Clase Pruebas de Compatibilidad copia
Anuncio
UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Prueba de Compatibilidad Pretransfusional Leonor Armanet Bernales Universidad de Chile UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Abordaremos • Riesgos asociados a la transfusión de GR • Concepto y elementos que incluye • Prueba cruzada o crossmatch o Métodos o Modalidades o Control de Calidad • Control de calidad y seguimiento • Algunos problemas UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Frecuencia de Reacción Adversa a la Transfusión (RAT) • Generalmente no ocurren, cuando aparecen son benignas. • Algunas pueden causar Morbilidad severa o mortalidad Síntomatología a menudo muy similar UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85 Nº de muertes (% ) 159 (48.5% ) 23 (7.0) 55.5% Causa Hemólisis inmune aguda Hemólisis retardada 73 (22.2) Enf transmisibles por transfusion Edema agudo pulmonar Contaminación bacteriana 33 (10.1) 26 (7.9) 14(4.2) Comentarios Principalmente incomp. ABO Muerte de causa múltiple, pero asociada a nuevos anticuerpos: Rh, Kell, Duffy y Kidd Hepatitis NANB, B, VIH Bacterias Gram + y Gram aeróbicas y anaeróbicas Anafilaxis, Hemólisis externa, GVHD Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica 182 Muertes debida a hemólisis postransfusional Nº de muertes Grupo ABO del Receptor Grupo ABO transfundido 82 20 8 6 1 11 1 8 14 8 O O O A A B B Desconocido Diferentes causas Acs diferentes a ABO A B AB B O* A AB Desconocido Información insuficiente 5 anti-Kell 1 anti-e 1 anti-Fya 1 anti-Jka+b * Sangre total Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica RIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)* BJM 1999;319:16-19 (3 July) 4 bacterianas 7 virales 1 malaria * * 52% * 62 ABO incompatible: Error de identificación en cualquier etapa del proceso 3 muertes * 164 hospitales 341 casos en 6 millones analizados (en 2 años) 22 muertes * *Serious Hazards of Transfusion UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Reacciones transfusionales hemolíticas tardías • 8 muertes o 53% anti-Jka/Jkb o 38% anti-Rh • 14% errores podrían haber sido evitados mejorando los procesos de laboratorio. o Error humano UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Calidad y Seguridad Transfusional • Regulaciones • Recomendaciones internacionales (OMS,AABB,ISBT, otras) • Normativas, Estándares, Orientaciones Nacionales. o (Servicios de Sangre, Bioseguridad) • Controles o Control de los procesos de toda la cadena transfusional. o Control de Calidad de los procedimientos. Garantía de Calidad UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Prevalencia de Sensibilización de Receptores • Riesgo: 1% por unidad transfundida (Issit). o o o o o Pacientes generales: 3% Politransfundidos: 35% Anemia Falciform: 35%. Talasémicos 10% >60% receptores crónicos (otra serie) • Puede ocurrir por transfusión, embarazo o aborto • 2ª exposición al mismo ag rápida respuesta imune destrucción g.rojos transfundidos. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Prevalencia de Inmunización • 3% - 8.4% receptores eventuales • Persistencia del Ac (26% a los 10 meses hasta años) o Anticuerpos Kidd: < tiempo de detección • Respuesta inmune en 7 dias o Anti-Jka en 4 dias • 1 – 2% de los potenciales receptores tendrán aloanticuerpos significativos diferentes a anti-D o 75% de dichos acs. con especificidad Rh o Kell. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Anticuerpos clínicamente significativos • Causan destrucción de los GR incompatibles • Cruzan la placenta y causan EHRN • Importante recordar que la unión de anticuerpos a los eritrocitos no les causa daño directo • Respuesta es heterogénea, depende de múltiples variables UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Factores que influencian la destrucción inmune de GR 1. Concentración plasmática y avidéz del Ac. 2. Rango térmico del Ac. 3. Clase y subclase de la inmunoglobulina 4. Densidad del Ag. en la membrana del GR 5. Volumen de eritrocitos transfundidos 6. Presencia de Ag en el plasma 7. Actividad del sistema fagocitario mononuclear 8. Sensibilidad de eritrocitos al complemento 9. Grado de activación del complemento UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Importancia clínica de los Alo Acs • Transfusión solo tomado en cuenta tipificación ABO y Rh: 98% de seguridad • Acs. siempre asociados a potenciales riesgos transfusionales: o ABO, Rh, Kell, Duffy, Kidd, SsU, Di, • Acs. a veces asociados a riesgo transfusional: o Lea , MN, P1, Lutheran (Lua, Lub), Cartwright ( Yta), Sda, Bg(HLA), Ge, Vel • Rara vez asociado a riesgo transfusional: o Leb, Chido/Rodgers, York (Yka), Sda, Xga, Bg, HTLA, Csa, Kna, JMH, Jra UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Inmunogenicidad relativa de antígenos eritrocitarios D> K> c> E> k> e> Fya > C> Jka > S> Jkb > s UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Test de Compatibilidad Pretransfusional • Serie de procesos y procedimientos cuyo objetivo final es asegurar el mejor resultado posible de una Transfusión sanguínea. Ausencia de RPTH • Su aplicación es para aumentar la seguridad transfusional, ya que no pueden garantizar una sobrevida normal de los GR transfundidos. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Elementos de la P de C 1. Indicación de Transfusión 2. Identificación del Receptor 1. En la muestra 2. En la solicitud 3. Del receptor 3. Análisis a realizar a la muestra del R 1. 2. 3. 4. 5. Características y condiciones de la muestra Grupo ABO y RhD Detección de Acs Irregulares Identificación de Anticuerpos Comparación con resultados previos 4. Selección de la unidad a transfundir 1. Confirmación ABO y RhD del Componente 5. Prueba Cruzada o Crossmatch 1. Serológico 2. Electrónico 6. Etiquetado de componente a transfundir Identificación del Receptor UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Dispositivos para mejorar identificación del paciente Vox Sanguinis (2006) 91, 97–101 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Identificación pre transfusional • Recordar: o La mayoría de las RPTH ocurren por una errada identificación del paciente o de la Unidad a transfundir • Cada SS debe: o Establecer e implementar el procedimiento para una identificación segura del paciente, muestra y producto • Puede ser solamente de lectura visual o visual y electrónica • Uso de N° único de identificación • Definir sistema de ID para pacientes inconscientes • Datos de ID en la muestra (EJ:código de barras) UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica La muestra • Correctamente tomada, etiquetada y apta para el análisis que se va a realizar. o Plasma (EDTA), Suero o Volumen o Carácterísticas: definir limitaciones y excepciones • Presencia de hemólisis visible • Presencia de lipemia • Presencia de un “buffy coat” anormalmente grande • Presencia de coágulos • Bajo volumen • Una razón célula:plasma, inesperadamente grande • Tiempo: UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Dos Modelos o Pctes transfundidos o embarazadas en los últimos 3 meses: NO MAS DE 3 DIAS al momento de la transfusión, para reflejar el estado inmunológico del paciente o Sin esta restricción para otro tipo de pacientes o Pctes sin historia clínica o transfusional demostrable, usar criterio de 3 días Paciente transfundido dentro de: La muestra se debe tomar no más de: 3 – 14 días 24 horas antes de la transfusión 15 – 28 días 72 horas antes de la transfusión 29 días - 3 meses 1 semana antes de la transfusión UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica ¿Cuánto tiempo guardar la muestra pretransfusional? • Almacenar por 7 días en refrigeración (AABB) • Otras referencias 3 días • Muestra del donante (tubuladura) UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Selección de la unidad a transfundir • ISOGRUPO • Aspecto o Hemólisis, contaminación, aire • Circuito cerrado o Indemnidad del equipo o No abierto • Días de almacenamiento, según condición del receptor • Tipo de paciente: Pediatrico, adulto… UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Componentes compatibles para transfusión 1ª opción: ISOGRUPO Grupo del receptor Plasma / GR crioprecipitad compatibles o compatible Plaquetas compatibles 1ª opción Plaquetas compatibles 2ª opción A A, AB A, O A, AB B, O B B, AB B, O B, AB A, O O O, A, B, AB O O A, B, AB AB AB AB, A, B, O AB A, B, O UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Tiempos de prueba estimado y riesgo de los diferentes métodos Procedimiento Tiempo que requiere, desde recepción de solicitud a término de pruebas compatibilidad (min) Riesgo de hemólisis, % Inmediata, sin pruebas 5 >5 Solo ABO y Rh D 5 a 10 2-5 Type and screen 30 a 45 < 0,1 Type and screen + prueba cruzada serológica 30 a 45 < 0,1 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Preparación de los hematíes de la tubuladura del componente • La principal dificultad reside en lograr la identificación segura de la tubuladura y del tubo secundario utilizado en el test, a partir del número en código de barra del producto: Recontrol ABO y RhD. • Preparación de los GR: lavado con PBS – resuspensión 5%. • Mantener circuito cerrado del componente por seguridad. Utilizar dispositivos limpios/ desechables para cortar la tubuladura. • Mantener la cadena de frío. 25 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Prueba Cruzada o Crossmatch • Es una investigación de anticuerpos irregulares (TAI) “personalizada”, se usan los GR del D y plasma del R. • Controla compatibilidad ABO entre R y D, de forma inmediata. • El plazo de validez de este análisis es de 72 horas. • Hay que disponer de: o POE, CC con aplicación y programa computacional para cada test o Reactivos aptos y suficientes o Equipos aptos y suficientes o Material apto y suficiente UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Ejecución técnica • La prueba cruzada se efectúa en iguales condiciones técnicas que el TAI, utilizando un suero AGH humana poliespecífico, con incubación a + 37°C. o Si reacción positiva >>> componente incompatible o Si reacción negativa >>> componente compatible • Pd ser en tubo o en gel. • Pd ser Manual o automatizada • Se puede usar LISS para disminuir tiempo de incubación y aumentar sensibilidad. 27 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Modalidades técnicas UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Método type and screen (Clasificación y Detección) • Realizar ABO, Rh D y TAI a todo potencial receptor de transfusión • Guardar la muestra para crossmatch por posible transfusión o En caso de TAI (-) Se transfunde componente isogrupo ABO / Rh D, con crossmatch salino. Muy rara vez se requiere transfusión tan urgente como para no hacer clasificación ABO / D toma 5 – 10 min. o Mantener un stock suficiente de GR para pacientes que se operan con esta modalidad. o En caso de TAI positivo identificar los anticuerpos, y PC completa o Si hay anticuerpos significativos, seleccionar unidades antígeno negativo. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Método type and screen (Clasificación y Detección) • Un type and screen es válido hasta por 72 horas (3 días), si el paciente no ha recibido una transfusión o no ha estado embarazada en los últimos 3 meses. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Uso de Prueba Cruzada completa • Obligatorio en : o Paciente que haya desarrollado un aloanticuerpo anti eritrocitario : TAI + o Recién nacido con un TAD positivo – uso de muestra de la madre. o Recién nacido cuya madre está aloinmunizada o Pacientes con AHAI • Recomendado en (puede usar T/S): o En pacientes no transfundidos o En pacientes con TAI negativo 31 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica MSBOS Maximum Surgical Blood Order Schedule • Definido por Comité Hospitalario de Transfusión. • Corresponde la lista de cirugías electivas más comunes, con el número máximo de unidades que deben estar disponibles para la operación. • Se recomienda para procedimientos que requieren poca sangre (menos de 0.5 unidades de glóbulos rojos/ paciente/ procedimiento). • Disminuye costos en PC • Disminuye reservas innecesarias de unidades • Preparar con T/S + PC salino el número específico de unidades requeridas de acuerdo al MSBOS. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Despacho electrónico Electronic cross match • Paciente con type and screen previo en 2 ocasiones. o Si ambos son negativos, está registrado en el sistema y no ha sido transfundido en ese periodo, se transfunde con componente ABO compatible elegido por computación y no se le hacen más pruebas. • Es muy rápido y ahorra tiempo. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Esquemas para Test Pretransfusionales AABB UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Casos complejos • Sueros conteniendo Acs. múltiples • Anticuerpos contra antígenos de alta frecuencia • Transfusión en AHAI “GR raros” es la unidad de componente sanguíneo negativo para los antígenos de alta frecuencia y mezcla de antígenos mas comunes. (AABB) Raro:< 1/5.000 Difícil manejo: <1/100 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Casos complejos Ac contra Ag de alta frecuencia • Difícil identificación • Difícil encontrar la GR compatibles Ac contra Ag de baja frecuencia • Algunas veces de difícil identificación • Fácil encontrar la GR compatibles Ac Múltiples • Algunas veces de difícil identificación • Muchas veces difícil encontrar GR compatibles UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Antígenos “raros” en panel de ID 39 UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica SELECCIÓN DEL MEJOR MÉTODO • Uso de metodologías sensibles o Deben ser tan buenas como el test de AGH con LISS (LISS-IAT) en el uso de rutina. (Gold Standard) o Entregar resultados reproducibles o Costo efectivas o No detectar Ac. sin importancia clínica (crioaglutininas) o Tubo, Gel, Microplacas, molecular, etc. • Automatización de procesos permite o Mejor utilización del tiempo, recursos humanos y económicos o Lectura objetivada UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Procedimiento para la validar técnicas inmunohematológicas • Lectura y análisis de insertos o Tubo, columna o microplaca • Sensibilidad: o o Usar un panel de Acs. débiles (no usar Acs. diluidos ya que tienen una alta afinidad por el Ag. y son fácilmente detectados). Si se puede cuantificar el anti-D, debe ser 0,1 - 0,2 iu/ml o 20 - 40 nanogramos/ml Enfrentarlos a un panel de GR heterocigotos para los Ags. Importantes • Validación de resultados negativos (tubo): o Usar GR sensibilizados con IgG (1+/2+) • Determinar la sensibilidad del test LISS-AGH: o Realizar tablero de ajedrez usando anti-D, anti-K y/o anti-Fya • Estudio de falsos positivos por AGH: o Realizar pruebas cruzadas usando suero fresco, permite detectar exceso de anti-C3d en el sistema. (métodos automatizados utilizan suero, anti-Jka y anti-Jkb se detectan por la presencia de un Ac. Anti-cadena liviana) UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Procedimiento para la validar técnicas inmunohematológicas • Estudio “rutinario” en paralelo (gran Nº de tests): o Conocer las fortalezas y debilidades del sistema en el trabajo diario del laboratorio o Determinar incidencia de reacciones falsas positivas y negativas. • Estudio del efecto de dosis: o Comparar reactividad de Acs. Débiles frente a GR homo y heterocigotos para varios Ags. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica CONCLUSIONES • NO EXISTE UN MÉTODO UNICO QUE SEA CAPAZ DE DETECTAR TODOS LOS ACS. DE IMPORTANCIA. o ELEGIRLO EN BASE A UN ANÁLISIS DE CALIDAD Y COSTO-BENEFICIO EN CADA INSTITUCION. o MUCHA DEDICACION Y TRABAJO • EDUCACION Y CAPACITACION DEL PERSONAL DEL SS Y DEL HOSPITAL • Indicación de la Transfusión • Pesquisa, manejo y estudio de RPT • Comité Hospitalario de Transfusiones UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Muchas Gracias UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica S.C.A.R.F. (Serum Cels and Rare Fluids Exchange Program) http://scarfex.jove.prohosting.con/ • Grupo internacional de serologistas y científicos. • Programa de intercambio de Sueros, Células y Fluídos Raros. • Inclusión del participante en el programa. • Los participantes pueden pedir sueros/ hematíes de interés directamente en la página del programa. • Los participantes deben enviar anualmente sueros y/o hematíes en la pagina del programa para los que puedan interesarse. UNIVERSIDAD DE CHILE Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica SCARF – Programa internacional de cambio de muestras
