Cromatografía de filtración por gel

Cromatografía de filtración por gel
Uno de los tipos de cromatografía es la cromatografía de filtración por gel. En ella, las
moléculas de la mezcla se separan en función de sus tamaños.
En esta técnica la fase estacionaria está formada por gránulos de gel (agarosa, poliacrilamida, etc.) hidratados que contienen poros; estos gránulos están encerrados en una
columna cilíndrica (cromatografía en columna).
Matriz de gel
Gránulo de gel
Detalle de un gránulo de agarosa
Las moléculas pequeñas pueden
penetrar dentro, no así las grandes.
Detalle de la columna cromatográfica.
Las esferas más grandes son los gránulos
de agarosa. Las otras dos esferas son
moléculas de proteínas.
Técnicas
Las moléculas pequeñas
entran en el espacio acuoso
de las esferas
Esferas de agarosa
Moléculas grandes que no
pueden entrar en las esferas
Material
Columna de cromatografía, gránulos de agarosa, tubos de ensayo y mezcla de proteínas.
Procedimiento
Disolvente
Gránulos
de gel
En la parte superior
de la columna, se
deposita la mezcla
de proteínas.
Técnicas
Las proteínas arrastradas
por el disolvente comienzan
a penetrar en la columna
y se van separando, en
función de su tamaño,
formando dos capas de
diferente color (roja y azul)
Las moléculas más
grandes (puntos azules)
avanzan más
rápidamente ya que no
pueden pasar al interior
de los gránulos y se
recogen los primeros
en la parte inferior
Las moléculas más
pequeñas (puntos rojos)
son las más lentas
debido a que penetran
en el interior, y las
últimas en recogerse
en la parte inferior