1 2 el sentido empresarial de estas actividades, pues generan necesidad de estas biotecnologías; por lo tanto existe demanda de los productos como; semen críoconservado,embriones normales, embriones in vitro, embriones sexados, es decir productos de la biotecnología a la carta. Obvio, esto ha permitido el desarrollo de laboratorios, de grupos de especialistas, diseños de estrategias de productos de biotecnologías, patentes, capacitación; en general desarrollo de un país. Editorial BIOTECNOLOGÍA Y DESARROLLO PRODUCTIVO Las biotecnologías más usadas y que han impactado en el desarrollo han sido relevante en el mejoramiento genético; son la inseminación artificial y ovulación múltiple y transferencia de embriones (MOET),en los animales domésticos. Su impacto es decisivo en la producción de leche y carne tanto en la calidad como en la cantidad. El desarrollo de esta biotecnología en ganado elite es fundamental para la multiplicación rápida de animales mejorados y mejor antes genéticamente; Brasil es el país que lidera y domina las principales metodologías; gracias al impulso brindado por el sector político al área agropecuaria y sobre todo a que los ganaderos han entendido y desarrollado Conocer la realidad de la diversidad genética del país asociado con la industria pecuaria es de primordial importancia para la implementación de programas de biotecnología animal; pues sin contabilizar los recursos genéticos y la diversidad genética, la aplicación de la biotecnología seria limitada. En Ecuador el desarrollo de la biotecnología es incipiente; en especial por el costo porque la mayoría de insumos son importados, y claro está que no existe una retribución económica que justifique la inversión. Es decir que beneficio tengo de usar marcadores moleculares para la calidad de carne; si eso no se traduce en un mayor ingreso por los animales vendidos. Ecuador utiliza algún tipo de herramientas biotecnológicas en especies de interés económica; pero la realidad es que no existe aún líneas de investigación con apoyo; tanto en forma económica; como en el aspecto de organización científico, tecnológico que permita decir; hablar de un esquema claro y planificado de desarrollo de la biotecnología en la producción y reproducción animal. Francisco Caiza de la Cueva, Ph. D Gerente de Investigación PRODUBIOGENSA CIA. LTDA. 3 DIRECTORA EDITORIAL CRISTINA PINTO COORDINACIÓN TÉCNICA DR. RUBEN CAIZA COORDINACIÓN ÁREA GENETICA ING. VALERIA VIDAL COORDINACIÓN ÁREA DE SANIDAD DR. MAURICIO CHAVEZ COORDINACIÓN ÁREA NUTRICIONAL ING. DANIÉL ESCOBAR COMITÉ EDITORIAL INTERNACIONAL DR. RICARDO ALBEIRO ARGENTINA DR. GUSTAVO OZZA COLOMBIA DR. CARLOS FARINA ARGENTINA DR. JORDI MIRO ESPAÑA COMITÉ NACIONAL ING. DIEGO VELA (ESPE) Dra. Luz María Martínez (UTE) Ing. Diego vela (ESPE) Dr. Tito Muñoz (Universidad Nacional de Loja) Ing. Patricio Guevara (ESPOCH) Dra. Alexandra Burbano (Agrocalidad) Ing. Rómulo Guzmán (Cisas) Dr. Hernán Gavilanez (Asociación Charolaise) Sr. Luis Zambrano (Ganadero) DIRECTOR GENERAL FRANCISCO CAIZA M.Sc. Ph.D. COMERCIALIZACIÓN ING. FERNANDA SALAZAR FOTOGRAFÍA VARIOS AUTORES EDICIÓN SEMEN Y EMBRIONES IMPRESIÓN GRAFICAS LISETH (593 - 2) 2316-400 / 2316-696 TIRAJE 3.000 EJEMPLARES DIRECCIÓN Machachi, Calle Jaime Roldos Aguilera 02-79 y Av. Pablo Guarderas Urb. El Campo Telfs: (593 - 2) 2310-356 / 2316-395 Email: [email protected] [email protected] TODOS LOS DERECHOS RESERVADOS 4 ÍNDICE 5 9 MÉTODOS DE INOVULACIÓN (Continuación) INSEMINACIÓN ARTIFICIAL EN GANADO OVINO 14 NUEVOS AVANCES EN EL ESTUDIO DE LA BRUCELOSIS EN VENEZUELA 17 SÍNDROME DIARREA EN TERNEROS Y SU TRATAMIENTO 23 PREPARACIÓN DE SEMENTALES Y MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE SEMEN BOVINO 28 REPORTAJE HACIENDA GANADERA “MAET GENETICS” 29 30 33 PUBLIREPORTAJE AGROVLSOLUCIÓN 34 NOTICIAS VETERINARIAS NACIONALES 37 NORMAS PARA PUBLICAR UN ARTÍCULO CIENTÍFICO EN LA REVISTA SEMEN Y EMBRIONES NOTICIAS BIOGENSA 2013 NOTICIAS VETERINARIAS INTERNACIONALES MÉTODOS DE INOVULACIÓN VILLOTA, LEONCIO Universidad Tecnológica Equinoccial - Campus Santo Domingo, TEL. (593) 062 712 966 [email protected] Santo Domingo - Ecuador PRECAUCIONES IMPORTANTES El procedimiento de la transferencia no quirúrgica requiere destreza, bastante experiencia y particularmente mucho cuidado en la manipulación del catéter en el cuerpo y cuerno del útero. El trauma provocado en el endometrio, puede hacer que se liberen prostaglandinas. Estas pueden causar respuesta inflamatoria, disminución de los niveles de progesterona y aumento de la contractilidad uterina, que interfieren con la vida media del cuerpo lúteo y en consecuencia con la sobrevida del embrión. Con el aumento del tiempo de manipulación también se incrementa el efecto traumático de la trasferencia, cuando la maniobra de la transferencia dura más de 3 minutos (Gordon, 1976) o si es llevada a cabo con torpeza se provoca irritación del endometrio, que puede conducir a una disminución del éxito del éxito de la transferencia (BOLAND, 1976). TREVIT y col., (1980) observaron que la preñez tendió a ser afectada (P < 0.10) linealmente por el tiempo necesario para la transferencia entre 0.7 a 6.3 minutos con un promedio de 1.8 minutos. Aunque algunos autores sostienen que el cérvix no es susceptible a los efectos traumáticos (CUPIN, 1988), es conveniente no subestimar su insensibilidad con una brusca manipulación. Las lesiones pueden provocar la interrupción de la fase luteal con el acortamiento consiguiente del ciclo a menos de 16 días como consecuencia de la liberación de PGF2α (TERVIT, 1980). Un trauma mecánico puede provocar, además, ingreso bacteriano en el lumen uterino, causando endometritis subclínica favorecida por el nivel de progesterona de la fase de diestro, que interviene también con la vida del embrión. La receptora retorna al celo entre 24-39 días después de la transferencia. Por último la manipulación excesiva estresa a la receptora. Para evitar el efecto traumático de la manipulación sobre el endometrio se pusieron a prueba drogas para inducir la relajación de la musculatura lisa del útero (relajantes uterinos) y/o anestésicos locales. Los relajantes uterinos se emplearon por primera vez en la estación de inseminación artificial y transferencia de embriones de Neustadt an der Aisch, Alemania (HAHN y col. 1975) y son empleados en la actualidad por algunos grupos de trabajo (HAHN, 1990). Los resultados obtenidos por otros investigadores no apoyan los obtenidos por Hahn y col. (1975) y Hahn (1990). Por el contrario otros autores encontraron que el empleo de Clenbuterol (Planipart, Bohringer) no incrementó la tasa de las receptoras. Luego de la transferencia en las receptoras se controla el no retorno. A los 14 días post-transferencia puede extraerse una muestra de sangre para realizar un diagnóstico temprano de gestación, basado en la determinación de progesterona en plasma. Otra opción es efectuar ultrasonografía a partir del día 21 post-transferencia, momento en el que el diagnóstico se realiza con mayor precisión al poder comprobarse el latido cardiaco. Finalmente a los 60 días post-transferencia se confirma la gestación por medio de palpación transrectal. RESULTADOS ELSDEN, (1980) alcanza después del trasplante quirúrgico 55% de la preñez y después del trasplante conservativo 50% en promedio. (8). GONZÁLEZ, R. et al., (4) realizaron trasplante de embriones en ganado Brahman utilizando trasplante no quirúrgico y de 233 embriones trasplantados se obtuvieron 151 preñeces, que corresponden a una tasa de gestación del 64.8%. INSTRUMENTOS Los envases para los embriones y los instrumentos empleados en la transferencia son de diverso material y tamaño. En la actualidad los catéteres de transferencia están adaptados a las pajuelas de 0.25 ml y 13 cm de largo, que sirven como envases para los embriones. Los catéteres son metálicos o de material plástico. El catéter metálico es de acero inoxidable su punta a-traumática posee un orificio lateral, por donde es expulsado el embrión (Fig.2). La rigidez de este catéter permite introducirlo más fácilmente a través del cérvix de vaquillonas que los de plástico, porque actúa simultáneamente como dilatador. Los plásticos son más finos que los metálicos, debido a su flexibilidad y son de elección para la transferencia de embriones en vacas multíparas. Vienen envasados en forma individual, estériles y descartables. 5 Fig.7. Vaca con sus crías obtenidas durante un año. Hacienda “Santa Amalia”. Km 16 vía Santo Domingo – El Carmen Figura 2. Pistola de transferencia de embriones universal ILUSTRACIONES Figura N°3. Donadora. Cortesía Hacienda “Santa Amalia” MÉTODO QUIRÚRGICO TRASPLANTE DE EMBRIONES EN BOVINOS DEL CAMPO, M. R., (1) describe la transferencia quirúrgica utilizando laparatomía lateral, así: La receptora es colocada en un brete que permita posteriormente realizar la laparatomía lateral izquierda o derecha. Luego se procede a realizar un examen rectal de la receptora para constatar la presencia de cuerpo lúteo (EVANS y col., 1979; DEL CAMPO y col., 1976). Los preparativos de asepsia de la operación son similares a cualquier intervención quirúrgica (corte de pelo en el área, lavado y desinfección). Figura N° 4. Embriones. Cortesía Hacienda “Santa Amalia” Fig. N° 5. Receptora. Cortesía Hacienda “Santa Amalia” Fig.6. Descendencia valiosa. Hacienda “Santa Amalia” 6 Una vez hecho esto, se procede a inyectar anestesia local (xilocaína al 2%) por infiltración, se incide la piel y las capas de tejido. Se realiza una incisión paralela a la última costilla, de no más de 10 cm, en el lado adyacente del ovario que posee el cuerpo lúteo, lo más posterior que sea posible (aproximadamente a una mano de distancia de las apófisis de las vértebras lumbares y a una mano del borde de la última costilla). Ver figura 9. Fig. 8. Esquema de una laparatomía lateral en bovinos El músculo oblicuo abdominal interno y el músculo recto son separados con los dedos o una pinza roma. Luego se introduce una mano a la cavidad abdominal y se procede a identificar nuevamente el cuerpo lúteo palpando los ovarios directamente o visualizándolo a través de la incisión si es posible. Después se exterioriza el cuerno adyacente al cuerpo lúteo traccionando el ligamento ancho a la altura del tercio distal de éste. Para una mejor sujeción del cuerno se usan compresas de gasa entre los dedos pulgar e índice. Luego el cuerno es puncionado aproximadamente a 5–8 cm. de la unión útero–tubárica con la parte roma de una aguja de sutura o estilete pequeño hasta alcanzar el lumen. Inmediatamente después el embrión, es depositado en el lumen uterino usando una cánula de plástico o una pipeta Pasteur, la que ha sido cargada previamente con el embrión de tal forma que éste se ubique entre 2 espacios de aire y medio de cultivo. Posteriormente la cánula es retirada lentamente y el cuerno es devuelto a la cavidad abdominal. Luego la herida operatoria es suturada. TRASPLANTE DE EMBRIONES EN OVINOS GIBBONS, A. E., Y CUETO, M.I. (2), en transferencia de embriones en ovinos, utilizaron las técnicas de siembra quirúrgica, bajo control endoscópico y semiendoscópico. Esta última es más rápida, se emplea el laparoscopio para localizar el cuerno uterino y la siembra se realiza en el exterior de la cavidad abdominal. Indican que la transferencia se realiza en el tercio superior del cuerno uterino, próximo a la unión úterotubárica. Es recomendable realizar una observación laparoscópica de los ovarios para determinar si el desarrollo del cuerpo lúteo se corresponde con el día del ciclo estral y rechazar las receptoras con quistes foliculares. Sin embargo, este método implica la exteriorización del tracto reproductivo, y esto a menudo conduce a un cierto grado de trauma quirúrgico y formación de adherencias postoperatorias (NELLENSCHULTE Y NIEMANN, 1992). Ver figura 10. Figura 9. Trasplante embrionario por laparotomía En la década de 1980, los embriones de la especie ovina eran transferidos por laparoscopía, un procedimiento que, en relación a laparotomía, es rápido, barato, y menos probable que pueda provocar la formación de adherencias (MCKELVEY y ROBINSON, 1984; MUTIGA y BAKER, 1984; SCHIEWE et al., 1984., MCKELVEY et al., 1985). Este método ha sido ampliamente aceptado y desarrollado por otros investigadores (NELLENSCHULTE Y NIEMANN, 1992; SILVA et al, 2003). Hasta la fecha, métodos no quirúrgicos de transferencia de embriones en ovejas no han sido suficientemente exitosos debido a la anatomía específica del cuello uterino de la especie ovina (HALBERT et al., 1990). Para LI, Q. Y., GUAN, H., AN, X. R. AND CHEN, Y. F., 2006, la transferencia convencional de embriones en ovinos ha sido realizada por laparotomía media ventral, y este procedimiento sigue siendo utilizado en todo el mundo. Sin embargo, consideran que se hace necesario un método fiable, rápido y simple para la transferencia de embriones, sobre todo, en algunos países en desarrollo cuya ubicación geográfica pueda limitar el acceso a conocimientos técnicos e instalaciones. Con el objeto de solucionar los problemas antes descritos, investigaron un método simplificado de trasplante de embriones en ovejas sobre la base de los métodos de laparotomía y laparoscopía. Este nuevo enfoque pretende eliminar las desventajas convencionales de cirugía (tiempo largo de operación, más de un traumatismo en ovejas receptoras, la formación de adherencias) y métodos de transferencia laparoscópica (endoscopio caros y asociados a instalaciones). El estudio se realizó en mayo de 2006. Todas las 99 ovejas receptoras utilizadas fueron cruzados (Mongolia × Merino) y tratadas al mismo tiempo. Las ovejas estaban sanas y se mantuvieron en una granja en condiciones naturales durante el día. La Alimentación consistió de 70% heno de alfalfa y 30% de paja de maíz suplementado con 400 g de concentrado comercial por día por oveja. Los animales tenían acceso libre al agua. Las ovejas fueron de 2,1 ± 0,2 años de edad, y la media de peso corporal fue 55 ± 2,4 kg. Las ovejas receptoras fueron tratados con los dispositivos de control de liberación de fármacos (CIDR de 0,3 g de progesterona,) durante 12 días, así como la aplicación (I.M.) de PMSG (400 UI por oveja; Pregnecol) en el momento de la retirada CIDR. Rams, equipado con arneses y lápices de colores, fueron introducidos en el rebaño las 24 h tras la administración de Prostaglandina sérica de yegua preñada (PMSG). La aparición del estro se registró cada 12 h. Aproximadamente 6,5 días después (d=0 día del estro), cada oveja recibió embriones congelados por uno de los tres métodos de transferencia (laparotomía convencional, laparoscopia o minilaparotomía. Una breve descripción de cada uno de los procesos de trasplante desarrollados por los antes mencionados autores, se describe a continuación: Transferencia de embriones por laparotomía La transferencia de embriones por laparotomía se llevó a cabo bajo anestesia general, I.V. Cada oveja receptora se fijó en una cuna de la cirugía en un ángulo de 45 grados. En el área del abdomen, la superficie anterior a la ubre, se afeitó y desinfectó completamente. En la transferencia quirúrgica convencional, una incisión de unos 5 cm de longitud se realizó sobre la pared abdominal a aproximadamente 8 cm por delante de la ubre. Un cuerno uterino fue sujetado entre el índice y dedo medio, y por las vías se exteriorizó para facilitar el conteo de cuerpos lúteos (CL). El útero adyacente a la unión úterotubárica fue punzado con una aguja roma de calibre 18 en un sitio fuera de los vasos sanguíneos visibles. Cada embrión se suspendió en 0,1 ml de medio en una pipeta de vidrio siliconado adjunta a una jeringa de 1 ml y luego colocados con cuidado en el lumen uterino. En la retirada, la pipeta fue inspeccionada para asegurar que el embrión había sido expulsado. El cuerno uterino se re-posicionó en la cavidad del abdomen, y la incisión se cierra con dos líneas de sutura (Incluyendo la pared abdominal y la piel). Transferencia de embriones por laparoscopía Para la transferencia laparoscópica, cada receptora anestesiada se fijó como se describe anteriormente y dos incisiones de aproximadamente 2 cm se hicieron a ambos lado de la línea media anterior, a unos de 8 cm a 10 a la ubre. El endoscopio se inserta directamente en la cavidad abdominal a través de una incisión y el fórceps para agarrar el útero, se inserta a través de la segunda incisión. Los ovarios se encontraron con las pinzas, y el número de cuerpos lúteos (CL) se contó. Un cuerno uterino ipsilateral al ovario que contenga al menos un CL, se agarró firmemente en la punta y fue exteriorizado mediante la pinza de agarre hacia fuera de la cavidad abdominal. 7 El embrión fue transferido a la cavidad uterina de una manera similar a la descrita anteriormente. El cuerno uterino suavemente se regresó a la cavidad abdominal, y cada incisión se cerró con una sutura simple. Transferencia de embriones por mini-laparotomía Para la transferencia de embriones utilizando la mini-laparotomía, método simplificado, la oveja receptora fue restringida y 2 incisiones, similares a los descritos para la transferencia por laparoscopia, se hicieron. La distancia entre las heridas fue de unos 10 cm. El dedo índice de la mano izquierda se inserta en la cavidad abdominal a través de la incisión de la izquierda y el dedo índice de la derecha la mano se introdujo de manera similar en el lado derecho de la cavidad. En primer lugar, se toma un cuerno uterino y se coloca contra la pared abdominal. En segundo lugar, se encuentran los dos ovarios moviendo los dedos a lo largo del cuerno uterino, y el número de CL se contó entonces con el tacto. Si es necesario, también se exterioriza los ovarios empujándose hasta el punto de incisión pertinente (Figura 11). Figura 11. Diagrama de la técnica de mini-laparotomía para transferencia de embriones en ovinos. En tercer lugar, una asa de cuerno uterino se exteriorizó empujándola a la incisión más cercana, y el embrión fue transferido de la misma manera como se describe para la transferencia laparoscópica. Después de la transferencia, todos los beneficiarios recibieron (IM) 800.000 UI de la penicilina y 1.000.000 UI de estreptomicina. Tasa de Preñez de las Receptoras El estado de preñez se determinó 8 por ecografía de barrido que se llevó a cabo aproximadamente 12 semanas después el momento de la transferencia de embriones. Los porcentajes de ovejas gestantes para la técnica de laparotomía convencional, la técnica laparoscópica, y la técnica de mini-laparotomía simplificada fueron 38,9% (14/36), 47,6% (10/21), y 45,5% (15/33), respectivamente. Discusión El propósito de esta investigación fue desarrollar un método sencillo y de bajo costo para la transferencia de embriones a gran escala en el sector ovino de China. China es un país con más de 100 millones de ovejas, y existe un importante potencial para mejorar la condición genética del rebaño nacional a través de la transferencia de embriones. La técnica de mini-laparotomía resultó ser tan buena como las otras dos técnicas, y dada la sencillez del procedimiento, es nuestro método preferido para la transferencia de embriones Combina todas las ventajas de la transferencia por laparotomía y por laparoscopia, así como evita las desventajas de estas dos técnicas. Sólo dos incisiones punzantes se requieren, y cada una puede ser cerrada con una única sutura. “En nuestras manos, equipo costoso no es necesario, el procedimiento es relativamente rápido, y el daño a los animales se reduce a un mínimo debido al menor tiempo de manipulación y realizar solo una pequeña herida. Los resultados demuestran que este método de transferencia simplificada es una excelente técnica, y su aplicación sería de particular valor en Mongolia, donde el suministro de electricidad puede ser un problema”. CONSIDERACIONES FINALES Es importante tener en cuenta que la manipulación del cuerno uterino deberá hacerse con sumo cuidado. El componente psicológico de éxito o fracaso establece una presión considerable sobre el operador principiante y en consecuencia puede actuar negativamente sobre las posibilidades de éxito. Una medida preventiva es realizar las transferencias sólo si existen buenas condiciones para ello. Particularmente tranquilidad de los animales (uso de tranquilizantes si fuera necesario) y una buena anestesia epidural. Estas medidas son más importantes si se trabaja con animales nerviosos y/o indóciles. BIBLIOGRAFÍA: 1. DEL CAMPO, M. R. 1984. Transferencia de embriones en bovinos: Métodos y técnicas. Monografías de Medicina Veterinaria. Universidad Austral de Chile. En: www. monografiasveterinarias.uchile. 2. GIBBONS, A. E. Y CUETO, M. I. 1995. Transferencia de embriones en ovinos y caprinos. INTA EEA. Bariloche. Argentina. 3. GONZÁLEZ, F. R. Trasplante de embriones. Venezolana de Inseminación Artificial y Trasplante de Embriones. En: www.avpa.ula. ve. 4. GONZÁLEZ, R., VELARDE, J. C., ONDIZ, A., MONTIEL, M., Y RAMÍREZ, A. 1994. Trasplante de embriones en ganado Brahman en Venezuela. Venezolana de Inseminación Artificial y Trasplante de embriones C. A. Maracaibo. Venezuela. En: www.revistas. luz.edu.ec. 5. HERNÁNDEZ, F. H. Fecundación in vitro. Universidad de Zulia. Maracaibo. Venezuela. En: www.avpa.ula.ve. 6. HAFEZ, E. S. 1996. Reproducción e inseminación artificial en animales. Sexta edición. México. 7. HOLY, L. 1986. Bases biológicas de la reproducción bovina. Editorial Diana. México. 8. LI, Q. Y., GUAN, H., AN, X. R. AND CHEN, Y. F. 2008. Transfer of ovine embryos through a simplified minilaparotomy technique. J. Anim. Sci. 2008.86:3224-3227. 9. PALMA, G. A. 2008. Biotecnología de la reproducción. Segunda edición. Córdoba. Argentina. INSEMINACIÓN ARTIFICIAL EN GANADO OVINO MANES, JEORGELINNA • Departamento de Producción Animal INTA – Balcarce – Argentina; [email protected] Introducción La inseminación artificial es una de las biotécnicas reproductivas más importantes y de mayor aplicación que se ha desarrollado para el mejoramiento genético de tos animales. Consiste en depositar el semen del macho, colectado previamente, en el tracto reproductivo de la hembra por medios no naturales, para producir la fecundación de los óvulos maduros. Permite al combinar la IA con la sincronización de los celos, la programación de tos servicios y tos partos, facilitando el manejo de las majadas y ajustar la venta de corderos en forma no estacional. • Reduce el riesgo de diseminación de enfermedades de transmisión sexual. • Permite diagnosticar posibles problemas de fertilidad. Por medio de esta técnica es posible obtener un mayor número de crías de un soto macho, dividiendo el semen de un eyaculado en una importante cantidad de dosis, para inseminar con él varias hembras simultáneamente. Esto último permite aprovechar el potencial de los machos con características mejoradoras de manera intensiva (un carnero en monta natural puede servir 25-30 hembras, mientras que en un programa de IA puede cubrir mas de 100). Las ventajas en el uso de la inseminación artificial son: • Mejora genética tiempo. en corto • Reducción del número de cameros en la explotación. • Conservación sencilla y prolongada del semen, permitiendo la incorporación de material seminal de machos de lugares lejanos. 9 La posibilidad de congelar el semen (criopreservación) favorece la mayor difusión de genes de machos seleccionados, ofreciendo un mayor campo de acción a la IA. No obstante, el éxito de estas técnicas depende de varios factores entre los que se destaca, en el caso del ovino, la compleja anatomía del útero de la oveja. De celo y en el parto. Su conducto presenta bordes transversales o espirales llamados anillos, que en la oveja presentan un gran desarrollo dificultando el acceso al cuerpo del útero durante la inseminación, ya que se disponen de manera desalineada (Fig. 1). Figura 1. Cuello uterino (abierto) de una oveja. Nótense los pliegues anulares del cérvix. La vagina es el órgano para la cópula de la hembra y es donde el macho deposita el semen. Tiene forma de tubo y sus paredes son delgadas y completamente elásticas; mide aproximadamente 15 cm de largo y se comunica al e tenor con la vulva. Aunque la vagina no contiene glándulas, sus paredes están lubricadas por trasudados de la mucosa, moco cervical y secreciones del endometrio uterino. La vulva es la porción e-.tema de los genitales de la hembra, que se extiende desde la vagina hasta el e tenor. En la unión de la vagina y la vulva se encuentra el orificio uretral externo (salida de 10 la orina), tapado por un pliegue (vestigio del himen). La comisura ventral de la vulva abriga el clítoris. Es importante conocer estas estructuras anatómicas para no provocar lesiones al aplicar los dispositivos para sincronizar el celo o al introducir en vulva el vaginoscopio para inseminar. Anatomía y Fisiología de la Hembra Ovina Un conocimiento básico de la anatomía del tracto reproductivo y de la fisiología de la hembra ovina, nos facilitará la comprensión de los próximos temas que se desarrollarán en este curso. Anatomía Reproductiva Los órganos del aparato reproductor femenino son ovarios, oviductos, útero, vagina y los genitales los (vulva). Los ovarios son tos órganos esenciales para la reproducción en la hembra. Son dos glándulas ovales, pequeñas, que están situadas dentro de la cavidad pelviana. Tiene una doble función: exocrina (liberación del óvulo que serán fecundados por tos espermatozoides) y endocrina sintetiza hormonas que son volcadas a la sangre (estrógeno y progesterona). En el ovario pueden encontrarse dos estructuras fundamentales: el folículo (que contiene en su interior al óvulo) y el cuerpo lúteo (CL). Este último se desarrolla después del colapso del folículo en la ovulación y es la estructura ovárica productora de la hormona progesterona, principal responsable de la gestación. Los oviductos o trompas de Falopio, son conductos sinuosos que, a cada lado, llevan el óvulo del ovario al cuerno respectivo del útero. Dentro de tos oviductos se produce la fecundación (unión óvulo-espermatozoide) y las primeras divisiones del embrión. El oviducto se divide en tres sectores: infundíbulo, ampolla e istmo. El útero es un órgano hueco, que conecta los oviductos con la vagina. Consta de cuerpo, cuello y dos cuernos. Sus funciones principales son: 1) favorecer el desarrollo del embrión y el feto, beneficiando su nutrición durante la gestación, 2) transportar los espermatozoides del sitio de eyaculación al sitio de fecundación y 3) regulación de la función del CL. Consta de tres partes: cuernos, cuerpo y cuello o cérvix. Los cuernos representan el 80 o 90% de la longitud total del útero. El cuerpo uterino es esta especie es muy pequeño 1-2 cm y conecta tos cuernos con el cérvix. El cuello uterino o cérvix es una estructura de tipo esfínter que se proyecta en sentido caudal hacia dentro de la vagina. Es un órgano fibroso, de pared gruesa y una luz constreñida. También puede ser calificado como un robusto esfínter que se encuentra firmemente cerrado excepto en el periodo Fisiología Reproductiva La oveja, al igual que la cabra, es un animal poliéstrico estacional. Es decir que presenta varios ciclos sexuales (estros o celos) restringidos a una estación del año, denominada estación reproductiva o sexual y el resto del año permanece en reposo sexual (anestro). La mayor actividad reproductiva se presenta en el periodo otoño-primaveral, estimulada por el acortamiento del período diario de luz solar (reproductora de días cortos). Es decir, el factor desencadenante de estos ciclos o periodos de reproducción, es la disminución de la cantidad de horas de luz del día. La luz es captada por la retina y a través del sistema nervioso central (SNC) llega a la glándula pineal, la cual segrega melatonina. hormona que es más abundante en sangre en los períodos de oscuridad (noche), informando al SNC la duración en horas del día y en consecuencia la estación del año. Estudios realizados en la raza Mermo, por el grupo de Reproducción del INTA Bariloche, demostraron que entre el 95 y 100% de las ovejas se encuentra ciclando entre los meses de marzo y julio, disminuyendo a valores de alrededor del 60% entre agosto y febrero. Tanto el momento en que se presenta como la duración de la estación reproductiva es característica de cada raza y del lugar donde se establece. Aquellos genotipos que se desarrollan en la región ecuatorial, sujetos a menores variaciones en el fotoperiodo, responden más a factores ambientales como temperatura y disponibilidad de alimento, por lo que pueden tener menor restricción estacional que aquellos que se establecen en zonas templadas, lejanas al ecuador. En estos casos, como se mencionó previamente, el principal condicionante es la variación de luz-oscuridad. Este comportamiento, es una adaptación filogénica para asegurar que las crías nazcan en un periodo adecuado del año y así resguardar su supervivencia. En el caso de la oveja la “estación reproductiva» confiere la posibilidad de que la mayor cantidad de partos se concentre en la primavera, siendo esta la estación más favorable para la madre y su cría por las ventajas en la alimentación y el clima, facilitando las mejores condiciones para sobrellevar la lactación (Forsberg, 2002). trabajo que requiere la detección de celo (encierre diario cada 12 horas bajo diferentes condiciones climáticas). Mediante técnicas de inducción del estro y de la ovulación en hembras en anestro (animales que se encuentran en estación no reproductiva) y sincronización del celo y la ovulación en hembras cíclicas, es posible evitar los encierres para detección de celo reduciendo el periodo de servicios, sincronizando paralelamente los partos. Fase Lútea Luego de la ovulación, la cavidad dejada por la rotura del folículo comienza a reorganizarse para dar origen a la estructura que caracteriza esta fase: el cuerpo lúteo (o cuerpo amarillo). Es una glándula que libera progesterona a la circulación sanguínea, evitando la nueva evolución de folículos y, por consiguiente, la aparición intempestiva de otro periodo estral, ya que el estro no ocurre en tanto está presente y activo el CL. La progesterona producida prepara al útero para la anidación del embrión. Los niveles de esta hormona aumentan desde la ovulación hasta el sexo día y luego se mantienen constantes durante toda la gestación. Si el óvulo no es fecundado y no ocurre la gestación, se produce la liberación por parte del útero de otra hormona denominada prostaglandina F2a que provoca la involución del CL (luteólisis). La involución del CL va seguida de nuevas cantidades de folículos que crecen. 1. Métodos Farmacológicos Control Artificial dé le Conducto dé Estro La incapacidad de predecir el momento del estro o celo en las hembras individuales en un grupo, con frecuencia hace poco práctico el uso de la IA porque es mucho el Es indispensable que las hembras a sincronizar se encuentren en buenas condiciones de salud, nutrición y libre de parásitos. A diferencia de lo observado en bovinos, 6 a 8 semanas antes de realizar la IA, se debe realizar el destete de los corderos. Los métodos que se aplican para controlar el estro pueden ser divididos en: métodos farmacológicos y naturales. Tienen la ventaja de concentrar un alto porcentaje de celos en un período corto de tiempo, lo que facilita la programación y realización de trabajos de I a. los dos más utilizados son: • • Sincronización de celo con esponjas o dispositivos con progestágenos Prostaglandinas sintéticas 1.2. Esponjas o dispositivos con progestágenos Simulan la acción de un cuerpo lúteo mediante la liberación lenta de su contenido de progesterona sintética o progestágeno. Los tratamientos con estos dispositivos intravaginales tienen una duración de 12-14 días, período que iguala o e-cede el tiempo de vida media del cuerpo lúteo. Estos tratamientos permiten obtener una alta concentración de celos, facilitando la inseminación artificial a tiempo fijo luego de finalizado el tratamiento hormonal. Un porcentaje variable de hembras no responden al tratamiento o no presentan ovulación en forma sincronizada con el resto. Para contrarrestar este efecto, se aconseja la utilización de progesterona combinada con una dosis de Gonadotrofina de Suero de Yegua Preñada (PMSG). La PMSG se administra por inyección intramuscular al momento de retirar las esponjas, en estación reproductiva; o 48 horas antes del retiro en anestro estacional. La PMSG provoca un pico importante de estrógenos, induciendo la aparición de un pico de LH y la ovulación, al mismo tiempo mejora la sincronización de los celos. Las dosis recomendadas varían entre 200 y 400 UI, dependiendo fundamentalmente del peso corporal, de la raza y de la época del año, aconsejándose probar en principio la dosis menor. Dosis elevadas de PMSG ocasionan ovulaciones y gestaciones múltiples, generando altas pérdidas de animales por toxemia de la preñez. Entre 24 y 72 horas post-retiro de las esponjas y aplicación de PMSG, se presenta un 85-95% de las ovejas en celo, alcanzándose la mayor concentración de estros entre las 34 y 48 horas (figura 1) Ciclo Estral Es el intervalo entre el comienzo de un periodo de celo hasta el inicio del siguiente, que se presenta en la oveja a intervalos regulares de 17± i días hasta quedar preñada, durante la estación reproductiva. El estro o celo dura en promedio 30 horas (en ovejas adultas 24-42 y en borregas 24-32). La ovulación ocurre al final del estro, y suele haber 2 o 3 ovulaciones en el mismo período estrual. La oveja es de ovulación espontánea. El ciclo estral se puede dividir en 2 fases: Fase Folicular y Fase Luteal. La fase folicular es relativamente corta (3-4 días), mientras que la fase luteal ocupa el resto del ciclo (14 días). Fase folicular Durante esta fase se lleva a cabo el crecimiento folicular, el que es regulado por 2 hormonas, ambas gonadotrofinas hipofisiarias, que ejercen su acción en el ovario. Estas son la llamada hormona folículo estimulante (FSH) y hormona luteinizante (LH). La FSH estimula el crecimiento temprano 11 de los folículos y la LH contribuye con el crecimiento final del folículo necesario para lograr la ovulación. El folículo estimulado por estas hormonas sintetiza y libera estrógenos (E) a la sangre. Cuando el nivel de E es suficientemente alto, 18-24 horas después de comenzado el estro, se produce un pico de LH, que provoca la ruptura del folículo y la liberación del óvulo (ovulación). Los estrógenos liberados en esta fase inducen el comportamiento asociado con el estro y los cambios anatómicos (enrojecimiento vulvar, secreción de mucus vaginal). Los signos externos de celo así como los cambios en el comportamiento (monta a otras hembras, “se deja montar”) no son muy marcados en esta especie. Al comienzo de la estación reproductiva, las ovejas presentan generalmente una primera ovulación que no va acompañada por manifestación externa del celo (comúnmente llamado celo silente). Esto se debe a la ausencia de progesterona proveniente de un CL del ciclo anterior. Es decir, es necesaria una exposición a progesterona en el ciclo previo (priming) para que exista comportamiento estral. Figura 1: Distribución de celos en ovejas tratadas durante 14 días con dispositivos intravaginales Colocación y retiro de las esponjas y otros dispositivos: 1. Previo a la colocación de las esponjas, sólo en este caso, es conveniente realizar el rociado de las esponjas con un antibiótico en polvo, aerosol o inyectándolo en las mismas. 2. Al colocar tos dispositivos en los aplicadores es importante cuidar que el hilo cuelgue hacia afuera. 3. El vástago se coloca dentro del aplicador por el extremo libre hasta que haga contacto con la esponja. 4. El aplicador se desinfecta y puede ser humedecido externamente con vaselina. 5. Para facilitar la maniobra de colocación de la esponja es conveniente que la hembra este parada en su posición natural. 6. Realizar la limpieza de la vulva con papel o esponja húmeda si es necesario. 7. El aplicador y el vástago son introducidos suavemente hasta el fondo de la vagina. 8. El tubo aplicador se retira unos 3-4 cm manteniendo el vástago en su sitio, hasta liberar la esponja. Número de animales Distribución de celos en Tratamiento de 14 días de duración 30 25 20 15 10 5 0 10 24 34 48 58 72 8 2 horas desde el retiro del dispositivo 12 Colocación de dispositivos Retiro de dispositivo 1.3. Prostaglandinas Simulan la acción de la prostaglandina F2 alfa, hormona proteica responsable de la lisis del cuerpo lúteo, liberada naturalmente por el útero en los casos en los que la hembra después de la ovulación y el servicio no queda preñada. Debido a ello, sólo se utiliza en estación reproductiva. Los celos después de la aplicación de esta hormona, se producen de manera dispersa, por lo que la inseminación debe realizarse previa detección de celo. Las prostaglandinas inducen la regresión del cuerpo lúteo entre los días 5 y 14 del ciclo estral en ovejas. El celo se manifiesta entre las 48 y 84 horas de aplicada la inyección. Las ovejas que se encuentran entre los días 15 y 17 del ciclo, manifiestan luteólisis natural que corresponde con el momento del ciclo y el celo se presentará dentro del mismo intervalo. Por otro lado, las hembras que se encuentran entre los días O y 4 son refractarias a la prostaglandinas y entrarán en celo entre 13 y 17 días más tarde. Por ello, la aplicación de una dosis de prostaglandina logra concentrar el celo en el 60-70% de las hembras. Los celos inducidos con esta metodología presentan una fertilidad reducida, por lo que se aconseja inseminar en el segundo celo (celo natural), comenzando la detección a partir del día 16 pos aplicación de prostaglandina, durante un período de 5 días en los que se concentrarán. La dosis utilizada en ovejas varia entre 50 y 75 µg, según peso, raza y categoría (borrega, oveja adulta), etc. 2. Métodos Naturales 2.1 Melatonina: La melatonina es secretada durante las horas de oscuridad, y el acortamiento o alargamiento del tiempo de secreción determina un cambio en la sensibilidad del eje hipotálamohipófisis a los estrógenos. El conocimiento de este mecanismo permitió desarrollar técnica para adelantar el reinicio de la actividad sexual cíclica en las hembras en anestro estacional. De esta forma, la estación reproductiva puede ser adelantada 4 ó 5 semanas en ovejas a través del uso de implantes de melatonina, pero su aplicación masiva se ve limitada por el alto costo del tratamiento. Efecto Macho: El inicio 2.2 de la estación reproductiva puede ser adelantado a través de la introducción de cameros a una majada que se encontraba aislada (30-40 días) de tos mismos. Este estimulo se conoce como "efecto macho". Provoca una variable concentración de los celos, por lo que no es recomendable su aplicación para realizar inseminación artificial a tiempo fijo. Se utilizan machos jóvenes vasectomizados (4%), no borregos y en buen estado sanitario y nutricional. Esta alternativa es una herramienta útil y adecuada para la inducción del celo fuera de temporada, sobre todo porque su costo es muy bajo. La introducción de tos cameros induce en las ovejas un inmediato incremento en la secreción pulsátil de LH que finaliza con un pico de LH seguido por la ovulación. La efectividad del efecto macho depende de la intensidad del estimulo y del estatus fisiológico de la oveja. deferente, cordón espermático, pene) y glándulas anexas (vesículas seminales, glándulas bulbouretrales, glándulas uretrales y próstata). Los testículos son dos glándulas ovales situadas en la región inguinal, dentro de una bolsa denominada escroto. La función de ésta bolsa es proporcionar a los testículos una temperatura inferior (2° a 3° C menor) que la de la cavidad abdominal, lo que favorece el desarrollo normal de la espermatogénesis. Los testículos pueden medir de 10 a 15 cm de largo y pesar aproximadamente 300 gr/cada uno. Su principal función es producir un número elevadísimo de espermatozoides, elaborando a su vez, la hormona de la masculinidad (testosterona). El epidídimo es un conducto flexuoso adosado íntimamente al testículo. La primera parte, se ubica en el borde superior del testículo, es la cabeza, que recibe los conductos eferentes del testículo. Continúa el cuerpo, prolongación delgada que recorre la cara interna del testículo, desemboca en un ensanchamiento conocido como cola, lugar donde se almacenan los espermatozoides que ya culminaron su maduración. En el trayecto de los epidídimos se realiza la maduración y almacenamiento de los espermatozoides, los que son suspendidos, nutridos y vehiculizados por las secreciones de los deferentes, glándulas anexas y epidídimos. El conducto deferente es un tubo largo que transporta los espermatozoides de los testículos a la uretra. Se ubica a lo largo de la cara interna de los testículos, originándose en la cola de los epidídimos. Constituye parte del cordón testicular o binza. El conocimiento anatómico del conducto deferente es de primordial importancia para la operación de la vasectomía, que consiste en la amputación de un trozo del mismo, y se logran así los carneros retajos, que identifican las ovejas en celo. El cordón espermático o binza por el músculo cremaster (retractor del testículo), el conducto deferente y las arterias, venas, linfáticos y nervios del testículo. El cordón espermático comienza en el anillo inguinal y termina en el testículo. El pene esta constituido por tejido eréctil y especialmente adaptado para depositar el semen dentro de la vagina de la hembra. Está recorrido por la uretra, que termina 3 ó 4 cm más allá del glande, formando una prolongación (prolongación uretral). En este especie, el pene presenta una flexura denominada sigmoidea que permite que se retraiga dentro del cuerpo y no se observe por fuera del cuerpo cuando el animal está en reposo. Las glándulas anexas son un conjunto de glándulas cuya secreción forma parte del eyaculado, constituyendo el plasma seminal en el que los espermatozoides son movilizados, aportando una fuente de energía y evitando cambios de pH que pueden afectar negativamente a los gametos masculinos. La próstata está ubicada detrás de la vejiga; las bulbouretrales, por delante del músculo uretral; las uretrales y las vesículas seminales, que constituyen una dilatación del conducto deferente. Entre el 40 y 100% de las ovejas en anestro estacional responde ante la presencia de los machos, presentando 2 periodos de celos concentrados, a partir del día 18 y 24 posterior a la introducción de tos machos. Anatomía y Fisiología Reproductiva del Carnero Anatomía Reproductiva Los órganos del aparato reproductor del macho son testículos, vías espermáticas (epidídimo, conducto 13 NUEVOS AVANCES EN EL ESTUDIO DE LA BRUCELOSIS EN VENEZUELA VARGAS, FRANCISCO Departamento de Medicina y Cirugía. Decanato de Ciencias Veterinarias Universidad; Centroccidental Lisandro Alvarado (UCLA). Tarabana, Estado Lara 3023, Venezuela. [email protected] En Venezuela la brucelosis continúa siendo un importante problema tanto de salud pública como animal. El biogrupo más importante en el país es Brucella abortus biovar 1, que se ha identificado como causante de la enfermedad en bovinos, caracterizado en esta especie por producir abortos durante el último tercio de la gestación, infertilidad en hembras, nacimiento de crías débiles y orquitis en toros, siendo transmisible a humanos ocupacionalmente expuestos (Vargas, 2002). Situación actual En el año 2003, entró en vigencia una nueva resolución (Gaceta oficial 37773, 2003), que cambió la prueba de diagnóstico oficial de campo de Aglutinación en Placa por la prueba de Rosa de Bengala. A partir de ese año (2003), cuando se pone en marcha la nueva resolución, se produce un incremento importante en el número de cero diagnósticos realizados en Venezuela, llegando a quintuplicar 14 el número de diagnósticos que se venían realizando habitualmente en años anteriores, lo que produjo a su vez un incremento en el índice de positividad que pasó de 0.7% en 1999 a 1.5% en 2006 para luego disminuir en los últimos años. En el año 2007, el laboratorio de bacteriología del Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas (INIA, CENIAP) reportó un incremento en el número de cero diagnósticos a brucelosis en el 2006 del 64% por finca y del 108% por animal, así como un incremento en el número de fincas y animales reaccionantes positivos a las pruebas de diagnóstico de brucelosis de 46.6% y 45.1% respectivamente, en relación al año anterior 2005. Los Estados que presentaron porcentajes de positividad mayor al 20% de un total de 4342 sueros bovinos enviados al laboratorio en el 2006, fueron: Apure, Aragua, Barinas, Carabobo, Cojedes, Guárico, Monagas y Yaracuy (Plaza et al., 2006). Diagnóstico En nuestro país a partir del año 2003, se ha utilizado la prueba de Rosa de Bengala (Card test) como prueba oficial d campo por su facilidad de realización y bajo costo. Sin embargo, esta prueba puede tener una sensibilidad baja del 74% en ciertas condiciones por lo que un porcentaje importante de animales positivos pueden quedar en los rebaños (Nielsen ,2002). Por lo tanto, para poder expedir los certificados de “finca libre de brucelosis”, como lo establece la normativa vigente (Resolución 37773, 2003), sería necesario hacer un muestreo a todo el rebaño con una prueba de mayor sensibilidad como el ELISA competitivo (Sensibilidad 97.5-100%) o Fluorescencia Polarizada (99.099.3%) (Nielsen, 2002). La prueba de ELISA indirecto (Sensibilidad 92.5-100%),también podría ser útil como prueba tamiz para bovinos, porque tiene un costo menor que el ELISA competitivo pero requiere hacer una confirmación de los positivos puesto que la prueba no discrimina los anticuerpos vacunales causados por cepa 19 de los anticuerpos infecciosos. La prueba de ELISA ha sido ampliamente usada en el diagnóstico de brucelosis en nuestro país: En el Estado Zulia, se realizó un trabajo de prevalencia con ELISA competitivo, encontrándose una positividad del 20.3% por rebaños y 9.1 % por animal, mientras que las pruebas de aglutinación (rápida en placa) detectaron un 3.3% de positividad por animal (DePool et al., 2004). También en el Estado Zulia, la mediante la prueba de ELISA indirecto en bovinos, se obtuvo una tasa media de positividad de 10,5 % que fue superior a la prueba de Fijación de complemento (8,5%) y Rosa de Bengala (5 %) (Rivera et al., 1995). En el Estado Lara, algunos estudios muestran un 6.4 % de positividad a ELISA competitivo en vacas lecheras, comparado con un 0.51% de reactores a Rosa de Bengala en base a una muestra de 13.350 animales (Maldonado, 2010). La prueba de ELISA competitivo ha sido también usada en pequeños rumiantes en fincas de ganadería intensiva en el Estado Lara, encontrándose un 17 % de positividad en cabras y 19% en ovejas, siendo todas ellas no reaccionantes a la prueba de card test (Chirinos y Vargas, 2009). Estos resultados contrastan con los obtenidos también en pequeños rumiantes en el Estado Lara con pruebas de aglutinación (rápida en placa, lenta en tubo y 2-Mercaptoetanol) en los que resultaron reaccionantes 2.69% de los caprinos y 2.17% de los ovinos (Javit et al., 2009). El uso de pruebas de diagnóstico para vigilancia epidemiológica en mataderos y receptorías de leche, ha sido aplicado en el país como lo establece la resolución vigente. La prueba de ELISA indirecto en muestreos serológicos aleatorios en toros de carne que van a matadero en el estado Barinas, demostró ser eficiente sin problemas de interferencia con cepa 19 porque estos animales no son vacunados, detectando un 6.2% de animales positivos (Garrido y Vargas, 2010). También se ha usado la prueba de ELISA indirecto en muestras de leche, comparado con la prueba del anillo en leche (PAL) como vigilancia epidemiológica en receptorías en el Estado Zulia, encontrándose un porcentaje de positividad de rebaño del 11.4% a la PAL, comparado con 27.2% a ELISA-i (Sánchez et al., 2009) y en el Estado Lara donde se ha detectado un 27.2% de rebaños reactores a PAL comparado con 13.4% a ELISA-i (Maldonado et al., 2010). En humanos, se han realizado algunos estudios de persona expuesto a riesgo a nivel de sala de matanza en Barinas, encontrándose hasta un 19% de positividad en pruebas de aglutinación, comparado con un 18% de positividad en bovinos (hembras y machos) en la misma sala de matanza (Josic y Mosquera, 2006). La prueba de ELISA ha sido empleada para el diagnóstico de brucelosis en humanos expuestos a riesgo y con la preencia de signos clínicos compatibles con la enfermedad (Vásquez et al., 1999). En relación a la prueba de Fluorescencia Polarizada, estudios de validación de la prueba realizados en el país demuestran que esta prueba ofrece la posibilidad de ser usada como prueba tamiz sin necesidad de confirmación debido a su alta sensibilidad y especificidad, su sencillez, rapidez y confiabilidad de los resultados, siendo incluso superior a los ELISA (competitivo e indirecto) y muy superior a la prueba oficial actual de campo Rosa de Bengala (Sánchez et al., 2008). El examen bacteriológico sigue siendo una herramienta fundamental en el diagnóstico de la brucelosis ya que el aislamiento de la bacteria es conclusivo, a pesar de la lentitud y complejidad de las técnicas. Sin embargo los laboratorios del INIA en Maracay, el Instituto Nacional de Higiene Rafael Rángel en Caracas y el laboratorio de zoonosis de la Facultad de Farmacia de la ULA en Mérida, han tenido experiencias exitosas en el aislamiento y diagnóstico bacteriológico de Brucella tanto en muestras de animales como de humanos) (Lugo et al., 2010) (Candelo, 2004) (Pinto et al., 2008), los cuales a su vez, junto con otros centros de investigación y universidades, trabajan en proyectos de diagnóstico molecular por PCR para esta patología. Vacunación antibrucélica Hasta el año 1999, en el país solo se aplicaba la vacuna cepa 19 a becerras hembras de 3 a 8 meses de edad. A partir de ese año, se aprobó la aplicación en el país de una nueva vacuna, la cepa RB51, que ha sido probada en hembras bovinas con excelentes resultados en la protección contra la infección y sin interferencia de anticuerpos con las pruebas convencionales de diagnóstico. Desde esta fecha hasta el presente, se ha incrementado vertiginosamente el número de dosis de vacuna antibrucélica aplicada en el país, en especial de cepa RB51, lo que ha permitido sin duda ofrecer una mayor protección a nuestros rebaños y controlar la enfermedad (Vargas, 2002). La eficiencia de la cepa RB51 ha sido estudiada en Venezuela en varios trabajos de investigación: Se ha demostrado en el país que la cepa RB51 ofrece un 100 % de la protección contra la infección y aborto en bovinos (Lord et. al., 1998). Así mismo, aunque la cepa RB51 no ha sido aprobada para su uso en toros en el país, un trabajo de investigación llevado a cabo por el autor (Vargas. et. al., 2001) demostró la seguridad de la vacunación de toros con cepa RB51 en una muestra estadísticamente significativa (20 toros adultos de 3 años de la edad), a los que se les aplicó una dosis completa de la vacuna sin efectos adversos a nivel testicular ni en la calidad seminal y sin excreción de la cepa a través del semen, sin inducir anticuerpos detectable en pruebas serológicas pero con una buena respuesta celular protectiva. El uso de la vacuna RB51 en vacas adultas en zonas de alta prevalencia de brucelosis en el país, junto con el sacrificio sistemático de reactores positivos a las pruebas de diagnóstico serológico, ha tenido un impacto extraordinario en la disminución de la prevalencia de la enfermedad en muchos rebaños del país. 15 REFERENCIAS • Candelo N (2004). Todo lo que se debe saber sobre brucelosis bovina. 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Clínicamente suele presentarse desde las 12 horas posparto hasta los primeros 35 días de vida y se caracteriza por excreción de heces acuosas y profusas, deshidratación progresiva, acidosis y, en casos severos, muerte en pocos días. (Odeón, J., 2010). La diarrea de los terneros se ha convertido en uno de los problemas que más suele preocupar al ganadero ya que es un proceso que se presenta repentinamente, de tal forma que terneros que un día toman la dieta láctea con normalidad, que se ven con el dinamismo y la vitalidad propios de su edad, al día siguiente y sin causa aparente, pueden aparecer inapetentes y tristes, con una sintomatología común: la diarrea. (Mosquera, J., 2006) La preocupación del ganadero radica no solamente en las consecuencias que la diarrea produce en el ternero que la padece, sino en la posibilidad de contagio a los otros terneros que conviven con el afectado. La diarrea origina un debilitamiento general del animal y un retraso en el crecimiento, además son muy frecuentes los casos de terneros que mueren por deshidratación durante un proceso de diarrea. (Jalvo, E., 2008) FISIOPATOLOGÍA: La compleja fisiopatología de la diarrea neonatal en terneros, es mediada por endotoxinas bacterianas, una inflamación causada por parásitos o por una atrofia de las vellosidades inducida por un virus. En terneros con diarrea aguda causada por los enteropatógenos comunes existe una pérdida neta de iones de sodio y agua, bicarbonato, cloro y potasio hacia los intestinos y subsecuentemente hacia las heces. Estas pérdidas resultan en grados diferentes de deshidratación, hipovolemia, acidosis metabólica, shock hipovolémico.(Fig1) Independientemente de la causa de la diarrea, el problema consiste en que el becerro no es capaz de absorber fluidos del intestino o reabsorber las secreciones del mismo, resultando en voluminosas cantidades de heces acuosas, lo que puede conducir a la muerte del animal por la pérdida de líquidos y desbalance electrolítico. (Odeón, A., 2010). Fig1. Esquema de la fisiopatología de la diarrea en terneros. Tomado de: Diarrea neonatal de los terneros (Odeón, A., 2010). Esquema de la fisiopatología de la diarrea Disminución de líquido extracelular Deshidratación Disminución de volumen plasmático Disminución de la circulación periférica SHOCK HIPOVOLEMICO Menor perfusión y oxigenación tisular Anorexia Mal absorción Aumento de la glucolisis anaeróbica Mayor concentración de ácido láctico Disminución del flujo plasmático renal HIPOGLUCEMIA Aumento del N urelco Menor excreción de N Menor secreción de H ACIDOSIS METABOLICA 17 Pérdidas de líquidos de hasta 100ml/kg de peso corporal pueden ocurrir en 12 horas. El volumen fecal total puede ser de 22 a 40 veces más que lo normal en terneros con diarrea. La pérdida en peso corporal puede ser subestimada de la pérdida real, ya que cantidades variables de líquido y electrólitos están presentes en el lumen intestinal durante el periodo de diarrea, pero aún no han sido expulsadas con las heces. A esto se le conoce como deshidratación intraluminal y debe ser tomado en cuenta cuando se calcula el grado de deshidratación con el propósito de iniciar la terapia de fluidos. (Torres, E., 2009). EPIDEMIOLOGÍA: La diarrea en terneros es el signo de una enfermedad compleja con varias causas posibles. Según Kehoe y Heinrichs., 2005, un ternero puede perder en un día de 5% hasta 10% de su peso corporal en agua por causa de una diarrea. Los terneros alimentados con lacto-reemplazadores son más propensos a diarreas que los alimentados con leche entera debido a los cambios bruscos en la concentración de los mismos, pero alimentar terneros con leche entera incrementa los riesgos de adquirir enfermedades como Mycobacterium paratuberculosis y las causadas por E. coli y Salmonella aun con una pasteurización previa (Morán, E., 2001). Según Íñiguez, F., 2010, las causas de diarrea en terneros pueden ser infecciosas (virus y bacterias), parasitarias (protozoarios), tóxicas (fármacos u otros químicos) nutricionales o congénitas como errores del metabolismo y desórdenes inmunológicos. Factores etiológicos infecciosos de diarrea en terneros. • • ETIOLOGIAS INFECCIOSAS La comprensión de los agentes causales de la diarrea es de suma importancia para un tratamiento apropiado. 18 Bacterias: la considerada más importante es E. coli, pero Salmonella y Clostridium perfringens tipo C también se pueden encontrar en terneros. (Paredes, C., 2008) Factores etiológicos parasitarios de diarrea en terneros. • Los factores determinantes epidemiológicos incluyen: üTransferencia insuficiente de inmunoglobulinas del calostro. üFalta de anticuerpos específicos en el calostro de las madres que no han sido expuestas a ciertos patógenos. üEstrés causado a los animales nacidos al aire libre por las condiciones climáticas. üUso de reemplazantes lácteos de baja calidad. üAlbergue e higiene inadecuados y el nivel general del cuidado. (Rodríguez, L., 2011) Virus: Rotavirus es el principal agente causante de la diarrea en terneros. Por otra parte Coronavirus, Parvovirus. DVB, IBR y Lengua azul son posibles etiologías pero no son comunes. También se ha reportado enterovirus y adenovirus. Las Clamidias, han sido asociadas con episodios de diarrea en el ternero recién nacido. (Paredes, C., 2008) Protozoarios: Coccidia, Eimeria surni, E. bovis y Cryptosporidia que cada día cobra mayor significancia al ser aislado más frecuentemente de casos de diarrea en becerros. (Páez, F., 2011) Factores etiológicos tóxicos de diarrea en terneros. Hongos: asociados con uso excesivo o cambios constantes en la medicación, el problema básicamente en este caso es Candida albicans. (Páez, F., 2011) Factores etiológicos nutricionales de diarrea en terneros. • • Dietarias: sobrealimentación, administración de substitutos de leche con proteína poco digestible para el ternero. (Páez, F., 2011) Factores predisponentes del síndrome diarreico neonatal. ØPobre condición física de la madre durante la gestación y el parto. Desnutrición. Parásitos. Parto distócico. Vacunación inadecuada o ausencia de vacunas. ØAporte inadecuado de calostro. Administrado tarde (después de 18 horas.). En cantidad insuficiente (menos de 2 litros). Calostro de bajo contenido de Inmunoglobulinas. Con falta de higiene. ØAlimentación inadecuada de los terneros. Alimentos fermentados (leche descompuesta o alimento mojado). Cambios bruscos de alimentación. Sobrealimentación. Carencias de vitaminas y minerales. ØMedio ambiente adverso Frío o calor. Ventilación inadecuada. Exceso de humedad. Sobrepoblación. Microorganismos patógenos presentes en el medio ambiente. (Terán, J.,2008) Los microorganismos que comúnmente se relacionan con el síndrome diarreico neonatal bovino son: Rotavirus, Coronavirus, Escherichia coli, Clostridium perfringens, Salmonella spp, Criptosporidium spp y Coccidias. ROTAVIRUS: es frecuente durante los primeros 6 días, después de la ingestión de materiales contaminados con heces y tiene un periodo de incubación de 12 a 36 horas. Produce diarrea acuosa de color amarillo, verde o café, que puede durar desde 1 a 2 días en infecciones simples o hasta 6 días cuando se complica con otros microorganismos. Se disemina rápidamente a otros animales susceptibles. La morbilidad puede ser del 90% y la mortalidad del 5 % en ausencia de infecciones secundarias. Puede ser alta cuando se complica con cepas enterotoxigénicas de Escherichia coli. (Álvarez, P & R, Gallardo., 2011) CORONAVIRUS: es común en animales de 7 a 10 días de edad. El periodo de incubación es de 3660 horas. Los terneros afectados muestran ligera depresión y diarrea amarillenta con moco y coágulos de leche no digerida. Después de 2 a 4 días, los becerros se ven deprimidos, débiles, demacrados y eventualmente mueren. La infección se disemina rápidamente a otras becerras susceptibles. La morbilidad puede ser del 90 % y mortalidad del 30% aún en ausencia de infecciones secundarias. La infección por E. coli o colibacilosis enterotoxigénica, inicia cuando los filamentos (K99) que se encuentran en la pared celular se adhieren a la superficie de las células de la mucosa intestinal. Las cepas más patógenas de E. coli contienen este antígeno K99. (Álvarez, P & R, Gallardo., 2011) Una vez adheridos a la superficie intestinal, E. coli libera toxinas LT, que alteran la permeabilidad de las células de las vellosidades intestinales y provocan el paso de líquidos y electrolitos del epitelio hacia el lumen intestinal. Al principio puede observarse diarrea amarillenta o blanquecina, luego diarrea acuosa. La pérdida de bicarbonato y fluidos provoca deshidratación y acidosis en la sangre y tejidos, la cual es agravada por vómito. La acidosis puede ser tan severa que produce falla renal y muerte. (Álvarez, P & R, Gallardo., 2011) COSTRIDIUM PERFRINGENS tipo C, produce enterotoxemia en terneros recién nacidos como resultado de la liberación de toxinas alfa y beta, que causan hemolisis y necrosis respectivamente en la mucosa intestinal. Los signos clínicos son diarrea hemorrágica, cólico, depresión y muerte súbita. En los casos hiperagudos no se observa diarrea. En el examen post mortem el intestino delgado está hemorrágico y con severa necrosis de la mucosa. La morbilidad es baja, pero la mortalidad es alta. La sobrealimentación de las becerras pueden ser un factor predisponente. (Álvarez, P & R, Gallardo., 2011) LA SALMONELOSIS: en terneros recién nacidos es causada por las cepas: S. typhimurium y S. dublin. Los terneros se infectan por la vía fecal- oral. Después de la ingestión la bacteria coloniza la mucosa del ileon terminal y el colon, luego penetra el tracto intestinal a través de las placas de Peyer, se replica en los macrófagos dentro de los nódulos linfáticos locales, para luego alcanzar los nódulos linfáticos mesentéricos regionales y de ahí a la circulación sanguínea causando bacteremia. Si la bacteria no es controlada por el huésped puede infectar otros órganos viscerales. (Álvarez, P & R, Gallardo., 2011). Pueden observarse 3 diferentes formas de salmonelosis en las becerras: Hiperaguda o septicémica, aguda o entérica y crónica. En la forma hiperaguda la muerte ocurre sin signos clínicos previos, hasta justamente antes de la muerte. Cuando se observan signos, estos incluyen hipotermia, depresión severa, debilidad, opistótonos y diarrea. Las infecciones por CRYPTOSPORIDIUM SPP son comunes en el primer mes de edad y con mayor frecuencia durante la primera semana de vida. Los animales mayores pueden infectarse pero no desarrollan diarrea. Las becerras se contagian al ingerir materiales contaminados con heces que contienen oocistos esporulados. La diarrea ocasionada por estos microorganismos es temporal y no es letal mientras no se complique con otros microorganismos. Inicia 2 a 7 días después de la ingestión de los oocistos y puede continuar por 1 ó 2 semanas. Los signos clínicos incluyen diarrea, tenesmo, anorexia, pérdida de peso y depresión. Las heces son amarillo cremosas, similares a las observadas en diarreas virales. La morbilidad puede ser muy alta pero la mortalidad es baja. (Álvarez, P & R, Gallardo., 2011) LA COCCIDIOSIS es otra causa de diarrea en becerras. Las coccidias más comunes son Eimeria bovis y Eimeria zuernii. La enfermedad se transmite a través de la ingestión de agua y alimentos contaminados. Los signos clínicos aparecen 2 semanas después de la ingestión de materiales contaminados con oocistos. Los primeros signos son heces líquidas, mezcladas con moco y pequeñas cantidades de sangre, que pueden aumentar con el curso de la enfermedad. Prácticamente todas las becerras experimentan un cierto grado de infección por coccidias durante el primer año de vida. (Segovia, C & Ayala, S., 2009). Esto puede llegar a agravarse cuando el nivel de inmunidad baja por causa del estrés, la sobrepoblación y las condiciones higiénicas deficientes. Cuando el nivel de infección es alto, las coccidias destruyen una gran cantidad de enterocitos, lo cual provoca una pérdida acelerada de sangre, agua y electrolitos que puede ser mayor al 12 % del total del agua corporal. La muerte sobreviene como resultado de la anemia, deshidratación, acidosis metabólica y shock. (Segovia, C & Ayala, S., 2009) MECANISMO DE LA DIARREA: La diarrea no es una enfermedad en sí misma, sino más bien el resultado de la alteración de la homeostasis intestinal en la cual se ve afectada la digestión y la absorción de nutrientes, electrolitos y agua. Se caracteriza por una descarga frecuente y anormal de heces en cuya fisiopatología están involucrados 4 mecanismos: I. Hipermotilidad Puede no ser causa de diarrea; se le observa frecuentemente con las diarreas e históricamente se ha pensado como un factor importante en la patogénesis. Las drogas destinadas a reducir los movimientos intestinales pueden agravar el daño a la mucosa ya 19 que cualquier bacteria o toxina presente permanecerá por más tiempo. El estrés y la intoxicación con organofosforados, son causa de una motilidad aumentada del intestino. (Aguirre, E., & T, Tobar., 2006) II. Permeabilidad aumentada Es un importante mecanismo en ciertos tipos de diarreas en las cuales la inflamación es prominente, tal como en las causadas por Clostridium perfringens tipo C o D, paratuberculosis y parasitosis. Normalmente, hay continuos movimientos secretorios y de absorción de fluidos a través de la mucosa intestinal. La mayor parte de estos flujos, ocurre por difusión pasiva primariamente a través de poros diminutos localizados en las uniones entre las células epiteliales vellosas. La inflamación provoca una presión hidrostática aumentada en los vasos linfáticos y en los vasos sanguíneos, así como una separación en las uniones de las células, aumentándose el tamaño del poro resultando en salida excesiva del líquido corporal hacia el lumen intestinal. (Aguirre, E., & T, Tobar., 2006) III. Hipersecresión A pesar de que la gran parte del flujo secretorio ocurre en forma pasiva a través de los poros intercelulares, existen además mecanismos secretorios activos que ocurren en las células vellosas de las criptas. Esta hipersecreción es el mecanismo en la patogénesis de la diarrea causada por E. coli enteropatógena en becerros, y Vibrio cholera en humanos; estos organismos producen una enterotoxina con actividad similar a la de las hormonas. La enterotoxina activa al AMPc (Adenosin monofosfato cíclico) en las células secretoras de las criptas, acelerando el metabolismo de estas células, lo que resulta en hipersecreción. (Gómez, J., 2007) IV. Mala absorción Como ya se mencionó, parte de la absorción ocurre pasivamente a través de los poros intercelulares, sin embargo las células de las crestas vellosas están involucradas en una absorción activa, además 20 producen enzimas digestivas como la lactasa. Los Rota y Corona virus (principalmente) invaden las células absorbentes de las crestas para su replicación, provocando primero una absorción disminuida y posteriormente una mala digestión, seguida por la pérdida de la célula; el resultado es una mala absorción debido a la ausencia del mecanismo de absorción activo más la mala digestión, provocando una diarrea osmótica (lactosa no digerida y atrofia de las vellosidades). (Aguirre, E., & T, Tobar., 2006) Deshidratación Como se expresó anteriormente en el síndrome diarreico neonatal, la deshidratación juega un papel crucial y una vez más es conveniente mencionar que cualquiera que sea la causa de la diarrea, la deshidratación y el desbalance electrolítico son la principal causa de muerte. Un becerro normal se encuentra en un estado de balance fisiológico con respecto al agua y electrólitos, perdiendo algo en las heces, orina y otras secreciones para balancear lo ingerido en la dieta. Dentro del estómago e intestino hay un constante movimiento de iones y agua, sin embargo, el área crucial cuando hay ocurrencia de diarrea es el intestino delgado. (Gómez, J., 2007) SINTOMALOGÍA: Los signos principales son diarrea (heces líquidas) por ende deshidratación, debilidad y muerte en uno o varios días después del comienzo de la misma (Fig2). Habitualmente es difícil hacer un diagnóstico etiológico concluyente, solo basándonos en los síntomas, sin embargo la experiencia del profesional podría llevar a emitir un diagnóstico presuntivo. (Sánchez, D., 2009). En la diarrea metabólica, las heces suelen ser de consistencia pastosa a gelatinosa y el ternero está despierto y en alerta, la recuperación espontánea puede ocurrir entre 24 y 48 horas. Los terneros que reciben lacto-reemplazantes con proteína de leche descremada, desnaturalizada al calor, pueden presentar diarrea crónica causando emaciación y posible muerte entre 2 a 4 semanas. La alimentación con leche entera de vaca produce una recuperación rápida y satisfactoria. (Morales, R., & Caza, J., 2007). La colibacilosis ocurre en terneros de menos de 3 a 5 días de vida, rara vez más tarde. El comienzo es súbito, las diarreas son profusas y muy líquidas pudiendo provocar colapso en menos de 24 horas, la deshidratación y la acidosis son notables, la temperatura puede estar elevada pero normalmente se mantiene estable. (Andrade, P & J, Villagómez., 2008). La salmonelosis entérica aguda de los terneros se caracteriza por heces mal olientes y por lo general contiene evidencia de sangre, materiales fibrosos intestinales de desecho y cantidades excesivas de moco y es muy común que exista fiebre. (Morales, R., & Caza, J., 2007). La entero toxemia hemorrágica ocasionada por Clostridium perfringes tipo B y C se caracterizan por un inicio agudo de depresión, debilidad, disentería dolor abdominal y muerte a las pocas horas. La diarrea por rotavirus y coronavirus ocurre generalmente de 5 a 15 días de vida, presentando depresión moderada y frecuentemente continúan bebiendo leche; las heces son voluminosas, de blandas a líquidas y frecuentemente contienen mucosidad excesiva, la diarrea persiste de 3 a varios días, dependiendo de la extensión de las lesiones intestinales. (Medina, X & O, Herrera., 2010). Figura 2. Deshidratación y debilidad en terneros generadas a consecuencia de diarrea. Tomado de: Sintomatología de diarrea en becerros. (Sánchez, D., 2009). TRATAMIENTOS TERAPIAS DE FLUÍDOS: El tratamiento oportuno y eficaz del síndrome diarreico en terneros puede salvar la vida de muchos de ellos es por eso que se tendría que actuar inmediatamente presentado el caso y en lo posible tratarlo sintomatológicamente para lo cual se podría optar por la separación inmediata de los animales afectados, cambio de dieta, reemplazo de líquidos y electrolitos, tratamiento antimicrobiano, uso de drogas anti diarreicas y/o agentes protectores intestinales. (Sánchez, D., 2009). Un esquema práctico para hidratar a los terneros que presentan diarrea es por vía oral (Fig4), tratando de suspender la administración de la leche entera o el reemplazante por un día para luego mezclar con agua hervida y/o agua medicinal (con electrolitos) y proporcionarle en diferentes porcentajes por 4 días, el orden sería el siguiente: 1. Primer día en 2 tomas de 2 lt en la mañana y 2 lt en la tarde de solución hidratante 2. Segundo día en 2 tomas en una proporción de 25 % de leche y 75 % de solución hidratante. 3. Tercer día en 2 tomas en una proporción de 50 % de leche y 50 % de solución hidratante. 4. Cuarto día en 2 tomas en una proporción de 75 % de leche y 25 % de solución hidratante. 5. Quinto día en 2 tomas en una proporción de 100 % de leche. (Gómez, J., 2007) Este esquema debe ser apoyado con sueros hidratantes por vía parenteral de elección intra- venosa y apoyarse si fuese necesario como mencionamos anteriormente con antimicrobianos. La necesidad de usar antimicrobianos es debatida y no es tan apoyada por ciertos estudios clínicos. Sin embargo, cuando hay evidencia de complicaciones bacterianas secundarias, el tratamiento antimicrobiano parenteral está definitivamente indicado. El uso de agentes antimicrobianos no está recomendado para agentes virales. En el caso de que la diarrea sea causada por Salmonella el tratamiento recomendado es una mezcla de trimetropin y sulfonamida. (Aguirre, E., & T, Tobar., 2006) EVALUACIÓN CLÍNICA DE LAS DNT • Diarrea grave: requiere atención clínica (hidratación, tratamientos sintomáticos), pero el cuadro es difícil de revertir y se observa muerte de terneros. • Diarrea importante: requiere atención clínica, los terneros responden al tratamiento y/o se observa muerte o casos aislados. • Diarrea leve: los terneros presentan una diarrea moderada, no pierden estado, no requiere atención clínica y revierte sola en dos o tres días. (Olguín, A., 2003) En este aspecto es importante que el veterinario evalúe el grado de deshidratación mediante la Prueba del pliegue de la piel en párpado superior o cuello y tome el tiempo de normalización del pliegue. (Tabla1) Tabla1. Porcentaje de deshidratación en terneros por causa de diarrea. Tomado de: Escalas de deshidratación. (Olguín, A., 2003) PREVENCIÓN Y CONTROL: El primer paso para establecer un programa de control de la diarrea en terneros es identificar los factores de riesgo; la corrección de factores relacionados con el manejo, nutrición e higiene del rodeo contribuye a minimizar la ocurrencia de dicha enfermedad. La incidencia y tasa de mortalidad dependerán del grado de exposición a los agentes infecciosos y del nivel de resistencia del ternero. Existen principios básicos de control que deberían ser aplicados en todos los rodeos con problemas: 1. Reducir el grado de exposición de los terneros neonatos a los agentes infecciosos. 2. Proporcionar resistencia no especifica máxima a través de un buen nivel nutricional y adecuado consumo de calostro. 3. Aumentar la resistencia específica de los neonatos mediante la vacunación de las hembras gestantes. (Aguirre, E., & T, Tobar., 2006) La disminución de la exposición a agentes infecciosos de los terneros se obtiene a través de prácticas de manejo, permitiendo que los animales permanezcan en un ambiente con reducida contaminación. La utilización de potreros para parición sin ocupación reciente por otros bovinos, proporciona un medio favorable a los terneros luego del nacimiento. Las hembras no deben permanecer mucho tiempo en estos potreros de parición (1 a 2 semanas preparto y unas 48 horas posparto) y la carga animal no debe ser excesivamente alta, siendo la superficie adecuada no inferior a 300 m2 por vaca. Cuando el número de hembras gestantes supere los 100 animales, se debe separarlas en grupos más reducidos, de 50 a 75 animales. Los terneros que presentan diarrea deben ser separados del rodeo junto a sus madres a otro potrero para el tratamiento y convalecencia. Esta práctica es de fundamental importancia para evitar la difusión de la enfermedad por ternero afectado de diarrea. (Sánchez, D., 2009). La resistencia inespecífica se logra administrando buena alimentación a la madre y al neonato, asegurándose que éstos consuman al menos un 5% de su peso en calostro dentro de las 6 primeras horas de vida. Debe recordarse que la capacidad para absorber las inmunoglobulinas presentes en el calostro se pierde a las 24 horas. Dar un adecuado nivel nutricional a los vientres preñados en los últimos 60 días de gestación, asegura el nacimiento 21 de un ternero vigoroso y la producción de calostro en calidad y cantidad suficiente. (Sánchez, D., 2009). La resistencia a la DNT puede incrementarse mediante un adecuado programa de vacunación de los vientres gestantes, que transferirán anticuerpos específicos al ternero con el calostro. Generalmente se aconseja inmunizar con dos dosis de vacuna a los 60 y 15 días previos al inicio de la parición. Cabe destacar que los resultados obtenidos con la vacunación son variables, fundamentalmente, debido a que en la ocurrencia de DNT intervienen múltiples factores. Dentro de las posibles causas de la «falla» de las vacunas se podría mencionar que: la vaca no fue inmunizada correctamente (N° de dosis insuficiente y tiempo preparto fuera del período de entre 60 y 15 días previos al inicio de la parición), el ternero no tuvo acceso al calostro en tiempo y cantidad, el agente que causa la diarrea no está contenido en la vacuna o el nivel de desafío supera la protección transferida por el calostro. (Olguín, A., 2003). • Íñiguez, F., 2010, Etiologías infecciosas. Diarrea neonatal indiferenciada en terneros: consideraciones sobre su prevención en campo. vet.zootec. 2(2): 59-68. • Jalvo, E., 2008. Consecuencias de la diarrea en ganadería. En línea: www.produccion-animal/terneros. pdf.; consultado el 16 de Enero del 2013. • Kehoe, H., & Y, Heinrichs., 2005. Epidemiología. 3era edición. 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Es allí, justamente, donde se presentan la mayor cantidad de casos de diarrea. Por consiguiente, lo más aconsejable es brindar protección pasiva mediante el suministro de anticuerpos que generen una acción directa sobre las mucosas digestivas. Al utilizar lacto-reemplazantes se debe realizar técnicamente pensando que estamos frente a neonatos que necesitan de mucho cuidado, esto quiero decir revisar con anterioridad la fórmula y su dilución que significa hacerlo en agua potable, hervida y a la temperatura idónea. En la crianza de terneras es necesario implementar controles rigurosos en bioseguridad y sanidad en todas las categorías de las terneras. Sería necesario capacitar constantemente al personal encargado de la crianza de las terneras con la finalidad de evitar cuadros diarreicos que finalicen con la muerte de las mismas. BIBLIOGRAFÍA: 22 • Aguirre, E., & T, Tobar., 2006. Mecanismos de la Diarrea. 3era edición. Editorial REVERTÉ. 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El Campo Machachi-Ecuador Casilla postal: 17-01-451 Quito – Ecuador [email protected] I. INTRODUCCIÓN el reflejo de orinar, mediante masajes en la zona del prepucio lavar con agua (idealmente con manguera) y secar muy bien la piel y mucosa con toallas. Finalmente procedemos a cortar sólo el exceso de pelos demasiado largos y muy contaminados del prepucio. Recordemos que los vellos del prepucio tienen la función protectora de la mucosa. Para la extracción nos basamos en la siguiente regla: Excitación pre-coital (montas falsas / maniobras a realizar). La cría selectiva de ganado es método importante en la producción de animales de raza pura. El ganado, al igual que todos los demás animales, no siempre puede seleccionar el mejor criterio para determinar con quién aparearse. El conocimiento de la fertilidad o de la capacidad fecundante de cada toro es uno de los principales objetivos en la producción de semen bovino. Un requisito indispensable para el desarrollo de la inseminación artificial es que el semen utilizado mantenga su capacidad de fertilidad después de haber sido crio preservado. II. OBJETIVOS • Calificar a un reproductor donador de semen, con métodos de colecta de semen. • Describir los métodos y equipos usados en la recolección de semen de toro. • Demostrar destreza en la aplicación de los métodos de recolección, usando Electro Eyaculador (EE) y una Vagina Artificial (VA), y el procedimiento en post-morten o técnica quirúrgica. III. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 1. PREPARACIÓN DE SEMENTALES Traslado de los toros a un galpón para pernoctar, previamente antes de la extracción, se debe estimular 23 Regla = XXRX Donde X= Monta Falsa Donde R= Reposo activo del toro. En esta etapa el operario va en busca de la vagina artificial en la sala de vaginas. El toro donante debe ser estimulado por unos pocos minutos permitiéndole efectuar “falsas montas”, bajándolo y permitiéndole movimientos alrededor del animal de monta. La estimulación sexual y la preparación sexual de los toros antes de la recolección es una parte importante de la cosecha. 2. MÉTODO DE EXTRACCIÓN DE SEMEN MEDIANTE VAGINA ARTIFICIAL (VA) El uso de la vagina artificial (VA) es el medio más práctico y satisfactorio para recolectar semen de toro, carnero, chivo y potro. Fig. 3. Cono de Goma: Es de látex del mismo diámetro de la camisa, que se monta en el extremo cercano al tapón del tubo rígido. Fig. 4. Tubos Plástico Graduado: Se lo conecta correctamente identificado al extremo de menor diámetro del cono. Debe estar protegido contra los rayos solares. Es de 15 cm. delargo La temperatura dentro de la (VA) oscila desde los 38ºC a 52ºC, dependiendo del donante (raza) y su edad. Cada tubo colector de semen se identifica con el código de cada donante. Se debe tener las facilidades para el manejo de los toros durante la recolección. Es necesario un maniquí, vaca o toro para que el toro monte adecuadamente. 2.1MATERIALES Fig. 5. Equipo de extracción de semen bovino. Fig. 1. Vagina Artificial: Tubo de goma rígido de 30 a 40 cm de largo y de 5 a 6 cm de diámetro interior. Fig. 2. Camisa Interior: Es de goma látex, cuyos extremos se montan sobre el tubo rígido formando una cámara. Los extremos de la camisa son mantenidos en posición por bandas de goma elásticas. 2.2PROCEDIMIENTO La (VA) se carga con agua caliente a 60ºC hasta que colocada en posición vertical, no rebalse del orificio de carga. La cantidad de agua usada y la temperatura interior depende de cada toro. Es necesario disponer o tener (VA) para cada toro. Después de que se carga la (VA) con agua caliente, se lubrica el extremo libre (opuesto al tubo de recolección) con un lubricante estéril (no espermicida) Se controla la temperatura interior con la ayuda de un termómetro. Al momento de la recolección, la temperatura debería ser 24 de 38ºC a 55ºC, como ya señalamos, la temperatura depende del semental que se va a colectar. Cuando el toro monta, el pene extendido es guiado, con la mano del operador protegida con un guante, directamente a la abertura de la (VA), la cual es mantenida en un ángulo de 45º empuñando el tubo rígido. El pene no debería ser tocado. Después de la eyaculación, la (VA) es colocada verticalmente (con el tubo recolector hacia abajo), permitiendo que el semen descienda hacia el embudo. El semen tiene que ser protegido del shock térmico (calor o frío extremos) y de la luz directa del sol. Un buen criterio es mantener el tubo dentro de otro mayor conteniendo agua a 38-39ºC, para que la temperatura del eyaculado baje paulatinamente para luego trasladar las muestras de eyaculado en un termo cooler a 5ºC. Tan pronto como el semen ha sido recolectado, debería etiquetarse incluyendo la fecha y Nº de código del toro. Deben registrarse el volumen del semen, la apariencia general y el Nº de eyaculado (primero, segundo, etc.). Deben mantenerse durante la recolección una buena limpieza e higiene. El piso del área de recolección debería ser limpio. Recomendamos que el operador deba tener experiencia y conocer del manejo del semental, para evitar fracasos en la recolección del material seminal. estímulo eléctrico por vía rectal estimulando el sistema nervioso autónomo y somático, que conduce a la obtención de secreciones de las glándulas accesorias y finalmente a la eyaculación. Desde entonces ha sido probado en muchas especies. En 1950, dos brasileros desarrollaron y usaron un tipo de electrodo bipolar para obtener semen de toros. Como regla, el semen obtenido por (EE) se compara favorablemente al obtenido con (VA), pero ciertamente no es superior. Sin embargo, el semen obtenido por (EE) es generalmente mejor que el obtenido por el método de masaje. La (EE) es un método conveniente para obtener semen de toros que son incapaces de servir mediante (VA), por varias razones: problemas podales, articulares, manejo, etc. Fig. 7. Introducción del vástago del (EE) por vía rectal. Fig. 6. Demostración de extracción de seme con (VA), semental Gyr. 3.1MATERIALES 3. EXTRACCIÓN DE SEMEN MEDIANTE ELECTRO EYACULADOR (EE) Esta técnica permite extraer semen a los sementales sin previo acostumbramiento. Muy utilizado para la evaluación de reproductores a campo; pero la colección de semen se debe realizar en una manga apropiada. • • • • • Electro Eyaculador (EE) Vástago o Sonda porta electrodos Mango colector Cono colector. Tubo Plástico graduado 15 cc Fig. 8. Equipo para colecta de semen con (EE) Fue utilizada por primera vez en Australia en ovejas (Gunn y colaboradores1936). La técnica está basada en la aplicación rítmica de un 25 4. EXTRACCIÓN DE SEMEN POST-MORTEN Dicho método de extracción post morten es una técnica de reproducción asistida la cual permite almacenar una muestra seminal de un animal con excelentes características, hasta su posterior utilización, además la técnica ha servido no solo para animales domésticos sino también para animales silvestres puesto que muchos de estos son excelentes sementales los cuales se están perdiendo sin dejar descendencia por ejemplo (toros de lidia). Recuperar y crio preservar espermatozoides tomados de epidídimo se constituye en una manera útil de rescatar el germoplasma de especímenes que estén en peligro de extinguirse, o que hayan muerto por causas naturales o accidentes (Brooke, 2003). Esta técnica es particularmente útil en casos donde la colecta de semen es difícil, como sucede en los animales salvajes, campo en el cual tiene mayor aplicación (Anel et al., 2002). Se prueba con seis toros de lidia de diferentes ganaderías, al realizar la técnica quirúrgica y crio conservación de semen con diferentes porcentajes de crio protector (glicerina 7-10%), no se encuentra diferencia o variabilidad satisfactorias a las pruebas de pre y pos congelación (Chávez, M y Oñate, D. 2008), Cuadro 1 y 2. Cuadro. 1. Comparación en pruebas microscópicas pre-congelación (Chávez, M. 2008). Cuadro. 2. Análisis mediante pruebas microscópicas pos-congelación (Chávez, M. 2008). 26 4.1. MATERIALES • Baño maría. • Semen + Diluyente • Plancha térmica • Microscopio • Espermac • Cajas Petri (Desechables) • Probetas graduadas • Pipetas • Equipo básico de cirugía • Guantes quirúrgicos • Gasas • Jeringuillas 10 ml • Termómetros • Alcohol-Formol 4.2. PROCEDIMIENTO Fig. 9. Retiro de la túnica albugínea. Fig. 10. Limpieza de la cola y cuerpo del epidídimo. Fig. 11. Debridación de la cola del epidídimo. BIBLIOGRAFÍA Fig. 13. Preparación epidídimo en diluyente. del Fig. 14. Disección de la cola del epidídimo. Fig. 15. Lavado y recuperación del semen. • www.synchropamba.com • www.bioeticawep.com • www.pionet.org • www.salvador.edu.ar • Bonet, Antonio, Enciclopedia Temática Educativa, Editorial Zamora, Colombia 2000. • Hafez. E.S.E, Reproducción e inseminación en Animales, 6ts edición, 1987. • Anel, L., Guerra, C., Alvarez, M., Anel, E., Martinez, A.F., Boixo, C.J., Kaabi, M., Herraez, P., And Paz, P. Effect Of Postmortem Interval In Quality Of Epididymal Spermatozoa In Iberian Red Deer (Cervus Elaphus Hispanicus). Theriogenology 2002; 57: 577. • Brooke, Fahrig, 2003: Cryopreservation By Pellet Freezing Of Epididymal And Ejaculated Spermatozoa From Male Dogs. M.Sc. Thesis. Louisiana State University. [En Línea]. Url: Http://Etd.Lsu. Edu:8085/Docs/Available/Etd0405103-193813/Unrestricted/ Bfahrigthesis. Fig. 12. Cola y cuerpo del epidídimo expuestos. 27 REPORTAJE HACIENDA GANADERA “MAET GENETICS” La Hacienda Ganadera “MAET”( Manuel Arichabala y Esperanza Tapia), esta ubicada en la Provincia de Morona Santiago, Cantón Santiago de Méndez, Parroquia Méndez. Tiene una extensión de 300 hectáreas, cuenta con una diversidad de pastos forrajeros (gramalote), su clima es tropical, con una topografía irregular, con hermosos ríos, arboles grandes, lindos paisajes, donde pastan hermosos animales puros de las razas Brown Swiss y Charolais. “MAET” cuentan con un equipo administrativo a cargo del Ing. Santiago Tapia quien es responsable y coordina las actividades que se realizan en la Finca, en conjunto con el Sr. Leonardo Vivanco, quienes son los encargados del bienestar y calidad de los animales para lograr el desarrollo y progreso genético. En Octubre del Año 2012 Don Manuel decide implementar un Programa de Mejoramiento Genético Integral, que incluye la identificación de sus animales, selección de los mejores ejemplares, cruzamientos genéticos, la implementación de la Técnica de Inseminación Artificial como instrumento para el mejoramiento genético. 28 Otra biotecnología aplicada que se implementará es MOET (Múltiple Ovulación y Transferencia de Embriones), seguido de pruebas genómicas a todos los reproductores hembras y machos del hato. El proceso empezara realizando programas de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo para avanzar en la mejora genética, programas de capacitación al personal técnico, programa de nutrición animal; adecuación de la infraestructura y manejo de pastos etc. Para este trabajo contrataron los servicios como Asesor Técnico al Dr. Francisco Caiza Gerente de “PRODUBIOGENSA CIA. LTDA.”. Dentro de este Programa de Mejora Genética esta previsto trabajar con toros de raza Charolais de excelente pedigrí tales como; POPULAIR, S A V I G N E U X , T R E Z E G O A L , UTRILLO, SISTERON, SUPEREUR y otros toros de la mejor Genética del mundo "Genes Diffusión". El objetivo del Sr. Manuel Arichabala es contar con animales de alto valor genético para apoyar a los Pequeños Ganaderos de su ciudad natal; "Méndez QUERIDO" como así lo denomina y promocionar la Genética de "MAET" a Nivel Nacional e Internacional. PUBLIREPORTAJE GENES DIFFUSIÓN DISTRIBUIDO POR "PRODUBIOGENSA" ECUADOR NAPOLEÓN RAZA VOSGIENNE ACTION RAZA HOLSTEIN NEGRO MUTZING RAZA SIMMENTAL UTRILLO RAZA CHAROLAISE Los puedes encontrar en: www.biogensa.com.ec NUESTRA VISIÓN es brindar directamente en el campo al agricultor y ganadero nuevas alternativas tecnológicas del tercer mundo que beneficien directament3e al mismo y ser competitivos en cuanto a calidad, precios y resultados. NUESTRA MISIÓN es ofrecer productos y servicios de calidad dentro y fuera del cantón con innovación tecnológica agrícola y pecuaria, integrando de esta manera al agricultor olvidado a incursionarse en el campo de la tecnología. AGROVLSOLUCIÓN realizó el agasajo navideño a todos los agricultores, comenzando con una misa campal de acción de gracias, para luego dar inicio a la II Copa Agricultor con la participación de los agricultores de las distintas zonas del cantón, los diferentes proveedores y el personal de nuestra empresa habiéndose convertido este evento en una tradición ya en nosotros, con la única finalidad de fomentar la unión, amistad y compartir experiencias entre nuestro almacén y los clientes, este evento también tiene la participación de algunos artistas invitados y una tarde taurina, siendo esto de gran agrado para el agricultor, culminando la tarde con la entrega de fundas de caramelos, presentes, premios y medallas a la mejor cosecha y a los triunfadores del futbol masculino y femenino. 29 NOTICIAS BIOGENSA 2013 LAVADO DE EMBRIONES DONDE EL DR. ENRIQUE CRUZ CON SEMEN SEXADO Se realizo un Lavado de Embriones con Semen Sexado en la Hacienda San Luis de Cruz, Ubicada en la Provincia de Pichincha, Cantón Mejía, Parroquia Aloasi. La Donante se llama Ana, de raza Holstein, tres años de edad, con 500 Kg de pesos. Se le insemino con Adwood Semen Sexado de raza Holstein. El Dr. Francisco Caiza conjuntamente con todo su equipo técnico de “PRODUBIOGENSA” realizo el respectivo Lavado de Embriones en la cual se tuvo un resultado favorable, se recolecto 5 embriones; 4 Mórula grado 1 y 1 Mórula grado 2, en la cual se procedió correctamente a congelar, ya que no se contaba con receptoras disponibles. El Dr. Enrique Cruz cuenta con embriones sexados dando un paso más en el avance de la biotecnología. LAVADO DE EMBRIONES DONDE EL SR FELIX JAYA “ P R O D U B I O G E N S A ” conjuntamente con su equipo técnico participaron en el lavado de Embriones de dos vacas de raza Jersey del propietario Sr. Félix Jaya en la Provincia de Chimborazo, Cantón Riobamba, con resultados favorables obteniendo un 70 % de recuperación de embriones, 5 embriones de cada animal y todas embriones de calidad 1 y grado 1 (Mórulas compactas), las cuales por falta de receptoras, estuvieron aptas para ser congelados, obteniendo 100 % de congelación. 30 SEMEN SEXADO “PRODUBIOGENSA” abre las puertas para realizar una investigación sobre el Semen Sexado Nacional, el egresado Gabriel Mena conjuntamente con el asesoramiento y la ayuda de todo los técnicos de “PRODUBIOGENSA” está realizando la investigación del semen sexado nacional, esperando resultados satisfactorios muy pronto tendremos semen nacional sexado en diferentes razas de animales bovinos disponibles para todos los ganaderos. LAVADO DE EMBRIONES DONDE SR. BOSCO RIVADENEIRA, MACAS Foto 1.- Recuperando embriones del lavado realizado en Macas; "Finca Morenita". PRODUBIOGENSA CIA LTDA con su equipo técnico Dr. Francisco Caiza PhD, Dr. René Mauricio Chávez Romero, Dr. Rubén Caiza, Ing. Daniel Escobar y Karina Orquera del IASA (pasante) y con el apoyo y soporte de GREEN HOUSE, Dr. Cid Calle en la hacienda "Lorenita" de propiedad del Sr. Bosco Rivadeneira, donde se realizó la super ovulación de 2 vacas de raza Charolais y se tuvo una respuesta muy positiva. Luego del exitoso procedimiento de lavado de embriones, se pudo recuperar en la primera vaca 30 embriones, de los cuales 24 de calidad excelente grado 1, es decir viables para transferir o congelar; de la segunda vaca se obtuvieron 6 embriones de excelente calidad grado 1, completando un total record de embriones en esta zona del país. Estos embriones se congelaron debido a que no había disponible receptoras, esta biotecnología se ve restringida precisamente por la falta de hembras receptoras. COLECTA DE SEMEN POST-MORTEN “PRODUBIOGENSA” con su equipo técnico, participó en las Corridas de Toros de Ambato, prestando sus servicios en colecta de semen post-morten; en tres ejemplares de excelente bravura, de diferentes ganaderías de Ecuador. El día Domingo 3 de Febrero del 2013, en el Monumental Plaza de Toros de Ambato, se lidio novillostoros de la Ganaderia Mirafuente, Ubicado en la Provincia de Pichincha, Cantón Mejía, Parroquia Machachi y Vista Hermosa, Ubicados en la Provincia de Pichincha, Cantón Quito, Parroquia Lloa, de los Hnos. Salazar, dos ejemplares que cumplían con excelente trapío, casta y mucha nobleza se procedió extraer el semen, (Reservado y Esmerado). Domingo 11 de Febrero del 2013, en el Monumental Plaza de Toros de Ambato, se lidio toros de la Ganadería Peñas Blancas, Ubicada en la Provincia de Pichincha, Cantón Quito, Parroquia Pifo, propietario el Sr. Cristobal Roldan, un ejemplar de nombre Marismeño, tuvo una excelente faena y se procedió a extraer el semen. CRIOCONSERVACION DE Siendo el semen de excelente viabilidad, motilidad y buena concentración se procedió a congelar el semen de estos hermosos ejemplares que tuvieron una faena espectacular en el ruedo de la Plaza de toros en Ambato. En el último cuarto de siglo la SEMEN DE EQUINO Y BURRO Hoy el semen congelado con resultados eficientes es una realidad y una excelente opción de preservación y comercialización. congelación de semen equino en el mundo ha sido un constante generador de cuestionamientos investigaciones, y polémicas sobre la eficiencia y pertinencia de esta técnica. “PRODUBIOGENSA” pone a su disposición los servicios en esta rama muy interesante, ya que nuestros laboratorios y centro de investigación han realizado estudios de el semen equino, burro Foto 2.- Extrayendo espermatozoides del epidídimos I.A.T.F. EN LA HACIENDA “MAET” (Manuel Arichabala; Esperanza Tapia) El Centro de Mejora Genética “MAET” (Manuel Arichabala; Esperanza Tapia) ubicada en la Provincia de Morona Santiago, Cantón Santiago de Méndez, Parroquia Méndez, se realizó un programa de I.A.T.F. con resultados excelentes. Se sincronizo 11 hembras bovinas de la raza Charolais, con un protocolo de progestágenos intravaginal, la respuesta del tratamiento hormonal fue muy buena de las 11 hembras sincronizadas, 9 respondieron favorablemente, es decir se obtuvo 81 %. Se les confirmo preñes mediante la palpación ginecológica de 9 hembras inseminadas, se detecto 6 preñadas. Los resultados de preñez alcanzados en el primer lote de sincronización de celos para IATF fueron del 66,67 % (6/9), esto hace notar muy claro el avance que cuenta este Centro de Mejora Genética. y sus reacciones ante un proceso de congelación y en el camino se han probado diversas técnicas y protocolos tendientes a encontrar, estandarizar y divulgar programas reproductivos eficientes, contando con técnicos preparados sobre esta rama obteniendo resultado un IMPLANTACIÓN DE EMBRIONES UTILIZANDO FLUNIXIN MEGLUMINE Y PROGESTERONA Con el asesoramiento de la empresa “PRODUBIOGENSA” y todo su equipo técnico, realiza una investigación conjuntamente con el Egresado Héctor Llumigusín, para identificar cuál de estos dos factores, Flunixin meglumine y progesterona, elevara el porcentaje de concepción de embriones transferidos en fresco en receptoras vírgenes, en toda la serranía Ecuatoriana. Así seguiremos fomentando las técnicas de biotecnología en el Ecuador ya que contamos con un porcentaje muy bajo en su aplicación. Con el impulso de la biotecnología lograremos una mejora genética en nuestro país. NUEVAS LINEAS FARMACOLÓGICAS LLEGAN AL PAIS Nuevas líneas farmacológicas llegan al mercado del país con la distribución propia de “PRODUBIOGENSA”. semen congelado con porcentajes de fertilización cercanos a los ofrecidos por el semen refrigerado. CRIOCONSERVACIÓN SEMEN DE OVINOS DE La obtención y fraccionamiento del semen ovino para su utilización en fresco, permite acelerar el mejoramiento de las características productivas y reproductivas de los rebaños al aumentar el número de crías logradas con respecto a las que se obtendrán en servicio natural. “PRODUBIOGENSA” cuenta con técnicos preparados para realizar dicho servicio, en la cual vamos a crioconservar semen de ovino de diferentes razas existentes en el país. Laboratorio León Pharma es una empresa argentina de marca registrada, especializada en la fabricación y comercialización de productos para uso en medicina veterinaria. Con una importante experiencia en el mercado de grandes y pequeños animales; sus creadores lograron formar un equipo de trabajo altamente profesional, dedicado a captar y atender las necesidades reales de dichos segmentos, 31 cuenta con medicamentos de alta calidad, elaborados bajo Normas de Buenas Prácticas de Fabricación en establecimientos de reconocimiento técnico en Argentina y el mundo. Cuenta con una línea extensa tanto para grandes como para pequeños animales: Antiparasitarios / Antibióticos / Mineralizantes Vitamínicos / Anabolizantes / Antiinflamatorios / Antidiarreicos / Anestésicos - Tranquilizantes / Hormonales / Especialidades veterinarias. Laboratorios FARVIG SRL. Es un empresa argentina de especialidades veterinarias, surgido bajo el empeño de profesionales formados no solo en los claustros universitarios, sino en la práctica del campo y con un enfoque “productivista” de la actividad ganadera. Presentando una gama de variedad de productos. Su lanzamiento al mercado será muy pronto con excelentes descuentos y buenas promociones dando así un avance más al servicio de nuestro país. PORGEN PONE A DISPOSICIÓN SUS SERVICIOS Es sin lugar a duda el mejor equipo del mundo LO MÁS ACTUAL Y ÚNICO EN ECÓGRAFOS PORTÁTILES DEL MUNDO (IMAGO) El centro de mejoramiento genético porcino, con 12 años de trayectoria en el mercado de la comercialización de semen porcino pone a su disposición los mejores reproductores, garantizando calidad y buen servicio, cuidando siempre de mantener adecuadas medidas de bioseguridad y control sanitario para conseguir excelentes dosis seminales. Ponemos a su disposición varios sementales de alto valor genético, con líneas maternas, paternas y líneas finalizadoras, presentan un elevado rendimiento a la canal y tendencia a presentar (carne blanda, pálida y exudativa), con muy buenas conformaciones, excelente adaptabilidad y numerosos lechones por camada, con el objetivo de mejorar las explotaciones porcinas. Cuenta con promociones extraordinarias y asesoramiento técnico profesional. “PRODUBIOGENSA” cuenta con el ecógrafo IMAGO, lo más actual en ecografía, un equipo muy Compacto, portátil, muy ligero y extremadamente robusto, IMAGO responde perfectamente a todas las aplicaciones veterinarias. Concebido con las últimas tecnologías, IMAGO puede utilizarse con una larga gama de sondas multi-frecuencia (lineal rectal, lineal abdominal, convexa, sectorial). Gracias a una resolución de imagen de muy alta calidad, permite diagnósticos rápidos y fiables en todas las circunstancias. Su batería intercambiable garantiza una autonomía de una jornada intensiva de trabajo, y su colocación tipo bandolera aporta gran libertad de movimientos. Su concepción totalmente numérica (procesador +FPGA) hace posible la actualización de su IMAGO (Hardware y Software), permitiendo trabajar siempre con un ecógrafo con las últimas actualizaciones. DISTRIBUCIÓN EXCLUSIVA "BIOGENSA" ECUADOR 32 NOTICIAS VETERINARIAS INTERNACIONALES NOTICIAS ACADÉMICAS NOTICIAS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE ROSARIO (ARGENTINA) El acuerdo firmado entre la UNR, la UNER y el Gobierno de Entre Ríos permitirá que la carrera de Veterinarias dicte su ciclo básico en la ciudad de Gualeguaychú (Argentina) en 2013. Jorge Gerard (UNER), Darío Maiorana (UNR), gobernador Sergio Uribarri, Albor Cantard (UNL) y Gustavo Sanmiguel (Decano de Veterinarias UNR). La Universidad Nacional de Rosario (UNR) firmó un acuerdo con la Universidad Nacional de Entre Ríos (UNER), en el que junto al gobierno de la provincia de Entre Ríos, impulsarán a partir del próximo año el inicio al ciclo básico de la carrera de Veterinaria en la ciudad de Gualeguaychú. FUENTE: http://unr.edu.ar/noticia/5805/desde-el2013-veterinarias-podra-cursarse-en-gualeguaychu FERIAS CURSOS Y CONGRESOS SOciedad Latinoamericana de Dermatología Veterinaria Noviembre del 2013 se efectuara el 2do Congreso Latinoamericano de Dermatología Veterinaria que se llevara a cabo en Bogotá, Colombia. FERIAS VETERINARIAS INTERNACIONALES Feria Internacional de Veterinaria La Animal Vetex es una feria de la feria más grande serie de Europa Central. Importanet y las tendencias últimas, innovaciones tecnologías en el campo de la medicina veterinaria y la cría de animales y la cría fils presentados por empresas de clase mundial. Además, un extenso programa sobre temas de actualidad, con la participación de personalidades es importante es proporcionada. 19.03.2013 - 22.03.2013 Brno República Checa FUENTE:http://www.feriasinfo.es/Ferias-de-medicinaveterinaria-Y357-S1.html FERIA PARA LA MEDICINA VETERINARIA VET Middle East en Dubai es una co-ubicada evento dedicado a la industria veterinaria, paralelamente a la exposición AGRAme. VET Middle East se centró en el mercado veterinario cada vez mayor en el Oriente Medio, presentando la última tecnología, equipos, medicamentos y otros productos y servicios. Los expositores son de diversos países como los Emiratos Árabes Unidos, EE.UU., Reino Unido, Alemania, Nueva Zelanda, Croacia, República Checa, Arabia Saudita, Irán, India, Francia, China y Pakistán. La exhibición de productos y servicios innovadores atrajo a especialistas veterinarios, hospitales privados y clínicas de veterinarios, técnicos, comerciantes y distribuidores de todo el Oriente Medio. 26.03.2013 - 28.03.2013 Dubai EÁU FUENTE: http://www.feriasinfo.es/Ferias-de-medicina -veterinaria-Y357-S1.html NORLA (FERIA REGIONAL) Agricultural exhibition 05.09.2013 - 08.09.2013 Rendsburg Alemania Fuente: http://www.sociedadlatinoamericanadedermatologia veterinaria.org/ FUENTE: http://www. feriasinfo.es/Ferias-demedicina-veterinariaY357-S1.html 33 NOTICIAS VETERINARIAS NACIONALES I SIMPOSIO INTERNACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN ANIMAL ORGANIZA CONFERENCISTAS: • ESPAÑA • ARGENTINA • COLOMBIA • HONDURAS • ECUADOR • PERÚ A REALIZARSE: En Santo Domingo de los Colorados. Del 26 al 28 de Agosto INFORMES Y RESERVACIONES TELÉFONOS: (593-2) 2310-356 (593-2) 2316-935 CELULAR: 099369786 - 0997631194 MAIL: [email protected] [email protected] www.biogensa.com.ec Sigifredo Briones Mejía FALTAN VETERINARIOS ESPECIALISTAS Todas las profesiones evolucionan, la medicina veterinaria no está exenta de ella; la excelencia académica da lugar a que los nuevos veterinarios especialistas con sus conocimientos científicostécnicos contribuyan a la seguridad alimentaria del pueblo; y al ser una profesión humanista desempeña una indispensable e importante labor en la prevención de las diversas enfermedades zoonósicas que se presentan en el país y que muchas pasan desapercibidas. FUENTE: http://www.eldiario.com.ec/noticias-manabiecuador/238586-faltan-veterinarios-especialistas CASA DEL GANADERO Al servicio del agro ecuatoriano Los mejores productos veterinarios y agrícolas TELFS: 2315 067 / 2316822 Machachi Ecuador 34 IIDEENCUENTRO NACIONAL INSEMINADORES DE GANADO BOVINO ORGANIZA EN LA CIUDAD: Machachi FECHA: 26 DE ABRIL DEL 2013 LUGAR: COSTO: SALÓN DE RECEPCIONES “LA TESALIA” $10.00 INCLUYE: Material Didáctico Compendium Memorias (CD) Certificado de asistencia Almuerzo / Refrigerio INSCRÍBETE YA: 2310-356 / 2316-935 0997631194 / 0997630874 MAIL: [email protected] [email protected] CUPOS LIMITADOS 35 36 NORMAS PARA PUBLICAR UN ARTÍCULO CIENTÍFICO EN LA REVISTA SEMEN Y EMBRIONES Normas para la publicación de trabajos científicos en revistas biomédicas. En Enero de 1978 un grupo de directores de Revistas Biomédicas se reunieron en Vancouver Canadá para fijar pautas con respecto a la presentación de manuscritos enviados a revistas biomédicas. Este grupo conocido como “El Comité Internacional de Directores de Revistas Médicas” o también conocido como “Grupo Vancouver”. El comité ha elaborado los requisitos uniformes para preparar los manuscritos que se envían a las revistas médicas. El Centro Nacional de Información de Ciencias Médicas del Ministerio de Salud Pública También ha dictado estas normas para los manuscritos enviados a la editorial de Ciencias Médicas (ECIMED). Los requisitos son los siguientes: Los artículos deben ser originales. Inéditos, no aceptados ni enviados a otras revistas. ni arreglos; margen 2.5 cm., 60 caracteres/línea, 28-30 líneas por cuartilla. Todas las páginas se numerarán con números arábigos y consecutivamente a partir de la primera. Los artículos se presentarán mecanografiados en papel blanco, a doble espacio, escrito por una sola cara, sin tachaduras Los trabajos aceptados pasan a ser propiedad de la revista y los autores renuncian a los derechos de publicación. Los trabajos con más de un autor deben ser leídos y aprobados por todos los firmantes. Calidad - Seguridad - Eficiencia PLAN DE FERTILIZACIÓN EN CULTIVOS MANEJO INTEGRADO DE PLAGAS Y ENFERMEDADES LÍNEA AGRÍCOLA • Insecticidas • Fungicidas • Herbicidas • Fertilizantes • Bactericidas ALIMENTOS Y BALANCEADOS • Aves - Cerdos • Bovinos - Equinos • Mascotas • Sales Minerales ANÁLISIS Y RECOLECCIÓN DE: SUELOS, AGUA Y FOLIARES LÍNEA VETERINARIA Medicina • Vitaminas • Vacunas • Desparasitantes • Ecografía Veterinaria • Inseminación • Artificial LÍNEA AGRÍCOLA Pastos • Hortalizas • Legumbres • Papas • MATRÍZ: Pilongo, Camino a San Antonio de Chanizas S 2-163 y Barriga Telfs.: 2316758 / 0995038230 SUCURSAL: Nestor Cueva OE 4-78 y Barriga (Tras del Estadio El Chan) E mail: [email protected] MACHACHI - CANTÓN MEJÍA 37 El Consejo de Redacción de la revista no acepta responsabilidades derivadas de las afirmaciones realizadas en el trabajo. Segunda página. Los trabajos serán examinados por el Comité de Redacción y enviados a dos expertos (árbitros) para su evaluación. Propósitos, procedimientos empleados, resultados más relevantes y principales conclusiones del trabajo. El Comité de Redacción, de acuerdo con la opinión de los expertos se reserva el derecho de rechazar artículos que no considere adecuados, proponer modificaciones del texto, eliminar tablas y figuras, modificar el estilo, lingüística, respetando siempre el contenido y con la autorización del autor. • Pueden enviarse versiones electrónicas en CDS. o a través del correo electrónico. Tipos de publicaciones que se aceptan. • Editorial • Trabajos originales • Notas experimentales • Comunicaciones breves • Notas clínicas • Artículos de revisión • Cartas del editor • Noticias • Otras -Conferencias clínicas -Reseñas de libros -Comentarios -Estadísticas -Historia -Arte y medicina -Colaboración extranjera -Estudio controlado aleatorio -Estudio multicéntrico Palabras claves (3-8) Tercera página en adelante. 3.-Texto ordenado según los siguientes epígrafes independientes. • • • • Introducción Métodos Resultados Discusión 4.-Agradecimientos, si los tiene 5.-Referencias bibliográficas. Citas de revistas; el 75 % de los últimos 7-10 años. Libros de los últimos 5-7 años. En hojas aparte, según párrafo francés. Siguiendo las recomendaciones de “Las Normas de Vancouver”. Enumeradas según orden de aparición en el texto en números arábigos y en forma exponencial. • • • • Trabajos originales: no mas de 20 citas Revisiones: de 25-50 citas Comunicaciones breves e informe de casos: 10 citas. Debe evitarse la mención de comunicaciones personales y documentos inéditos. Estos se mencionarán en el texto entre paréntesis. El autor deberá especificar en que apartado desea se incluya su trabajo. El Comité de Redacción se reserva el derecho a su clasificación. 6.-Tablas: Cada una en hoja aparte con título y nota de pie. Primera página: 8.-Carta de presentación del manuscrito, firmado por todos los autores, en que se hace constar la aceptación de las instrucciones. 1.-Título: máximo 15 palabras Orden de los trabajos. • • • • 38 2.-Resumen: 150 palabras como máximo. Debe contener: Autor (es). Nombre completo, ordenado según su participación Institución (es) Dirección (es). Incluyendo dirección electrónica Notas académicas no burocráticas. Grado científico. Categoría científica o docente. 7.-Figuras: Cada una en hoja aparte con título y nota de pie. CARACTERÍSTICAS DE LAS PUBLICACIONES QUE SE ACEPTAN EN REVISTAS BIOMÉDICAS. Editorial Es una declaración de opiniones, creencias o política del editor de la revista; sobre asuntos de significado médico o científico. Expresan un estado de opinión o una puesta al día sobre determinado tema científico. TRABAJOS ORIGINALES. Describe resultados originales de investigación, trabajos prospectivos de investigación clínica o experimental. Otras contribuciones sobre etiología, fisiología, anatomía patológica, epidemiología, métodos diagnósticos y tratamientos. Extensión: 8 páginas (incluidas las tablas y figuras o gráficos) Autores: 6 Tablas y figuras: 6 en total Referencias bibliográficas acotadas. NOTAS EXPERIMENTALES O COMUNICACIONES BREVES (Artículos cortos). Representa resultados definitivos o preliminares de investigación. Avances sobre técnicas de diagnóstico o tratamiento y otros de interés que justifiquen su publicación. Debe contener: Objetivos, métodos, resultados y discusión. NOTAS CLÍNICAS. Extensión: 4 páginas Tablas y figuras: 2 Referencias bibliográficas acotadas. Descripción de uno o varios casos clínicos de excepcional observación o de algún nuevo aspecto de una enfermedad o síndrome previamente conocido, que representa una aportación de especial interés. Estructura: Introducción, casos clínicos, métodos y comentarios Extensión: 4 páginas, a doble espacio Tablas y figuras: 2 Referencias acotadas. ARTÍCULOS DE REVISIÓN Se refiere a un material ya publicado, con el cual se recopila, analiza y sintetiza el estado actual de la investigación, sobre un tema concreto. Debe indicarse: Propósito de la revisión Fuentes y métodos de búsqueda de referencias. Estructura: Recogida de la información, análisis, conclusiones. Son artículos por encargo que lo hace el Comité de Redacción a personas de alto prestigio científico y mucha experiencia en la especialidad. Extensión: 12 páginas Tablas y figuras: 6 Autores: Hasta 6 CARTAS AL EDITOR Comentarios u objeciones relativas a artículos publicados en una revista. Informe o hallazgos preliminares de una investigación inconclusa en breve texto. Extensión: 2 páginas Autores: 2 Referencias bibliográficas. NOTICIAS • • • • • Noticias de Sociedades Científicas Anuncios de Eventos Científicos Informes y memorias Cursos, reuniones o congresos Premios, becas PREPARACIÓN DEL MANUSCRITO Trabajos originales experimentales. y notas No subtítulo, no abreviaturas, siglas ni jergas y ordenado de lo general a lo particular. Que exprese el contenido del texto y que pueda ser registrado en los índices nacionales e internacionales. Evitar palabras superfluas tales como: • • • Estudio sobre Investigación a cerca de Análisis de los resultados AUTORES • Nombre y apellidos completos de todos los autores • Grados académicos • Nombre y dirección del autor principal. Correo electrónico. • Institución (es): Nombre o nombres de los centros donde se realizó el trabajo. RESUMEN • • • • • • • Será conciso: 150-250 palabras Debe incluir: Objetivos, Cual es el problema principal y propósitos del estudio Como se realizó el trabajo Cuales son los hallazgos principales y conclusiones (más importantes). No abreviaturas No referencias bibliográficas No tablas ni figuras. PALABRAS CLAVES Señalar de 3-8 palabras claves para facilitar la inclusión en los índices internacionales y nacionales. Premisa fundamental: La redacción científica y técnica debe ser comprendida desde la primera lectura por el lector promedio que conoce la disciplina general. Contiene 4 independientes: Una de las partes más importantes del trabajo. Debe escogerse con mucho cuidado para que sea breve, claro, atractivo y codificable. Máximo 15 palabras. • • • • Introducción Métodos Resultados Discusión -Expone de forma breve y concisa el problema con análisis de sus antecedentes -Establece claramente el objetivo de estudio, así como las hipótesis -No incluye resultados ni conclusiones. Métodos: Redactado en forma clara, que proporcione información para que otro investigador pueda repetir el estudio. Debe describir el diseño general de la investigación, definir el universo y la muestra, así como las técnicas y métodos empleados, las variables y los análisis estadísticos. Materiales y equipos: Con modelos y marcas Fármacos: Nombre genérico Productos químicos: Nombre comercial (entre paréntesis), precedido del nombre genérico. Drogas: Dosis y vías de administración Métodos estadísticos seguidos y razones de su elección. Si son métodos habituales y conocidos; poner solo las referencias y describir los métodos nuevos. No usar términos como: • Al azar • Normal • Significativo • Correlación • Muestra • Validez TENER PRESENTE ASPECTOS ÉTICOS. epígrafes LOS Resultados: • • TEXTO TÍTULO Introducción: • • • • Los resultados relatan, no interpretan las observaciones Es la parte más corta y esencial del artículo. Representa los nuevos conocimientos que se están aportando Deben ser claros, precisos y sin exceso de palabras Mencionar solo los resultados más relevantes Presentar preferentemente en forma de texto Las tablas y figuras para reforzar la información. Discusión: • Debe referirse a los aspectos nuevos e importantes del estudio 39 • • • • • No repetir información presentada en la introducción, resultados etc. Analizar los resultados dentro del contexto de los conocimientos existentes, su limitaciones Señalar similitudes y diferencias entre su trabajo y otros autores, emitir su criterio. Ideas claras, breves y precisas. Proponer nuevas hipótesis Establecer nexos entre conclusiones y objetivos. Agradecimientos: Mencionar a las personas o entidades que hayan contribuido de forma significativa a la realización del trabajo. Citar a las personas que necesitan ser reconocidas. Referencias bibliográficas: • • • • • • Se enumeran y ordenan por orden de aparición en el texto Artículos revisados: solo seleccionar los más importantes en relación con su trabajo, publicados en revistas o libros No se incluyen comunicaciones personales No se incluyen trabajos no publicados. Se pueden incluir en el texto entre paréntesis Trabajos publicados en revistas: poner (en prensa) No utilizar como referencias: -Resúmenes -Tesis de residentes -Otros materiales no asequibles -Tesis de residentes o doctorados no publicados (se anotarán al pie de la página) Secuencia revistas para artículos de -Apellidos -Iniciales del nombre de todos los autores, hasta 6, después "et al' -Titulo del trabajo en el idioma original -Abreviatura del nombre de la revista de acuerdo al "Index Medicus" -Año de publicación -Volumen y página primera y última del trabajo. Ejemplos: 1,-Halpem SD, Ubel PA, Caplan 40 AL. Solid-organ transpíantation in HlV-infected patients. N EnglJ Med. 2002 Jul 25; 347(4):284-7. 2,-Rose ME, Huerbtn MB, Melick J, Marión DW, Palmer AM, Schldmg JK, et al. Regulatton of interstitial excttatory amino acid concentration after cortical contusión injury. Brain Res. 2002; 935 (1-2): 40-6. Secuencia para libros: -Autores -Título del libro -Número de la edición -Lugar de a publicación -Editor -Año de publicación -Primera y última página. Ejemplos: 1.-Murray PR, Rosenthai KS. Kobayashi GS, Pfaiier MA. Medical Microbioiogy. 4th ed. Sí. Louis: Mosby;2Q02. 2.-Breediove GK, Schorfheide AM. Adoíecent pregnancy. ¿*d ed. Wíeczorek RR editor, Whiíe Piains (NY): March of Dimes Education Services; 2001. 3.-Meitzer PS, Kalliorílemi A, Tren JM. Chromosome aiterations in human soitd tumors. in: Vogelstein B, Ktnzter KW, edítors. The genetíc basics of human cáncer. Ney York: Me Graw-Hill; 2002, p:93-113. Según actualización del 9 de Julio del 2003 del "Comité Internacional de Editores de Revistas Médicas" (ICMJ), se consideran como bibliografía acotada las revisiones que aparecen en soporte electrónico; tales como: TABLAS. • • • • • FIGURAS. • • • • ABREVIATURAS Y SÍMBOLOS. • • • Precedidas por el nombre completo la primera vez que aparecen en el texto Se emplean las de uso internacional Se utiliza el Sistema Internacional de Unidades (SIU) Los resultados de labóratelo deberán informarse en unidades SIU. ETICA. • Cuando se informe sobre experimentos en seres humanos, señalar si los procedimientos estuvieron de acuerdo con las normas éticas del Comité de Ética de la institución que supervisa la experimentación en seres humanos o con la declaración de Helsinki de 1975, enmendada en 1983 • No use el nombre, las iniciales ni el número de clave hospitalaria de los pacientes • En experimentos con animales mencionar si se cumplieron las normas sobre este aspecto en cada uno de los países. Abood S. Quaiity improvement initiative ín nursing homes: the ANA acts in advisory role. Am J Nurs (Seria! on the Internet), 2002 Jun (cited 2002 Aug 12); 102(6): (about 3 p). Available frorn: h üp :/www. nursingwo rtd. org/A JN/2 002/jun e/wa watch.htm Cancer-pain. Org (homepage on the Internet). New Cork: Associatíon of Cáncer Online Resources, !nc;c2001-01 (update 2002 May 18; cited 2002 Juf 9). Available frorn: http:/www.cancer-pain.org/. Fotografías: Papel de brillo con suficiente nitidez Gráficos, dibujos, esquemas: confeccionados con tinta mina en papel blanco (15 cm. de ancho) Salida de computadora otros Tendrán numeración arábica consecutiva. Cada tabla o figura llevará en el reverso un papel adhesivo o escrito a lápiz, el número correspondiente y flecha que indique la parte superior. Artículo de revista en Internet: Página principal de un sitio Web. En hojas apartes No se intercalan en e articulo Se enumeran consecutivamente, números arábicos y mencionadas en el texto No se aceptan en papel fotográfico Tamaño de una página. GENÉTICA BOVINA ECUATORIANA CON PRUEBAS GENÓMICAS JERSEY HOLSTEIN NEGRO HOLSTEIN ROJO BROWN SWISS PIZAN GYR LECHERO NORMANDO GYR - HOLANDO CHAROLAIS SIMMENTAL BRAHAMAN 50% TARANTES Y 50% JERSEY SU AVANCE TECNOLÓGICO ES NUESTRA PASIÓN Machachi: Calle Jaime Roldos Aguilera 02-79 y Av. Pablo Guarderas Urb. El Campo Pedidos: (593 - 2) 2310-356 / 2316-395 41 DIRECCIÓN: Machachi, Calle Jaime Roldos Aguilera 02-79 y Av. Pablo Guarderas Urb. 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PRESENTACIÓN: 5-10-20-40 KG REGISTRO SANITARIO: 1 AB 6511 AGROCALIDAD LOTE: 1701013 FECHA DE ELABORACIÓN: FECHA DE CADUCIDAD: LOTE: 1701013 PREPARADO Y ELABORADO PARA BIOGENSA POR LA EMPRESA SIAP ANIMAL NUTRICIÓN DISTRIBUIDO POR: DIRECCIÓN: Machachi, Calle Jaime Roldos Aguilera 02-79 y Av. Pablo Guarderas Urb. El Campo Telfs: (593 - 2) 2310-356 / 2316-395 Email: [email protected] / [email protected] www.biogensa.com.ec 43 44