Aporte del laboratorio

Aportes del Laboratorio de
Urgencia al estudio de las
Diarreas en el Paciente Critico
Departamento de Laboratorio de
Patología Clínica.
Hospital de Clínicas
„
¿Porque el Laboratorio de Urgencia?
„
Paciente Critico : Paciente Grave
Respuesta Rápida RR (muestras ,exámenes ,resultados ) para que
estos pacientes puedan ser rápidamente diagnosticados y tratados
„
„
Estos tipos de pacientes necesitan nuevos tipos de
estudios(materias) que deben ser ser incluidos en la RR
mediante Test Ràpidos de Estudio de Materias Fecales .
Ex.Fisico : Olor ,Color ,Cantidad ,Consist
Ex. Quimico : Sangre ,Grasa ,Ph,Ionograma,GOF
Ex . Citológico : Leucocitos
Ex Microbiologico
Importancia del Laboratorio
Contribución Diagnóstica
1) De Repercusión Sistémica de la
Diarrea
Examenes en en sangre y orina que permiten estudiar :
Test Rápidos
Estado AB y Respiratorio : Oxi Gasometria
Estado Hidro Eelectrolítico: Ionograma
Estado Nutricional : Prealbumina
Función Renal : Creatinina ,Urea
Repercusión Inmunológica Sistémica : Proteina C Reactiva, VES ,
Leucocitosis ,Plaquetas(Hemograma)
Estado de la Hemoglobina : Hemograma
2 )Tipo Fisiopatologico de Diarrea
a) Líquida Secretoria
Se produce por :
Transporte Anormal de Iones a través del Endotelio
(Secreción Gastro Intestinal modificada)
Se caracteriza por : Leve diferencia entre la relación Agua / Particulas (Sales de
Na+ y K +)de las materias Fecales con la del Plasma
Se estudia :
Test Rápidos : GAP OSMOLAL FECAL :Ionograma en Materias Fecales
Medida Osmolalidad en Plasma
Calculo GOF
Menor a 50 mosmoles/ kg
í
b) Líquida Osmòtica
Se produce por : Aumento de la presencia en luz intestinal sustancia s
osmóticamente activa.
Dèficit de la Digesto Absorcion de Glucidos
Se caracteriza por : mayor diferencia entre la relación Agua /Partículas( Sales
Na+,K+) de las materias fecales y de la del plasma
Se estudia :
Test Rapidos : GAP OSMOLAL FECAL : mayor a 125 mosmoles/kg
Ph fecal : Aumento de Carbohidratos en luz Intestinal(menor a 5,6)
Examen Fisico de las Materias : Olor (acido etc )
c) Inflamatoria
Se produce por: Lesión del Endotelio,Inflamación ,Exudación
Se caracteriza por : Presencia de sustancias anormales en las heces
Respuesta inflamatoria sistémica
Se estudia :
„
En Heces : Presencia de Sustancias anormales
Sangre : Macroscópica: Fisico (color ) no es totalmente especifico
Microscópica : Sangre oculta : PSI (perdida de sangre intestinal) .Normal 50 ml /dia
Métodos : Clàsicos accion peroxidasica del grupo Hem (inespecifico ),
Inmunologicos detectan Hb Humana (FOBT fecal ocult blood test)
( Test Rápido , especifico y sensible)
Leucocitos :
Exámen Directo con Azul de Metileno dificultad : Ph de las materias presipitan el colorante
„
En Sangre: Respuesta Inflamatoria Sistemica
PCR,,VES,Leucocitosis
„
d) Esteatorreica
Se produce por :mala digesto absorcion de las grasa
Se caracteriza por : aumento de las grasas en luz intestinal y las materias
Exámen: Fisico Color : Acolicas, Brillantes aceitosa
Cantidad : Abundantes
Adhieren a la espatula
Olor . Ráncio,butírico
Quimico : Grasa
Métodos:
Cualitativo y semicuantitativo
Coloración con Sudan III(T.Rapido)
Cuantitativo : Van de Kamer
3) Diagnóstico Etiológico
a)Microbiologicos : Bacterias ,Hongos,Parasitos ,Virus
Se estudia :
Test Rápidos : Directos de heces: inespecifico
Criptosporidium(frecuente Diarrea de Inmunodeprimidos)Tincion de Ziehl Nilsen
Inmunocromatograficos en placa etc
Test mas de 72 horas . Cultivo de heces
Hemocultivo
PCR (polimersa chain reaction)
Problema : el DNA puede ser digerido y confundido con la de otras celulas presentes en las materias
b) Otros :Neoplasicas , Endocrinas etc :
Exàmenes : Dosificacion de Hormonas ,etc
Revision de Metodos de
Importancia Diagnostica
Gap Osmolal Fecal
Mètodo utilizado para diferenciar la Diarrea
Secretoria de la Osmòtica
Definición de Osmolalidad
Expresa la relación :
„ N° de Particulas Osmot. activas(osmoles) / Kg de agua MF . o del P.
(Osmolaridad : Nº de particulas / L de solucion)
„
Particula Osmoticamente Activa : capaces de producir efecto osmotico
Particula(Osmoles) = Mole, Equivalentes etc
„
1 Mol de Glucosa = 1 Particula = 1 Osmol/1 Mol de ClNa = 2 Equis = 2 Particulas = 2 Osmoles
Osmolalidad Medida : OSMOMETRO
Fundamento : se basa en la relación N° Particulas /agua de una solución con la disminuciòn
del Punto de Congelación de la solución
Mide todas las partículas presentes
Plasma : 300 mosm/kg
Materias . Varia hay muchas particulas Osmoticamente activas
Osmolalidad Calculada : a partir de la concentracion en meq/l o Moles/l
de las Particulas
Plasma:: (Na+K meq/l ) x 2 = 290moso/kg
Materias: (Na + K meq/ l ) x 2 : Normalmente similar a la del Plasma
Gap Osmolal Fecal
„
Diferencia entre :
Relación Agua /(Na + K )/meq/l x 2 del Plasma con
la relación Agua/( Na + K) ) x 2 de las Materias
Cálculo GOF
Osmol Plasmatica
(medida o calculada) - Osmol
Fecal (calculada)
Diarrea Secretoria : poca diferencia entre Osmol. del Plasma y de las Materias
Valor : menor a 50 mosm /kg
Diarrea Osmotica : mayor diferencia entre Osmol. del Plasma y de las Materias
Valor : mayor a 125 mosmoles /kg
Realización
„
„
Preparación del Paciente
Muestra : Materias fecales liquidas , frescas ,buen
estado de conservaciòn ,Aleatoria
„
„
„
„
Ionograma (Na y K) : en materias fecales
Càlculo Osmolalidad Fecal: (Na + K)/ meq/l x 2
Osmometria o Càlculo: Plasma
Cálculo GOF : Formula
Osmolalidad plasmatica medida/calculada – Osmolalidad fecal calculada
Representaciòn Gráfica
Relación : Gap Osmolal con los Tipos
de Diarrea Secretoria y Osmótica
Correlación :Gap Osmolal con la la Severidad de la
Diarrea Osmótica
Método Diagnóstico
del Clostridium Difficile
Agente etiològico Bacteriològico + frecuente en pacientes
intrahospitalarios post tratamiento con antibiòticos
Clostridium Difficile
Caracteristicas .
„
Bacilo gram positivo , esporulado,anaeroboico
„
Productor de Toxinas :A Enterotoxina y B Citotoxina
„
Habitualmente forma parte de la falora Normal Fecal(inactivo),conjuntamente
con otros Clostridium que no producen Enterotoxinas
„
Con el tratamiento con Antibioticos se activa (produce toxinas)
„
Produce Diarreas de distintoss Grados de Severidad
Diagnostico de Diarrea por
Clostridium Difficile
„
„
CIínico : Paciente Hospitalizado
Diarrea Aguda
Historia de Tratamiento Antibiòticos
De Laboratorio:demostraciòn de la presencia de Toxina A en Heces
Test Ràpidos en Materias : Detecciòn Toxina A
Test Lentos : Cultivo: identificaciòn del gérmen y además la
demostración de la produccion de Toxina A
PCR . Identificaciòn del gen productor de toxina
Diagnostico del Laboratorio
Urgencia de la Toxina A
Test Ràpido
„
Inmunocromatografia en Placa
Fundamento:
Se realiza en placa de agar celulosa
Anticuerpo Monoclonales anti Toxina A marcado con latex azul se unene a Toxina A presente en
heces se forma un complejo que migra y es atrapado por Anticuerpos antitoxina A inmovilizados
en una linea de la placa: , quedando la linea de la placa de color azul
Linea de Control conanticuerpos anti anticuerpos marcados con latex
„
Cualitativo : de demostracion de la presencia de la toxina A
Duración . 30 minutos
„
Muestra : + apropiada acuosa , aleatoria,recoleccion en recipiente
„
conteniendo solucion de extraccion , conservacion hasta 3 dias a 2 ºC
„ Preparaciòn : homogenizacion, dilucion , centrifugacion
Interpretaciòn del Test
„
„
„
„
„
Test + = presencia de Toxina A y del Clostridium D.
Cultivo Clostridium D . + no es suficiente hay demostrar la
presencia de Toxina A .
La Toxina A + . No es igual a enfermedad debe ser
interpretada con la clínica.
Test negativo : no excluye la presencia de la Toxina A.
Si hubo una inapropiada conservacion de la muestra esta
pudo ser destruida por las bacterias
No excluye la presencia de otras Microorganismos
Test positivo : la presencia de sangre puede dar falsos
positivos
Perfomance o Valor del Test
informado por el fabricante de la marca utilizada
Ante heces con y sin Toxina A
Sensibilidad : 90,4% (9,6% falsos negativos)
Especifidad : 97 ,8%(2,2% falsos positivos)
Valor predictivo Positivo :94,7%(cuando test + solo el
5,3% puede ser falso +)
Valor predictivo Negativo : 96,3%(cuando el test es –
Solo 3,7% puede ser falso negativo )
Conclusiones
„
Importancia de la contribución del Laboratorio
en el Diagnóstico
De la Repercusión sistémica de la Diarrea
Del Tipo Fisiopatologico
De la Etiología
„
Importancia de incluir Test Rápidos de
Estudio de las Materias Fecales en la
Respuesta Ràpida brindada a los Pacientes
Críticos con este tipo de patología