoméricos Depurinación Deaminación Daño oxida@vo Transposones • 
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Análogos de bases Agentes alquilantes Agentes intercalantes Radiación ultravioleta Radicación ionizante Cambios tautoméricos Depurinación – Deaminación Mutágenos Agentes alquilantes Agentes intercalantes Análogos de bases Mutaciones causadas por radiaciones Consecuencias moleculares de la mutación Mutaciones Indel Mutaciones Sus2tución Consecuencias moleculares de la mutación Mutación sinónima Mutación por cambio de sen2do Conserva@va No-­‐Conserva@va Mutación cambio de marco de lectura Adición de una base Deleción de una base Mecanismos de reparación Reparación por fotoreac@vación Base Excision Repair (BER) Reparación por escisión de base Nucleo@de Excision Repair (NER) Reparación de tramo corto NER en células humanas Mismatch Repair (MDMR) Reparación de desapareos en DNA mediado por me@los Células Humanas E. coli Respuesta SOS Recombinación
Recombinación sitio-específica
CONJUGACIÓN
TRANSPOSICIÓN
Recombinación homóloga
M E I O S I S,
Reparación de DNA
Recombinación homóloga
1. 
Corte en cada dúplex de DNA o doble
corte en uno de los dúplexes
2. 
Intercambio de cadenas rotas entre
dúplexes
3. 
Movimiento del punto de
entrecruzamiento en el heterodúplex
4. 
Sellado de los cortes iniciales
5. 
Segundo corte en los dúplexes:
A) Sobre la misma cadena del
primer corte: (NO recombinantes)
B) Sobre la cadena contraria al
primer corte: (recombinantes
recíprocos)
La recombinación puede involucrar
la formación de heterodúplex o de
recombinantes
1
2
3
4
1
2
MODELO HOLLIDAY
3
4
RESOLUCION
V
H
Recombinación homóloga en bacteria
1.  La nucleasa RecBCD se une
aleatoriamente al DNA donador y
produce un corte
endonucleotídico.
2.  RecBCD se va moviendo por la
doble hélice hasta encontrar una
secuencia característica
denominada “chi” que es un “punto
recombinativo”.
3.  RecBCD corta 4-6 bases a la
derecha (lado 3') de la cadena
superior, y la subunidad D
(nucleasa) se desprende, mientras
que BC continua como helicasa
desenrollando la cadena cortada,
formando DNA de cadena sencilla
con su extremo 3’OH libre.
sitio chi
5´GCTGGTGG3´
3´CGACCACC5´
RecBCD (bacteria):
helicasa (BC) y nucleasa (D) que forman el sustrato para RecA
Rec A
RecA unida al DNA de cadena sencilla (donador) facilita el encuentro de
éste con la región homóloga de la otra doble hélice (receptor), y
promueve la formación de una triple hélice.
Mediante hidrólisis de ATP, RecA facilita que la cadena del donador
desplace a la cadena homóloga del receptor, y por lo tanto se empareje
con la complementaria de ese receptor. En este proceso, la porción de
cadena del receptor homóloga del donador se ve desplazada, originándose
la llamada “estructura en D”.
Resolución de las uniones Holliday
Ruv A se une a las cuatro hebras
del intermediario de Holliday
Ruv B es hexámero con
actividad de ATPasa que sirve de
motor para su movimiento. El
consumo de ATP permite girar a
la molécula
Ruv C es una endonucleasa
que resuelve los intermediarios
de Holliday
En eucariontes no se han encontrado
homólogos para las proteínas Ruv,
pero sí para RecA (Rad51)