Fenotipos de resistencia frente a macrólidos y lincosamidas de

XV Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas 2014 - II Jornada Latinoamericana
Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional de Rosario
Fenotipos de resistencia frente a macrólidos y
lincosamidas de cocos grampositivos aislados de mastitis
bovina
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Denamiel, Graciela; Pereyra, Ana; Puigdevall, Tomás; Testorelli,
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Florencia; Srednik, Mariela; Rumi, Valeria; Grieben, Mario;
Zenobi,
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Carlos; Gentilini, Élida
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Cátedra de Microbiología. Cátedra Bovinos de Leche. Facultad de
Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires (UBA).
Comunicación preliminar. Trabajo subsidiado por UBACyT. Mastitis Bovina.
[email protected]
Los cocos grampositivos como patógenos involucrados en la mastitis
bovina, constituyen el grupo microbiano más representativo integrado, entre
otros, por los Géneros Staphylococcus y Streptococcus. Para la selección
de un correcto tratamiento antimicrobiano (ATM), es importante la
identificación del patógeno y la determinación de la susceptibilidad
antibiótica. Los estafilococos y estreptococos poseen diferentes
mecanismos de resistencia (R) frente macrólidos y lincosamidas. Se
denominan: fenotipo MLS (Macrolide-Lincosamide-Streptogramin) que
afecta a macrólidos, lincosamidas (Lin) y estreptograminas del tipo B,
ocasionado por una alteración del sitio blanco de acción, al modificar la
diana ARNr 23S por lo que da R cruzada de alto nivel a todos los ATM del
grupo MLS. Puede ser constitutivo (MLSC) que afecta a eritromicina (Eri) y a
todos los macrólidos de 14 y 15 átomos de carbono, a clindamicina (Cli) y a
estreptograminas B; o inducible (MLSi) que se expresa como R a todos los
macrólidos pero con sensibilidad (S) a las Lin (lincomicina, clindamicina y
pirlimicina) y a las estreptograminas B, en ausencia de un inductor como la
propia Eri. El fenotipo M, cuyo mecanismo es el eflujo e involucra sólo a los
macrólidos de 14 y 15 átomos de carbono y el fenotipo L debido a la
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presencia de la enzima lincosamida nucleotidil-transferasa , que actúa solo
sobre las Lin. El objetivo de este trabajo es estudiar el patrón fenotípico de
R frente a macrólidos y lincosamidas de Staphylococcus spp. y
Streptococcus spp. aislados de mastitis bovina. A partir de 100 aislamientos
de cocos grampositivos (83 estafilococos y 17 estreptococos) procedentes
de leches mastíticas de la provincia de Buenos Aires (Benito Juárez, Tandil,
Gral. Las Heras, Ameghino) y sur de Córdoba (Canals, Rio Cuarto, La
Carlota), entre septiembre de 2013 a marzo de 2014, se determinó el patrón
fenotípico de R frente a macrólidos y Lin. La identificación bacteriana se
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realizó según el Manual de Determinaciones Bacteriológicas de Bergey . El
34,9% (43) de los aislamientos correspondió a Staphylococcus aureus, el
32,5% (40) a estafilococos coagulasa negativos (ECN) y el 15,4 % (17)
fueron Streptococcus spp. La detección del patrón de R frente a estos ATM
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se realizó por antibiograma por difusión (Bauer y col ), colocando un disco
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de Eri (15µg) a dos centímetros de un disco de Cli (2µg). El análisis de los
fenotipos se realizó de acuerdo a la siguiente lectura, según
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recomendaciones del Clinical Laboratory Standard Institute : MLSc (Eri-R y
Cli-R), ausencia de un halo de inhibición alrededor de los discos de Eri y Cli,
indicando R a ambos. MLSi (Eri-R y Cli-S), ausencia de halo de inhibición
a Eri y un achatamiento del halo de Cli en la zona de difusión de Eri,
interpretándose como R a ambos ATM. Fenotipo M (Eri- R y Cli-S), ausencia
de halo en el disco de Eri y presencia de halo de inhibición en el disco de
Cli, indicando R a Eri y S a Cli. Fenotipo L (Eri-S y Lin-R) utilizando disco de
Cli, con halo en el disco de Eri y ausencia de halo en el disco de Cli
interpretándose como Eri S y R a todas las Lin. Staphylococcus aureus
arrojó una R del 37,2% (16), los ECN del 35% (14) y los estreptococos del
35,2% (6). El 34,8% (15) de los S. aureus presentó el fenotipo MLSc y el
2,3% (1) el fenotipo M de R. El 17,5% (7) de los ECN el fenotipo MLS c, el
2,5% (1) el MLSi y el 15% (6) el fenotipo M. El 29,4% (5) de los
estreptococos el fenotipo MLSc y el 5,8% (1) el fenotipo M de R. No se
detectaron cocos con fenotipo L de R. En este estudio, los cocos
grampositivos expresaron con mayor frecuencia, el fenotipo MLSc,
coincidiendo con descripciones realizadas sobre aislamientos de distintos
orígenes. El monitoreo de los perfiles fenotípicos de R de los cocos aporta
información tendiente a minimizar errores de interpretación en las lecturas
de las pruebas de susceptibilidad en el laboratorio. Así, como ocurre en el
fenotipo MLSi, que puede aparecer como drogas activas in vitro pero no ser
efectivas clínicamente. Además de permitir el control epidemiológico de la
eritromicina-resistencia, que suele estar asociada con una diseminación
local de clones de R.
BIBLIOGRAFÍA
1. Bauer, A.W.; Kirby, W.M.M; Sherris, J.C.; Turck, M. Antibiotic
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2. Clinical Laboratory Standards Institute. VET01-A4. Performance
Standards for Antimicrobial Disk and Dilution Susceptibility Test for Bacteria
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3 Holtt, J.; Krieg, N.; Sneath, P.; Staley, J.; Williams, S. Bergey´s Manual of
Determinative Bacteriology. Ninth Edition. (ISBN 0-683-00603-7) Williams
and Wilkins 428 East Preston Street Baltimore, Maryland 212002, USA.
Group 17, 544-551.1994.
4. Morosini, M.I.; Cercenado, E. y Torres, C. Detección fenotípica de
mecanismos de resistencia en microorganismos grampositivos. Enferm
Infecc Microbiol Clin. 1-8. 2012.