TEMA 8: HEMATOLOGÍA Células: • Hematíes: Anemia

TEMA 8: HEMATOLOGÍA
Células:
•
Hematíes: < Anemia, > Policitemia
•
Leucocitos:<Leucopenia,>Leucocitosis
•
Plaquetas: <Trombocitopenia,
> Trombocitosis
Análisis
sistemático
de
sangre:
recuento de células sanguíneas,
fórmula leucocitaria, concentración de
hemoglobina y hematocrito.
Recuento de células sanguíneas =
citometría hemática o hemocitometría
a) Métodos ópticos
b) Métodos automáticos: basados en
variaciones en la conductividad o
resistencia, basados en la difracción
de la luz
Fórmula
leucocitaria:
proporción
presente en la sangre de cada tipo de
leucocito
Métodos:
a) Extensiones sanguíneas
b) Métodos automáticos ej. mediante
sistemas
de
citoquímica
celular.
Fundamento: tamaño y tinción.
Utiliza dos canales: 1. canal de la
peroxidasa y 2, canal de basófilos
/lobularidad.
Canal de la peroxidasa:
A: Linfocitos
B: Monocitos
C: Neutrófilos
D: Eosinófilos
E: LCU, células
de gran tamaño
Células sanguí
sanguíneas
Plaquetas,
linfocito
Monocito
Neutrófilo
Eosinófilo
Basófilo
Neutrófilos: 3.500-7.000/mm3, 60-70%
Eosinófilos: 150-400/ mm 3, 2-4%
Basófilos: 50-100/ mm 3, < 1%
Linfocitos: 1.500-2.500/ mm3, 20-25%
Monocitos: 200-800/ mm3, 3-8%
Eritrocitos: 4,5-5 millones/ mm3
Plaquetas: 200.000-300.000/ mm 3
EXPLORACIÓN DE LA FASE DE
COAGULACIÓN
DEFINICIÓN: Medición “ in vitro” del tiempo que tarda la sangre
en formar un coágulo.
ASPECTOS PRÁCTICOS:
•Extracción de la sangre: punción limpia para que no se contamine con el factor
tisular
•Muestra: normalmente se utiliza plasma, debe obtenerse lo antes posible. Si se
forma algún coágulo la muestra no es válida
•Anticoagulante: Citrato sódico al 3,8% en proporción 1:10 (ej. 1 ml de
anticoagulante por 9ml de sangre)
DETERMINACIONES:
TIEMPO DE COAGULACIÓN: tiempo que tarda en coagular la
sangre sin anticoagulantes a 37ºC depositada en un tubo de
cristal.
• V.N. 8-12 minutos
• Valoro la vía intrínseca
• Método de Lee-White
TIEMPO DE CEFALINA PARCIALMENTE ACTIVADA
(TTPA): tiempo de coagulación de un plasma citratado pobre en
plaquetas al que se añade Ca+2 un fosfolípido (cefalina) que
sustituye al factor plaquetario III y un activador.
• V.N. 30-40 segundos (no debe exceder en 8 segundos al patrón)
• Valoro vía intrínseca salvo el factor plaquetario
TIEMPO DE PROTROMBINA O TIEMPO DE QUICK: Mide
el tiempo de coagulación de un plasma al que se añade calcio y
tromboplastina tisular
• V.N. 10-15 segundos
• Valoro la vía extrínseca de la coagulación
TIEMPO DE TROMBINA: tiempo de coagulación de un plasma al
que se le añade trombina
• V.N. 15-20 segundos. Diferencias de 5 segundos con el tiempo
de un plasma testigo son significativas
• Valoro:
1) cantidad y calidad de fibrinógeno presente
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2) Presencia o no de antitrombinas
EXPLORACIÓN DE LA FASE DE COAGULACIÓN-METODOLOGÍATIEMPO DE COAGULACIÓN
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Método de Lee-White:
Partimos de dos tubos de cristal introducidos en un baño a 37ºC
Depositamos aproximadamente 1 ml de sangre sin anticoagulante en cada tubo y
ponemos en marcha el cronómetro
Uno de los tubos se saca del baño cada 30 segundos y se inclina para ver si fluye la
sangre
Cuando la sangre no fluya se saca el segundo tubo del baño cada 15segundos, cuando
la sangre no fluya se para el cronómetro y se anota el tiempo.
TIEMPO DE CEFALINA PARCIALMENTE ACTIVADA (TTPA)
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Recoger la sangre sobre citrato sódico y centrifugar 10 min a 3000rpm para obtener el
plasma
En un tubo de hemólisis calentado depositar 0.1ml de plasma + 0.1ml de cefalina con
activador
Mezclar e incubar 3 min a 37ºC
Añadir 0.1ml de Cl2Ca 0.025M y poner en marcha el cronómetro
Agitar sin sacar el tubo del baño
Sacar el tubo a los 30 segundos y anotar el tiempo de coagulación
El ensayo se debe realizar por duplicado, en las 3 horas siguientes a la extracción y
comparando con un patrón
TIEMPO DE PROTROMBINA O T DE QUICK
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Esta determinación se utiliza para el control del tratamiento con anticoagulantes orales
En un tubo de hemólisis se depositan 0.1 ml de plasma y se incuba 2 minutos a 37ºC
Transcurrido ese tiempo se añade 0.2 ml de tromboplastina cálcica previamente
precalentada (15 minutos a 37ºC) y se pone en marcha el cronómetro anotándose el
tiempo de coagulación
El ensayo se hace por duplicado y comparando los resultados con los de un patrón.
Debe llevarse a cabo en las 4horas siguientes a la extracción.
TIEMPO DE TROMBINA
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Se incuban 0.2 ml de plasma durante 2 minutos a 37ºC
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Se añade 0.2 ml de trombina cálcica, se pone en marcha el cronómetro y se anota el
tiempo de coagulación
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El ensayo se realiza por triplicado, obteniéndose el valor medio. Los resultados se
comparan con los de un patrón.