Inclusión de células en agar-agar para la obtención de bloques

Inclusión de células en agar-agar para
la obtención de bloques celulares
(material líquido o semisólido)
A. González, M. García, M.C. Bartolomesanz, P. Parrales, R.
Gómez, M. González, E. Sayós,
M. Llatjós.
Servicio de Anatomía Patológica.
Hospital Universitario Germans Trias i Pujol. Badalona. Barcelona
Introducción
• Algunos productos inductores de la aglutinación
son costosos y no dan un resultado óptimo.
• Conseguir un bloque en muestras citológicas
líquidas o semisólidas que no coagulan puede
ser un problema.
• Características propias de la muestra: viscosidad,
escasez de material o material necrótico.
Objetivo
Describir una técnica para conseguir un
bloque en muestras citológicas líquidas
o semisólidas:
• Sencilla
• Rápida
• De bajo coste
Material y métodos I
• 20 muestras en fresco BAL, líquidos de cavidades y
punciones (EBUS-PAAF) durante un período de 6 meses:
• Material utilizado:
1. Agar-agar (agar grado A)
5. Rotor con calor
2. Tubo cónico
6. Centrífuga
3. Placa de petri
7. Vaso de precipitado
4. Bisturí
8. Asa calibrada
Material y métodos II
1.
Centrifugar las muestras 5 minutos a 1500
revoluciones en un tubo cónico.
2.
Preparación de la gelatina.
3.
Depositar 1 cm3 de gelatina sobre la muestra
centrifugada, dejándola enfriar.
4.
Desmoldar el bloque.
5.
Separar la parte que contiene la muestra.
6.
Envolver la muestra en un papel y depositarla
en un cassette.
7. Seguir proceso de inclusión en parafina.
Preparación de la gelatina
• 25 cm³ de agua
destilada en un rotor con
calor (a 50-60º C).
• Añadir 0,8 gr de Agar.
• Llevar a ebullición.
• Dejar enfriar (36/37º C)
Realización del bloque
Control de temperatura
Bloque de agar-agar
Desprendimiento del bloque
Movimientos en espiral
Introducir aire
Inclusión de la muestra
Resultados
• Muestras procesadas en agar-agar: 20
- 17 evaluables
- 3 no valorables
• Rendimiento: 85%.
H-E
H-E
QUER5/6
p63
Conclusiones
• La inclusión de células en agar-agar es una
técnica:
- Sencilla
- Barata
- Eficaz
• Permite un elevado rendimiento en
muestras habitualmente difíciles de valorar.
• Permite realizar técnicas especiales
Gracias