DGP para alteraciones cromosómicas estructurales

 DGP para alteraciones cromosómicas
estructurales
1. Presentación. ¿Qué es? Es un procedimiento que nos permite detectar desequilibrios cromosómicos en los embriones de pacientes portadores de alteraciones cromosómicas estructurales tales como translocaciones (Robertsonianas y recíprocas) e inversiones (pericéntricas y paracéntricas). 2. Objetivo. ¿Para qué sirve? Permite seleccionar aquellos embriones cromosómicamente normales o equilibrados de entre todos los embriones evolutivos de una pareja en la que uno de los dos miembros es portador de una alteración cromosómica estructural equilibrada. 3. Indicaciones. ¿Para quién y por qué? Aunque los portadores de alteraciones cromosómicas estructurales equilibradas no presentan patología, pueden tener un riesgo elevado de infertilidad, aborto o descendencia con desequilibrios en el material genético que sí impliquen patología. La selección de embriones cromosómicamente normales o equilibrados en estos pacientes reduce el riesgo de descendencia desequilibrada y de aborto, e incrementa de forma global el éxito reproductivo. 4. Muestra. ¿Cómo? Las muestras a analizar pueden ser células embrionarias o una fracción de trofoectodermo, obtenidas mediante biopsia embrionaria en día 3 y 5 respectivamente de desarrollo embrionario. 5. Metodología Dependiendo del tipo de alteración y del tamaño de los fragmentos cromosómicos implicados en la alteración podemos utilizar las siguientes técnicas: 5.1. "Hibridación in situ Fluorescente" (FISH) Consiste en hibridar el núcleo de una o dos células embrionarias con sondas de ADN marcadas con moléculas fluorescentes para determinar el número de copias de los fragmentos cromosómicos implicados en la alteración. Para ello, las blastómeras obtenidas tras la biopsia se fijan en un portaobjetos. La elección de las sondas utilizadas para el análisis depende de cada alteración, por lo que esta técnica precisa de un estudio previo personalizado. Este estudio se realiza en linfocitos del portador de la alteración y permite el diseño de un protocolo personalizado con la selección de sondas de ADN que nos permita descartar los desequilibrios para los cromosomas implicados (lo denominamos "Estudio Previo Translocación"). www.igenomix.com 5.2. Arrays de CGH (aCGH) Consiste en extraer y amplificar el ADN de una blastómera o de varias celúlas de trofoectodermo, que tras la biopsia han sido colocadas en un microtubo. Tras la amplificación, el ADN representativo de cada embrión y ADN de individuos control normales se marcan con diferentes fluorocromos (Cy3 y Cy5). A continuación el ADN marcado se hibrida con los micro‐arrays de ADN 24sure+TM. El análisis de las imágenes obtenidad se analiza con el software BlueFuse Multi 2.6 Hay que tener en cuenta que antes de empezar cada tratamiento se debe consultar con el laboratorio para estudiar qué metodología es la más apropiada. Para las translocaciones Robertsonianas recomendamos la técnica de arrays de CGH que además de la translocación nos permite descartar aneuploidias para el resto de cromosomas. Para el resto de alteraciones estructurales siempre se podrá realizar FISH específico para los cromosomas implicados en la alteración, pero también se podrá optar por los arrays de CGH en algunos casos, con riesgo de desequilibrio para fragmentos cromosómicos de tamaño medio‐grande. 6. Procesamiento de muestras y entrega de resultados. ¿Cuándo? La muestra se transporta en un contenedor frío y bien protegido para evitar golpes. La muestra debe enviarse inmediatamente a la dirección de entrega: España: IGENOMIX, Laboratorio DGP cromosómico, Parc Cientific Universitat de Valencia, C/ Catedrático Agustín Escardino, n99, 46980 Paterna (Valencia). Latam: IGENOMIX Latam 7955 NW 12th St.Suite 415 Miami, Florida 33126 USA El protocolo en el laboratorio requiere 24‐48h para realizar el estudio y emitir el informe de los resultados. 7. ¿Cómo comenzar? Contacte con España: contacte con [email protected] Latam: info‐[email protected] 8. FAQ's ¿Qué es la biopsia embrionaria? ¿Sufre algún daño al embrión? La biopsia embrionaria consiste en la extracción de una/varias células del embrión (dependiendo del estado de desarrollo del mismo). Se trata de un método invasivo y que requiere de una gran experiencia y habilidad por parte del embriólogo que manipula los embriones. Si el embrión es manipulado correctamente, el embrión se desarrolla con normalidad tras la biopsia embrionaria, implanta con normalidad y da lugar a recién nacidos vivos sanos. Los estudios publicados hasta el momento en los que se compara niños procedentes de embriones biopsiados y no biopsiados muestran resultados equivalentes en términos clínicos. ¿Es aconsejable hacer la biopsia en día 3 o en día 5? Si bien en muchos centros de reproducción asistida los mejores resultados diagnósticos se obtienen tras biopsia embrionaria en día 5 de desarrollo (lo que conlleva obligadamente la congelación de los embriones o la transferencia en día 6 de desarrollo), en nuestro centro hemos comprobado que los resultados diagnósticos son igualmente sólidos en día 3 y en día 5 de desarrollo. La ventaja de realizarlo en día 3 de desarrollo es el no necesitar congelar los embriones ni retrasar el momento de transferencia del embrión. Si realizo un DGP para alteraciones cromosómicas estructurales ¿tengo garantizado por completo la gestación de un niño libre de la anomalía genética de la que es portador uno de los padres? El análisis garantiza la transferencia de un embrión sin la anomalía genética o un embrión con la anomalía equilibrada en las mismas condiciones que el progenitor portador de la anomalía. En ambos casos el embrión está libre de www.igenomix.com patología originada por la alteración pero no es posible distinguir entre embriones normales y embriones equilibrados. ¿Qué diferencia hay entre Arrays 24 sure y FISH? Con la técnica de Arrays 24sure+ se estudian los 24 cromosomas mientras que la técnica de FISH sólo se puede analizar los cromosomas implicados en la alteración cromosómica concreta. Sin embargo, no siempre es posible la elección de la técnica empleada para el análisis puesto que esta depende de que el tamaño de los fragmentos implicados en la anomalía cromosómica sea superior al límite de resolución de los arrays. Si me realizo un estudio de aneuploidías, ¿es recomendable realizarse un estudio prenatal? Pese a que las técnicas empleadas son sumamente precisas, no están exentas de errores inherentes a la técnica o al material biológico objeto de estudio. No se puede excluir el mosaicismo embrionario, por lo que se recomienda la realización de estudio prenatal en forma de amniocentesis o de muestreo de vellosidad coriónica. www.igenomix.com