Cultivo en tambo Martín Pol, Veterinario, M. Sc.
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Cultivo en tambo Martín Pol, Veterinario, M. Sc. Costo de la Mastitis Clínica • Es la enfermedad más frecuente y costosa de las vacas lecheras • Pérdidas de mastitis clínicas incluyen: – – – – Leche descartada Menor producción Descarte prematuro Costo de tratamiento • Los productores de Wisconsin estiman que cada caso cuesta $91.00 USD Costos estimados Caso Clínico Drogas 21% Vet & Trab. Leche 19% desc. 60% Rodrigues, Caraviello & Ruegg, JDS 2005 Principios de un tratamiento eficaz • Identificación temprana del caso • Estimar la probabilidad de éxito • Diagnóstico presuntivo del agente causal Tratar o No Tratar? Antibióticos IMM disponibles Estreptococos Estreptococos ambientales ambientales (cura) • Ambientales • no Contagiosos tienen efecto sobre – Coliformes 100% 100% – Staph. aureus coliformes – Estreptococos amb. – Strep. agalactiae 80% 80% Terapia ATB orientada hacia – Otros – Mycoplasma el tercer compartimiento: 60% 60% la vaca • Estreptococos: ATB! • Agalactiae y aureus 40% 40% necesitan Además de tratamiento ATB: fluídos, AINE, antimicrobiano • Coliformes: No ATB! oxitocina y ordeño 20% 20% 0% • 0% Mycoplasma no responde bien al tratamiento Espontánea CLINICA Trat SUBCLINICA MC ($) Crónica Hogan & Smith, Todhunter et 1985 Schukken et al., al, 2003 2004 Streptococos ambientales • Streptococos NO agalactiae – Strep uberis – Strep dysgalactiae • Tendencias estacionales en la infección • Tasa de cura espontánea es alta – También la tasa de repetición si no se trata adecuadamente • Los casos clínicos necesitan tratamiento intramamario agresivo Tasa de Cura Bacteriana Sin Antibióticos Antibióticos 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% Wilson '99 Morin '98 Tasas de cura de mastitis inducidas por Strep uberis Sin Tratamiento 100% 90% A: 2X Jeringas 3 días B: 1X IM 3 days 80% 70% 60% A & B 50% 40% C: 1X Jeringas 3 días 30% 20% D: Oxitocina 10% C & D 0% Cura Clínica Cura Bacteriológica Hillerton & Kleim, 2002 Mastitis por coliformes • Amplio uso de vacunas J-5 redujo la cantidad de casos – E. coli severos – Klebsiella • Cerca del 40% de las vacas severamente enfermas • La causa más importante pueden desarrollar de mastitis severas bacteremia • Coliformes – La mayoría de los casos son leves y moderados – 10-30% son severos – 20-25% de los severos, mueren – Wenz et al., 2002 • Uso de Ceftiofur IM diariamente mejoró el resultado clínico de las vacas severamente enfermas – Erskine et al., 2002 Propuesta Clásica • Los resultados de cultivo no están a tiempo para decidir el tratamiento “Si parece coliforme, no tratar con ATB” • … pero los síntomas clínicos no son buenos para predecir el agente… Cultivo en Tambo • Diferencia patógenos que necesitan tratamiento de ATB de los que no necesitan ATB • Severidad 1 y 2 esperan 24 hs para iniciar tratamiento ATB • Severidad 1: Leche alterada (resto OK) • Severidad 2: Leche alterada y cuarto inflamado • Severidad 3: Enfermedad sistémica • Tratar según resultado del cultivo • Severidad 3: Terapia de soporte desde el diagnóstico Protocolo de tratamiento basado en cultivos Con fiebre Severidad 3 • AINEs • Fluídos orales • Monitoreo • ATB inyectable? Mastitis Clínica Protocolo de tratamiento basado en cultivos Sin fiebre Severidad 1o 2 Mastitis Clínica • Cultivo y Lectura en 24 hs Coliforme • Sin ATB IMM Sin Desarrollo • Sin ATB • AINEs, Fluídos (según Sev) •AINEs, Fluídos (según Sev.) • Monitoreo •Monitoreo • • No tratar hasta cultivo Descartar leche del ¼ AINEs si es “2” Gram + • Pomo • Inyectables (Sev. 2) •AINEs (Sev. 2) Clinical Mastitis Pathogen Isolation Mastitis cow Clinical mastitis Score 1 abnormal-milk 2 Abnormal-milk, udder 3 Abnormal-milk, udder, cow Clinical Physical Exam Subclinical CMT Score N No gelling T Slight gelling 1 Mild gel 2 Moderate gel 3 Thick gel TKT agar MacConkey agar TKT agar selects for Streptococcial growth Esculin rxn : (+) black colonies Coliform selective Lactose positive - pink colonies Bile salt ppt - pink cloudy around colony neg Culture Blood Agar pos All bacteria grow on blood agar Gram neg Gram pos Coliform No Growth No antibiotics; Banamine, if fever; Monitor cow No antibiotics; Banamine, if fever; Monitor cow Gram pos. cocci Strep ag Strep sp. Gram-pos cocci H2O2 neg CAMP Test - pos (arrow shape) Gram-pos cocci H2O2 - neg CAMP Test - neg Strep dysagalactiae Strep uberis Enterococci H202 rxn H2o2 (-) H2O2(+) Staph aureus Intramammary antibiotic therapy; Flag records; Cull? Strep - negative Staph - positive H2O2(+) Staph sp Intrmammary antibiotic therapy; Flag records Sears , 2003 Example SOP Clinical Mastitis Decisions Clinical Mastitis Score 1 abnormal milk 2 abnormal milk, quarter 3 abnormal milk, quarter, cow Clinical Mastitis No Fever Clinical Score: 1 or 2 Fever Clinical Score: 2 or 3 Culture (BA/TKT/MAC) Oxytocin & milk out recheck at 12 hours Oxytocin & milkout Banimine recheck 12 hrs If sick; Naxel*, recheck Staphylococci (BA) Staph aureus ID - segregate/leg band Dry off Cull Flag records; Treat - recheck (3) If positivecull chronic IMI Streptococci (BA/TKT) Staph sp Treat CM; Intramammary antibiotic therapy; Flag records Strep ag ID-segregate; Intramammary antibiotic therapy all 4 quarters; Reculture (3x) ID & segregate Cull chronic IMI; Monitor bulk tank (wk/mo) Strep sp Treat CM Intramammary antibiotic therapy Coliform (BA/MAC) Klebsiella sp E. coli/no growth Naxel* Banimine (fever) Monitor cow no antibiotics Banimine (fever) * Extra-label Use AABP 1999 Uso de protocolos de tratamiento en lecherías C lin ica l M a stitis H A S FE V E R Treat w ith Banam ine or Asp irin, O ral or H yp ertonic Fluid s, M onitor D aily, G ive antibiotics as indicated . N O FE V E R C ulture –D on’t treat w ith antibiotics until culture re sults are com plete P h y sic al E xam C U LT U R E 1 cc M ilk O N P E TR IFILM ™ 1. S tap h a u reu s; 2 . C olifo rm ; 3 . A ero b ic S ta ph a u reu s Positive C o lifo rm P o sitiv e N o A ntibiotics, Treat w ith A ntiin flam atories, fluids, m on itor as necessary C h eck S C C N ew In fection , If chronic – no Treatm ent, seg reg ate, quarter m ilk or cull 1 st case, sing le quarter, lactation= 1 or 2 Treat 6 d ays in quarter w ith Pirsue ® N o G ro w th a t A LL N o Antibiotics, Treat w ith A ntiinflam atories, fluids, m onitor as necessary A ero bic P ositiv e Probable Strep Treat accordin g to Farm Protocols R esu lt C U LL B ac k to H E R D Adapted from Sears et al., 2003 Qué se necesita? • Suficientes casos clínicos para ser competente • Personal del tambo con interés • Estufa, heladera • Lugar apropiado • Tambo Ideal – Poco Strep ag o aureus • Entrenamiento Protocolos de tratamiento en tambo • Los protocolos de tratamiento deban ser: – Específicos de cada tambo – Basados en un diagnóstico presuntivo u objetivo – Por períodos de tiempo apropiados • Antibióticos para Gram + • Algunos tambos están empezando a basar los tratamientos en los resultados de cultivo – BiPlacas – TriPlacas – Petrifilm™ aeróbicos Staph aureus Coliformes Biplacas para Cultivo en Tambo • Medio selectivo para Gram (+) y para Gram (–) GRAM + • 4 resultados posibles – – – – Sin desarrollo Gram (-) Gram (+) Contaminada NT T • 2 decisiones posibles GRAM - Biplacas para Cultivo en Tambo Gram Negativo Biplacas para Cultivo en Tambo Gram Positivo Easy Culture II System BiPlaca TriPlaca Manejo de vacas NO ATB • Si tienen un sólo cuarto afectado y no se tratan con ATB – Uso del ordeñador de cuartos y permanecen en el rodeo de producción – 3 cuartos buenos al tanque • Si tienen 2 o más cuartos afectados – Van al hospital y se descarta la leche mientras esta sea anormal Manejo de los animales con mastitis • Vaca 1: mastitis 1 cuarto • Vaca 2 mastitis en 2+ cuartos • Sin ordeñador de cuartos Lunes AM CET durante lavado del tambo Lunes PM Martes AM DIAGNOSTICO ANTES HOSPITAL Martes AM Manejo de los animales con mastitis • Vaca 1: mastitis 1 cuarto • Vaca 2 mastitis en 2+ cuartos • Uso del ordeñador de cuartos NO TRATAMIENTO TRATAMIENTO Lunes AM CET durante lavado del tambo Lunes PM Martes AM DIAGNOSTICO ANTES HOSPITAL Martes AM Eficacia y características del CET para decidir tratamientos • Tambo 550 VO • Mastitis clínicas producidas por ambientales • Enero – Febrero 2008 • Personal de investigación en la fosa – (diag. presuntivo, muestras, CET, trat) • Definición de caso, 14 d (a nivel de cuarto) desde fecha de alta • Muestra duplicada de cuarto con mastitis – CET – Laboratorio (100µL) • Incubación 4 h (10 µL) • Tratamiento según CET Casos de Mastitis Clínica • Descripción de las mastitis clínicas • Evaluación diagnóstico presuntivo • Características del CET • Días en hospital (DEH) para grupo antibiótico y no antibiótico • 81 vacas hicieron MC • 189 casos MC (2.3/vaca) • 31 vacas 1 sólo caso • 23 vacas 4 casos • Distribución por cuartos 49 48 43 49 • Tasa de cura 14 y 21 días • Análisis económico Mastitis Clínica MC y DEL MC y Lactancias 10% 15% 23% 80 # Casos/30 d 120 80 40 0 60 40 20 Lact 1 Lact 2 Lact 3 MC 50% vacas con MC Lact 4+ 90 15 0 21 0 27 0 33 0 39 0 0 30 # vacas 160 12% DEL Sanas 46% casos de MC Patógenos causantes MC Sin Desarrollo S. aureus CNS C. bovis Streps. Amb. Coli Otros 9% 8% 3% 58% 13% 6% Severidad de casos de MC Severidad MC • Severidad 1: 66% (124) 100% • Severidad 2: 32% (61) % casos • Severidad 3: 1% (2) 80% • Temperatura – < 39.5°C: 78% – > 39.5°C: 22% ≥ 40°C: 8% 60% 40% 20% 0% SEV Todo Sev 1 Sev L1 Sev 2 Sev L2+ Sev 3 Patógenos MC y severidad 6.6% 100% 80% 60% 60% 40% 20% 33% es Co l ifo rm b. Am re ps . C .b ov is St Si n D es ar ro l lo 0% Severidad 3 Severidad 2 Severidad 1 Causas de mastitis severas • 6 lecherías de Michigan – 150 a 750 vacas/lechería • Definición de mastitis severa: – ¼ duro, inflamado; leche anormal, & 2 o + de lo siguiente: • Temperatura >39.5, anorexia, disminución de producción de leche, shock, depresión marcada E coli Klebsiella Sin Aislamiento Strep sp. Staph sp. Other 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% he c Le ria F E B C D a a a a a i i r r ri ri ri e e e e e h h c c ch ch ch e e e e e L L L L L A Erskine et al., 2002, JDS Propuesta Clásica • Los resultados de cultivo no están a tiempo para decidir el tratamiento “Si parece coliforme, no tratar con ATB” • … pero los síntomas clínicos no son buenos para predecir el agente… Diagnóstico presuntivo 140 – Aciertos en TRAT: 91% (46 casos) – Aciertos en NO TRAT: 16% (129 casos) 120 # casos MC • Aciertos en diagnóstico presuntivo a campo 100 80 60 40 20 0 TRAT (en lab) – Total: 167 casos Acierto NO TRAT (en lab) No Acierto Se consideró tratamiento de C. bovis, Muestras contaminadas no se incluyeron Evaluación de Cultivo en Tambo T CAMPO • En el tambo, se detectaron correctamente el 74% de los casos que necesitaban tratamiento (Se) • y el 82% de los que no necesitaban tratamiento (Sp) • El 59% de los casos tratados, necesitaban tratamiento (VP+) • El 89% de los casos no tratados, no necesitaban tratamientos (VP-) LAB T 34 NT 12 NT 22 VP+ 59% VP100 89% Se Sp 168 74% 82% Resultados de otros trabajos Autor (Año) Lago et al. (2006) Mc Carron (2008) Mc Carron (2008) Argentina (2008) Medio N (% TX) BP 80 (37%) PF 280 lab (62%) BP 280 lab (68%) BP 168 (32%) Sens. VP(-) 83% 90% 95%* 77% 98% 92%* 66% 97% 74% 89% Tratamientos implementados • Severidad 1 – IMM cada 12 h durante 3 días • Severidad 2 – IMM cada 12 h durante 3 días – Parenteral cada 24 h durante 3 días – AINEs Efecto del CET en tratamientos • Se trataron con ATB el 32% de los casos • Días en el hospital: – ATB: 7.8 días – No ATB: 3.7 días • $ ATB: Reducción del 60% Análisis económico • Presupuesto parcial • Supuestos – Costo Tx 1: $ 17.7 – Costo Tx 2: $116.1 – Leche tirada: 20 lt/d Cuarto: 5 lt/d – $ Leche: $0.92/L – $ Placas: $14 c/u • 189 casos MC – 127 Severidad 1 – 61 Severidad 2 Costo Trat. Costo Leche Tirada Costo Total $9.300 $24.300 $33.600 CET todas al $3.500 HOSPITAL $16.500 $20.000 CET uso del ORD de 1/4 $14.300 $17.800 Tradicional $3.500 Presupuesto Parcial (189 casos – 1 mes) Hospital Ordeñador 1/4 Ingreso Adicional (+ Leche) $ 7.800 $10.000 Reducción de Costo (- Tx) $ 5.800 $5.800 $ 13.600 $ 15.800 $0 $0 $ 3.300 $ 3.333 $ 3.300 $ 3.333 $ 11.400 $ 13.767 Subtotal Ingreso Extra Ingreso Reducido Aumento de costos (Placas) Subtotal Costo Extra INGRESO NETO Tasa de cura Tasa de cura • Muestras • Criterio # Casos – Cuarto – 14 y 21 d post tratamiento 35 30 – Sólo casos con aislamiento inicial – Cura: Muestras 14 y 21 d SD o patógeno ≠ del inicial Sin diferencias significativas 25 20 15 10 87% 77% T NT 5 0 Cura No Cura Tasa de cura # Casos Tasa de Cura 160 140 120 100 80 60 40 20 0 71% 60% T NT Cura No Cura Lago et al., 2008 Rol del veterinario • Entrenamiento – Toma de muestra – Selección Materiales • Tipo de Estufa – Ubicación del laboratorio • Calor • Humedad • Bioseguridad – Lectura de placas • Supervisión – Diseño de protocolo de tratamiento – Cómo se hacen los trabajos? – Cuándo cambiar un tratamiento? – Se está leyendo bien? – Se usan bien los resultados? Limitaciones • El cultivo en tambo es una guía para elegir el tratamiento • Orientado hacia grupos de patógenos mas habituales • No permite evaluar la cura bacteriológica Preguntas? Comentarios?
