Comprobación de las leyes de Mendel con Drosophila Luis Lozano Sanabria, José A Bocanegra, Pablo González, Julia Moreno, Ana I Perea y Juan M Ruíz. IES Jm Caballero Bonald, Ntra. Sra. De la merced sn, 11406 jerez de la frontera, cádiz, [email protected] INTRODUCCION: METODOLOGIA: La mosca de fruta Drosophila melanogaster, ofrece grandes ventajas para la realización de diversos estudios en genética. Ha sido utilizada ampliamente como material experimental . Existen en la actualidad una gran cantidad de cepas de laboratorio disponibles para la investigación. Otras ventajas que ofrece este organismo son un tiempo generacional relativamente corto, un tamaño suficientemente pequeño para facilitar su manejo pero suficientemente grande para la observación de un gran numero de caracteres mutantes, un alto índice de prolificidad,.. Mendel, por otro lado, se considera el descubridor de las leyes de la herencia biológica. Con sus experimentos famosos con la planta del guisante demostró que los caracteres (color de la semilla o de la flor, altura de la planta,..) podían ser atribuidos cada uno a un par de “factores”, iguales o distintos, que son lo que después se llamaron genes. En unos viales de plástico transparentes poníamos una papilla en polvo, añadíamos agua y unos granos de levadura para cultivar la mosca de la fruta. Dormíamos las moscas con un preparado comercial, FlyNap, o con éter. Las moscas dormidas se manipulaban con unos pincelitos para no dañarlas y las observábamos a la lupa. Seleccionamos los machos y hembras que nos interesaban y los pusimos en viales limpios para estudiar su descendencia. Era fundamental obtener hembras vírgenes: de un vial de dónde se habían retirado los adultos y quedaban sólo las pupas se iban recogiendo las nuevas moscas que aparecían en las 6 horas siguientes. En los cruces poníamos varios machos y hembras vírgenes de genotipos conocidos en un vial para estudiar las descendencia; a la semana retirábamos los padres, a las dos semanas contábamos los descendientes de la primera generación, a la tercera semana eliminábamos ésta, y a la cuarta contábamos la segunda generación. Un vial en el momento de dormir las moscas Foto hecha a través del ocular con el movil TERCERA LEY DE MENDEL CON LOS GUISANTES CEPAS UTILIZADAS POR NOSOTROS Alas vestigiales Ebony Salvaje White EXPERIMENTACION Y RESULTADOS: Empezamos haciendo cruces de moscas atendiendo a sólo un carácter (ojos rojos vs. ojos sepia o cuerpo alado vs. alas vestigiales) para familiarizarnos con el material y el procedimiento: conocer la anatomía básica del insecto y los caracteres de estudio, el ciclo de vida con las distintas etapas (huevo, 3 larvas instar, pupa e imago) y el tiempo que duraba cada una, los imagos jóvenes de los adultos, las pupas vacías y las habitadas, las diferencias entre sexos,etc Así comprobamos fácilmente la 1ª y 2ª leyes de Mendel. Algunos resultados no coincidieron con los esperados quizá por el poco cuidado que teníamos al principio para evitar la “contaminación” producida al mezclar tapones con huevos de distintos viales. El ajuste entre los resultados obtenidos y los esperados se hizo mediante la prueba del chi-cuadrado. En esta se tomaba como grados de libertad al número de fenotipos estudiados menos 1. Constatamos la influencia de la temperatura en el desarrollo de las moscas viendo cómo, con la llegada del frío en Noviembre, el ciclo vital se alargaba.Para evitar las temperaturas bajas nocturnas utilizamos una estufa de cultivos con la puerta abierta (la completa oscuridad impide que las moscas se vean y entonces no se reproducen). También abordamos la 3ª ley de Mendel con moscas de fenotipo salvaje (cuerpo alado, ojos rojos) y dobles mutantes (alas vestigiales, ojos sepia). Utilizamos también moscas de ojos blancos (carácter ligado al sexo) para replicar los experimentos clásicos de Morgan. Especialmente interesante resultó utilizar la mutación recesiva ébony (cuerpo negro) para comprobar las tres leyes de Mendel. Esto nos condujo al descubrimiento de la incompatibilidad de dos mutaciones recesivas: ebony y sepia. HOJA RECUENTO DE DROSOPHILAS Experimento nº ojos rojos ojos rojos _________________ x __________________ P1 Hembra P2 Macho Fecha Eliminac F1 Fecha apaream P Fecha Recuento Total Fecha Eliminac P Fecha apareamien F1 Fenotipos de F1 y número de moscas - ojos rojos - ojos sepia 6+8+21+7+16 6+3+8+3+3 58 23 - - Proporcion del total Conclusión: P eran heterozigóticos HOJA RECUENTO DE DROSOPHILAS Experimento nº 3 Pardo-vest-sepia HOJA RECUENTO DE DROSOPHILAS 3 Ebony-alado-rojo Experimento nº _________________ x __________________ P1 Hembra Fecha Eliminac F1 Fecha apaream P 2 ojos blancos _________________ x __________________ P2 Macho P1 Hembra P2 Macho Fecha Eliminac P Fecha apareamien F1 Fecha Eliminac F1 Fecha apaream P Fecha Recuento Fenotipos de F1 y F2 y número de moscas -Pardo-aladorojo F1 50 - F2 Ebonyaladorojo 21 Ebonyvestigrojo 12 Fecha Recuento Otros fenotipos Incompatibilidad Ebony-Sepia Fecha Eliminac P Fecha apareamien F1 Fenotipos de F2 y número de moscas -hembra rojo -hembra blan -macho rojo -macho blan 0 Ebonyaladosepia 0 1 ojos rojos - Ebonyvestigsepia 0 Pardoaladorojo 57 Pardovestigrojo 26 Pardoaladosepia 15 Pardovestigsepia 5 F1 15+10 0 0 17+8 F2 8+5+4 7+2+1 9+6+3 4+6+4 P hembra era homozigótica y P macho hemizigótico