different stages of maturi§,. anrazónica, perteneciente a la familia

Contenido de compuestos fenólicos y actividad antioxidante del arazá (Eugenia stipit«ta
Mc Vaugh) en diferentes estados de maduración.
Phenolic content and antioxidant activity of araza (Eagenia stipitata Mc Vaugh) in
different stages of maturi§,.
Galeano P., M.Sil; Paladines Ml, Cuellar Nl, Orrizfl, Silva Y.] Velasquez H3
I Docente Universidad de la Amazonia Florencia Caquetá., 2 Estudiantes del Programa de Química, Universidad
de la Amazonia.
*Autor para c.orrespodencia: paulalg@uniam¿¿onia.edu.co
Recibido: 2-3-2010. Aceptado: 3-6-2010
RESUNIEN
El Arazá(Eugenia stipitataMc Vaugh), despierta gran interés en dif'erentes ámbitos por las cualidades organotépticas dcl fruto y
por el índice de producción de la planta. Con el objetivo de evaluar el potencial antioxidante del Arazá cultivado en el
Departamento Caquetá.
(.A1: Vcrde:
se
evaluó la actividad de los extractos acuosos de la pulpa de Arazá en 5 dif'erentes estados de maduración
42: Verde madurol A3: Pintón; A4: Maduro y 45: Sobre maduro), empleando las metodologías dc DPPH yABTS.
1,
cuantificó el contenido total dc f'enoles usando el ensayo cle Folin-Ciocalteu acorde con el método desamollado por Velioglu.
Los resultados indican que la mayor actividad antioxidante la prcsentan las fnrtas de arazá en estado de maduración 43. con
valores TEAC-DPPH de 81,9 ¡rmol trolox/l00 g extracto seco y TEAC- ABTS de 241,8 ¡unol trolox/I00 g extracto seco. En este
mismo estado de maduración se encontró el mayor contenido de l'enoles totales (1063,9 rng ácido ascó¡bico/I00 g de extracto
seco), por lo tanto, principalmentc a cstos compucstos fenólicos, puede ser atribuida la actividad antioxidante.
se
Palabras claves: Eugeniastipitata,DPPH,ABTS, Fenolestotales, Maduración.
ABSTRACT
The Atazá (Eugenía stipitata Mo Vaugh), arise interest in diftbrent fields by the fruit organoleptics properties and for the plant
production index. With the aim ofdetenninate to theArazá antioxidant capacity oultivated in Caquetá region, there rvas evaluated
the waterl'extracts activity oftheA¡azáflesh in 5 differentripeness conditions (l: Green: 2: Ripeness Creen;3: Pre ripeness;4:
ripeness and 5: post ripeness), using the methoclologies of DPPH andABTS, and the totsl phenolic content rvas quantif,ied using
Folin-Ciocalteu assay according to a method developed by Velioglu. The study indicated that the highest antioxidant capacity is
found in the third (3) ripeness couditions with TEACI-DPPH of 81,9 ¡unol troloVl00 g riried efir'act and TF¡\C-ABTS de 241"8
¡rmol tlolox/l 00 g dried extract values. In the samé ripeness condition is fbund the highest phenolic content ( I 063,9 mg ascorbio
acid/l 00 g ofdried extract), therefore could be attributed these phenolic compoun<ls to tlte antioridant capacit-v.
Keywortls: Eugeniastipita¡a,DPPH,ABTS,Totalphen<lliccontent.Ripeness.
INTRODUCCIÓN
La Amazonia colonlbiana cuenta con
rendimiento del fmto, cosecha temprana y por sll
contenido de vitamina C. (León 2000).
una
enorrne variedad de especies frutícolas nativas.
El Arazá (Eugenia stipitata Mc Vaugh), es una
fruta exótica y tradicional de la
anrazónica, perteneciente
a la
Los estudios realizados en arazá se basan
principalmente en la caracterización química
región
por cromatografía de gases acoplada
familia
'a
espectrometría de masas (GC/MS) del aceite
esencial de las hojas, encontrándose que está
constituido por sesquitelpenos y monoterpenos;
Myrtáceae, es un arbusto o árbol pequeño que
alcanza alrededor de los 2,50 m de altura. Las
hojas son opuestas, enteras, elípticas con ápice
acuminado, y medidas que se aproximan a8-12
cm por 3-6cm (Pinedo er al, 1981). Lo más
notable de esta especie es el tamaño del fruto,
principalmente por o-pineno (14,106), Bcariofileno (22,7%) y oxido de cariofileno
(15,4%). Además, se repoúa la actividad
cuya pulpa es amarilla, incluyendo el mesocarpo
antimicrobiana de los aceites esenciales frente
y los tejidos que rodean la sernilla; es ácida y se
prepala en refi'escos y helados de sabor muy
agradable. Es un fi'utal de valoq tanto por el
Staphylococcus aureus, Pseudomona
aeruginosa y Listeria monocytogenes.
(l\4edeiros 2003).
28
Galeano, Paladines, Cuellar, Ortiz, Silva y Velasquez / Revista Facultad de Ciencias Agropecuarias, Vol.2 No.2 2010, pp:28-34
el objetivo de evaluar la actividad
antioxidante y el contenido de compuestos
fenólicos del fruto de Arazá (Eugenia stipitata)
en diferentes estados de maduración, se
emplearon las técnicas de actividad atrapadora
de radicales (DPPH y ABTS.), así como la
cuantificación por el método de Folin-Ciocalteu
Estudios químicos en los procesos de
crecimiento, desarollo y maduración del fruto
Con
de arazá, demuestran que el ácido málico, es el
principal ácido orgánico encontrado en la pulpa;
la variación de este contenido puede ser un
parámetro a tener en cuenta en la cosecha.
(Hernández e t ul, 2006).
mediante espectrofotometria.
Por otro lado, se han realizado exploraciones de
la actividad antioxidante durante la rnaduración
del tiuto de arazá, en períodos
MATERIALESYltrÉTODOS
de
Material vegetal:
almacenamiento de seis días, encontrándose que
el contenido de ácido ascórbico y de compuestos
fenólicos disminuye durante el almacenantiento.
Pese a esto, los investigaclores aseguran que la
contribución del arazá en la dieta alirnenticia es
buena, en comparación con otros alimentos.
(Yargas et aL,2005).
Las frutas de arazá iberon colectadas en el centro
de investigaciones CIMAZ- Macagual, ubicado
en el kilómetro 20, vía Florencia- Colombia
(Coordenadas geográficas 1o37"N y 75"36"W,
380 msnm). Las muestras fileron caracterizadas
como (A1: Verde; A2: \y'erde maduro: ,{3:
antioxidante se relaciona coR
cornpuestos capaces de proteger un sistema
biológico del efecto potencialmente dañino de
procesos que causan excesiva oxidación, entre
Pintón; A4: Maduro y A5: Sobre macluro),
teniendo en cuenta su estaclo de madurez segíut
los parárnetros propuestos por Hemández et al.,
2006"
los que se encuentran las especies reactivas del
oxígeno, los iones metálicos y los radicales
libres. (Arnao et aL,1999).
La ftmeza
La actividad
B
of2OoC.
Muchas enfermedades como la inflamación, la
aterosclerosis, la enf'ermedad de Alzheimer y de
Una vez removida la pi€l de la fi'uta, se tomaron
100 g de pulpa, se homogenizaron con agua
destilada hasta agotamientc¡ de la muestra y
posteriormente tueron filtradas y almacenadas a
-40c.
Parkinson, han sido asociadas a los daños de las
macromoléculas biológicas por el ataque de las
especies reactivas de oxígeno (ROS), las cuales
generan un clesbalance entre la producción de
radicales
y
los sistemas atrapadores de
fure detenninada con penetrómetro
ertuzzi Ac curacy *1oA fu I I s c a/e a tem peratura
Determinación
de la concentración de
los
extiactos.
esos
radicales.
Para ello se utilizaron cajas de petri previamente
secas y pesaclas, luego se les adicionó I mL de
Existen nulnerosos rnétodos para evaluar la
muestra y se pesó el conjunto. Posteriotmente se
ller.ó a secado en una estufa a 50"C durante 20
horas aproximadamente. Al cabo de este tiempo
actividad antioxidante en alimentos, sin
embargo, no existe un ensayo in vitro para
se pesó nuevamente la caja de petri
deteminar la actividad antioxidante que pueda
considerarse corno universal, debido a que la
y
se
determinó el peso del extracto seco.
actividad anti-radicalaria
depende
fundamentalmente de la naturaleza del radical y
del método de generación del mismo. La
eleccién de un sistema químico para generar
especies reactivas es url punto crítico en el
Determ inación de Fenoles Totales.
Se desamolló la rnetodología propuesta por
Singleton et al 1961. La mezcla de reacción
constiflrida por 50 pLL del extracto de xazá,425
pL de agua destilada, 125 pL del reactivo de
desan'ollo de cualquier ensayo antioxidante con
elfin de obtener resultados relevantes. (Aruoma
2003)
Folin-Ciocalteu
?q
y
400 pL de una solución de
-l
Galeano, Paladines, Cuellar, Ortiz, Silva y Velasquez / Revista !'acultad de Ciencias Agropecuarias, Vol.2 No.2 2010, pp:28-34
RESULTADOSYDISCU§IÓN
carbonato de sodio al 17Yo se dejó en reposo por
I hora. Al cabo de este tiempo se leyó la
absorbancia a 765 nm.
El
contenido total de
De varios árboles de arazáse colectaron frutos de
diferentes estados de maduración. Se realizó la
fenoles se expresó como mg de Ácido gálico/l00
g de extracto seco, teniendo en cuenta una curva
de calibración con diferentes concentraciones de
caracterización de la madurez del fruto,
ubicando a las muestras de acuerdo a su
coloración y características físicas: verde mate
verde-amarillo claro (A2), verde:25oA
amarillo (A3), 100% amarillo (A4) y amarillo
ácido gálico.
(Al),
Reacción con
el
radical 2-2difenil-1-Picril
Hidrazilo (DPPH).
Se llevó
a cabo utilizando la
oscuro(A5). (Verfigura l,tabla l).
metodología
propuesta por Brand Williams et al., I 995; dónde
se tomaron l0 L del extracto acuoso de arazáy
990 L de la solución metanólica de DPPH (20
mg/L). Corno referencia se empleó la misma
cantidad dq DPPH y 10 L del solvente de la
muestra. Luego de 30 minutos de reacción a
temperatura ambiente y en la oscuridad, se leyó
la absorbancia
a
una longitud de onda de 5 l7 nm,
(Cavin et al, 1998). Los resultados fueron
expresados como valores TEAC (Trolox
Equivalent Antioxidant Capacity) mediante Ia
consíucción de una curva patrón usando varias
Figura
concentraciones de antioxidante TROLOXo.
Reacción con
Tabla
el radical
2,2'-azino-bis (3etilbenztiazolin-6-sulfonato de amonio
I
1.
Estados de Maduración de
Arwá.
Esfado de maduración y descripción de las muestras úilizadas.
Color
Muestra Escala
(ABT'S-).
Estado Valor
Descripción Desuipción Firmeza
color
coordegada
Se realizó mediante Ia metodología propuesta
por Re ef al, (1999). Se tomaron 10 pL
de
AI
extracto acuoso de arazáy 990 ¡rL de la solución
del radical ABTS'ajustada con PBS pH 7,4 a 0,7
unidadés de absorbancia a 732 nm, se dejó
reaccionar por 30 minutos a temperatura
ambiente y en la oscuridad. Luego se leyó la
Verde
L=54-57
maduro
C=38-41
Vude
mato
Verdecla¡o
sín
briilo
I
I
H=l0l- l0s
423
Pintón
L=58 -60
Verde
Verde claro
C42 -44
amarillo
sin brillo
8.5
H=95 -99
absorbancia respecto a la
referencia del reactivo (Pannala et al,200l,Re
R. et al, 1999). Los resultados se expresaron
como valores TEAC mediante la construcción
de una curva patrón usando diferentes
variación de
2
Ia
Ldl-64
A34
Verde con
Pintón
C+5-48
Verde
3t4
H=89-94
Ama¡illo
l0
5.0
25%ananllo
concentraciones de TROLOXCI.
L=6t67
Anális.is estadístico.
Maduro C+9-54
Todos los experimentos se realizaron por
triplicado. Las regresionés fueron calculaclas
H=83
con un nivel de significancia del95% (p<0.05),
usando el programa Statgraphics Plus versión
5.0 (Statistical Graphics Co.p., Rockville, MD).
456
-
Amarillo
del
2,3
fruto
1.,7
superñcie
fruto
88
Sobre
L=5&61
Amarillo Amarillo
maduro
C=55-59
oscuro
H=80- 84
30
Amarillo 100%
oscuro
blando
Galeano, Paladines, Cuellar, Ortiz, Silva y Velasquez / Revista F'acultad cle Ciencias Agropecuarias, Vol.2 No.2 2010, pp:28-34
Contenido de compuestos fenólicos:
Actividad antioxidante:
Los antioxidantes naturales presentes en plantas
Dado que la actividad antioxidante en alimentos
está determinada por la mezcla de diferentes
moléculas con distintos mecanismos de aeción, e
interacciones de tipo sinérgica, es necesario
combinar más de un método, para deietminar la
y
en frutales son responsables de inhibir o
prevenir el deterioro celular, consecuencia del
estrés oxidativo. Los compuestos fenólicos
y antioxidantes.
f'enoles encontrados en plantas han
actinn com o agentes reductore
Los
s
actividad antioxidante de productos
demostrado inhibición de la fomación de
radicales aniónicos superóxido generados por
diferentes sistemas enzimáticos {Taubert et al,
alimenticios por métodos in vitro (Pérez et al,
2003).
maduración, los cuales involucran la medida de
2008). Por
del arazá en slls diferentes
la
EI contenido de fenoles totales se muestra en la
tabla2.Éste contenido se evaluó en cada uno de
los fiutos en diferentes estados de maduración
de arazá, el cual osciló entre 3 46,1 * 28 y 1 063,9
* 23 mg ácido gálico por cada 100 gramos de
extracto seco. El contenido de fenoles totales en
los frutos de arazá sigue el orden: A3 >A4 > A2
>A5 >A1; mostrando que en estado pintón se
presenta el mayor contenido de compuestos
fenólicos (ver figura 2), aproximadamente 3
veces mayor que en A1 y A5 (346,1y 383,5 mg
de Ac. gálico/100 g de extracto
lo tanto, se seleccionaron dos
métodos para evaluar el potencial altioxidante
desaparición
estados de
del color por Ia acción de
radicales libres (DPPHyABTS) (Kuskoski era{
2005), los resultados se rssumen enlatabla2.
'I'abla2. R.esultados de F'enoles totales, AI]'fS y I)PPIl de
las m uestras evaluadas.
ENSAYO
MUESTRA
FENOLESTUTALES
TEAC:DPPH
Ac. galico / 100 (pmol holox /
g extracto
gde extracto
ng
de
seco,
AI
346,1+28
,1 5+1
^,
630,1+
41,0
A3
L4
9l 6,2 + 18
A5
383,5
I
50
00
*
TEAGABTS
(¡Lmol trolox
seco)
seco
4t
1063,9 !23
I
/
I
00 g
exfuacto seca)
52,5 + 3
I
159,6
*
81,9 + 3
24 1,8
+ 35
28,7 +
1
150,0
*12
22,8 +
1
160,4 + 5
5
respectivamente).
1
200
1
000
c
La capacidad antioxidante expresada en valores
TEAC- DPPH , osciló Entre 22,8 * 1 y 81,9 * 3
¡rmol trololl00 g extracto seco. El estaclo de
maduración A3 presenta la mayor actividad
atrapadora del radical DPPH de las ttuestras
analizadas (81,9
a
E
o
ú
pinol trolox/100 g extracto
800
O
O
seco,
respectivamente). Por otro lado, los valores
TEAC_ABTS oscilaron entre 52"5 =L 3 y 241,8 +
35 ¡Lmol trolox / 100 g extracto seco, donde el
estado de macluración A3 presenta el mayor
valor (241,8 pmol troloVl00 g extracto), 4.6'
veces más aho que enAl (52,5 pr:roltrolox/100
g extracto seco) y 1,6 veces mayorqueA5 (160,4
pmol troloV100 g extracto seco).
600
d
E
pmol trolox/l00 g extracto
seco), aproximadamente 3.5 veces más alto que
en el estado de maduraciónAl yA5 (23,5 y 22,&
400
E
200
0
Según Vargas et a|,2005, durante la madnración
en a lm acenamiento del aruzá, e I ác,id o ascórbico
Figtra2.
y
Contenido de fenoles totales para los frutos de
los compuestos fenólicos disminuyen, sin
embalgo, la actividad antioxiciante tiene
Arazá en diferentes estados de maduración.
tendencia a aumentar; los autores atribuyen a
que durante la maduración podrían generarse
31
--t
Galeano, Paladines, Cuellar,
O*iz, Silva y Velasquez / Revista F'acultad de Ciencias Agropecuarias, Vol.2 No.Z 2010, pp:28-34
productos de condensación
o
incremento en
algunos compuestos fenólicos que aporten
mayor actividad antioxidante.
a
una
AB'I'S
Los resultados de esta investigación penniten
obseruar que la actividad antioxidante de los
frntos de arazá se intensifica a medida que
aumenta la maduración del fruto (Ver figura 3 y
4), presentando el mayor contenido de fenoles
totales y valores TEAC-DPPH y TEAC- ABTS
o
o
P lso
§
x0
en el estado pintón (A3), y a partir de este estado
inicia un descenso en
b0
8
la
actividad. Este
comportamiento se debe a que la madurez
influye directamente en el contenido de
r:o
't
o
E
'a
compuestos bioactivos, dado que se generan
8o
E
durante este procesos de biosíntesis que
producen mayor contenido de carotenoides,
compuestos fbnólicos, ácido ascórbico entre
otros, que contribuyen de manera significativa al
aumento progresivo del potencial antioxidante;
por otro lado, la disminución de Ia actividad
antioxidante luego del estado de maduración
Muestra
Figura 4. Actividad antioxida¡rte de fiutos de arazá en
pintón, puede asociarse a la degradación de estos
compuestos por factores relacionados al estrés y
a
dif'erentes est¿rdos de madur.ación. TécnicaABTS
laaltaproducción de laplanta.
Correlación:
Teniendo en cuenta que los frutos de arazá
presentan gran actividad antioxidante evaluada
por los métodos DPPH y ABTS, y un alto
contenido de conopuestos fenólicos, se
DPP},I
consideró pertinente realizar la cor-relación de
Pearson para establecer la relación enhe las
-. tv
variables.
s6o
El coe{iciente de correlación de Pearson entre la
actividad antioxidante (expresada como TEAC -
áso
DPPH
a
y
ABTS),
y el contenido de fenoles
totales, se presenta en la tabla 3. La actividad
antioxidante total para los ensayos DPPH (R:
0,62; P<<<0.005), ABTS (R:0,73 ; P<<<0.005),
indicanque existe una buena corelación entre el
contenido de fenoles totales y la actividad
antioxidante del arazá. Estos resultados son
:40
z^^
!JU
zE
320
lñ
los encontrados en diferentes
la relación entre el
contenido de fenoles totales y la actividad
acordes con
estudios donde reportan
A3
antioxidante en diferentes fiutas (Sreeramulu e/
a|,2010, Kumar et aL,2010, Becerra et al,20ll,
Babbar et al, 2011, Arcan et al, 2009). En base a
esto, se puede afirmar que la mayoría de
compuestos antioxidantes presentes en las frutas
de arazáatrapan los radicales libres mediante un
mecanismo de transferencia de átomos de
f:igrrra 3. Actividad antioxidante de frutos de araz.á ett
nraduracitin.'l'écnica DPPI {.
di l'erentcs estados de
hidrógeno.
32
Galeano, Paladines, Cuellar, Ortiz, Silva y Velasquez / Revista F'acultad de CienciasAgropecuarias, Vol.2 No.2 2010, pp:28-34
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composition of essential oils of seven species of Eugenia
COLE R. TIABER
Tabla3.correlaciónentreFenolestotales,DppHyABTS.
fiom Monteverde. Costa Rica: USA.
S,v-stematics a:rd
Fenoles Totales
DPPH
0,62
ABTS
0,73
Biochemical
Ecology 35 (2007) 877e886
HE,RNÁNDEZ M. MARTÑEZ O. FERNÁNDEZ I .2006.
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arazá (Eugenia stipitata
Mc Vaugh) fruit
quality traits during growth, development and ripening,
Bogotá Colombia. Scientia Horticulturae lll (2007)
220*227.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
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FERNÁNDEZ JP. 2006. Arazá. Origen y fisiología de
El
potencial antioxidante del arazá está
íntimamente ligado a la variación del contenido
conservacitin. Flditorial Instituto Amazónico
de
de compuestos fenólicos, lo cual se puede
observar por la comelación lineal entre las
Investigaciones Científlicas- SINCHI Bogotá, Colombia.
técnicas, enmarcando al xazá como una fruta
benéfica que puede aprovecharse mejor si se
20l0.Antioxidant activity offresh and dry frr"rits commonly
consumed in India. Foo<i Resea¡ch International. 43,
consume en estado pintón.
285-288.
KUMAR, C. SR[.][.)RAMUI,L], D. & RAGIIIINAIII,I\,1.
KUSKOSKI, E. M. ASUERO, A. G. TRONCOSO, A. M.
Agradecimientos:
MANCINT-t"ll-llO, J. & l.'Fl'll. R. 2005. Apiicación de
diversos métodos químicos para determinar actividad
Los autores agradecen al programa "Semilleros
de Investigación" de la Vicerrectoría de
ar.rtioxidante en pulpa de frutos. Ciéncia e Tecnologia de
Investigaciones y Posgrados de la Universidad
de la Amazonía, por la financiación del
proyecto.
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