tiempo de trombina (tt)

THROMBIN TIME (TT)
COD 61000
CONSERVAR A 2-8ºC
Reactivos para la determinación de TT
Solo para uso in vitro en el laboratorio clínico
TIEMPO DE TROMBINA (TT)
FUNDAMENTO DEL MÉTODO
CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
La adición de trombina humana en muestras de plasma induce la formación del coágulo de
fibrina1. El método mide el tiempo que tarda en formarse el coágulo.
− Repetibilidad (intraserie):
Promedio TT (s)
CV %
n
2,53
10
CV %
n
5,05
10
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
20,6
A. Reactivo 4 x 3 mL. Trombina humana en medio tamponado de calcio y estabilizantes.
Liofilizado.
− Reproducibilidad (interserie):
CONSERVACIÓN
Promedio TT (s)
Conservar a 2-8ºC.
Los Reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre
que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
REACTIVOS AUXILIARES
Control de Coagulación I (BioSystems Cod. 61007), Control de Coagulación II (BioSystems
Cod. 61008).
− Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias
sistemáticas significativas al ser comparados con reactivos de referencia. Los detalles del
estudio comparativo están disponibles bajo solicitud.
− Interferencias: Algunos medicamentos y sustancias pueden interferir4.
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Reactivo A: Añadir la cantidad de agua destilada indicada en la etiqueta. Agitar con
suavidad (Nota 1) y mantenerlo a 18-25ºC durante 30 minutos. Estabilidad en el vial original
una vez reconstituido: tres días a 22ºC, cinco días a 15ºC y siete días a 2-8ºC.
No congelar.
EQUIPO ADICIONAL
− Coagulómetro
MUESTRAS
Sangre venosa obtenida mediante venopunción2. Mezclar nueve partes de sangre con una
parte de trisodio citrato dihidrato 0,109 mol/L. Mezclar suavemente la sangre y centrifugar a
1500 x g durante 15 minutos para obtener el plasma3.
Las muestras no centrifugadas o las centrifugadas sin separar el plasma de los
componentes celulares se pueden conservar hasta 4 horas a temperatura ambiente3. El
plasma separado (sin células) se puede conservar hasta quince días a -20ºC o hasta seis
meses a -70ºC. Descongelar los plasmas congelados a 37ºC justo antes de ser utilizados3.
Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al
cambiar de instrumento o realizar el procedimiento manualmente.
CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
El TT (tiempo de trombina) es una prueba simple utilizada para determinar la formación de
fibrina en el diagnóstico de trastornos de la coagulación y en el examen de la efectividad de
la terapia fibrinolítica. El TT puede verse incrementado en:
− anormalidades del fibrinógeno: anormalidades cualitativas (disfibrinogenemia) o
cuantitativas (hipofibrogenemia congénita y afibrinogenemia, hipofibrogenemia adquirida
como en la enfermedad hepática, coagulación diseminada intravascular, fibrinolisis).
− la presencia de antitrombinas, tanto terapeuticas (heparina, hirudina, argatroban) o
anormales (proteínas de mieloma inhibidoras de la polimerización de los monómeros de
fibrina).
El TT es normal en déficit de factor XIII (factor estabilizante de fibrina)5.
NOTAS
1. No agitar el vial (es preferible un movimiento de inversión) y evitar la formación de
espuma. Puede ser necesario el uso de una barra de agitación.
PROCEDIMIENTO
1.
2.
3.
4.
5.
20,9
Atemperar el Reactivo A a temperatura ambiente.
Pipetear 100 µL de muestra (plasma de paciente o control) en el tubo de ensayo.
Incubar la muestra a 37ºC durante 2 minutos.
Pipetear 100 µL de Reactivo A y simultáneamente poner el cronómetro en marcha.
Determinar el tiempo de coagulación.
Este procedimiento es válido para coagulómetros manuales o semiautomáticos. En el caso
de hacer la determinación en un coagulómetro automático, consultar las instrucciones
específicas en el manual de usuario.
BIBLIOGRAFÍA
1. David Lillicrap; Nigel Key; Michael Makris; Denise O'Shaughnessy (2009). Practical
Hemostasis and Thrombosis. Wiley-Blackwell. p. 53
2. CLSI. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture;
Approved Standard-Sixth Edition. CLSI document H3-A6.
3. CLSI. Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Testing PlasmaBased Coagulation Assays; Approved Guideline—Fifth Edition. CLSI document H21-A4.
VALORES DE REFERENCIA
4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
− Menos de 30 segundos.
5. Caen J, Larrieu MJ, Samama M. L'hemostase: Méthodes d'exploration et diagnostic
practique. Paris: L'Expansion scientifique, 208-209, 348-351, 1975.
Estos valores se dan únicamente a título orientativo. Cada laboratorio debe establecer sus
propios intervalos de referencia.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda el uso de Control de Coagulación I (BioSystems Cod. 61007) y el Control de
Coagulación II (BioSystems Cod. 61008) para verificar la funcionalidad del procedimiento de
medida
Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno, así
como procedimientos de corrección en el caso de que los controles no cumplan con las
tolerancias aceptables.
M61000c-01
BioSystems S.A. Costa Brava, 30. 08030 Barcelona (Spain)
Quality System certified according to
EN ISO 13485 and EN ISO 9001 standards
09/2013